CORONAVIRUS COVID-19 Plan de Acciรณn 2 0 2 0
Workflow Completo COVID-19 R e c o l e c i รณ n & P r e s e r va c i รณ n Purificaciรณn & Aislami ent o Detecciรณn Basadaen PCR
ESTAMOS LISTOS PARA HACER NUESTRA PARTE .
CORONAVIRUS
S O B R E NORGEN Norgen Biotek fue fundada en 1998 por el Dr. Yousef Haj-Ahmad. La compañía está ubicada en una instalación de vanguardia de 24,000 pies cuadrados en Thorold, Ontario, Canadá, a pocas cuadras de la Universidad de Brock. Norgen es una empresa canadiense de biotecnología totalmente integrada certificada por ISO 9001, ISO 13485 e Illumina Propel que se enfoca en desarrollar productos para la recolección de muestras, preparación de muestras y detección de muestras, así como también brinda
Tabla de contenido 1 Colección & Preservación
3
2 Purificación y Aislamiento 3 Detección basada en PCR
5
+ Componentes de PCR
6
COVID-19
7
servicios de investigación integrales a la comunidad científica. Las certificaciones ISO 9001 e ISO 13485 de Norgen indican nuestro compromiso de fabricar y vender productos de alta calidad, así como nuestro de
mejorar
continuamente
nuestra
Complete Workflow 3
compromiso
COVID -19
empresa, nuestros productos y nuestro sistema de gestión de calidad. Nuestra certificación Illumina Propel enfatiza
nuestra
competencia
con
Illumina
1
Next-Generation Sequencing (NGS) para apoyar la
Sistema de recolección y preservación total de ácidos nucleicos
investigación genética y genómica y brindar servicios de alta calidad a nuestros clientes.
2
3
Fundador & Presidente Dr. Y. Haj-Ahmad
2
Kit de purificación de ARN total
2019-nCoV Taqman RT-PCR Kit
Sistema de recolección y preservación total de ácidos nucleicos (Cat. 68800 ) No es necesario procesar muestras inmediatamente
Conserva el ADN total, incluido el ADN viral, a temperatura ambiente por 2 años Conserva el ARN total, incluido el ARN viral, a temperatura ambiente durante 2 meses. Inactiva microorganismos y virus para un transporte y manejo seguro y fácil Envíe muestras a temperatura ambiente sin la necesidad de costosos transporte en cadena de frío Compatible con la mayoría de los métodos de aislamiento de ADN y ARN Compatible con muchos tipos de muestras, incluyendo nariz, boca, garganta y piel. Validado para la detección de COVID-19
RECOLECCIÓN Y PRESERVACIÓN DE MUESTRAS
N O R G E N B I OT E K C O R O N AV I R U S
Preserve el ARN total, incluido el ARN viral, con el conveniente * sistema de recolección todo en uno de Norgen por hasta 2 meses DAY 0 Total RNA DR
RL
DAY 5
ETOH DR
RL
Total RNA DR
DAY 16 Total RNA DR
RL
RL
DR
Total RNA
RL
DR
DAY 22 ETOH
DR
RL
Total RNA DR
RL
Alternativa destacada
DAY 10 ETOH
ETOH
RL
DR
DAY 30 ETOH
DR
RL
Total RNA DR
RL
ETOH DR
RL
RL
Figura 1. Aislamiento de ARN de alta calidad a partir de células HeLa almacenadas en el tubo conservante de ácido nucleico total de Norgen a temperatura ambiente durante 30 días. Las células HeLa se almacenaron en el tubo conservante de ácido nucleico de Norgen (DR) y RNAlater (RL) durante 30 días, y el ARN se aisló de las muestras conservadas utilizando un método de precipitación con etanol y el kit de purificación de ARN total de Norgen (Cat. 17200). Como se puede ver, el método de precipitación con EtOH no logró aislar el ARN de la muestra conservada de ARNlater. Se aisló ARN de alta calidad de las muestras conservadas en los tubos de preservación de ácido nucleico total de Norgen utilizando ambos métodos de aislamiento, lo que indica una excelente conservación del ARN y compatibilidad con varios métodos de aislamiento.
Dispositivo de recolección y preservación de ARN de saliva (Cat. RU53800)
Información sobre pedidos Sistema de recolección y preservación total de ácidos nucleicos 50 Units SCAN ME WITH YOUR SMART PHONE
Cat. 68800
Para obtener más datos y especificaciones técnicas, visite www.norgenbiote.com o escanee el código.
* El ADN total, incluido el ADN viral, se conservará a temperatura ambiente durante 2 años, el ARN total, incluido el ARN viral, se conservará hasta por 2 meses.
www.norgenbiotek.com / www.e-allscience.com
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PURIFICACIÓN & AISLAMIENTO
Kit de purificación de ARN total (Cat. 17200, 37500, 17250)
Extrae ARN total de alta calidad y pureza, incluido miARN No requiere paso de fenol Une y eluye todo el ARN independientemente del tamaño o contenido de GC, sin sesgo Extraiga eficientemente ARN pequeño independientemente del contenido de GC Alta sensibilidad y rendimiento Formato de columna giratoria. Aísle de una amplia variedad de muestras El ARN purificado es adecuado para una variedad de aplicaciones posteriores, incluida la secuenciación de ARN pequeño.
Para la purificación rápida de ARN total, incluido microARN, sin fenol A
NORGEN Silicon Carbide
COMPETITOR
B
NORGEN
COMPETITOR
Silica
Información sobre pedidos Kit de purificación de ARN total
1.5% Formaldehyde Gel
Cat. 17200
100 Preps
Cat. 37500
250 Preps
Cat. 17250
Para obtener más datos y especificaciones técnicas, visite www.norgenbiotek.com o escanee el código QR. Agilent BioAnalyzer Gel Image
Small RNA Species Figura 1. Alta calidad de ARN aislado con rango de tamaño completo. A diferencia de los kits de la mayoría de los competidores, el kit de purificación de ARN total de Norgen permite el aislamiento de todos los tamaños de ARN, desde el ARN muy grande hasta el microARN, sin el uso de fenol. El ARN total se aisló de 1 x 109 células de E. coli usando el kit de purificación de ARN total de Norgen y un kit de la competencia. Se analizaron cinco microlitros y 1 µL de los 50 µL de ARN aislado en un gel de agarosa (Panel A) y el chip Agilent® 2100 BioAnalyzer RNA Nano 6000 (Panel B), respectivamente. Tenga en cuenta la presencia de pequeñas especies de ARN (cuadrado rojo) en las muestras aisladas a través del kit de Norgen y la ausencia de estas especies de ARN en la preparación de ARN de la competencia.
4
50 Preps
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2019-nCoV TaqMan RT-PCR Kit (Cat. TM67100)
Kit de detección de SARS-CoV-2, que causa COVID-19 (2019-nCoV) Formato listo para usar que contiene todo lo necesario para la detección (cebador / sondas, control positivo, agua libre de nucleasas, mezcla maestra RT-PCR de un paso)
DETECIÓN BASADA EN PCR
N O R G E N B I OT E K C O R O N AV I R U S
Detecta ARN específico de SARS-CoV-2 con RT-PCR en tiempo real basado en la tecnología TaqMan ™
Información sobre pedidos 2019-nCoV TaqMan RT-PCR Kit 50 Rxns
Cat. TM67100
Para obtener más datos y especificaciones técnicas, visite www.norgenbiotek.com o escanee el código QR.
Figura 1. Sensibilidad analítica para la detección de 2 genes diana nucleocápsidos de SARS-CoV-2 y el objetivo de control interno RNase P según lo recomendado por el Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades (CDC). El panel A representa el objetivo 2019-nCoV_N1, el panel B representa el objetivo 2019-nCoV_N2 y el panel C representa el objetivo de control interno RNase P. La sensibilidad analítica del kit de RT-PCR TaqMan 2019-nCoV de Norgen se determinó analizando una serie de diluciones del control positivo cuantificado de RT-PCR 2019-nCoV Norgen (Cat. PC67102) por triplicado (n = 3) basado en el uso de TaqMan® tecnología. Se ha determinado que el rango lineal del kit de RT-PCR TaqMan 2019-nCoV de Norgen detecta tan solo 2 copias / µL con una confianza ≥ 90%
www.norgenbiotek.com / www.e-allscience.com
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COMPONENTE DE PCR
2019-nCoV Primer & Probe Mixes Conjunto de cebadores y sondas para SARS-CoV-2, que causa COVID-19 (2019-nCoV) Contiene los 3 ensayos desarrollados por CDC en tubos individuales Cada ensayo está dirigido a uno de los 2 genes diana de nucleocápside ARN (N1, N2) y una RNasa P para control interno Información sobre pedidos 50 Rxns
Cat. TM67101
Positive Control (Cat. PC67102) - Theoretical Copy Number 2019-nCoV_N1F
2019-nCoV_N2F
RNAse P-F
8
2x10
+
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2x107
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2x106
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2x105
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2x104
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2x103
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2x102
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2x101
+
+
+
N/D
N/D
N/D
NTC
Control Positivo 2019-nCoV RT-PCR Control positivo para SARS-CoV-2, que causa COVID-19 (2019-nCoV) Contiene 2 ARN del gen diana de nucleocápside (N1, N2) y RNasa P. Compatible con el conjunto de cebador / sonda CDC Información sobre pedidos 50 µL
Cat.PC67102
2X One-Step RT-PCR Master Mix Conveniente solución lista para usar Alta sensibilidad y rendimiento Amplificación robusta Información sobre pedidos
6
100 Rxns
Cat. 28113
200 Rxns
Cat. 28114
500 Rxns
Cat. 28115
Figura 1. Rendimiento de la mezcla maestra de RT-PCR de un solo paso 2X de Norgen (Cat. 28113) para detectar el SARS-CoV-2 usando las mezclas de cebador y sonda de Norgen 2019- nCoV (Cat. TM67101) y Norgen's 2019-nCoV RT-PCR positivo Control (Cat. PC67102). La reacción RT-PCR de un paso se preparó de acuerdo con el protocolo CDC y la sensibilidad de detección de los tres objetivos; Se comparó 2019-nCoV_ N1 (círculo), 2019-nCoV_ N2 (triángulo) y RNase P (cruz) con el producto del competidor N (rojo).
N O R G E N B I OT E K C O R O N AV I R U S
C O R O N AV I R U S COV I D - 1 9 En diciembre de 2019, comenzó un brote de enfermedad respiratoria en la ciudad de Wuhan, provincia de Hubei, China, y ahora se ha extendido por todo el mundo. Esta enfermedad respiratoria fue causada por un nuevo coronavirus y se denominó inicialmente "nuevo coronavirus 2019" o "2019-nCoV", sin embargo, en febrero de 2020, la Organización Mundial de la Salud (OMS) anunció que el nombre oficial de la enfermedad es COVID-19. El nombre oficial del coronavirus que causa COVID-19 es SARS-CoV-2. El SARS-CoV-2 es una nueva cepa de coronavirus que infecta a humanos que no se había detectado previamente antes del brote en China en diciembre de 2019. Se sabe que los coronavirus infectan comúnmente a camellos, vacas, gatos y murciélagos. En los humanos, las infecciones por Coronavirus pueden causar diversas enfermedades, desde el resfriado común hasta enfermedades más graves, como el Síndrome Respiratorio del Medio Oriente (MERS) y el Síndrome Respiratorio Agudo Severo (SARS). El SARS-CoV-2 es un betacoronavirus, similar al MERS y al SARS, que tienen su origen en los murciélagos. La fuente animal del SARS-CoV-2 aún no se ha identificado, sin embargo, los funcionarios chinos han vinculado muchos de los primeros casos a un gran mercado de mariscos y animales vivos, lo que sugiere que la transmisión inicial fue el resultado de la propagación de animal a persona. Sin embargo, muchos de los casos detectados más tarde no informaron ninguna exposición a los mercados de animales, lo que indica que el virus ahora se está propagando a través del contacto de persona a persona. Los síntomas de infección con SARS-CoV-2 pueden variar desde síntomas más leves, como secreción nasal, dolor de garganta, tos y fiebre hasta síntomas más graves, como neumonía o dificultades respiratorias. En algunos casos, la infección por SARS-CoV-2 ha provocado la muerte. Al igual que con otras enfermedades respiratorias, las personas mayores y las personas con afecciones médicas preexistentes (como diabetes o enfermedades cardíacas) son más vulnerables a enfermarse gravemente con el virus. Las autoridades chinas publicaron el genoma completo de SARS-CoV-2 en la base de datos de secuenciación de NIH GenBank. La CDC informó que los primeros casos de COVID-19 en los EE. UU. que fueron secuenciados son similares a la secuencia publicada por China, por lo que agregaron más evidencia al hecho de que hubo una aparición reciente y única de este virus de una fuente animal. El diagnóstico preciso de COVID-19 se realiza mediante el uso de ensayos de RT PCR en tiempo real (rRT-PCR) para la detección cualitativa in vitro de SARS-CoV-2. La CDC ha publicado pautas completas para la recolección y manejo de muestras, extracción de ácido nucleico, el ensayo de detección por RT-PCR (incluidas las sondas y los cebadores) e interpretación los resultados de las pruebas.
For more information please visit:
www.cdc.gov/coronavirus www.norgenbiotek.com/coronavirus
www.norgenbiotek.com / www.e-allscience.com
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3430 Schmon Parkway Thorold, Ontario Canada L2V 4Y6 Rev 001
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