3.4. Phương pháp sắc ký lớp mỏng

liệu, nếu cần thiết) cho đến khi tất cả bột dược liệu đem đi khảo sát trở thành bột DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL mịn (không bỏ sót dược liệu còn trên rây khi làm). Cảm quan về bột dược liệu trước khi đem quan sát dưới kính hiển vi (gồm màu sắc, mùi vị, độ mịn,….) để dễ nhận biết bột khi kiểm nghiệm. Thực hiện tiêu bản soi bột dược liệu: Đầu tiên, nhỏ lên lam kính 1-2 giọt nước cất đã chuẩn bị sẵn, dùng kim mũi mác lấy một ít bột (khoảng bằng hạt đậu hoặc hạt gạo) cho vào giữa giọt nước cất trên lam kính, dùng lamen đậy mẫu soi bột lại (tránh tạo khí khi đậy lamen). Tiếp đến dùng khăn giấy lau hết phần bột và nước thừa xung quanh phiến kính và lamen trước khi soi trên kính hiển vi. Đặt lam kính vừa chuẩn bị mẫu bột dược liệu lên kính hiển vi, mở công tắt máy, chỉnh ánh sáng, nâng bàn kính lên cao nhất và chỉnh vật kính nhỏ nhất; tiếp đến ta chỉnh ốc to, ốc nhỏ (bên thân máy) sao cho nhìn thấy rõ mẫu bột dược liệu cần soi, chụp hình và chỉnh vật kính lên từ từ (10x, 40x, 100x) để phóng đại hạt bột dược liệu lên; mục đích để ta nhìn thấy rõ các cấu tử có trong bột dược liệu (lỗ khí, mạch vòng, mạch xoắn, tinh thể calci oxalat,……). Cuối cùng, chụp hình mẫu soi và vẽ hình mẫu bột. 3.4. Phương pháp sắc ký lớp mỏng Chuẩn bị bản mỏng silica gel: - Bản mỏng: Silica gel. - Yêu cầu: bảng mỏng rộng 2 cm, dài 10 cm. Kẻ đường ngang cách mép trên 1 cm và dưới 1,5 cm trên bản mỏng, đánh dấu 1 điểm cần chấm lên trên đường kẻ phía dưới. Chuẩn bị dung môi và bình chạy sắc ký: - Dung môi khai triển: Etyl acetat – acid acetic – acid formic – nước (5 : 0,5 : 0,5 : 1). - Bình sắc ký: phải khô, sạch, không có nước (nếu có nước hoăc mới rửa, dùng cồn cao độ trán qua bình và dùng khăn giấy sạch lau khô từ trong lòng bình ra ngoài bình và nắp đậy). - Sử dụng giấy lọc cắt cho vào bình (chiều cao ngắn hơn bình khoảng 1 cm và chừa khoảng trống để quan sát mẫu chấm sắc ký khi chạy). Bão hoà bình sắc ký bằng giấy lọc đã chuẩn bị cho đến khi đạt yêu cầu (khoảng 30 phút) và đậy nắp. Chuẩn bị mẫu thử: - Dung dịch thử: Lấy 10 g bột dược liệu thuốc dòi cho vào 1 bình nón nút mài 100ml, thêm methanol ngập mặt dược liệu, đun các thuỷ từ 5 phút đến 10 phút, thỉnh thoảng lắc nhẹ, lọc bàng bông gòn vào cốc có mỏ, cho dung dịch đã lọc vào