Órgano del Colegio de Bioquímicos de Santa Fe 2da. Circunscripción
Tiempo Año 2018 JUNIO Nº 78 ISSN 2591-3891
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COMISIÓN DIRECTIVA
EDITORIAL
Presidente Dra. Lidia María Mannino
Estimados colegas Bioquímicos y Microbiólogos:
Vicepresidente Dr Horacio Santiago Gianni
Nos encontramos nuevamente en nuestra ciudad: Rosario, en la actividad cientíca más importante que organiza el Colegio de Bioquímicos de la 2da Circunscripción de la Pcia. de Santa Fe, el 9no Congreso Bioquímico Rosario 2018, en esta oportunidad en forma conjunta con la Asociación Argentina de Microbiología, que realiza las XVIII Jornadas Argentinas de Microbiología 2018. En este marco también se desarrollan las 2das Jornadas Provinciales de Redes de Laboratorios y Epidemiología. La realización conjunta de este evento cientíco nacional, potencia el menú de temas que se ofrece a los concurrentes, por lo que incrementa sin dudas el interés y refuerza la convocatoria de asistentes en función de los antecedentes que ambos encuentros académicos ya tienen de eventos anteriores.
Secretaria Dra Sandra Laura Alvarez Prosecretario Dr Germán Roberto Perez Tesorera Dra Patricia Isabel Faucetta Protesorera Dra LIliana Beatriz Cachero Vocal titular Dra Norma Beatriz Mogues Vocal suplente Dr Miguel Angel Taborda Tribunal de Etica - Miembros titulares Dr. Enzo Peralta Dr. José Berta Dr. Leonardo Durand Tribunal de Etica - Miembros suplentes Dr. Gabriel Munini Dra. Elisabet Masters Dra. Gabriela Mateo Revisores de Cuenta titulares Dr. Federico Andrés Contreras Dr. Juan Pablo Guareschi
Por primera vez se realizan 4 cursos pre-congreso y 2 cursos pre-jornadas, además de las 6 conferencias, 4 miniconferencias, 2 plenarias, 10 mesas de discusión y la exposición de trabajos orales y posters, con un temario seleccionado cuidadosamente por el comité cientíco, conformado por destacados docentes, investigadores y profesionales de nuestro medio. En función de este temario se convocaron disertantes de todo el país, especialistas, docentes e investigadores, dispuestos a compartir sus conocimientos y experiencias con nuestros colegas en lo que creemos es el ámbito adecuado. Y así cumplir con uno de los objetivos de estas Instituciones que es fomentar la educación continua de los profesionales: bioquímicos, microbiologos y médicos, partes de un equipo necesario para brindar la mejor cobertura de salud para quienes en denitiva va dedicado nuestro trabajo, nuestros pacientes.
Revisores de Cuenta suplentes Dr. Roberto Baldarenas Dr. Carlos Giordano
Somos conscientes que estamos frente a un gran desafío, pero tenemos la convicción de que como en encuentros anteriores, logramos plasmar una propuesta que va a satisfacer a la Coordinadora Comisión de Especialidades heterogénea concurrencia que tenemos en este evento cientíco, que con Dra. María Susana Galetto su presencia hacen al verdadero éxito del encuentro, en cuanto a la satisfacción por la elección del temario y de los disertantes, Comisión de Habilitaciones encontrándonos en un espacio de cordialidad, conocimiento continuo y Dra. Liliana Cachero crecimiento profesional entre colegas. Comisión de Actualización Continua Coordinador: Dr. Germán Roberto Pérez En nombre de las Comisiones Organizadoras y del Colaboradores nuestro propio los invitamos a disfrutar de esta iniciativa y hacer de ella Dr. Luciano Frigieri una verdadera esta del conocimiento. Dra. Verónica Colmegna Ediciones y Difusión Dr. Federico Andrés Contreras Comisión de Jóvenes Profesionales Dr. Luciano Frigieri
Dr. Eduardo Gregorini Presidente de las XVIII Jornadas Argentinas de Microbiología Rosario 2018
Dr. Enzo E. Peralta Presidente del 9no Congreso Bioquímico Rosario 2018
Tiempo Bioquímico es el órgano ocial del Colegio de Bioquímicos de Santa Fe. 2da. Circunscripción. Santa Fe 1828. (2000) Rosario. (0341) 4258187 / 4241012. Ley 3950 y Modif. 4105 -4583. www.colebioqsf2.org colegio@colregiobioqsf2.org ISSN 2591-3891 La edición está a cargo de WM Ediciones, de Walter Mariño. Impresión: Imprenta de Jesús, de María Beatriz Alessio. Santa Fe 4312 - S2002KVH Rosario. Telefax: 4388481 - Líneas Rotativas. E-mail: info@dejesuscomunicacion.com.ar 3
COMITES ORGANIZADORES
9°Congreso Bioquímico Rosario 2018
XVIII Jornadas Argentinas de Microbiología 2018
Presidente Dr Enzo Peralta
Presidente Dr Eduardo Gregorini
Vicepresidente Dr Germán R Perez
Vicepresidentes Dr Rodolfo Notario Dr Gustavo Giusiano
Autoridades CBSF2 Presidente Dra Lidia Mannino Vicepresidente Dr Horacio Gianni Secretaría Dra Sandra Álvarez Tesorería Dra Patricia Faucetta Área Técnica Dra Isabel Padró Dra Florencia Facciuto Dra Verónica Colmegna Dra Susana Galetto Dra Liliana Cachero Comité Cientíco Cordinadores Dr Germán R Perez Dra Isabel Padró Integrantes Dra Laura Fornasiero Dra Margarita Bragos Dra Sandra Suarez Dra Sandra Arriaga Dra Mabel D’Arrigo Dr Fabián Pelusa Dra Silvina Benetti Dra Ma. Florencia Gosso Dra Florencia Facciuto Dr Sergio Ghersevich Dra Marcela Perez Dr Héctor Daniel Elías
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Secretaria General Dra Laura Colombo Secretario de Actas Dr Norberto Arancegui Secretaria Área Cientíca Dra Adriana Limansky Secretaria Área de Finanzas Dra Victoria Rucci Secretaria Área Técnica Dra Julieta Valles Área Técnica Dra Adriana Belmonte Dra Isabel Bogado Dra Cecilia Casabone Dra Griselda Lapenta Dra Mónica Nogueras Comité Cientíco Dra Susana Amigot Dra Marisa Biasoli Dra Perla Hermida Dra Mariángel Rinaudo Dra Emma Sutich Dr Miguel Taborda
DECLARACIONES DE INTERÉS
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AUSPICIOS
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PROGRAMA CIENTÍFICO 8º CONGRESO BIOQUÍMICO ROSARIO 2018 CURSOS PRE-CONGRESO Miércoles 6 de junio de 2018 Centro de Convenciones del Hotel Ariston (Córdoba 2554 – Rosario).
8:30 – 9:00 hs
Acreditación
9:00 – 13:00 hs
Actualización de Gestión de Calidad en el Laboratorio Clínico. Coordinación: Dr Enzo Peralta. Laboratorio IBC. Rosario. Disertantes: Dr. Carlos Peruzzetto / Dra. Cecilia Ghisolfi. Dictado por integrantes de C3 – Comisión de Calidad de CUBRA.
9:00 – 13:00 hs
Dislipidemias y Biomarcadores Cardiovasculares. Coordinación: Dra Sandra Arriaga. Fac. Cs Bioq y Farm. UNR. Rosario. Disertante: Dr. Fernando Brites. Departamento De Bioquímica Clínica, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires. CABA.
14:30 –15:00 hs
Acreditación
15:00 – 19:00 hs
Calidad Segura en el Laboratorio. Coordinación: Dra Mabel D’Arrigo. FCByF – UNR. Rosario. Disertantes: Dr. Héctor Mazzei / Dra. M. Cristina Brizuela / Dra. Alicia Rinaldi. Dictado por integrantes de C3 – Comisión de Calidad de CUBRA.
15:00 – 19:00 hs
Biomarcadores en Cirrosis Hepática y Hepatocarcinoma. Coordinación: Dr Germán R Perez. Fac. Cs Bioq y Farm. UNR. – Gammalab. Disertantes: Dra.Melisa Dirchwolf. Hospital Privado de Rosario. Rosario. Dr.Juan Carlos Nicolás. Facultad Ciencias Químicas. Universidad Católica de Córdoba.
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CONGRESO DÍA 1 Jueves 7 de junio de 2018 Centro de Convenciones del Hotel Ros Tower (Mitre 299 – Rosario). 8:00 – 8:30 hs
Acreditación
8:30 – 10:00 hs
Mesas de Discusión I: Enfermedad Celíaca y sensibilidad al gluten no celíaca. Coordinador: Dra Mabel D’Arrigo. FCByF. UNR “Marcadores inmunológicos de enfermedad celíaca“. Dr Fabián Pelusa. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario. Rosario. “Aspectos clínicos de la enfermedad celíaca”. Dr Gustavo Aliverti. Hospital de Niños “Víctor J Vilela”. Rosario. “Aspectos genéticos de la enfermedad celíaca y su relación con la inestabilidad genómica”. Dra Ariela Fundia, Laboratorio de Farmacogenómica, Instituto de Medicina Experimental (IMEX), CONICETAcademia Nacional de Medicina. CABA.
10:00 – 10:30 hs
Coffee Break
10:30 – 12:30 hs
Mesas de Discusión II: Biomarcadores óseos. Coordinador: Dr Enzo Peralta. IUNIR - Laboratorio IBC. "Desarrollo y mantenimiento de la masa ósea". Dr Ariel Sanchez. Centro de Endocrinología. Rosario. “Biomarcadores óseos”. Dra Isabel Teres. Sección Endocrinología, Laboratorio Centro Gallego de Buenos Aires.CABA. “25 OH vitamina D total y libre. Aspectos metodológicos”. Dr Erich Fradinger. Instituto de Diagnóstico e Investigaciones Metabólicas (IDIM). CABA.
12:30 – 14:00 hs
Almuerzo libre.
14:00 – 16:00 hs
Exposición oral de Posters – Sesión A.
16:00 – 17:30 hs
Mesas de Discusión III: Seguridad del paciente. Coordinadores: Dra Florencia Facciutto. FCByF.UNR. – Laboratorio IDIMYC. Dr Hector Daniel Elias. CEMAR. "Impacto de los valores críticos en la seguridad del paciente”. Dra Susana Legal. Hospital Italiano de Buenos Aires. CABA. “Gestión de riesgo en los laboratorios clínicos”. Dra Gabriela García. Área Gestión de calidad, Dirección de Bioquímica. Municipalidad de Rosario. “Experiencia local en Seguridad del Paciente”. Dr Javier Marino. Laboratorio del Sanatorio Parque y Sanatorio de Niños. Rosario.
17:30 – 18:00 hs
Coffee Break.
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18:00 – 19:00 hs
Plenaria: Atención bioquímica. Reingeniería de la Profesión. Dra Mariel Emilce Alejandre. Laboratorio de Proteínas del Departamento de Bioquímica Clínica-FFyB- Hospital de Clínicas José de San Martín y Laboratorio de Especialidades Proteicas Dr. Marco Pizzolato-Centro de Hematología Pavlosvky.
19:00 – 20:00 hs
Apertura del Congreso - Conferencia inaugural El laboratorio frente a los nuevos tratamientos de la hepatitis C. Dr Andrés Ruf. Hospital Privado de Rosario - Fundación para la Docencia e Investigación de las Enfermedades del Hígado (FUNDIEH). Rosario
CONGRESO DÍA 2 Viernes 8 de junio de 2018 Centro de Convenciones del Hotel Ros Tower (Mitre 299 – Rosario).
8:00 – 8:30 hs
Acreditación
8:30 – 10:00 hs
Mesas de Discusión IV: Marcadores bioquimicos de hipercoagulabilidad. Coordinadores: Dra Sandra Suarez. LAHT – Gammalab "Nuevos anticoagulantes orales. Pruebas de laboratorio”. Dra Laura Fornasiero. Laboratorio de Hemostasia y Trombosis (LAHT) - Gammalab/Grupo Gamma. Rosario. “Aspectos clínicos y modo de acción de los nuevos anticoagulantes orales”. Dr José Luis Fedele. Centro de Especialidades Hematológicas de Rosario – Hospital Privado de Rosario. Rosario. “Importancia del Dímero DD como marcador de activación de la coagulación”. Dr Germán Detarsio. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, UNR.
10:00 – 10:30 hs
Coffee Break
10:30 – 11:30 hs
Conferencia: Inflamación e infertilidad masculina. Dr Ruben Motrich. Bioquímica Clínica, Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Nacional de Córdoba – Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología (CIBICI)/CONICET. Córdoba.
11:30 – 12:30 hs masculina.
Conferencia: Fragmentación del ADN espermático e infertilidad Dr Conrado Avendaño. ANDROLAB. Córdoba - Gynesis Salud y Fertilidad. Córdoba.
12:30 – 14:00 hs
Almuerzo libre.
14:00 – 16:00 hs
Exposición oral de Posters – Sesión B.
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16:00 – 17:30 hs
Mesas de Discusión V: El laboratorio de precisión. Coordinador: Dr Germán R Perez / Dra Margarita Bragos. – FCByF. UNR. "Hemoglobina glicosilada: implicancias clínicas”. Dr Juan José Gagliardino. CENEXA. Centro de Endocrinología Experimental y Aplicada (UNLPCONICET) La Plata, Argentina “BCR-ABL cuantitativo en el seguimiento y respuesta al tratamiento en Leucemia Mielógena Crónica”. Dra Irene Larripa. Laboratorio de Genética Hematológica, IMEX, CONICET-Academia Nacional de Medicina “Caracterización de exomas en el diagnóstico de enfermedades genéticas”. Dr Marcelo Martí. Departamento de Química Biológica FCENUBA, INQUIBCEN-CONICET, Bitgenia.
17:30 – 18:00 hs
Coffee Break.
18:00 – 19:00 hs
Plenaria: “Inmunoterapia activa en cáncer: investigación y desarrollo del monoclonal anti-idiotipo racotumomab”. Dr Daniel Alonso. Laboratorio de Oncología Molecular, Departamento de Ciencia y Tecnología, Universidad Nacional de Quilmes, Buenos Aires.
19:00 – 20:00 hs
Cierre del Congreso y Conferencia de clausura “Nuevos criterios y marcadores en sepsis neonatal”. Dra Cecilia Enfedaque. Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales, Hospital de Niños R. Gutiérrez. CABA. – Coordinadora del Proyecto de Prevención de Bacteriemias Neonatales organizado por SAP y UNICEF.
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PROGRAMA CIENTÍFICO XVIII JORNADAS ARGENTINAS DE MICROBIOLOGÍA CURSOS PRE-JORNADAS Auditorio CEMAR (San Luis 2020 – Rosario).
8:30 – 9:00 hs
Miércoles 6 de junio de 2018
Acreditación
1er Taller Regional sobre Métodos de Diagnóstico Microbiológico Rápidos, Automatizados, Espectrometría de Masas y Biología Molecular. Discusión de Casos Clínicos. Coordinación: Viviana Ballerini. Hospital Municipal Carrasco. Rosario Julieta Valles. CEMAR. Rosario. "Incorporación de MALDI-TOF y FILMARRAY como métodos de diagnóstico microbiológico rápido. Impacto clínico y modificación de conductas terapéuticas". Andrea Badano. Hospital de Niños “Victor J. Vilela”. Rosario. "Actualización en métodos moleculares de diagnóstico rápido. Integración y complementación de métodos basados en biología molecular con MALDI-TOF”. María Inés Zamboni. Centro de Especialidades Médicas Ambulatorias Rosario (CEMAR). Rosario. "Experiencia en la utilización de método automatizado PHOENIX para identificación y sensibilidad antimicrobiana". Analía Mollerach. Hospital Cullen. Santa Fe. "Impacto del diagnóstico rápido de TBC en la epidemiología de la Provincia de Santa Fe”. Sandra Fajardo. Centro Regional de Estudios Bioquímicos de la Tuberculosis (CREBIOT). Rosario. 9:00 – 12:00 hs
14:30 – 15:00 hs 15:00 – 18:00 hs
Acreditación
Impacto del Uso de Antimicrobianos en Medicina Humana y Veterinaria. Resistencia Bacteriana a Antimicrobianos: Vigilancia y Detección en el Laboratorio. Discusión de Casos Clínicos. Coordinación: Jaime Kovensky Pupko. SADEBAC. AAM. Victoria Rucci. Hospital Italiano. Rosario. "Uso de antimicrobianos en producción pecuaria y resultados del programa de vigilancia de la resistencia antimicrobiana en animales de consumo". Federico Luna. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria (SENASA). CABA. "Resistencia Bacteriana: un desafío para el clínico". Joaquín Bermejo. Hospital Español. Rosario. "Estrategias para la detección de mecanismos de resistencia bacteriana a los antimicrobianos en aislamientos clínicos de coprocultivo". Jorgelina Pérez. Servicio de Bacteriología, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario. Rosario. "Vigilancia de la resistencia antimicrobiana en humanos: rol del microbiólogo clínico”. Jaime Kovensky Pupko. Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínicas (SADEBAC) – Asociación Argentina de Microbiología (AAM). CABA.
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JORNADAS DÍA 1 Jueves 7 de junio de 2018 Centro de Convenciones del Hotel Ros Tower (Mitre 299 – Rosario). 8:00 – 8:30 hs
Acreditación
8:30 – 10:00 hs
Mesa Redonda 1: Actualización diagnóstica y epidemiológica de patologías genitales. Coordinadores: Patricia Galarza y Emilce Méndez "Papilomavirus Humano, un paradigma de infección de transmisión sexual". Adriana Giri. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario (IBR/CONICET). Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario. Rosario. “Candidiasis vulvovaginal recurrente: un desafío para el diagnóstico”. María Elena Tosello. Centro de Referencia de Micología (CEREMIC), Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario, Rosario. “Nuevos patógenos causantes de ITS en Argentina: Mycoplasma genitalium y Chlamydia trachomatis Serovar L”. Patricia Galarza. Instituto Dr. Carlos Malbrán. CABA.
10:00 – 10:30 hs
Coffee Break
10:30 – 12:00 hs
Mesa Redonda 2: Diagnóstico de la patología fúngica. Coordinadores: Gustavo Giusiano y Damián Lerman “Diagnóstico micológico: métodos directos”. Carlos Gómez. Centro de Especialidades Médicas Ambulatorias (CEMAR) – Centro de Referencia de Micología (CEREMIC), Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario. Rosario. “Utilización de métodos inmunológicos y de biomarcadores de las micosis”. Mercedes Romero. Centro de Especialidades Médicas Ambulatorias (CEMAR). Rosario. “Utilidad de los resultados del laboratorio en el tratamiento de las micosis”. José A Cozzi. Comisión de infecciones en el paciente inmunocomprometido, Sociedad Argentina de Infectología (SADI).
12:00 – 13:00 hs
Almuerzo libre.
13:00 – 14:00 hs
Exposición de Posters.
14:00 – 15:30 hs
Miniconferencias. “Situación de las micosis endémicas en Argentina, influencias climá-ticas y del ser humano”. Gustavo Giusiano. Universidad Nacional del Nordeste. Corrientes. “MicroXplora: desarrollo en Argentina de un ensayo diagnóstico de disbiosis de microbioma intestinal”. Mariela Sciara- Laboratorio Cibic, Rosario.
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15:30 – 16:00 hs
Break.
16:00 – 17:30 hs
Mesa Redonda 3: Impacto de las nuevas metodologías diagnósticas. Coordinadores: Marisa Almuzara y María Ines Zamboni. “Biología Molecular: nuevas metodologías diagnósticas en microbiología”. Mariela Sciara. Laboratorio Cibic. Rosario. “Espectrometría de masa en la identificación bacteriana y su impacto clínico”. Marisa Almuzara. Hospital de Clínicas José de San Martín, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires. CABA. "Diagnóstico Molecular de Infección por Trypanosoma cruzi para detección neonatal de Chagas congénito". Santiago Bortolotti. Wiener lab Group. Rosario.
17:30 – 18:00 hs
Coffee Break.
18:00 – 19:00 hs
Conferencia: “Metodologías diagnósticas en Microbiología Clínica: el aporte de las convencionales y el impacto de las nuevas”. Carlos Vay. Hospital de Clínicas José de San Martín – Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires. CABA.
19:00 – 20:00 hs
Apertura del Congreso - Conferencia inaugural El laboratorio frente a los nuevos tratamientos de la hepatitis C. Andrés Ruf. Hospital Privado de Rosario - Fundación para la Docencia e Investigación de las Enfermedades del Hígado (FUNDIEH). Rosario.
JORNADAS DÍA 2 Viernes 8 de junio de 2018 Centro de Convenciones del Hotel Ros Tower (Mitre 299 – Rosario).
8:00 – 8:30 hs
Acreditación
8:30 – 10:00 hs
Mesa Redonda 4: Actualización diagnóstica de infecciones respiratorias Coordinadores: María Estela Cadario y Damián Aguila. “Neumonías atípicas. Jerarquización de técnicas diagnósticas para Chlamydia pneumoniae, Chlamydia psittaci, Mycoplasma pneumoniae y Legionella spp”. María Estela Cadario. Instituto Dr. Carlos Malbrán. CABA. “Neumonías por Staphylococcus aureus meticilino-resistente: dentro y fuera del hospital”. Esteban Nannini. Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Rosario. Rosario. “Infecciones Respiratorias Virales. Influenza: otra presentación”. Gabriela Rompato. Laboratorio Central Provincia de Santa Fe. Santa Fe.
10:00 – 10:30 hs
Coffee Break
10:30 – 12:00 hs
Exposición de Comunicaciones Orales. Coordinadores: Patricia Marchiaro y Guillermo Repizo.
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12:00 – 13:00 hs
Almuerzo libre.
13:00 – 14:00 hs
Exposición de Posters.
14:00 – 15:30 hs
Miniconferencias. “Vigilancia Epidemiológica, herramienta fundamental en Salud Pública”. Andrea Uboldi. Ministerio de Salud de la Provincia Santa Fe. Santa Fe. “Estrategias para optimizar el uso de antimicrobianos: análisis crítico”. Carlos Bantar. Hospital San Martín. Paraná.
15:30 – 16:00 hs
Break.
16:00 – 17:30 hs
Mesa Redonda 5: Resistencias antimicrobianas de impacto clínico en la era de la Multiresistencia. Coordinadores: Alejandra Corso y Joaquín Bermejo. “Estado de situación de la Resistencia Antimicrobiana en Argentina”. Alejandra Corso. Instituto Dr. Carlos Malbrán. CABA. “Resistencia a los antifúngicos en levaduras: prevalencia, mecanismos y consecuencias terapéuticas de la evaluación de la sensibilidad”. Guillermo García-Effron. Laboratorio de Micología y Diagnóstico Molecular (CONICET), Universidad Nacional del Litoral. Santa Fe. “Movilización y diseminación de genes de resistencia a carbapenemes en Acinetobacter baumannii”. Alejandro Viale. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario (IBR/CONICET) – Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario. Rosario.
17:30 – 18:00 hs
Coffee Break.
18:00 – 19:00 hs
Conferencia: “Bacterias Gram-negativas XDR y PDR: cómo lidiar con el enemigo”. Fernando Pasterán. Instituto Dr. Carlos Malbrán. CABA.
19:00 – 20:00 hs
Cierre del Congreso y Conferencia de clausura. “Nuevos criterios y marcadores en sepsis neonatal”. Cecilia Enfedaque. Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales, Hospital de Niños R. Gutiérrez. CABA. – Coordinadora del Proyecto de Prevención de Bacteriemias Neonatales organizado por SAP y UNICEF.
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PROGRAMA CIENTÍFICO 2° JORNADAS PROVINCIALES DE REDES DE LABORATORIOS Y EPIDEMIOLOGÍA JORNADAS DÍA 1 Jueves 7 de junio de 2018 Centro de Convenciones del Hotel Ros Tower (Mitre 299 – Rosario). . 8:00 – 14:00 hs Acreditación 14:00 – 16:00 hs
Taller de la Red Provincial de Laboratorios de Virus Respiratorios y Sarampión. Introducción. Objetivos para la Red Nacional. Actualización en el diagnóstico de laboratorio. Rol del Laboratorio Nacional de Referencia. Dra. Elsa Baumeiter (INEI – ANLIS “Dr. Carlos Malbrán”) Experiencia de los laboratorios de la red de Santa Fe. Coordina: Dr. Sergio Lejona (Lab. CEMAR) Temas a desarrollar durante el taller: Estado de organización de la Red de Santa Fe. Esquema se derivaciones. Capacitaciones. Vigilancia laboratorial. Nuevo SNVS.
JORNADAS DÍA 2 Viernes 8 de junio de 2018 Centro de Convenciones del Hotel Ros Tower (Mitre 299 – Rosario). . 8:00 – 14:00 hs
Acreditación
14:00 – 16:00 hs
Taller de la Red Provincial de Laboratorios de Dengue y otros Arbovirus Introducción. Objetivos para la Red Nacional. Actualización en el diagnóstico de laboratorio. Rol del Laboratorio Nacional de Referencia. Dra. Cintia Fabri (INEVH - ANLIS “Dr. Carlos Malbrán”) Experiencia de los laboratorios de la red de Santa Fe. Coordina: Dra. Silvia Calatayud (Lab. CEMAR) Temas a desarrollar durante el taller: Estado de organización de la Red de Santa Fe. Esquema se derivaciones. Capacitaciones. Vigilancia laboratorial. Nuevo SNVS.
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RESÚMENES XVIII JORNADAS ARGENTINAS DE MICROBIOLOGÍA JORNADAS DÍA 1
Jueves 7 de junio de 2018
Miniconferencias SITUACIÓN DE LAS MICOSIS ENDÉMICAS EN ARGENTINA, INFLUENCIAS CLIMÁTICAS Y DEL SER HUMANO. Giusiano, Gustavo. Investigador Independiente de CONICET. Cátedra Microbiología, Parasitología e Inmunología, Facultad de Medicina, Departamento Micología, Instituto de Medicina Regional, Universidad Nacional del Nordeste. gustavogiusiano@yahoo.com.ar La paracoccidioidomicosis (PCM) históricamente se presentó en el noreste argentino con la forma crónica del adulto, pero en los últimos años se ha observado un aumento creciente de casos con un amplio espectro de manifestaciones clínicas, algunas muy poco frecuentes. Junto a esto se detectaron casos de formas agudas/subagudas infanto-juveniles, algunas progresivas y muy severas. Alrededor del 17% de los casos y de ambas formas clínicas, tuvieron serología negativa. Por otro lado, si bien la PCM tradicionalmente afecta a población de áreas rurales, muchos casos fueron urbanos y el paciente no rerió contacto con el ámbito rural. Buscando las causas de la posible reemergencia de la PCM se han estudiado razones de tipo ambientales, como los efectos del Fenómeno del “El Niño”, inuencia de la represa Yacyretá, la deforestación, los cambios en los tipos de cultivos, la situación socioeconómica, etc. La Red Nacional de Laboratorios de Micología (ANLIS- Malbrán) informó 48 nuevos casos de coccidioidomicosis (CM) en humanos entre 2010 y 2015. Casi el 50% ocurrieron en pacientes que vivían o visitaron el Valle Central de Catamarca. Las tasas anuales de incidencia en esta provincia aumentaron de valores históricos por debajo de 0,5 / 100.000 a 2 / 100.000 habitantes desde 2000 a 2009. La incidencia de 2010-2015 se informa entre 1-2 / 100.000 habitantes. Probablemente, el aumento (4 veces) de las áreas urbanizadas y 38 veces las áreas cultivadas, ocurridos entre 1973 y 2007, generaron cambios en el ecosistema del Valle Central de Catamarca y fue un factor favorecedor del aumento de CM en la región. No se han informado cambios considerables generales en la incidencia de la histoplamosis, aunque sí en determinadas zonas de Argentina, como ser casos autóctonos en la Patagonia generados por brotes epidémicos y aumentos de casos en el noroeste. La incidencia de la histoplamosis también se ve inuenciada por su carácter oportunista en pacientes inmunocomprometidos. “MICROXPLORA: DESARROLLO EN ARGENTINA DE UN ENSAYO DIAGNÓSTICO DE DISBIOSIS DE MICROBIOMA INTESTINAL”. Sciara, Mariela. Laboratorio Cibic, Rosario, Argentina. msciara@cibic.com.ar Nuestro organismo es portador de abundantes comunidades de microorganismos, denominadas en su conjunto microbioma, íntimamente integradas con el ser humano, con una gran variedad de funciones. El microbioma intestinal está involucrado en el metabolismo energético, diversos procesos neuronales y el desarrollo del sistema inmune, entre otras. La composición del mismo se
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ve afectada por diversos factores como edad, sexo, medio ambiente, dieta o estado de salud. Alteraciones en el microbioma, denominadas disbiosis, están asociadas a desórdenes no solo gastrointestinales, sino también inmunológicos, neurológicos o metabólicos. Para poder conocer la relación de las variaciones en el mismo con las enfermedades es fundamental la caracterización del microbioma en individuos considerados sanos. Varios proyectos se han basado en poblaciones europeas o estadounidenses, no abarcando las distintas condiciones socio-culturales o geográcas. Para poder analizar una disbiosis en la población argentina es necesario contar con una base de datos de microbioma de individuos control que se vean afectados por las mismas condiciones ambientales. En Rosario contamos con una plataforma de genómica única en el país, donde analizamos muestras de 200 individuos de referencia de varias ciudades de la región centro-pampeana, cuidadosamente seleccionados en base a un extenso cuestionario relacionado a la historia clínica y hábitos de vida y a extensos análisis bioquímicos de cada uno de ellos. De este modo, generamos la primera base de datos de microbioma gastrointestinal a nivel local, a la que denominamos MicroXplora Control, a partir de la cual se derivan los valores de referencia de la población Argentina, contra los cuales se pueden contrastar los valores obtenidos para un paciente con disbiosis. El desarrollo local del estudio del microbioma como metodología diagnóstica es un componente clave en la medicina de presición hacia la que vamos en camino. Mesa Redonda I: Actualización diagnóstica y epidemiológica de patologías genitales Coordinadores: Patricia Galarza y Emilce Méndez PAPILOMAVIRUS HUMANO, UN PARADIGMA DE INFECCIÓN DE TRANSMISIÓN SEXUAL. Giri, Adriana A. Grupo Virología Humana, Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario (IBR)CONICET/UNR. giri@ibr-conicet.gov.ar; Área Virología, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario. agiri@ ioyf.unr.edu.ar La infección por el papilomavirus humano (HPV) es la segunda infección de transmisión sexual más frecuente a nivel global según las estimaciones de la OMS. Los HPV sonun grupo heterogéneo de virus desnudos, genoma de ADN doble hebra circular y tropismo por epitelios mucosos y cutáneos. Los HPV mucosos se clasican en de alto (HPV-AR) y bajo riesgo oncogénico según las manifestaciones clínicas que producen sus infecciones. Actualmente está rmemente establecido que la infección persistente con HPV-AR es necesaria para el desarrollo de cáncer cervicouterino (CCU). El CCU es mundialmente una de las neoplasias más comunes que afecta a la mujer, con una estimación de 528.000 casos nuevos y de 266.000 muertes durante el año 2012. Las estimaciones para Argentina resultaron en tasas de incidencia y de mortalidad de 20,9/100.000 y de 8,4/100.000, respectivamente. Numerosos estudios han establecido que la detección de ADN de HPV es signicativamente más sensible que el Papanicolaou (Pap) para la detección precoz de CCU. Además, la elevada sensibilidad de la detección de ADN de HPV la posiciona como una herramienta ideal para el tamizaje primario del CCU en la era de vacunación de HPV. En base a esta evidencia, Argentina denió como prioritario el abordaje integral de la prevención de CCU, que incluye la incorporación de la vacuna contra HPV y el fortalecimiento de la estrategia de prevención secundaria a través del Pap y la introducción del Ensayo de HPV como tamizaje primario. Sin embargo, los métodos comerciales disponibles son importados, con costos elevados y disponibilidad variable. En este contexto, se presentarán estrategias metodológicas desarrolladas en nuestro laboratorio para el dosaje de ADN de HPV orientadas a sustituir importaciones, reducir los costos y asegurar la continuidad de los programas de prevención de CCU: HPV BIO-Detection que combina PCR simple y detección colorimétrica en formato de EIA y el HPV REAL-Detection basada en PCR en tiempo real
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CANDIDIASIS VULVOVAGINAL RECURRENTE: UN DESAFÍO PARA EL DIAGNÓSTICO. Tosello, María Elena Centro de Referencia de Micología (CEREMIC), Área Micología, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario. mtosello@fbioyf.unr.edu.ar Candidiasis vulvovaginal (CVV), es una infección vaginal por especies del género Candida, donde el sitio dominante de inamación y el origen de los síntomas es la vulva. Los síntomas que se pueden presentar son: prurito, irritación, dolor, ujo vaginal abundante y con aspecto de queso “cottage”. No se pueden generalizar síntomas, por esa razón las CVV pueden ser asintomáticas o con síntomas, con cuadros agudos o manifestaciones crónicas o de largos períodos. Sin embargo existe un subgrupo de mujeres que han tenido episodios recurrentes - teniendo períodos asintomáticos entre los episodios- que se la encuadra entre las candidiasis vulvovaginal recurrentes (CVVR). La CVVR se la dene como las presentación de 4 o más episodios anuales de CVV conrmadas micológicamente. En muchas ocasiones cuando comienza la sintomatología suelen consultar y se les da tratamiento con óvulos multivalentes o pueden adquirir antifùngicos orales disponibles en el mercado, que pueden ser utilizados de la manera incorrecta, pudiendo generar cepas de levaduras resistentes. Algunos de los síntomas pueden ser compartidos por distintos cuadros infecciosos o coexistir con vaginosis bacteriana. En el análisis de ujo vaginal de una CVV se observan elementos levaduriformes con o sin seudomicelio en el examen directo y desarrollo de levaduras en los cultivos. En el 90% de los casos se ha aislado Candida albicans y en orden decreciente otras especies: C. parapsilosis, C. tropicalis, C. glabrata y C. krusei. Es indispensable la identicación denitiva, como la realización de pruebas de sensibilidad antifúngicas. Todavía queda mucho por dilucidar en las CVVR: entre ellos, cual es el rol del microbioma gastrointestinal y vaginal, los factores responsables de cambios de suceptibilidad de los aislamientos, los mecanismos innatos y adquiridos de respuesta del hospedador a la Candida, la historia familiar de CVV y el rol patógeno del biolm.
Mesa Redonda II: Diagnóstico de la patología fúngica Coordinadores: Gustavo Giusiano y Damián Lerman UTILIDAD DE LOS RESULTADOS DEL LABORATORIO EN EL TRATAMIENTO DE LAS MICOSIS. Cozzi, José A. Medico Asesor Servicio de Hematología Hospital Provincial del Centenario, Rosario, Argentina; Comisión de Infecciones en Pacientes Inmunocomprometidos, Sociedad Argentina de Infectología (SADI); Miembro Titular del Centro de Referencia de Micología (CEREMIC), FCByF, UNR. Rosario, Argentina. joseacozzi@hotmail.com Debido a la dicultad en el diagnóstico de las infecciones fúngicas invasivas (IFI) y la alta morbilidad y mortalidad que provocan por el retraso en la administración del tratamiento, se utiliza el tratamiento empírico antifúngico (TEA) en los pacientes neutropénicos severos de alto riesgo (Leucemia Agudas y Receptores de Trasplante de Células Progenitoras Hematopoyéticas) con ebre persistente o recurrente después de 4 a 7 días de tratamiento antibiótico de amplio espectro. El objetivo del TEA es tratar precozmente una IFI oculta y prevenir la aparición de una nueva. Existen aspectos debatibles del TEA, uno de ellos es el sobretratamiento. Según diferentes trabajos, el riesgo de IFI oculta es de 25-30 % en pacientes con neutropenia febril persistente de alto riesgo (que no reciben antifúngicos), por lo que si utilizamos TEA, un 70-75 % de pacientes recibirán antifúngicos y no la necesitarían. La ebre como único síntoma tiene un valor predictivo positivo (VPP) bajo para el diagnóstico de IFI. Además, los pacientes pueden estar afebriles porque reciben corticoides u otras terapias antilifoncitarias y no recibirán antifúngicos si nos basamos en ................ 19
esta estrategia, por lo que perderíamos la posibilidad de tratar a pacientes que sí lo necesitarían. El mejor conocimiento de los factores de riesgo asociados a IFI y la aparición de nuevos métodos para un diagnóstico temprano [galactomananos (GM) y tomografía computarizada de alta resolución (TCAR)] permitirían adoptar estrategias de tratamiento dirigido antifúngico (TDA), denominado por ciertos autores como “tratamiento preventivo o anticipado” ; iniciando el tratamiento antifúngico en pacientes neutropénicos febriles persistentes después del 5.° al 7.° día o ante recaída de la ebre, si los biomarcadores (GM) son positivos en combinación con hallazgos clínicos y/o signos radiológicos Objetivo del TDA = Identicar y tratar a los pacientes en estadio temprano de la IFI, y limitar la terapia antifúngica solo a pacientes con alto riesgo de IFI. El TDA podría reemplazar el uso de TEA solo si el paciente está hemodinámicamente compensado, recibe prolaxis antifúngica con uconazol, y no hay retraso en los resultados de los métodos diagnósticos utilizados (TCAR y biomarcadores); sin diferencias signicativas en la mortalidad global. El TDA puede ayudar a la suspensión precoz del TEA teniendo en cuenta los resultados de los métodos diagnósticos y el estado clínico del paciente. No existe un único antifúngico de elección para TDA o TEA, este debe individualizarse en cada paciente considerando el riesgo de IFI, la exposición previa a antifúngicos, las interacciones medicamentosas, la toxicidad y los costos, y la epidemiología de las IFI en cada centro.
Mesa Redonda III: Impacto de las nuevas metodologías diagnósticas Coordinadores: Marisa Almuzara y Sergio Lejona B I O L O G Í A M O L E C U L A R : N U E VA S M E T O D O L O G Í A S D I A G N Ó S T I C A S E N MICROBIOLOGÍA. Sciara, Mariela. Laboratorio Cibic, Rosario, Argentina. msciara@cibic.com.ar La microbiología clínica ha experimentado cambios muy signicativos en la última década gracias al creciente desarrollo tecnológico. La Biología Molecular es una de las áreas de diagnóstico de mayor dinamismo y crecimiento, revolucionando el sistema de salud y optimizando los tratamientos médicos respondiendo a las necesidades clínicas que requieren métodos rápidos con alta sensibilidad y especicidad. Entre estas innovaciones están los ensayos moleculares que detectan e identican simultáneamente múltiples patógenos. El sistema FilmArray™ detecta simultáneamente bacterias, virus, levaduras, parásitos y/o genes de resistencia a través de paneles integrales asociados a síndromes clínicos. Estas pruebas posibilitan el diagnóstico rápido y certero de las infecciones permitiendo tomar decisiones en cuanto al manejo clínico del paciente en el momento oportuno. Otra plataforma con gran impacto en el último tiempo es la secuenciación de nueva generación (NGS: Next-Generation sequencing). NGS tiene el potencial de revolucionar el laboratorio de microbiología clínica, contribuyendo enormemente a la epidemiología y permitiendo obtener información de relevancia clínica en menos tiempo que los procedimientos tradicionales. En este sentido hemos implementado la utilización de la tecnología NGS en la detección de variantes minoritarias asociadas a fallas en los tratamientos con antirretrovirales contra el HIV superando ampliamente la metodología tradicional, contribuyendo a tomar decisiones terapéuticas respecto al mejor esquema antiviral para cada paciente. La implementación de estos tipos de tecnologías enfrenta importantes desafíos en cuanto al alto costo, infraestructura y herramientas bioinformáticas y la correcta interpretación de los resultados para asegurar diagnósticos de calidad. Para esto resulta fundamental formar equipos multidisciplinarios que logren implementar, estandarizar e interpretar estas herramientas diagnósticas. 20
LA ESPECTROMETRÍA DE MASA EN LA IDENTIFICACIÓN BACTERIANA Y SU IMPACTO CLÍNICO. Almuzara, Marisa. Laboratorio de Bacteriología, Cátedra Microbiología Clínica, Departamento Bioquímica Clínica, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Hospital de Clínicas José de San Martín, Universidad de Buenos Aires, Ciudad Autónoma Buenos Aires. marisaalmuzara@gmail.com Dada la dicultad de abordar a la identicación correcta de aquellos microorganismos de difícil diagnóstico ya sea por su desarrollo fastidioso o por su inercia en las pruebas bioquímicas, por las metodologías convencionales utilizadas en la práctica diaria, el verdadero rol de los mismos en la enfermedad infecciosa podría está subestimado. Bacilos gram negativos no fermentadores de glucosa, microorganismos del grupo HACEK y géneros relacionados, bacilos gram positivos (difteroides y actinomicetos aerobios) y cocos gram positivos catalasa negativa (sobre todo aquellos distintos del género Enterococcus), entre otros, representan los grupos bacterianos de mayor dicultad diagnóstica. El advenimiento de nuevas tecnologías destinadas a la identicación microbiana ha permitido el descubrimiento de nuevos patógenos implicados en la infección human marcando un cambio en su epidemiologia. En este contexto, la espectrometría de masas ha revolucionado la microbiología. Esta metodología permite arribar a género y especie en unos pocos minutos con una sensibilidad y especicidad comparables a la de los métodos moleculares representando una alternativa rápida y segura en la identicación de microorganismos de impacto clínico. DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE INFECCIÓN POR Trypanosoma cruzi PARA DETECCIÓN NEONATAL DE CHAGAS CONGÉNITO. Bortolotti, Santiago Wiener Laboratorios S.A.I.C. santiago.bortolotti@wiener-lab.com La enfermedad de Chagas (tripanosomiasis americana), es una infección provocada por el parásito Trypanosoma cruzi (T. cruzi), la cual es una causa importante de morbilidad y mortalidad en América Latina, generando entre 13000 y 45000 muertes de pacientes infectados por año. Si bien la infección se transmite principalmente por vectores hematófagos, otra vía de transmisión importante es la transmisión congénita de la madre al feto. El diagnóstico de laboratorio depende del estadio de la enfermedad. Durante la fase aguda, debido a que se presenta en general una alta parasitemia, el diagnóstico se efectúa mediante métodos parasitológicos directos. Uno de los métodos directos más utilizados es la técnica del microhematocrito. Sin embargo, esta metodología es altamente dependiente del operador y presenta baja sensibilidad. Los métodos moleculares se están incorporando a la rutina para detección en fase temprana de la enfermedad de Chagas (antes de los 10 meses). Uno de los métodos moleculares más aceptados para el diagnóstico de rutina en general es la PCR en tiempo real, la cual presenta elevada sensibilidad. Durante la fase crónica, se utilizan métodos serológicos como: ensayo inmunoenzimático, hemaglutinación o inmunouorescencia. El diagnóstico temprano permite tomar decisiones terapéuticas de mayor éxito, ya que se ha demostrado que cuanto más temprano se suministre tratamiento tripanosomicida a un niño infectado, más pronto se logra la seroconversión, actual criterio consenso de curación. Se ha desarrollado recientemente un kit diagnóstico destinado a la identicación de ADN de T. cruzi en el marco de un subsidio FONARSEC partir de la consolidación de un consorcio integrado por el INGEBI, el INP y Wiener Lab. Este kit sobre el que tratará la disertación fue validado en niños recién nacidos de madres infectadas (transmisión congénita), aunque no es exclusivo. Se podría extender a otros pacientes agudos tales como trasplantados, transfundidos o infectados por vector.
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JORNADAS DÍA 2
Viernes 8 de junio de 2018
Miniconferencia ESTRATEGIAS PARA OPTIMIZAR EL USO DE ANTIMICROBIANOS: ANÁLISIS CRÍTICO. Bantar, Carlos. Jefe, Servicio Control de Infecciones; Director Médico, Hospital San Martín, Paraná, Entre Ríos, Argentina. cebantar@gmail.com Desde el descubrimiento y utilización de la penicilina se asume que la emergencia de la resistencia a los antimicrobianos (ATM) es una consecuencia directa de la utilización de la droga. A partir de allí, un sin número de publicaciones abogan por el uso prudente de los ATM y por la necesidad de establecer medidas de barrera que limiten la propagación de microorganismos multiresistentes. De hecho, se describen hoy diversas estrategias para administrar “racionalmente” el uso ATM. Sin embargo, pese a la descripción de resultados puntuales auspiciosos, la escalada de la resistencia bacteriana continúa su rumbo inexorablemente. Es interesante la siguiente reexión: la información cientíca en este tema parece regirse por el precepto inverso al de la información que arroja el periodismo cotidiano… la mala noticia, no es noticia. Este fenómeno le imprime un sesgo exista a dicha información. Por lo que en esta presentación se ejercitará un análisis crítico de las estrategias descriptas para propiciar el uso prudente de los ATM. Para eso, se intentará responder las siguientes preguntas: 1. Cuáles son las metas; 2. Cuáles son las diferentes estrategias; 3. Todas las estrategias son apropiadas para el logro de las diferentes metas; 4. Cómo medimos el logro de las metas; 5. Cómo vigilamos y aseguramos la vigencia del logro de las metas a lo largo del tiempo y 6. Quién diseña y ejecuta la estrategia. Se analizará en esta entrega, la evidencia cientíca y se abonará con la experiencia propia publicada. Mesa Redonda IV: Actualización diagnóstica de infecciones respiratorias Coordinadores: María Estela Cadario y Damián Aguila. NEUMONÍAS ATÍPICAS. JERARQUIZACIÓN DE TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS PARA Chlamydia pneumoniae, Chlamydia psittaci, Mycoplasma pneumoniae y Legionella spp. Cadario, María E. INEI-ANLIS Dr. Carlos G Malbrán. ecadario@anlis.gov.ar El diagnóstico de M. pneumoniae, C. pneumoniae, C. psittaci y Legionella spp en pacientes (p) con neumonías, no se realiza rutinariamente en atención primaria y debería ser motivo de vigilancia en unidades centinelas; sólo se estudian brotes o casos individuales graves que no responden al tratamiento. M. pneumoniae es el agente más frecuente en infecciones respiratorias (IR) y C. psittaci se estudia en p con IR que han tenido contacto con aves. Usualmente, estos microorganismos (MO) están subdiagnosticados por la falta de pruebas diagnósticas o de la correcta jerarquización de las mismas. Desde el INEI proponemos algoritmos de técnicas diagnósticas para cada uno de estos microorganismos en p con sospecha clínica. Los métodos directos (detección de antígeno, aislamiento o métodos moleculares) son los de elección, denen especie, genotipos y pueden detectar la fuente en un brote. Los indirectos, como la detección de anticuerpos en pares de sueros, se utilizan, para complementar el estudio de brotes (detección del caso índice) o para el diagnóstico en p con tiempo de evolución tardío e indican si el p estuvo en contacto con ese MO. Solo la técnica de microarray para anticuerpos es capaz de denir la especie. Los resultados se consideran conrmatorios cuando son positivos por ambos métodos, directos e indirectos y en p con clínica compatible. Probables si dan positivos solo con métodos 22
directos o solo por conversión serológica. Posibles, cuando la serología es positiva en un único suero. Se consideran indeterminados, cuando los métodos directos y la serología resultan negativos en una muestra tomada tardíamente o post tratamiento o la muestra de suero pertenece a un p con inmunodepresión. Es necesario un programa de vigilancia sistemática para comprender la carga de la enfermedad en estos agentes en la Argentina, facilitar la identicación de casos y brotes e implementar estrategias terapéuticas y de control de infecciones apropiadas. INFECCIONES RESPIRATORIAS VIRALES. INFLUENZA: OTRA PRESENTACIÓN. Rompato, Gabriela; Mugna, Viviana. Laboratorio Central de Referencia de la Provincia, Dirección de Promoción y Protección de Salud, Ministerio de Salud de la Provincia de Santa Fe. gabrielarompato@yahoo.com.ar; vmugna@gmail.com Las Infecciones respiratorias de origen viral representan una importante causa de morbimortalidad en determinados grupos etarios. En nuestra región, el diagnóstico de laboratorio se orienta en la búsqueda de Virus Sincicial Respiratorio, Adenovirus, Parainuenza e Inuenza A y B, utilizando técnicas moleculares y de inmunouorescencia. La investigación de los agentes etiológicos depende de la edad, presentación clínica y epidemiología del paciente. Los grupos más vulnerables son los menores de 5 y mayores de 65 años. Respecto a la presentación clínica, en las infecciones por virus Inuenza, además de las formas típicas se observa la aparición de parotiditis asociada a inuenza A, más frecuentemente del subtipo (H3N2) y principalmente en niños en edad escolar (OMS). En concordancia, en la provincia de Santa Fe, un estudio realizado en 2017, muestra una asociación del 70% de las parotiditis con este subtipo de Inuenza. En cuanto a la situación epidemiológica, el hemisferio Sur reeja generalmente lo ocurrido en el Norte. El último informe de OPS revela una disminución de casos de infecciones respiratorias agudas (IRAs) causados por Inuenza, que podría estar asociada a la cobertura y diseño vacunal. En la actualidad, la vacuna antigripal, de revisión anual, incorporada al calendario nacional incluye 3 cepas: inuenza A (H1N1) pdm09, A (H3N2) e inuenza B. La selección de las mismas se basa en el análisis de las cepas circulantes durante la temporada invernal anterior tanto en los países del Hemisferio Norte como del Hemisferio Sur. Mesa Redonda V: Resistencias antimicrobianas de impacto clínico en la era de la Multiresistencia Coordinadores: Alejandra Corso y Joaquín Bermejo. ESTADO DE SITUACIÓN DE LA RESISTENCIA ANTIMICROBIANA (RAM) EN ARGENTINA. Corso, Alejandra. Servicio Antimicrobianos, Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas ANLIS “Dr. Carlos G. Malbrán”, Laboratorio Nacional de Referencia en Resistencia a los Antimicrobianos. acorso@anlis.gov.ar La gran aceleración observada en los últimos años en la emergencia y diseminación de la RAM está directamente vinculada al abuso y mal uso de estos agentes. La RAM conlleva a graves consecuencias en el sistema de Salud Pública ya que se encuentra asociada a la falla de los tratamientos empíricos, incremento de la morbi-mortalidad y de los costos de atención y fracaso de procedimientos médicos que dependen de la efectividad de estas moléculas. En 2017, la OMS publicó una lista de 12 familias de bacterias que deberían ser prioritarias para los esfuerzos de investigación y desarrollo de nuevos antimicrobianos y las clasicó como de prioridad: critica, alta y media. Entre los de prioridad crítica se encuentran los bacilos negativos multirresistentes (MDR) 23
como las Enterobacteriaceae productoras de BLEE o resistentes a carbapenemes y A. baumannii y P. aeruginosa con resistencia a carbapenemes. Entre los de prioridad crítica se encuentran: S. aureus meticilino-resistente, E. faecium resistente a vancomicina y N. gonorrhoeae con resistencia a cefalosporinas de 3raG o uorquinolonas, entre otros. Argentina no se encuentra ajena a esta situación global y presenta indicadores de resistencia en todos los patógenos listados por OMS. Entre los grupos de bacterias que generan mayor preocupación son aquellas que producen carbapenemasas, en particular aquellas del tipo KPC, tipo OXA-48, o metalo-β-lactamasas como NDM, por su vinculación con la XDR/PDR y su alta morbi-mortalidad asociada. Recientemente, el hallazgo del mecanismo de resistencia transferible a colistín mediado por el gen mcr-1 en aislamientos de E. coli de diversas regiones del país, ha generado incertidumbre en lo que respecta a las alternativas terapéuticas para el tratamiento de gérmenes MDR portadores de este mecanismo. La intensicación de los programas de prevención y control de infecciones, la implementación de pruebas de diagnóstico rápido y el fortalecimiento de los sistemas de vigilancia son pilares fundamentales para la contención de la RAM. RESISTENCIA A LOS ANTIFÚNGICOS EN LEVADURAS: PREVALENCIA, MECANISMOS Y CONSECUENCIAS TERAPÉUTICAS DE LA EVALUACIÓN DE LA SENSIBILIDAD. Garcia-Effron, Guillermo. Laboratorio de Micología y Diagnóstico Molecular (CONICET), Cátedra de Parasitología y Micología, Fac. Bioquímica y Ciencias Biológicas, Universidad Nacional del Litoral. ggarcia@unl.edu.ar / guillermo_garciaeffron@yahoo.com.ar Candida albicans sigue siendo el principal agente de las candidiasis invasoras. En los últimos años, la prevalencia de otras especies del género ha ido en aumento con la emergencia de especies cripticas multirresistentes. La sensibilidad de las distintas especies de Candida varía y la resistencia clínica intrínseca a los antifúngicos se ha descrito en varias de estas especies. Este hecho se ha convertido en un importante problema para el manejo de las infecciones por Candida al que se suma el problema de las resistencias secundarias a los antifúngicos en especies normalmente sensibles. Los mecanismos moleculares que explican las resistencias primarias y secundarias, en muchos casos son los mismos. Estos se pueden resumir en cambios en la estructura tridimensional de la proteína target de las drogas (mutaciones) o aumentos de su expresión, hiperexpresión de bombas de eujo e inexistencia del target. La evolución clínica de un paciente afectado por una micosis invasora depende de la selección del tratamiento antifúngico correcto y de la rapidez con que se inicia dicho tratamiento. Se ha comprobado que si el inicio de un tratamiento antifúngico “correcto” se retrasa por más de 12 horas, la mortalidad sube 30% y no puede ser mejorada a pesar de un cambio terapéutico. Con el objetivo de mejorar la elección del tratamiento antifúngico correcto se desarrollaron métodos de evaluación de la sensibilidad a los antifúngicos por microdilución que se aplican sobre todo en centros de referencia. Posteriormente, se desarrollaron métodos de evaluación de la sensibilidad por difusión en agar similares a los que se utilizan en bacteriología. Más recientemente, el objetivo ha cambiado y se está centrando en mejorar la rapidez de detección de la resistencia. Para esto, se han desarrollado métodos basados en biología molecular y utilizando MALDI-TOF. Todas estas metodologías serán analizadas en esta mesa redonda y discutiremos nuestra experiencia.
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MOVILIZACIÓN Y DISEMINACIÓN DE GENES DE RESISTENCIA A CARBAPENEMES EN Acinetobacter baumannii. Viale, Alejandro M. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario, Rosario. viale@ibr-conicet.gov.ar Acinetobacter baumannii es un patógeno Gram-negativo oportunista de signicativa incidencia en infecciones nosocomiales y demostrada capacidad de adquirir nuevos determinantes de resistencia, incluyendo últimas opciones terapéuticas como los carbapenemes. Mecanismos prevalentes de resistencia son la adquisición de β-lactamasas tipo D con actividad carbapenemasa (CHDL) incluyendo OXA-23 y OXA-58, siendo los correspondientes genes movilizados por plásmidos. Aun así, los mecanismos que median tanto la movilización como la evolución de plataformas genéticas conteniendo genes blaOXA son poco comprendidos. La secuenciación de plásmidos de cepas de A. baumannii resistentes a carbapenemes del Complejo Clonal 104 prevalente en nuestra región indicó la presencia de plásmidos con un nuevo módulo de adaptabilidad conteniendo dos transposones compuestos, uno portando blaOXA-58 responsable de resistencia a carbapenemes y el otro aphA6 de resistencia a amikacina. Todos los plásmidos estudiados mostraron varios motivos de 28 nucleótidos reconocidos por las tirosin-recombinasas XerC y XerD del hospedador bacteriano (sitios XerC/D), las cuales son normalmente responsables de procesos de recombinación especíca de sitio (SSR) dirigidos a la resolución de dímeros formados durante la replicación de cromosomas bacterianos y plásmidos evitando “catástrofes diméricas”. Muchos sitios XerC/D se localizaron en las proximidades del módulo de adaptabilidad arriba mencionado, y algunos fueron capaces de conformar pares recombinacionalmente activos mediando fusiones y resoluciones entre distintos plásmidos así como inversiones del módulo de resistencia comprendido entre ellos. Estos eventos de SSR poseen un impacto signicativo en la dinámica de los plásmidos dando lugar a enormes posibilidades de re-arreglos, donde algunas estructuras resultantes de la selección por terapia antimicrobiana tomarán eventualmente control de la diseminación de las estructuras de resistencia que portan en la población bacteriana.
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TRABAJOS CIENTÍFICOS 8º CONGRESO BIOQUÍMICO ROSARIO 2018 Jueves 7 de junio de 2018 (14:00 – 16:00 hs)
HEMATOLOGÍA 18 ANÁLISIS DE RESULTADOS DE RESISTENCIA A LA PROTEÍNA C ACTIVADA EN 2 PERÍODOS CON DISTINTAS CONDICIONES DE TRABAJO. Laura Fornasiero. Cecilia Dozstal. Sandra Suarez. Chantai Chainghan. Ingrid Sjoberg. María Sonia Baquedano. Mariana Fiori. Pablo Godoy. Regina Carnino. Laboratorio LAHT. Rosario. La adición de proteína C activada (PCa) al plasma humano normal prolonga el tiempo de tromboplastina parcial activada (APTT). La PCa es una proteasa de serina que inhibe la formación de trombina mediante la degradación de Factor VIII activado y el Factor V activado por un clivaje proteolítico selectivo. Una mutación puntual del gen del factor V (factor V Leiden) se asocia con el fenotipo de resistencia a la PCa (APCr) y es la sustitución de adenina por guanina en la posición del nucleótido 1691 que lleva al reemplazo de arginina (R) en la posición 506 de la molécula de factor V por glutamina (Q) y lo hace resistente a la acción de la PCa. Cada kit comercial tiene su propio valor de corte para valores normales y valores asociados con la mutación del factor V. No todos los estudios muestran correlación diagnóstica entre la prueba funcional y los pacientes heterocigotas, haciendo necesaria la conrmación por biología molecular. Nuestro objetivo fue comparar sensibilidad especicidad y valor predictivo positivo (VPP) de la prueba de APCr en dos períodos de trabajo diferentes: 20112012 n133 pacientes relacionando APCr realizadas con 2 kits comerciales diferentes (primeras marcas y Factor V Leiden realizado por derivación a 2 centros y 2016-2017 n287 pacientes, APCr realizada con un 3° kit comer26
cial y Factor V Leiden realizado en sección Biología Molecular de nuestro laboratorio. Resultados: 2011-2012: sensibilidad 100%, especicidad 78.3%,(VPP) 33.3%; 2016-2017: sensibilidad 100%, especicidad 96.0%, (VPP) 80.0%. El VPP aumentó considerablemente en el segundo período lo cual indica una mejora al cambiar de marca de equipo de APCr. Cabe aclarar que existe en la literatura un porcentaje de APCr positivas debido a otras alteraciones genéticas y también a causas adquiridas. El estudio de correlación intralaboratorio entre la prueba funcional y la genética es importante ya que un valor predictivo positivo (VPP) elevado le da valor como prueba funcional. 21 COMPARACIÓN DE DOS REACTIVOS COMERCIALES DE TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADO (APTT). Laura Fornasiero. Cecilia Dosztal. Mariana Fiori. Sandra Noemí Suarez. Laboratorio LAHT. Rosario. El tiempo de tromboplastina parcial activado (APTT) es la prueba básica más utilizada para la detección de inhibidores de la coagulación tales como anticoagulante lúpico (AL) e inhibidores especícos y para detección de deciencias de factores sobre todo de la vía intrínseca. En ambos casos existe un alargamiento del tiempo respecto al rango normal. Los reactivos comerciales de APTT debido a diferencias en composición y concentración fosfolipídica, activadores etc. varían ampliamente en su sensibilidad para evidenciar deciencias de factores e inhibidores. Comparamos el comportamiento de 2 reactivos de APTT de primeras marcas comerciales, en sus respectivos autoanalizadores y en relación al rango normal de cada uno calculado en nuestro laboratorio. Obtuvimos 55 mediciones de pacientes con ambos reactivos (A y B) en sus respectivos autoanalizadores (I y II), 32 correspondientes a
pacientes con inhibidores y 23 correspondientes a deciencias de factores de vía intrínseca. El rango normal calculado analizando 200 pacientes adultos normales (percentil 97.5) para A en I se estableció en 24 a 33 seg y para B en II en 23 a 34 seg. Los resultados obtenidos fueron: Media: Inhibidor: A-I: 52 seg B-II 84.71 seg. Deciencia: A-I 46.2 seg B-II: 46.3 seg. Promedio de las diferencias pareadas: (A-I BII): Inhibidor -32.71 seg. Deciencia: -0.10 seg. Proporción por encima del límite superior: Inhibidor: A-I:78.57% B-II: 100% Deciencia: AI:70% B-II: 70%. Las mediciones promedio muestran que entre los inhibidores el equipo BII arroja valores más elevados que el equipo A-I, con una diferencia pareada promedio de 32.71 puntos, mientras que en el grupo deciencia los valores son similares. Por lo tanto elegimos para trabajar con inhibidores tanto especícos como de interferencia el equipo B-II. Es importante conocer estos comportamientos en laboratorios especializados a n de detectar los casos con resultados cercanos al límite de lo normal. 22 DETERMINACIÓN DE RANGOS NORMALES DE PARÁMETROS DE COAGULACIÓN EN CANINOS SANOS. Laura Fornasiero1. Sandra Noemí Suarez1. Cecilia Dosztal1. Mariana Fiori1. Melina Gines2. Cora Colla 2 . Gisel Schoeder 2 . Joaquín Rodriguez2. 1 Laboratorio LAHT. Rosario. 2 Facultad de Ciencias Veterinarias. UNR. Rosario. En el laboratorio de hemostasia y trombosis orientado a veterinaria los valores de las pruebas de coagulación varían y son especícos para cada especie animal. La Hemolia y la Enfermedad de Von Willebrand son dos patologías de la hemostasia muy frecuentes en caninos por lo cual recibimos solicitudes para el dosaje de los factores relacionados. Con el objetivo de brindar resultados seguros al profesional veterinario nos propusimos confeccionar rango normal (RN) percentil 97.5 (p97.5) para las pruebas de coagulación básicas y factores VIII (FVIII) y Von Willebrand (FVW). Se evaluaron 30 caninos
adultos de ambos sexos, de diferentes razas, en perfecto estado de salud. A cada uno se le extrajo 2 ml de sangre anticoagulada con citrato de sodio al 3,8% en tubos de plástico para las pruebas de coagulación. A dichos tubos se los sometió a una doble centrifugación a 3.500 rpm durante 15 minutos para de esta manera obtener plasma pobre en plaquetas (menos de 5.000 plaquetas/mm3). Para todas las determinaciones se utilizó método automatizado. La curva de calibración para cada determinación se realizó con un pool de plasmas normales de 20 caninos sanos provistos por la misma profesional veterinaria. Las determinaciones realizadas fueron Tiempo de Protrombina (TP) Tiempo de tromboplastina parcial activado (APTT), Tiempo de Trombina (TT), FVIII y FVW. Resultados: TP(seg): RN(p97.5): 6 a 11 seg APTT(seg): RN(p97.5): 14 a 24 seg TT(seg): RN(p97.5): 11 a 22 seg FVIII (%): RN(p97.5): 55 a 110 % F VW(%): RN(p97.5):60 a 130 %. Los valores obtenidos para las pruebas básicas son notablemente diferentes a los humanos. Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de referencia que deben ser informados al profesional veterinario junto a los valores obtenidos en el paciente. Proponemos efectuar las curvas de calibración por especie para cada parámetro ya que los mismos varían de manera notable. 33 EVALUACIÓN DEL DESEMPEÑO DE LOS PROCEDIMIENTOS DE MEDIDA DEL LABORATORIO EN PRÁCTICAS DE HEMOSTASIA UTILIZANDO LA ESCALA SIX SIGMA. Sandra Suarez. Mariana Fiori. German Batistti. Laura Fornasiero. Cecilia Dostal. Laboratorio LAHT. Rosario. Six sigma es una herramienta que permite evaluar el desempeño de un método, garantizando la calidad del mismo. Nuestro objetivo fue evaluar el desempeño de los métodos de medición de tres analitos relacionados a las prácticas de coagulación: tiempo de protrombina (TP) en segundos, tiempo de tromboplastina parcial activado (APTT) en segundos y brinógeno (Fi) en mg/dl. 27
Estudiamos retrospectivamente datos obtenidos del control interno de estos analitos durante el período septiembre 2017-febrero 2018. La evaluación se realiza en términos de error total (ETc) y métrica sigma (σ). Como requerimiento de calidad se consideró el error total permitido (ETp) especicado por fuente CLIA. Para el cálculo de la veracidad (sesgo) se utilizan datos obtenidos del programa de control de calidad externo en el que participa el laboratorio. El desempeño de cada método se considera aceptable si ETc < ETp y σ ≥ 3. A mayor valor de sigma, mejor desempeño del procedimiento de medida, pudiendo utilizar esquemas más simples de control de calidad. Se utilizan grácos de decisión de métodos para clasicar el desempeño y el valor de la métrica sigma para la selección de reglas de control adecuadas. Clasicación según Six sigma: inaceptable (σ < a 2); pobre (σ entre 2 y 3); marginal (σ entre 3 y 4); bueno (σ entre 4 y 5); excelente (σ entre 5 y 6) y clase mundial (σ > a 6). Los valores de ETc y σ obtenidos para los analitos estudiados son: TP: ETp 15 %; ETc 10,26 %; σ 3.58; APTT: ETp 15 %; ETc 10.83; σ 3.11; Fi: ETp 20 %; ETc 12.20 %; σ 4.06. El desempeño de los métodos es adecuado según los requisitos establecidos por CLIA, clasicándolos como marginal para los analitos TP y APTT; y bueno para Fi. Esto revela que es posible implementar acciones que mejoren el desempeño, tanto en precisión como en exactitud. El uso de esta herramienta aplicada en el laboratorio de hemostasia nos permitió conocer la calidad de los métodos y continuar con el proceso de mejora continua. 51 CORRELACIÓN ENTRE EL ÍNDICE DE RESISTENCIA A LA PROTEÍNA C ACTIVADA Y EL FACTOR V DE LEIDEN Laura C Bastone. Laura Fornasiero. Germán R Pérez. Sandra Suarez. Mónica Torruela. Gammalab. Grupo Gamma. Rosario. INTRODUCCION. El Factor V Leiden (FVL) es la forma más frecuente de trombolia hereditaria y la causa más común de resistencia a la proteína C activada (PCa). La mutación c.1691G>A en el gen F5 provoca una 28
sustitución aminoacídica (p.R506Q) en el Factor V e impide que la PCa inactive su forma activa, por lo que aumenta el riesgo de aparición de eventos tromboembólicos. Por ello, en pacientes con esta mutación, la relación entre el tiempo de coagulación en la prueba de APTT en ausencia y presencia de PCa (índice APC) es cercano a 2. OBJETIVO. Evaluar la relación entre el índice APC y el genotipo para el FVL en pacientes con antecedentes de estados de hipercoagulabilidad. METODOLOGÍA. El índice APC se determinó utilizando un ensayo comercial adaptado a automatizador. La variante del FVL fue detectada mediante ensayo de PCR de punto nal, corte del producto con enzima MnlI y análisis de fragmentos de restricción en gel. Los resultados fueron conrmados mediante un ensayo comercial en plataforma cobas z480 (Roche). Los resultados se analizaron mediante pruebas de múltiples rangos (diferencia mínima signicativa de Fisher). RESULTADOS. Se estudiaron 170 pacientes de genotipo conocido [Homocigota normal (HN): 91% (155/170), Heterocigota (HT): 4% (7/170), Homocigota patológico (HP): 5% (8/170)]. Los índices APC para los subgrupos son (media ± CV): HN (2,61 ± 0,37), HT (1,77 ± 0,11) y HP (1,89 ± 0,14). La prueba de múltiples rangos estableció diferencia estadísticamente signicativa (nivel de conanza del 95%) entre las medias del índice APC para los pares (diferencia ± CV): HN-HT (0,85 ± 0,27) y HN-HP (0,73 ± 0,25). No se encontró correlación en el par HT-HP (-0,12 ± 0,36). CONCLUSIÓN. El índice APC permitió identicar la población de pacientes portadores de la variante del FVL, pero no discriminar aquellos HP de HT. La detección de la variante c.1691G>A sería necesaria para estimar el riesgo relativo de eventos trombóticos de los pacientes.
GENÉTICA CLÍNICA 34 DIAGNÓSTICO MOLECULAR DIFERENCIAL PARA SÍNDROME DE NOONAN MEDIANTE NEXT GENERATION SEQUENCING (NGS). Guadalupe Mejico1. Bianca Brun2. María Florencia Gosso1. Ana Laura Ruggieri1. Cristian
Rohr 3 . María Fernanda Madeira 3 . Martin Vazquez3. Fabián Fay1. 1 Laboratorio CIBIC S.A. 2INDEAR. 3HERITAS. Introducción: RASopatías es el término empleado para un grupo de desórdenes relacionados que presentan anomalías del desarrollo, resultado de un mecanismo patogénico común: la desregulación de la vía Ras/MAPK. Esta vía cumple un rol esencial en el control del ciclo celular. Existe alto grado de solapamiento fenotípico entre las distintas RASopatías. Se maniestan con apariencia facial característica, defectos cardíacos congénitos, anomalías cutáneas, retraso neurocognitivo de grado variable y predisposición a desarrollo de tumores. El Síndrome de Noonan (SN) es un trastorno genético relativamente común, su prevalencia es 1/1000-2500 nacidos vivos. Se hereda de forma autosómica dominante en un 30-75% de los casos, existiendo un porcentaje signicativo de pacientes con mutaciones de novo. SN presenta heterogeneidad genética; en 30-60 % de los casos se encuentra asociado a mutaciones en el gen PTPN11 (MIM*176876). Existen otros genes con mutaciones reportadas asociadas a SN: BRAF, CBL, HRAS, KRAS, MAP2K1, MAP2K2, NRAS, RAF, SHOC2 y SOS1. Materiales y Métodos: Muestra de 22 pacientes con diagnóstico presuntivo de SN. Extracción de ADN genómico a partir de sangre entera con EDTA. Secuenciación mediante el kit Trusight® Cardio de Illumina en la plataforma NextSeq500. El análisis bioinformático y la anotación de las variantes se realizó mediante un desarrollo propietario de Héritas basado en GATK (Broad Institute). Resultados: Se obtuvieron resultados positivos para el 60% de los pacientes analizados. El 46% de los casos presentó mutaciones patogénicas en PTPN11, mientras que las mutaciones restantes se asociaron a variaciones en los genes BRAF, HRAS, KRAS, MAP2K1, RAF1 y SOS1. Conclusiones: La utilización del panel de RASopatías como primera línea de screening molecular en pacientes con sospecha clínica de SN permite arribar de manera rápida y segura al diagnóstico. Permitiendo denir prognosis y seguimiento; y brindar asesoramiento genético al paciente y su familia.
52 DIAGNÓSTICO DE HIPERPLASIA SUPRAR R E N A L C O N G É N I TA AT Í P I C A : DETECCIÓN DE VARIANTES EN EL GEN CYP21A2. Germán R Pérez. Laura C Bastone. Mónica Torruella Gammalab. Grupo Gamma. Rosario INTRODUCCIÓN. La Hiperplasia Suprarrenal Congénita (CAH) es un trastorno endócrino hereditario causado por un décit de enzima esteroidogénica. La forma más frecuente de CAH es por décit de 21-hidroxilasa, enzima codicada por el gen CYP21A2, la cual regula la síntesis de cortisol y aldosterona. El 95% de los casos es debido a una mutación en ese gen. Las formas atípicas se caracterizan por mostrar alteraciones bioquímicas con escasos signos clínicos. El pseudogen inactivo CYP21A1P se encuentra a corta distancia del gen CYP21A2. Ambos genes tienen 10 exones y son 98% homólogos. OBJETIVO. Identicación de variantes en pacientes de la ciudad de Rosario con sospecha de CAH atípica. METODOLOGÍA. Se estudiaron 6 pacientes con sospecha de CAH atípica. El ADN genómico se obtuvo a partir de sangre entera con EDTA por medio de la tecnología de partículas magnéticas (Roche). Los exones del gen CYP21A2 se amplicaron a partir de los productos de 2 long-range PCR que se superponen en el exón 3, para evitar la amplicación del pseudogen CYP21P (Roche). Los productos se secuenciaron mediante método estándar de Sanger (BDT v3.0) y el análisis de los fragmentos se efectuó por electroforesis capilar en un analizador genético (Applied Biosystems). La presencia de grandes rearreglos fue investigada por técnica de amplicación de sondas dependiente de ligandos múltiples (MRC-Holland). RESULTADOS. Paciente [variantes]: A [sin variantes patogénicas]. B [c.656A/C>G (I2G) en heterocigosis]. C [c.92C>T (p.P31L) + c.844G>T (p.V282L) en heterocigosis]. D [c.844G>T (p.V282L) en heterocigosis]. E [c.738+12_738+13 delACinsGT + c.1481G>A en heterocigosis]. F [c.1481G>A en heterocigosis]. No se detectaron deleciones/duplicaciones en el gen CYP21A2. CONCLUSIÓN. Los estudios genéticos 29
permitieron certeza en el diagnóstico de CAH atípica detectándose variantes poco frecuentes. 86 BÚSQUEDA DE MUTACIONES EN EL EXÓN 3 Y 4 DEL GEN DE APOLIPOPROTEINA A1 (APOA1), EN INDIVIDUOS CHILENOS CON NIVELES NORMALES Y DISMINUIDOS DE COLESTEROL HDL J Lagos. C Carrillo. K Cortez. C Martínez. Escuela de Tecnología Médica, Universidad Santo Tomas, Temuco, Chile INTRODUCCIÓN: Se considera que niveles séricos disminuidos del colesterol asociado a lipoproteínas de alta densidad (C-HDL), predisponen a mayor riesgo de enfermedad cardiovascular. La apolipoproteína A1 (APOA1) es el principal componente de las HDL y polimorsmos genéticos en el gen de APOA1 determinan disminución de C-HDL. Es así, como el objetivo de este estudio fue realizar una búsqueda de mutaciones mediante secuenciación, en el exón 3 y 4 del gen de APOA1, en individuos chilenos con niveles normales y disminuidos de C-HDL. MÉTODOS: Mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se amplicaron secuencias genómicas de 523 y 854pb, correspondientes al exón 3 y 4 del gen de apoA1. 29 muestras de ADN correspondieron a sujetos con niveles sanguíneos de CHDL inferiores a 40 mg/dl (casos) y 30 con niveles superiores o iguales 40 mg/dl (controles). Los productos de PCR fueron puricados, secuenciados y posteriormente analizados bioinformáticamente en su homología de secuencias. Todos los sujetos autorizaron su participación en el estudio mediante rma de consentimiento informado. RESULTADOS: No se encontraron polimorsmos dentro del exón 3 y 4, sin embargo, se reportaron dos cambios intrónicos de citosina por timina en las posiciones 5756 y 5655, correspondientes a los polimorsmos rs5072 y rs2070665 respectiva-mente. El rs5072 se asoció a disminución de C-HDL (83% casos v/s 57% controles, p=0.0470). CONCLUSIÓN: No existen mayores reportes de asociación del rs5072 y niveles de C-HDL, siendo este el primer resultado en población Chilena. Si bien 30
el rol de este polimorsmo no es claro, la región intrónica en la que se ubica, se relaciona con el cluster genético A1/C3/A4/A5 que regula apolipoproteínas en el metabolismo lipídico. Se proyecta investigar el rs5072 en un grupo mayor de sujetos y evaluar su funcionalidad en el metabolismo de lipoproteínas HDL, a n de estimar factores genéticos de riesgo de esta dislipidemia en población chilena.
103 ESTUDIO ESTADÍSTICO DE SCREENING DE PRIMER TRIMESTRE PARA DETERMINACIÓN DE RIESGO DE TRISOMÍA 21. Marcelo Pugliessi. Enzo Peralta. Delia Ostera. Laboratorio IBC. Rosario. INTRODUCCIÓN: El screening del primer trimestre utilizando los marcadores bioquímicos PAPP-A y Subunidad Beta Libre y la medición de translucencia nucal (TN) es una herramienta ampliamente utilizada para la detección de trisomía 21. Existe el concepto de que el mismo debe ser ofrecido sólo a pacientes de edad avanzada, cuando todos los colegios de obstetricia recomiendan hacerlo para todos los embarazos, independientemente de su edad. OBJETIVO: Realizar un análisis estadístico sobre los screening realizados en nuestro laboratorio entre 2012 y 2018 para vericar el riesgo de T21 en todo el rango de e d a d e s e s t u d i a d a s . M AT E R I A L E S Y MÉTODOS: Se estudiaron 2319 embarazadas entre semana 8 y 14 de gestación, de 20 a 47 años que concurrieron al laboratorio entre 2012 y 2018. Las mediciones de PAPP-A y Sub Beta Libre fueron realizadas por Electroquimioluminiscencia – Roche Diagnostico. La TN fue medida en centros de diagnóstico por imágenes certicados por Fetal Medicine Foundation FMF. Cálculo e informe de riesgo fueron realizados mediante Software SsdwLab 5.0. El valor de corte de riesgo utilizado fue 1:250 embarazos. RESULTADOS: El 2.5% de las mujeres menores de 35 años presentaron un riesgo de T21 mayor a 1:250. CONCLUSIÓN: Si comparamos el riesgo de las menores de 35 años utilizando el screening vs el riesgo únicamente por edad para 35 años que es de 1:385 vemos que existe un riesgo 10 veces mayor que
es detectado utilizando el screening. Dado que el 80% de los niños afectados por T21 son nacidos de madres menores a 35 años nuestras conclusiones concuerdan con las recomendaciones de los diversos colegios en ofrecer este test a todas las embarazadas independientemente de su edad.
tiene como objetivo el monitoreo de pacientes diabéticos, y su correcta medición impacta directamente no solamente, en el ajuste de la medicación, sino que además en el diagnóstico. Dado el resultado del estudio realizado es posible contar con una técnica trazable a la Gold Standar con el equipamiento habitual en un Laboratorio Clínico de rutina.
ENDOCRINOLOGÍA 12 COMPARACIÓN DE UN MÉTODO COMERCIAL INMUNOTURBIDIMÉTRICO PARA LA MEDICIÓN DE LA HEMOGLOBINA GLICOSILADA (HBA1C) CONTRA EL MÉTODO DE REFERENCIA (HPLC). Luciano Soto. Mariana Bevione. María L Plaza. Gustavo A Dip. Alejandra Lombardo. Laboratorios Turner SRL. Rosario.
15 MICROALBUMINURIA: UN MARCADOR DE DAÑO RENAL TEMPRANO EN NIÑOS Y ADOLESCENTES CON DIABETES MELLITUS TIPO 1 Mariana Castañeira1. María José Sadonio2. Javier Nuñez1. María Virginia Piaggio1. María del Rosario Zárate2. Larisa Carrera2. 1 Hospital de Niños Dr. Orlando Alassia. 2 Facultad de Ciencias Médicas. UNL
INTRODUCCIÓN: La determinación de HbA1c presenta una amplia variabilidad entre los diferentes métodos y el laboratorio clínico debe garantizar la exactitud de los resultados de la misma cumpliendo con los requisitos analíticos internacionales de calidad. OBJETIVO: Comparar un método inmunoturbidimétrico comercial para la medición de HbA1c, contra el método de referencia (HPLC). MATERIALES Y MÉTODOS: La cuanticación de HbA1c se realizó mediante la utilización de 2 equipos comerciales diferentes: Método Inmunoturbidimétrico: se realizó de manera automatizada en un autoanalizador ADVIA 1800 (Siemens, Alemania). Rango analítico: de 2,9 – 15,4%. Método HPLC: Bio-Rad VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 (HPLC) por intercambio iónico. Rango analítico: 3,5 a 19,0 %. Se procesaron controles comerciales de HbA1c y 48 muestras de paciente ambulatorios, utilizando el protocolo de comparación de métodos descripto como CLSI EP9. RESULTADOS: Ecuación: ordenada al origen 0,15; Pendiente: 0,983; R=0,9953. La estimación para la pendiente fue de (0,964 a 1,003) y para la ordenada (-0,03 a 0,33), con un nivel de conanza del 95%. Podemos armar que no existen diferencias sistemáticas ni diferencias proporcionales entre los dos métodos. CONCLUSIONES: La determinación de HbA1c
En la Diabetes Mellitus (DM) el mal control metabólico es considerado un factor de riesgo de complicaciones, entre ellas la nefropatía diabética. La detección temprana de microalbuminuria (MA) es un marcador de daño vascular sistémico y glomerular que permite identicar la presencia de nefropatía incipiente. El objetivo del trabajo fue analizar los valores de MA en niños y adolescentes con DM tipo 1 y relacionarlos con los valores de hemoglobina glicosilada (HbA1c) y el tiempo de evolución de la enfermedad. Se analizaron retrospectivamente 120 historias clínicas de niños y adolescentes, atendidos en el Servicio de Endocrinología del Hospital de Niños Dr. Orlando Alassia durante el período 2012 a 2017. Para el análisis de MA se utilizó el método cuantitativo por inmunoturbidimetría procesado en autoanalizador Cobas c 311 (Roche Hitachi), en muestras de orina de 24 horas, considerándose positivos valores superiores a 20 mg/l, en al menos dos pruebas. Se realizó MA a 55 pacientes (el 45.8%). En 46/55 se detectó MA negativa, el valor promedio fue 6.23±4.32mg/l y la media de HbA1c fue 9.61±2.66 %. Exhibieron MA positiva 9/55 (16.36%), 7 mujeres y 2 hombres, con un valor promedio de 64.36±52.27 mg/l y un valor de HbA1c promedio de 9.22±1.27 %. La edad promedio de los pacientes con MA positiva fue 13 años (rango 11-15) y la media del tiempo de 31
e vo l ución 3.88 años Comparando lo s resultados con las guías ISPAD (International Society for Pediatric and Adolescent Diabetes) que recomiendan valores de HbA1c menores a 7.5% concluimos que los pacientes con MA positiva presentaron un mal control metabólico y un corto tiempo de evolución de la diabetes (menor que en otros trabajos de investigación revisados). Los resultados revelan que se realizó MA a un grupo reducido de niños y adolescentes y señalan la importancia de solicitar el análisis independientemente del tiempo de evolución como marcador de nefropatía incipiente para prevenir complicaciones a temprana edad. 31 DIABETES MELLITUS TIPO 1 EN NIÑOS MENORES A 5 AÑOS. María J Sadonio1. Mariana Castañeira1. María V Piaggio 2 . Magdalena Fainberg 1 . Larisa Carrera1. 1 FCM UNL. 2Hospital de Niños Dr. Orlando Alassia. En los últimos años se ha incrementado la incidencia de Diabetes Mellitus (DM) en menores de 5 años. La cetoacidosis diabética (CAD) representa una de las más serias complicaciones metabólicas agudas, derivada de la falta prolongada de insulina, y se presenta en la mayoría de los debuts de la DM tipo 1. El objetivo del presente trabajo fue analizar las características clínicas y de laboratorio al debut de la DM tipo 1 en niños menores de 5 años. Se realizó un análisis retrospectivo de 112 historias clínicas de niños atendidos en el Servicio de Endocrinología del Hospital de Niños Dr. O. Alassia, durante el período 2012 a 2017. Se denieron como casos de CAD aquellos que presentaron glucemia >2 gr/l, pH <7.3, bicarbonato (HCO3-) <15 mEq/l y cetonuria. La media de edad de los niños analizados fue de 8.17 ±4.01 años. Se observó que 29/112 (25.8%) niños debutaron con la enfermedad a una edad inferior a 5 años y 10/29 (34,4%) eran ≤ 24 meses. Las manifestaciones clínicas principales fueron deshidratación y alteración de la conciencia. Al debut, 19/29 (65,5%) de los niños presentaron CAD y fue clasicada como moderada o severa en el 84,2% de los casos. La media de glucemia fue de 4.32 ±1.81 gr/l, el 32
pH de 7.24 ±0.15, el HCO3- de 12.59 ±8.06 mEq/l, el exceso de base de -12.01 ±10.12 mEq/l y una media de HbA1c en el primer control de 9.37 ±1.88 %. El debut de la enfermedad se presentó en un porcentaje elevado de niños menores de 5 años y lo mismo se exhibió en menores de 2 años (al compararlo con otros estudios revisados). Lo recomendado es aumentar el tamaño de la muestra para conrmar las diferencias encontradas. Se aconseja reforzar las acciones de detección en este grupo de etario ya que la sintomatología inespecíca previa genera demoras en la consulta y mayor gravedad del cuadro en su debut. El control metabólico y tratamiento son difíciles de alcanzar en estos pacientes, y son más susceptibles a presentar secuelas neurológicas por episodios de hipoglucemia.
59 AGREGACIÓN ERITROCITARIA EN PACIENTES DIABÉTICOS PEDIÁTRICOS Virginia María Canetti 1 . Larisa Carrera 1 . Verónica Reus1. Mónica Susana Sosa2. 1 Facultad de Ciencias Médicas-UNL. 2 Laboratorio Hospital de Niños de Santa Fe Dr. Orlando Alassia. La Diabetes Mellitus (DM) es un trastorno metabólico que se presenta con anormalidades hemorreológicas, una de ellas, la hiperagregación eritrocitaria. In vivo e in vitro, en presencia de macromoléculas plasmáticas, los eritrocitos se agregan naturalmente, formando agregados lineales como “pilas de monedas” conocidos como rouleaux. La formación alterada de éstos contribuye a las alteraciones micro-vasculares. El objetivo de este trabajo es analizar la presencia y el patrón de la agregación eritrocitaria en un grupo de pacientes del Hospital de Niños de Santa Fe “Dr. Orlando Alassia”. Para caracterizar el patrón de agregación eritrocitaria se utilizaron muestras de sangre anticoaguladas con EDTA/Na2 de controles rutinarios de 13 niños diabéticos. Las muestras fueron proce-sadas dentro de las 6 hs de su extracción. Se trabajó con técnica modicada según Fontana. Se preparó dilución al 0,5% en plasma autólogo y 50 µl de ésta se colocaron en un portaobjetos
con un cubre. Después de 5 minutos de reposo se estudió la agregación eritrocitaria por observación microscópica de los agregados y posterior captura de imágenes. Aplicando una metodología cualitativa morfológica, la agregación eritrocitaria se presenta en forma de un entramado de glóbulos rojos, formando extensos apilados unidos entre sí, en forma tortuosa. Del total de niños, 12 se presentaron con patrón tipo entramado y 1 de ellos presenta clusters. Se tomaron imágenes correspondientes a niños sanos los cuales no poseen entramado. Se presenta en este trabajo la primera etapa de la investigación, cuyo objetivo nal será obtener la caracterización y cuanticación de los agregados eritrocitarios en los niños diabéticos. Los resultados contribuirán a comprender las alteraciones hemorreológicas de pacientes diabéticos pediátricos. Viernes 8 de junio de 2018 (14:00 – 16:00 hs)
BIOQUÍMICA CLÍNICA 13 EVALUACIÓN DE FACTORES DE RIESGO CARDIOVASCULAR EN ESTUDIANTES DE BIOQUÍMICA DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DEL LITORAL. María L Bertona. Noelia Villafañe. Carolina Aro. Adriana Benmelej. Ana P Fabro. Josena Iugman. Mariana Cabagna. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Universidad Nacional del Litoral. Introducción: Las enfermedades crónicas no transmisibles constituyen actualmente la principal causa de muerte; dentro de las cuales se incluyen las enfermedades cardiovasculares (ECV), cáncer, enfermedades respiratorias crónicas y diabetes. Los universitarios adoptan estilos de vida no saludables que predisponen al desarrollo de sobrepeso y obesidad aumentando el riesgo cardiovascular. Las ECV se pueden prevenir mediante intervención directa sobre los factores de riesgo, por esto es estratégico conocer la prevalencia de éstos en los estudiantes universitarios. Objetivo: Evaluar factores de riesgo cardiovascular y su relación
con el estado nutricional en estudiantes de Bioquímica de la Universidad Nacional del Litoral, en el año 2016. Materiales y métodos: Se estudiaron 52 alumnos (20 y 36 años) a quienes se les realizaron mediciones antropométricas (circunferencia de cintura, peso, talla), de presión arterial, encuestas sobre tabaquismo, actividad física y alimentación. Del total de alumnos 38 se realizaron extracción sanguínea previo ayuno de 12 hs para cuanticación del colesterol total mediante el método enzimático oxidasa peroxidasa. Resultados: Del análisis de datos se obtuvo los siguientes resultados: 44,23% tenía exceso de peso, 71,15% riesgo cardiovascular bajo, 92,3% presión arterial óptima, normal y normal alta, 86,84% colesterol óptimo, 88,46% realizaban actividad física y 75% no fumaban actualmente. Finalmente se halló asociación estadística-mente signicativa (p=0,0001) entre estado nutricional evaluado y riesgo cardiovascular por circunferencia de cintura. Conclusiones: Al ser la universidad una etapa crítica para los estudiantes desde el punto de vista nutricional y de adquisición de hábitos de vida es de gran importancia diseñar estrategias para mejorar la alimentación, aumentar la actividad física y evitar conductas perjudiciales para la salud y, de esta manera prevenir o tratar enfermedades crónicas no transmisibles en este grupo etario. 14 ÁCIDOS BILIARES Y SU IMPORTANCIA EN LA DETECCIÓN DE COLESTASIS INTRAHEPÁTICA GESTACIONAL, HOSPITAL JOSÉ MARÍA CULLEN PERÍODO 2015-2017 Sofía Meret 1. Elisabeth Pusineri 1,2,3,4. Carina Manatini 1. Natalia Fernández 1. Estella Salerno 1 . Silvia Peretti 1,5. 1 Hospital José María Cullen. Sanatorio Santa Fe. 2 Sanatorio Garay. 3 Sanatorio Mayo. 4 Sanatorio Santa Fe. 5Clínica de Nefrología. La colestasis intrahepática gestacional es la patología más frecuente dentro de las enfermedades hepáticas en el embarazo. Está asociada a graves riesgos perinatales, tales como parto pretérmino, presencia de meconio, distress respiratorio del neonato y muerte fetal intraútero. Debido a que frecuentemente la 33
ASAT (amino aspartato transferasa), la ALAT (alanina amino transferasa), la BT (bilirrubina total) y la BD (bilirrubina directa) de estas pacientes son normales, se utilizan los AB (ácidos biliares) para su detección constituyendo el marcador más sensible y precoz para la enfermedad, por lo que es una determinación de urgencia. El objetivo del trabajo fue evaluar los niveles de AB en embarazadas, en relación a los datos de ALAT, ASAT, BT Y BD correspondiente. Se trabajó con muestras (suero, plasma con EDTA o heparina) de pacientes atendidas en el Hospital José María Cullen en el período 2015-2017, con sintomatología característica (prurito palmoplantar) (n=198). Se cuanticaron por un método enzimático colorimétrico empleando una técnica adaptada con reactivos Randox en el equipo cobas c501. El 42% de las pacientes presentó valores de AB mayores al VR (valor de referencia): 10 µmol/L, aunque sólo se observó alteración en un 50% de ALAT, 45.24% de ASAT, 17.86% de BT Y 32.29% BD. A su vez, el 13% mostró valores mayores a 40 µmol/L de AB (valor considerado por distintos algoritmos determinante para la interrupción del embarazo) y, llamativamente, en este grupo solo se obtuvieron valores alterados de 40% de ASAT, 40% ALAT, 40% BT y 56% BD. Estos resultados remarcarían la importancia de considerar los niveles de AB para el diagnóstico de Colestasis intrahepática gestacional ya que más de la mitad de los hepatogramas son normales con AB alterados en pacientes con sintomatología clínica, siendo la principal manifestación el prurito palmo plantar a generalizado en casos más graves, sin erupción cutánea. 16 RELACIÓN ENTRE LOS NIVELES DE VITAMINA D Y PARÁMETROS SEMINALES EN PACIEN-TES INFÉRTILES. Mariela Holzer 1. Sergio Ghersevich 2. 1 Laboratorio de Estudios Bioquímicos y Área de Bioquímica Clínica - Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas - Universidad Nacional de Rosario. 2Área de Bioquímica Clínica-Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas- Universidad Nacional de 34
Rosario. La deciencia de vitamina D (vit D) es un hallazgo relativamente frecuente y se ha sugerido el posible vínculo de dicha deciencia y diversas alteraciones en la función reproductiva. En este trabajo se evaluó la relación entre la concentración sérica de vit D y parámetros seminales en pacientes varones infértiles y se compararon con los resultados de voluntarios controles sanos normozoospérmicos. Se obtuvo una muestra de sangre y una de semen de pacientes (PI, n=29) derivados para estudios de fertilidad y diagnóstico de esterilidad y de donantes voluntarios sanos (VS, n=27). Se determinó la concentración sérica de vit D por quimioluminiscencia. Las muestras de semen se procesaron según OMS (2010). Los resultados se reportaron como media ± error estándar medio. El análisis se realizó mediante el test t de Student, tablas de contingencia basadas en el test de Fisher, y regresión lineal. Se encontraron diferencias signicativas en % motilidad progresiva (39,5 ± 3,3% vs. 58,5 ± 2,1%, p<0,001), % mortalidad (23,9 ± 3,2% vs. 8,4 ± 0,7%, p<0,001), y % morfología espermática normal (8,5 ± 0,6% vs. 13,1 ± 0,4%, p<0,001) entre los PI y los VS, respectivamente. Las concentración de vit D fue signicativamente más baja en los PI respecto de los VS (19,74 ± 1,40 ng/ml vs. 32,68 ± 1,52 ng/ml, p<0,001) y se determinó una asociación signicativa (p < 0,001) entre los niveles séricos de vit D < 20 ng/ml y la presencia de infertilidad. Se halló una correlación inversa signicativa entre los niveles de vit D y el % de mortalidad espermática (r= -0,34; p<0,01). Se encontró una correlación signicativa entre la concentración de vit D y el % de motilidad progresiva (r= 0,32; p<0,05). Los resultados sugieren que los niveles de vit D afectarían la función reproductiva masculina. Sin embargo, dado que la infertilidad masculina es una enfermedad heterogénea, tal vez la concentración de vit D sería un marcador de salud general y no un factor etiológico de dicha patología.
45 EVALUACIÓN DEL GRADO DE CONTROL LIPÍDICO ALCANZADO EN PACIENTES CON TRATAMIENTO FARMACOLÓGICO QUE ASISTEN AL PAMI I. María Verónica Colmegna 1. Gabriela Barbero 1. Reinaldo Cipriani 1. Marta Posadas 1. Liliana Racca 2. Sabrina Silva Quintana 2. 1 Policlínico Pami I. Rosario. 2Área Estadística y Procesamiento de Datos. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. UNR. Rosario. Los valores sanguíneos de colesterol se asocian en forma continua con el riesgo de padecer eventos vasculares, en todos los grupos etarios y de forma independiente de otros factores de riesgo como los niveles de presión arterial. En Latinoamérica la dislipidemia explicaría un 40,8% de los infartos (Estudio INTERHEART). Cuando los cambios de estilo de vida terapéuticos (dieta, ejercicio y control de peso) no son sucientes para controlar la hipercolesterolemia, dentro de las estrategias individuales se recurre al tratamiento farmacológico. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el grado de control lipídico en pacientes tratados farmacológicamente que asisten al PAMI I. Los pacientes evaluados tenían en promedio 74,6 años con un desvío estándar de 7,9 años; el 72% eran de género femenino. Para analizar las diferencias entre los valores de las variables (Col Total, Triglicéridos, Col-HDL y Col-LDL) para pacientes tratados (n: 41) y no tratados (n: 206) se aplicó el test t de Student para muestras independientes, previo ensayo de homogeneidad de variancias, o el de MannWhitney según correspondiera. Resultados en mg/dL (media ± desvío estándar): Col Total: 195,9 ± 40,1 vs 196,4 ± 42,1 (p=0,951); Triglicéridos: 137,3 ± 63,9 vs 126,8 ± 49,1 (p= 0,6332); Col-HDL: 52,0 ± 13,9 vs 53,3 ± 15,1 (p= 0,6883); Col-LDL: 118,6 ± 37,7 vs 119,9 ± 35,9 (p=0,842) para tratados y no tratados respectivamente. Los resultados obtenidos permiten concluir que el tratamiento farmacológico aplicado fue efectivo ya que los pacientes alcanzaron un perl lipídico semejante al grupo de pacientes no tratados. Si bien la ausencia de diferencias estadísticamente signicativas entre los pacientes que
reciben tratamiento y los que no, señalaría la efectividad de la intervención farmacológica en el grupo con dislipidemia, en ambos grupos el valor de Col-LDL supera las recomendaciones médicas más recientes (< 100 mg/dL), por lo que evaluamos conveniente comunicar estos hallazgos. 49 ESTUDIO DE PREVALENCIA DE FAN POSITIVO EN UNA POBLACIÓN DE PACIENTES AMBULATORIOS EN LA CIUDAD DE ROSARIO Georgina Maroni. María Lujan Techera. Sergio Lejona. Gustavo Ariel Dip. Laboratorios Turner SRL. Rosario. INTRODUCCIÓN: El factor antinúcleo (FAN) es una prueba de screening que se utiliza ante la sospecha de enfermedad autoinmune (EAI). El FAN generalmente se presenta en altos títulos, sin embargo la negatividad del test no excluye EAI. OBJETIVO: Estudiar la prevalencia de FAN positivo en pacientes ambulatorios que concurrieron a nuestro laboratorio en comparación a la descripta bibliográcamente. MATERIALES Y MÉTODOS: Se realizó la determinación de FAN por inmunouorescencia indirecta (IFI) en improntas de HEP 2 (BIORAD), se utilizó anti IgG humana de cabra (Biocientica). Se estudiaron 163 pacientes. Criterio de positividad: a partir de 1/40 inclusive (uorescencia del núcleo). RESULTADOS: Se obtuvieron resultados positivos para FAN en el 31,3% de los pacientes. Para analizar la prevalencia de FAN a titulo alto se aplicó el Test de Fischer en el cual se evaluó: FAN positivo a titulo mayor o igual a 1/160 y por otro lado FAN negativo más título bajo (1/40 y 1/80), en hombres y mujeres. El riesgo relativo fue de 3,6 con mayor prevalencia en mujeres. También se evaluó FAN a titulo alto en pacientes con diagnóstico y en pacientes sin diagnostico al momento de la toma de muestra y lo mismo con FAN negativo más título bajo. Los resultados dieron un VPP de 52% y VPN del 97%. La sensibilidad de la técnica fue del 75% y la especicidad del 93%. El porcentaje de FAN positivo a titulo alto en pacientes diagnosticados fue del 7,3% y a titulo bajo y negativos 2,5%. En 35
los pacientes con FAN positivo a titulo alto sin diagnostico el porcentaje fue 6,7% y con FAN negativo o a titulo bajo fue 83,5%. CONCLUSIÓN: La prevalencia de FAN positivo en la población estudiada no presenta diferencias a la descripta en la bibliografía. La frecuencia de FAN a titulo alto es mayor en pacientes femeninos que en masculinos. Un pequeño porcentaje de FAN a bajo título o negativo se relacionó con EAI. Un alto porcentaje de la población tiene FAN positivo sin relacionarse a títulos altos y/o EAI. 57 BIOMARCADORES DE ESTRES OXIDATIVO EN CHAGAS Mabel D'Arrigo. Romina Diviani. Gabriela Gerrard. Susana Lioi. María José Ceruti. María Belén Marti. Área Química Analítica Clínica. FBIOYF. UNR. Rosario. Introducción: La enfermedad de Chagas es una entidad de patogenia insucientemente conocida, clínica variable e impredecible y de tratamiento sintomático. El estrés oxidativo constante en el corazón contribuiría a la Miocardiopatía Chagásica (MCC). Objetivos: Evaluar biomarcadores de estrés oxidativo: actividad enzimática de superóxido dismutasa (SOD), catalasa (CAT), medición de oxidación lipídica (tBARS) y antioxidantes totales (Ant T) en muestras de sangre de individuos controles (CN: 60), chagásicos sin MCC (Ch+MCC-: 28), chagásicos con MCC (Ch+MCC+: 35) y cardiopatía no chagásica (Ch-C+: 30). Materiales y Métodos: Se analizaron biomarcadores por métodos espectrofotométricos (Kits Ransel Labs). Resultados: SOD (USOD/g Hb). Se aplicó ANOVA. Se observó diferencia signicativa entre los grupos (p=0,0001). El test de comparaciones múltiples de Bonferroni mostró diferencia signicativa del grupo control con todos los restantes. CAT (K/g Hb), Se aplicó ANOVA. Se observó diferencia signicativa entre los grupos (p=0,0014). El test de comparaciones múltiples de Bonferroni mostró diferencia signicativa entre el grupo Control con ChsinMCC y con MCC, también entre CnoCh y MCC. tBARS (nmol/ml). Se 36
aplicó el test de Kruskal-Wallis. Esta prueba dio signicativa (p-value=0,0154). El test de comparaciones múltiples de Dunn mostró diferencia signicativa entre Control y CnoCh (p=0.0280) y entre Control y MCC (p=0,0262). Conclusiones: La mortalidad y morbilidad de la enfermedad de Chagas se debe principalmente a procesos crónicos. La respuesta a la infección persistente de T. cruzi, involucra la generación sostenida de ROS/RNS por células inamatorias y la disfunción mitocondrial en el corazón, que conduciría a estrés oxidativo. Los fagocitos activados ejercerían efectos citotóxicos a través de ROS que mediarían la muerte del patógeno por el daño oxidativo, desempeñando un papel importante en el control de T. cruzi. 63 DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA GLICOSILADA EN MUESTRAS CON ESCASO VOLÚMEN. Mercedes Mazzola. Germán R Pérez. Mónica Torruella. Gammalab - Grupo Gamma. Rosario. INTRODUCCIÓN. La hemoglobina glicosilada (HbA1c) se forma por adición de azúcares al grupo amino N-terminal de la cadena β de la hemoglobina (Hb) y aumenta en relación a la concentración promedio de glucosa en sangre. Por ello, HbA1c se utiliza para control y seguimiento de pacientes diabéticos. Los equipos COBAS c311 y c501 cuantican simultáneamente las Hb y HbA1c, por un inmunoensayo turbidimétrico de inhibición para sangre entera (SE). En estas plataformas, el volumen de muestra es limitante lo cual conduce a la recitación del paciente para una nueva extracción de sangre. La dilución de la SE con solución siológica (SF) es una opción para aumentar el volumen inicial antes de su análisis y mantener la trazabilidad del paciente. OBJETIVO. Evaluar cómo las diluciones de las muestras afectan los valores de HbA1c. METODOLOGÍA. Se realizaron diluciones (SE:SF): D1 = 3:1, D2 = 1:1, D3 = 1:3. A la muestra sin diluir (D0) y a las diluciones se les dosaron HbA1c con A1C3 (Roche) en la plataforma COBAS c511. Los resultados se
analizaron mediante pruebas de múltiples rangos (diferencia mínima signicativa de Fisher). RESULTADOS. Se analizaron 49 muestras de pacientes ambulatorios con valores normales de Hb divididos en 3 grupos: G1 (HbA1c 4.5-6.5%): 19, G2 (HbA1c 6,68,4%): 15 y G3 (HbA1c > 8,4%): 15. En el grupo G1, la prueba de múltiples rangos estableció diferencia estadísticamente signicativa (nivel de conanza del 95%) entre las medias de HbA1c para los pares (diferencia ± CV) [D0/D1/D2 vs D3 (-1,61/-1,68/-1,91 ± 0,37)] y p<0,0001 de la prueba F entre grupos. No se encontró correlación para los pares: G2 [D0/D1/D2/D3 – p=0,45 de la prueba F entre grupos] y G3 [D0/D1/D2/D3 – p=0,92 de la prueba F entre grupos]. CONCLUSIÓN. Una dilución 1:3 afecta la cuanticación de HbA1c en muestras con rangos normales incluidos en G1. Se podría utilizar una dilución 3:1 como opción ante escasa muestra ya que no altera los valores en los tres grupos estudiados. 66 DETECCIÓN DE AC ANTI-BRUCELLA EN EL PERÍODO 2014 A 2017 EN MUESTRAS PROCESADAS EN EL LABORATORIO C.E.M.A.R. Eliana A Gribaudo 1. Stella M Acebal 1. Silvia A Calatayud 1. Eduardo Anchart 2. Gustavo Dip 3. 1 Laboratorio C.E.M.A.R., Dirección de Bioquímica, Municipalidad de Rosario. 2Ministerio de Salud, Provincia de Santa Fe. 3Dirección de Bioquímica, Municipalidad de Rosario. Epidemiológicamente, en regiones donde la brucelosis es endémica los individuos están constantemente expuestos al riesgo de infectarse con Brucella. Los anticuerpos (Ac) no sólo están presentes en el suero de enfermos agudos, crónicos o convalecientes, sino que también se pueden encontrar en individuos aparentemente sanos que han cursado infecciones subclínicas. El objetivo de este estudio es destacar la presencia de Ac. aBrucella tanto en muestras que ingresaron con síndrome febril (SF), como en aquellas que fueron pre-ingresos laborales, embarazadas, donantes o controles periódicos de salud. A todos los sueros se les realizó como prueba de
screening la técnica de Aglutinación (Agl) con antígeno tamponado (BPA), y los estudios complementarios: Agl en placa (Huddleson), Agl con Rosa de Bengala (RBT), Agl en tubo (Wright). A los ingresos que entraron como SF cuyas pruebas de screening fueron negativas, se les agregó Microaglutinación en portaobjeto (RSAT) para búsqueda de B. canis. Todas las muestras positivas fueron conrmadas por el Instituto Dr. Carlos Malbrán con: Wright con 2mercaptoetanol, Fijación del complemento, ELISA de competición y ELISA indirecto. En el año 2014 analizamos en total 1132 sueros, 58 ingresaron como SF, de los cuales 16 resultaron positivos (27,6%); de los 1074 restantes, 12 mostraron seropositividad (1,1%). En 2015 estudiamos 1002 sueros, fueron positivos 19 de los 61 SF (31,1%) y 17 de los 941 sin denuncia (SD) (1,8%). En 2016 analizamos 1139 muestras: 14 de los 47 con SF resultaron positivas (29,8%); y 11 de los 1092 SD fueron positivas (1,0%). En 2017 analizamos 1440 sueros: 9 de los 56 SF fueron positivos (16,1%) y 14 de los 1384 SD resultaron positivas (1.0%). Los resultados demuestran la importancia de trabajar con técnicas de alta sensibilidad aún en pacientes asintomáticos para evitar el sub-diagnóstico de una enfermedad que por su variedad de síntomas es difícil de identicar. 69 MARCADORES SEROLÓGICOS EN EL DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDAD CELÍACA. REVISIÓN DE CUMPLIMIENTO CON EL ÚLTIMO CONSENSO 2017 EN UN HOSPITAL MUNICIPAL DE BAHÍA BLANCA Mariana Lobo. Joel Marinovich. Laboratorio Central Hospital Municipal de Agudos Dr. Leónidas Lucero de Bahía Blanca Introducción: La Enfermedad Celíaca (EC) es una enteropatía crónica, de carácter autoinmune, que afecta al intestino delgado en niños y adultos genéticamente predispuestos. Existe una intolerancia permanente al gluten que provoca a partir de una respuesta inamatoria inadecuada una lesión de la mucosa del intestino delgado. En el año 2011 el Programa Nacional de Detección y Control de la 37
EC, publicó una Guía de Práctica Clínica sobre Diagnóstico de la EC en el Primer Nivel de Atención. En el año 2017 se república una actualización. Objetivos: Evaluar la combinación de pruebas serológicas recomendadas en el consenso del año 2017 para el diagnóstico de EC y el pedido de biopsia para su conrmación. Materiales y Métodos: Estudio retrospectivo de tipo transversal. Se estudiaron 281 pacientes con un rango de edad de 1 a 58 años. A todos se les realizó antitransglutaminasa IgA (a-tTG IgA), péptidos de gliadina deaminados IgG (a-DGP IgG) e IgA total sérica (IgA).Se realizó enzimoinmunoanálisis para a-tTG IgA y a-DGP IgG con reactivos marca DiaMetra en equipo DaVinci Quattro, la IgA total sérica (IgA) por Inmunodifusión Radial utilizando reactivos marca Diffuplate. Se evaluaron las historias clínicas (HC) de los pacientes con al menos uno de los marcadores positivos. Población: pacientes pediátricos y adultos atendidos en el Hospital Municipal Dr. Leónidas Lucero de Bahía Blanca entre enero y julio del año 2017. Resultados: 39 presentaron alguno de los marcadores serológicos positivos (a-tTG IgA o a-DGP IgG) con una frecuencia del 14%.La mediana de edad fue de 11 años. Ninguno presentó deciencia de IgA. De los 39 evaluados la combinación de a-tTG IgA/ DGP IgG detectó 80% de positivos y a-tTG IgA/ IgA el 20%.Se pudieron evaluar 19 historias clínicas, sólo 5 tuvieron conrmación por biopsia, el resto no la tenía indicada y constaba la indicación de dieta sin gluten. Conclusión: En nuestra experiencia la dupla a-tTG IgA / a-DGP IgG detectó mayor positividad. 72 CREATININA: COMPARACIÓN DE MÉTODO JAFFÉ CINÉTICO CON COMPENSACIÓN VS ENZIMÁTICO Luciano Soto. Gustavo Ariel Dip. Alejandra Lombardo. María Nuria La Hoz. Mariana Andrea Jubilla. Laboratorios Turner SRL. Rosario. INTRODUCCION: La creatinina es un analito importante como marcador de control y monitoreo en diferentes patologías renales. Dado que en el último tiempo se han incorporado nuevas técnicas en el mercado, es 38
necesario conocer si los resultados obtenidos en diferentes laboratorios clínicos con distintas metodologías de cuanticación, son comparables en sus resultados. OBJETIVO: comparar el método Jaffé cinético con compensación del blanco (Siemens, Alemania) (CREA_2) y Enzimático (Siemens, Alemania) (ECRE_2) en autoanalizador Advia 1800 ( S i e m e n s , A l e m a n i a ) . M AT E R I A L E S Y METODOS: Solución madre de 62,64 mg/dl resultante de un ltrado (Cell Strainer 70 um, FALCON), de pool de sueros enriquecido con creatinina droga sintética. Rango analítico establecido para el estudio: 0,10 a 25,00 mg/dl, se diseñaron 4 intervalos de ensayo: A: 0,00 a 6,25 mg/d; B: 6,25 a 12,25 mg/dl; C: 12,25 a 18,75 mg/dl y D: 18,75 a 25,00 mg/dl. Se procesaron controles comerciales (Lyphochek Assayed Chemistry Control, Bio-Rad) y 48 alícuotas que permanecieron freezadas a 70ºC hasta su medición. Se utilizó el protocolo de comparación de métodos descripto como CLSI EP9 con ETa < 8,92% (BV DESEABLE). RESULTADOS: Ecuación: ordenada al origen 0,2043; Pendiente: 1,158; R=0,9998. La estimación para la pendiente fue de (1.153 a 1.163) y para la ordenada (-0,2592 a -0.1494), con un nivel de conanza del 95%. CONCLUSIÓN: El error total obtenido fue para CREA_2 = 4,75 % y ECRE_2 = 3,45 %, siendo satisfactorios para cada método según el ETa elegido. Existen no obstante, diferencias sistemáticas y proporcionales entre los dos métodos que los hacen no comparables para todo el rango de medición propuesto. Los sigmas (s) de ambas técnicas son buenos, logrando ECRE_2 (s=6) un desempeño superior al encontrado en CREA_2 (s= 4). 74 D I S E Ñ O D E U N A H E R R A M I E N TA A UTILIZAR EN INVESTIGACIÓN SOBRE ENFERMEDAD RENAL CRÓNICA Y UROLITIASIS EN ESTUDIANTES DE SANTA FE: CUESTIONARIO DE HISTORIA CLÍNICA Y ACTIVIDAD FÍSICA. Cecilia Brisson 1. Verónica Fernández 1. María Silvina Sobrero 1. Verónica Cuestas 1. Priscila Prono Minella 1. Rosina Bonifacino Belzarena 1. María Eugenia Brisson 2. Susana Denner 1. Silvia Marsili 3. Vanesa Colussi 1. Jimena
Bartolome 1. Adriana Follonier 1. Nilda Marsili 1. Gilda Michlig 1. 1 Facultad de Bioquímica y Cs. Biológicas Universidad Nacional Del Litoral. 2Universidad Nacional De Lanús. 3Facultad de Ciencias Médicas. Universidad Nacional del Litoral. En la etiopatogenia de la Enfermedad Renal Crónica (ERC) y de la Urolitiasis (UL) inuyen factores familiares, ambientales y hábitos de vida, datos obtenibles por cuestionarios. La utilización de estas herramientas ha generado desafíos a dos proyectos de investigación de la Universidad Nacional del Litoral. Objetivos: a) diseñar un cuestionario de Datos generales (DG), Historia Clínica (HC) y Actividad Física (AF) y b) realizar y analizar prueba piloto para ajustes en problemas estructurales. Metodología: Estudio descriptivo, corte trasversal. Se elaboró un cuestionario (C) autoadministrado (basado en C de proyectos anteriores y en el Cuestionario Internacional de Actividad Física, IPAQ, corto) cuyas principales variables fueron: edad; sexo; antecedentes familiares y personales; factores de riesgo para ERC y UL y AF. El mismo fue elaborado y respondido por los investigadores y reevaluado por expertos. Con el C de 181 preguntas (P), 11 abiertas (PA), 33 cerradas (PC) y 137 semiabiertas (PSA) se realizó una prueba piloto. Entregado a 27 estudiantes previa rma de consentimiento informado. Resultados. Tasa de respuesta: 66,7 % (18 estudiantes). Edad: 23-30 años. Descarte: 1 C, incoherente. Ítems respondidos: entre 74-100%. 11% respondió incompletas P contingentes a una P ltro: 2 fueron reorganizadas para mejor visualización. 18% y 12% no sabe/está seguro del tiempo (t) de ejercicio moderado y caminata respectivamente: se aclaró criterio de aproximación y se solicitó t en min. 7P eliminadas: información obtenible en otra instancia, 1P reformulada: mejor comprensión, 1P agregada: cuestión emergente. C denitivo: 174 P, 11 PA, 30 PC y 133 PSA. Conclusiones: en la muestra analizada, la herramienta diseñada tiene validez de contenido para la recolección de datos para estudiar la ERC y la UL. Se destaca la importancia de probar herramientas validadas en otras poblaciones previo uso en una investigación clínica.
101 DETERMINACIONES COMPLEMENTARIAS PARA EL DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO DE ENFERMEDAD CELÍACA EN PACIENTES CON DÉFICIT DE INMUNOGLOBULINA A EN MUESTRAS RECIBIDAS DURANTE EL AÑO 2017 EN LABORATORIO C.E.M.A.R. Silvia A Calatayud 1. Stella M Acebal 1. Gustavo A Dip 2. Edgardo G Anchart 3. 1 Inmunoanálisis, Laboratorio C.E.M.A.R., Dirección de Bioquímica, Municipalidad de Rosario. 2 Dirección de Bioquímica, Municipalidad de Rosario. 3Ministerio de Salud, Provincia de Santa Fe El estudio para el diagnóstico inmunológico de Enfermedad Celíaca (EC) se realiza mediante el dosaje de anticuerpos IgA aTr a n s g l u t a m i n a s a ( T G A ) j u n t o c o n l a cuanticación de la inmunoglobulina A sérica total (IgA). Cuando existe una inmunodeciencia de IgA se recomienda utilizar otros marcadores serológicos. Para tal n en nuestro laboratorio realizamos la búsqueda de anticuerpos IgA-IgG a-péptidos desaminados sintéticos derivados de la gliadina (GD) y de anticuerpos IgG a-Transglutaminasa (TGG). El objetivo de este trabajo es evaluar si es necesario continuar realizando ambas determinaciones a n de mantener la sensibilidad en la búsqueda de posibles casos de EC. Se realizaron por técnicas de ELISA los 3 ensayos de búsqueda de anticuerpos en suero, y por inmunoturbi-dimetría, la cuanticación de IgA. Se analizaron 7266 muestras para TGA y un 11.5% (839/7266) presentaron décit de IgA. El 88.8% (745/839) de estos décit resultaron no reactivos para las 3 determinaciones, el 2,5% (21/839) presentaron TGA reactivas a pesar de la inmunodeciencia de IgA (18 resultaron reactivas para las 3 determinaciones y 3 solo para TGA y GD) y un 8.7% (73/839) mostraron al menos una de las 3 pruebas reactivas. Se obtuvieron 54 GD reactivas (10 coincidentes con TGG y 44 fueron solo reactivas para GD) y hubo 29 TGG reactivas (19 solo reactivas para TGG). En conclusión consideramos que si bien la determinación de GD detectaría un grupo más amplio de posibles casos de EC respecto
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al dosaje de TGG, serían necesarios realizar ambos marcadores para una evaluación más completa en los casos de inmunodeciencia de IgA. 102 MARCADORES SEROLÓGICOS PARA ENFERMEDAD CELÍACA SEGÚN SEXO Y EDAD Y BÚSQUEDA DE ANTICUERPOS APÉPTIDOS DESAMINADOS DE GLIADINA EN MENORES DE 2 AÑOS EN MUESTRAS RECIBIDAS EN EL C.E.M.A.R. EN EL 20 Silvia A Calatayud 1. Stella M Acebal 1. Gustavo A Dip 2. Edgardo G Anchart 3. 1 Inmunoanálisis, Laboratorio C.E.M.A.R., Dirección de Bioquímica, Municipalidad de Rosario. 2 Dirección de Bioquímica, Municipalidad de Rosario. 3Ministerio de Salud, Provincia de Santa Fe Ante la sospecha clínica de Enfermedad Celíaca (EC), se recomienda realizar el rastreo a través del marcador sérico (anticuerpos) IgA a-transglutaminasa (TGA) tisular humana junto con la cuanticación de la inmunoglobulina A sérica total (IgA). Según nuestro algoritmo de trabajo a las muestras TGA reactivas y a los pacientes menores de 2 años (debido a la baja sensibilidad que presenta la TGA en esta edad) se les agrega la búsqueda de anticuerpos IgAIgG a-péptidos desaminados sintéticos derivados de gliadina (GD). Los objetivos de este trabajo fueron (1) analizar los porcentajes de muestras reactivas para TGA según sexo y edad; (2) evaluar la utilidad de la búsqueda de GD en los pacientes menores de 2 años. Los dosajes de anticuerpos se realizaron en suero por técnicas de ELISA y la cuanticación de IgA por inmunoturbidimetría. Durante el año 2017 se analizaron 7266 muestras para TGA en el laboratorio C.E.M.A.R. El 67% (4883/7266) de ellas corresponden a mujeres siendo reactivas el 4.8% (234/4883). En hombres (2383/7266) el porcentaje de muestras reactivas baja a 2.4% (58/2383). Respecto a los grupos etarios 8% (600/7266) de los ingresos corresponden a menores de 2 años (G1); 36% (2625/7266) a niños entre 2 y 16 años (G2); 53% (3817/7266) a mayores de 16 años (G3) y un 3% (224/7266) no presentan datos de edad por lo cual no han 40
podido considerarse en ninguno de los grupos anteriores. El 15% (90/600) de las muestras del G1 presentaron GD reactivas. Solamente el 0.7% (4/600) coincidentes con TGA. Descontando los casos con décit de IgA y los que se presentaron en más de una oportunidad, un 12% (71/600) fueron reactivas solamente para GD. Concluimos (1) que el porcentaje de sospecha de EC es mayor en mujeres como así también el porcentaje de muestras reactivas. (2)Por otro lado, queda demostrada la menor sensibilidad de TGA en menores de 2 años y el aporte importante que signica la realización de GD en este grupo etario, ya que constituyen posibles hallazgos de EC. 104 HÁBITO ALIMENTARIO COMO FACTOR DE RIESGO DE UROLITIÁSIS Y ENFERMEDAD R E N A L C R Ó N I C A : E VA L U A C I Ó N D E INSTRUMENTOS PARA EL REGISTRO DE L A A L I M E N TA C I Ó N D E A L U M N O S UNIVERSITARIOS. PRE-TEST. PRIMERA PARTE. Verónica Fernández1. Cecilia Bressón1. María Cecilia Sobrero1. Verónica Cuestas1. Priscila Prono Minella1. Rosina Bonifacino Belzarena1. Jimena Bartolomé 1. María Eugenia Brissón 2. Nidia Marsili1. Gilda Michlig1. Adriana Folonier1. Susana Denner 1 . Vanesa Colussi 1 . Silvia Marsili3. 1 Fac. Bioquímica y Cs. Biológicas. Universidad Nacional del Litoral. 2Universidad Nacional de Lanús. 3Facultad de Ciencias Médicas. Universidad Nacional del Litoral. Uno de los factores etiológicos de la urolitiasis (UL) y de riesgo de enfermedad renal crónica (ERC) es la alimentación. Estudios en alumnos de bioquímica de la Universidad Nacional del Litoral (UNL), sanos, sin antecedentes, hallaron riesgo aumentado para UL: 54%, y 13% de ERC. Se analizó la orina de 24h, que se correlaciona con la ingesta del día y también es relevante el impacto de la ingesta durante varios días. Objetivos: 1.Elaborar instrumentos de registro de la alimentación. 2. Aplicar el pretest. 3. Identicar problemas estructurales del instrumento. Se elaboró un registro diario (24h) de alimentos (RDA), y un registro semanal (5
días) de alimentos (RSA). Autoadministrados, cuantitativos, cuatro comidas básicas y colaciones. Variables: ingesta (I), tamaño de la medida (T), número de porciones (NP) y, en el RDA, forma de cocción (C). RDA: 349 preguntas (P): 195 cerradas (PC), 153 semiabiertas (PSA), 1 abierta (PA). RSA: 745 P, 345 PC, 375 PSA, 25 PA. Muestra del pretest: alumnos de Bioquímica de la UNL, previa rma de consentimiento informado. Los investigadores respondieron las encuestas, se evaluó la comprensión de las preguntas, las consignas, la facilidad de respuesta, realizando modicaciones. En un taller se entregaron los instrumentos con el modelo de porciones caseras a 27 alumnos. Estudio descriptivo, corte trasversal. Encuestas respondidas: 18, tasa de respuesta: 66,7%. Las respuestas de un alumno fueron descartadas por incoherencias. La tasa de respuesta correctas (TRC) para RDA, I: 98,6%/T: 96,1%/NP: 99,2%/C: 48,3%. Para RSA, I: 96,9%/T: 91,1%/P: 98,2%. No hubo diferencias signicativas (p>0,05) entre RDA y RSA para las variables I, T, NP. La TRC para RDA, variable C: 48,3%. La TRC en las PSA: RDA 83,7% y RSA 79,3%. Conclusión: De acuerdo a las TRC de las PSA y C, se cambió la formulación de las preguntas. Estructuralmente los RDA y RSA elaborados son equivalentes. El estudio se continúa con la validación y evaluación de la equivalencia nutricional.
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TRABAJOS CIENTÍFICOS XVIII JORNADAS ARGENTINAS DE MICROBIOLOGÍA COMUNICACIONES ORALES Viernes 8 de junio de 2018 (10:30 – 12:30 hs) Coordinadores: Patricia Marchiaro y Guillermo Repizo 20 AÑOS DE EXPERIENCIA DE UN INSTITUTO DE BUENOS AIRES EN LA INFECCIÓN POR EL VIRUS LINFOTRÓPICO T HUMANO TIPO 1 Y 2 (HTLV-1/2). Benencio P, Ducasa N, Berini CA, Biglione M. INBIRS, Facultad de Medicina, UBA. Introducción. En Argentina, el HTLV-1 es endémico en el Noroeste al igual que sus patologías, la Leucemia/Linfoma a Células T del Adulto (ATLL) y la Paraparesia Espástica Tropical (PET), que se desarrollan en 5% de los infectados. El HTLV-2 lo es en la región Chaqueña. El tamizaje es obligatorio en donantes de sangre desde 2005. El objetivo fue realizar un estudio retrospectivo de todas las muestras procesadas para diagnóstico de HTLV-1/2 por el grupo HTLV entre enero 1997 y diciembre 2017. El diagnóstico se realizó con aglutinación de partículas (Serodia, Fujirebio), ELISAs, Western blot MP2.4 (Genelabs) y nPCR desde el 2003. Resultados. De los 2700 casos analizados, que se distribuyeron anualmente de manera constante, 1867 (69%) provenían de bancos de sangre con un tamizaje previo reactivo. De un total de 946 casos reactivos en nuestro instituto, 723 (76%) resultaron positivos (519 HTLV-1, 171 HTLV-2, 27 HTLV sin tipicar, 6 con co-infecciones HTLV-1/2) y 367 (13%) resultaron indeterminadas por Western blot (WB). De los casos indeterminados con material (n=66) se conrmaron 2 HTLV-1, 1 HTLV-2 y el resto resultó negativo. De un total de 255 diagnósticos presuntivos de enfermedad se conrmaron 25 ATLL y 39 PET; 38 derivados de servicios hospitalarios de CABA, 18 del Gran Buenos Aires, Santa Fe, Tucumán, Rio Negro y 2 de Paraguay y 6 de Perú. Ambos virus, el TLV1 y 2, circulan en todas las regiones de 42
Argentina. Se evidencia que aunque se utilicen equipos serológicos de alta eciencia, el diagnóstico molecular es una herramienta indispensable. Sería importante capacitar profesionales para un asesoramiento adecuado e implementar centros referentes con herramientas diagnósticas y un algoritmo óptimo para brindar un resultado denitivo. En conclusión, la inclusión de estos retrovirus en un Programa Nacional, con el n de prevenir la transmisión vertical y sexual, permitiría reducir signicativamente la tasa de infección de HTLV1/2 en nuestro país. 19 EFECTO EN LA EXPRESIÓN DE DETERMINANTES DE VIRULENCIA EN Escherichia coli SHIGATOXIGÉNICAS POR HIDRÓXIDO DE BISMUTO COLOIDAL. Subils T1, Casabonne C1, González A1, Aquili V1, Balagué C1. 1 Área Bacteriología, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas de la Universidad Nacional de Rosario. Escherichia coli Shigatoxigénica (STEC) es un patógeno gastrointestinal emergente, principal responsable del Síndrome Urémico Hemolítico. La expresión de determinantes de virulencia como adhesinas, mbrias y toxinas puede ser modicada por diferentes compuestos químicos, antimicrobianos y otros fármacos. El objetivo de este trabajo fue determinar si la crema hidróxido de bismuto coloidal comercial (CB) usado como antidiarreico, pueden reducir la patogenicidad de STEC al reducir la expresión de mbrias y adhesinas que median la adherencia permitiendo la colonización e infección del tracto gastrointestinal. Se estudiaron 10 aislamientos de STEC de origen fecal y alimentos y como controles STEC ATCC 43895 y Salmonella spp. Se trabajó con la CB, su principio activo el hidróxido de bismuto coloidal (HB) y los excipientes (E) a concentraciones de ¼ de la CIM de los distintos
compuestos. La presencia de mbrias y adhesinas se evidenció mediante reacciones de hemoaglutinación e hidrofobicidad supercial, la cual se ensayó mediante los métodos de salting out con diluciones seriadas de una solución de (NH4)2SO4 y “Partición por solvente” midiendo OD a 600 nm antes y después del tratamiento con xileno de los cultivos. Para la expresión de la mbrias se tomaron 2 cepas representativas, una stx1 (+) y una stx2 (+). La expresión mbrial se cuanticó por PCR en tiempo real de los genes mH y eaeA en presencia y ausencia de los compuestos de bismuto. Se utilizó el método 2∆∆Ct para la cuanticación génica relativa respecto a gapdh. Se evidenció que el CB y HB a la concentración ensayada suprimen la hemoaglutinación en las cepas estudiadas y disminuyen la hidrofobicidad supercial. Además, se observó una disminución signicativa (p<0.01) en la expresión génica de mH y eaeA respecto de las cepas sin inducir. Dichos resultados proponen a CB como un posible reductor de la expresión mbrial y de adhesión necesarias en los primeros eventos del proceso infeccioso de STEC. 40 APLICACIÓN DE LA REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA EN TIEMPO REAL (qPCR) PARA LA VIGILANCIA AMBIENTAL DE Legionella pneumophila. Merino LA1, Losch LS1, Deluca GD1, Medina MG1. 1 Facultad de Medicina (UNNE), Corrientes, Instituto de Medicina Regional (UNNE), Resistencia, Argentina. Legionella spp es un patógeno de transmisión hídrica y su detección por distintos métodos es la principal herramienta en la vigilancia y monitoreo ambiental, siendo el cultivo la técnica de referencia. Sin embargo, la qPCR es un método de reconocida sensibilidad y especicidad, que permitiría instaurar acciones correctivas hacia la fuente ambiental contaminada, de manera más ágil. El objetivo fue la detección de material genómico de L. pneumophila en muestras de agua de depósitos domiciliarios utilizando qPCR. El material de muestra consistió en un litro de
agua colectada en botella estéril desde algún grifo de la vivienda, conectado al depósito permanente. Previo al procesamiento, las muestras de agua fueron concentradas por ltración con membranas de 0,45 µm. Cada membrana fue transferida a 10 ml de buffer Ringer 1/40 y fue agitada durante 2 minutos con vortex. Alícuotas de 0,5 mL se sometieron a tratamiento térmico de 100°C durante 10 minutos. A partir de estas alícuotas se realizó un protocolo de qPCR con colorante intercalante (SybrGreen). Las secuencias diana utilizadas para la identicación de Legionella correspondieron a fragmentos conservados del gen 23S rRNA para la conrmación del género, y el gen mip especíco para la especie L. pneumophila para identicación de especie. Cada muestra fue además procesada por cultivo según la norma ISO 11731:1998. Se estudiaron 40 muestras de agua. La aplicación directa de la qPCR en los concentrados de las muestras arrojó resultados negativos sobre todas ellas. Sin embargo, 15 (37,5%) resultaron positivas por cultivo para el género Legionella y en 14 de éstas 15, L. pneumophila se conrmó por qPCR utilizando los mismos cebadores. La presencia de inhibidores en las muestras ambientales puede llevar a un resultado falso negativo en las técnicas moleculares. La estandarización y validación de nuevas técnicas para el monitoreo de patógenos en agua requieren estudios con series más amplias y procesos más rigurosos.
53 EL SISTEMA DE RECOMBINACIÓN SITIOESPECÍFICO XerC/D DE Acinetobacter baumannii PROMUEVE LA PLASTICIDAD DE PLÁSMIDOS PORTADORES DE PLATAFORMAS DE RESISTENCIA A CARBAPENEMES MEDIADA POR blaoxa-58. Cameranesi MM1, Repizo GD1, Morán-Barrio J1, Limansky AS1, Viale, AM1. 1 Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario (IBR, CONICET), Depto. Microbiología, FCByF, UNR, Argentina. Plásmidos de Acinetobacter baumannii (Aba) constituyen elementos genéticos móviles (EGM) relevantes en la diseminación de determnantes de resistencia (R) a antibióticos. Se ha 43
reportado que módulos plasmídicos discretos que contienen genes blaOXA son anqueados por sitios reconocidos por recombinasas XerC/XerD, y que su adquisición estaría mediada por eventos de recombinación sitioespecíca (RSE). El objetivo fue analizar la evolución de EGM portadores de blaOXA-58 en cepas clínicas multirresistentes de Aba, con énfasis en la participación de la RSE en la diseminación de R. Para ello, se emplearon como modelo de estudio plásmidos presentes en cepas locales. La estructura de los plásmidos de Ab825, secuenciados y ensamblados in silico, fue corroborada experimentalmente. Identicamos pAb825_12 y pAb825_36, siendo pAb825_12 idéntico a pAb242_12 presente en la cepa relacionada clonalmente Ab242. Determinamos que pAb825_36 es un co-integrado formado por fusión de plásmidos homólogos a los de Ab242 mediante RSE que involucra 2 sitios activos XerC/D. pAb825_36 contiene un módulo de adaptabilidad portador de determinantes de R a carbapenemes y aminoglucósidos, anqueado por sitios XerC/D, y en orientación opuesta al reportado en pAb242_25; indicando un evento de inversión XerC/D-dependiente. La diseminación de la R fue evaluada mediante transformación de A. nosocomialis M2 con plásmidos de Ab825. Las transformantes contienen al co-integrado pAb825_39, resultante de la fusión de pAb825_12 y de pAb825_27, no detectado por pirosecuenciación. pAb825_39 se conforma por RSE mediada por sitios XerC/D activos, y los sitios resultantes permiten luego su resolución en M2. Así, mecanismos de RSE mediados por sitios XerC/D activos se hallan involucrados en la formación de co-integrados plasmídicos, como en la inversión de módulos de R. Esto aporta evidencias de los mecanismos de plasticidad genética que modulan la evolución plasmídica y la diseminación de la R a antimicrobianos. 58 PRIMER AISLAMIENTO REPORTADO DE Candida ciferrii EN UN PACIENTE FIBROQUÍSTICO. Funes PB1, Valles J1, Díaz MS1, Bletler C1, Borgo M1, Acardi HH1, Mari R1, Martinich C1, 44
Hourquescos MC1, Romero MM1, Amigot SL1, Anchart E2, Dip G2, Badano A3, Gallardo L3, Ernst AM3. 1 Centro de Especialidades Médicas Ambulatorias de Rosario, 2 Dirección de Bioquímica de Rosario, Secretaría de Salud Pública de la Municipalidad de Rosario, 3 Hospital de Niños Víctor J. Vilela, Rosario. Candida ciferrii es una levadura aislada ocasionalmente en humanos, caracterizada por poder presentar una elevada tasa de resistencia a uconazol. Reportamos su hallazgo en una paciente inmunocomprometida. Paciente de 17 años de edad, broquística (FQ) con diabetes asociada a Fibrosis Quística y que presenta un cuadro de cirrosis e hipertensión portal. Es internada por exacerbación de su cuadro respiratorio en Hospital de Niños V.J. Vilela. En Micología CEMAR, recibimos cepas de levaduras aisladas de dos hemocultivos y punta de catéter y 4 muestras de esputo para procesar. Las cepas se sembraron en medio CHROMagar Candida (CHR), se identicaron mediante espectrometría de masas (MALDITOF) y se estudió la sensibilidad por VITEK-2C (bioMérieux). Los esputos se procesaron según protocolos y las colonias levaduriformes obtenidas fueron aisladas en medio CHR e identicadas por MALDI-TOF. En hemocultivos y punta de catéter, las cepas se identicaron como Candida dubliniensis y fueron sensibles a los antifúngicos probados. En los esputos, se obtuvieron tres colonias: C. dubliniensis, Candida tropicalis y una tercera, color blanco en CHR, que no pudo ser identicada por MALDI-TOF ni VITEK. La colonia blanca se reaisló e identicó como C. ciferrii por BD Phoenix (Bencton Dickinson). El estudio de sensibilidad antifúngica, mediante Sensititre YeastOne (TREK Diagnostic Systems Ltd.), reveló las concentraciones inhibitorias mínimas: Anfotericina B: 0.5 mg/l, Fluconazol (FLZ): 128 mg/l, Itraconazol: 16 mg/l, Voriconazol: 2 mg/l, Micafungina: 0.06 mg/l, Anidulafungina: 0.25 mg/l, Caspofungina: 0.12 mg/l. El interés del caso reside en el hallazgo de C. ciferrii, especialmente en esputos de una paciente FQ, la peculiaridad de esta especie de mostrar resistencia al FLZ y la dicultad para la identicación en laboratorios de menor
complejidad. Su aislamiento en un paciente inmunocomprometido debe ser jerarquizado teniendo en cuenta la posibilidad de una diseminación sistémica.
96 EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD DE FORMAR BIOFILMS Y DE LA RESISTENCIA A LA DESECACIÓN DE AISLAMIENTOS A M B I E N TA L E S D E A c i n e t o b a c t e r baumannii RESISTENTES A CARBAPENEMES. Friedman L1, Liberatti C2, Rodriguez CH3, Foccoli M4, Capdevila AA5, Irrazabal CL5, Muñoz JA1, Alcaraz E1, Vay C3, Famiglietti A3, Passerini de Rossi B1. 1 Cátedra de Microbiología, 2 Carrera de Especialización en Esterilización, 3Laboratorio de Bacteriología Clínica, Departamento de Bioquímica Clínica, Facultad de Farmacia y Bioquímica 4División de Infectología, 5División de Terapia Intensiva, Hospital de Clínicas José de San Martin, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires. Acinetobacter baumannii (AB) es un patógeno oportunista multiresistente asociado a infecciones nosocomiales que se aísla del entorno de los pacientes en las UTIs. Su capacidad de formar biolms y sobrevivir en condiciones de desecación le permite persistir en el ambiente hospitalario. Nuestros objetivos fueron: evaluar la presencia de AB en el entorno de los pacientes de UTI en un hospital universitario y caracterizar los aislamientos respecto a su capacidad de formar biolms y sobrevivir a la desecación. Las muestras ambientales se tomaron con hisopos que se incubaron en caldo LB y fueron subcultivados en medio Leeds con vancomicina y ceftriaxona. Se tomaron 51 muestras de camillas y equipos de UTI, de las cuales se recuperaron 23 aislamientos de AB (identicados por espectrometría de masa, MALDI-TOF) resistentes a imipemen y meropenem (ensayo de susceptibilidad por difusión, según CLSI), 5 de ellos fueron obtenidos después de la desinfección terminal. Se incluyeron 3 aislamientos clínicos contemporáneos de la UTI. La genotipicación por REP-PCR reveló 7
perles. Los más frecuentes fueron el 5 (11 aislamientos ambientales y 2 clínicos), el perl 2 (3 ambientales y 1 clínico) y el 6 (4 ambientales). Los 26 aislamientos formaron biolms en el ensayo en microplacas. Se seleccionó un aislamiento ambiental de cada genotipo predominante para el ensayo de sobrevida a la desecación; se inocularon cubreobjetos con 108 UFC y se conservaron con una HR del 20%. Se evaluó el número de UFC a las 24 y 120 h. En todos los casos fue posible recuperar microorganismos viables a las 120 h y el aislamiento del perl 5 mostró mayor resistencia a la desecación. Estos resultados conrman la relevancia de la capacidad de formar biolms y de sobrevivir a la desecación en la persistencia de AB en el ambiente en áreas críticas. Actualmente la Institución ha implementado una extensiva revisión de las prácticas de desinfección en el marco de su plan de control de infecciones.
EXPOSICIÓN DE POSTER Jueves 7 de junio de 2018 (14:00 – 16:00 hs)
BACTERIOLOGÍA 4 Arcanobacterium haemolyticum: ¿LO TENEMOS PRESENTE A LA HORA DE BUSCAR EL AGENTE CAUSAL DE FARINGITIS /ESCARLATINA? REPORTE DE CASO EN HOSPITAL PÚBLICO DE LA CIUDAD DE ROSARIO. Arciero G1, Conforti C1, Di Cosco A1, Díaz MS1, Di Santolo A1, Alvarez G1, Díaz C1, Guenzelovich G2, Valles J3,Dip G4, Anchart E5. 1 Servicio de Microbiología Hospital Roque Sáenz Peña, Dirección de Bioquímica, Municipalidad de Rosario, 2Laboratorio Hospital Roque Sáenz Peña, Dirección de Bioquímica, Municipalidad de Rosario, 3 Servicio de Microbiología CEMAR, Red MALDI Tof, Dirección de Bioquímica, Municipalidad de Rosario, Rosario, 4Dirección de Bioquímica, Municipalidad de Rosario, 5Dirección Provincial de Redes de Laboratorios, Dirección Provincial 45
de Promoción y Prevención de la Salud, Ministerio de Salud de Santa Fe, Santa Fe. Arcanobacterium haemolyticum (A.h.) es un bacilo Gram positivo corineforme, causante de faringitis exudativa, similar a la faringitis estreptocócica. Puede presentarse con rash escarlatiniforme, o asociarse a sinusitis, celulitis y sepsis. Suele darse en adolescentes y adultos jóvenes. No requiere procesamiento especial de la muestra, aunque necesita mayor tiempo de incubación, y la expresión de su hemolisina se ve favorecida en medio de agar sangre humana o de conejo. Caso clínico: paciente de 6 años de edad, con ebre de 48 hs de evolución y rash en todo el cuerpo y extremidades, áspero, similar al de la escarlatina. Faringe congestiva, de la que se envía muestra a cultivo a este laboratorio, y se trata con amoxicilina. Diagnóstico presuntivo: escarlatina. La muestra se siembra en agar sangre de carnero, y a las 48 hs se ven colonias muy pequeñas, con una beta hemólisis muy débil. La identicación se realiza por espectrometría de masas (MALDI-TOF), tipicándose como A.h., con score mayor a 2. Se prueba sensibilidad a penicilina y vancomicina (e-test). A partir de este caso, nos preguntamos si es recomendable buscar de rutina este microorganismo en exudados faríngeos. Su incidencia es muy baja (0,2 a 2,5 %), y la mayor cantidad de aislamientos están en la franja etárea de 15 a 25 años. Su búsqueda es importante en cuanto al tratamiento, ya que A.h. es sensible a penicilina, pero este antibiótico suele fallar debido a la localización intracelular del mismo. Tratamiento de elección: macrólidos. Reforzar la búsqueda de A. h. en muestras faríngeas de adolescentes y adultos jóvenes, y en niños con diagnóstico presuntivo de escarlatina, para poder instaurar el tratamiento correcto. En los casos de faringitis a repetición, o en los que hay falla de tratamiento con beta-lactámicos, se debería agregar una placa de agar sangre humana además del agar sangre de carnero utilizado habitualmente en estas muestras, para no perder de vista a este patógeno.
30 INFECCIONES URINARIAS POR Streptococcus agalactiae y Staphylococcus saprophyticus EN MUJERES EMBARAZADAS Y NO EMBARAZADAS. Guzzetti P1, Lopardo H1, Coria M1, Suarez M1, Vigliarolo L1, Viegas Caetano J1. 1 Facultad de Ciencias Exactas, UNLP, La Plata. Distintos autores dieren en la mayor o menor prevalencia de las infecciones urinarias (IU) por Streptococcus agalactiae y Staphylococcus saprophyticus en mujeres embarazadas (ME) y no embarazadas (NE). Se realizó un estudio retrospectivo, comparativo, de cohortes con el objetivo de evaluar la frecuencia de IU por S. agalactiae y S. saprophyticus en ME asintomáticas pertenecientes a centros de atención primaria de la salud del Municipio de La Plata (CAPS) entre 2008 y 2016 y compararla con la de NE sintomáticas en edad fértil, no internadas, que asistieron al Hospital “San Roque” (HSR) entre 2014 y 2017. Se procesaron 2.378 orinas de ME que concurrieron a las CAPS. De ese total, 201 fueron positivas (8,5%), el 10,4% de las mismas (n: 21) correspondieron a S. agalactiae y el 10% a S. saprophyticus (n: 20). En el 54% se aisló Escherichia coli. El total de urocultivos en la población de NE fue de 2.281 y 526 fueron positivos (23,1%): 7 correspondieron a S. agalactiae (1,3%), 18 a S. saprophyticus (3,4%) y el 78% a E. coli. En conclusión, la frecuencia d e a i sl a mi e n to d e S. a g a l a cti a e y S. saprophyticus fue signicativamente mayor en la población de ME pertenecientes a las CAPS respecto de las NE estudiadas en el HSR. 32 MICROORGANISMOS MÁS FRECUENTES EN MUESTRAS RESPIRATORIAS DE PACIENTES PEDIÁTRICOS CON FIBROSIS QUÍSTICA Y SU DISTRIBUCIÓN POR EDADES. Boretto L, Zurbriggen M, Blesa M, Aro C, Degiovanni G, Baroni M. Hospital de Niños Dr. O. Alassia, Santa Fe. La brosis quística (FQ) se dene como la enfermedad autosómica recesiva crónica de
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manifestación multisistémica más común en la población caucásica. En el aparato respiratorio produce secreciones extremadamente viscosas que obstruyen las vías aéreas, predisponen a la infección y al deterioro pulmonar; siendo la enfermedad broncopulmonar la principal causa de muerte de estos pacientes. El objetivo del presente trabajo fue investigar los micro-organismos más frecuentemente aislados, su perl de sensibilidad a los antimicrobianos y su distribución por edades. Estudio retrospectivodescriptivo. Se estudiaron muestras respiratorias de 76 pacientes pediátricos con diagnóstico de FQ entre Enero de 2012 y Diciembre de 2014. El procesamiento de muestras respiratorias de pacientes con FQ esta protocolizado en el Laboratorio de Bacteriología del Hospital de Niños Orlando Alassia para la búsqueda de los principales agentes bacterianos. Se aisló Staphylococcus aureus (Sa) en el 91 % de los pacientes, Pseudomonas aeruginosa (Pa) en el 54 %, Haemophilus inuenzae (Hi) en el 53 % y el Complejo Burkholderia cepacia en el 7 %. En 8/76 pacientes nunca se aislaron microorganismos implicados en la colonizacióninfección broncopulmonar. El 65 % de Sa fue sensible a la meticilina. El 30 % de Hi fue resistente a la ampicilina por producción de beta-lactamasa. El 78% de los aislamientos de Pa fueron sensibles a todos los antibióticos. En todos los grupos etarios estudiados Sa fue el microorganismo predominante, seguido de Hi y Pa, excepto en los grupos de 5 a 9 años y de 15 a 18 años donde Pa ocupó el segundo lugar en importancia. Para evitar exacerbaciones e infecciones crónicas que alteren la estructura y funcionalidad pulmonar es fundamental mantener una vigilancia microbiológica de las vías aéreas para así mejorar la calidad de vida de estos pacientes y aumentar su supervivencia. 37 LISTERIOSIS MATERNO NEONATAL: COMUNICACIÓN DE DOS CASOS EN UNA MATERNIDAD. Fernandez C 1 , Sienko G 1 , Franco M 1 , Ramacciotti S1, Prieto M2, Cannistraci Giolito R1
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Hospital Materno Provincial "Dr. Raul F. Lucini", Instituto Dr. Carlos Malbrán, Buenos Aires, Argentina. 2
Listeria monocytogenes (Lm) es un bacilo gram positivo intracelular, móvil, ampliamente distribuido en la naturaleza. Suele afectar a recién nacidos (RN), embarazadas, ancianos y pacientes inmunodeprimidos. En los adultos la infección se adquiere mediante la ingestión de alimentos contaminados. Por su habilidad para cruzar barreras biológicas: intestinal, hematoencefálica y placentaria, puede causar aborto, septicemia o infección del sistema nervioso central tanto en adultos y neonatos. La enfermedad en el RN puede ser de comienzo temprano, de transmisión vertical o de comienzo tardío, a partir de los 5 días de vida, resultado de una transmisión vertical u horizontal por contacto con la madre durante el periparto o transmisión nosocomial indirecta secundaria a casos de listeriosis temprana a través de personas o equipo hospitalario. El objetivo de nuestro trabajo es comunicar dos casos de enfermedad neonatal por Lm ocurridos en un breve lapso en una maternidad. Caso 1: RN de 39 semanas de gestación, nacido de madre de 19 años, embarazo controlado sin antecedentes patológicos de interés. Deprimido al nacer con un cuadro de síndrome de distress respiratorio, hipertensión pulmonar, neumotórax y un cuadro de sepsis clínica. El hemocultivo (HC) recogido al nacer desarrolló Lm. Se trató con ampicilina y gentamicina. A las 72 hs se tomó nuevo HC el cual resultó negativo para Lm; sin embargo desarrolló Klebsiella pneumoniae productora de beta-lactamasa de espectro extendido, interpretándose como sepsis hospitalaria por lo cual se agregó meropenem. A los 16 días de vida se tomó un tercer HC, resultado negativo. Fallece dos días después por falla multiorgánica secundaria al shock séptico. Caso 2: RN de 38 semanas de gestación, nace dos días después del nacimiento del caso 1. Madre de 19 años internada un mes antes con diagnóstico prenatal de malformación fetal incompatible con la vida. Neonato deprimido al nacer, Apgar 5/6. Se toma HC al nacer sin antibióticos, resultado negativo. A los 5 días frente a un cuadro clínico de sepsis se toma nuevo HC. Fallece a las 47
pocas horas por shock séptico. En el HC desarrolló Lm. Los aislamientos fueron conrmados en Instituto Malbrán como L.m serogrupo 4b. La subtipicación fue realizada por macrorestricción de ADN y PFGE presentando pulsotipos indistinguibles. El caso 1 corresponde a una listeriosis neonatal temprana de transmisión vertical; además quedó demostrada la transmisión nosocomial del segundo caso. Es necesario resaltar la importancia que tienen las recomendaciones de higiene, conservación y cocción de alimentos ingeridos durante el embarazo, así mismo como la rápida detección y control de la transmisión hospitalaria como se logró hacer en esta circunstancia no habiéndose detectado ningún otro aislamiento de Lm. 99 PREVALENCIA DE Staphylococcus aureus PRODUCTORES DE LEUCOCIDINA DE PANTON-VALENTINE (LPV) EN CEPAS INTRA Y EXTRAHOSPITALARIAS EN DOS HOSPITALES PÚBLICOS DE ROSARIO. Ballerini V1, Diaz S2, Kozicki G1, Posella N1, Arguello J1 1 Hospital Carrasco. Municipalidad de Rosario, 2 Maternidad Martin, Municipalidad de Rosario, Rosario. Staphylococcus aureus meticilino resistente (SAMR) contiene el gen mec y múltiples elementos genéticos móviles de localización cromosómica que codican diferentes factores de patogenicidad. Entre ellos, la LPV, citotoxina que actúa sobre leucocitos induciendo necrosis tisular con aumento de permeabilidad y agresividad. Es codicada por dos genes que se co-transcriben. Está presente en SAMR hospitalarios y en prácticamente todos los SAMR de la comunidad. Objetivos: I) Determinar la prevalencia de SA LPV positivo (+), II) analizar las resistencias acompañantes (Ra) y III) evaluar tratamiento empírico. Se estudiaron 104 aislamientos de SA correspondientes a 2 hospitales públicos de Rosario en el periodo 01/10/2017 a 31/03/2018. 88 provenientes de heridas y partes blandas y el resto provenientes de materiales varios. La identicación bacteriana se realizó por MALDI48
TOF y las pruebas de Sensibilidad por VITEK 2. La identicación del gen codicante de LPV (lpv) se realizó por PCR. Todos los aislamientos resultaron sensibles (S) a teicoplanina, vancomicina, minociclina, tetraciclina, rifampicina y trimetoprima sulfametoxasol (Tms). 80/104 aislamientos de SA (77%) fueron MR y 24/104 (23%) meticilino sensible (MS). 72/80 SAMR resultaron PVL+ (90%). 67% de los SAMR LPV+ no presentó Ra, 15% fue R a gentamicina (Gen), 4% presentó fenotipo MLSc, 7% fenotipo MLSi, 3% MLSc+R a Gen y 4% R a ciprooxacina. Dentro de los 24 MS hubo 2 LPV+, uno sin Ra y el otro con R a Gen. Los resultados muestran que LPV está presente en la mayoría de SAMR. La presencia de LPV en SAMS sugiere diseminación de lvp por transferencia horizontal. El uso empírico de clindamicina, obliga a vericar presencia MLSc y MLSi. Potenciar el uso de Tms como tratamiento empírico. La R a Gen es una de las principales Ra. Tomar medidas estrictas de control de colonización para evitar la diseminación de cepas más virulentas y con otras Ra, resultantes de los intercambios genéticos dentro del ámbito hospitalario. 8 Aggregatibacter aphrophilus COMO AGENTE CAUSAL DE ABSCESO CEREBRAL. Ferrand C1, Misto C1, Morettin A1, Arias M1, Constantini M2, Peyronel E1, Fay F1 1 Laboratorio CIBIC, Rosario, 2 Sanatorio Parque, Rosario, Argentina. Aggregatibacter aphrophilus es un cocobacilo gram negativo de crecimiento lento que pertenece al grupo de bacterias HACEK y origina abscesos hepáticos, infecciones de hueso y articulaciones, endolftalmitis, meningitis, celulitis y pericarditis y raros casos de abscesos cerebrales. Presentamos el caso de un absceso cerebral causado por A. aphrophillus: Mujer de 22 años, ingresa a la guardia de la institución por cefalea holocraneana y trastornos visuales de más de una semana de evolución. Sin otros síntomas acompañantes. No reere tomar medicación habitual. La paciente se encontraba con signos vitales estables. Al ingreso se realizaron
estudios de laboratorio que arrojaron valores normales. Se realizó resonancia magnética de cráneo con gadolinio. Se diagnostica lesión abscedada cerebral, por lo cual se realiza drenaje quirúrgico de dicho absceso y comienza en forma empírica tratamiento antibiótico con ceftazidima. En el cultivo del absceso en agar sangre de carnero se obtiene desarrollo a las 48 hs de Aggregatibacter aphrophillus, identicado en equipo Vitek 2 Compact (98%). El aislamiento resultó sensible a cefotaxima, amikacina, ciprooxacina y resistente a meropenem, por lo que la paciente comienza tratamiento dirigido ciprooxacina+amikacina. Recibe el alta sanatorial luego de 14 días de internación, con evolución favorable, continuando con antibióticos vía oral y control con Neurocirugía e Infectología. El absceso cerebral se dene como una colección de pus en el parénquima cerebral. Representa una de las enfermedades más serias del sistema nervioso central, ya que su mortalidad se encuentra en alrededor de un 20%, si bien ha disminuido en las últimas décadas gracias al advenimiento de la tomografía computada que permite un diagnóstico y tratamiento oportunos. La evolución fue favorable por la extirpación del mismo, lo que facilitó la ecacia del tratamiento antibiótico dirigido al agente bacteriano identicado rápidamente. 46 Dermabacter hominis EN UN PACIENTE INMUNOCOMPETENTE: UN CASO PARA NO HACER OÍDO SORDO. Margenet L1, Mendosa M1, Duarte M2, Mollerach A1, Nardín M1, Manias V1, Morano S1, Cristobal S1, Ramos C1, Nagel A1. 1 Mircobiología, Laboratorio Central, Hospital J.M. Cullen, Santa Fe, 2Clínica Médica, Hospital J.M. Cullen. Santa Fe. Dermabacter hominis (D.h.) es una bacteria cocobacilar, gram positiva, anaerobia facultativa, integrante de la microbiota cutánea humana, y considerada patógena oportunista. Se han documentado pocos casos de infecciones en pacientes gravemente inmunocomprometidos. Se describe el primer aislamiento de D.h. como agente etiológico de
un absceso retroauricular en una mujer de 25 años, sin antecedentes de inmunocompromiso. Se extrajo material mediante punciónaspiración, se remitió a la Sección de Microbiología del Hospital Dr. J.M. Cullen para su estudio, y se inició tratamiento empírico con clindamicina durante 7 días, sin evolución favorable. En la coloración de Gram se observaron cocobacilos positivos y abundantes leucocitos. Se sembró el material en agar sangre ovina al 5% y CLDE; se incubó en aerobiosis a 35-37°C durante 48h; y se obtuvo desarrollo de colonias blanco amarillentas, cremosas, hemolíticas y con fuerte olor acre. Se identicó el microorganismo como D.h. con sistema automatizado (Phoenix 100-BD) y mediante pruebas bioquímicas convencionales siendo positivas las pruebas de: catalasa, esculina, PYR, lisina y ornitina decarboxilasas, hidrólisis de la gelatina, y fermentación de azúcares (glucosa, maltosa y sacarosa); y negativas: urea, reducción de nitratos a nitritos, manitol y CAMP. Por indicación médica se rotó la terapia antimicrobiana a ciprooxacina oral por 7 días. La identicación se conrmó por MALDI-TOF MS en el Servicio de Bacteriología Especial del INEI-ANLIS Dr. C. Malbrán. Si bien se trata de un patógeno oportunista comúnmente considerado contaminante, el desarrollo único de D.h. y la evolución favorable del paciente, avalaron su jerarquización. De este modo se destaca la importancia de su búsqueda, identicación y diferenciación de otras bacterias corineformes de interés clínico. 50 CONJUNTIVITIS Y SEPTICEMIA POR Listeria monocytogenes EN UN NEONATO PREMATURO. Hofer P1, Mollerach A1, Mendosa M1, Morano S1, Francia L2, Ochat C2, Funes S2, Nardín M1, Ramos C1, Manias V1, Cristóbal S1, Nagel A1. 1 Sección Microbiología Laboratorio Central Hospital Dr. J.M. Cullen, Santa Fe, 2Servicio Neonatología Hospital Dr. J.M. Cullen, Santa Fe, Argentina. Listeria monocytogenes (Lm) es un bacilo Gram-positivo, intracelular que causa infecciones letales en recién nacidos. El 49
objetivo es describir el primer caso de conjuntivitis y septicemia neonatal por Lm en nuestro hospital. Neonato nacido por parto natural, prematuro de 33 semanas de gestación, ingresó a Neonatología en estado grave con sospecha de sepsis. Recibió reanimación con oxígeno e inició tratamiento proláctico con ampicilina y gentamicina. Los análisis de laboratorio fueron: PCR 97,6 mg/L, leucocitos 9000/mm³ con desviación a la izquierda y acidosis respiratoria. Se tomó muestra de líquido cefalorraquídeo (LCR), secreción conjuntival y sangre para cultivo. El cultivo de LCR fue negativo. Los hemocultivos se incubaron en BACTEC 9120 BD y resultaron positivos a las 24 horas (2/2). Se repicaron en agar chocolate incubándose a 35-37°C en CO2 desarrollando colonias grisáceas de aspecto mucoso. En la secreción ocular se obtuvieron colonias con morfología semejante. En la coloración de Gram se observaron bacilos positivos. Se identicaron por pruebas fenotípicas: catalasa, movilidad a 4°C y temperatura ambiente, esculina y CAMP, resultando todas positivas. Se observó movilidad característica de Lm en forma de paraguas y el CAMP como cabeza de fósforo. Paralelamente se procesó en BD PhoenixTM arrojando como resultado el mismo microorganismo. El agente etiológico se conrmó por MALDI-TOF MS en el Servicio de Bacteriología Especial del INEI-ANLIS Dr. C. Malbrán. Durante los primeros días los leucocitos aumentaron a 112.000/mm3 con plaquetopenia y alteraciones de la función renal y hepática. Luego de 10 días de tratamiento, la paciente empezó a evolucionar favorablemente hasta su alta médica. Posteriormente se realizó la búsqueda de Lm en la madre, en hemocultivo y endometrio, pero ambos resultaron negativos. La sospecha y detección temprana de este microorganismo es crucial, debido a que la mortalidad de los prematuros infectados no tratados es del 100%. 55 RARO… COMO MENINGITIS A Staphylococcus aureus. Diaz M1, Mari R1, Martinich C1, Borgo M1, Bletter C1, Acardi H1, Valles J1, Hourquescos M1, Romero M1, Amigot S1, Dip G2, Anchart E2, 50
Benegas L3, Aviale R4, Puig G4, Granados G1, Ballerini V5,6. 1 Centro de Especialidades Médicas Ambulatorias Rosario (CEMAR), 2Dirección de Bioquímica, Secretaria de Salud Pública Municipalidad de Rosario, 3 Servicio de Infectología Maternidad Martin, Rosario, 4 Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales Maternidad Martin, Rosario, 5 Programa Epidemiología y Vigilancia de la Resistencia a Antimicrobianos IBR (CONICET), Rosario, 6 Hospital Carrasco, Rosario, Argentina. Staphylococcus aureus (SA) es una causa poco frecuente de meningitis, su incidencia está aumentando a expensas de Staphylococcus aureus meticilino resistente de la comunidad (SAMR-CA). Esta última es predominante en post operatorio de sistema nervioso central por SAMR-CA, ocasionalmente se presenta en forma espontánea y/o hematógena. En SAMR-CA hay mayor prevalencia de genes que codican para Leucocidina de Panton-Valentine (PVL), el cual se considera un importante factor de virulencia. SAMR-CA, PVL positivo está implicado en infecciones severas. En este trabajo, se presentan dos casos de meningitis a SAMR-CA. CASO 1. Neonato nacido a término, con distress respiratorio. Ingresa a Neonatología, se le coloca vía periférica y sonda descompresiva orogástrica, con alta a los 7 días. A las 48 hs, le constatan distensión abdominal. Reingresa a Neonatología. Se toman hemocultivos (HC) (2), líquido cefalorraquídeo (LCR) y urocultivo. Se obtuvo desarrollo de SA meticilino resistente (MR), sin resistencia acompañante (RA), en todas las muestras. El paciente evoluciona a shock séptico y fallece a las 48 hs del reingreso. No se detectó ningún antecedente de jerarquía, a excepción de la internación previa. CASO 2. Paciente de 22 años, oriunda de Cañada de Gómez, con náuseas, vómitos, ebre y rigidez de nuca de 24 hs de evolución. Se interna por sospecha de meningitis. Se toman HC (2) y LCR. El diagnóstico por imágenes reveló initrado pulmonar bilateral. Se obtiene desarrollo de SAMR, sin RA, en todas las muestras. La paciente evoluciona al shock séptico con falla mutiorgánica y fallece. Como antecedente de jerarquía, se describe foco
cutáneo en rostro (forúnculo). Se derivan los aislamientos para el estudio PVL, con resultado positivo para la totalidad de las mismas. La importancia de documentar estos casos posibilita adecuar los tratamientos antibióticos empíricos iniciales en infecciones graves y en localizaciones que, como la meníngea o la ósea, requieren una rápida decisión. 56 JERARQUIZACIÓN DEL ESTUDIO DE M I C O P L A S M A S U R O G E N I TA L E S Y Chlamydia EN MATERNIDAD PÚBLICA DE ROSARIO. REVISIÓN DE SOLICITUDES Y RESULTADOS EN UN PERÍODO ANTERIOR Y POSTERIOR A CAMBIO DE PROTOCOLO. Arciero G1, Conforti C1, Di Cosco A1, Diaz S1, Di Santolo A1, Guenzelovich G1, Lejona S2, Dip G3, Anchart E4. 1 Servicio de Microbiologia Hospital Roque Saenz Peña, Rosario, 2Servicio de Biologia Molecular (CEMAR), Rosario, 3Dirección de Bioquímica, Secretaría de Salud Pública Municipalidad de Rosario, Rosario, 4Dirección Provincial de Redes de Laboratorios, Dirección Provincial de Promoción y Prevención de la Salud, Ministerio de la Salud de Santa Fe, Santa Fe. Introducción: La colonización por micoplasmas urogenitales Ureaplasma urealyticum (Uu), Micoplasma hominis (Mh) y Micoplasma genitalum (Mg); y Chlamydia trachomatis (Cht), ha sido considerado en los últimos años como causante de corioamnionitis y rotura prematura de membrana (RPM). Esto se asocia a parto prematuro, abortos recurrentes e infecciones en el recién nacido pretérmino (RNPT). Materiales y métodos: Estudio retrospectivo comparativo de resultados en un período de 2 años antes del cambio de protocolo en la Maternidad (2014 – 2015), y 10 meses posteriores (Julio 2017 - Marzo 2018). Las muestras son extraídas de fondo de saco, y transportadas en medio RPMI al Laboratorio, para su ingreso, derivación y procesamiento en el servicio de Biología Molecular del CEMAR. Métodos de detección de Mh, Uu y Mg: PCR en Tiempo Real; detección de Cht: in house nested PCR. Tras el cambio en el protocolo de trabajo, observamos un aumento de las solicitudes
respecto al periodo 2014 – 2015, para la búsqueda de micoplasmas urogenitales y Cht, en pacientes con amenaza de parto prematuro (APP) o con bolsa rota; y un aumento en la cantidad de resultados positivos, predominando Mh y Uu. Durante el período 2014-2015, hubo en la Maternidad 3287 partos, con 21 solicitudes de gérmenes atípicos, encontrándose 3 positivos (14,3%), y durante el período julio 2017- marzo 2018, hubo 1247 partos, con 106 solicitudes, en las cuales se encontraron 88 positivos (83%). Recibimos 2 muestras nasofaríngeas de neonatos con pedido de Uu, resultando positivas. Embarazadas: tratamiento azitromicina. Neonatos: tratamiento claritromicina. Conclusiones: Los resultados justican la implementación del nuevo protocolo que incluye la búsqueda de micoplasmas urogenitales y Cht como probable causa de APP. Esto permite analizar la situación de la población atendida en este hospital, jerarquizando estas infecciones y su transmisión vertical, evaluando el riesgo del RNPT de desarrollar problemas respiratorios.
61 BACTERIEMIA POR Campylobacter jejuni EN PACIENTE PEDIÁTRICO. REPORTE DE UN CASO CLÍNICO, HOSPITAL DEL NIÑO JESÚS TUCUMÁN. Del Valle E, Naja J, Assa J. Hospital del Niño Jesús, Tucumán, Argentina. Introducción: El género Campylobacter se asocia con gastroenteritis agudas, pues es uno de los principales agentes de enfermedades trasmitidas por alimentos. En los últimos años se registraron aislamientos de muestras extraintestinales. Los casos de bacteriemia por este género ocurren principalmente en inmunodeprimidos. Objetivo: Reportar un caso clínico de bacteriemia por Campylobacter jejuni en paciente pediátrico. Materiales y métodos: Paciente masculino de un mes, presenta ebre y mal estado general. Reere diarrea días previos. Solicitan hemocultivos, procesados por método automatizado Bact-Alert. Resultados: Hemocultivos positivos 2/2, debido a la morfología sospechosa en la coloración Gram, 51
se siembra en medio Skirrow modicado incubando en anaerobiosis a 42ºC. A 48 hs desarrollan colonias puntiformes. La identicación por espectrometría de masa (MALDI-TOF) informa Campylobacter jejuni. El antibiograma por método de Kirby-Bauer MH sangre presenta sensibilidad para amoxicilina/clavulánico, azitromicina, cefotaxima, cefepime, imipenem, gentamicina y ciprooxacina. El paciente evoluciona favorablemente bajo tratamiento con azitromicina. Conclusiones: En pacientes de grupos de riesgos, se sugiere la búsqueda de este microorganismo ante la observación de una morfología sospechosa en la coloración de Gram. Debido a que las bacteriemias por Campylobacter ocurren generalmente en pacientes inmunodeprimidos, se sugiere interconsulta con el Servicio de Inmunología. 62 AISLAMIENTO DE Salmonella Typhimurium E N H E M O C U LT I V O Y M U E S T R A D E ABSCESO EN PACIENTE PEDIÁTRICO DEL HOSPITAL DEL NIÑO JESÚS. REPORTE DE UN CASO CLÍNICO. Naja J, Del Valle E, Assa J. Hospital del Niño Jesús, Tucumán, Argentina. Introducción: Salmonella entérica produce infecciones por alimentos contaminados provocando manifestaciones clínicas como gastroenteritis, bacteriemias e infecciones focales. Las localizaciones extraintestinales afectan principalmente a pacientes con inmunidad celular alterada y hemoglobinopatías. Objetivo: Reportar el aislamiento de Salmonella Typhimurium en hemocultivo y absceso en paciente pediátrico. Materiales y métodos: Paciente masculino de 11 años, con anemia drepanocítica, consulta por ebre y absceso en hombro derecho. Se solicitan hemocultivos y cultivo de absceso. Los hemocultivos se procesan por metodología automatizada Bact-Alert. La muestra de absceso se siembra en agar sangre, chocolate y Levine incubando 72hs y en tioglicolato 7 días a 37°C. Resultados: A 24hs de incubación desarrollan bacilos Gram-negativos en hemocultivos 2/2. En material de absceso, desarrolla en tioglicolato a las 72hs. Por 52
espectrometría de masa (MALDI-TOF) se identica Salmonella sp y se tipica según esquema de Kauffmann White con antisueros OSA, OS4-5, Hi positivos, identicándose como Salmonella Typhimurium en ambas muestras. Se estudia sensibilidad antimicrobiana por método automatizado Vitek2. El paciente evoluciona favorablemente con posteriores cultivos negativos de control. Conclusiones: La salmonelosis extraintestinal es un cuadro clínico infrecuente y debe ser considerado en inmunocomprometidos. Su hallazgo determina la necesidad de investigar la condición de base que predispone su presentación.
82 AISLAMIENTO DE Arcobacter butzleri EN LÍQUIDO ABDOMINAL DE PACIENTE CON PERITONITIS APENDICULAR. Dalman M1, Gregorini E1, Zambon O1, Colombo L1, Truccolo P2, Villalba J2, Valles J3. 1 Laboratorio de Microbiología Hospital Escuela Eva Perón, Granadero Baigorria, 2Servicio de Infectología Hospital Escuela Eva Perón, Granadero Baigorria, 3Centro de Especialidades Médicas Ambulatorias de Rosario (CEMAR), Rosario, Argentina. Las bacterias del género Arcobacter son bacilos Gram negativos no esporulados en forma de S que pertenecen a la familia Campylobacteriaceae y son logenéticamente cercanas a Campylobacter spp, género del que se diferencian fundamentalmente por su aerotolerancia. Están ampliamente distribuidas en fuentes naturales de agua y son comensales en múltiples especies animales. En las últimas décadas se las considera como patógeno emergente de enfermedades gastrointestinales de transmisión alimenticia y potencial agente de zoonosis. Actualmente se describen 22 especies de las cuales Arcobacter butzleri, A. cryaerophilus, A. skirrowii y A. thereiusse se han aislado en procesos entéricos. A. butzleri es la especie prevalente tanto en infecciones como en reservorios naturales. Con el objetivo de presentar esta problemática describimos el caso de un paciente de 32 años de edad sin antecedentes de jerarquía que consulta por
dolor abdominal que migra a fosa ilíaca derecha sometido a apendicetomía con diagnóstico de peritonitis apendicular. El Laboratorio de Microbiología recibe un líquido abdominal donde se observa a los 3 días de cultivo en medios habituales desarrollo mayoritario de un bacilo Gram negativo con movilidad en tirabuzón, catalasa y oxidasa positivo. El aislamiento fue enviado a Laboratorio de Referencia local para su identicación por espectrometría de masas (MALDI-TOF) siendo informado como Arcobacter butzleri. El paciente evolucionó favorablemente con tratamiento empírico metronidazolciprooxacina. El número de reportes de enfermedades gastrointestinales asociadas a microorganismos de este género aumenta a medida que se lo estudia más profundamente y mejoran los métodos diag-nósticos , de forma tal que está se está considerando como un verdadero riesgo para la salud pública y evaluando la necesidad de comenzar su vigilancia. El hallazgo de este microorganismo constituye un alerta y un desafío para su recuperación en los Laboratorios de Microbiología Clínica. 90 PATOLOGÍA MENÍNGEA POR Aerococcus viridans (AEV). Ballerini V A, Kozicki G, Posella N, Argüello J. Laboratorio Microbiología Hospital Carrasco, Secretaría Salud Pública, Municipalidad de Rosario, Rosario. Los Aerococcus son cocos microaerólos, Gram-positivos, catalasa negativos que se disponen en pares, tétradas o racimos. Suelen considerarse contaminantes, no obstante se han descrito casos asociados a bacteriemia, infecciones urinarias, endocarditis y meningitis aguda. El género comprende 7 especies. No todas están asociadas al hombre siendo viridans una ellas. Se los puede identicar con pruebas convencionales (PC) tales como pyrrolidonyl-aminopeptidasa (PYR), leucina aminopeptidasa (LAP), bilis esculina (BE) y desarrollo en cloruro de sodio (NaCl). La secuenciación del gen 16S rRNA (Sec) sería la técnica de identicación más apropiada. Son usualmente susceptibles a beta-lactámicos y
vancomicina (Van). Presentamos el caso de una paciente que ingresó a la guardia clínica con rigidez de nuca, sonofobia, fotofobia y cefalea holocraneana pulsátil con 5 días de evolución, que cedió parcialmente con antiinamatorios no esteroideos. Se remitió LCR para cultivo bacteriológico y la paciente se retiró con alta transitoria con amoxicilina/ ácido clavulánico por asociar el caso a cuadro de sinusitis. Al tercer día reingresó por persistencia sintomática. Se solicitó tomografía de cráneo y posterior internación. Se obtuvo desarrollo de AEV obtenido a partir del caldo de enriquecimiento. El tratamiento inicial fue ceftriaxona (Cro). La identicación bacteriana se realizó con PC, MALDI Biotyper (Mt) y Reacción en cadena de la polimerasa para 16S rRNA con posterior secuenciación y análisis. Se utilizó E-test para las pruebas de sensibilidad que se interpretaron según normas CLSI M45. Mt y Sec identicaron AEV. Los resultados de PC fueron: PYR y LAP (+), BE (-) y NaCl (+). AEV resultó sensible a meropenem y Van, sensibilidad intermedia a ciprooxacina y Cro y resistente a penicilina (Pen). Se diagnosticó meningitis tardía a AEV. Se rotó tratamiento a Van. La rápida y coincidente identicación de Mt y Sec permitió correcta toma de conductas. Las PC no fueron concluyentes. La resistencia a Pen fue inusual. La paciente evolucionó favorablemente luego de 15 días de tratamiento.
41 PRIMER ABORDAJE DE NUESTRO EQUIPO DE TRABAJO EN LA DETECCIÓN DE Chlamydia trachomatis POR PCR EN MUESTRAS DE ORINA. Doná F1, Alvarez C A1, Zurbriggen M L1, Segovia G1, Mendosa M A1,2 , Morano S2, Nagel A2, Méndez E de los A1. 1 Cátedra de Bacteriología Clínica, FBCB, UNL, 2 Hospital J. M. Cullen, Laboratorio Central, Laboratorio de Microbiología. Santa Fe. Chlamydia trachomatis (CT) es un importante agente etiológico de infecciones de transmisión sexual (ITS). Los principales factores de riesgo son edad menor de 25 años, nuevas y múltiples parejas sexuales, otras ITS concurrentes. La infección puede ser asintomática en 53
aproximadamente el 75% de mujeres y el 50% de varones. Si no se detecta precozmente para implementar el tratamiento adecuado, puede desencadenar en complicaciones genitales severas y hasta podría ser causa de infertilidad en ambos sexos. Nuestro grupo de trabajo viene realizando desde hace un tiempo la detección de CT por PCR en muestras genitales. La orina resulta una alternativa no invasiva que simplica la recolección de la muestra y facilita el acceso de los jóvenes al diagnóstico. El objetivo fue evaluar la detección de CT en primer chorro de orina y en muestras genitales. Se estudiaron 30 pacientes (29 mujeres y un hombre) que concurrieron al Hospital J. M. Cullen de la ciudad de Santa Fe con pedido médico de detección de CT en muestras genitales. Al momento de la toma de muestra y; luego de obtener el consentimiento informado del paciente, se solicitó primer chorro de orina. La investigación de CT se realizó mediante la técnica de PCR plásmido críptico. Se vericó la ausencia de inhibidores de PCR mediante la amplicación del gen de la ß-actina. De los 30 pacientes, se detectó CT en exudados genitales de 5 mujeres, concordando estos hallazgos con los del primer chorro de orina. Se concluye que la orina se vislumbra, en nuestro medio, como muestra prometedora para la detección de CT. Si bien el número de pacientes fue escaso, el hecho de haberla detectado en ambas muestras de las mismas pacientes nos impulsa a seguir trabajando con jóvenes asintomáticos en esta línea y; de esta manera, incrementar la vigilancia y desarrollar acciones de prevención en la población. 80 UTILIZACIÓN DEL FILMARRAY® BCID PANEL EN SHOCK SÉPTICO: REPORTE DE CASOS. Manssur A1, Sciara M1, Zubillaga E1, Ferrand C1, Misto C1, Gerger J F2, Perez Lindo M2, Ugolini A3, Gutierrez G3, Fay F1. 1 Laboratorio Cibic, 2 Sanatorio Parque, 3 Sanatorio de Niños, Rosario. En pacientes con shock séptico, la demora en el inicio de terapia antimicrobiana efectiva es una variable terapéutica crítica asociada a la mortalidad. La misma no solo se relaciona con 54
la correcta elección inicial del antibiótico, sino también con la demora en instaurar el mismo desde que se produjo el shock. Los métodos microbiológicos convencionales demoran de 12 a 72 hs para la identicación de microorganismos a partir de hemocultivos. El FilmArray® BCID Panel es una metodología diagnóstica que utiliza una PCR múltiple para identicar 24 patógenos y 3 genes de resistencia asociados a sepsis a partir de una muestra de hemocultivo en 1 hora. Caso 1: Paciente hombre de 17 años que consulta a la guardia por diarrea abundante, vómitos y ebre, sin antecedentes. Inestable hemodinámica-mente, requiere asistencia respiratoria mecánica inmediata. Ingresa a UTI con deterioro renal, digestivo y neurológico con shock séptico. El hemocultivo en sistema automatizado Bact/Alert® 3D resulta 2 de 2 positivos a las 8,5 hs. Se realiza FilmArray® BCID Panel detectándose S. pyogenes una hora después, rotando a tratamiento especíco a las 10 hs de tomada la muestra. La evolución fue favorable. Caso 2: Paciente mujer de 13 años que consulta a la guardia por ebre, cefalea, eritema y edema de ojo izquierdo, sin antecedentes. El cuadro evoluciona en forma agresiva, con sensorio alternante, ingresando a la UCIP el mismo día por shock séptico y celulitis necrotizante orbitaria y periorbitaria. El hemocultivo en sistema automatizado Bact/Alert® 3D resulta 1 de 2 positivo a las 3,6 hs. Se realiza FilmArray® BCID Panel detectándose S. pyogenes una hora después, rotando a tratamiento especíco a las 5 hs de tomada la muestra. La evolución fue favorable. La utilización del sistema de detección molecular FilmArray® BCID Panel permitió la identicación del patógeno causal en un corto lapso de tiempo posibilitando la implementación de la terapia adecuada rápidamente.
43 PANEL RESPIRATORIO FILMARRAY: APLICACIÓN EN NIÑOS CON DIFICULTAD RESPIRATORIA SEVERA. Sciara M1, Zubillaga E1, Gomez A1, Del Castillo P1, Sfalcin J1, Manssur A1, Zancocchia N2,
Arevalo R2, Ugolini A2, Subira C2, Flynn L P2, Serravalle A1. 1 Laboratorio Cibic, 2 Sanatorio de Niños, Rosario. Introducción: Las infecciones respiratorias agudas son una de las principales causas de consultas médicas y hospitalización en niños. La mayoría son causadas por agentes virales, siendo las infecciones bacterianas menos frecuentes. Sin un diagnóstico denitivo, los pacientes con infecciones virales es más probable que reciban tratamiento con antibacterianos innecesariamente. El Panel Respiratorio FilmArray (PR-FA) es un sistema cerrado y automatizado capaz de detectar 20 patógenos respiratorios simultáneamente por biología molecular a partir de una única muestra de hisopado nasofaríngeo (hnf) con gran sensibilidad y especicidad. Tiene un muy corto tiempo de procesamiento hasta la obtención del resultado. Materiales y métodos: se estudiaron 12 pacientes menores de 2 meses que ingresaron al Sanatorio de Niños por dicultad respiratoria y bronquiolitis y/o catarro de vías altas superiores con un promedio de 6 días de evolución. Se tomaron muestras de hnf de todos los pacientes y se analizaron con PR-FA. En 7 pacientes se solicitó paralelamente la detección de antígenos por inmunouo-rescencia (IF) para algunos patógenos. Resultados: Mediante el PR-FA se detectó la presencia de patógenos virales en todas las muestras analizadas: 4 Rhinovirus-EV, 3 VSR, 2 Parainuenza 3 y 3 fueron infecciones múltiples. Las muestras analizadas por IF presentaron infección por un único patógeno mediante PR-FA. En 2 de ellas el patógeno detectado por PR-FA no estaba incluido en los patógenos estudiados por IF. De las 5 muestras restantes solo una fue reactiva por IF para el patógeno detectado por biología molecular. Conclusiones: La utilización del PR FilmArray permitió un mayor diagnóstico de virus respiratorios en comparación con el método de rutina dada la mayor sensibilidad del PR-FA y la posibilidad de detectar otros virus y bacterias no incluidos en la IF, permitiendo aplicar el tratamiento adecuado al momento de la internación.
84 IDENTIFICACIÓN DIRECTA EN LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO UTILIZANDO ESPECTROMETRÍA DE MASAS (MALDI-TOF MS) E N U N PA C I E N T E C O N M E N I N G I T I S NEONATAL TARDÍA POR Streptococcus agalactiae. Betler C1, Benegas L1, Puig G1, Acardi H H1, Díaz M S1, Valles J1, Mari R1, Hourquescos M del C1, Borgo M1, Matinich C1, Parodi P1, Romero M M1, Granados G1, Funes P B1, Elias M1, Dutto M1, Fernendez F1, García I1, Dip G2, Anchart E3, Amigot S1. 1 Microbiología CEMAR, 2Dirección de Bioquímica, Municipalidad de Rosario, 3 Dirección Provincial de Redes de Laboratorios, Dirección Provincial de Promoción y Prevención de la Salud, Ministerio de la Salud de Santa Fe, Rosario. Streptococcus agalactiae (EGB) es considerado el principal agente etiológico de sepsis y meningitis neonatal. Puede manifestarse los primeros 7 días de vida (sepsis neonatal precoz) o entre los 8 y 90 días (sepsis neonatal tardía, SNT). Se describe 1 caso de SNT en el que se identicó EGB directamente en Líquido Cefalorraquídeo (LCR) utilizando Espectrometría de masas [Matrix assisted laser desorption/ionization time of ight mass spectrometry (MALDI-TOF MS)]. Paciente nacida por parto natural de 28 semanas de gestación. Ingresa a neonatología por bajo peso y distress respiratorio. A los 15 días comienza con ebre. Remiten al laboratorio muestras de hemocultivos (2), punta de catéter, urocultivo y LCR. Los datos de laboratorio arrojaron un Hemograma sin particularidades, Proteína C reactiva: 6.8mg/l (valor signicativo>6 mg/l) y Procalcitonina: 2.30ng/ml (valores>2 ng/ml sugieren alto riesgo de sepsis severa y/o shock séptico). El LCR tenía un aspecto precentrifugado xantocrómico opalescente y postcentrifugado xantocrómico límpido con pequeño botón blanco, 32 elementos/mm3, glucorraquia<2mg%, proteínas 4.10gr/lt y un pandy++++. En la coloración de Gram-Nicole se observó abundantes cocos Gram (+) en cadenas. Se realiza MALDI-TOF del pellet centrifugado del LCR y de este mismo pellet previo tratamiento con etanol absoluto, ácido ............... 55
fórmico al 70% y Acetonitrilo. Se obtuvo un espectro equivalente a EGB con score =2,213 y divergencia>10%, resultado conable para género y especie. A las 24hs se obtuvo desarrollo de EGB en todos los cultivos. La paciente fallece a los 16 días de vida. Nuestra experiencia MALDI-TOF nos ofreció una identicación rápida y conable por ambas metodologías siendo de preferencia la muestra pretratada. Sugerimos incorporar esta herramienta dada la alta tasa de morbi mortalidad de meningitis neonatales y la necesidad de un diagnóstico rápido y certero para poder establecer el tratamiento.
MICOLOGÍA 5 CRIPTOCOCOSIS EN PACIENTE CIRRÓTICA. Peyronel E1, Ferrand C1, Misto C1, Morettin A1, Arias M1, Ramos A2, Perezlindo M2, Fay F1 1 Laboratorio CIBIC, Rosario, 2 Sanatorio Parque, Rosario. La criptococosis es la tercera causa de micosis sistémica, detrás de candidiasis y aspergilosis. Se estima que entre el 21-36% de casos de criptococosis en pacientes no infectados por HIV se asocian a cirrosis, presentándose en un 45% de los casos como peritonitis. La mortalidad asociada a esta patología varía entre el 81-100%. En pacientes cirróticos es una entidad subestimada, con diagnóstico y tratamiento tardíos. El 15% de dichos pacientes son diagnosticados post mortem. Describimos el caso clínico de una mujer de 52 años, con antecedentes de cirrosis que ingresa a la guardia de la institución con deterioro del estado general de 48 horas de evolución. Presenta abdomen blando, depresible y doloroso en forma generalizada, sin defensa ni reacción peritoneal. Se realizan estudios de laboratorio, radiografía de tórax y TAC de abdomen, cultivos de líquido peritoneal (elementos: 6.000/mm3) y hemocultivos. Se comienza tratamiento antibiótico con piperacilina+tazobactam. La paciente evoluciona tórpida, con aumento del dolor abdominal con defensa, persistencia de encefalopatía; 56
falla hemodinámica, respiratoria y renal. Se rota tratamiento antibiótico a meropenem y se toma nueva muestra de líquido peritoneal a las 24 horas (Elementos: 15.400/mm3). La paciente evoluciona en falla multiorgánica y fallece a los 3 días de internación. Se aísla Cryptococcus neoformans en hemocultivos y en líquido peritoneal, identicado por el sistema automatizado Vitek Compact 2 (98%). La evolución rápida de criptococosis en la paciente se debe a la inmunosupresión causada por la cirrosis. El diagnóstico se vio dicultado debido al elevado tiempo de crecimiento de los cultivos y a que es más frecuente una peritonitis bacteriana. Esto marca la necesidad de sospechar criptococosis en pacientes cirróticos con cultivos bacteriológicos negativos y líquido peritoneal con alto recuento celular. En el laboratorio microbiológico es importante contar con métodos de detección sensibles y rápidos. 9 PRODUCCIÓN DE BIOPELÍCULAS IN VITRO EN AISLAMIENTOS DE Candida spp RECUPERADAS DE INFECCIONES GENITOURINARIAS. Vila H, Nogueras M, Gandini V, Radzivoncik V, Raimondi M. Facultad de Ciencias Médicas, UNR, Rosario. La patogénesis de diversas infecciones está relacionada con la presencia de microorganismos formadores de biopelículas (BP), incluyendo a las levaduras del género Candida. El propósito de este trabajo fue investigar la capacidad in vitro de formación de BP por aislamientos de Candida albicans (Ca), Candida tropicalis (Ct) y Candida glabrata sensu lato (Cg), provenientes de infecciones genitourinarias. La identicación de las levaduras se llevó a cabo por métodos convencionales y el sistema API 20 C AUX. Se estudiaron 12 aislamientos de cada especie mediante el método de microplaca por triplicado. Se colocó 100 µl de cada inóculo a una concentración correspondiente a la escala 0,5 de Mc Farland provenientes de un cultivo de 24 hs y se adicionó 100 µl de caldo Sabouraud. Se incubó 24 hs a 37°C y luego se lavó tres veces con tampón fosfato salino (PBS); se jó con metanol
y se coloreó con solución de safranina. Se realizaron tres lavados y se eluyó con ácido acético, leyéndose a 450 nm. Se consideró ausencia de BP al promedio de las lecturas de absorbancias de los blancos (DOc). Según criterios de Stepanovic se compararon los promedios de la absorbancia de cada aislamiento (DO) con DOc y se establecieron cuatro categorías: ausencia de producción de BP (DO< DOc), débil (DOc < DO > 2.DOc), moderada (2. DOc < DO >4. DOc) y fuerte (4. DOc <DO). De 12 aislamientos de Ca, 1 no formó BP, 7 tuvieron producción débil, 2 producción moderada y 2 producción fuerte. De los 12 de Cg, 1 no formó BP, 2 lo hicieron en forma moderada y 9 generaron fuerte BP. Todos los aislamientos de Ct generaron BP, 3 moderada y 9 fuerte. Concluimos que el uso de esta sencilla técnica permitirá evaluar in vitro la posible resistencia a los antifúngicos sobre los aislamientos de Candida, considerando la formación de BP como un factor de patogenicidad relacionado con falla terapéutica. 38 PROTEINASAS Y FOSFOLIPASAS EN ESPECIES DEL COMPLEJO Candida parapsilosis. Podesta M, Tosello M, Luque A, Racca L, Funes P, Amigot S, Biasoli M. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas de Rosario, UNR, Rosario. Las levaduras del género Candida ejercen su v i r u l e n c i a p o r a d h e r e n c i a c e l u l a r, lamentización, formación de biolms, producción de proteinasas y fosfolipasas entre otros factores. Las proteinasas y fosfolipasas tienen la capacidad de hidrolizar proteínas y f o s f o l í p i d o s d e l a m e m b r a n a c e l u l a r, ocasionando una ruptura de la barrera cutánea mucosa del hospedador. El objetivo fue detectar la actividad de proteinasas y fosfolipasas de las especies del complejo Candida parapsilosis aisladas de muestras clínicas (hemocultivos, LCR, biopsias y otras muestras). Se trabajó con 80 cepas cuya distribución fue: 74 C. parapsilosis sensu stricto, 2 C. orthopsilosis y 4 C. metapsilosis. El 62% (46/74) de las C. parapsilosis sensu stricto
fueron aisladas de sitios estériles. Se utilizaron técnicas cualitativas para determinar las actividades de fosfolipasas (con yema de huevo como sustrato) y de proteinasas (con albúmina sérica bovina como sustrato). Se observó un precipitado blanco debajo y alrededor de la colonia y un halo claro alrededor de la misma para fosfolipasas y proteinasas respectivamente. El 38,7% (31/80) de las cepas presentó actividad fosfolipasa: 27/74 de C. parapsilosis sensu stricto, 2/2 de C. orthopsilosis y 2/4 de C. metapsilosis. Al analizar las proteinasas se observó un 71% (57/80) de actividad: 57/74 de C. parapsilosis sensu stricto y 2/4 de C. metapsilosis y ninguna cepa de C. orthopsilosis. No se puede realizar la comparación de las actividades enzimáticas para C. metapsilosis y C. orthopsilosis por su baja frecuencia de aislamiento, en cambio, para C. parapsilosis sensu stricto, la actividad de proteinasas es mayor que la de fosfolipasas (p < 0,0001). No se observó diferencia en la expresión de las enzimas según el sitio de donde fueron aisladas las levaduras. Los resultados obtenidos concuerdan con la bibliografía, donde el complejo C. parapsilosis es menos patógeno que C. albicans la cual presenta una actividad de proteinasa y fosfolipasa del 100%. 54 Crytococcus gattii DESCRIPCIÓN DE UN CASO AUTÓCTONO EN LA PROVINCIA DE TUCUMÁN, ARGENTINA. Antich Rizza C, Courtade V, Gomez G, Assa J. Hospital Del Niño Jesús, Tucumán, Argentina. Introducción: La criptococosis es una enfermedad fúngica oportunista causada por levaduras capsuladas del género Cryptococcus, particularmente las del complejo Cryptococcus neoformans/Cryptococcus gattii; que presentan numerosas diferencias en la distribución geográca, nichos ecológicos, epidemiología, patología, presentación clínica y caracteres moleculares. La genotipicación de las dos especies de Cryptococcus a nivel subespecie proporciona información relevante para comprender cómo se ha propagado este hongo en todo el mundo. En la actualidad, se han 57
reconocido nueve tipos moleculares principales: VNI, VNII, VNB, VNIII y VNIV entre aislados de Cryptococcus neoformans, y VGI, VGII, VGIII y VGIV entre aislados de C. gattii. En la Argentina los reportes de distribución y frecuencia de C. neoformans y C. gattii aislados son escasos. El primer caso autóctono de criptococosis por C. gattii ocurrió en 1987 en un paciente aparentemente inmunocompetente. Objetivo: Reportar el aislamiento de Cryptococcus gattii genotipo VGII en un paciente con Leucemia Linfoblástica Aguda de la localidad de Concepción-Tucumán. Materiales y métodos: Paciente de sexo masculino, 13 años, con diagnóstico de Leucemia Linfoblástica Aguda tipo B en fase de inducción de su tratamiento, procedente de Concepción-Tucumán; ingresa al Hospital del Niño Jesús en regular estado general; febril, normo hidratado, diuresis y catarsis positivas, dolor abdominal agudo, hepatomegalia, palidez generalizada, decaimiento, hiporreactividad, peso corporal disminuido. Se solicitan exámenes clínicos de laboratorio: Hto 32%, Hemoglobina: 9,8 g/dl cursa con síndrome anémico; G.B: 2,4 x109/L (linfocitosis); Plaquetas: 96 x109/L; Química Hemática: Glucosa: 60 mg/dL, Urea: 53 mg/dL, Creatinina: 0,36 mg/dL, Gamma glutamil transpeptidasa: 251UI/L, Transaminasa glutámico oxalacético: 51 UI/L, Transaminasa glutámico pirúvico: 64UI/L, Bilirrubina total: 2,16 mg/dL, B. Directa: 1,34 mg/dL, B. Indirecta: 0,8 mg/dL. Estudios microbiológicos: Líquido cefalorraquídeo: no se realiza punción lumbar, Urocultivo: negativo 48hs.Hemocultivos: positivos 2/2 a las 72 hs. de i n c u b a c i ó n e n s i s t e m a B A C T- A L E RT, coloración de Gram: se observan levaduras, Tinta china: levaduras capsuladas, Siembra en medio agar Saboureaud: desarrollo de colonias cremosas, lisas – mucoides; en medio agar con extracto de semilla de girasol: pigmento marrón a 25-28°C -5 días, hidrolisis de Urea: positiva. Se realiza su identicación mediante sistema automatizado VITEK2 y MALDI-TOF. Por sistema VITEK2 se identica Cryptococcus neoformans; por tecnología MALDI-TOF se identica Cryptoccus gattii. La cepa es derivada al Servicio de Identicación de Levaduras Departamento Micología INEI - ANLIS "Dr. Carlos G. Malbrán" para su sensibilidad y genotipicación denitiva mediante biología 58
molecular (PCR del gen URA5). Resultados: la cepa identicada fue Cryptococcus gattii genotipo VGII. El estudio de su sensibilidad de acuerdo al método utilizado EUCAST 7.3 fue el siguiente: CIM Anfotericina B: 1mg/L, CIM Voriconazol: 0.25mg/L, CIM Itraconazol: 0,5 mg/L, CIM Fluconazol: 16mg/L. A la fecha no hay puntos de corte establecidos. Conclusiones: Es de suma importancia la correcta identicación y tipicación molecular de las cepas aisladas, para poder establecer un correcto tratamiento y prolaxis además de evaluar la epidemiología de la criptococosis en la Argentina. Este es el primer informe sobre Cryptococcus gattii genotipo VGII de origen clínico en el Norte Argentino. 68 HISTOPLASMOSIS DIAGNOSTICADAS EN L A R E D D E L A B O R ATO R I O S D E L A DIRECCIÓN BIOQUÍMICA ROSARIO: 7 AÑOS DE HISTORIA. Romero M1, Bletler C1, Valles J1,Hourquescos M1, Acardi H1, Borgo M 1, Martinich C1, Parodi P1, Granados G1, Dutto M1, Fernandez F1, Elias M1, Mari R1, Garcia I1, Diaz M1, Dip G2, Soto L3, Godoy P3, Badano A4, Ernst A4, Benitz G5, Arciero G6, Garcia M7, Martinez M8, Ballerini V9, Pendino A10, Funes P1, Anchart E11, Amigot S1 1 Microbiología CEMAR, 2Dirección Bioquímica, Secretaría Salud Pública Municipalidad Rosario, 3 División Logística Dirección Bioquímica, 4 Microbiología Hosp. Víctor J Vilela, 5Microbiología Hosp. Alberdi, 6 Microbiología Hosp. Roque Saenz Peña, 7 Microbiología HECA, 8 Microbiología Hosp. Pcial. Rosario, 9Microbiología Hosp. Intendente Carrasco, 10Epidemiologia CEMAR, Rosario, 11 Dirección Provincial de Redes de Laboratorios, Santa Fe. La histoplasmosis (His) es una patología producida por Histoplasma capsulatum (Hc) endémica en nuestra región que afecta mayormente a pacientes con inmunodeciencia. El objetivo de este trabajo es analizar los casos diagnosticados de His en nuestro laboratorio durante el periodo 2011-2017.Se realizó un estudio descriptivo retrospectivo en el que se analizaron los resultados micológicos de 3863
muestras de 2981 pacientes con sospecha de micosis profundas. Las muestras fueron remitidas por los laboratorios derivantes de la zona sur de la provincia de Santa Fe a Micología del CEMAR. Fueron estudiadas por observación directa, May- Grundwald- Giemsa (MGG), y siembra en medios de cultivo apropiados (C). Se consideró como criterio diagnóstico: observación de la levadura en MGG y/o desarrollo de Hc en C. El diagnóstico de His fue conrmado en 117 muestras (3.03%).En el 7.4 % se observó Hc sin desarrollo, en 53.7 % se obtuvo desarrollo del hongo sin observación en MGG y fue positivo por ambos métodos en 38.8 %. De todas las muestras positivas, la mayoría fue recuperada de hemocultivos, seguida por muestras de piel (biopsias y escaricaciones) y luego muestras respiratorias, cabe destacar 1 aislamiento de líquido cefalorraquídeo. De los pacientes diagnosticados, el 76 % eran hombres y el 24% mujeres, en un rango etario de 30 a 60 años, excepto 2 casos de pacientes pediátricos. La patología predisponente mayoritaria fue VIH. Uno de los pacientes pediátricos fue inmunocompetente y el otro portador de VIH. No hubo diferencia signicativa en el número de pacientes diagnosticados a lo largo del período estudiado (p=0.065). Podemos concluir que el porcentaje de casos de His son similares en los 7 años que se realizó el estudio, la relación hombre-mujer es similar a la descripta en la literatura, y la portación del VIH sigue siendo el factor de riesgo más importante para la enfermedad.
PARASITOLOGÍA 10 LOPHOMONIASIS: ¿UNA ENFERMEDAD EMERGENTE? Castellani M, Jaramillo C, Sandoval E, Destefano V, Dopico D. Hospital del Niño de San Justo, La Matanza, Argentina. Lophomonas spp es un protozoario multiagelado anaerobio, comensal en el tracto digestivo de cucarachas, como Periplaneta americana. Los quistes son inhalados a través
de materiales contaminados por heces o secreciones de estos vectores. Produce una afección broncopulmonar que se maniesta con ebre, tos, expectoración y dolor torácico con falta de aliento. El diagnóstico se realiza por examen directo y diversas coloraciones sobre muestras de lavado broncoalveolar, aspirado traqueal, esputo y cepillado bronquial. Objetivos: Presentar un caso sospechoso de lophomoniasis broncopulmonar en un paciente que asiste al Hospital del Niño de San Justo. Establecer criterios morfológicos para diferenciar por microscopia óptica Lophomonas spp de células ciliadas bronquiales. Descripción del caso clínico: Paciente de sexo masculino de 4 años de edad. Presenta síndrome de Down y antecedentes de infecciones respiratorias recurrentes que lo llevaron a una traqueotomía. Ingresa al hospital por riesgo de ahogo. El laboratorio de ingreso no presenta particularidades y en los estudios por imágenes se observa un inltrado difuso bilateral. Se toma muestra de aspirado traqueal aislándose Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Pseudomona aeruginosa. En el examen directo se observan escasas células epiteliales, abundantes leucocitos y formas que impresionan parásitos agelados. Discusión: Las condiciones de hacinamiento asociadas a necesidades básicas insatisfechas proporcionan la posibilidad de inhalar quistes de Lophomona blattarum presentes en el ambiente. Para la identicación se deben aplicar con rigurosidad los criterios de tipo morfológico utilizando la microscopía óptica. Conclusiones: Si bien no está establecido el rol patogénico per se, la presencia del protozoario exacerba los cuadros respiratorios. 11 PREVALENCIA DE PARÁSITOS INTESTINALES EN NIÑOS QUE ASISTEN AL HOSPITAL DEL NIÑO DE SAN JUSTO, LA MATANZA, ARGENTINA. Dopico D, Sandoval E, Destefano V. Hospital del Niño de San Justo, La Matanza, Argentina. Introducción: las parasitosis intestinales en pediatría son una de las infecciones más 59
comunes a nivel mundial y, fundamentalmente, en países en vías de desarrollo. El partido de La Matanza tiene una alta densidad de población y gran parte de la misma con necesidades básicas insatisfechas. Materiales y métodos: se realizó un estudio retrospectivo, sobre 2512 muestras de materia fecal (PMF) y 2263 muestras de escobillado anal (TG) de niños entre 0 y 17 años de edad, que asistieron al Hospital del Niño de San Justo en el periodo julio 2014-junio 2017 (3 años). Resultados: de los 2512 PMF estudiados, 651 (25.9%) arrojaron resultado positivo; de los 2263 TG estudiados, 577 (25.5%) resultaron positivos. El mayor porcentaje de muestras positivas se encontró en el rango etario de 3 a 5 años (32.6 %), seguido del de 6 a 8 años (31.1%). El 79.3% de los positivos presentó una especie única, mientras que en el resto (20.7%) se hallaron asociaciones parasitarias de hasta 4 géneros diferentes. Se identicaron Giardia lamblia (9.4%); Endolimax nana (7.1%), Blastocystis spp (4.6%), Escherichia coli (4.2%); Hymenolepis nana (0.24%), Ascaris lumbricoides (0.16 %). Las asociaciones más frecuentes fueron Enterobius vermicularis + G. lamblia (30.9%), seguida de E. vermicularis + E. nana (18.9%). Los resultados mostraron una prevalencia global de parásitos intestinales del 25.7 %. Conclusiones: los resultados obtenidos mostraron que 1 de cada 4 muestras es positiva para algún parásito intestinal. La prevalencia es mayor en niños de entre 3 y 8 años, esto podría deberse a los hábitos infantiles (circuito anomano-boca). Además, en el último período estudiado se vio una disminución en el número de positivos en muestras de escobillado anal, posiblemente como consecuencia de la tendencia actual de optar por medicar en forma preventiva a los niños, sin hacer el estudio parasitológico previo.
VIROLOGÍA 79 DIARREAS AGUDAS POR ROTAVIRUS EN UN HOSPITAL GENERAL EN EL PERÍODO 2013-2017. ¿IMPACTÓ EL INGRESO DE LA VACUNA EN CALENDARIO OBLIGATORIO? Suarez L, Astbury MA, Dalman MC, Martine C, 60
Colombo L. Laboratorio de Microbiología, Hospital Escuela Eva Perón Granadero Baigorria, y Servicio de Infectología, Hospital Escuela Eva Perón Granadero Baigorria, Santa Fe. Rotavirus (RV) es un virus ARN, miembro de la familia Reoviridae, presenta 7 grupos antigénicos de la proteína de la cápside VP6, los del grupo A son los que generan infecciones en el ser humano. Las proteínas de cápside externa VP4 y VP7 inducen la producción de anticuerpos neutralizantes y se utilizan para clasicar en serotipos. RV es la mayor causa de hospitalización por diarrea en el mundo, sobre todo en niños menores de 5 años. Se transmite persona a persona o por consumo de alimentos contaminados y es altamente contagioso. A partir del 1 de enero de 2015 se introduce la vacuna anti-rotavirus en calendario obligatorio argentino. Contiene una única cepa de origen humano (cepa G1P[8]), de administración vía oral a partir de los 2 meses de edad y en 2 dosis con intervalo de 2 meses. Con el objetivo de obtener datos locales sobre esta patología y observar si los mismos se modicaron por la introducción de la vacuna se analizaron en forma retrospectiva 385 muestras (69% de pacientes internados),procesadas entre 2013 y 2017 por inmunocromatografía VIKIA® RotaAdeno (bioMérieux) obteniéndose los siguientes resultados expresados como número de número de muestras (m), positivos (p) y % de positividad : 2013, 59 m, 15 p (25%); 2014, 111 m, 39 p (35%); 2015, 96 m, 23 p (24%); 2016, 52m, 2 p, (4%) y 2017, 67m, 8 p (12%). De estos 8 pacientes, 4 no ingresaron en el calendario obligatorio por su edad, 1 no fue vacunado y los otros 3, vacunados de un año de edad presentaron cuadros de diarrea aguda leve con menos de 48 horas de internación. El porcentaje de muestras positivas en pacientes internados fue 19% (2013), 27% (2014), 15% (2015), 4% (2016) y 7% (2017). No se apreciaron variaciones estacionales en este último período. Se observa una disminución en el total de solicitudes, en el número y porcentaje de muestras positivas y en el número y gravedad de casos en internación desde la introducción de la vacuna.
85 RETROSPECTIVA 2017 DE INFECCIONES R E S P I R AT O R I A S E N P O B L A C I Ó N H O S P I TA - L I Z A D A D E C Ó R D O B A : DESTACANDO LA CIRCULACIÓN DE MPVH Y COVH. Camara A1, Rodrigue PE1, Liend ME2, Barbero L2, Sabbatini J2, Benso M1, Herrea Simo C1 Cufni C1, Frutos MC1, Camara J1, Garcia Oro MC2, Soriano MA2. 1 InVIV, Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Córdoba, 2 HIM Córdoba.. Las infecciones respiratorias en niños son la causa más común de muerte en el mundo, que van desde síndromes clínicos leves a cuadros graves como bronquiolitis o neumonía. El objetivo fue detectar y determinar la epidemiología de MPVh, Adv, RSV, PI 1,2 y 3, Flu A, Flu B por Inmunouorescencia directa y CoVh (229E y OC43) por técnicas moleculares. Se tomaron ANF de niños internados en el HIM por personal idóneo bajo criterios éticos y normas bioseguras. Se analizó la prevalencia, la clínica, edad, género, estacionalidad. De un total de 700 muestras las prevalencias fueron para RSV 65,11%; PI 1,2 y 3: 16,91%; Flu A: 1,44% y Flu B: 3,24%; MPVh: 5,55%.La clínica observada fue un 50,28% bronquiolitis (BQL), 39, 57% Síndrome Obstructivo Bronquial (SOB) y 10% Neumonía (N). La edad más afectada fue de 1 a 6 meses. La estacionalidad general fue de abril a septiembre; MPVh se presentó desplazada hacia la primavera con respecto a RSV. CoVh se analizó en un tercio del muestreo, la prevalencia esperada de 3,89 % (9/231). La clínica en su mayoría BQL, luego SOB. Los casos se observaron en el primer año de vida. La estacionalidad del CoVh se dio en febrero, abril, julio, agosto y septiembre. Se detectaron coinfecciones dobles entre RSV y PI; RSV y PI 2; RSV y PI 3; RSV y Flu A, PI 3 y MPVh; PI 3 y Adv. CoVh siempre único. En conclusión, los agentes virales respiratorios circularon en 2017. Con la importancia que MPVh (ya incluido en el panel) y CoVh circularon en las prevalencias esperadas. Los pacientes más afectados fueron los menores de 2 años. Se observaron coinfecciones dobles excepto CoVh se presentó simple. Las prevalencias para todos los agentes virales son
comparables a las informadas por otros autores. Se destaca que para MPVh y CoVh la manifestación clínica más frecuente fue la BQL, le siguió el SOB. Hubo pacientes con comorbilidades previas que agravaron las infecciones. Mantener estos estudios epidemiológicos mejora las condiciones de la Salud Pública.
Viernes 8 de junio de 2018 (13:00 – 14:00 hs)
BACTERIOLOGÍA 2 P R E VA L E N C I A D E M O L L I C U T E S E N CANINOS Y PRIMER AISLAMIENTO EN EL PAÍS DE Ureaplasma canigenitalium. Scapini JP1, Cámpora M2,Sorribas C3, Ingaramo D2. 1 Cátedra Microbiología, IUNIR, 2 SILAB, 3 Cátedra Clínica de Animales de Compañía Fac. Cs. Veterinarias, UNR, Rosario. Mycoplasma, Acholeplasma y Ureaplasma pertenecen a la clase Mollicutes. No poseen pared y son las bacterias más pequeñas. En los últimos 70 años se han publicado menos de 50 artículos sobre micoplasmas en perros. En dichos estudios, el rango de prevalencia oscila entre el 23 y 75%. Si bien algunos autores no ven evidencias concluyentes del rol patógeno, la infección experimental en perros se asocia en un 50% con uretritis, epididimitis, oligospermia, azoospermia, engrosamiento del útero y endometritis. Existe una única publicación en la Argentina acerca de la presencia de Mycoplasma spp en tracto genital de caninos hembra sanas (n=33). Estudiamos la presencia de micoplasmas en hembras (n=305) con patología reproductiva u obstétrica (infertilidad, abortos, reabsorción de embriones) y en machos sanos (n=54) en un período de 4 años. Las muestras genitales se cultivaron en medio sólido enriquecido para micoplasma en anaerobiosis estricta durante 4 días a 35 ºC y en caldo Urea-Arginina. Los cultivos se revisaron con 100 y 200 aumentos. Las colonias típicas (huevo frito) se tipicaron 61
mediante PCR especíca de Mycoplasma canis y las rugosas, compatibles con Ureaplasma spp se tipicaron por morfología y pruebas metabólicas. El 35,45% de las hembras (n=108) y el 22,2% de los machos (n=12) resultaron positivos para uno o más micoplasmas. El 31% de los aislamientos de Mycoplasma spp se tipicaron como M. canis. Se aislaron 14 cepas de Ureaplasma canigenitalium, las primeras reportadas en el país. De las 17 especies de micoplasmas reportadas en perros, 13 se han encontrado en tracto genital. La importancia clínica de estos patógenos y la pobre producción cientíca del tema abren una interesante rama de investigación en la microbiología veterinaria. 78 DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE Salmonella spp EN DERIVADOS DE SOJA Y ALIMENTOS BALANCEADOS. Marchessi NC, Galián LR, Delno C, Trejo NG. Cátedra de Microbiología, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de Lomas de Zamora, Lomas de Zamora, Provincia de Buenos Aires. Entre los años 2012 y 2017 el país recibió un total de 24 noticaciones a través de las Food and Feed Safety Alerts (RASSF) de la Comunidad Europea por la presencia Salmonella spp en harina de soja con destino a Europa, signicando perdidas económicas para el país. Haciendo eco al propósito de mejorar la producción nacional, nuestro objetivo fue determinar la presencia de Salmonella spp en harina de soja y sus derivados destinados a la alimentación animal como indicativo de las condiciones higiénico sanitarias de su industrialización. Se analizaron 25 muestras formadas por pellets de soja y alimentos balanceados facilitados por el SENASA, molinos harineros y granjas. El trabajo se realizó respetando las normas de calidad, muestreo y metodología para los granos y subproductos contenidas en la Resolución 1074/94 (SAGyP). La metodología para el análisis microbiológico de las mismas se ajustó al estándar internacional que reglamenta la determinación de Salmonella spp en 62
alimentos y materias primas para alimentación animal (ISO 6579). Con la aplicación de dicho protocolo, se obtuvieron los siguientes resultados: en una muestra con destino a Irán se determinó Salmonella spp. En 18 muestras se encontraron microorganismos coliformes (Enterobacter spp, Serratia spp, Citrobacter freundii, Escherichia coli y Klebsiella p n e u m o n i a e ) Ta m b i é n s e o b t u v i e r o n aislamientos de Yersinia enterocolitica, Pseudomona spp y Alcaligenes faecalis. En las seis muestras restantes se determinó ausencia de Enterobactereaceae. No es esperable la presencia de Salmonella spp ni de otras enterobacterias en productos tratados térmicamente en su industrialización, esto indicaría deciencias en la manipulación posterior, por lo cual se requiere determinar estrategias ecientes de actuación, en especial a nivel de las explotaciones, para satisfacer las exigencias de los programas de vigilancia y control que persiguen erradicar la salmonelosis del Mercado Común Europeo.
3 DESEMPEÑO DE CHROMAGAR TM MRSA F R E N T E A L C U LT I V O C L Á S I C O Y PREVALENCIA DE PORTACIÓN NASAL DE MRSA EN INDIVIDUOS AMBULATORIOS SANOS. Cámpora MM, Scapini JP, Ingaramo D. SILAB, Rosario, Argentina. El aumento en la portación de Staphylococcus aureus meticilino resistente (MRSA) y su rol en la infección quirúrgica, llevó a protocolizar el screening pre-admisión en cirugía traumatológica primero, luego en otro tipo de cirugías e incluso antes del parto. Se evaluó el desempeño del método cromogénico CHROMagarTM MRSA (CHM) frente al cultivo clásico con detección fenotípica de resistencia y se determinó la portación nasal de MRSA en individuos ambulatorios sanos. Se evaluaron 212 muestras de pacientes de la ciudad de Rosario con pedido de búsqueda de MRSA en hisopado nasal. Las muestras fueron sembradas en paralelo en CHM y en Agar Columbia con 5% de sangre de carnero (AC). Luego de 48 horas de incubación a 35ºC, las
colonias compatibles con S. aureus en AC fueron tipicadas y se realizó prueba de sensibilidad antibiótica frente a la cefoxitina según normas CLSI. El medio cromogénico se utilizó según indicaciones del fabricante, considerando positivas las colonias rosa o malva luego de 18-24 horas de incubación. A todas las cepas de S. aureus se les realizó una PCR de punto nal para detectar la presencia del gen mecA. De 212 muestras analizadas 16 (7,5%) fueron positivas para MRSA. Tres muestras presentaron falsos positivos en CHM. Estas cepas resultaron ser S. aureus meticilino sensible. La observación detallada de la morfología de estas colonias permitió establecer diferencias con las cepas MRSA (más pequeñas y de color levemente diferente), la detección de mecA resultó negativa en los 3 casos. El CHM mostró un sensibilidad del 100% y una especicidad del 98.47% frente al método clásico. El porcentaje de portación de MRSA en la población estudiada fue levemente superior al hallado por Boncompain y cols en personal de salud en 2014 lo cual indicaría una incidencia creciente. El entrenamiento profesional en la identicación de las colonias podría incrementar la especicidad del CHM. El método evaluado resulta conable y práctico en el screening de MRSA. 6 ESTUDIO DE LA COLONIZACIÓN BACTERIANA Y SUSCEPTIBILIDAD ANTIBACTERIANA EN PACIENTES QUEMADOS DE UN HOSPITAL MUNICIPAL DE LA CIUDAD DE ROSARIO. Barrios EC1, Aquili V2, Casabonne C2, Taljame ML1, Fernández Coria R1, Garcia M1, González A2. 1 Hospital de Emergencias Clemente Álvarez, 2 Cátedra de Bacteriología, Facultad de Cs. Bioquímicas y Farmacéuticas, UNR, Rosario. Las complicaciones infecciosas son la causa principal de mortalidad en pacientes quemados ya que el tejido quemado posee condiciones favorables para la colonización e invasión bacteriana. El objetivo de este trabajo es describir la ora colonizante y su susceptibilidad antimicrobiana en pacientes
internados en la Unidad de Quemados (UQ) del Hospital de Emergencias Clemente Álvarez (HECA) a los nes de establecer políticas en el uso de antibióticos. Se estudiaron 3 hisopados de heridas de pacientes quemados (n=20) mayores de 12 años hospitalizados en la UQ del HECA entre 11/2016-08/2017. Las muestras fueron obtenidas en el día 1 y 10 de ingreso a la UQ. La identicación de los aislamientos se realizó empleando espectrometría de masas MALDI-TOF y la sensibilidad a los antimicrobianos mediante el equipo Vitek 2C. Tras la admisión, se aislaron principalmente Staphylococcus epidermidis (S. ep) (35%), Staphylococcus aureus (SAU)(16%), Pseudomonas aeruginosa ( PA E ) ( 4 % ) y A c i n e t o b a c t e r b a u m a n i i (ABA)(1.5%). S. ep presentó meticilino resistencia (MR) (25%), resistencia a macrólidos/lincosamidas (15%) y a gentamicina (25%). SAU presentó MR (37%), resistencia a macrólidos/lincosamidas (18%) y a g e n t a m i c i n a ( 2 7 % ) . PA E p r e s e n t ó BLEE+Impermeabilidad+Eujo y sensibilidad a colistina (50%) y sólo Impermeabilidad (50%). ABA presentó una carbapenemasa clase D con sensibilidad a colistina y amikacina. A los 10 días, las quemaduras se colonizaron con PAE (24.4%), ABA (15.4%), SAU (25.6%), entre otros. PAE presentó BLEE+ Impermeabilidad+Eujo y sensibilidad a colistina (90%) y tipo BLEE+Impermeabilidad con sensibilidad a colistina y gentamicina (10%). ABA presentó una carbapenemasa clase D con sensibilidad a colistina y amikacina. SAU presentó MR (55%), resistencia a macrólidos y lincosamidas (45%), gentamicina (30%) y uoroquinolonas (20%). Estos resultados evidenciaron a PAE y ABA son los principales agentes bacterianos identicados en este estudio, con elevada resistencia a los antimicrobianos. 24 EPISODIOS DE BACTERIEMIA EN UN HOSPITAL PEDIÁTRICO DE SANTA FE. AÑO 2016. Borgogno JL, Baroni MR, Blesa MJ, Aro C, Zurbriggen L, Degiovanni GE. Hospital de Niños "Dr. Orlando Alassia", Santa Fe. 63
La bacteriemia sigue siendo una de las causas más importantes de morbilidad y mortalidad, a pesar de los numerosos antimicrobianos hoy disponibles. Objetivos: a- analizar el lugar de adquisición de las bacteriemias (BA), bdescribir frecuencia y sensibilidad antimicrobiana de agentes etiológicos en las distintas salas de internación, exceptuando neonatología. Estudio retrospectivodescriptivo. Se revisaron registros de 132 episodios de BA durante el 2016. Del total, 47% fueron adquiridas en la comunidad (BAC), 47% asociadas a cuidado de la salud (IACS) y 6% sin documentar. En BAC, S. aureus (SA)(31%) se aisló con mayor frecuencia, de ellos un 68% fueron SA meticilino resistente (SAMR). E. coli (18%), H. inuenzae (18%) y S. pneumoniae (16%): el 22% resistente a penicilina. E. coli: 100% sensibles a cefotaxima, 82% a gentamicina y 9% a ampicilina. De IACS, los agentes aislados más frecuentemente: SA (18%), S. marcescens (SMA)(18%) y K. pneumoniae (KPN)(18%). De los SA el 82% fueron SAMR. SMA y KPN presentaron BLEE: 91% y 64% respectivamente. El 100% fueron sensibles a carbapenemes y amicacina, exceptuando un aislamiento de KPN con carbapenemasa (KPC). P. aeruginosa (PAE): 8%, todas sensibles a ceftacidima. Del total de episodios de IACS, los bacilos Gram negativos (BGN)(61%) duplicaron en frecuencia a los cocos gram positivos (CGP), el restante 10% corresponde a funguemias. Los BGN fueron más comunes en las salas de cuidados intensivos (KPN, PAE, B. cepacia, A. baumannii y SMA): 59% y en clínica médica (SMA y KPN): 83%. En la sala de cuidados especiales, 53% CGP y 47% BGN. Los resultados muestran que el porcentaje de BAC es similar a IACS y que dentro de la primera predominan CGP, siendo SA prevalente. Y en la segunda, BGN fueron los más frecuentes, dentro de ellos, SMA y KPN. No se observa en estos dos últimos multiresistencia, a excepción de un aislamiento de KPN. Se observó una elevada resistencia a meticilina en los SA tanto de origen comunitario como hospitalario.
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¿LA COLOCACIÓN DE PIERCING CONSTITUYE UN FACTOR DE RIESGO PARA DESARROLLAR UNA INFECCIÓN GRAVE? Segovia GC1, Garberi MS1, Mendosa MA1, Nagel A2, Mollerach A2, Aro C3, Baroni MR1, Méndez EA1. 1 Cátedra de Bacteriología Clínica, Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas (UNL), 2 Sección Microbiología, Laboratorio Central, Hospital J. M. Cullen, Santa Fe, 3Laboratorio Hospital de Niños Dr. O. Alassia, Santa Fe. Las infecciones causadas por Staphylococcus aureus meticilino resitentes (SAMR) han sido ampliamente reportadas alrededor del mundo, tradicionalmente asociadas al ámbito intrahospitalario, actualmente denominado “asociado a cuidados de la salud” (healthcare associated, SAMR-AH). Sin embargo, en los últimos quince años se han comunicado infecciones causadas por este patógeno en pacientes con escaso o ningún contacto con el ámbito hospitalario (adquirido en la comunidad, SAMR-AC). Se han reportado en la bibliografía internacional, numerosas infecciones asociadas a la colocación de piercings. El objetivo de este trabajo fue la caracterización feno y genotípica de dos aislamientos de SAMR. Estos provenían de dos pacientes, una mujer adulta atendida en el Hospital J. M. Cullen y un niño que asistió al Hospital pediátrico Dr. Orlando Alassia, ambos de la ciudad de Santa Fe. Las cepas estudiadas fueron recuperadas en el mismo período de tiempo (octubre 2017). El perl de sensibilidad se realizó con sistema automatizado Vitek 2C y Phoenix BD, en cada uno de los centros asistenciales. La caracterización genotípica, estudio de pvl y spa, se llevó a cabo en la Cátedra de Bacteriología Clínica (FBCB-UNL). Ambos fueron meticilino resistentes y sensibles al resto de los antimicrobianos ensayados. Los dos aislamientos portaron el gen pvl y el tipo spa resultó t019. Los pacientes tenían un antecedente en común: colocación previa de un piercing; el pediátrico tuvo un desenlace fatal y la adulta evolucionó favorablemente luego de sucesivos esquemas antibióticos. De los datos precedentes se concluye que la importancia del presente trabajo radica en la similitud de las
cepas respecto al lugar de adquisición de la infección, fecha del aislamiento, sensibilidad antibiótica, portación de gen pvl y tipos spa; proviniendo las mismas de pacientes de hospitales distintos de la misma ciudad. 75 MENINGITIS POR Streptococus pyogenes. Petraglia L, Nadalich MV, Espina J, Garay Gonzalez AP, Gelpi P, Alonso G, Vigliarolo L, Suarez M, Verdile F. HIGA San Roque de Gonnet, La Plata, Argentina. Streptococcus pyogenes es principalmente un agente causal de infecciones del tracto respiratorio superior, piel y partes blandas, y tan sólo el 2% de las infecciones que provoca corresponden a meningitis, explicando entre el 0,1-1% del total de casos de dicha patología. Entre los factores de riesgo que se asocian a dicha etiología se encuentran las fístulas de líquido cefalorraquídeo. La displasia de Mondini representa el 30 % de las anomalías congénitas del oído interno y su principal característica consiste en el desarrollo coclear incompleto. Esta anomalía puede producir una conexión entre el espacio subaracnoideo y el oído medio, generando fístulas de LCR y episodios recurrentes de meningitis. Materiales y métodos: Paciente femenino de 32 años que consulta por cefalea, fotofobia y equivalentes febriles de un día de evolución. La paciente padece una hipoacusia congénita y antecedentes de meningitis bacterianas. Se efectúa punción lumbar. Resultados: El análisis del líquido cefalorraquídeo informa un recuento de 445 elementos/mm3 (90% polimorfonucleares). Se aisla Streptococcus pyogenes, sensible a penicilina (CIM por E-test: 0.002 ug/ml), y a ceftriaxona (difusión en Agar Mueller-Hinton con agregado de sangre Marca Britania, según Normas CLSI). Se indica tomografía computarizada de oído para descartar Síndrome de Mondini pero la familia decide continuar tratamiento en su ciudad de origen. Conclusiones: Las meningitis por S. pyogenes se caracterizan por su baja incidencia, siendo menos del 1% de los casos. Debido al aumento de las infecciones invasivas por S. pyogenes se debe considerar siempre la posibilidad de infección por este micro-
organismo en los casos de meningitis, especialmente en pacientes con factores de riesgo. En una paciente con hipoacusia neurosensorial unilateral y meningitis bacteriana recurrente, se debe sospechar la displasia de Mondini y la TAC de alta resolución es una herramienta importante para un diagnóstico correcto y oportuno. 27 SEROGRUPOS Y SUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANA DE Shigella AISLADAS DE COPROCULTIVOS PEDIATRICOS EN EL HOSPITAL DR. O. ALASSIA DE LA CIUDAD DE SANTA FE. Radosevich C, Zurbriggen ML, Blesa MJ, Aro C, Degiovanni G, Baroni MR. Sección Bacteriología, Laboratorio Hospital de Niños Dr. Orlando Alassia, Santa Fe, Argentina. Estadísticas de nuestro hospital reeren a Shigella como el primer agente etiológico de diarrea aguda. Si bien ésta se autolimita, hay pacientes que por su edad, estado nutricional y/o inmunológico requieren de tratamiento antibiótico para disminuir la duración del cuadro clínico y el periodo de transmisión. La creciente resistencia antimicrobiana y el restringido espectro de antibióticos en pediatría, obligan a la búsqueda de nuevas alternativas antibióticas. El objetivo de este trabajo fue determinar la frecuencia de serogrupos de Shigella, su perl de resistencia antimicrobiana y distribución de halos de inhibición de azitromicina (AZM). Se realizó un estudio r e s t r o s p e c t i v o - o b s e r v a c i o n a l d e 11 6 0 coprocultivos procesados en el hospital desde 1º de enero 2016 a 31 enero 2018. Las muestras fueron analizadas siguiendo procedimientos microbiológicos estandarizados. El sistema automatizado Vitek 2C permitió la identicación bioquímica y susceptibilidad de las colonias sospechosas. La identicación serológica se realizó mediante antisueros. Para la susceptibilidad a AZM, se empleó el método de difusión con disco, siguiendo las normas del CLSI. De un total de 1160 coprocultivos procesados, en 70 (6%) se recuperó el género Shigella. El 67% correspondió al serogrupo B 65
Shigella exneri (Sf) y el 33% al D, Shigella sonnei (Ss). La mayoría (68/70) presentaron resistencia a AMP y/o TMS. La resistencia a CTX, TMS, AMP y AMP+TMS resultó, 0%, 2%, 54% y 44%, respectivamente. La distribución de halos de AZM en Sf y Ss estuvo comprendida entre 20-30 mm y 14-18 mm, respectivamente. El agente etiológico más frecuente fue Sf frente a Ss. La elevada resistencia a TMS/AMP, obliga a buscar nuevas alternativas para el tratamiento empírico. Si bien CLSI no establece puntos de cortes clínicos por difusión para Sf ni Ss, las cepas de Sf presentaron halos de inhibición de AZM mayores a los observados en Ss. No hubo superposición de rangos de distribución de halos entre ambas especies.
empleando antisueros monovalentes comerciales. En los 11 casos de SUH estudiados en los cuales fue posible el aislamiento de EHEC, 5 (45,4%) fueron EHEC O157, 4 (36,4%) EHEC O145, 1 (9,1%) EHEC O171 y 1 (9,1%) EHEC O111. Todos los casos analizados portaban solamente el gen stx2, excepto el aislamiento EHEC O171 en el que se detectó el gen stx1. Este trabajo demostró un cambio en los serotipos hallados a partir del año 2009, donde prevaleció el serotipo O145 en esta Unidad Centinela de SUH. Estos datos reejan una diferencia con los datos nacionales recopilados por el Instituto Dr. Carlos G. Malbrán que describen el mencionado serotipo en un 13,6% de los casos.
48 EPIDEMIOLOGÍA DE LOS SEROTIPOS DE E s c h e r i c h i a c o l i P R O D U C TO R A D E SHIGATOXINAS ASOCIADAS A SÍNDROME URÉMICO HEMOLÍTICO EN ZONA ROSAFE. Caprile L1, Gonzalez A1, Casabonne C2, Aquili V2. 1 Hospital Provincial de Rosario, 2Bacteriología, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional Rosario.
28 EXPERIENCIA EN CULTIVOS SEMICUANTITATIVOS DE SECRECIONES CONJUNTIVALES. Ingaramo D1, Campora M1, Scapini JP2. 1 SILAB, Rosario, 2IUNIR, Rosario.
En Argentina el Síndrome Urémico Hemolítico [SUH D(+)] es considerado endémico. La mayoría de los brotes epidémicos y casos esporádicos de SUH se han asociado con cepas de Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC) del serotipo O157:H7/NM (75%). El porcentaje restante corresponde a otros serotipos como O26:H11, O103:H2, O111:NM, O113:H21 y O145:NM, también asociados a enfermedad humana severa. El objetivo de este trabajo fue investigar epidemiológicamente los serotipos circulantes de EHEC asociados a casos de SUH en un hospital público de Rosario donde funciona una Unidad Centinela de Síndrome Urémico Hemolítico. El análisis epidemiológico abarcó el periodo 1999-2018. La detección de EHEC se realizó mediante extracción de ADN a partir de zona de conuencia de cultivo en agar MacConkeysorbitol y posterior amplicación por PCR de los genes stx1, stx2, eae y rfbO157. La detección de los serotipos O157 y O145 se realizó 66
El diagnóstico etiológico de las conjuntivitis bacterianas, mediante métodos clásicos, plantea limitaciones debido a la baja recuperación de microorganismos y a la dicultad de interpretar el rol patógeno o sapróto de los aislamientos que forman parte de la ora normal. Estos resultados se asocian a un sobre o sub-diagnóstico y conducen a tratamientos antibióticos inadecuados. Se implementó una metodología de cultivo semicuantitativo (CSC) con jerarquización de los aislamientos mediante valores de corte (UFC/100 ul) por grupos bacterianos, modicando la técnica de D. Raghunath y V. Nagaraja. Durante 2016 y 2017 se analizaron 607 muestras obtenidas por hisopado conjuntival (hisopo sintético, no algodón) y sembradas en el momento. Los hisopos se colocaron en solución siológica, se agitaron inmediatamente en vortex, sembrando 100 ul de la solución en placas frescas de Agar Columbia sangre de carnero y medio Sabouraud. En las placas con sangre se cruzó una línea de S. aureus para mejorar la recuperación de Haemophilus sp. Se obtuvieron 358 cultivos positivos (61,0%) de los cuales 272
(44,8%) presentaron recuentos signicativos según los valores de corte establecidos. En 20 pacientes se diagnosticaron infecciones mixtas. Los aislamientos signicativos se dividieron de la siguiente manera: Staphylococcus sp (32,7%), S. aureus (18%), Haemophilus inuenzae (12,6%), S. pneumoniae (10%), Streptococcus spp (Grupo viridans) (9,8%), Corynebacterium sp (6,9%), Enterobacterias (4%), P. aeruginosa (2,9%), Moraxella catarrhalis (1%), Streptococcus pyogenes, Candida sp y Enterococcus sp (0,7%). No hubo diferencia entre sexos. El 100% de los aislamientos de H. inuenzae se hallaron en menores de 14 años. El CSC además de permitir jerarquizar los aislamientos aumentó la tasa de recuperación con respecto a la técnica cualitativa utilizada anteriormente. Está en estudio la correlación clínica de los resultados. 67 MENINGITIS BACTERIÉMICA RECURRENTE POR Pasteurella multocida. PRESENTACIÓN DE UN CASO. Boleas M, Mobilia L, Prestilippo A, Piedrabuena M, Almara A, Calgaro I. Laboratorio de Bacteriología, Hospital "San Martin", Paraná, Entre Ríos. Pasteurella multocida es un cocobacilo Gramnegativo que forma parte de la ora normal del tracto respiratorio y digestivo de animales (perros y gatos). Las enfermedades en humanos son raras y las infecciones invasivas poco frecuentes. Caso clínico – Resultados. Ingresa a la guardia del hospital paciente femenina de 46 años, etilista, con hepatopatía alcohólica en estadio cirrótico que convive con múltiples perros y gatos, con cuadro febril, alteración del sensorio y antecedentes de un accidente doméstico con fractura del tabique nasal días antes. El laboratorio presenta un recuento de leucocitos de 13.300 /mm3 con neutrolia (83 %). Se realiza punción lumbar obteniéndose resultados compatibles con infección bacteriana. Se solicitan hemocultivos, cultivo de Líquido cefalorraquídeo (LCR) y se inicia tratamiento con ceftriaxona-clindamicina. En el LCR y los hemocultivos (Bact/Alert) se
observan cocobacilos Gram negativos que desarrollan a las 24 horas como colonias pequeñas, grises en agar sangre y chocolate. Se realiza tipicación y antibiograma en Vitek2C. Se diagnostica meninigitis bacteriémica por P. multocida, suspendiendo clindamicina. Evoluciona favorablemente, con hemocultivos de control negativos. Es dada de alta, pero reingresa al mes por estado febril. Se toman nuevamente muestras de LCR y hemocultivos. El cultivo del LCR es negativo pero los hemocultivos son positivos a P. multocida, con igual sensibilidad que el aislamiento anterior. Se realiza nuevamente tratamiento con ceftriaxona hasta hemocultivos negativos y ecocardiograma transtorácico descartándose endocarditis. Se trata con ciprooxacina para eliminar colonización. La paciente mejora. Pasteurella sp es un agente poco frecuente que debería sospecharse en pacientes con enfermedades crónicas y que estén en contacto estrecho con perros y gatos. Su diagnóstico y tratamiento precoz son fundamentales para la resolución favorable, así como la descolonización para evitar recurrencia. 39 VAGINOSIS BACTERIANA EN EMBARAZADAS Y SU IMPACTO EN LA PREMATUREZ Y EN EL BAJO PESO AL NACER. Venturi Grosso A1, Matkowski G2, Suarez M1, Viegas Caetano JA1, Vigliarolo L1, Lopardo H1. 1 Facultad de Ciencias Exactas, UNLP, 2Centro de Atención Primaria de la Salud Nº 32, Municipalidad de La Plata, La Plata, Buenos Aires, Argentina. La vaginosis bacteriana (VB) es una infección endógena, producida por el desequilibrio de la microbiota vaginal normal, frecuente en mujeres en edad fértil, incluyendo embarazadas (ME). Los objetivos de este trabajo fueron conocer la prevalencia de VB en el segundo trimestre de embarazo en la población estudiada y su impacto sobre la producción de partos prematuros (PP) y/o de bajo peso al nacer (BPN). Se realizó un estudio retrospectivo, comparativo, de casos y controles, de 315 ME con y sin vaginosis en el segundo trimestre de embarazo entre 2009 y 2016. Se consideraron 67
“casos” a aquellas afectadas por VB (estadio IV) y “controles” a las que exhibían una microbiota habitual (estadio I). El 20% de las ME presentaron VB (estadio IV). Se registraron 16 BPN (11 entre los 62 casos y 5 entre los 120 controles) (p=0,025). En 16 oportunidades el parto fue prematuro (10 entre los casos y 6 entre los controles) (p=0,007) En total, las dicultades en el parto fueron signicativamente más numerosas entre los casos que entre los controles (p=0,009). Al menos en la población estudiada la presencia de vaginosis en el segundo trimestre de las ME estuvo signicativamente asociada con PP y/o BPN. 73 S E P S I S N E O N ATA L P R E C O Z P O R Streptococcus pneumoniae: IMPORTANCIA DEL ESTUDIO DE MEMBRANAS OVULARES EN GESTAS CON RUPTURA PREMATURA DE MEMBRANAS. CASO CLÍNICO. EspinaJ, Gelpi P, Petraglia L, Verdile F, Nadalich MV, Alonso G, Suarez M, Fadon N, Vigliarolo L, Garay GAP. HIGA San Roque, Gonnet, La Plata, Provincia de Buenos Aires. Se considera sepsis neonatal precoz (SNP) a las infecciones adquiridas durante el parto o intraútero, que se presentan dentro de los primeros seis días de vida. Las membranas ovulares (MO) delimitan la cavidad amniótica obliterando la cavidad coriónica. Puede ocurrir ruptura prematura de las MO (RPM) por los microorganismos que colonizan recto, vagina y cérvix, y provocar SNP. Las bacterias involucradas con mayor frecuencia son Streptococcus agalactiae o los Gram-negativos entéricos. Materiales y métodos: Paciente de 22 años de edad, que cursaba embarazo de 38,2 semanas de gestación ingresó al Servicio de Obstetricia por RPM de 3hs. de evolución. A las 7hs. del ingreso debido a taquicardia fetal sostenida se realizó cesárea abdominal de urgencia en la cual la gestante estuvo subfebril. La T° se normalizó 7hs. después. Se enviaron MO a cultivo. El recién nacido (RN) tuvo examen físico general y hemograma normales y proteína C reactiva elevada. Se tomaron 68
hemocultivos (HC) y se medicó al RN con ampicilina y gentamicina. Resultados: El aislamiento en cultivos de MO y HC fue Streptococcus pneumoniae serotipo 28A (serotipado por Instituto Nacional Dr. Carlos Malbrán) sensible a penicilina y cefotaxima. Se dio el alta luego de una semana del ingreso al RN con HC control negativos y a la madre con tratamiento oral de cefalexina por 10 días. Conclusiones: La prevalencia de SNP y de colonización vaginocervical en embarazadas por S. pneumoniae es baja, varía entre 1-11,5% y 0,03-0,50% respectivamente. En la bibliografía revisada no se hallaron datos de prevalencia de microorganismos aislados en cultivo de MO. En este caso el cultivo de MO fue útil para dilucidar el origen de la SNP. El serotipo 28A no está incluido en las vacunas contra neumococo disponibles en la actualidad. A pesar de la baja prevalencia de S. pneumoniae como causa de SNP y colonizante vaginocervical, no debe dejar de considerarse como agente responsable de infección puerperal y/o neonatal. 94 IMPORTANCIA DE LA DETECCIÓN DE Staphylococcus aureus METICILINO RESISTENTE (SAMR) EN MUJERES EMBARAZADAS. Lapenta G1, Pugliessi M1, Peralta E1, Ostera D1, Aguilar F2. 1 IBC (Instituto de Bioquímica Clínica), Rosario, 2 CEDOR (Centro De Obstetricia Rosario), Rosario. El principal reservorio de Staphylococcus aureus en el ser humano son las fosas nasales. Los portadores intermitentes de cepas sensibles a la meticilina están en riesgo de adquirir Staphylococcus aureus Meticilino Resistente (SAMR). Existen diversos factores de riesgo que favorecen la portación de SAMR, tales como: hospitalización prolongada, lesiones en la piel, tratamientos con antimicrobianos, entre otros. En pacientes embarazadas donde hay un porcentaje que será sometida a cesárea es importante la detección de portación con el objetivo de disminuir complicaciones quirúrgicas.
Objetivo: Detección de portación de SAMR en mujeres embarazadas en el último trimestre de embarazo. Materiales y métodos: Se estudiaron entre el año 2016 y 2017, 57 hisopados nasales y 37 hisopados nasales e inguinales en pacientes embarazadas. La identicación de S. aureus se realizó por métodos convencionales y el antibiograma se realizó por el Método de Kirby-Bauer. Resultados: Se identicaron 1 (2%) portador a SAMR y 17 (30%) Meticilino Sensible (MS) en un total de 57 hisopados nasales, y 8 (22%) portadores MS, y 2 (5%) Meticilino Resistente en un total de 37 muestras de hisopados nasales e inguinales. Conclusiones: Dada la elevada tasa de detección de portadores de S. aureus se recomienda estudiar a la embarazada para prevenir los riesgos que esto conlleva ante la necesidad de una cesárea ya que en este estudio se detectó entre en 2 y un 5 % de portadores SAMR. 70 EVALUACIÓN DEL AUMENTO DE CASOS DE SÍFILIS EN EL HOSPITAL J. B ALBERDI. SECRETARÍA DE SALUD PÚBLICA DE ROSARIO, SANTA FE. Gueli G1, Parodi JP1, Fossaroli G1, Lupachini E2, Anchart E3, Dip G4. 1 Laboratorio Hospital J. B. Alberdi, 2Área Estadística Hospital J.B Alberdi, 3Dirección Provincial de Redes de Laboratorios, Dirección Provincial de Promoción y Prevención de la Salud, Ministerio de la Salud de Santa Fe, 4 Dirección Bioquímica, Municipalidad Rosario, Rosario. La sílis es una enfermedad sistémica, crónica, causada por Treponema pallidum (TP), siendo la forma de transmisión más frecuente la vía sexual, además de placenta, mucosas y transfusión de sangre, afectando principalmente a: grupos sociales relacionados con consumo de drogas; pacientes HIV positivos y adolescentes que inician sus relaciones sexuales a temprana edad, con escasa información sobre infecciones de transmisión sexual (ITS), evitando el uso de preservativo. Objetivo: estudiar comparativamente en 3 años consecutivos
(enero 2015 a diciembre 2017) el aumento de resultados positivos de VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) en el Hospital Alberdi de Rosario y establecer una correlación con los datos de Ministerio de Salud de la Nación (MSN). Metodología: Se hizo un estudio retrospectivo, observacional, usando la prueba no treponémica (VDRL) para el diagnóstico y, frente a un resultado positivo de la misma, se realizaron pruebas treponémicas (Ac anti-TP) para la conrmación, por métodos de aglutinación partículas de gelatina (TPPA) y quimioluminiscencia (QL). Se estudiaron 6920 pacientes, el 80% proveniente de consultorio externo y 20% internados y guardia, no habiendo diferencia signicativa en cuanto al género. Del total de muestras, 303 fueron reactivas para la prueba no treponémica de las cuales: 193 fueron Reactivas frente a las pruebas treponémicas (PT), 24 dieron No Reactivo, considerándolas falsos positivo, relacionadas a Síndrome Antifosfolípido y/o cambio de operador y a las 86 restantes no se realizó PT por tener resultados previos de las mismas, (control de tratamiento). En el 2015 tuvimos 46 casos positivos, en 2016 fueron 58, y 89 en 2017. Conclusiones: Según el objetivo planteado, observamos que prácticamente se duplico el número de casos de sílis en dos años, lo cual se correlaciona con los datos del boletín del MSN. Consideramos prioritario implementar campañas de detección precoz para sílis (semejantes a las de VIH), para iniciar en forma rápida el tratamiento adecuado, minimizando así los riesgos de transmisión, ya que tratar la infección es fácil, lo difícil es detectarla a tiempo. Asimismo, es necesario reforzar la concientización y difusión sobre la prevención con el uso de preservativos para disminuir los riesgos de ITS. 81 INFECCIONES ASOCIADAS A LA ATENCIÓN EN SALUD EN LAS UNIDADES CRÍTICAS D E L H O S P I TA L S . A . M . I . C . O B E R Á , MISIONES. ESTUDIO TRANSVERSAL. González C1, Von Spech M2, Torrus Tendero D3. 1 Hospital S.A.M.I.C. Oberá Misiones, 2 Universidad Nacional de Misiones (UNaM),
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Misiones, 3Universidad Miguel Hernández, Alicante, España. Las acciones de vigilancia, constituyen el principal componente para la prevención y control de las infecciones asociadas a la atención en salud (IAAS). Para este importante problema de Salud Pública, se estudió la magnitud, distribución, etología y perl de resistencia a los antimicrobianos en las unidades críticas. Se aplicó, el protocolo del Proyecto EPINE (Estudio de Prevalencia de Infecciones Nosocomiales en España), en los años 2015-2016, por primera vez en un Hospital Nivel III del interior, de la provincia de Misiones, donde no existe un programa estructurado en esta área. Los objetivos fueron determinar la prevalencia de las IAAS en el área de cuidados críticos del Hospital S.A.M.I.C. Oberá, identicar los factores de riesgos intrínsecos (FRI) y extrínsecos (FRE) en pacientes con IAAS y su relación con los principales cuadros, e identicar los microorganismos relevantes y sus perles de resistencia a los antimicrobianos. La prevalencia de IAAS en las unidades de cuidados intensivos de adultos (UTI) fue de 24.47%, y en neonatología (UCIN) de 18.58%. Entre los FRI se destacan la diabetes mellitus (p=0,03) y la hipoalbuminemia (p: 0.02), en UTI, y la inmunodeciencia (p: 0.01) y coma (p: 0.03), en UCIN. Entre los FRE, se destacan la asistencia respiratoria mecánica (ARM) (p: 0.01), y el catéter venoso central (CVC) (p: 0.001), y ARM (p: 0.02) en UCIN. Se observó Klebsiella pneumoniae con 100 % de resistencia debida a beta-lactamasas de espectro extendido (BLEE) en UCIN, y en UTI, Staphylococcus aureus resistente a la meticilina adquiridos en la comunidad (62%), y Staphylococcus aureus resistente a la meticilina adquiridos en el hospital (37.5%). La prevalencia de las IAAS fue alta en pacientes UTI. Constituyeron factores de riesgo con asociación signicativa, diabetes e hipoalbuminemia, e intubación con infecciones respiratorias bajas, en UTI; así como coma e inmunodeciencia y CVC con infecciones del torrente sanguíneo, en UCIN. Las bacterias presentaron patrones de multirresistencia.
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ANTIMICROBIANOS 17 UTILIDAD DE UN MÉTODO DE TAMIZAJE PA R A D E T E C TA R L A R E S I S T E N C I A BACTERIANA A FOSFOMICINA Y COLISTINA EN MUESTRAS DE ORIGEN ANIMAL. Merino L1,2, Amable V3, Weber M1, Yarros A1, Losch L1,2 1 Fac. de Medicina (UNNE), Corrientes, Argentina, 2Inst. de Medicina Regional (UNNE), Resistencia, Argentina, 3Fac. de Ciencias Veterinarias (UNNE), Corrientes, Argentina. Los antimicrobianos en animales pueden ser usados con nes terapéuticos, prolácticos, metalácticos y como promotores de crecimiento. El uso de fosfomicina (FOS) y colistina (COL) con éste último n se extendió a animales de cría, lo que llevó a que se detectara resistencia en enterobacterias aisladas de diferentes especies. Sin embargo, el uso de estas drogas en animales de compañía es poco frecuente. El objetivo del presente trabajo fue determinar la utilidad de un método de tamizaje (MT) para la selección directa de enterobacterias resistentes a COL y FOS a partir de muestras de origen animal. Se incluyeron en el estudio 44 muestras: 12 provenían de perros y 32, de animales de cría (aves, cabras, cerdos, terneros). Las muestras fueron recogidas con hisopos, transportadas en medio de Stuart hasta su procesamiento y sembradas por diseminación cubriendo la totalidad de la supercie de placas de agar Mac Conkey. Sobre las placas ya inoculadas con las muestras se colocaron discos de FOS (50 µg) y COL (10 µg). Posteriormente, en los aislamientos que desarrollaron dentro del halo de inhibición, se realizó la conrmación de la resistencia mediante un antibiograma por difusión con discos (ADD) según recomendaciones internacionales. Mediante el MT se recuperaron 10 aislamientos a partir de los halos de inhibición de los discos de COL y FOS, y la resistencia fue conrmada por ADD. De las 44 muestras, 3 (6,8%) fueron resistentes a FOS y sensibles a COL, 3 (6,8%) evidenciaron resistencia a COL y sensibilidad a FOS, y 4 (9,1%) presentaron resistencia
combinada a ambos antibióticos; 34 (77,3%) resultaron sensibles a los dos antibióticos probados. Todas las cepas resistentes provenían de muestras de terneros. El tamizaje con discos resultó un método sencillo, económico y de gran especicidad para seleccionar bacterias resistentes a partir de una gran variedad de muestras ya que existió una concordancia total con los métodos conrmatorios.
65 DIFERENCIAS EN LA INTERPRETACIÓN DE LAS PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD A LOS CARBAPENEMES EN Aeromonas spp: VITEK-2 VS DIFUSIÓN EN AGAR. Rebagliati J1, Gregorini E1, Braida A2, Rinaudo M3, Colombo L1. 1 Servicio de Microbiología, Hospital Escuela Eva Perón, Granadero Baigorria, Santa Fe, Argentina, 2Servicio de Infectología, Hospital Escuela Eva Perón, Granadero Baigorria, Santa Fe, Argentina, 3Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario, Rosario. Las especies del género Aeromonas spp producen diferentes tipos de beta-lactamasas, siendo CphA prevalente entre estas; metalobeta-lactamasa (MBL) que afecta sólo a los carbapenemes. La producción de MBL es especíco de especie, producida por A. dhakensis, A. hydrophila, A. veronii, A. sobria pero no por A. caviae ni por A. trota. La sospecha de la presencia de la MBL se da cuando los valores de concentración inhiboria mínima o del halo de inhibición por difusión para el carbapenem da resistente (R) o con sensibilidad intermedia (I). El objetivo del trabajo fue determinar los valores de CIM a imipenem (IMP) y meropenem (MER) por Vitek2 y los valores de los halos de inhibición de IMP, MER y ertapenem (ERT) por método de difusión y evaluar si existe concordancia en la interpretación. El presente es un estudio retrospectivo, en el que se analizaron 36 aislamientos de Aeromonas, recolectados durante 36 meses (2015-2017). Se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) a IMP y MER por Vitek-2 y los halos de inhibición a
IMP, MER y ERT por método de difusión, utilizando para la interpretación los puntos de corte del CLSI M45-3 (2015). La estimación de la concordancia se llevó a cabo por medio de la prueba Kappa (k) para variables dicotómicas. Según la CIM a IMP y MER por Vitek-2, se obtuvieron 33 cepas IMP y/o MER R/I y 3 cepas IMP/MER sensibles (S); y según los halos de inhibición por el método de difusión, se obtuvieron 24 cepas S a IMP/MER/ERT, 5 cepas IMP I /MER S /ERT S, 2 cepas IMP I /MER I /ERT S, 2 cepas IMP I/MER I/ERT R, 1 cepa IMP R /MER I /ERT I, 1 cepa IMP R/IMP I /ERT R y 1 cepa IMP R/MER R /ERT R. Este estudio revela la baja concordancia en la interpretación de susceptibilidad a los carbapenemes por ambos métodos (k = 0,36), siendo la resistencia del 91,7% por Vitek y del 33,3% por método de difusión. Independientemente del método elegido, se debe evitar el uso de carbapenemes como terapia antimicrobiana en las infecciones por Aeromonas spp.
64 DETECCIÓN DE CARBAPENEMASAS EN ESPECIES DEL GÉNERO Aeromonas spp P O R M É TO D O D E I N A C T I VA C I Ó N A CARBAPENEMES. Rebagliati J1, Dalman M1, Lerman D2, Rinaudo M3, Colombo L1. 1 Servicio de Microbiología, Hospital Escuela Eva Perón, Granadero Baigorria, Santa Fe, Argentina, 2Servicio de Infectología, Hospital Escuela Eva Perón, Granadero Baigorria, Santa Fe, 3Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario, Rosario, Argentina. Aeromonas spp es un patógeno oportunista emergente asociado a peritonitis, bacteriemia, infecciones de piel y partes blandas y diarrea. Las especies pueden producir diferentes tipos de beta-lactamasas. CphA (Carbapenem hydrolysing Aeromonas) es la metalo-betalactamasa (MBL) prevalente en el género y es activa sólo sobre carbapenemes. Esto es de gran relevancia ya que los carbapenemes son cada vez más usados como terapia empírica en infecciones severas, y la detección de CphA 71
sería importante en aquellas con alta carga bacteriana. Esta MBL no es fácilmente detectada in vitro por pruebas fenotípicas convencionales. El método de inactivación a carbapenemes (MIC), recientemente descripto, podría ser aplicable en Aeromonas. El objetivo del trabajo fue detectar carbapenemasas en aislamientos clínicos de Aeromonas por MIC. El presente es un estudio retrospectivo, en el que se analizaron 36 aislamientos de Aeromonas, recolectados durante 36 meses (2015-2017). Se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) a imipenem (IMP) y meropenem (MER) por Vitek 2, utilizando los puntos de corte del CLSI M45-3. Para la detección de MBL se llevó a cabo el MIC que consiste en incubar un disco de MER en suspensión con la cepa por 2 horas a 37°C y transferir este disco en placa de Mueller-Hinton hisopada con una cepa de Escherichia coli ATCC 25922 por 18 horas a 37°C. La actividad carbapenemasa se evidencia por ausencia de zona de inhibición que indica hidrólisis enzimática del disco de MER. Según la CIM a IMP y MER, se obtuvieron 33 cepas IMP y/o MER resistentes y 3 cepas IMP/MER sensibles. Con las MIC se logró detectar la presencia de carbapenemasas en 33 cepas. En Aeromonas suele existir falla en la detección de carbapenemasas y por lo tanto representa un desafío terapéutico utilizar métodos con alta especicidad y sensibilidad. Se propone como método de detección de carbapenemasas en Aeromonas al MIC como una técnica sencilla, fácil de interpretar y de bajo costo.
23 NUEVA PLATAFORMA GENÉTICA PORTAD O R A D E b l a K P C E N A I S L A M I E N TO S CLÍNICOS LOCALES DE ENTEROBACTERIAS RESISTENTES A CARBAPENEMES. Marchiaro P, Rinaudo M, Diaz S, Pagani A, Ballerini V, Viale A, Limansky A. Laboratorio de Resistencia Bacteriana a Antimicrobianos, Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario (IBRCONICET), Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, UNR, Rosario, Argentina. 72
La emergencia de enterobacterias productoras de carbapenemasas tipo-KPC (EB-KPC) constituyen un problema de salud pública debido a las escasas opciones terapéuticas. El éxito de la propagación de bla KPC se liga esencialmente a la diseminación del clon epidémico de Klebsiella pneumoniae (Kpn) ST258, así como la asociación de blaKPC a plataformas genéticas móviles como transposones tipo-Tn4401 insertos en plásmidos conjugativos. Se caracterizaron plataformas de diseminación de blaKPC en 20 EBKPC recuperadas de un hospital de Rosario, 18 Kpn, 1 Enterobacter cloace (Ecl) y 1 E. aerogenes (Eae), mediante conjugación, así como PCR/secuenciación de regiones marcadoras de Tn4401, y del menos prevalente no-Tn4401 (1). Se identicaron 5 clones, mediante PCR y sequenciotipo, siendo A/ST258 mayoritario (14/18). Ensayos de transferencia revelaron plásmidos conjugativos con blaKPC en los 5 clones de Kpn, así como en Eae y Ecl. El entorno Tn4401 se encontró solo en Kpn clonA/ST258 (11/14). Por su parte, el entorno no-Tn4401 se observó en 3/14 Kpn clon A/ST258, en otros 4 clones Kpn, en Ecl, y en Eae, mostrando así elvada diseminación. Las secuencias nucleotídicas de regiones marcadores de aislamientos seleccionados con entornos no-Tn4401 mostraron variabilidad: aquellas de Kpn clon D y Eae revelaron 99 % de identidad con la presente en Variante 1a (1), mientras que aquellas Kpn clon A/ST258 y clon C/ST1, y Ecl mostraron una deleción de 143 pb antes no reportada (denominada aquí Variante “4A”), indicando así una plataforma diferente en EB-KPC locales. Los plásmidos portadores de Variantes 1a y “4A”mostraron perles de restricción diferente. Los resultados evidencian diseminación de blaKPC entre enterobacterias asociada a transposones menos prevalentes (no-Tn4401), insertos en plásmidos conjugativos. Estos datos aportan nuevo conocimiento de plataformas involucradas en la movilización de blaKPC, y explicarían su profusa diseminación. 1) De Beld et al. Microb Drug Res 2017
20 ENTEROBACTERIAS CON RESISTENCIA DISOCIADA A CEFALOSPORINAS DE TERCERA GENERACIÓN: RESPUESTA “IN VITRO” A CEFTAZIDIMA Y CEFEPIME. Liebrenz K1, Marchisio M1, Di Conza J2, Mendez E3. 1 Cátedra de Microbiología General, Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas, Universidad Nacional del Litoral, 2Laboratorio de Resistencia Microbiana, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, 3 Cátedra de Bacteriología Clínica, Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas, Universidad Nacional del Litoral, Santa Fe. Las β-lactamasas son el principal mecanismo de resistencia frente a β-lactámicos en bacilos gram negativos. Dos grupos de éstas son las βlactamasas de espectro extendido (BLEE) y las enzimas AmpC plasmídicas (pAmpC). El objetivo fue establecer el perl de sensibilidad de aislamientos wild type (WT) y transconjugantes (TC) de enterobacterias con fenotipo de resistencia disociada (RD) a cefalosporinas de tercera generación (CTG) y analizar su respuesta “in vitro” frente a ceftazidima (CAZ) y cefepime (FEP). Se estudiaron 15 WT (11 Escherichia coli, 3 Proteus mirabilis y 1 Klebsiella pneumoniae) y 12 TC. El perl de sensibilidad fue determinado por difusión por discos y sistema automatizado Vitek 2. Cinco de estos WT (1 E. coli y 1 P. mirabilis con mecanismo CMY-2; 2 E. coli y 1 P. mirabilis portadores de mecanismos CTX-M) y 2 TC con mecanismo CMY-2 fueron estudiadas por medio de curvas de muerte llevadas a cabo en medio Mueller-Hinton con concentraciones de FEP y CAZ de 2xCIM y 4xCIM. Se hicieron recuentos a las 0, 3, 6 y 24h de incubación. La actividad bactericida fue denida como la disminución igual o mayor a 3log10. Todas las TC con mecanismos CTX-M-2, 14 o 15 presentaron un perl de RD frente a CTG: resistencia a CTX y sensibilidad a CAZ. No se observó el mismo perl en las TC con mecanismo CMY-2: resistentes a CTX y a CAZ. Las curvas de letalidad mostraron que frente a C A Z l o s W T c o n m e c a n i s m o C M Y- 2 presentaron recrecimiento luego de 3h de incubación. FEP demostró actividad bactericida
tanto frente a WT como a TC. La acción de los antibióticos frente a los WT con mecanismos CTX-M-2 y 14 mostró recrecimiento frente a FEP y muerte cuando se los enfrentó a CAZ. Los resultados indican que no todas las enterobacterias con RD a CTG responden de igual forma a los antibióticos. No en todos los casos el único tratamiento posible son los carbapenemes. La detección del mecanismo de resistencia involucrado podría contribuir a la decisión del tratamiento clínico.
26 DETECCIÓN DE RESISTENCIA A QUINOLONAS MEDIADA POR PLÁSMIDOS (PMQR) EN AISLAMIENTOS CLÍNICOS DE ENTEROBACTERIAS DE LA REGIÓN ROSARIO. Virginia Aquili1, Casabonne C1, Gonzalez A1, Subils T1, Franco Y2, Caprile L3. 1 Bacteriología, Facultad Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, UNR, 2 Bacteriología, Sanatorio los Alerces, Rosario, 3 Hospital Provincial de Rosario, Rosario. Las quinolonas (QL) se usan para el tratamiento de diferentes tipos de infecciones bacterianas generando la aparición de cepas resistentes. Los principales mecanismos de resistencia están mediados por elementos cromosómicos, sin embargo, en 1998, se describió la resistencia a QL mediada por plásmidos transferibles. El gen qnr es el responsable de dicha resistencia. Se han identicado seis familias siendo qnrA, qnrB y qnrS las más frecuentes. El objetivo de este trabajo fue evaluar la presencia de genes qnr A, B, S en cepas de enterobacterias aisladas de pacientes de la región Rosario. Para ello, se recolectaron cepas con resistencia disminuida a QL y/o cepas con resistencia a QL y presencia fenotípica de β-lactamasas. La susceptibilidad a los antimicrobianos así como la detección de β-lactamasas se realizó según las recomendaciones propuestas por el CLSI. La presencia de los genes qnr (A, B, S) se determinó mediante PCR utilizando primers especícos. De los 59 aislamientos analizados, se detectó el gen qnr en 5 cepas (8.47%). El alelo qnrB se detectó en 3 aislamientos de Klebsiella 73
pneumoniae (Kpn) (5.08%) y en 1 aislamiento de Escherichia coli (E. coli) (1.69%). El alelo qnrS se detectó en 1 aislamiento (1.69%) de Kpn. No se detectó el gen qnrA en las cepas estudiadas. De los 5 aislamientos qnr positivos, 2 exhibieron fenotípicamente la presencia de βlactamasas de espectro extendido (BLEE) y 2 carbapenemasas (KPC), todas tipicadas como Kpn. El aislamiento de E. coli mostró resistencia disminuida a QL. Este estudio provee los primeros reportes de detección de genes qnr en aislamientos clínicos de la región Rosario. Es importante destacar la relación establecida entre los determinantes qnr con la producción de BLEE/KPC así como con la resistencia disminuida a QL. La diseminación horizontal de mecanismos de resistencia a QL abre la posibilidad de una rápida expansión de su resistencia.
estudiadas mostró valores de Concentración Inhibitoria Mínima (C.I.M) dentro la categoría sensible según los puntos de corte establecidos por CLSI 2017, no registrándose ninguna cepa en la categoría de intermedio ni resistente a ceftarolina. Por la Técnica de difusión en disco (Kirby-Bauer) los resultados coinciden con los arrojados por metodología de microdilución (Phoenix). La ceftarolina mostró excelente actividad in vitro frente a las cepas de Satphylococcus aureus Meticilino Sensibles (SAMS) y Staphylococcus aureus Meticilino Resistentes (SAMR) por lo que podría presentarse como una alternativa prometedora en el tratamiento de infección de piel y partes blandas y en neumonía adquirida en la comunidad causadas por estas bacterias.
MICROBIOLOGÍA GENERAL Y APLICADA 47 VIGILANCIA DE SUSCEPTIBILIDAD IN VITRO A CEFTAROLINA EN CEPAS DE Staphylococcus aureus. Martinez M, Rossi P, Caprile L, Gonzalez A, Scaraa L. Hospital Provincial de Rosario, Rosario.
42 APTITUD TECNOLÓGICA Y SELECCIÓN DE BACTERIAS ÁCIDO LÁCTICAS AISLADAS DE LECHE CRUDA DE OVEJA. Godaly MS, Alvarez de Toledo D. Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires.
Uno de los grandes problemas que enfrenta en la actualidad la Salud Pública es la creciente emergencia de resistencia de las bacterias a los antibióticos convencionales. Hoy en día se están estudiando nuevos fármacos para tratar dichas bacterias como es el caso de la ceftarolina, un antibiótico con alta anidad por las PBP2a, las PBP alteradas responsables de la Meticilino Resistencia en Staphylococcus aureus. El objetivo de este trabajo fue evaluar la susceptibilidad in vitro de ceftarolina en cepas de Staphylococcus aureus recuperadas de muestras biológicas en el período comprendido entre noviembre 2017 y febrero de 2018. Se aislaron 70 cepas de las cuales 38 resultaron Meticilino Resistentes y 32 Meticilino Sensibles. A todas ellas se les determinó el valor de la Concentración Inhibitoria Mínima (C.I.M) por la técnica de microdilución arrojados por Phoenix utilizando paneles PMIC/ID. También se evaluó la susceptibilidad de las cepas a través del método de difusión con discos (Kirby-Bauer). El 100 % de las cepas
Las BALs aisladas de leche de oveja podrían ser utilizadas como cultivos iniciadores en subproductos como quesos artesanales. Éstos son de gran interés económico en producciones regionales de la Argentina. Es importante realizar una selección de las cepas ya que no todas poseen igual potencial tecnológico deseable. Las BALs poseen propiedades tecnológicas tales como acidicación y gelicación de la leche, actividad lipolítica y proteolítica, entre otras. El objetivo de este trabajo fue realizar un estudio del potencial tecnológico de cepas de BALs aisladas de leche cruda de oveja y su selección para ser utilizadas como cultivos iniciadores. Se tomaron muestras directamente del batch de recolección de la leche. Los primoaislamientos se realizaron en Agar MRS (Lab. Britania) bajo condiciones de anaerobiosis (Gaspak™) a 37º C durante 48 hs. Se aislaron hasta el momento 6 cepas de BALs. La identicación fue realizada en base a tinción de Gram, morfología, prueba
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de catalasa y movilidad. Se estudiaron cuatro propiedades tecnológicas, a saber: coagulación de la leche, actividad proteolítica, actividad lipolítica y formación de diacetilo. La coagulación de la leche se realizó con leche UHT más 1% V/V de la cepa; la proteólisis se evaluó cualitativamente en Agar PCA (Lab. Britania) más 10% de leche en polvo descremada; la lipólisis se realizó en ACC (Lab. Britania) más 1% de crema de leche esterilizada. Estas tres determinaciones fueron incubadas a 37º C durante 72 hs.; la producción de diacetilo se evaluó en leche UHT y se incubó a 37º C por 24 hs. Las cepas aisladas fueron cocobacilos y bacilos Gram (+), catalasa (-) e inmóviles. Los resultados mostraron que las seis cepas coagularon la leche y produjeron diacetilo. Respecto de la actividad lipolítica y proteolítica, dos cepas destacaron cualitativamente. Estas aptitudes tecnológicas demostradas hasta el momento, son importantes ya que podrían utilizarse para la formación del coágulo en la fabricación artesanal de quesos, y la formación de diacetilo, actividad proteolítica y lipolítica colaborarían en la maduración, textura nal y desarrollo de aromas distintivos. A partir de los parámetros funcionales evaluados, es posible inferir el desempeño de las cepas lácticas estudiadas, permitiendo con ello mejorar la calidad microbiológica del subproducto lácteo terminado. 44 REDUCCIÓN DE LA VIABILIDAD DE Salmonella spp EN SUPERFICIES DURAS MEDIANTE TRATAMIENTO CON ÁCIDO LÁCTICO. Aquili V1 Gonzalez A1, Muñoz Vidal F1, Brambilla M1, Subils T1, Godoy V2, Acuña V2, Rouillon A2, Casabonne C1. 1 Área Bacteriología, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, UNR, 2 Congelados del Sur S.A., Rosario, Santa Fe. La contaminación de equipos, supercies e instalaciones por bacterias patógenas, como Salmonella spp, podría ser responsable de la posterior contaminación de los alimentos durante su procesamiento. En la industria, la
descontaminación de las supercies representa un gran desafío debido a la resistencia de muchas bacterias potencialmente patógenas a los desinfectantes tradicionales y a la característica corrosiva o tóxica de muchos ellos. El objetivo de este estudio fue validar el uso de ácido láctico (AL) como una intervención estratégica para reducir la carga bacteriana de Salmonella enterica subespecie entérica durante el proceso de picado de carnes de pollo en la elaboración del producto “Formas de pollo”. Las muestras empleadas fueron tiras de pechuga de pollo de 8x2x1 cm. Las piezas de la picadora fueron utilizadas sin inocular, inoculadas con 8 log y 3 log UFC/ml de Salmonella enterica subespecie enterica ATCC 13076 (S. enterica) por inmersión e inoculadas bajo las condiciones antes descriptas y tratadas posteriormente con AL a concentraciones de 3, 4 y 5% por pulverización. Las muestras de pollo fueron picadas y posteriormente, se realizó el recuento de UFC/ml en agar Salmonella-Shigella y agar Xilosa-Lactosa-Desoxicolato. Al contaminar las supercies con un inóculo bacteriano bajo (3 log UFC/ml), se implementó un enriquecimiento selectivo previo a la siembra en medios selectivos. Las muestras de pollo contaminadas con alto inóculo bacteriano, demostraron que, luego de la pulverización con AL, los recuentos bacterianos se redujeron en 5-6 log, mientras que las contaminadas con bajo inóculo bacteriano, demostraron que, luego de la pulverización con AL, los recuentos bacterianos se redujeron a no detectables. El tratamiento con AL redujo signicativamente los niveles de S. enterica. Estos datos serán útiles para la industria de la carne como una posible intervención contra S. enterica contribuyendo al control de la Enfermedades Transmitidas por Alimentos. 83 COMPORTAMIENTO DEL FORMULADO BIOLÓGICO DE Bacillus subtilis SOBRE Fusarium sp EN CULTIVO DUAL. Marchessi N 1 , Trejo N 1 , Taglialatella D 2 , Salvarezza A2, Corvalan G1, Pezuk A1, Galian L1. 1 Cátedra de Microbiología, Facultad de Ciencias Agrarias UNLZ, Lomas de Zamora, 75
Buenos Aires, 2 Cátedra de Fitopatología, Facultad de Ciencias Agrarias UNLZ, Lomas de Zamora, Buenos Aires. Una alternativa para el manejo de enfermedades podría ser la inoculación con Bacillus subtilis (Bs), bacteria promotora del crecimiento vegetal, PGPR con posibles aptitudes para el control biológico de enfermedades, PGPB. Una estrategia de uso puede ser la aplicación del formulado biológico antes de la siembra. El objeto de esta experiencia fue evaluar in vitro el efecto antagónico de Bs sobre Fusarium sp (Fus) a partir de un inoculante comercial. Las cepas de Fus se aislaron de semillas de trigo procedentes de Tres Arroyos (Bs. As) y Nogoya (Entre Ríos), en medio APG al 2% para realizar el ensayo. Colonias de Bs se aislaron a partir del inoculante comercial en placas de Petri con agar nutritivo (Redcai). Posteriormente, se sembró tres repeticiones por quintuplicado en la placa con un medio mix (APG y AN) un disco de 6 mm de diámetro con Fus y a 2 cm se sembró en estría Bs. Como testigo se sembró solo Fus. Para cuanticar se midió el radio en mm de la colonia testigo (r1) y de la colonia en interacción con Bs (r2), a los 4, 7 y 11 días. Se determinó un porcentaje de inhibición del 50 al 65% de Bs. El efecto antagonista del Bs-Fus se manifestó morfológicamente por la presencia de un micelio aéreo denominado “aerial uffy mycelium” con conidios en ramillete. Estos resultados permitirán planicar ensayos en invernáculo y a campo para vericar la ecacia y eciencia del uso del formulado comercial con Bs en el manejo integrado de esta enfermedad. 60 ANÁLISIS DE GENÓMICA COMPARATIVA M U E S T R A U N C L A D O D E C E PA S P O R TA D O R A S D E G E N E S C O N IMPLICANCIA CLÍNICA EN LA ESPECIE AMBIENTAL Acinetobacter bereziniae. Brovedan M 1 , Repizo GD 1 , Espariz M 1 , Marchiaro P1, Viale AM1, Limansky A1. 1 Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario (IBR, CONICET), Microbiología, FCByF, Universidad Nacional de Rosario, Rosario, Argentina.
76
Acinetobacter bereziniae (Abe), especie ambiental poco asociada a infecciones nosocomiales, exhibe actualmente cepas resistentes a carbapenemes (1). Reportamos recientemente el genoma de una cepa local portadora de blaNDM-1 (1 y 2), siendo 7 los depositados al presente. Evaluamos la variabilidad genética intraespecíca, y la presencia de cepas que comparten características adaptativas. Incluimos en este estudio estos 7 genomas y 2 Acinetobacter sp (Ag2 y WC-743) identicados aquí como Abe mediante "Average Nucleotide Identity" (3). El empleo de "Pan-Genomes Analysis Pipeline" (PGAP) nos permitió conocer que 70% de los genes de Abe pertenecen al "core” (n= 3014), mientras que 30% restante (n= ~ 1200) es accesorio. Similar análisis con A. baumannii (Aba, 4), mostró 1590 genes "core", constituyendo 40% del total. La comparación del pangenoma de Abe y Aba mostró 7508 y 9513 genes, respectivamente. Estos resultados muestran que Abe es una especie de baja plasticidad. El análisis logenético basado en las secuencias concatenadas de 1663 genes del genoma “core” de las cepas de Abe incluyendo cepas tipo de A. gerneri y A. guillouiae, distinguió 4 grupos: i) NIPH3; ii) XH901; iii) CIP 70.12 y KCTC 23199 y iv) HPC229, CHI-40-1, 507_ABAU, WC-743 y Ag2. La evaluación de cepas que comparten características funcionales empleando OrthoMCL (2) mostró 3 grupos: i) CIP 70.12 y KCTC 23199 (aisladas en 1960); ii) NIPH 3 (1991) y iii) 507_ABAU, WC-743, Ag2, CHI-401, HPC229 y XH901 (desde 2005). El repertorio proteico mostró ausencia/presencia de genes codicantes de mecanismos de resistencia, factores de virulencia y transposones, en grupos i-ii, respecto de iii, respectivamente. Este trabajo aporta así evidencias de la capacidad de ciertas cepas de Abe de adaptarse a hábitats nosocomiales, explicando el hallazgo de esta especie en especímenes clínicos. 1-Brovedan et al, AAC, 2015; 2-Brovedan et al, Gen Announc, 2016; 3-Espariz et al, PLoS ONE, 2016; 4-Touchon et al, GenBiolEvol, 2014
77 Acinetobacter baumannii NCIMB8209: UNA CEPA AMBIENTAL AISLADA HACE MÁS DE 70 AÑOS QUE AYUDA A ENTENDER LA A D A P T A C I Ó N D E E S T E MICROORGANISMO AL MEDIO HOSPITALARIO. Repizo GD, Espariz M, Díaz Miloslavich JI, Viale AM. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario (IBR, CONICET), Microbiología, FCByF, Universidad Nacional de Rosario, Rosario, Argentina.
como Galleria mellonella y Caenorhabditis elegans. Proponemos a NCIMB8209 y a su cepa acompañante DSM30011 (Repizo et al. 2017) como cepas modelo para el estudio tanto de la evolución de Ab desde un organismo ambiental a un patógeno nosocomial multirresistente así como de la adaptación al hospedador. Repizo GD et al. Genome Biol Evol. 9:22922307.
Acinetobacter baumannii (Ab) es un importante patógeno nosocomial oportunista cuyo reservorio ambiental es desconocido. La cepa de Acinetobacter NCIMB8209 fue aislada mediante enriquecimiento de la microbiota asociada al arbusto resinoso desértico guayule en 1944, antes del uso masivo de antibióticos. En este trabajo reportamos un análisis comparativo de la secuencia completa de su genoma, el cual posee 3,9 Mpb y 3.752 secuencias codicantes (CDS). El trazado logenético basado en genes “core” de especies del género Acinetobacter indicó la pertenencia de NCIMB8209 a Ab, y un análisis MLST utilizando los 7 genes “housekeeping” del esquema Pasteur indicó un ST previamente no reportado. NCIMB8209 carece de islas de resistencia antimicrobiana y de defensa incluyendo el sistema de secreción tipo 6 (T6SS) y el sistema CRISPR-cas. En concordancia, NCIMB8209 presentó resistencia antimicrobiana solo ante ampicilina reejando la presencia de los genes para βlactamasas endógenas ampC y blaOXA-51, esta última asimismo marcador de la especie. NCIMB8209 porta 16 secuencias distintas de inserción (IS), algunas no reportadas previamente, y muchas de ellas interrumpiendo genes que codican para estructuras de supercie de la bacteria. Una reconstrucción bioinformática de sus rutas catabólicas indicó loci relacionados con la degradación de constituyentes y productos de plantas, sugiriendo que las mismas podrían constituir reservorios naturales de Ab. Contrariamente a otros aislamientos de Ab, NCIMB8209 mostró una baja virulencia en modelos de infección 77
ÍNDICE DE TRABAJOS CIENTÍFICOS POR TEMAS 8º CONGRESO BIOQUÍMICO ROSARIO 2018
Jueves 7 de junio de 2018 - (14:00 – 16:00 hs) Nº TRABAJO
TÍTULO DEL TRABAJO
Área temática: HEMATOLOGÍA 18 21 22 33 51
Análisis de resultados de resistencia a la proteína C activada en 2 períodos con distintas condiciones de trabajo. Comparación de dos reactivos comerciales de tiempo de tromboplastina parcial activado (APTT). Determinación de rangos normales de parámetros de coagulación en caninos sanos. Evaluación del desempeño de los procedimientos de medida del laboratorio en prácticas de hemostasia utilizando la escala six sigma. Correlación entre el índice de resistencia a la proteína C activada y el factor V de Leiden.
Área temática: GENÉTICA 4 52
Diagnóstico molecular diferencial para síndrome de noonan mediante next generation sequencing (NGS). Diagnóstico de hiperplasia suprarrenal congénita atípica: detección de variantes en el gen CYP21A2.
86
Búsqueda de mutaciones en el exón 3 y 4 del gen de apolipoproteina a1 (ApoA1), en individuos chilenos con niveles normales y disminuidos de colesterol HDL.
103
Estudio estadístico de screening de primer trimestre para determinación de riesgo de trisomía 21.
Área temática: ENDOCRINOLOGÍA
78
12
Comparacion de un metodo comercial inmunoturbidimetrico para la medicion de la hemoglobina glicosilada (HbA1c) contra el método de referencia (HPLC).
15
Microalbuminuria: un marcador de daño renal temprano en niños y adolescentes con diabetes mellitus tipo 1
31
Diabetes mellitus tipo 1 en niños menores a 5 años.
59
Agregación eritrocitaria en pacientes diabéticos pediátricos
PAG.
Viernes 8 de junio de 2018 - (14:00 – 16:00 hs) Nº TRABAJO
TÍTULO DEL TRABAJO
PAG.
Área temática: BIOCLÍNICA CLÍNICA 13
Evaluación de factores de riesgo cardiovascular en estudiantes de bioquímica de la Universidad Nacional del Litoral.
14
Ácidos biliares y su importancia en la detección de colestasis intrahepática gestacional, hospital josé maría cullen período 2015-2017.
16
Relación entre los niveles de vitamina D y parámetros seminales en pacientes infértiles.
45
Evaluacion del grado de control lipídico alcanzado en pacientes con tratamiento farmacologico que asisten al PAMI I.
49
Estudio de prevalencia de fan positivo en una poblacion de pacientes ambulatorios en la ciudad de rosario.
57
Biomarcadores de estres oxidativo en chagas.
63
Determinación de hemoglobina glicosilada en muestras con escaso volúmen.
66
Detección de ac anti-brucella en el período 2014 a 2017 en muestras procesadas en el laboratorio CEMAR.
69
Marcadores serológicos en el diagnostico de enfermedad celiaca. Revisión de cumplimiento con el último consenso 2017 en un hospital municipal de Bahia Blanca
72
Creatinina: comparación de método Jaffé cinético con compensación vs enzimático
74
101
Diseño de una herramienta a utilizar en investigación sobre enfermedad renal crónica y urolitiasis en estudiantes de Santa Fe: cuestionario de historia clínica y actividad física. Determinaciones complementarias para el diagnóstico inmunológico de enfermedad celíaca en pacientes con déficit de inmunoglobulina a en muestras recibidas durante el año 2017 en laboratorio CEMAR.
102
Marcadores serológicos para enfermedad celíaca según sexo y edad y búsqueda de anticuerpos a-péptidos desaminados de gliadina en menores de 2 años en muestras recibidas en el CEMAR.
104
Hábito alimentario como factor de riesgo de urolitiasis y enfermedad renal crónica: evaluacion de instru-mentos para el registro de la alimentacion de alumnos universitarios. Pre-test. Primera parte.
79
XVIII JORNADAS ARGENTINAS DE MICROBIOLOGÍA Viernes 8 de junio de 2018 - (10:30 – 12:00 hs) Nº TRABAJO
TÍTULO DEL TRABAJO
PAG.
Comunicaciones Orales 7
20 años de experiencia de un instituto de Buenos Aires en la infección por el Virus Linfotrópico T Humano tipo 1 y 2 (HTLV-1/2).
19
Efecto en la expresión de determinantes de virulencia en Escherichia coli shigatoxigénicas por hidróxido de bismuto coloidal.
40 53
Aplicación de la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR) para la vigilancia ambiental de Legionella pneumophila. El sistema de recombinación sitio-específico XerC/D de Acinetobacter baumannii promueve la plasticidad de plásmidos portadores de plataformas de resistencia a carbapenemes mediada por blaoxa-58.
58
Primer aislamiento reportado de Candida ciferrii en un paciente fibroquístico
96
Evaluación de la capacidad de formar biofilms y de la resistencia a la desecación de aislamientos ambientales de Acinetobacter baumannii resistentes a carbapenemes.
Jueves 7 de junio de 2018 - (13:00 – 14:00 hs) Nº TRABAJO
TÍTULO DEL TRABAJO
Exposición de Pósters - Área temática: BACTERIOLOGÍA 4
30 32
80
Arcanobacterium haemolyticum: ¿lo tenemos presente a la hora de buscar el agente causal de faringitis/escarlatina? Reporte de caso en hospital público de la ciudad de Rosario. Infecciones urinarias por Streptococcus agalactiae y Staphylococcus saprophyticus en mujeres embarazadas y no embarazadas. Microorganismos más frecuentes en muestras respiratorias de pacientes pediátricos con fibrosis quística y su distribución por edades.
37
Listeriosis materno neonatal: comunicación de dos casos en una maternidad.
99
Prevalencia de Staphylococcus aureus productores de leucocidina de PantonValentine (LPV) en cepas intra y extrahospitalarias en dos hospitales públicos de Rosario.
8
Aggregatibacter aphrophilus como agente causal de absceso cerebral.
46
Dermabacter hominis en un paciente inmunocompetente: un caso para no hacer oído sordo.
50
Conjuntivitis y septicemia por Listeria monocytogenes en un neonato prematuro.
PAG.
55 56 61 62 82
Raro… como meningitis a Staphylococcus aureus. Jerarquización del estudio de micoplasmas urogenitales y Chlamydia en Maternidad Pública de Rosario. Revisión de solicitudes y resultados en un período anterior y posterior a cambio de protocolo. Bacteriemia por Campylobacter jejuni en paciente pediátrico. Reporte de un caso clínico, Hospital del Niño Jesús, Tucumán. Aislamiento de Salmonella typhimurium en hemocultivo y muestra de absceso en paciente pediátrico del Hospital del Niño Jesús. Reporte de un caso clínico. Aislamiento de Arcobacter butzleri en líquido abdominal de paciente con peritonitis apendicular.
90
Patología meníngea por Aerococcus viridans (aev).
41
Primer abordaje de nuestro equipo de trabajo en la detección de Chlamydia trachomatis por PCR en muestras de orina.
80
Utilización del FilmArray® BCID panel en shock séptico: reporte de casos.
43
Panel respiratorio FilmArray: aplicación en niños con dificultad respiratoria severa.
84
Identificación directa en líquido cefalorraquídeo utilizando espectrometría de masas (MALDI-TOF MS) en un paciente con meningitis neonatal tardía por Streptococcus agalactiae.
Exposición de Pósters - Área temática: MICOLOGÍA 5
Criptococosis en paciente cirrótica.
9
Producción de biopelículas in vitro en aislamientos de Candida spp recuperadas de infecciones genitourinarias.
38
Proteinasas y fosfolipasas en especies del complejo Candida parapsilosis.
54 68
Crytococcus gattii descripción de un caso autóctono en la provincia de Tucumán, Argentina. Histoplasmosis diagnosticadas en la Red de Laboratorios de la Dirección Bioquímica Rosario: 7 años de historia.
Exposición de Pósters - Área temática: PARASITOLOGÍA 10
Lophomoniasis: ¿una enfermedad emergente?
11
Prevalencia de parásitos intestinales en niños que asisten al Hospital del Niño de San Justo, La Matanza, Argentina.
Exposición de Pósters - Área temática: VIROLOGÍA 79 85
Diarreas agudas por rotavirus en un hospital general en el período 2013-2017. ¿impactó el ingreso de la vacuna en calendario obligatorio? Retrospectiva 2017 de infecciones respiratorias en población hospitalizada de Córdoba: destacando la circulación de MPVH y COVH.
81
Viernes 8 de junio de 2018 - (13:00 – 14:00 hs) Nº TRABAJO
TÍTULO DEL TRABAJO
Exposición de Pósters - Área temática: BACTERIOLOGÍA 2 78 3 6
Prevalencia de mollicutes en caninos y primer aislamiento en el país de Ureaplasma canigenitalium. Determinación de la presencia de Salmonella spp en derivados de soja y alimentos balanceados. Desempeño de chromagartm MRSA frente al cultivo clásico y prevalencia de portación nasal de MRSA en individuos ambulatorios sanos. Estudio de la colonización bacteriana y susceptibilidad antibacteriana en pacientes quemados de un hospital municipal de la ciudad de Rosario.
24
Episodios de bacteriemia en un hospital pediátrico de Santa Fe. Año 2016.
25
¿La colocación de piercing constituye un factor de riesgo para desarrollar una infección grave?
75
Meningitis por Streptococus pyogenes.
27 48 28 67 39 73 94 70 81
Serogrupos y susceptibilidad antimicrobiana de Shigella aisladas de coprocultivos pediatricos en el Hospital Dr. O. Alassia de la ciudad de Santa Fe. Epidemiología de los serotipos de Escherichia coli productora de shigatoxinas asociadas a síndrome urémico hemolítico en zona rosafe. Experiencia en cultivos semicuantitativos de secreciones conjuntivales. Meningitis bacteriémica recurrente por Pasteurella multocida. Presentación de un caso. Vaginosis bacteriana en embarazadas y su impacto en la prematurez y en el bajo peso al nacer. Sepsis neonatal precoz por Streptococcus pneumoniae: importancia del estudio de membranas ovulares en gestas con ruptura prematura de membranas. Caso clínico. Importancia de la detección de Staphylococcus aureus meticilino resistente (SAMR) en mujeres embarazadas. Evaluación del aumento de casos de sífilis en el Hospital J. B Alberdi. Secretaría de Salud Pública de Rosario, Santa Fe. Infecciones asociadas a la atencion en salud en las unidades críticas del Hospital S.A.M.I.C. Obera, Misiones. Estudio transversal.
Exposición de Pósters - Área temática: ANTIMICROBIANOS
82
17
Utilidad de un método de tamizaje para detectar la resistencia bacteriana a fosfomicina y colistina en muestras de origen animal.
65
Diferencias en la interpretación de las pruebas de susceptibilidad a los carbapenemes en Aeromonas spp: Vitek-2 vs difusión en agar.
64
Detección de carbapenemasas en especies del género Aeromonas spp por método de inactivación a carbapenemes.
23
Nueva plataforma genética portadora de blakpc en aislamientos clínicos locales de enterobacterias resistentes a carbapenemes.
PAG.
20
Enterobacterias con resistencia disociada a cefalosporinas de tercera generación: respuesta “in vitro” a ceftazidima y cefepime.
26
Deteccion de resistencia a quinolonas mediada por plasmidos (PMQR) en aislamientos clinicos de enterobacterias de la region Rosario.
47
Vigilancia de susceptibilidad in vitro a ceftarolina en cepas de Staphylococcus aureus.
Exposición de Pósters - Área temática: MICROBIOLOGÍA GENERAL Y APLICADA 42 44 83 60
77
Aptitud tecnológica y selección de bacterias ácido lácticas aisladas de leche cruda de oveja. Reducción de la viabilidad de Salmonella spp en superficies duras mediante tratamiento con ácido láctico. Comportamiento del formulado biológico de Bacillus subtilis sobre Fusarium sp en cultivo dual. Análisis de genómica comparativa muestra un clado de cepas portadoras de genes con implicancia clínica en la especie ambiental Acinetobacter bereziniae. Acinetobacter baumannii NCIBM8209: una cepa ambiental aislada hace más de 70 años que ayuda a entender la adaptación de este microorganismo al medio hospitalario.
83
ÍNDICE DE TRABAJOS CIENTÍFICOS POR AUTOR Autor Acardi, Horacio Hugo Acebal, Stella Maris Adriana, Benmelej Aguilar, Fernando Alcaraz, Eliana Almara, Adriana Alonso, Giselle A. Alvarez, G Alvarez, Claudia Anahí Alvarez De Toledo, Delfina Amable, Valeria Amigot, Susana Anchart, Eduardo Antay Munoz , Jazmin Antich Rizza, Constanza Aquili, Virginia Arciero, Graciela Alicia Arguello, Julia Arias, Mauro Aro, Carolina Assa, Jose Daniel Astbury, Maria De Los Angeles Avile, Romina Badano, Andrea Balagué, Claudia Ballerini, Viviana Baquedano, Maria Sonia Barbero, Gabriela Baroni, Maria Rosa Barrionuevo Medina, Evangelina Del Valle Barrios, Edgardo Cristian Bartolome, Jimena Bastone, Laura C Batistti, German Benegas, Liliana Benencio, Paula Benitez, Graciela Benso, Miriam Berini, Carolina Andrea Bertona, Maria Lilian Bevione, Mariana Biasoli, Marisa Biglione, Mirna Blesa, Maria Jose Blesa, Maria José Bletler, Caren Boleas, Mariana Bonifacino Belzarena, Rosina Boretto, Jesica Guadalupe Borgo, Monica Borgogno, Joaquin Leandro Braida, Ariel Brisson, Maria Eugenia 84
N° Poster 55, 58, 68, 84 66, 101 102 13 94 95, 96 67 73, 75 4 41 42, 105 17 38, 55, 58, 68, 84 4, 55, 56, 58, 66, 68, 70, 84, 101, 102 95, 96 54 6, 19, 26, 48 4, 56, 68 90, 99 5, 8 13, 24, 25, 27, 32 54, 61, 62 79 55 58, 68 19 23, 55, 68, 90, 99 18 45, 85 24, 25, 27, 32 61, 62 6 74, 104 51, 52 33 55, 84 7 68 85 7 13 12 38 7 24 27, 32 55, 58, 68, 84 67 74, 104 32 55, 58, 68, 84 24 65 74, 104
Brisson, Cecilia Brovedan, Marco Brun, Bianca Cabagna, Mariana Calatayud, Silvia Andrea Calgaro, Ileana Maillen Calzetta Resio, Andrea A Camara, Jorge Camara, Alicia Cameranesi, Maria Marcela Campora, Micaela Canetti, Virginia María Cannistraci Giolito, Roxana Capdevila, Abelardo Alfredo Capitaine Funes, Carlos Caprile, Luis Alberto Carnino , Regina Carrera, Larisa Carrillo, C Casabonne, Cecilia Castañeira, Mariana Castellani, Marilén Ceruti, Maria Jose Chainghan, Chantai Cipriani, Reinaldo Colla, Cora Colmegna, Marìa Verònica Colombo, Laura Graciela Colussi, Vanesa Conforti, Carina Conforti C, Coria, Maria Del Pilar Cortez, K Corvalan, Gladys Costantini, Maria Soledad Courtade, Valeria Giselle Cristobal, Sabrina Anali Cuestas, Veronica Cuffini, Cecilia Dalman, Maria Del Carmen Darrigo, Mabel De Gregorio , Stella De Lorenzi, Paola S Degiovanni, Gabriela Emilce Delfino , Carlos Deluca, Gerardo D Denner, Susana Destefano, Vanesa Mariana Di Conza, Jose Di Cosco, Adriana Di Santolo, Analia Diaz, Maria Susana Diaz Miloslavich, Juan Ignacio Díaz Ms, Dip, Gustavo Ariel Diviani, Romina Doná, Florencia Dopico, Dario Dostal, Cecilia
74, 104 60 34 13 66, 101, 102 67 105 85 85 53 2, 3, 28 59 37 95, 96 29 26, 47, 48 18 15, 31, 59 86 6, 19, 26, 48 15, 31 10 57 18 45 22 45 64, 65, 79, 82 74, 104 56 4 30 86 83 8 54 41, 46, 50 74, 104 85 64, 79, 82 57 96 101, 102 24, 27, 32 78 40 74, 104 10, 11 20 4, 56 4, 56 4, 23, 55, 56, 58, 68, 84, 99 77 4 4, 12, 49, 55, 56, 58, 66, 68, 70, 72, 84, 101, 102 57 41 10, 11 18, 21, 22, 33 85
Duarte, María L. Ducasa, Nicolas Dutto, Magdalena Beatriz Elias, Marta G Ernst, Adriana Margarita Espariz, Martin Espina, Janet M. Fabro, Ana Patricia Fadon, Natalia A. Fainberg, Magdalena Famiglietti, Angela Fay, Fabian Fernandez, Natalia Fernandez, Cintya Fernandez, Fernando Fernandez, Veronica Fernández Coria, Rodrigo Ferrand, Carolina Fiori, Mariana Foccoli, Monica Follonier, Adriana Folonier, Adriana Fornasiero, Laura Fossaroli, Gustavo Francia, Lucrecia Franco, Yubelli Franco, Maria Friedman, Laura Frutos, Maria Celia Funes, Paula Funes, Sebastian Funes, Paula Belen Galian, Liliana Gallardo, Liliana Gallucci, Georgina Gandini, Virginia Garay Gonzalez, Ana Paula Garberi, María Sol Garcia, Miriam Garcia, Miriam Garcia, Irene Garcia Oro, Maria Cecilia Gelpi, Paula Gerber, Juan Fernando Gerrard, Gabriela Ghersevich, Sergio Gines, Melina Godaly, María Susana Godoy, Pablo Gomez, Gladys Gonzalez, Agustina Gonzalez, Cristina A Gosso, Maria Florencia Graciela , Nora Granados, Graciela Gregorini, Eduardo Gribaudo, Eliana Anabel Gueli, Gabriela Beatriz Guenzelovich, Graciela 86
46 7 68, 84 68, 84 58, 68 77 73, 75 13 73 31 95, 96 5, 8, 34, 80 14 37 68, 84 74, 104 6 5, 8, 80 18, 21, 22, 33 95, 96 74 104 18, 21, 22, 33, 51 70 50 26 37 95, 96 85 38 50 58, 68, 84 78, 83 58 29 9 73, 75 25 6 68 68, 84 85 73, 75 80 57 16, 29 22 42, 105 18, 68 54 6, 19, 26, 47, 48 91 34 78 55, 58, 68, 84 65, 82 66 70 4, 56
Gutierrez, Griselda Herrea Simo, Candela Hofer, Paola Fernanda Holzer, Mariela Hourquescos, Maria Del Carmen Ingaramo, Damian Irrazabal, Celica Leonor Iugman, Josefina Jaramillo , Carlos Alberto Jubilla, Mariana Andrea Kozicki, Graciela La Hoz, Maria Nuria Lagos, J Lapenta, Griselda Lejona, Sergio Lerman, Damian Liberatti, Carina Liebrenz, Karen Ivana Liendo, Matias E Limansky, Adriana Lioi, Susana Lobo, Mariana Lombardo, Alejandra Lopardo, Horacio Angel Losch, Liliana S Losch, Liliana S Lupachini, Evangelina Luque, Alicia Madeira, Maria Fernanda Manatini, Carina Manias, Valeria Manzur, Alejandra Marchessi, Nicolas Carlos Marchiaro, Patricia Marchisio, Martin Margenet, Leticia E. Mari, Raquel Marinovich, Joel Maroni, Georgina Marsili, Silvia Marsili, Nilda Marti, Maria Belen Martinez, Maria Carolina Martinez, Cecilia Martinich, Carina Massa, Estefania Matinich, Carina Matkowski, Graciela Mazzola, Mercedes Medina, Marcelo G Mejico, Guadalupe Mendez, Emilce De Los Angeles Mendosa, Maria Alejandra Meret, SofĂŹa Beatriz Merino, Luis A Merino, Luis A Michlig, Gilda Misto , Claudia Mobilia, Liliana
80 85 50 16 55, 58, 68, 84 2, 3, 28 95, 96 13 10 72 90, 99 72 86 94 49, 56 64 95, 96 20 85 23, 53, 60 57 69 12, 72 30, 39 17 40 70 38 34 14 46, 50 80 78, 83 23, 60 20 46 55, 58, 68, 84 69 49 74, 104 74, 104 57 47, 68 79, 86 55, 58, 68 29 84 39 63 40 34 20, 25, 41 25, 41, 46, 50 14 17 40 74, 104 5, 8, 80 67 87
Mollerach, Analía Mollerach, Analía Moran Barrio, Jorgelina Morano, Susana Morettin, Alejandra Nadalich, Maria Victoria Nagel, Alicia Naja, Jessica Lorena Nardín, María Elena Nogueras, Monica Nuñez, Javier Ochat, Carina Ostera, Delia Pagani, Ariana Parodi, Juan Pedro Passerini De Rossi, Beatriz Pendino , Ana Maria Peralta, Enzo Peretti, Silvia Perez, Germán R Perez Lindo, Mauro Perezlindo, Mauro Petraglia, Lisandro Peyronel, Esteban Pezuk, Angela Piaggio, Maria Virginia Piedrabuena, Milagros Pilar, Guzzetti Plaza, Maria Luisa Podesta, Maria Virginia Posadas, Marta Posella, Noelia Prestifilippo, Ana Prieto, Monica Prono Minella, Priscila Pugliessi, Marcelo Puig, Gabriela Pusineri, Elisabeth Miriam Racca, Liliana Radosevich, Cintia Lis Radzivoncik, Verónica Raimondi, Marcela Ramacciotti, Susana Ramos, Agñel Ramos, Claudia Rebagliati, Juan Daniel Repizo, Guillermo Daniel Reus, Verónica Rinaudo, Mariangel Rodriguez, Joaquin Rodriguez, Pamela E Rodriguez, Carlos Hernan Rohr, Cristian Romero, Maria Mercedes Rossi, Paola Guadalupe Ruggieri, Ana Laura Sabbatini, Julia Sadonio, Maria José Sadonio, Maria Jose 88
25 46, 50 53 41, 46, 50 5, 8 73, 75 25, 41, 46, 50 61, 62 46, 50 9 15 50 94, 103 23 68, 70, 84 95, 96 68 94, 103 14 51, 52, 63 80 5 73, 75 5, 8 83 15, 31 67 30 12 38 45 90, 99 67 37 74, 104 94, 103 55, 84 14 38, 45 27 9 9 37 5 46, 50 64, 65 53, 60, 77 59 23, 64, 65 22 85 95, 96 34 55, 58, 68, 84 47 34 85 15 31
Salerno, Estella Salvarezza, Adriana Sandoval, Eugenia Cristina Scapini, Juan Pablo Scarafia, Leila Lujan Schoeder, Gisel Sciara, Mariela Segovia, Glenda Carina Segovia, Glenda Sienko, Gabriela Silva Quintana, Sabrina Sjoberg, Ingrid Sobrero, Maria Silvina Soriano, Maria Alicia Sorribas, Carlos Sosa, Mónica Susana Soto, Luciano Eugenio Jesus Spariz, Martin Suarez, Sandra Suarez, Mariana Celeste Suarez, Luciana Subils, Tomás Taglialatella, Diana Taljame, Maria Laura Techera, Maria Lujan Torres Yepes, Karol Patricia Torruella, Mónica Torrus Tendero, Diego Tosello, Maria Elena Tozzini, Roberto Trejo, Nora Truccolo, Paula Ugolini, Antonela Valles, Julieta Vay, Carlos Vazquez, Martin Venturi Grosso, Agustina Verdile, Fabiana Viale, Alejandro Viegas Caetano, Jose Alberto Vigliarolo, Laura Ofelia Vila, Helvio Villafañe, Noelia Villalba, Juan Manuel Von Spech, Martha H Weber, Micaela N Yarros, Agustina E Zambon, Omar Zárate, María Del Rosario Zubillaga, Ezequiel Zurbriggen, Maria Laura
14 83 10, 11 2, 3, 28 47 22 80 25 41 37 45 18 74, 104 85 2 59 12, 68, 72 60 18, 21, 22, 33, 51 30, 39, 73, 75 79 19, 26 83 6 49 35 51, 52, 63 91 38 29 83 82 80 4, 55, 58, 68, 82, 84 95, 96 34 39 73, 75 23, 53, 60, 77 30, 39 30, 39, 73, 75 9 13 82 91 17 17 82 15 80 24, 27, 32, 41
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