Выделение геномной ДНК из цельной крови для диагностики in vitro Наборы NucleoSpin® Blood и NucleoSpin® Dx Blood
®
NucleoSpin Dx Blood
Продукция для выделения и очистки геномной ДНК
Для образцов крови, стабилизированной ЭДТА, цитратом или гепарином Простой и удобный протокол работы Высокая воспроизводимость при выделении геномной ДНК из цельной крови… … Получение самых надежных результатов ПЦР анализа! www.mn-net.com
Наборы NucleoSpin® Blood XX
Применение для диагностики in vitro
Сочетаются с любыми методами ферментативной амплификации и детекции геномной ДНК
XX
Возможно использование стандартных пробирок для отбора крови
Для свежей и замороженной крови, стабилизированной ЭДТА, гепарином, цитратом
XX
Надежность выделения геномной ДНК из цельной крови
Хорошая воспроизводимость результатов
XX
Удобны в работе
Работа при комнатной температуре Образцы готовы для фотометрического анализа сразу после выделения ДНК
XX
Сертификат СЕ в соответствии с директивой ЕС 98/79/ЕС
Набор NucleoSpin® Dx Blood соответствует всем требованиям IVD в ЕС
Краткий протокол работы В состав наборов NucleoSpin® (Dx) Blood входят колонки Mini spin с модифицированной силикагелевой мембраной, обеспечивающие быстрое выделение геномной ДНК из 200 мкл цельной крови. Образцы крови лизируются в присутствии хаотропных солей и протеиназы К. Лизат наносят на колонку Mini spin. Геномная ДНК оседает на мембране колонки. Мембрану с ДНК промывают двумя буферами, затем элюируют ДНК.
1.
Лизис образца
Добавить в образец крови протеиназу К и
Эффективный лизис свежей или замо-
буфер для лизиса.
роженной крови, содержащей ЭДТА,
Инкубировать 15 минут.
цитрат или гепарин.
2.
Связывание ДНК
Перенести лизат в колонку Mini spin и центрифугировать.
Нанесение лизата на колонку.
3.
4.
Удаление ингибиторов и загрязнений
Нанести на мембрану первый промывочный буфер и центрифугировать. Нанести на мембрану второй промывочный
в 2 этапа.
буфер и центрифугировать .
Промывка мембраны
Элюция геномной ДНК Элюция буфером, не содержащим азидов, позволяет провести прямое фото-
Нанести на мембрану 50-200 мкл буфера для элюции и центрифугировать.
метрическое измерение количества ДНК.
www.mn-net.com
NucleoSpin® Blood и NucleoSpin® Dx Blood Общая информация по продукции Технология
Фильтрация через силикагелевую мембрану
Формат
Колонка Mini spin
Исходный материал
Цельная кровь (свежая или замороженная), стабилизированная ЭДТА, цитратом или гепарином.
Объем пробы
200 мкл
Выход ДНК
3 – 5 мкг (зависит от образца)
Качество ДНК
A260/A280 1,7 – 1,9
Объем элюата
50 – 200 мкл
Концентрация ДНК
40 – 60 нг/мкл
Время выделения
30 мин
Статистические данные по использованию Выход ДНК [мкг]
7
Надежная технология, обеспечивающая высокую степень чистоты ДНК и отличную воспроизводимость результатов ДНК трижды выделяли из образцов крови (200 мкл, ЭДТА) 5 разных доноров (А – Е). Результаты представлены на графике.
6 5 4 3
Выход ДНК 2,7 – 6,6 мкг, в зависимости от образца.
2 1 0 A
2,0
B
C
D
E
Соотношение A260/A280
Высокая степень чистоты выделяемой ДНК Соотношение A260/A280 было измерено для 15 проб (3 пробы от каждого из 5 доноров, А – Е). Из графика видно, что значения A260/A280 колеблются в пределах 1,80 – 1,92, что свидетельствует о высоком качестве выделенной ДНК.
1,5
1,0
Качество ДНК гарантирует достоверные результаты в последующей диагностике in vitro.
0,5
0,0 A
8
B
C
D
E
Эффективная очистка ДНК вне зависимости от используемого антикоагулянта
Флуоресценция [относительные единицы]
7
ДНК выделяли из 15 образцов крови различных доноров, стабилизированных различными антикоагулянтами: ЭДТА, гепарином или цитратом.
ЭДТА Цитрат Гепарин
6
5
Для всех выделенных ДНК наблюдали высокий выход продукта при проведении ПЦР в реальном времени.
4
3
2
1
Число циклов 0 0
5
10
15
20
25
30
35
40
Совместимость c наборами для сбора и хранения образцов крови Название
Производитель
S-Monovette Li-Heparin
Sarstedt
S-Monovette EDTA
Sarstedt
S-Monovette Citrat
Sarstedt
VACUETTE EDTA
GREINER BIO-ONE
BD VACUTAINER K2E
BD Diagnostics
K2 EDTA
APTACA
® ® ®
®
®
www.mn-net.com
NucleoSpin® Blood и NucleoSpin® Dx Blood Надежное выделение ДНК для диагностики in vitro NucleoSpin® (Dx) Blood является оптимальным набором для выделения и очистки геномной ДНК из цельной крови. Набор может быть использован для образцов свежей и замороженной крови, стабилизированной ЭДТА, цитратом или гепарином, а также с готовыми системами для сбора и хранения крови. NucleoSpin® (Dx) Blood помогает получить геномную ДНК, используемую затем в любых процессах, например, в ПЦР-анализе, и отлично подходит для применения в диагностике. Исходный образец крови
NucleoSpin® Blood
ПЦР-анализ или иные процессы
Информация для заказа Небольшое количество экспериментов
Кол-во экспериментов
Номер по каталогу
NucleoSpin® Dx Blood
50 / 250
740899.50 / .250
10 / 50 / 250
740951.10 / .50 / .250
20
740954.20
10 / 50
740950.10 / .50
Набор для выделения геномной ДНК из 200 мкл крови с СЕ сертификатом
NucleoSpin® Blood Набор для выделения ДНК из образцов крови объемом до 200 мкл
NucleoSpin® Blood L Набор для выделения ДНК из образцов крови объемом менее 2 мл
NucleoSpin® Blood XL Набор для выделения ДНК из образцов крови объемом менее 10 мл
Сопутствующая продукция Небольшое количество экспериментов (CE – маркировка)
Кол-во экспериментов
Номер по каталогу
NucleoSpin® Dx Virus
50 / 250
740895.50 / .250
Набор для выделения вирусных ДНК и РНК из 150 мкл плазмы и сыворотки крови с СЕ сертификатом
NucleoSpin® Plasma XS
10 / 50 / 250
740900.10 / .50 / .250
Среднее и большое количество экспериментов
Кол-во экспериментов
Номер по каталогу
NucleoSpin® 8 Blood
12 x 8 / 60 x 8
740664 / .5
NucleoSpin® 8 Blood Core* Kit
48 x 8
740455.4
NucleoSpin® 96 Blood
1 x 96 / 4 x 96 / 24 x 96 740665.1 / .4 / .24
NucleoSpin® 96 Blood Core* Kit
4 x 96
740456.4
8-луночные пластинки/ 96-луночные плашки для автоматического или ручного выделения геномной ДНК из цельной крови
NucleoMag® Blood 200 μL
1 x 96 / 4 x 96
744501.1/.4
NucleoMag® Blood 3 mL
1 x 96
744502.1
Технология на основе магнитных частиц для ручного или автоматического выделения геномной ДНК из цельной крови
Посетите www.mn-net.com/bioanalysis для более детальной информации
Ваш дистрибьютор:
Группа компаний «ГалаХим»
* В базовом варианте наборы ориентированы на автоматические платформы.
Все дополнительные аксессуары могут быть включены в комплект по запросу.
тел.: (495) 984-42-44 e-mail: galachem@galachem.ru сайт: www.galachem.ru адрес: 123100, г. Москва, Звенигородское шоссе, 3
www.mn-net.com MACHEREY-NAGEL
EN ISO 9001: 2008 CERTIFIED
MACHEREY-NAGEL GmbH & Co. KG · Neumann-Neander-Str. 6–8 · 52355 Düren · Germany Switzerland: Germany France: MACHEREY-NAGEL AG and international: MACHEREY-NAGEL EURL Tel.: +41 62 388 55 00 Tel.: +49 24 21 969-0 Tel.: +33 388 68 22 68 Fax: +41 62 388 55 05 Fax: +49 24 21 969-199 Fax: +33 388 51 76 88 E-mail: sales-ch@mn-net.com E-mail: sales-fr@mn-net.com E-mail: info@mn-net.com
USA: MACHEREY-NAGEL Inc. Tel.: +1 484 821 0984 Fax: +1 484 821 1272 E-mail: sales-us@mn-net.com
Image credits: © Sebastian Kaulitzki / Fotolia.de · KATEN300051/NuSpin DxBlood en2/5/0/6.2011 PD Printed in Germany
Набор для быстрой очистки циркулирующей ДНК из плазмы и сыворотки