Бенджамин Бест
Научное обоснование практики крионики Институт крионики. Клинтон Тауншип, шт. Мичиган, США
Тезисы Очень низкие температуры создают условия, в которых ткани могут храниться веками, возможно, сохраняя и неврологическую основу сознания человека. С помощью процесса, известного как "витрификация", ткани мозга могут быть охлаждены до криогенных температур без образования льда. Повреждения, связанные с этим процессом, теоретически являются обратимыми, также как и омоложение является теоретически возможным с помощью конкретных, представимых уже сегодня технологий. Повреждения мозга от остановки кровоснабжения, как сейчас известно, вызываются сложной совокупностью процессов, которым для завершения требуется намного больше времени, чем шесть минут - именно такое время является пределом для существующих обычных технологий реанимации. Реперфузия (восстановление кровотока - прим.перев.), совершённая после шести минут повреждает, прежде всего, кровеносные сосуды, а не ткани мозга. Апоптоз нейронов занимает много часов. Это создаёт окно для возможного вмешательства между юридической смертью и необратимой потерей жизни для людей или животных, когда их можно криосохранить с возможностью будущего оживления. При идеальных условиях промежуток времени между наступлением клинической смерти и началом процедуры крионирования может быть сокращён менее чем до минуты, но даже гораздо более длительные промежутки вполне приемлемы. Хотя имеющиеся доказательства того, что крионика может сработать, являются косвенными, но косвенные доказательства считаются значимыми во многих областях науки. Если сложные изменения, вызванные старением когда-то в будущем окажутся обратимыми, то столь же сложные изменения, вызванные остановкой кровоснабжения и криосохранением, также могут быть обратимыми и привести к спасению любого человека, потребности которого в медицинском вмешательстве превосходят современные возможности медицины.
Общие сведения о крионике Крионика - это практика сохранения людей и животных при сверхнизких температурах в надежде на то, что наука в будущем сможет вернуть их к жизни в здоровом состоянии, а также - омолодить их. Сейчас крионика может быть использована только после заключения о юридической смерти криопациента. Научное обоснование практики крионики основано на нескольких ключевых идеях: (1) Низкие температуры замедляют метаболизм. Достаточно низкая температура может практически остановить химические изменения на века. (2) Образование льда можно сократить или вообще предотвратить, используя растворы
2
Научное обоснование практики крионики
Бенджамин Бест
для витрификации. (3) Юридически мёртвый не означает "необратимо мёртвый". Смерть - это процесс, а не одномоментное событие - и процесс этот занимает дольше, чем принято считать. (4) Повреждения, связанные с низкотемпературным сохранением и клинической смертью, являющиеся необратимыми сегодня, теоретически обратимы в будущем. Необходимо официальное признание человека мёртвым, так как крионирование не является методом с доказанной эффективностью и общепризнанной медицинской процедурой. Команда по крионированию начинает действовать немедленно после официальной констатации смерти. Криоконсервация должна предотвратить повреждение тканей при охлаждении их до температуры ниже -120ºC и минимизировать изменения в них после остановки сердца. На первой стадии аппаратами поддерживается кровообращение и дыхание, вводятся защитные лекарственные препараты, тело пациента быстро охлаждается до температуры между 0 и 10ºC. Кровь вымывается и значительное количество тканевой жидкости замещается раствором криопротектора, предотвращающим образование льда. Пациент охлаждается до температуры ниже -120ºC и затем находится в криостазисе. Когда и если медицина будущего будет обладать соответствующими возможностями, пациент будет отогрет, криопротектор удалён, ткани восстановлены, заболевания вылечены и проведено омоложение (при необходимости).
Охлаждение Сохранение продуктов в холодильниках и морозильных камерах основано на снижении скорости биохимических реакций при понижении температуры. Охлаждение снижает уровень метаболизма (и, в конечной счёте, фактически останавливает его), что и является принципом, на котором основана крионика. Начальное охлаждение непосредственно после официального объявления смерти осуществляется в ванне с водой со льдом. Применение системы искусственного кровообращения и дыхания, использующей периодическое сжатие также ускоряют охлаждения за счёт отбора тепла циркулирующей кровью. Пациент охлаждается конвективным способом. Метод основан на комбинации теплопроводности с быстрым отведением тепла от поверхности охлаждаемого предмета быстро циркулирующей жидкостью либо газом. При конвекции объект (в данном случае криопациент) охлаждается текучей средой (жидкостью или газом), и текучая среда уносит тепло с прилежащего к объекту слоя. При охлаждении человеческого тела (37ºC) до температуры 10ºC применение быстро циркулирующей ледяной воды намного более эффективно, чем использование пакетов со льдом или ванн без циркуляции. Показатель теплопередачи определяется уравнением ньютоновского закона охлаждения, который описывает величину отводимого тепла как: hA(Ts-Tf), где: Ts начальная температура (голова или тело крионируемого пациента), Tf - конечная температура (температура охлаждающего агента, т. е. ледяная вода или жидкий азот), A - площадь охлаждаемой поверхности и h - переменная, которая зависит от скорости циркуляции хладагента, его теплопроводности и теплоёмкости. Чем выше скорость циркуляции охлаждающего агента и его теплоёмкость, тем выше будет значение h. Ньютоновский закон охлаждения предопределяет большую скорость охлаждения в начале процесса, когда Ts намного больше Tf. В дальнейшем, скорость охлаждения падает экспоненциально. При отсутствии кровообращения в условиях пониженной температуры в тканях тела необратимые изменения наступают значительно позже. Сообщалось о большом количестве случаев выживания с полным восстановлением нормальной
БенджаминБест Бест Научное обоснование практики крионики Бенджамин
3 2
нервной деятельности после остановки сердца в течение от 20 минут до часа и более (особенно у детей) в условиях гипотермии, например при утопании в холодной воде [1,2]. Уровень метаболизма при охлаждении значительно падает. Как было показано в опытах на песчанках, длительность ишемии, приводящей к повреждению 50% нейронов, растёт экспоненциально при снижении температуры мозга с 37ºC до 31ºC [3]. Шесть из шести собак, введенных в гипотермическое состояние до температуры (измеряемой на барабанной перепонке) 10ºC, показали полное восстановление без какого-либо повреждения нервной системы после 90минутной остановки сердца; две из семи перенесли аналогичное состояние в течение 120 минут без видимого нарушения нервной деятельности [4]. Пациентов погружают в гипотермическое состояние с остановкой сердца более чем на час для операций на аорте без ощутимого ущерба для нервной системы. Люди, испытавшие состояние электрического молчания мозга (нулевой биспектральный индекс на ЭЭГ) при температурах между 16ºC и 24ºC [5], возвращаются в нормальное состояние без ущерба для нервной системы, что подтверждает возможность утраты и восстановления динамической активности мозга без потери личности. Гипотермическую защиту от повреждения в условия ишемии можно видеть на примере лесной лягушки (Rana sylvatica) которая выживает в полузамороженном состоянии без сердцебиения месяцами при температурах от -3ºC до -6ºC с полным восстановлением после отогревания [6]. В 1966 году японский исследователь заменил кровь в мозгу кошки на глицерин с целью уменьшения образования льда и охладил до -20ºC. Мозг пробыл при этой температуре и в отсутствии кровообращения 45 дней, после чего был оживлен и демонстрировал нормальную ЭЭГ [7].
Отношение между скоростью химической реакции (k) (включая процессы обмена и ишемического повреждения тканей) и температурой (T) может быть описано уравнением Аррениуса [8] где: T - Температура в Кельвинах, Ea - энергия активации, R - универсальная газовая постоянная (8,314 Джоулей/моль-Кельвин), A - частотный коэффициент
(учитывающий частоту молекулярных соударений и вероятность, что соударение происходит с ориентацией, благоприятствует протеканию реакции). Взяв натуральный логарифм от обеих частей уравнения получаем:
4
Научное обоснование практики крионики
Бенджамин Бест
Для двух различных температур, T1 и T2, будет различной и зависимость
скорости реакции от температуры, k1 и k2: или
Вычитание ln k2 из ln k1 дает уравнение первой степени с четырьмя переменными: которое может быть упрощено до: Скорость ферментативных реакций при различных температурах дает хорошее приближение зависимости между температурой и уровнем метаболизма. Лактатдегидрогеназа мышц кролика с энергией активации (Ea) 13100 калорий/моль[9] может рассматриваться как типичный фермент. Одна термохимическая калория равна 4.184 Джоуля, что дает 54810 Джоулей/моль.
Сравнение скорости протекания реакции (k1) для лактатдегидрогеназы при 40ºC (313 Кельвинов) (T1) со скоростью реакции (k2) при 30ºC (303 Кельвина) (T2) дает: Скорость протекания реакции при 40ºC вдвое превышает скорость реакции при 30ºC или, напротив, падение температуры на 10ºC снижает скорость реакции наполовину. Это согласуется с правилом Вант-Гоффа - эмпирическим правилом, согласно которому при температурах между 0ºC и 40ºC скорость реакции уменьшается в 2-3 раза при снижении температуры на 10ºC[10]. Такое экспоненциальное уменьшение скорости реакций со снижением температуры означает, что скорость их протекания становится исчезающе малой при криогенных температурах (ниже -100ºC), если они возможны при таких условиях. В приведенной таблице, полученной с использованием предыдущего уравнения сравниваются скорость протекания реакции при 37ºC (310 Кельвинов, нормальная температура человеческого тела) и скорости реакций при более низких температурах. Скорость реакции при низких температурах по сравнению с 37ºC
ТЕМПЕРАТУРА
ЭТАЛОН
ПО ОТН. К 37С
0 С (273 К)
Таяние льда
в 18 раз медленнее
1,8 часа
-80 С (193 К)
Сухой лёд
в 400000 медленнее
4,5 года
-120 С (153 К)
Стеклообр. сост.
в 3*109 медленнее
-197 С (77 К)
Кипение азота
в 9*10 медленнее
27
6 мин при 37С
34 000 лет 1023 лет
БенджаминБест Бест Научное обоснование практики крионики Бенджамин
5 2
Если взять лактатдегидрогеназу как типичный фермент, то скорость метаболизма при 37ºC будет в 18 раз выше чем при 0ºC. Экспериментально наблюдался уровень окислительного фосфорилирования при 4ºC составлявший 1/20 от такового при 37ºC [11], что приблизительно соответствует вычисленному. Скорость реакции в 9 октиллионов раз более высокая при температуре человеческого тела чем при -196ºC означает, что при низкой температуре практически не будет происходить реакций в течение тысячелетий. При температуре жидкого азота потребуется 100 секстиллионов лет, чтобы протекли те ишемические биохимические реакции, которые при 37ºC произойдут за 6 минут. Но даже эти цифры преуменьшают химическую инертность при криогенных температурах, так как уравнение Аррениуса справедливо для жидкостей или газов, в которых возможно обычное химическое взаимодействие. При температурах ниже 130ºC ткани млекопитающих переходят в твердое стекловидное состояние с вязкостью более 1013 пуаз[12,13], что более чем в 1015 (один квадриллион) раз выше, чем вязкость воды при температуре 20ºC. В результате этого скорость диффузии незначительна даже в геологических масштабах времени. При температуре жидкого азота ткани млекопитающих могут даже быть на протяжении многих столетий устойчивы к фоновой радиации [12]. Мнение, что при заморозке тканей млекопитающих всегда происходит образование льда внутри клеток, приводящее к их разрыву, является заблуждением. При охлаждении тканей, вода осмотически покидает клетки, после чего образуются внеклеточные кристаллы изо льда без примесей. Не замёрзший жидкий остаток содержит всё более высокую концентрацию токсичных электролитов. В дальнейшем образуется столько внеклеточного льда, что он разрушает клетки в оставшихся незамороженными каналах [12]. Вопрос о том, что является основной причиной повреждений клеток при образовании льда во время медленного охлаждения механические повреждения или токсичные концентрации электролитов - остаётся предметом споров среди криобиологов [15]. Практика же современной крионики направлена на уменьшение или, даже, исключение кристаллизации.
Витрификация и криогенное хранение В крионике долгое время искали способ предотвратить образование льда в тканях с помощью препятствующих замерзанию веществ - криопротекторов, первоначально в основном глицерина. В 2007 г. обе основные крионические организации (Alcor Life Extension Foundation и Cryonics Institute) заявили, что они, с помощью витрифицирующегося раствора, исключили образование льда в головном мозгу; подобного заявления о других органах и тканях сделано не было. Витрификация является затвердеванием в аморфное (стеклоподобное) состояние, отличающиеся от кристаллического льда. Известным примером витрифици-рованного (аморфного, акристаллического) твёрдого вещества является янтарь. Чистая вода может витрифицироваться при охлаждении со скоростью не меньшей, чем три миллиона Кельвинов за секунду [18], подобная скорость для тканей животных является недостижимой. Сахарозу можно охладить достаточно быстро, чтобы она витрифицировалась в "сахарную вату", но более медленное охлаждение приведёт к образованию кристалла сахара. Добавление кукурузного сиропа в сахарозу позволяет её охлаждать в используемое в леденцах акристаллическое твёрдое состояние медленно. Диоксид кремния можно охладить достаточно быстро, чтобы образовалось витрифицированное кварцевое стекло, при медленном же охлаждении образуется его кристаллическая форма (кварц). Бытовое стекло производится с добавлением в диоксид кремния оксидов натрия и кальция, что позволяет охлаждать постепенно загустевающий расплав достаточно медленно с
6
Научное обоснование практики крионики
Бенджамин Бест
образованием аморфного (акристаллического) твёрдого вещества. Несмотря на отсутствие фазового перехода из жидкого в кристаллическое состояние при температуре плавления/кристаллизации, витрификация сопровождается значительным увеличением вязкости вещества (называемым затвердеванием), которое происходит при температуре стеклования (Tg), что определяется скоростью охлаждения. Наиболее часто используемые криопротекторы включают в себя диметилсульфоксид (ДМСО), а также полиолы этиленгликоль (автомобильный антифриз), пропилен гликоль (ранее использовавшийся как добавка против образования ледяных кристаллов в мороженом) и глицерин (используется с 1950-х годов для криоконсервирования спермы и клеток крови). Все эти соединения способны к созданию водородных связей с молекулами воды, что препятствует их организации в лед. Эти криопротекторы также препятствуют формированию молекулярной решётки льда благодаря коллигативному эффекту. Смеси криопротекторов могут быть менее токсичны, чем чистые криопротекторы, и могут полностью устранить льдообразование. Использование блокаторов льда (не криопротекторов, таких как препядствущие замораживанию протеины, которые химически блокируют рост кристаллов льда) в витрификационные смеси может еще больше снизить токсичность и концентрации, необходимых для витрификации [19]. Трудность достижения достаточно высокой концентрации криопротекторов для ликвидирования льдообразования, одновременно минимизируя повреждений от токсичности криопротекторов, и является ограничивающим фактором, препятствующим лучшему восстановлению биологических систем после криоконсервации. Быстрое охлаждение может позволить использование более низкие концентрации криопротекторов для предотвращения льдообразования, но быстрое охлаждение становится затрудненным с увеличением объёма тканей. Токсичность криопротекторов снижается при низких температурах, и использование менее вязких смесей криопротекторов позволяет увеличить скорость проникновения их в ткани и, тем самым, сократить время воздействия криопротекторов на ткани при более высоких температурах до охлаждения. Предлагался ряд возможных объяснений токсичности криопротекторов, однако точные молекулярные механизмы остаются неизвестными [20]. Поскольку криопротекторы не разрушают молекулы, то ущерб наносимый ими не обязательно должен быть невосполнимым. Кроме того, значительный успех был достигнут в направлении снижения токсичности витрификационных смесей [21,22], и нет никаких оснований полагать, что дальнейшее снижение токсичности не может быть достигнуто. Наиболее изученным органом млекопитающих, в попытках витрификации органов является яичник. Переменный успех был достигнут с яичниками ряда видов, но наибольший успех был достигнут с яичниками мышей. Витрифицированные яичники мыши, криоконсервированные при -196 º C, были повторно разогреты для произведения потомства, причём рождаемость была сопоставима с той, что наблюдалась при использовании свежих яичников [23]. В исследовании на срезах гиппокампа крыс показано, что клетки витрифицированных срезов, охлажденных до твёрдого состояния при -130 º C, после повторного нагревания могут иметь жизнеспособность, сопоставимую с контрольными срезами, которые не были витрифицированы или криосохранены. Ультраструктура повторно разогретого среза региона CA1 (область мозга, наиболее страдающая при ишемии) выглядит достаточно хорошо сохранившейся в сравнении с ультраструктурой контрольной ткани CA1 [24]. Крионические организации перфузируют мозг витрификационным раствором до достижения насыщения.
БенджаминБест Бест Научное обоснование практики крионики Бенджамин
7 2
Витрифицированные и криосохраненные ткани оцениваются как по жизнестойкости, так и по ультраструктуре. Для измерения жизнеспособности часто используется внутриклеточное соотношение ионов K+/Na+, хотя в будущем могут оказаться полезными и другие методы (такие как измерение концентрации АТФ в клетке). Натриевый насос, поддерживающий трансмембранный потенциал, не будет функционировать без связывания с АТФ и Na+ внутри клеточной мембраны и K+ вовне. Хотя клетка может поддерживать трансмембранный потенциал в течение нескольких часов и с нефункционирующим натриевым насосом, после этого протекание Na+ внутрь клетки и сопутствующее вытекание K+ из клетки приведут к полной потере трансмембранного потенциала. Аналогично, если клетка погибает в том смысле, что она более неспособна производить АТФ в митохондриях, то и натриевый насос прекратит работу. Таким образом, нормальное внутриклеточное соотношение K+/Na+ показывает как нормальное функционирование натриевых насосов, так и целостность клеточных мембран. Чтобы проверить межклеточное соотношение K+/Na+, ткани помещают в маннитол для вымывания внеклеточных ионов. Затем используют трихлоруксусную кислоту для разрыва клеточных мембран и высвобождения внутриклеточных ионов. Для определения относительных концентраций натрия и калия можно использовать атомно-абсорбционный спектрометр или пламенный фотометр. Изучение жизнеспособности витрифицированных гипокампальных срезов при использовании межклеточных соотношений K+/Na+ показывает жизнеспособность более, чем в 90% по сравнению с нормой. Почка кролика была витрифицирована, охлаждена до температуры -135ºC, затем снова разморожена и трансплантирована в кролика. Витрифицированный ранее трансплантат функционировал как единственная почка достаточно хорошо для поддержания кролика в живых неограниченное время [25]. Некоторые полагают, что для криосохранения мозга необходимо понимание механизма его функционирования. Но, если говорить упрощенно, почки производят мочу, а мозг продуцирует сознание. Размороженный после крионирования мозг, восстановленный физиологически, должен продуцировать сознание не менее эффективно, чем размороженная почка производит мочу. Сохранение структуры и восстановление физиологии должно обеспечить восстановление функциональности, независимо от вида органа или ткани. Для сохранения почки кролика использовалсz витрификационный раствор M22. M22 также применяется для витрификации крионируемых пациентов организацией Алькор. Показано, что перфузии кроликов раствором M22 сохраняет ультраструктуру мозга без образования льда[26]. Охлаждение от 0ºC до -130ºC должно быть быстрым для минимизации возможности образования льда. При охлаждении от -130ºC до -196ºC термические напряжения в больших твёрдых образцах могут приводить к их растрескиванию и разламыванию [27]. Хотя существует теоретическая возможность достаточно медленного охлаждения до -196ºC, что дает возможность избежать растрескивания, точно неизвестна скорость такого охлаждения, и она может оказаться слишкой малой для практического использования. Снятие напряжений в витрифицированном образце при температурах в районе перехода его в стекловидное состояние может снять термические напряжения в нем[28], но этого может быть недостаточно. Ввиду отчетливо выраженной природы, повреждения образца от растрескивания могут быть устранены гораздо более легко, чем повреждения тканей непосредственно от заморозки.
8
Научное обоснование практики крионики
Бенджамин Бест "Обратимая
смерть"?
Еще в 1950-х годах верили, что при остановке сердца наступает необратимая смерть. Сегодня установлено, что сердечно-легочная реанимация в сочетании с использованием автоматических внешних дефибрилляторов способно вернуть многих людей к жизни из состояния клинической смерти, наступившей вследствие остановки сердца [29]. Но многие до сих пор считают, что после примерно шести минут остановки сердца и прекращения циркуляции крови наступает непоправимое повреждение мозга. В 1976 году Питер Сафар (Peter Safar, изобретатель искуственного дыхания) продемонстрировал, что собаки могут быть возвращены к жизни после 12 минут остановки сердца без повреждения нервной системы с использованием повышения артериального давления, норэпинефрина, гепарина и гемоделюции с декстраном 4030. Через десять с лишним лет был проведен эксперимент, который показал, что реперфузия и лечение норэпинефрином (или допамином), гепарином, инсулином и буфером кислотности возвращает спонтанную активность на электроэнцефалограмме у 50% кошек после часа общей ишемии головного мозга. Шесть из пятнадцати кошек, подвергнутых интенсивной терапии, восстановили спонтанное дыхание, а одна из кошек прожила полный год с нормальными нейрологическими функциями (за исключением легкой атаксии) [31]. Шестиминутная граница - это в первую очередь не нейрологический феномен, а проблема увеличения васкулярного сопротивления, которая может быть преодолена (частично) с помощью увеличения перфузионного давления [32]. Реперфузионными повреждениями называются повреждения в тканях, связанные с восстановлением кровотока после ишемического периода продолжительностью около 20 минут и больше. Возобновление поступления крови после длительного периода ишемии инициирует воспалительные процессы и заставляет кислород формировать токсичные свободные радикалы (активные формы кислорода), такие, как супероксид [33]. Порождаемый при участии ксантиноксидоредуктазы супероксид повреждает эндотелий гораздо сильнее, чем паренхиму [34]. В условиях воспаления, которые имеют место при реперфузии, адаптивные синтетазы оксида азота могут увеличить концентрацию оксида азота в тысячи раз по сравнению с нормальным уровнем [35]. Во время реперфузии аномально высокое количество супероксида превращает почти весь имеющийся оксид азота в пероксинитрит, который, как считается, является причиной большинства повреждений эндотелиальных клеток капилляров мозга [36]. Несмотря на повреждающее действие эксайтотоксичности [37], структура мозга обычно сохраняется после смерти гораздо дольше, чем обычно считается. После шестичасовой остановки кровотока (ишемии головного мозга) в коре головного мозга крыс некротизировалось только 15% нейронов. Большая часть нейронов (65%) не некротизировалась до двенадцатичасовой отметки после остановки кровотока [38]. Нейроны, отобранные во время аутопсии головного мозга пожилых людей, умерших в среднем за 2.6 часа до аутопсии, после двухнедельного хранения вне тела показывали жизнеспособность 70-90% [39]. Одной из причин, по которой в настоящее время более шести минут остановки сердца ведут к неврологическим повреждениям, является тот факт, что ишемия запускает процесс саморазрушения нейронов (апоптоз), который занимает много часов. Однако уже скоро могут быть созданы методы предупреждения апоптоза. Нейроны в секторе CA1 гиппокампа намного более уязвимы к отмиранию вследствие ишемии, чем нейроны в любой другой части мозга [40]. Но количество отмирающих клеток в гиппокампе после ишемии может быть существенно снижено
БенджаминБест Бест Научное обоснование практики крионики Бенджамин
9 2
при использовании ингибиторов каспаз, которые останавливают процесс апоптоза [41]. Ингибиторы каспаз также использовались для остановки апаптоза в криосохраненных и размороженных гематопоэтических (кроветворных) клетках [42]. Протеин Bag-1, который связывает про-апоптические протеины семейства Bcl2 показал мощный анти-апоптический эффект на печени крыс, подвергшихся повреждению от ишемии/реперфузии [43]. Большинство нейробиологов согласны, что анатомическая основа разума закодирована в физических структурах мозга, в особенности, в сетях нейропилей и в силе синаптических соединений [44] и, возможно, в эпигенетической структуре нейронов [45]. Тот факт, что даже полное отсутствие электрической активности в мозгу не делает полное неврологическое восстановление пациента невозможным [45, 46], поддерживает предположение о том, что основа сознания носит структурный, а не динамический характер, а значит, может быть сохранена при криогенных температурах. Значительное восстановление коры головного мозга после инсульта может быть связано с избыточностью в хранении информации головным мозгом [47, 48, 49]. Восстановление головного мозга от вызванных ишемией, токсинами или криоконсервацией травм потенциально может быть усилено терапией нейрональными стволовыми клетками [50]. Данные соображения увеличивают допустимую величину повреждений, которые могут быть нанесены при хранении человека в крионических субоптимальных условиях. Сохранение структуры мозга и восстановление мозговых фунцкий - центральные проблемы крионики. Другие органы и ткани не так важны, поскольку можно ожидать, что медицина будущего сможет легко регенерировать их, используя стволовые клетки. Регенерация конечностей у саламандры уже используется как ориентир для регенерационной медицины млекопитающих [51]. Поддающиеся биологическому разложению трёхмерные каркасы из переплетённых волокон [52] потенциально могут быть использованы для изготовления органов, а возможно и целых тел. Традиционная крионика стремится к минимизации повреждений и уменьшению зависимости от молекулярных восстановительных технологий будущего. Во многих случаях у криопациентов период после остановки сердца, длился менее минуты, после чего кровообращение было восстановлено. Свидетельства того, что неврологическая основа сознания сохраняется значительно дольше шестиминутного предела даёт надежду, что молекулярная медицина, направленная на лечение апоптоза и восстановления повреждённых кровеносных сосудов, может помочь восстановить жизнеспособность крионических пациентов, которым не помогло доступное сейчас лечение. Маловероятно то, что крионика бесполезна после шестиминутной остановки кровообращения. Гибель множества тканей наступает лишь по прошествии нескольких часов после остановки сердца. В идеальном случае в мозгу криопациента практически не образовывается кристаллов льда. Починка витрифицированных тканей мозга, получивших небольшие ишемические повреждения, может быть произведена при температурах выше криогенных одновременно с излечением болезней и омоложением. Хотя существует обоснованная правовая необходимость обозначить чёткую границу между жизнью и смертью, с биологической и физиологической точек зрения правильнее говорить о непрерывном диапазоне состояний, а не о простой дихотомии. Сознание постоянно развивается, проходя через стадии эмбриона, плода, ребенка, взрослого и может постепенно деградировать из-за неврологических заболеваний. После остановки сердца структура мозга разрушается в течение
10 Научное обоснование практики крионики
Бенджамин Бест
нескольких часов или дней, со скоростью, зависящей от температуры. Недихотомичность состояний мозга станет очевидна для оживляемых криопациентов, чьи мозги были частично разрушены, затем восстановлены. Результатом такой процедуры может быть частичная амнезия и неполнота восстановления исходной личности.
Крионические процедуры Предварительная обработка умирающих, которые в дальнейшем будут крионированы, имеющая целью снижение повреждений в результате ишемии/реперфузии, желательна, но редко делается на практике. Так, например, внутривенные инъекции витамина E в форме альфа-токоферола (20 мг/кг) за 30 минут до ишемии, как было показано, значительно снижают перекисное окисление липидов и неврологические повреждения [53]. Лучше комбинировать введение как альфа-токоферола так и гамма-токоферола, поскольку гамма-токоферол удаляет пероксинитрит, а альфа-токоферол - нет [54]. Премедикация витамином Е дает преимущество в виде увеличения времени свертывания крови, и не подвергает пациента риску желудочного кровотечения, связанного с приемом аспирина. Многие виды рыбьего жира (особенно лосося) дают такие же преимущества и, в дополнение, снижают риск остановки сердца [55]. Сокращение свертывания крови у криопациентов, как правило, является большим преимуществом, но для пациентов, которые подвергаются хирургическому вмешательству, витамин Е и рыбий жир могут быть запрещены к применению из-за опасности массивного кровотечения. Криопроцедуры обычно производятся только с людьми, которые заранее имели контрактные и финансовые договорённости с крио-организациями (например, Фонд продления срока жизни Алькор, Американское сообщество Крионики или Институт Крионики). При оптимальных условиях подвергающийся крионированию человек будет объявлён юридически мертвым очень быстро после остановки сердца. Лишь после официального призания факта смерти могут быть начаты криопроцедуры. Как только произошла остановка сердца и факт смерти был юридически зафиксирован, пациенту вводят препараты для поддержания седации, снижения мозгового метаболизма, предотвращения/обращения свертывания крови, повышения кровяного давления, стабилизации рН от ацидоза, а также защиты от повреждений при ишемии/реперфузии. Криопроцедуры включают в себя как можно более быстрое восстановление кровообращения и вентиляции лёгких с целью поддержания жизни в тканях. В крионике это называется сердечно-легочная поддержка (CardioPulmonary Support, CPS), в отличии от сердечно-легочной реанимации (CardioPulmonary Resuscitation, CPR), поскольку реанимация после констатации смерти не желательна (состояние DNR - Do Not Resuscitate). Пропофол (2,6-диизопропилфенол) используется отчасти из-за того, что его седативный эффект может предотвратить реанимацию, что сочетается с его нейропротекторным действием [56]. Показано, что пропофол ингибирует апоптоз нервных клеток, который может произойти вследствие повреждения при ишемии/реперфузии [57]. Для предотвращения свертывания крови используется гепарин. Тромболитический фермент стрептокиназа часто используется для растворения сгустков крови. Трис-гидроксиметил АминоМетан (THAM, Tris-Hydroxymethyl AminoMethane) служит буфером, поддерживающим артериальный показатель pH без выделения диоксида углерода, а также внутриклеточный pH благодаря его свойству легко проникать сквозь клеточную мембрану [58].
БенджаминБест Бест Научное обоснование практики крионики Бенджамин
11 2
При наличии оборудования команда по крионированию восстанавливает дыхание и кровообращение с помощью аппаратов, действующих как на сжатие (рабочий ход вниз), так и на разрежение (рабочий ход вверх). Применение активного сжатия-разрежения (Active Compression-DeCompression - ACDC), перемежаемого с брюшным сжатием может существенно повысить эффективность проводимой сердечно-легочной поддержки [59]. Часто одновременно с процедурами сердечнолегочной поддержки для поддержания кровяного давления вводится эпинефрин, с этой целью также может быть использован вазопрессин[60]. Во время процедуры сердечно-лёгочной поддержки с применением ACDC сам пациент находится в ванне с циркулирующей ледяной водой. Охлаждение в воде происходит намного быстрее, чем на воздухе[16], а в проточной воде намного быстрее, чем в стоячей, согласно закону охлаждения Ньютона. Охлаждение криопациента значительно ускоряется из-за циркуляции крови, вызванного сердечно-лёгочной поддержкой с ACDC. После того, как температура тела криопациента будет снижена до менее чем 10ºC, может быть начато проведение перфузии витрифицирующим раствором. Витрификация головного мозга с использованием криопротектора занимает значительно больше времени, чем это необходимо для витрификации срезов гиппокампа. Криопротекторы токсичны, соответственно, их токсическое действие на ткани головного мозга возрастает с увеличением времени обработки. Однако, крупные органы не могут быть охлаждены со скоростью, применяемой для охлаждения срезов тканей, что означает необходимость применения более высоких концентраций криопротекторов для предупреждения образования льда. Были сделаны предложения по созданию систем хранения криопациентов при температурах, близких к -130ºC, чтобы избежать трещин в результате термического стресса при охлаждении до -196ºC. Объекты, хранящиеся при температуре чуть ниже -130ºC, уже будут иметь твердое состояние, так как витрификационные растворы имеют температуру затвердевания чуть ниже -120ºC [20]. В настоящее время практические все криопациенты хранятся при температуре чуть ниже 130ºC. Криопациенты хранятся в похожих на термос контейнерах, наполненных жидким азотом. Этот метод экономен и независим от электричества (не так уязвим к отключениям электроэнергии). Наука и косвенные доказательства Многие критики утверждают, что крионика - не наука, и она не сможет ею считаться до тех пор, пока млекопитающее не будет реанимировано после криосохранения при сверхнизких температурах. Однако экстраполяция косвенных доказательств и построение моделей на их основе - это важнейший научный метод. Никто никогда не видел ядро Земли. Были созданы модели состояния Вселенной в первую миллионную долю секунды после Большого Взрыва. Ученые описывают будущее состояние Земли после многих лет глобального потепления. Существуют модели, описывающие распад ядерных отходов в течение сотен тысяч лет, и на эти модели опираются при разработке методов хранения отходов. Высадка человека на Луну косвенно доказывает возможность будущих управляемых полетов и высадки человека на Марсе. Многие люди криоконсервируют стволовые клетки своих новорожденных младенцев, полагаясь на потенциал будущих научных разработок, а не на уровень современной науки. Половые клетки и образцы ДНК видов, находящихся под угрозой исчезновения, также криоконсервированы и ожидают будущих технологий.
12 Научное обоснование практики крионики
Бенджамин Бест
Вакцины против гриппа дают только 50%-ную защиту людям старше 65 [62,63]. Это не антинаучно - рисковать, пользуясь недостаточно эффективным или довольно опасным медицинским лечением, которое обосновано косвенными доказательствами определённой вероятности успеха, а не абсолютной её гарантией. Если существуют потенциально возможные модели для восстановления и реанимации криоконсервированных пациентов [64, 65], то кажется разумным опираться на них при принятии решений в отношении криоконсервации как долгосрочного лечения, которое может или не может добиться успеха. Ждать до тех пор, пока криоконсервированное млекопитающее будет реанимировало, прежде чем криоконсервировать людей, может означать, что жизнь многих людей будет потеряна. Это всё равно, что ожидать десятки или сотни тысяч лет, чтобы убедиться, что ядерные отходы могут быть захоронены, прежде чем захоранивать их. Существуют косвенные доказательства в поддержку утверждения, что оживление криоконсервированных млекопитающих не является существенным для научного обоснования крионической практики. Заключение Низкая температура замедляет биологическое время, практически останавливая его при температуре жидкого азота. Криопротекторы значительно снижают ущерб, причиняемый криоконсервацией тканей, а эффективная виртификация может полностью предотвратить образование льда. Токсичность криопротекторов, скорее всего наносит лишь обратимые повреждения, кроме того, продолжают появляться всё менее токсичные средства криоконсервации. Применительно к человеку и животным, криоконсервация позволяет обеспечить стабильного биологического состояния, которое принципиально обратимо. Умирание - это процесс, который начинается, а не заканчивается, когда сердцебиение и циркуляция крови прекращается. Когда на основании факта остановки сердца объявляется юридическая смерть, криопроцедуры минимизируют дальнейший вреда путем искусственного восстановления кровообращения и быстрого понижения температуры. Длительность клинической смерти при высокой температуре, после которой составляющая личность человека информация в мозгу теряется, может составлять несколько часов. Предположение, что старение является болезнью, которую можно лечить и, возможно, в конечном итоге обратить вспять (омоложение), основывается на общем понимании того, что старение состоит из множества конкретных патологий на клеточном и молекулярном уровнях, которые можно изучать, понимать, и исправлять с помощью создаваемых в обозримом будущем инструментов. Патологии, вызванные глобальной церебральной ишемией (клинической смертью), процессом криоконсервации, а также неизлечимыми в настоящее время заболеваниями, также поддаются анализу и возможному восстановлению в будущем. Если повреждения от старения могут быть исправлены когда-то в будущем, разумно полагать, что повреждения от криопроцедур также могут быть исправлены. И если повреждения от старения могут быть исправлены в будущем, то крионика может оказаться единственным для многих живущих сегодня людей способом, позволяющим получить в своё распоряжение медицинские технологии будущего, которые смогут вылечить пока неизлечимые заболевания и провести омоложение. Перевод: © Ежов Матвей, Feuerfrei, Михаил, Артюхов И.В., Медведев Д.А., coced, Попов А., zakal, Валерия Прайд, hellt. translated.by Список литературы и электронную версию статьи можно прочитать: http://www.kriorus.ru/content/nauchnoe-obosnovanie-praktiki-krioniki