Laboratorio microbiologĂa Por
Anny Puentes Sally Polo Omayra Marriaga
INTRODUCCION
En el contenido de este libro virtual encontraremos, los informes hechos a partir de las prácticas realizadas en el laboratorio de microbiología, donde se analizaron muestras de productos cárnicos y lácteos para evidenciar el crecimiento de microorganismos como los coliformes, mohos, levaduras, hongos y otros.
INFORME DE LABORATORIO
ANNY PUENTES ENCISO OMAYRA MARRIAGA PERILLA SALLY POLO PIEDRAHITA
SENA CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS BOGOTA D.C 2014
INFORME DE LABORATORIO MANIPULADORES, SUPERFICIES Y AMBIENTES
ANNY PUENTES ENCISO OMAYRA MARRIAGA PERILLA SALLY POLO PIEDRAHITA FICHA: 576734
Alexandra Cucaita Instructora
SENA CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS BOGOTA D.C 2014
MARCO TEORICO Para asegurar la calidad de los alimentos debe prestarse atención tanto los microorganismo como a los alterantes, que pudieran llegar a la materia prima o al alimento terminado a partir del hombre (manipulador), equipos, utensilios, tuberías, superficies y aires. Muchos sitios del cuerpo humano albergan una carga microbiana normal, los sitios de importancia donde reciben los microorganismos saprofitos y que se constituyen en una fuente de contaminación para manipuladores de alimentos son la piel y el tracto respiratorio (fosas nasales y faringe). El microorganismo más importante a analizar es el staphylococus aureus, este microorganismo reside también en las fosas, el tracto nasofaríngeo y la mayoría de las veces se encuentran asociado a furúnculo, heridas y lesiones en la piel. Loa equipos, utensilios y superficies, utilizadas en el procesamiento, fabricación o preparación de alimentos, deben estar diseñados, construidos, instalados y mantenidos de tal forma que se evite el proceso de limpieza y desinfección de los mismos. Igualmente es importante el estudio microbiológico del aire (ambiente), ya que este se pone en contacto con los alimentos, por eso se debe estar seguro de trabajar en un ambiente adecuado, debidamente desinfectado o esterilizado.
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL Realizar un análisis, en el cual se pueda determinar cada uno de los factores que influyen en el crecimiento microbiano y que pueden llegar a afectar los procesos de fabricación y elaboración de los alimentos en las industrias y lugares donde se comercializan, evaluando los diferentes medios por los cuales pueden llegar a ser contaminados los alimentos ya sea por medio del ambiente, de las superficies y el personal manipulador.
OBJETIVOS ESPECIFICOS 1. Analizar la calidad del aire, mediante una prueba de ambiente, evidenciando el crecimiento de mesófilos si hubiere lugar a contaminación por el ambiente el cual está siendo evaluado. 2. Evaluar las superficies que rodean y, en las que están siendo procesados y elaborados los alimentos, determinando si existen microorganismos que puedan causar daños tanto en el alimento como en el consumidor, logrando observar en el medio de cultivo el crecimiento de coliformes totales, y así determinando errores en el procedimiento de limpieza y desinfección de las superficies que están en contacto con el producto alimenticio. 3. Mediante un análisis de frotis, buscar evidenciar el tipo de contaminación microbiológica que puede llegar a trasmitir el personal manipulador a los alimentos, en los casos de no seguir el protocolo establecido para mantener la inocuidad del alimento. 4. Observar en cada uno de los medios de cultivo el crecimiento microbiano dado por cada uno de los análisis hechos en el laboratorio.
MATERIALES Y METODOS
MEDIOS DE CULTIVOS Standard Plate Count (SPC) Eosin Methyl Blue (EMB) Agar de Papa y Dextrosa (PDA) Oxitetraciclina Glucosa Yeast (OGY) Agua Peptonada 0.1% EQUIPOS Y UTENCILIOS Incubadora Balanza analitica Mechero Bussen Gradilla Trípode Guantes Cajas de Petri Frasco schott Agitador de vidrio Hisopos Plantilla de 10 cm2 Tubos de ensayo Agua destilada Papel parafilm Vinipel METODOS 1. Se explico que tipo de caldos se debían preparan C/U 1 EMB =Coliformes 1 SPC =Mesofilos 1 OGY o PDA = M y L 2 Tubos de agua peptonada 2 Hisopos 1 Plantilla
2.
Se realizaron los cรกlculos necesarios.
EMB 1 X 20ml = 20ml 37g ------------1000 ml X ------------ 20ml
= 0,75g
SPC 1 X 20ml = 20ml 23.5g ---------- 1000ml X ----------- 20ml
= 0, 47g
OGY 1 X 20ml = 20ml 18,5g ---------- 500ml X ---------- 20ml
= 0, 74g
PDA 1 X 20 = 20ml 39g ----------- 1000ml X ----------- 20ml
= 0, 78g
AGUA PEPTONADA 8,5G NaCl 1g pep/ 1L agua = 0,1% 8,5 NaCl ---------- 1000ml X ----------- 20ml = 0,17g 1g pep ----------- 1000ml X ------------- 20ml
= 0,02g
3. Se realizaron los cรกlculos de los medios que cada grupo prepare SPC
1 X 20ml = 20ml X 15 = 300ml 7,5g ----------- 1000ml X ------------ 300ml
= 11.25
PEPTONA 8,5g NaCl ----------- 1000ml X ----------- 300ml = 0,255g 1g pep --------------- 1000ml X --------------- 300ml 4. 5. 6. 7. 8.
= 0,3g
Se alistaron materiales y se levaron a él autoclave. Se peso y se midió los gramos y los mililitros obtenidos en los cálculos. Se agrego al agua los 11,25g de SPC. Se encendió el mechero y se llevo a ebullición el caldo. Se sirvió los medios en las cajas de petri esterilizadas y se llevaron a la nevera rotulada y envuelta en papel vinipel. 9. Se sacaron los cultivos de la nevera. 10. Se realizaron las pruebas de (ambientes, superficies y manipuladores). 11. Se sellaron las cajas y se llevaron a incubación. 12. Se sacaron los medios de incubación y se realizaron las debidas lecturas.
RESULTADOS
MANIPULADORES MEDIO DE CULTIVO
EMB (Eosin Methyl Blue)
MICROORGANISMO EVALUADO
NINGUNO (manos)
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
Ausencia de UFC de coliformes
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
No se evidencio crecimiento de microorganismos
NUMERO DE COLONIAS
0
MEDIO DE CULTIVO
SPC (Standard Plate Count)
MICROORGANISMO EVALUADO
Staphylococcus epidermidis (manos)
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS NUMERO DE COLONIAS
Colonias de 1 a 3 mm de diámetro, lisas, levemente elevadas, de bordes enteros, levemente convexas y generalmente pigmentadas con un color que puede ir desde el crema al amarillo. Se observan 3 morfotipos. cocos Gram positivos, de forma esférica. 57
MEDIO DE CULTIVO
OGY (Oxitetraciclina Glucosa Yeast)
MICROORGANISMO EVALUADO
levaduras (frotis de garganta)
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
NUMERO DE COLONIAS
Se observan 3 morfotipos. 1. siembra masiva 2. (5) forma irregular, borde ondulado, elevada, cremosa, color crema amarilla. 3. (1) forma circular, borde entero, elevaci贸n convexa, superficie brillante cremosa, color purpura con fondo beige.
Se puede decir que se evidencia el crecimiento de Pseudomonas aeruginosa, Bacilos gram(-) Flagelo polar.
7
SUPERFICIES MEDIO DE CULTIVO
SPC (Standard Plate Count) (mesa enfermeria)
MICROORGANISMO EVALUADO
Mesofilos (Escherichia coli)
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS NUMERO DE COLONIAS
Se evidenciaron 2 morfotipos 1. forma circular, borde entero, elevada de superficie rugosa. 2. forma irregular, borde lobulado, elevaci贸n plana de superficie rugosa seca. Bacilos gram negativos, no forman esporas, miden de 0.5 micras de ancho por 3 micras de largo, catalasa positivo, oxilasa negativo. 38
MEDIO DE CULTIVO
EMB (Eosin Methyl Blue) (mesa y bar)
MICROORGANISMO EVALUADO
Coliformes (Escherichia coli)
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
6 color oscuro, cremoso brillante. 31 color claro rosa, forma circular, borde entero, elevaci贸n convexa, superficie cremosa brillante. Bacilos gram negativos, no forman esporas, miden de 0.5 micras de ancho por 3 micras de largo, catalasa positivo, oxilasa negativo.
NUMERO DE COLONIAS
37
MEDIO DE CULTIVO
PDA (Agar de Papa y Dextrosa) (nevera mesa y bar)
MICROORGANISMO EVALUADO
Mohos y Levaduras ()
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
Forma filamentosa, elevaci贸n algodonosa, superficie invasiva. Se observaron 3 morfotipos de mohos. De forma rizoide, filamentoso, elevada rugosa y de color rosa y otro de color oscuro.
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS NUMERO DE COLONIAS
24
AMBIENTES MEDIO DE CULTIVO
PDA (Agar de Papa y Dextrosa) (mesa y bar)
MICROORGANISMO EVALUADO
Mohos y levaduras
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
5 morfotipos. Mohos de forma y borde filamentosa, elevación algodonosa, superficie invasiva, colores oscuros, rosas, beige. Cladosporium, Aspergillus niger, Penicillium, Trichoderma, mohos filamentosos. Presentan conidióforo corto, liso de hasta 300 mm de longitud y de 5 a 8 mm de diámetro
NUMERO DE COLONIAS
41
MEDIO DE CULTIVO
PDA (Agar de Papa y Dextrosa) (taller carnicos)
MICROORGANISMO EVALUADO
Mohos y Levaduras
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
NUMERO DE COLONIAS
4 morfotipos, 3 levaduras, de forma circular de borde entero, elevación convexa, superficie cremosa brillante. 1 moho de forma filamentosa, borde lobulada, elevación algodonosa, superficie invasiva. Mohos. Las vesículas son globosas o subglobosas de 10 a 65 mm de diámetro produciendo fiálides uniobiseriadas alrededor de la vesícula. Levaduras. 29
MEDIO DE CULTIVO
SPC (Standard Plate Count) (economato)
MICROORGANISMO EVALUADO
Mohos (Zygomycetes)
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
NUMERO DE COLONIAS
Forma y borde filamentosa, elevación algodonosa de superficie “superficial” Mucor, Los conidióforos no ramificados de pared gruesa, hialinos, rugosos, de ≥1 mm de longitud y de 10 a 20 mm de diámetro. Las vesículas son globosas o subglobosas de 10 a 65 mm de diámetro produciendo fiálides uniobiseriadas alrededor de la vesícula 1
DISCUSIÓN DE RESULTADOS En el analisis de la prueba realizada manipuladores no se encontro crecimiento de coliformes, pero si se evidencio el crecimiento de la bacteria llamada Staphylococcus epidermidis presente en las manos, se hallaron 3 morfotipos de esta y 57 UFC, además se evidencio en cremiento de levaduras al realizar un frotis de garganta el numero de UFC no fue tan representativa como el microorganismo anterior pero si hubo desarrollo de 7 UFC. Resultado de superfiecies fue más representativo porque en este se evidencio el crecimiento de mesofilos como la bacteria Escherichia coli y el numero de UFC fue de 38, tambien se pudo observar el crecimiento de coliformes se presentaron 37 UFC en totales, además se hallo crecimiento de mohos y levaduras de estos crecieron 24 UFC. La prueba realizada ambiente mostro el cremiento de mohos y levaduras, la primera fue en medio PDA mostro cinco morfotipos distintos y 41 UFC. La segunda fue en mismo medio de cultivo pero el crecimiento fue menor porque presento 29 UFC de mohos y levaduras. En la última se evidencio el crecimiento de los mohos zygomycetes y presento solo una UFC.
RECOMENDACIÓN
CONLUSIONES Se cumplieron con los objetivos de este laboratorio que era el analizar la calidad del ambiente, determinar la carga microbiana de las superficies escogidas para este fin y determinar la presencia o ausencia de microorganismos patogenos en los manipuladores de alimento, se puede concluir que hubo crecimiento de algunos microorganismos patogenos, se logro identificar entre ellos los coliformes totales hallados en la zona de mesa y bar, la Escherichia coli , mohos y levaduras, se puede decir que son lugares aparentemente limpios pero que en realidad se pueden encontrar microorganismos que afectan la salud a traves de los alimentos. En cuanto a los resultados hallados en manipuladores se puede comprobar que aunque se realice un lavado de manos este no es suficiente siempre sigue existiendo riesgo. Despues de realizado el laboratorio se comprobó que los ambientes, superficies y los procesadores de alimentos son fuentes contaminantes para los alimentos.
BIBLIOGRAFIA http://es.scribd.com/doc/8614571/Manual-de-Medios-de-Cultivo http://books.google.com.co/books?id=Wv026CUhR6YC&pg=PA876&lpg=PA876&dq=cara cteristicas+macroscopicas+y+microscopicas+de+las+pseudomonas+aeruginosas&source =bl&ots=n5nwpEAJM9&sig=VLULeUAcZ1z8v2dSQ3wPHRKxBLE&hl=es419&sa=X&ei=IZ_nU___OZPNsQSE44KgBA&ved=0CGcQ6AEwCA#v=onepage&q=carac teristicas%20macroscopicas%20y%20microscopicas%20de%20las%20pseudomonas%20 aeruginosas&f=false http://www.uv.mx/personal/sbonilla/files/2011/06/Escherichia-coli-I.pdf file:///C:/Users/fmla%20cardona%20puentes/Downloads/OXOID%20%20REMEL%202013 %20(2).pdf
INFORME ANALISIS DE COLIFORMES RECUENTO EN PLACA
ANNY MAYELY PUENTES ENCISO OMAYRA MARRIAGA PERILLA SALLY POLO PIEDRAHITA
SENA CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS BOGOTA D.C 2014
INFORME ANALISIS DE COLIFORMES RECUENTO EN PLACA
ANNY PUENTES OMAYRA MARRIAGA PERILLA SALLY POLO PIEDRAHITA FICHA: 576734
Alexandra Cucaita Instructora
SENA CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS BOGOTA D.C 2014
MARCO TEÓRICO
Esta técnica se basa en contar las colonias de microorganismos que se desarrollan después de inocular en un medio de cultivo adecuado e incubar a una temperatura y tiempo determinados un volumen determinado de muestra. Se utiliza para determinar el número de células aisladas o microorganismos unicelulares viables como bacterias, levaduras, también se utiliza para el conteo de esporas fúngicas presentes en la muestra. Se trata de conocer el número total de microorganismos presentes en el alimento. Este número no guarda relación con el de microorganismos patógenos por lo que no puede usarse como índice de su presencia y sólo debe considerarse un indicador de las características higiénicas generales del alimento. La muestra a inocular debe ser homogénea y no contener conglomerados de células. Después de la incubación cada microorganismo o célula viable formará una masa visible de organismos, o sea una colonia. De esta manera el número de colonias permitirá a su vez determinar el número de organismos viables en la muestra sembrada. Se pueden utilizar sistemas de siembra en superficie, o en profundidad. Generalmente la muestra original se diluye para que el número de colonias desarrolladas en la placa se encuentren entre 30 y 300 colonias y así permitir un óptimo crecimiento y facilitar la lectura. En primer lugar, la muestra se diluye seriadamente, transfiriendo 1 ml de la muestra a 9 ml de medio estéril y se mezclan adecuadamente. Este proceso se repite hasta obtener una dilución apropiada en este ejemplo, 1:100000 (10-5). Posteriormente se añade 0,1 ml a una placa de agar nutritivo, bien extendiéndolo en la superficie de la misma (método de extensión en placa) o mezclándolo con el medio (método de vertido en placa). Las placas se incuban y se recuentan las colonias que se desarrollan. Debido a razones estadísticas, las placas deben contener entre 30 y 300 colonias. Cuando la muestra se diluye el cálculo del resultado se realiza contando las colonias en aquellas placas que tengan entre 30 y 300, se promedia y se multiplica por el factor de dilución. Los resultados se expresan en colonias por ml. Los resultados también pueden expresarse en unidades formadoras de colonias (UFC), el valor de UFC es un valor que expresa el número relativo de microorganismos de un taxón determinado en un volumen de un metro cúbico de muestra. En el caso de alimentos el resultado se considera como un indicador de las características higiénicas generales del alimento
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL Consiste en añadir medio de cultivo fundido y enfriado a 50ºC sobre placa de Petri que contiene una cantidad determinada de la muestra diluida. Se tapa la placa y se rota para mezclar la muestra en el agar. Cuando el agar solidifica se incuban las placas. Las colonias se desarrollan tanto dentro del agar como en la superficie. Es un método generalmente utilizado para el recuento de microorganismos anaerobios facultativos o microaerofilos
OBJETIVOS ESPECIFICOS
El aislamiento de colonias El recuento de los microorganismos que tenemos en el cultivo inicial.
METODOLOGIA
Hacer disoluciones de la muestra al 1/10. 1/100.etc, según estime el grado de contaminación. Poner 1mL de cada disolución decimal en placas de Petri (por duplicado). Añadir 15 mL de medio de cultivo (fundido, a 45°C en un baño termostático) y dar movimientos circulares y de vaivén para que se distribuya la muestra uniformemente. Incubar: una serie de placas a 20°C/ 3 días (psicrófilos) y otra serie de placas a 35°C/ 2 días (mesófilos). Para incubar las placas introducirlas invesrtidas en la estufa. Pasado el período de incubación contar las placas que tengan entre 30 y 300 colonias. Expresar el resultado en ufc/g de alimento. Para ello se cuenta el duplicado y se halla la media, multiplicándose por la inversa del factor de dilución en el que se realizó el recuento.
TABLA DE RESULTADOS
MEDIO DE CULTIVO EMB (Eosin Methyl Blue)
EMB (Eosin Methyl Blue)
MICROORGANISMOS EVALUADO
DILUSION
–1 Coliformes totales
Coliformes totales –1
EMB (Eosin Methyl Blue)
Coliformes totales
EMB (Eosin Methyl Blue)
Coliformes totales
–2
EMB (Eosin Methyl Blue)
Coliformes totales
–3
EMB (Eosin Methyl Blue)
Coliformes totales
–2
–3
IMAGEN
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
No hubo crecimiento de microorganismos en ninguna de las tres disoluciones que se realizaron, una de las dos razones por la cuales no se presento creciemiento fue que la muestra no tenia presencia de microorganismos y la otra razón fue la prepración de la dilusion, es decir que las disoluciones no se hicieron bien y por esta razón no se dieron las condciones de crecimiento para los coliformes totales.
RECOMENDACIONES
A la hora de realizar la disolución se recomienda ser más precavido y minucioso ya que la ausencia de microorganismo puede ser realizar mal la dilución.
CONCLUSIONES
No se logro el objetivo del analisis que era evidenciar el crecimiento de los coliformes totales, aunque se siguio paso a paso las instrucciones dadas no se dio crecimeinto del microorganismo.
BIBLIOGRAFIA
http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/curso/UNI_02/u2 c6s2c.htm
http://www.unavarra.es/genmic/recuento%20microorganismos.htm
INFORME ANALISIS DE COLIFORMES NMP
ANNY PUENTES ENCISO OMAYRA MARRIAGA PERILLA SALLY POLO PIEDRAHITA
SENA CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS BOGOTA D.C 2014
INFORME ANALISIS DE COLIFORMES NMP
ANNY PUENTES ENCISO OMAYRA MARRIAGA PERILLA SALLY POLO PIEDRAHITA FICHA: 576734
Alexandra Cucaita Instructora
SENA CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS BOGOTA D.C 2014
MARCO TEORICO Debido a que las aguas residuales son de composición variada provenientes de descargas de usos municipales, industriales, comerciales, de servicios, agrícolas, pecuarios, domésticos, incluyendo fraccionamientos y en general de cualquier uso, así como la mezcla de ellas, contienen diferentes tipos de microorganismos contaminantes y las diferentes concentraciones, dependiendo de su fuente. La variada población de microorganismos en esta agua, proviene del suelo y de origen intestinal, incluyen aerobios y anaerobios estrictos y facultativos así como también numerosos virus como: Poliovirus y virus de la hepatitis. Igualmente pueden contener formas parasitarias variables como quistes de Protozoarios y huevecillos de Helmintos (Metazoarios). Asimismo, existe en nuestro país el grave problema de contaminación de ríos, lagos acuíferos y costas debido a que estos son utilizados como depósito de todos los desechos generados por las actividades humanas. Estos microorganismos pueden sobrevivir al tratamiento, por lo que su reúso p.ej., en riego agrícola, actividades recreativas: Aguas de piscinas, baños de hidromasaje, aguas potables naturales, actividades piscícolas y aguas marinas superficiales (playas), representan un riesgo potencial a la salud pública. La presencia y extensión de contaminación fecal es un factor importante en la determinación de la calidad de un cuerpo de agua. Las heces contienen una variedad de microorganismos y formas de resistencia de los mismos, involucrando organismos patógenos, los cuales son un riesgo para la salud pública al estar en contacto con el ser humano. El examen de muestras de agua para determinar la presencia de microorganismos del grupo coliforme que habitan normalmente en el intestino humano y de otros animales de sangre caliente, da una indicación, pues dada la limitada capacidad de algunos miembros del grupo de organismos coliformes para sobrevivir en agua; sus números también pueden emplearse para estimar el grado de contaminación fecal. Son Organismos coliformes aquellos capaces de crecimiento aeróbico ya sea 35 ó 37 ± 1°C en un medio de cultivo líquido lactosado con producción de acido y gas dentro de un periodo de 48 h. El método de la NPM es un método robusto por lo que puede aplicarse en cualquier tipo de agua, aún aquellos que contienen gran cantidad de materia orgánica. Para la determinación del NMP de Coliformes Totales y Fecales en este tipo de aguas, es necesario proceder a preparar diluciones decimales de la muestra, debido a que se espera que la concentración de coliformes sea superior en éstas que en un agua potable. El número de diluciones varía mucho, dependiendo del origen de la muestra a tratar. Por lo demás, para su análisis de procede en la misma forma que para una muestra de agua potable.
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL Evidenciar el crecimiento de coliformes a través de la técnica del número más probable.
OBJETIVOS ESPECIFICOS Observar la existencia de coliformes en el producto analizado en el laboratorio. Aprender a identificar los coliformes a través de la técnica del NMP.
MATERIALES
Caldo bilis verde brillante Agua peptonada Tubos de ensayo tapa rosca Campanas Durham Micropipeta Pipetas de 1ml Puntas Probetas Incubadora Gradilla Frascos tapa rosca Mecheros Vidrio de reloj Agua desionizada Espátulas
METODOLOGIA 1. Se alistaron materiales 2. Se realizaron los cálculos
AGUA PEPTONADA
8.5 X
1000ml 108ml
= 0.918g SAL
1pep X
1000ml 108ml
= 0.108g PEPTONA
CALDO BILIS
10ml X 9 = 90ml 40g x
1000ml 90ml
= 3.6
3.
Se agrego al frasco shoot los 108ml de agua desionizada, enseguida la peptona y la sal. 4. Se agrego a un frasco shoot 90ml de agua desionizada y enseguida el caldo bilis. 5. Se repartió en agua peptona en dos tubos de ensayo. 6. Se agrego a los tubos de ensayo las Campanas Durham boca abajo y se sirvió enseguida el caldo bilis a cada tubo de ensayo. 7. Se metió el material envuelto en papel craff a la autoclave para esterilizar. 8. Se predio el mechero y se desinfectaron mesones. 9. Se saco el material del auotclave y se dejo enfriar. 10. Se agrego la muestra (Yogurt) a el frasco shoot de agua peptonada, se tomo la micropipeta y se sirvió 1ml para el tubo de ensayo de agua petonada -2 y de este tubo se tomo 1ml de muestra y se paso a el tubo de ensayo -3. 11. Luego del frasco shoot se tomo 1ml de muestra para cada tubo de ensayo de la prueba -1. 12. Del tubo de ensayo -2 se tomo 1ml de muestra y se sirvió en cada tubo de ensayo de la prueba -2. 13. Por último del tubo de ensayo -3 se tomo 1ml de muestra y se agrego a cada tubo de la prueba -3, se tomaron todos los tubos de las pruebas y se llevaron a incubación.
RESULTADOS MEDIO DE CULTIVO VERDE BRILLANTE BILIS
MICROORGANISMO EVALUADO COLIFORMES
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
N째 DE COLONIAS
DILUSION
NO SE OBSERVO NINGUN MICROORGANISMO
NINGUNA
0
-1
SE OBSERVA UNA BURBUJA DENTRO DE LA CAMPANA DURHAM. FERMENTAN LA LACTOSA, FORMAN GASES EN 48 HRS A UNA T째 DE 35C째37C째
BACTERIAS EN FORMA DE BASTONCILLOS, NO FORMAN ESPORAS,GRAM NEGATIVOS AEROBIOS, ANAEROBIAS FACULTATIVAS
1
-1
NO SE OBSERVO NINGUN MICROORGANISMO
NINGUNA
0
-1
IMAGEN
NO SE OBSERVO NINGUN MICROORGANISMO
NINGUNA
0
-2
NO SE OBSERVO NINGUN MICROORGANISMO
NINGUNA
0
-2
NO SE OBSERVO NINGUN MICROORGANISMO
NINGUNA
0
-2
NO SE OBSERVO NINGUN MICROORGANISMO
NINGUNA
0
-3
NO SE OBSERVO NINGUN MICROORGANISMO
NINGUNA
0
-3
NO SE OBSERVO NINGUN MICROORGANISMO
NINGUNA
0
-3
DISCUSIÓN DE RESULTADOS Se realizó este laboratorio por la técnica del NMP para observar los coliformes en las diferentes diluciones. Solo se consiguió evidenciar coliformes en la dilución de 10-1 en el resto de las diluciones no hubo crecimiento. Se puede decir que hubo una falla en el momento de realizar la siembra del microorganismo por lo cual este no creció. RECOMENDACIONES Al realizar la practica por esta técnica, debemos llevar la secuencia de la siembra para evitar que existan confusiones y se salte uno de los pasos y no se realice el procedimiento adecuado y de esta manera no se evidencie el crecimiento de coliformes.
BIBLIOGRAFIA http://www.upemor.edu.mx/labo/tarchivos/archivos/HEAL/practica_7.pdf
INFORME ANALISIS MESOFILOS, PSICROFILOS Y TERMOFILOS
ANNY PUENTES ENCISO OMAYRA MARRIAGA PERILLA SALLY POLO PIEDRAHITA
SENA CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS BOGOTA D.C 2014
INFORME ANALISIS MESOFILOS, PSICROFILOS Y TERMOFILOS
ANNY PUENTES ENCISO OMAYRA MARRIAGA PERILLA SALLY POLO PIEDRAHITA FICHA: 576734
Alexandra Cucaita Instructora
SENA CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS BOGOTA D.C 2014
MARCO TEORICO
El crecimiento de los microorganismos se encuentra influenciado por varios factores. Entre ellos los más importantes son la aireación y la temperatura. En cuanto a este último, la Temperatura, los microorganismos tienen un margen de temperaturas en el cual pueden crecer. Este margen viene delimitado por la temperatura máxima de crecimiento, a partir de la cual no pueden vivir e incluso mueren; la temperatura mínima por debajo de la cual no pueden crecer aunque generalmente no mueren; y la temperatura óptima a la cual ofrecen el mejor crecimiento. Atendiendo a este margen de temperatura de crecimiento, los microorganismos se clasifican en: Hipertermófilos: Su temperatura óptima se encuentra por encima de los 80ºC. Muchos de ellos son arqueas. Termófilos: Su temperatura óptima se encuentra entre 45-70ºC. Suelen ser microorganismos de vida libre Mesófilos: Su temperatura óptima se encuentra entre los 25-45ºC. Incluye microorganismos patógenos y comensales del hombre y animales de sangre caliente y algunos de vida libre. Psicótrofos: La temperatura óptima de los microorganismos de este grupo está por debajo de los 25 – 30°C incluye microorganismos de vida libre. Psicrófilos: Su temperatura óptima de desarrollo se encuentra entre los 12 – 15°C
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL Observar los microorganismos que son capaces de crecer en las diferentes temperaturas, altas, ambiente y de congelación. OBGETIVOS ESPECIFICOS Adquirir destreza en la determinación de aerobios mesófilos en alimentos. Realizar informe de los resultados obtenidos por la muestra analizada. Diferenciar los microorganismos, termófilos, mesófilos y Psicrófilos
MATERIALES
Standar Plate Count Agar Cajas petri Erlenmeyer Tubos de ensayo Agua peptonada Puntas estériles Micropipetas Pipetas Probetas Balanza Incubadoras Nevera
METODOLOGIA 1. Se alistaron materiales 2. Se realizaron los cálculos
AGUA PEPTONADA
8.5 X
1000ml 108ml
= 0.918g SAL
1pep X
1000ml 108ml
= 0.108g PEPTONA
SPC
1 X 20ml = 20l X 9 = 180ml 37.5g X
1000ml 108ml
= 4.05g
3. Se midio el agua 4. Se llevo a ebullición el medio (SPC). 5. Se mezclo el agua peptonada (agua, sal y peptona). 6. Se metió a esterilizar el material a la autoclave. 7. Se prendió el mechero y se desinfectaron mesones. 8. Se saco el material de la autoclave y se dejo enfriar. 9. Se agrego la muestra (Leche) a el frasco shoot con agua petonada. 10. Se tomo la micropipeta y del frasco shoot -1 se tomo 1ml y se paso al tubo de ensayo -2. 11. Del tubo de ensayo -2 se tomo 1ml de muestra y se paso al tubo de ensayo -3. 12. A cada caja de petri de la muestra -1 se le agrego con una micropieta 1ml de muestra tomado del frasco shoot -1 y enseguida se les sirvió el mmedio de cultivo. 13. A cada caja de petri de la muestra -2 se le agrego con una micropipeta 1ml de muestra tomado del tubo de ensayo -2 y enseguida se les sirvió el medio de cultivo. 14. A cada caja de petri de la muestra -3 se le agrego con una micropieta 1ml de muestra tomado del tubo de ensayo -3 y enseguida se les sirvió el medio de cultivo. 15. Se tomo y caja de petri de la muestra -1, una de la muestra -2 y una de la muestra -3 y se sellaron con papel vinipel. 16. Por último se llevo un paquete con tres muestras a incubación de 4°C, otro paquete a incubación de 37°C y el otro a incubación de 45°C.
RESULTADOS
MEDIO DE CULTIVO (SPC) Standard Plate Count NUMERO DE COLONIAS
MICROORGANISMO EVALUADO
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
TERMOFILOS DILUCION
C.E=>300 UFC
10-1
436 UFC
10-2
C.E=>300 UFC
10-3
IMAGEN
MEDIO DE MICROORGANISMO CARACTERISTICAS CULTIVO EVALUADO MACROSCOPICAS (SPC) Standard MESOFILOS Plate Count NUMERO DE DILUCION COLONIAS
110 UFC
10-1
18 UFC
10-2
31 UFC
10-3
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
IMAGEN
MEDIO DE CULTIVO (SPC) Standard Plate Count NUMERO DE COLONIAS C.E= < 1 UFC
MICROORGANISMO EVALUADO
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
PSICROFILOS DILUCION
10-1
C.E= < 1UFC
10-2
C.E= < 1 UFC
10-3
IMAGEN
DISCUSIÓN DE RESULTADOS Se realizó el laboratorio de mesófilos, termófilos y Psicrófilos para evidenciar el crecimiento de estos microorganismos, se hicieron diluciones por duplicado de la muestra y se llevaron a cada una de las temperaturas indicadas para su crecimiento. Al cabo de que se cumpliera el tiempo se observaron los medios, evidenciando el crecimiento de mesófilos y termófilos mas no de psicrófilos, aunque crecieron microorganismo no era el resultado que se esperaba, se puede decir que uno de los pasos del procedimiento no se hizo como era y por esta razón los resultados no salieron bien.
RECOMENDACIONES En el momento de realizar las diluciones se recomienda tener más precaución en el momento del servido ya que se pueden influir factores como el ambiente, no sembrar la cantidad necesaria, la temperatura del medio etc. CONCLUSIONES
Se pudo identificar mesófilos y termófilos. No se realizó la práctica debidamente y no se consiguió el resultado esperado.
BIBLIOGRAFIA
https://sites.google.com/a/goumh.umh.es/practicas-de-microbiologia/indice/influencia-delmedio-ambiente/temperatura