El Aguacate Criollo: Otro tipo de Antibiótico Natural
Dr. Victor E. Aguirre Facultad de Agronomía Facultad de Agronomía, UANL
Staphylococcus aureus Bacteria Gram (+) Forma de cocos Agrupada en racimos Manitol (+) Coagulasa (+) Catalasa (+) Halรณfilos (15%)
Hรกbitat
Comienzo de la historia… • 1944
Introducción de la penicilina
• 1946
14% producen ß lactamasa
• 1950
59% producen ß lactamasa
• 1960 – 64 Nuevos farmacos meticilina y Oxacilina
Penicilinas resistentes a penicilasa
Evolución de la resistencia del S. aureus a la Meticilina (MRSA)
1961 Primeros reportes de resistencia (Jevons y Knox) en hospitales europeos Nacimiento del “SuperBug” MRSA
http://www.nature.com/nrmicro/journal/v4/n11/full/nrmicro1535.html
Ampicilina
Dicloxacilina
penicilina
Tener presente que… ** Si una cepa de Estafilococo es resistente a la Oxacilina, ningún otro beta lactámico sería eficaz para el tratamiento
independientemente que muestre sensibilidad in vitro
HA-MRSA
CA-MRSA
CA-MRSA
Toxinas propias de SA Coagulasa, Fibrinolisina Hialuronidasa Termonucleasas Bacteriocinas DNAsa Leucocidinas Toxina del síndrome del shock tóxico Toxina epidermolítica Enterotoxinas.
Toxinas propias de MRSA Citotoxinas como: Alfa toxina: destruye monocitos y plaquetas (forma anillo polimérico) Beta toxina: esfingomielinasa C Gamma toxina: hemolítica Delta toxina: tipo detergente
Hemolisinas α Hemolisina γ Hemolisina
PVL, MRSA y Murphy Si hay posibilidad de que algo salga mal, saldrá mal. Corolario: Si existe la posibilidad de que varias cosas salgan mal, la que cause más perjuicios será la única que salga mal Si se intuye que hay cuatro posibilidades de que una gestión vaya mal y las evita, al momento aparecerá espontáneamente una quinta posibilidad.
PVL: Panton-Valentin-Leucocidina
Dos toxinas que producen poros: LukS-PVL y LukF-PVL
SCCmec
SCCmec
Situación del MRSA en E.U. (2005) Más de 2 millones de consultas en cuerpos de guardia por infección de piel y partes blandas 18 000 fallecimientos atribuibles a infección por MRSA Más fallecidos que los reportados por SIDA Aparición en 1995 de cepas resistentes e intermedias a vancomicina (VI-MRSA, VR-MRSA)
¿Cómo llegó la bacteria desde el hospital hasta la comunidad?
Hรกbitat
Resultados de Carmen Martinez y Cesar Bautista
Resultados de Carmen Martinez y Cesar Bautista
Tanque de almacenamiento (Bulk Tank)
Resultados de Armando Cesar Bautista
Muestreo: 70 vacas muestreadas 12 tanques de almacenamiento de leche 35 aislamientos positivos a S. aureus
7 positivos MRSA
Otra alternativa????
Resultados de Irving PiĂąon
ATCC 33592
CCIV 4
ATCC BAA-1556
PERSIMONIO Diospyros kaki
GUDELIA Wedelia Trilobata
ATCC BAA-1556
ATCC 33592
CCIV 4
Rosmarinus Officinalis
9 diferentes hojas de plantas Hojas de limรณn efecto contra la cepa de hospital y la de vaca y sin efecto contra la de comunidad Hojas de persimonio: efecto contra cepa de hospital y comunidad y sin efecto contra la de vaca. Hojas de moringa: Efecto contra la cepa de hospital y discreto efecto contra la cepa aislada de vaca y la de comunidad
Flavonoides
Saponinas
Polifenoles
Alcaloides
Taninos
EXPRESIÓN GÉNICA ENTRE GENOTIPOS DE AGUACATE RAZA MEXICANA (Persea americana Mill. var. drymifolia)
(Gutierrez Diez, et al., 2009)
Persea americana var. drymifolia
Aramberri N.L.
Gusano TelaraĂąero
Gusano Barrenador
Gusano del hueso del aguacate
ATCC 33592
ATCC BAA-1556
CCIV 4
30.
mm en inhibición
22.5
15.
7.5
0. ATCC-33592
BAA-1552 Extractos etanólicos
CCIV 4
María Elena Pato Huevo de Paloma Amarillo Campeón Mantequilla Plátano Temprano Plátano Tardío Criollo 1 Criollo 2 Criollo 3 Criollo 4 Cuerno Pagua Leonor El Salvador El salto (Adriana) Plátano tardío Kanamicina EtOH (70%)
Resultados de Miguel Angel Moreno
Comprender la EcologĂa de la bacteria
No bacterium is an island: Indeed, bacteria in nature exist as polymicrobial communities where interactions between individuals influence activities of the entire population
S. Marvin Friedman
“ In my Lab we are always thinking about how cells, bacterial cells, can talk each other and then organize into enormous groups that function in unison� Bonnie Bassler
Expresiรณn relativa 16s/AgrA Sin extracto
Con extracto
2.25 1.8 1.35 0.9 0.45
0 33592
BAA-1556
CCIV-4
Expresiรณn relativa 16s/RNAIII
OBTENCIÓN DE POLIFENOLES Por cada gramo de materia seca de hoja de aguacate mexicano se obtuvieron 0.018 g ± 1.12 de polifenoles totales. Rendimiento del 1.8%.
13.2
4.4
-4.4
-13.2
Número de genes regulados
Expresión génica global de S. aureus MRSA cepa μ3 22
-22
Funciones desconocidas Traducción de señal Funciones reguladoras Transcripción Síntesis de proteínas
Protein Fate Funciones de elementos moviles y…
Metabolismo del DNA Transporte y unión de proteínas Purinas, pirimidinas, nucleosidos y… Acidos grasos y metabolismo de… Metabolismo energético Metabolismo central intermadiario Biosisntesis de cofactores, grupos… Biosintesis de aminoácidos Procesos celulares Envoltura celular
Regresa la Sensibilidad a los antibiรณticos 3.5 3 2.5
Antibiotico
2
Extracto
1.5
AntibioticoExtracto
1 0.5 0 MRSA CAMRSA HA MRSA VA
MSSA
Diámetro de inhibición (cm)
2.00
Halos de inhibición de MRSA cepa μ3, expuesto a los distintos tratamientos
1.50
Ext/Diclo
1.00
Extracto Gentamicina
0.50
Dicloxacilina
0.00 Tratamientos
Análisis estadístico de los halos de inhibición de los tratamientos para la sensibilidad de antibióticos. Comparación de medias por Tukey. Tratamiento
medias
n
E.E
Extracto
0.5
15
0.02
Extr/Dicloxa
0.95
15
0.02
Genta
1.5
15
0.02
0
15
0.02
Dicloxacilina
A
Medias con una letra común no son significativamente diferentes (p >0.05). Exrt: Extracto; Dicloxa: Dicloxacilina.
B C D
Cromatograma de los polifenoles contenidos en las hojas de aguacate mexicano cultivar MarĂa Elena
Sitios clave para la actividad antimicrobiana Quercetina Perseitol Apigenina
• Promueve sensibilidad a antibióticos • Inhibición de bombas de flujo (asociados a f.v.)
• Inhibición de síntesis de pared y membrana celular Catequina
• Degradación de la membrana • Evita el transporte y síntesis de ATP
• Inhibición de la actividad enzimática
MecR1 presentó un puntaje z de -1.987535
Cushine y Lamb, 2011; Gordon et al., 2013;Yin et al., 2015; Ponce y Millones, 2015
Resultados de Ernesto Alonso Lopez Correa
Modificaciรณn de las propiedades de Adhesiรณn de S. aureus por influencia de los polifenoles de hojas de aguacate mexicano
Porcentaje de inhibición de nueva película
90 80 70 60 50 Series1
40 30 20 10
0 EOG127
eog163
eog04
eog145
eog97
eog102
eog105
eog1307
eog1963
eog5847
eog113
mu3
Porcentaje de eliminaciĂłn de pelĂcula ya formada %inhibicion 60.000
50.000
40.000
30.000
%inhibicion
20.000
10.000
0.000 EOG127 eog163
eog04
eog145
eog97
eog102
eog105
eog1307 eog1963 eog5847
eog113
mu3
Gracias!! Preguntas o comentarios son bienvenidos