PROTOZOOS INTESTINALES AUTORES DOCENTES MICROBIOLOGIA
CLAUDIA CLAVIJO ROMERO MARCELA GOMEZ GARZON ADRIANA JIMENEZ ROJAS DIANA ORTIZ JIMENEZ
PRACTICA PARASITOLOGIA # 2 PROTOZOOS INTESTINALES (Diferentes amebas)
Phylum I. Sarcomastigophora (pseudopodia, flagella) Subphylum I. Mastigophora (flagella) Order 5. Diplomonadina Giardia Phylum III. Apicomplexa (Complejo de microtúbulo apical) Clase 2. Sporozoea Orden 3. Eucoccidia Cryptosporidium, Isospora,Cyclospora, Sarcocystis. Phylum VII. Ciliophora (ciliados) Clase I. Kinetofragminophorea Orden 1. Trichostomatida Balantidium OBJETIVO DE LA PRÁCTICA
Al finalizar la sesión Nº 2, el estudiante estará en capacidad de reconocer apropiadamente mediante examen microscópico las características morfológicas y estructuras típicas de algunos protozoarios intestinales Giardia lamblia, Balantidium coli, Cryptosporidium y correlacionarlo con la patología que produce en el humano. Al finalizar la sesión Nº 2, el estudiante estará en capacidad de identificar correctamente los diferentes métodos y ayudas de laboratorio útiles en el diagnóstico de los protozoarios intestinales.
INTRODUCCION PROTOZOOS
Blastocystis hominis Blastocystis hominis es un protozoario intestinal de prevalencia creciente del cual aún se desconocen muchos aspectos epidemiológicos. En el pasado era confundido en el laboratorio con artefactos o quistes de otros protozoarios. En la actualidad su papel como patógeno continúa generando controversia y los hallazgos del laboratorio deben correlacionarse con la clínica del paciente para determinar si el paciente requiere de un antiparasitario. Se describen cuatro formas de vida principales: 1) Vacuolar o cuerpo central, 2) granular, 3) ameboide y 4) quiste. La primera es la más frecuentemente observada en heces constituyéndose por lo tanto en el estadio diagnóstico, los quistes son difíciles de observar debido a su tamaño y se requieren de técnicas especiales.
Protozoos flagelados intestinales Giardia lamblia/Giardia intestinales/ Giardia duodenales/Trichomonas hominis
Si usted o algún miembro de su familia presentan dolor abdominal, flatulencias y diarrea ¡Cuidado¡ posiblemente sea víctima de la Giardia lamblia llamada también llamada Giardia intestinales o Giardia duodenales, un protozoo que parasita el intestino delgado y se adquiere al consumir alimentos mal lavados y agua contaminada con quistes. Pero ¡ojo¡ en muchos casos no se presenta síntomas y los descritos anteriormente pueden pertenecer a otros microorganismos o enfermedades genéticas que al igual que Giardia producen mala absorción de alimentos. Las muestras idóneas para la búsqueda de G. lamblia, son heces diarreicas o heces formadas, si después de practicar varios exámenes de materia fecal no se puede realizar el diagnostico de G. lamblia, se deberá recurrirse al estudio microscópico de contenido duodenal obtenido por endoscopia. También se puede detectar la presencia de antígenos mediante técnicas inmunológicas como Hemaglutinación indirecta, ELISA CIEF (Contrainmunoelectroforesis) e inmunoblot. Trichomona hominis
Trichomona hominis es otro protozoario flagelado que vive en el intestino grueso. Es considerado como un parásito no patógeno, pero si la infección es severa y el número de trofozoitos en el intestino aumenta considerablemente, puede llegar a provocar diarrea por irritación de la mucosa. Se presenta bajo una sola forma de vida “trofozoitos,” que son infectantes en todo momento. La vía de transmisión más común es la ingestión de trofozoitos por medio de alimentos o de bebida infectados con materia fecal. En ciertos casos, las moscas pueden actuar como vectores mecánicos de los trofozoitos, al transportar restos de materia fecal a los alimentos. Una vez establecidos en el nuevo hospedador los trofozoitos se dividen y se extienden por todo el intestino grueso. El diagnóstico de laboratorio se realiza a través de la visualización del trofozoito en examen de materia fecal, las características morfológicas son muy similares a la de Trichomonas vaginales y Trichomonas tenas
Protozoos intestinales ciliados Balantidium coli
Es el protozoo de mayor tamaño y el único ciliado que afecta al hombre. Se encuentra a menudo infectando el colon, produce balantidiasis o colitis con un cuadro clínico similar al de la amebiasis. En su ciclo de vida presenta dos fases trofozoito y quiste. El diagnóstico se comprueba observando al microscopio trofozoitos en materia fecal diarreicas recientemente emitidas. Los quistes se observan en materia fecal pastosa o dura. La rectosigmoidoscopia permite observar las lesiones y obtener muestra para examen parasitológico, también se puede realizar diagnostico por inmunofluorecencia indirecta y hemaglutinación indirecta. El hombre se contamina por alimentos, agua, manos que contengan quistes del parásito. COCCIDIOS
Cryptosporidium, Cyclospora, Isospora, Sarcocystis y Toxoplasma. Desde la aparición de la epidemia del Síndrome de Inmunodeficiencia Humana (SIDA), se ha incrementado el número de reportes de pacientes infectados con parásitos oportunistas entre los que se encuentran algunos géneros del grupo de los coccidios.
Debido a la obtención de resultados negativos en los estudios de muestras de materia fecal y a las lesiones poco llamativas encontradas en las biopsias intestinales de estos pacientes, ha sido conveniente el estudio de las muestras con coloraciones especiales con el fin de llegar a un diagnóstico de la especie que ocasiona la infección.
Cryptosporidium hominis/Cryptosporidium parvum Son coccidios que poseen un ciclo de vida complejo. La forma que se elimina en materia fecal es la de ooquiste, que es la forma infectante para otros humanos cuando penetra por ingestión. Estas formas son resistentes al cloro por lo que se transmiten fácilmente a través del agua, aunque las manifestaciones clínicas solo son evidentes en pacientes inmunocomprometidos. Microscópicamente pueden confundirse con levaduras. La coloración de Kinyoun (ácido alcohol resistente modificado o Ziehl Neelsen modificado) permite diferenciarlos de otros microorganismos, ya que el Cryptosporidium se tiñe de rojo o rosado y las levaduras y otros detritus de azul. Se debe tener presente que otros coccidios como Isospora y Cyclospora también son ácido alcohol resistentes y se diferencian entre si por su tamaño. En la actualidad, existen otras técnicas útiles para el diagnóstico de la criptosporidiosis como la biopsia intestinal, la técnica ELISA (sensibilidad del 80-90%), inmunoflorecencia indirecta o técnicas moleculares como reacción en cadena de la polimerasa. Técnicas que no son incluidas en los laboratorios debido a los altos costos y su baja demanda. Cyclospora cayetanensis
Inicialmente este parásito se conoció como una bacteria (Cianobacteria) luego mediante estudios de microscopia electrónica se observo que sus características morfológicas eran más concordantes con un parásito. La forma de Ooquiste se observa en examen directo en fresco de materia fecal o teñidas con coloración de Kinyoun.
Isospora belli La forma que se elimina y observa en materia fecal es el ooquiste, que en el ambiente esporula, formando en el interior del ooquiste dos esporoquistes que constituyen la forma infectante al ser ingeridos. Los métodos de tinción sobre frotis de muestras concentradas pueden ayudar a la detección de los ooquistes de I. belli. La tinción de ácido-alcohol resistencia modificada (Ziehl-Neelsen modificado) tiñe los ooquistes de rosa. Los ooquistes también se tiñen mediante el método de la auramina-rodamina, apareciendo fluorescentes. Con la tinción de Giemsa los ooquistes y esporoblastos (esporoquistes) se tiñen de azul.
ACTIVIDADES 1.
Señale en las siguientes representaciones de parásitos, el género correspondiente y las estructuras que observa. GENERO: Giardia
GE-
NERO: Balantidium 2. Grafique la formas parasitarias que observa teniendo en cuenta la coloraciรณn respectiva y muestra correspondiente.
TROFOZOITO de Giardia lamblia EN MATERIA FECAL COLORACIÓN DE GRAM
DESCRIPCION MICROSCOPICA Tamaño de 5 a 15 micras x 10-20 micras Forma periforme su parte anterior ancha presenta una especie de ventosa o concavidad que le sirve para adherirse al epitelio intestinal y es el disco suctorio. En el citoplasma se encuentra dos núcleos anteriores con cariosoma voluminoso y central que semejan “gafas” Existe una barra media que va desde la ventosa hasta la extremidad posterior y constituye el Axostilo que le sirve para fijar flagelos en total son ocho flagelos (4 pares) Hacia la mitad del Axostilo se encuentra el cuerpo basal y dentro de la masa protoplasmática se hallan inclusiones que son pedazos de células intestinales.
TROFOZOITO de Giardia lamblia EN MATERIA FECAL COLORACIÓN DE tricromo
DESCRIPCION MICROSCOPICA Tamaño de 5 a 15 micras x 10-20 micras Forma periforme su parte anterior ancha presenta una especie de ventosa o concavidad que le sirve para adherirse al epitelio intestinal y es el disco suctorio. En el citoplasma se encuentra dos núcleos anteriores con cariosoma voluminoso y central que semejan “gafas” Existe una barra media que va desde la ventosa hasta la extremidad posterior y constituye el Axostilo que le sirve para fijar flagelos en total son ocho flagelos (4 pares) Hacia la mitad del Axostilo se encuentra el cuerpo basal y dentro de la masa protoplasmática se hallan inclusiones que son pedazos de células intestinales.
Quiste de Giardia lamblia MUESTRA DE MATERIA FECAL CON TINCIÓN CON LUGOL
DESCRIPCION MICROSCOPICA
Tamaño en torno a 15 um de longitud y 10 um de ancho, forma ovalada. Posee de 2 a 4 núcleos que aparecen dispuestos en alguno de los polos. En el interior del quiste se pueden observar especies de ramas correspondientes a sus flagelos, restos flagelares, cuerpo paranasales. Pared transparente Axostilo que atraviesa de un extremo a otro.
FORMAS VACUOLARES DE Blastocystis hominis EN MATERIA FECAL CON LUGOL
DESCRIPCION MICROSCOPICA Tamaño de 4 a 5 micras Se observa cuerpo central o un centro que ocupa más de mitad de la célula ( vacuola) Presenta un citoplasma como banda periférica. Tiene uno o cuatro núcleos con aspecto brillante.
FORMAS VACUOLARES DE Blastocystis hominis EN MATERIA FECAL CON COLORACION DE TRICROMO
DESCRIPCION MICROSCOPICA Tamaño de 4 a 5 micras Se observa cuerpo central o un centro que ocupa más de mitad de la célula ( vacuola) Presenta un citoplasma como banda periférica. Tiene uno o cuatro núcleos con aspecto brillante.
OOQUISTE DE COCCIDIO (Cryptosporidium) en materia fecal con coloración de Kinyoun o Ziehl Neelsen modificado
DESCRIPCION MICROSCOPICA
Se resaltan los Ooquiste de color rojo brillante Gránulos internos de color oscuro Forma esférica, vacuola citoplasmática
OOQUISTE DE COCCIDIO (Cryptosporidium) en corte histológico de ileon con coloración de Hematoxilina-Eosina
DESCRIPCION MICROSCOPICA
Formas esféricas de 4-6 ìm basófilas adheridas al borde en cepillo del intestino.
OOQUISTE DE COCCIDIO (Isospora) EN MATERIA FECAL CON COLORACION DE KINYOUN.
DESCRIPCION MICROSCOPICA
Estructura ovalada de aproximadamente 25 x 15 ìm teñidos de fucsia. En su interior se pueden visualizar dos esporoblastos (o esporoquistes) de color rojo.
TROFOZOITO DE Balantidiun coli en corte histológico de colon con coloración de HematoxilinaEosina
DESCRIPCION MICROSCOPICA
Estructuras de aproximadamente 170 ìm. Posee dos núcleos, el macronúcleo en forma de riñón y el micronúcleo no siempre visible. Posee dos hendiduras en cada uno de sus extremos, una corresponde a la boca o citostoma y la otra al ano o citopigio. Cilios en la periferia