UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA. Profesor: Dr.- Carlos García MSc. Alumno: Oswaldo Luis Silva Oyola. Curso: 5to Bioq. Farm. Grupo: # 7
Paralelo: “B“
10 Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes 16 de Junio del 2015. Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 23 de Junio del 2015. PRÁCTICA N° 3 Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR METANOL . Animal de Experimentación: Rata wistar de color: blanco. Vía de Administración: Vía Parenteral. (INTRAPERITONIAL.) Volumen Administrado: 10 mL TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 7:45 am Dosis adminstrada: 10 mL Animal de experimentacion: Rata wistar de color: blanco. Hora de administración del toxico a la rata wistar : 7:48 am Deceso del animal: 7:56 am Hora de diseccion: 7:58 am Inicio de la destilación: 8:00 am Finalización de la destilación: 9:28 am Final de la práctica: 10:30 am
SÍNTOMATOLOGIA DEL COBAYO.
Convulsiones. Ceguera Vomito Cefalias.
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA. 1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por metanol. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el toxico. 3. Adquirir la destreza para realizar las reacciones de identificación, mediante la transformación del metanol a metanal. 4. Reconocer mediante la observación de los colores características, la presencia de metanal indicativo de la presencia del metanol. MATERIAL
Jeringuilla de 10 cc. Varilla Espátula Probeta Panema Perlas de vidrio Bureta Soporte universal Cinta plástica Lámpara de alcohol Fosforo Pinzas Porta tubo Tubos de ensayo Tabla de disección Cronómetro Equipo de disección Bisturí Vasos de precipitación 200 y 500 ml. Erlenmeyer Equipo de destilación. Pipetas Guantes de látex Mascarilla Mandil Gorro
SUSTANCIAS:
Formol al 40% Ácido tartárico Permanganato de potasio al 1% Ácido Oxálico Ácido Sulfúrico puro Fushinabisufatada (Reactivo de Schiff) Cloruro de Fenil Hidracina al 4% Nitroprusiato de Sodio al 2.5% Hidróxido de Sodio Ácido Clorhídrico. Ferricianuro de potasio al 5-10% Hidróxido de Potasio al 12% Ácido cromotrópico Leche Cloruro Férrico. Agua destilada EQUIPOS
Balanza Cocineta
PROCEDIMIENTO: 1. Limpiar y desinfectar el area de trabajo. 2. Colocamos la rata wistar de color: blanco en el panema. 3. Administramos al cobayo, 10 ml de metanol por vía intraperitoneal y anotamos el tiempo. 4. Observamos los efectos que produce en la rata wistar . 5. Procedimos a la apertura de la rata wistar con la ayuda del bisturí. 6. Observamos el estado de las vísceras. 7. En un vaso de precipitación recolectamos la sangre y colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles). 8. El contenido del vaso anterior lo pasamos al balón para proceder a la destilación. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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9. Armamos correctamente el equipo de destilación (método de soxhleth), asegurando que no existan fugas que conlleven a pérdidas del destilado. 10. Adicionamos a las vísceras acido tartárico (25 ml) y calentamos con la lámpara de alcohol esto con movimiento circular. 11. Al producto de la destilación (destilado), le colocamos una lámina de cobre al rojo vivo hasta que se observe el desprendimiento de partículas de color gris, con esto convertimos el metanol a metanal y procedimos a realizar las reacciones de identificación. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO. En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el reconocimiento de formaldehído, así: 1. REACCIÓN DE SCHIFF: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo. 2. REACCIÓN DE RIMINI. A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa. 3. CON LA FENILHIDRACINA. En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella. 4. REACCIÓN DE MARQUIS. Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta. 5. REACCION CON EL CIANURO DE SODIO. (CNNa) Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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6. REACCIÓN DE HEHNER.Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta. GRÁFICOS DE LA PRACTICA:
Animal de experimentación: “ Rata wistar “.
Inyectar 20 ml el toxico (metanol) en el animal de experimentacion.
Observar los síntomas de la rata luego de la administración del toxico hasta la muerte.
Se arma el equipo de destilación y comienza la destilacion.
Colocación de las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el vaso.
Se recoge destilado, para reacciones identificación.
el las de
Aqui esta la solucion madre, para que los grupos hagan las reacciones de reconocimiento.
Colocar a la rata en la tablay realizamos la disección.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS. Reacción violeta.
REACCIÓN DE SHIFF: Positivo característico
Antes (color transparente)
Hay coloración
Despues (Positivo caracteristico )
REACCIONES DE COLORACIÓN A LA LLAMA.
Reacción coloración a la llama positivo no caracteristico coloración amarilla – alifatica. COLORACIÓN A LA LLAMA
COLORACIÓN A LA LLAMA
ANTES Adicionamos Acido Sulfurico
DESPUES Positivo no característico coloración violeta
REACCION DE RIMINI. Reacción Positivo No caracteristico coloración azul intensa.
Antes (color transparente)
No hay
Despues (Positivo No caracteristico )
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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REACCION CON LA FENILHIDRACINA. Reacción Positivo No caracteristico Coloración rojo grosella.
Antes (color transparente)
No
Despues (Positivo No caracteristico )
REACCIÓN DE MARQUIS.
Reacción Positivo No caracteristico coloracion color violeta.
Antes (color transparente)
hay
No hay
Despues (Positivo No caracteristico )
REACCIÓN CON EL ÁCIDO CROMOTRÓPICO. (CNNa)
Reacción coloración roja.
Positivo No caracteristico
Antes (color transparente)
No hay
Despues (Positivo No caracteristico )
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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REACCIÓN DE HEHNER.
Reacción Positivo No caracteristico coloración color violeta o azul violeta.
Antes (color transparente)
No hay
Despues (Positivo No caracteristico )
AQUÍ ESTA EL GRUPO # 7 TRABAJANDO Y DEMOSMOSTRANDO LA REACCION QUE OCURRIO EN LA REACCION DE HEHNER.
OBSERVACIONES. Hemos observado que al administrar el toxico (metanol) por vía intraperitoneal el cobayo presentó: convulsiones ceguera , al 1 minuto se puso agitado respiracion lenta, tuvo cefalias, a los 2 minutos más se empezó vomitar, Luego se le empezo a hinchar el estomago,con la sobredosis que se le fue administrado murió inmediatamente a los 5 minutos. CONCLUSIONES. Al término de esta práctica podemos concluir que el veneno utilizado (metanol) es muy tóxico debido a las manifestaciones como la poca movilidad, “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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convulsiones ,cefalia, y vomito que se presentaron en el animal, el deceso fue inmediato y mediante las reacciones para el reconocimiento de éste podemos concluir que si hubo presencia de metanol. RECOMENDACIONES.
Realizar la asepsia del área a trabajar. Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar la cámara de gases para realizar las pruebas y evitamos así intoxicaciones. Al someter calor en el tubo de ensayo para las reacciones, realizarlo de lado y que no esté alguna persona en esa dirección, ya que puede haber salpicadura del toxico. Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar posteriormente accidente alguno. Al momento de administrar la dosis realizarlo en la vía correcta, para evitar de esta manera provocar embolias. Preparar correctamente los reactivos a la concentración requerida en la práctica y así mismo utilizar pipetas o bulbos para cada reactivo. Culminada la práctica se debe dejar el área desinfectada, para evitar contaminación con las sustancias químicas utilizadas.
CUESTIONARIO 1. ¿QUE ES EL METANOL? El compuesto químico metanol, también conocido como alcohol de madera o alcohol metílico (o raramente alcohol de quemar), es el alcohol más sencillo. A temperatura ambiente se presenta como un líquido ligero (de baja densidad), incoloro, inflamable y tóxico que se emplea como anticongelante, disolvente y combustible.Su fórmula química es CH3OH (CH4O). 2. ¿DÓNDE SE ENCUENTRA EL METANOL?
Anticongelante Fuentes de calentamiento enlatadas Líquidos para copiadoras Líquido descongelante Aditivos para combustibles (mejoradores del octanaje) Removedor o disolvente de pintura Goma laca Barniz Líquido limpiador de parabrisas
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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3. ¿TOXICIDAD DEL METANOL? El metanol es extremadamente tóxico. Tan solo dos cucharadas pueden ser mortales para un niño y alrededor de 2 a 8 onzas pueden ser mortales para un adulto. La ceguera es común y a menudo permanente a pesar de los cuidados médicos. El pronóstico para la persona depende de la cantidad de tóxico ingerida y de la prontitud con que se reciba el tratamiento. 4. ¿USOS DEL METANOL? El metanol tiene varios usos. Es un disolvente industrial y se emplea como materia prima en la fabricación de formaldehído. El metanol también se emplea como anticongelante en vehículos, combustible de estufetas de acampada, solvente de tintas, tintes, resinas, adhesivos, biocombustibles y aspartame. El metanol puede ser también añadido al etanol para hacer que éste no sea apto para el consumo humano (el metanol es altamente tóxico) y para vehículos de modelismo con motores de combustión interna. 5. ¿CUÁLES SON LAS MANIFESTACIONES CLÍNICAS QUE SE PRESENTA POR INTOXICACIÓN DE METANOL? El intervalo entre la ingesta y la aparición de las manifestaciones clínicas es variable (de pocos minutos hasta 72 horas). En la mayoría de los casos los síntomas iniciales (embriaguez, somnolencia y vértigo) se siguen de un periodo asintomático, especialmente si el metanol se ingiere mezclado con etanol. Concentraciones de etanol entre 100 y 150 mg/ml pueden retrasar la instauración de los síntomas hasta que se haya metabolizado una cantidad suficiente de etanol como para que el metanol empiece a transformarse en sus metabolitos tóxicos. Sin embargo, incluso si el metanol se consume solo, pueden transcurrir de 12 a 24 horas hasta que se produzcan concentraciones de metabolitos tóxicos en cantidad suficiente como para producir síntomas.
GLOSARIO:
EMBALSAMAMIENTO.- es una práctica que utiliza generalmente sustancias químicas, en especial resinas o bálsamos, y cuyo objetivo es preservar de la putrefacción la integridad de los cadáveres. ASPARTAME.- es un edulcorante no calórico descubierto en 1965 por la multinacional farmacéutica G.D. Searl and Company. Que se emplea en numerosos alimentos en todo el mundo bajo varias marcas como Natreen y Canderel, además de NutraSweet, y que corresponde al código E 951 en Europa. EMANACIONES: Desprendimiento o emisión de sustancias volátiles de cuerpo hacia su alrededor. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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MOSTO.- es el zumo de la uva que contiene diversos elementos de la uva como pueden ser la piel, las semillas, etc. Se considera una de las primeras etapas de la elaboración del vino. ACIDOSIS.- Es una dolencia en la cual hay demasiado ácido en los líquidos del cuerpo. Es lo opuesto a alcalosis (una afección en la cual hay exceso de base en los líquidos corporales). BIBLIOGRAFÍA
Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial CientíficoMédico. Madrid. España. 2010.
NOGUÉ S. MARRUECOS L. Guía clínica para el tratamiento de las intoxicaciones por metanol y etilenglicol. Indicaciones del fomepizol. Barcelona, 2006. .(Consultado el 19 deJunio del 2014). Disponible en: http://www.fetoc.es/asistencia/Metanol_Etilenglicol_Fomepizol.pdf
LORÍA J .BERMEO A. RAMÍREZ A. FERNÁNDEZ D. Archivos de Medicina de Urgencia de México. Intoxicación por metanol, reporte de un caso. Mexico 2009 Vol. (Consultado el 19 deJunio del 2014). Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/urgencia/aur2009/aur092f.pdf
GUTIERREZ M. GUÍAS PARA MANEJO DE URGENCIAS CAPITULO XII INTOXICACION POR METANOL(Consultado el 19 deJunio del 2014). Disponible en: http://www.bionica.info/Biblioteca/Gutierrez-Intoxicacion-Metanol.pdf
WEBGRAFÍA
https://www.google.com.ec/?gfe_rd=cr&ei=I72nU8_2Ca_Q8gfx7IDgB Q&gws_rd=ssl#q=metanol http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002680.htm http://es.wikipedia.org/wiki/Metanol
AUTORIA. Dr.- Carlos García MSc.
FIRMA DEL RESPONSABLE.
Oswaldo Luis Silva Oyola “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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ANEXOS: DATOS OBTENIDOS DE LA PRACTICA DE INTOXICACION POR FORMALDEHIDOS, MEDIANTE LA SINTOMATOLOGIA DE LA RATA WISTAR Y LAS REACCIONES DE RECONOCIMIENTO POR METANOL.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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