Utilidad de las pruebas rápidas para VIH
Infecciones por virus de la inmunodeficiencia humana: tópicos de interés en el 2012 Octubre 19
Santiago Estrada, M.D. Director General Laboratorio Clínico Congregación Mariana www.labcongregacion.org.co
Clases de pruebas para el diagnóstico de VIH
ELISAs 1° generación: lisados purificados de VIH. Sensiblidad y especificidad disminuidas. 2° generación: proteinas reconvinantes o péptidos sintéticos para VIH 1y2 3° generación: elisa emparedado con Ag como conjugado. Alta sensiblidad y redujeron el periodo de ventana considerablemente. 4°generación: detectan Ag y Ac.
Pruebas rápidas Caracteristicas • Rápida: se obtiene el resultado en menos de 30 minutos. • Simple: se realiza en 3-4 pasos, requiere mínimo entrenamiento y equipo. • De fácil interpretación: formato de tarjeta o tirilla con reacción visual. • Conservación: menos de 30°C, no requieren refrigeración • Bajo costo TDR/SDI/DE/03.1 Laboratory-based evaluation of rapid syphilis diagnostic 2003
Clases de pruebas para el diagnóstico de VIH
Pruebas rápidas • Aglutinación • Inmunofiltración • Inmunocromatografia • Dipstick Lectura por mancha de color, linea o aglutinación de partículas La mayoría se realizan en 20 minutos por lo que se conocen como pruebas simples/rápidas World Health Organization.HIV Assays: Operational Characteristics Report 14 / Simple/Rapid tests. 2004
Terminología
Prueba diagnóstica: se realiza la prueba de VIH en personas teniendo en cuenta sus manifestaciones clinicas (signos y síntomas). Prueba de tamizaje: se realizan la prueba de VIH en todas las personas de una población definida. Prueba blanco: se realiza la prueba de VIH en subpoblaciones de personas de alto riesgo, basado este en sus conductas de riesgo o características demográficas. Opt-out tamizaje: realizar una prueba de VIH previa notificación al paciente que la prueba se hará; el consentimiento se asume a menos que el paciente lo rechace.
Impacto de las pruebas rápidas en la Salud Pública
Alta tasa de personas que no reclaman sus resultados. En el 2000 en USA, 31% de las personas no reclamaban sus resultados. Necesidad de un resultado inmediato para definir una conducta. Salas de parto. Manejo de la exposición con y sin riesgo biológico. Realizar tamizajes en poblaciones de alto riesgo.
Conocimiento del estadio serológico de personas con VIH en USA
Número de personas infectadas con VIH
1,039,000 – 1,185,00
Número de personas que desconocen su infección
252,000 - 312,000 (24%-27%)
Estimativo anual de nuevas infecciones
40,000
Glynn M, Rhodes P. 2010 HIV Prevention Conference
Avances en la Prevención del VIH (AHP): nuevas estrategias para cambiar la epidemia
Cuatro prioridades: 1.
Ofrecer de rutina la prueba de VIH en todos los sitios de atención médica.
2.
Implementar nuevos modelos de diagnóstico de infección de VIH en lugares diferentes a los sitios médicos de atención.
3.
Prevenir nuevas infecciones, trabajando con personas infectadas con VIH y sus compañeros.
4.
Disminuir la transmisión perinatal.
MMWR April 18, 2003
Fuentes de pruebas para VIH y resultados positivos • 38% - 44% de adultos de 18-64 años fueron tamizados • 16-22 millones de personas entre 18-64 años son tamizados anualmente en USA Pruebas de VIH*
Pruebas VIH+**
Consultorios privados
44%
17%
Hospital, ED, consulta externa
22%
27%
Centros públicos
9%
21%
Centros de consejeria para VIH
5%
9%
Cárceles
0.6%
5%
Clínicas de ITS
0.1%
6%
Clinicas de drogadictos
0.7%
2%
*National Health Interview Survey, 2005 **Suppl. to HIV/AIDS surveillance, 2001-2006
Cuatro pruebas rápidas para VIH, aprobadas por la FDA Sensiblidad (95% C.I.)
Especificidad (95% C.I.)
OraQuick Advance - Sangre total - fluido oral - plasma
99.6 (98.5 - 99.9) 99.3 (98.4 - 99.7) 99.6 (98.5 - 99.9)
100 (99.7-100) 99.8 (99.6 – 99.9) 99.9 (99.6 – 99.9)
Uni-Gold Recombigen - sangre total - suero/plasma
100 (99.5 – 100) 100 (99.5 – 100)
99.7 (99.0 – 100) 99.8 (99.3 – 100)
Cuatro pruebas rápidas para VIH, aprobadas por la FDA Sensibilidad (95% C.I.)
Especificidad (95% C.I.)
Reveal G2 - suero - plasma
99.8 (99.2 – 100) 99.8 (99.0 – 100)
99.1 (98.8 – 99.4) 98.6 (98.4 – 98.8)
Multispot - suero/plasma - HIV-2
100 (99.9 – 100) 100 (99.7 – 100)
99.9 (99.8 – 100)
OraQuick Advance HIV-1/2
CLIA-aprobada para sangre del dedo, sangre total, fluido oral; moderada complejidad en plasma
Almacenada a temperatura ambiente.
Tamiza para VIH-1 and 2.
Resultados en 20 minutos.
Muestra de sangre por punción de dedo‌
Introducir el asa dentro del vial y sumergir
Recolectar la muestra de fluido oral, pasando el dispositivo entre la encia y el labio. Guantes opcionales; los desechos no son biopeligrosos
Insertar el dispositivo; esperar resultado en 20 minutos
Control positivo Positivo HIV-1/2
Positive Negative Lectura del resultado en 20 – 40 minutos
Uni-Gold Recombigen
CLIA-Aprobada para sangre por punción del dedo, sangre total; moderada complejidad con suero, plasma
Almacenar a temperatura ambiente.
Tamiza para VIH-1.
Resultados en 10 minutos.
Agregar 1 gota de muestra al pozo
Agregar 4 gotas de soluci贸n de lavado
Positive
Negative
Leer resultados en 10 -12 minutos
Reveal
G2
CLIA moderada complejidad con suero, plasma
Reconstituir y refrigerar los reactivos.
Tamizaje para VIH-1.
Realizar la prueba en 5 minutos.
Centrifugar para obtener suero o plasma
Agregar buffer para reconstituir el conjugado. (Suficiente para 15 pruebas; refrigerar para almacenar)
Agregar 3 gotas de buffer para humedecer la membrana
Agregar una gota de suero o plasma, seguidos de 3 gotas de buffer.
Agregar 4 gotas del agente revelador
Agregar 3 gotas del buffer de lavado
Reactivo
Negativo
Leer resultados inmediatamente
Multispot HIV-1/HIV-2
CLIA moderada complejidad con suero, plasma
Refrigerar los reactivos.
Diferencia VIH-1 de VIH-2.
Prueba en 15 minutos.
Diluci贸n de plasma o suero
Remover y descartar el tap贸n
Varios tiempos de reactivos & lavados
Control positivo
Recombinante VIH-1
Peptido VIH-2 Peptido VIH-1
Negativo
HIV-1 & HIV-2 Positivo
Ventajas y desventajas de las pruebas rápidas para VIH
Buenas noticias: más personas positivas recibirán su resultado.
Malas noticias: algunas personas recibirán un resultado falso positivo antes de la prueba confirmatoria.
Interpretaci贸n de las pruebas r谩pidas Para pruebas de laboratorio: Sensibilidad: Probabilidad prueba=positiva si paciente=positivo Epecificidad: Probabilidad prueba =negativa si patiente=negativo
Valor predictivo: Probabilidad paciente=positivo si prueba =positiva Probabilidad paciente =negativo si prueba =negativa
Ejemplo:
Prueba 1,000 personas
Especificidad = 99.6%
(4/1000)
VIH prevalencia = 10% Verdaderos positivos:
100
Valor predictivo positivo:
Falsos positivos: 4 100/104 = 96%
Ejemplo: Pruebas 1,000 personas Especificidad = 99.6% (4/1000) VIH prevalencia = 10% Verdaderos positivos: 100 Falsos positivos: 4 Valor predictivo positivo: 100/104 = 96% VIH prevalencia = 0.4% Verdaderos positivos:
4
Falsos positivos: 4
Valor predictivo positivo: 4/8 = 50%
Valor Predictivo de una Ăşnica prueba depende de la especificidad & Varia con la prevalencia Valor predictivo, Prueba positiva Prevalencia de VIH 10% 5% 2% 1% 0.5% 0.3% 0.1% Especificidad
OraQuik 99% 98% 95% 91% 83% 75% 50%
Reveal 92% 85% 69% 53% 36% 25% 10%
Uni-Gold 97% 95% 87% 77% 63% 50% 25%
Ăşnico EIA 98% 96% 91% 83% 71% 60% 33%
99.9%
99.1%
99.7%
99.8%
Pruebas de tamizaje rutinarias para VIH, en paciente de urgencias
Cook County Hospital, Chicago
Pruebas de OraQuick desde octubre de 2002 60% aceptó la prueba de VIH. 98% recibió el resultado. 2.5% nuevos diagnósticos de VIH. 80% ingresó al programa de VIH
4 nuevos proyectos (Wisconsin, Massachusetts, Los Angeles, New York)
Tamizaje para VIH en urgencias
Nuevos VIH+
Cook County ED, Chicago Grady ED, Atlanta Johns Hopkins ED, Baltimore Massachusetts (4 hospitals)
Porcentaje de sitios de urgencias donde se realizó la prueba de VIH
2.5% 2.7% 3.2% 2.0% : 1.2%
Tamizaje para VIH con OraQuik en MIRAID: Mother Infant Rapid Intervention At Delivery Resultado de la prueba de VIH en mujeres en trabajo de parto: 12 hospitales en 5 ciudades 7.860 mujeres tamizadas 54 (0,7%) nuevas infecciones. 6 falsos positivos, no falsos negativos. 15 falsos positivos por EIAs. Especificidad de OraQuik 99,92%; EIA 99,80% VPP: OraQuik 90%; EIA 76% Bulterys et al, JAMA July 2004
Resultados en los tiempos para pruebas rápidas, Punto de atención (Point-of-Care) vs misma prueba realizada en el laboratorio Prueba en el Punto de atención (Point-of-care): promedio 45 min – (rango 30 min – 2.5 horas) Misma prueba en el laboratorio: promedio 3.5 horas – (rango 94 min – 16 horas)
MMWR 52:36, Sept 16, 2003
Estudio del CDC’s para la prueba de OraQuick
527,775 pruebas compradas en el período 2003 - 2004 –137 dependencias de salud en 36 estados Período: septiembre 2003 – septiembre 2004: – Personas probadas 173,003 – Positivas para VIH 2,741 (1.6%) – Insumos utilizados para el entrenamiento 17,266 – 25,926 reactivos usados para el uso de controles externos.
Changes in HIV Testing at Same Sites After Rapid Testing Introduced 6000
Number of Tests
5000
5222
EIA Rapid Test
3839
4000 3000
1929 1359
2000 1000 0
666 02
932
03
Utah
786
02
1002
03
Maryland
02
03
New York State
02
03
Wisconsin
Changes in Positive Tests at Same Sites After Rapid Testing Introduced
Number of Positive Tests
60 EIA Rapid Test
50 40 30 20 10 0
02
03
Utah
02
03
Maryland
02
03
New York State
02
03
Wisconsin
Fuentes de consulta
General and technical information (updated frequently): CDC: www.cdc.gov/hiv/rapid_testing OMS: operational characteristic of hiv www.who.int/eht/
Proponte desde hoy, no volver a utilizar plรกstico, es uno de los mayores contaminantes.