منهج حفظ الاصول الوراثية فبراير 2016

‫قســـم الوراثـــة‬

‫مادة حفظ األصول الوراثية‬

‫اإلسم ‪:‬‬ ‫الشعبة‪:‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪1‬‬

‫الموضوعات العملية لمقرر حفظ االصول الوراثية‬ ‫استمارة ( ‪)1‬‬ ‫جدول توزيع موضوعات الدروس العملية على أسابيع الفصل الدراسي المقرر في مرحلة البكالوريوس ‪.‬‬ ‫الفصل الدراسي ‪ :‬الثانى‬ ‫اسم المقرر ‪ :‬حفظ االصول الوراثية رقم المقرر ‪( :‬ورث ‪)......‬‬ ‫الرابع‪ /‬برنامج التكنولوجيا الحيوية‬ ‫المستوى والبرامج‪:‬‬ ‫لجنة التدريس‪ :‬ا‪.‬د‪ /‬محمود عبد الحفيظ – د‪/‬لمياء مصطفي كمال – ا‪.‬مني مغازي – ا‪.‬هبه حسن‬ ‫الهدف من دراسة المقرر‪ :‬التأكد أن الطلبة تستطيع استنباط المعلومات الخاصة ب‪......................‬‬ ‫الموضـــــــــــــــــــــــــوع‬

‫األسبوع‬ ‫االول‬

‫مقدمة عن حفظ االصول وتقنيات حفظ الاصول الوراثية‬

‫الثانى‬

‫قانون هاردي وواينبرج لتحديد التكرارات الجينية في المجتمعات‬

‫الثالث‬ ‫الرابع‬

‫التقني ات الجزيئي ة المس تخدمة لقي اس او تقي يم التن وع الحي وي م ابين‬ ‫االنواع بـ ‪RAPD‬‬ ‫المعشبة النباتية "اصنعها بنفسك"‬

‫الخامس‬

‫المعشبة الحيوانية "اصنعها بنفسك"‬

‫السادس‬

‫المعشبة الفطرية "اصنعها بنفسك"‬

‫السابع‬

‫المعشبة الحشرية "اصنعها بنفسك"‬

‫الثامن‬

‫الحفظ المعملي لالصول الوراثية بواسطة زراعة االنسجة‬

‫التاريخ‬

‫التاسع‬ ‫العاشر‬ ‫الحادى عشر‬ ‫الثانى عشر‬ ‫الكتب الدراسية و المراجع ‪-:‬‬ ‫مواعيد الحصص العملية يوم‬

‫الثالثاء من ‪5-3‬‬

‫مواعيد االمتحانات خالل الفصل الدراسي ‪:‬‬ ‫امتحانات أعمال السنة‬

‫األسبوع ‪/‬‬

‫امتحان الشفهي‬

‫األسبوع ‪ /‬الثالث عشر مع اإلمتحان العملي‬

‫طرق تقييم أخرى و مواعيدها ( إن وجدت )‪-:‬‬

‫موعد االمتحان النظري يحدد من قبل إدارة الكلية طبقا للجدول العام‬ ‫لالمتحانات ‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪2‬‬

‫الدرس العملي االول‬ ‫مقدمة عن حفظ األصول وتقنيات‬ ‫حفظ األصول الوراثية‬ ‫االهداف العامة‬ ‫هو تعريف الطالب عل ي القيم ة المباش رة للنب ات ف ي حي اة االنس ان وذل ك م ن خ الل التن وع البيول وجي ال ذي يخ دم االنس ان‬ ‫وماهي اهمية المحافظة عليها وعمل حفظ لالصول الوراثية‪.‬‬

‫االهداف الخاصة‬ ‫ان يتعرف الطالب على بعض التقنيات المستخدمة فى الحفاظ علي االصول الوراثية‪.‬‬

‫‪ ‬ما هو التنوع البيولوجي؟‬ ‫إن التنوع البيولوجي هو الذي يدعم الحياة على كوكب األرض‪ ،‬ويعني التنوع الموجود في الكائنات الحية‬ ‫والذي يتراوح بين التركيب الجيني للنباتات والحيوانات وبين التنوع البيئي‪.‬‬ ‫‪ ‬ماذا يعني التنوع البيولوجي بالنسبة إلى صحة اإلنسان؟‬ ‫إن البشر يعتمدون على التنوع البيولوجي في حياتهم اليومية على نحو ال يكون‬ ‫واضحا ً وال ملحوظا ً بصورة دائمة‪ .‬فصحة اإلنسان تعتمد اعتماداً جذريا ً على‬ ‫منتجات وخدمات النظام اإليكولوجي (كتوافر المياه العذبة والغذاء ومصادر‬ ‫الوقود) وهي منتجات وخدمات ال غنى عنها لتمتع اإلنسان بالصحة الجيدة ولسبل‬ ‫العيش المنتجة‪ .‬وخسارة التنوع البيولوجي يمكن أن تكون لها آثار هامة ومباشرة على صحة اإلنسان إذا‬ ‫أصبحت خدمات ال ُنظم اإليكولوجية غير كافية لتلبية االحتياجات االجتماعية‪ .‬وللتغيرات الطارئة على‬ ‫خدمات ال ُنظم اإليكولوجية تأثير غير مباشر على سبل العيش والدخل والهجرة المحلية وقد تتسبب أحيانا ً في‬ ‫الصراع السياسي‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪3‬‬

‫وباإلضافة إلى ذلك فإن التنوع الفيزيائي البيولوجي للكائنات المجهرية والنباتات والحيوانات يتيح معرفة‬ ‫واسعة لها فوائد هامة في العلوم البيولوجية والصحية والصيدالنية‪ .‬وهناك اكتشافات طبية وصيدالنية هامة‬ ‫تتحقق بفضل تعزيز فهم التنوع البيولوجي على كوكب األرض‪ .‬وقد تتسبب خسارة التنوع البيولوجي في‬ ‫الحد من اكتشاف العالجات المحتملة لكثير من األمراض والمشاكل الصحية‪.‬‬ ‫يشمل التنوع البيولوجي «االحيائي» جميع األنواع النباتية والحيوانية ومواردها الوراثية والنظم االيكولوجية‬ ‫التي تنتمي اليها هذه االنواع‪ ،‬انه باختصار تنوع كافة اشكال الحياة على وجه األرض سواء كانت على‬ ‫اليابسة او في المياه ‪ .‬ويوفر التنوع البيولوجي للعالم ضمانة للحصول على امدادات متصلة من االغذية ومن‬ ‫انواع ال حصر لها من المواد الخام التي يستخدمها االنسان في حياته اليومية ولبناء حاضره ومستقبله‪ .‬وال‬ ‫يشمل التنوع البيولوجي األنواع االحيائية الموجودة في محيط بيئي مائي او على اليابسة في وحدة زمنية‬ ‫محددة فحسب بل يشمل النظم البيئية والوراثية التي جاءت منها هذه األنواع‪.‬‬ ‫‪ ‬أقسام التنوع البيولوجي‬ ‫يمكن تقسيم التنوع البيولوجي الى عدة فئات وأهم هذه الفئات‪:‬‬ ‫‪ -1‬التنوع الوراثي‬ ‫ويقصد به تنوع الوراثى داخل األنواع ويشمل ذلك مجاميع متميزة من نفس النوع مثال اعداد كبيرة من‬ ‫انواع القطف وهو نبات مقاوم للجفاف والملوحة‪ ،‬او االف االنواع من األرز الموجودة في تايالند والهند‬ ‫مثال‪ .‬وقد يكون التنوع الوراثي داخل المجموعة الواحدة‪ ،‬وهو شديد بين وحيد القرن الهندي ومنخفض عند‬ ‫الفهد الصياد‪ .‬وإذا كانت قياسات التنوع الوراثي قد طبقت على األنواع المستأنسة والمدجنة المحتفظ بها في‬ ‫حدائق الحيوان والحدائق النباتية فقد بدأ االنسان بتطبيق نفس التقنيات على األنواع البرية في مواطنها‬ ‫االصلية‪ .‬ويعتبر التنوع الوراثي من اهم منتجات البيئة وعلى كل المقاييس الحيوية واالقتصادية والصحية‬ ‫واالجتماعية‪ ،‬ويمكن قياس انتاجية منطقة معينة بناء على التنوع الوراثي الموجود فيها‪ ،‬ويمكن استنتاج‬ ‫انتاجية نظام بيئي معين من خالل الذخيرة الوراثية الموجودة في هذا النظام فمثال مجتمع الطيور البرية‬ ‫والدجاج البري مقاوم لمعظم األمراض وظروف انخفاض وارتفاع درجات الحرارة ونقص الغذاء بينما ال‬ ‫يحتمل نفس النظام الكثير من االمراض اذا كان مربى بشكل قطعان كما في المداجن او مزارع الطيور‬ ‫مثال‪ .‬وينظر االقتصاد البيئي الحديث الى مناطق التنوع الوراثي على انها بنوك وراثية تحوي تلك‬ ‫الموروثات المنتجة وقد بدأ العلماء بتصنيفها منذ بداية هذا القرن‪.‬‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪4‬‬

‫‪ ‬اذا ما هو التنوع الوراثي؟‬ ‫التنوع الوراثي هو عبارة عن مجموعة من الصفات الوراثية‪ ،‬الموج ودة ف ي جين ات ك ل األف راد الموج ودة‪،‬‬ ‫وفي كل واحد من المخلوقات الموجودة على وجه األرض بما فيه ا‪ :‬النبات ات والحيوان ات والكائن ات الحري ة‬ ‫المجهرية‪ .‬يمكن للصفات الوراثية الجديدة أن تتطور عند مختلف األفراد عن طريق الطفرات الوراثية وم ن‬ ‫خالل الصفات الوراثية الجديدة التي تظهر عن طريق التكاثر عند األنواع‪ .‬هذه الصفات الوراثية الجديدة هي‬ ‫التي تمكن الكائن الحي أن يالئم نفسه لبيئته المتغيرة بواسطة عملية االنتقاء الطبيعي‪.‬‬ ‫متي بدء التفكير فى حفظ االصول الوراثية؟‬ ‫باستهالك األلفية ال جديدة وما سوف يواكبها من تقنية جديدة ومع القلق المتزيد بسبب زيادة تعداد السكان‬ ‫واإلخطار المحدقة بالبيئة بدأ العالم يعي حالة المصادر الوراثية للنباتات خاصة ما‬ ‫يتعلق بالغذاء والمراعي والغابات ومدى احتياج ذلك التخاذ إجراءات تنظيمية‬ ‫وتوعية فورية وعاجلة‪ .‬ومع الوعي المتعلق بمملكة النبات (لكونها تمثل نظام الدعم‬ ‫الحياتي)‪ ،‬فقد تزايد عدد أولئك الناس الذي يتساءلون عن التهديدات التي تحدق‬ ‫بمصادر النبات وما يترتب عليها من تناقص في المصادر النباتية وما يجب عمله‬ ‫لحماية مواطن النباتات وكيف يتحقق لإلفراد وأعضاء الجمعيات ومؤسسات صنع القرار أن يساهموا في‬ ‫المحافظة على النبات‪.‬‬ ‫وقد برزت فكرة تجميع وحفظ االصول النباتية بزراعتها فيما يسمي بالحدائق النباتيه منذ القرن الثامن عشر‪.‬‬ ‫أما االن فهناك اهتمام عالمي بتجميع وحفظ االصول النباتيه النقراض العديد من االنواع النباتية نتيجة‬ ‫الكوارث الطبيعية واستزراع الغابات‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪5‬‬

‫وال تتوقف اهمية النباتات المعرضة لالندثار على الناحية الغذائية أو باعتبارها مصدر لكثير من العقاقير‬ ‫الطبية واستغاللها كوقود واخشاب فحسب‪ ,‬بل تعدي األمر الي تأثيرها على البيئة بصفة عامة‪ .‬كما يتم ايضا‬ ‫القضاء على الكثير من االنواع النباتية بإحالل أصناف ذات مواصفات تالءم المتطلبات الحالية‪.‬‬ ‫فقد ساهم استنباط أصناف جديدة عالية اإلنتاج في اندثار بعض االصول النباتية التي يعيبها قلة اإلنتاج‪.‬‬ ‫وربما تكون تلك االنواع النباتية المعرضة للخطر الفناء هي المصدر الوحيد لجينات‬ ‫ذات قيمة اقتصادية كبيرة لتحسين اإلنتاج النباتي بصفة عامة‪.‬‬ ‫يمتلك الوطن العربي الكثير من اصول االنواع النباتية والطرز الوراثية المميزة‬ ‫باالضافة الي االعشاب البرية والتي لها اهمية طبية عالمية‪ .‬لذا يجب حماية وتسجيل‬ ‫تلك االصول والحفاظ عليها من األندثار أو النهب من قبل منظمات اخري فقد قامت‬ ‫الدول الصناعية وبعض المنظمات العالمية بالطرق المشروعة وغير المشروعة بجمع تلك الثروات من‬ ‫الدول الفقيرة وحفظها لستغاللها فى المستقبل‪.‬‬

‫وقد تم وضع استراتجيات من اجل المحافظة على تلك النباتات المهددة باالنقراض منه‪:‬‬ ‫‪ .1‬المحافظة في المكان الطبيعي ‪In-situ Conservation‬‬ ‫تهدف هذه الطريقة للمحافظة على السالالت واألنواع جنبا إلى جنب‬ ‫مع أصولها البرية وتظهر التباينات الوراثية من التهجينات بين‬ ‫السالالت الحديثة واألصول النباتية الطبيعية في المنطقة وفي هذا‬ ‫النوع من طرق الحفظ قد تتعرض بعض السالالت إلى الفقد بسبب‬ ‫الظروف البيئية باإلضافة إلى التكلفة العالية للحفاظ على هذه السالالت‬ ‫منزرعة في األرض والقيام على خدمتها‪ .‬وتعتبر من أفضل االستراتجيات المعمول بها التي تخض لسن‬ ‫قوانين وأنظمة إدارية ومنها تحديد المنطقة المستهدفة التي يتوفر بها األنواع المراد المحافظة عليها‪.‬‬

‫‪ .2‬المحافظة خارج الموطن األصلي ‪Ex-Situ‬‬ ‫‪Conservation‬‬ ‫عندما تكون عملية المحافظة علي النباتات صعبة داخل موطنها‪.‬‬ ‫تقوم الجهات المسئولة بإنقاذ النباتات المستهدفة من موطنها المهدد‬ ‫وتقديم الحماية لها في مستودعات أو مخازن كان يكون منتزها‬ ‫وطنيا أو محمية للحياة البرية أو حديقة نباتية أو بنك للبذور او‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪6‬‬

‫مركز للحفظ بالتبريد وتمتاز هذه األماكن انها التحتاج إلى مساحات كبيرة‪ .‬وهنا يتم الحفاظ على المصادر‬ ‫الوراثية خارج الموطن األصلي في صورة بذور أو خاليا أو أعضاء نامية تحت ظروف مناسبة لمدة طويلة‬ ‫كبنك للجينات ويعتبر حفظ المادة الوراثية على صورة بذور أوسع الطرق انتشارا حيث تشغل البذور مساحة‬ ‫صغيرة للتخزين وسهلة النقل‪.‬‬

‫عيوب هذه الطريقة‪:‬‬ ‫‪ ‬فقد حيوية البذور مع طول فترة التخزين والقابلية لإلصابة باألمراض والحشرات‪.‬‬ ‫‪ ‬عدم القدرة على حفظ السالالت الممتازة وخاصة الناتجة من التربية الداخلية الناتجة عن طريق التوالد‬ ‫الكبرى‪.‬‬ ‫‪ ‬ال يمكن تطبيقها على المحاصيل التي تتكاثر خضريا مثل البطاطس والبطاطا ويندرج تحت هذه‬ ‫الطريقة من الحفظ المعملي‪.‬‬

‫الحفظ المعملي لألصول الوراثية ‪:‬‬ ‫تعتبر طريقة الحفظ المعملي أفضل الطرق للمحافظة على المادة النباتية التي تتكاثر خضريا ‪ ،‬واألنواع ذات‬ ‫البذور وكذلك األنواع المهندسة وراثيا‪.‬‬

‫ومن أهم مميزات هذه الطريقة ‪:‬‬ ‫‪ .1‬الحاجة إلى مساحة صغيرة للمحافظة على أعداد كبيرة من النباتات المتكاثرة خضريا ‪.‬‬ ‫‪ .2‬الحفاظ على المادة الوراثية بعيدا عن مصادر اإلصابة المرضية والحشرية ‪.‬‬ ‫‪ .3‬الحماية من الظروف المناخية غير المناسبة‬ ‫‪ .4‬سهولة اإلكثار النتاج أعداد كبيرة من النباتات عند الحاجة إليها في أي وقت ‪.‬‬ ‫‪ .5‬تقليل العوائق واإلضرار التي قد تتسبب بواسطة نظام الحجر الزراعي حيث أن هذه األنواع‬ ‫موجودة وتنقل تحت ظروف تعقيم وتطهير كاملة ‪.‬‬ ‫وسوف نتناول فقط تطبيقات زراعة الخاليا واألنسجة في عملية المحافظة على األصول الوراثية‪.‬‬

‫الوسااااالل المسااااتخدمة فااااى حفااااظ األصااااول الوراثيااااة‬

‫‪For‬‬

‫‪Used‬‬

‫‪Materials‬‬

‫‪Conservation‬‬ ‫المواد الوراثية التي ُتحفظ في المعمل قد تكون بروتوبالس ت مع زول – خالي ا م ن م زارع س ائلة – م زارع‬ ‫كالوس‪ ،‬قمم مرستيمية ‪ ،‬وحدات تكاثرية في مراحل مختلفة من التكشف ونباتات كاملة‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪7‬‬

‫حفظ المادة الوراثية عن طريق إعادة الزراعة ‪ Subculture‬على فت رات متقارب ة ل ه بع ض العي وب منه ا‬ ‫خطورة فقد هذه المواد نتيجة الخطأ البشري في الحفاظ على هذه األنسجة داخل المعمل أو تعرضها لمسببات‬ ‫األمراض ‪ .‬أيضا عدم الثبات الوراثي والذي يظهر كنتيجة لتكرار الزراعة وظهر هذا العيب بص فة أساس ية‬ ‫في الخاليا واألنسجة غير التكشفية (كالوس) وتتراوح التغيرات الوراثية ما بين إضافة أو نقص تت ابع جين ى‬ ‫‪ .‬وقد وجد أن المحافظة على المادة الوراثية في صورة نباتات كاملة ومن ثم إكثارها بواسطة اس تخدام قط ع‬ ‫الس الميات (بط اطس) أو التفص يص (م وز) يقل ل م ن فرص ة التع رض لع دم الثب ات ال وراثي وه و أح د‬ ‫المتطلبات األساسية في الحفاظ على األصول الوراثية أيضا تقليل عملية إعادة الزراعة بأقل صورة ممكنة ‪.‬‬ ‫وهذا يمكن أن يتم بواس طة ع دة ط رق منه ا التخ زين الب ارد وأيض ا تح ت ض غط ج وي م نخفض وأكس جين‬ ‫منخفض وأيضا يمكن الحفظ بالتجميد‬ ‫وعموم ا ال يمك ن حف ظ الم ادة النباتي ة عل ى درج ة الح رارة العادي ة للنم و ألنه ا تس تمر بنش اطها مم ا ي ؤدي‬ ‫لتدهورها ويتم المحافظة عليها إما بتخفيض نش اطها ونموه ا إل ى الح د األدن ى وب ذلك يمك ن حفظه ا لم دة ق د‬ ‫تصل من عدة شهور إلى سنة أو اثنين أو يتم وقف نموها تماما عن طريق تجميدها بالنيتروجين السائل ومن‬ ‫هنا تنقسم طرق الحفظ المعملي إلى طريقتين حسب مدة الحفظ ‪:‬‬ ‫‪ .a‬حفظ األنسجة النباتية لمدة قصيرة لمتوسطة (‪)Short to medium term storage‬‬ ‫‪ .b‬حفظ األنسجة النباتية لمدة طويلة (‪)Long Term Storage‬‬

‫‪ ‬حفظ االصول الوراثية بالوسالل االتيه‪:‬‬ ‫‪ .1‬جمع العينات في األنابيب‬ ‫تشمل هذه الطريقة على تنظيف العينة من الحشرات ووضع النس يج الح ي الم زروع للنب ات ف ي وس ط معق م‬ ‫خاص باالس تنبات قب ل نقل ه لمختب ر االس تنبات تمهي دا لمزي د م ن االج راءات لحفظ ة ف ي االنب وب الزج اجي‬ ‫وتعتب ر ه ذه الطريق ة مناس بة ل بعض ان واع النب ات الت ي ي تم تض اعفها بالتك اثر الالتزاوج ي ول بعض الب ذور‬ ‫واالجنة الحساسة التي تنهار سريعا‪ .‬ولهذه الت قنية ميزة إن النبات ات المنقول ة تخض ع بس هولة النظم ة الحج ر‬ ‫الصحي مما يوقف امراض كثيرة مثل مرض الفيوزاريوم وامراض اخرى سهلة االنتشار‪.‬‬

‫‪ .2‬المعشبات ‪:‬‬ ‫تعتبر مرجعا ً هاما ً في تصنيف األنواع النباتية غير المعروفة التي هي في نفس الوقت ذات قيمة علمية عالية‬ ‫للخب راء والب احث ين الع املين ف ي معرف ة األن واع واألجن اس‪ ،‬وك ذلك الع املين ف ي أع داد الفل ورات المحلي ة‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪8‬‬

‫والعالمية‪ ،‬لذا فإن جمع وإعداد العين ات النباتي ة بطريق ة س ليمة يجع ل االس تفادة منه ا ممكن ا ً ومتيس راً لت وفير‬ ‫الكثير من المعلومات‪.‬‬

‫‪ .3‬طرق تقييم العينات بالواسمات الجزيلية لحفظ االصل الوراثي‪:‬‬ ‫وتعتبر تقنية مفيدة لتقييم المصادر الوراثية للنبات او الحيوانية الم راد حفظه ا واس تخدامها كم ا تس هل تحلي ل‬ ‫ومراقبة التنوع الحيوي وتقييم وتحديد ميزات وخصائص المورثات التي تم جمعه ا وك ذلك تقي يم التن وع ف ي‬ ‫المجموعات النباتية المتوفرة‪.‬‬

‫‪ .4‬طرق تقييم العينات بواسطة حساب التكارارات االليلياة والجينياة داخال العشايرة‬ ‫لحفظ االصل الوراثي‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪9‬‬

‫التدريب العملي االول‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬ ‫(ورث ‪)416‬‬ ‫شعبة البيوتكنولوجي‬ ‫تقييم تقرير التنوع البيولوجي لبعض الكائنات‬

‫(‪)1‬‬

‫قسم الوراثـــــــــة‬

‫اسس التقييم للبحث االول عن التنوع البيولوجي لبعض الكائنات‪:‬‬ ‫رقمممممممممممممممممم اسم المجموعة‬

‫البيئة‬

‫المجموعة‬

‫التنممممممممممموع التنمممممممممممممموع االلقاء‬ ‫الوراثى‬

‫االنواع‬

‫تقيمممممممممممميم‬ ‫العرض‬

‫‪.1‬‬

‫‪.2‬‬

‫المجموع =‬

‫***اضف رمز ‪A=2, B= 1, C=0‬‬ ‫لكل عنصر من العناصر المقام عليها التقييم علي حسب النقاط المذكورة‬ ‫‪ .1‬البيئة ‪ :‬درجة الحرارة – التغذية – مكان المعيشة‬ ‫‪ .2‬التنوع الوراثى ‪ :‬الشكل المظهرى – االختالف على المستوى الكروموسومات‬ ‫‪ .3‬التنوع االنواع (على مستوى الكائنات للعشيرة ‪)richness – evenness‬‬ ‫‪ .4‬االلقاء امام وااللتزام بالوقت‬ ‫‪ .5‬العرض التقديمي‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪10‬‬

‫اوالا‪ :‬التقنيات الوراثية لتحديد التكرار‬ ‫الجيني داخل العشيرة ولتقييم وقياس‬ ‫االصول الوراثية قبل حفظها‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪11‬‬

‫الدرس العملي الثاني‬ ‫قانون هاردي – وواينبرج‬ ‫تحديد التكرارات الجينية في المجتمعات‬ ‫االهداف العامة‬ ‫هو تعريف الطالب‬

‫ليبا المة بل ال را برن لي رباح ابا الةبان اذلكبان خاللبا تبو ب‬

‫ال بو‬

‫الرةولوجا الذي يخدم اذلكان ختاها اه ةل ال حااظل ليةها خل ل الفظ ل صو الوراثةل‪.‬‬ ‫االهداف الخاصة‬

‫‪‬‬

‫ان ي عرف الطال‬

‫ليى ‪:‬‬

‫ماب التمرارات الجينية (ا ليليم) ل ينة من مجتما نتوي علي التراكيب الوراثية ‪AA, Aa,‬‬ ‫‪ aa‬والتي لمل مناا شم ً ظاهر ا ً مميزاً‪.‬‬ ‫‪ ‬انن ن ما إذا كاات عينة المجتما التي اتمون من التراكيب الوراثية ‪ AA, Aa, aa‬ذات الكمل‬ ‫الظاهري المميز امثل مجتم ا ً في الة إازان هادري – وا نبرج‪.‬‬ ‫‪‬‬

‫ماب التمرارات األلي ت ‪ A,a‬عننما مون هنا‬

‫يادة اامة ( أي أن الكمل الظاهري للتركيب‬

‫الوراثي ‪: )Aa = AA‬م لومية امرار األفراد ذات التركيب (‪ )A-, aa‬في عينة مجتما م ين‪.‬‬

‫التنوع الوراثي‪:‬‬ ‫هو عبارة عن مجموعة من الصفات الوراثية‪ ،‬الموجودة في جينات كل األفراد الموجودة‪ ،‬وفيي كيل وا ين مين‬ ‫المخلوقييات الموجييودة علييا وجييم األره ‪:‬مييا فيايياا النبااييات والنيوااييات والماهنييات النر يية المجار يية‪ .‬مميين‬ ‫للصفات الوراثية الجن نة أن اتطور عنين مختليا األفيراد عين ر يف الطفيرات الوراثيية ومين اي‬

‫الصيفات‬

‫الوراثية الجن نة التي اظار عين ر يف التمياثر عنين األايواذ‪ .‬هيصف الصيفات الوراثيية الجن ينة هيي التيي اممين‬ ‫المييييييييياهن النيييييييييي أن‬

‫هيييييييييط افميييييييييم لبيطتيييييييييم المت ييييييييييرة ‪:‬وا يييييييييطة عمليييييييييية ا ات يييييييييا الطبي يييييييييي‪.‬‬

‫حيث يطلق اسم "العشيرة" عليا الماهنيات النيية التيي ا ييب ميا ‪ :‬بياا اليب ة فيي و ينة ج رافيية منيندة‬ ‫والتي اتماثر ما ‪ :‬باا الب ة والتي اتزاوج فيما ‪:‬يناا جنميا ً مت ا يمة مميتودذ جينيي مكيتر ‪ ..‬مثمال علمى‬ ‫ذلك‪ :‬عكيرة ال ز ن التي ا يب في منمية عين جني‪ ،‬أو عكيرة النمور التي ا يب فيي منميية مجمي م فيي‬ ‫الجو ن وغيرها‪ .‬تواجن التنوذ الوراثي عنن األفراد في عكيرة م ينة لنوذ م ين يوا ا داايل ال كياهر التيي‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪12‬‬

‫ا ييييب ‪:‬جيييوار ‪ :‬بييياا اليييب ة أو فيييي عكييياهر ا ييييب ‪ :‬يييينة عييين ‪ :‬بييياا اليييب ة مييين النا يييية الج رافيييية‪.‬‬ ‫لمل عكيرة هنا اركيبية ااةية مين ا ليي ت والتيي انبيا مين م همية أفيراد ال كييرة افمياا للظيرو‬

‫البيطيية‬

‫المت يرة‪.‬‬ ‫المستودع الجيني‪ :‬عبارة عن كل الم لومات الوراثية التي املماا األفراد المتماثرة في عكيرة من الماهنات‬ ‫التي اتزاوج جنمياً‪ .‬واوجن ع قة د ناميمية في ممتودذ الجينات ‪:‬ين األلي ت و‪ :‬باا وما األليي ت والبيطية‬ ‫التي ا يب فياا هصف الماهنات واؤدي ال وامل البيطة (الطفرات – اإلاتخاب‪ -‬الاجرف‪..... -‬إلخ) إلي الت يير‪.‬‬ ‫التكممرار الجينمميا مييني امييرار وجييود جييين م ييين ف يي‬ ‫عكييييرة ميييا‪ .‬واميييت مل الرميييوا الاجاهيييية للت بيييير عييين‬ ‫التمرارات الجينية يث بر ‪ p‬عين ينوا النينا و ‪q‬‬ ‫عن عنم نوا الننا‪ .‬و‪:‬التالي فإن الرمز ‪ p‬بير عين‬ ‫ظاور األليل الماهن ‪ A‬والرمز ‪ q‬بر عن ظاور األلييل‬ ‫اآلار المتنني ‪ .a‬و‪:‬ما أن مجموعة األ تميا ت المممنية‬ ‫لننوا نا ما هيو الوا ين الصينيب و‪:‬التيالي إذا اتب نيا‬ ‫أليلين ف ط لموقا وراثي وا ن فإنا‬

‫صورة (‪:)14‬تنوع التكرارات الجينية داخل العشيرة‬

‫أي أنا ‪p + q = 1‬‬ ‫و‪:‬التالي فإنا‬ ‫أي أنا‬

‫‪A+a=1‬‬ ‫‪(p +q)2 = (1)2= p2+ 2pq + q2 =1‬‬ ‫‪(A +a)2 = (1)2= A2+ 2Aa + a2 = 1‬‬

‫وفي عام ‪ 1908‬اكتكا ال الط اإلاجليزي هاردي والطبيب األلمااي وا نبرج كل علي نف مبنأ إايزان‬ ‫هاردي – وا نبرج والصي نص علي أام عنين اإلايزان اظيل التميرارات األليليية واميرارات التراكييب الوراثيية‬ ‫ثا‪:‬تة من جيل إلي آار‪.‬‬

‫التكرار الجيني في حالة وراثة السيادة التعادلية‪-:‬‬ ‫‪:‬ما أن في هصف النالة اجن أن كيل مين األليليين الت بيير عين افمياما فيي األفيراد الخليطية ييث يتط التميييز ‪:‬يين‬ ‫التراكيب الماهنة األةيلة والخليطة والمتننية و‪:‬التالي ممن ماب التمرار األليلي من ا‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫ا‬ ‫‪13‬‬

‫‪(Number of AA + 1/2 Number of Aa) / Total number‬‬

‫=)‪P(A‬‬

‫‪(Number of aa + 1/2 Number of Aa) / Total number or‬‬

‫=)‪q(a‬‬

‫)‪1- p (A‬‬

‫=)‪q(a‬‬

‫التكرار الجيني في حالة وراثة السيادة التامة‪-:‬‬ ‫في هصف النالة اجن أن األليل الماهن مود في ا بيرف عليي األلييل المتننيي و‪:‬التيالي‬ ‫‪:‬ين التراكيب الماهنة األةيلة والخليطة و‪:‬التالي تط ماب التمرار األليلي من ا‬

‫اميتطيا التميييز‬

‫ا‬

‫‪Number of aa / Total number‬‬

‫=)‪q2(aa‬‬

‫)‪√ q2 (aa‬‬

‫= )‪q(a‬‬

‫)‪P(A) 2 & 2pq(Aa) = 2 X p(A) X q(a‬‬

‫= )‪p2 (AA‬‬

‫)‪then p (A) =1- q(a‬‬

‫تطبيق علي الوراثة البشرية‪:‬‬ ‫بعض الصفات البشرية و طرق سيادتها في المجتمع وهمل منهما صمفات حافظمت علمي اسمتمراريتها ام حمدث‬ ‫لها انقراض‪.‬‬

‫السيادة‬

‫الصفة‬

‫الصورة‬

‫شييي ر ع لييية األةيييبا وجود الك ر اهن علي عنم وجودف‬ ‫الو طي‬ ‫لا اللمان‬

‫م نرة اللا اهن علي عنم الم نرة‬

‫م نميييية الكيييي ر ميييين اابات الك ر من الجباة اهن علي اابااية مين ايط‬ ‫الجباة‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫وا ن‬

‫‪14‬‬

‫األذن الملتص ة‬

‫األذن غير الملتنمة اهنة علي الملتنمة‬

‫ااننا اإل‪:‬اام‬

‫عنم ا تطاعة ثني اإل‪:‬اام اكثر من ‪ º45‬اهن علي ا تطاعة الثنا‬

‫و األةا‪:‬ا‬

‫ةفة متأثرة ‪:‬الجنس‪ ،‬في الصكور أةبا المبا‪:‬ة ال صير اهن‬

‫تطبيق حساب التكرار الجيني علي الصفات الوراثية فى االنسان‪:‬‬ ‫هدف هذا التطبيق‪ :‬هل ممنك انن ن أكثر الصفات عمومية وااتكاراً في اإلامان؟‬

‫‪ .1‬اختار صفة من الصفات السابق ذكرها بحيث يتم حسب التكرار الجيني لها من حيث تطبيمق‬ ‫هذا التمرين علي الطلبة في القاعة الدراسية؟‬

‫عممدد االفممراد التممي عممدد االفممراد التممي العممممممممممدد الكلممممممممممي‬

‫الصفة‬

‫تظهممممممممر علمممممممميهم ال تظهمممممر علممممميهم للمجموعة‬ ‫الصفة‬

‫الصفة‬

‫لا اللمان (ةفة اهنة)‬ ‫إاننا ا ‪:‬اام (ةفة اهنة)‬ ‫‪ .2‬اي الصفات التي دراستها أكثر عمومية وأكثر إنتشاراا؟‬ ‫‪...............................................................................................................‬‬ ‫المراجع‬ ‫‪https://www.pathwayz.org/Tree/Plain/GENE+POOLS+%26+ALLELE+FREQUENCY‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪15‬‬

‫التدريب العملي الثاني‬ ‫‪ .1‬في األغنام لون الصوف األبيض يعتمد علي وجود العامل السائد ‪ B‬بينما اللون األسود يرجمع‬ ‫إلممي العامممل المتنحممي ‪ .b‬فممي عشمميرة مممن ‪ 900‬خممروف وجممد ا تممي‪ 891 :‬أبمميض و ‪ 9‬أسممود‪.‬‬ ‫أحسب التكرار الجيني لهذين العاملين‪ .‬ماهي الخطموات الالمممة للحفمال علمي سماللة الخمراف‬ ‫المنتجة للصوف ذو اللون االسود؟‬ ‫‪ .2‬فااي ماشااية الشااورتهورن‪ -‬التركيااب الااوراثي ‪ CRCR‬يعطااي اللااون األحماار للجساام‬ ‫‪ CWCW‬للااون األبااي‬

‫و‪ CRCW‬للااون الطااوبي‪ .‬فااتذا افترضاانا أن عشاايرة ماان هااذه‬

‫الماشية محتوية علي األعاداد التالياة‪ 108 :‬أحمار ‪144‬طاوبي ‪ 48‬أباي‬

‫‪ .‬أحساب‬

‫تكرار العامل ‪ CW, CR‬في هذه العشيرة؟‬ ‫‪ .3‬عنممدما أختبممرت عينممات الممدم مممن ‪ 999‬طالممب لمجموعممة الممدم ‪ Rh‬وجممد أن ‪ %74.9‬كانممت‬ ‫موجبة‪ %25.1 ،‬سالبة‪ ،‬فإذا فرضنا موجا واحدا ممن األلميالت ‪ r ,R‬يمتحكم فمي همذل الصمفة‬ ‫ما هو التكرار الجيني‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪16‬‬

‫الدرس العملي الثالث‬ ‫التقنيات الجزيلية المستخدمة لقياس او تقييم‬ ‫التنوع الحيوي ما بين األنواع للعينات بـ ”‪“RAPD‬‬ ‫االهداف العامة‬ ‫هو ا ر ا الطالب علي ال يمة المباشرة للنبات في ياة ا اميان وذليك مين اي‬

‫التنيوذ البيوليوجي اليصي‬

‫خنم ا امان وماهي اهمية المنافظة علياا وعمل فظ ل ةو الوراثية‪.‬‬ ‫االهداف الخاصة‬ ‫ان يتعرف الطالب على ‪:‬‬ ‫‪ ‬ا ر ا هصف الت نية‬ ‫‪ ‬اطبيف ااتبار (‪)RAPD‬‬ ‫‪ ‬كيفية اجراهاا‬

‫تقنيات لتقييم حفظ األصول الوراثية‬ ‫علا الرغم من أهميـيية التوصـييي‬

‫المورفولوجي لدرامة التباينات بين ال را النباتية إ أنم ي د عملية ص بة‬

‫خاصـييييييية فـيييييييي النباتات المتكاباة في الكم الخارجي‪ ،‬وينتاج إلا وقت وي ويتأثر بدرجة مبيرة فـيييييييي‬ ‫الظرو‬

‫البيطية‪ ،‬لذل توجات األنظار إلا درامة ا خت فات الوراثية علا ممتوﻯ (‪ )DNA‬التي يممن من‬

‫خ لاا مك‬

‫ملاا (البنر وام ﺅف‪ .)1999 ،‬وقد تممن‪ Williams‬وام ﺅف (‪)1990‬‬ ‫ا خت فات الوراثية ﹼ‬

‫من ت وير ت نيـ ية ‪ RAPD‬الم تمـ يدة علـ يا التبخيم ال كواطي ألجااﺀ من الدنا بامتخدام جااا تفاع البلمرة‬ ‫بروريا فـيييي‬ ‫ﹰ‬ ‫المتملـيييم ‪ PCR‬التـيييي تمتخدم بكم واما في مجا البيولوجيا الجايطية التي ي د امتخداماا‬ ‫إدارة ونفظ األصو الوراثية باد‬

‫نفظ المادة الوراثية لﻸنواذ النباتية (‪ Hormaza‬وام ﺅف ‪.)1978‬‬

‫وت د ت نية ‪ RAPD‬إندﻯ الت نيات المتمياة بـمرعتاا وانخفاه ملفتاا عند درامة ال قات الوراثية وانت ـياﺀ‬ ‫األصـييينا‬

‫المرغـيييوب فياـيييا‪ ،‬إذ تمتخدم في درامات الخراط الوراثية‪ ،‬ووراثة ال كاطر‪ ،‬والت ييم الـيييوراثي‪،‬‬

‫ومـ يذل فـ يي برامﺞ تربية النيوان والنبات (‪ )Baradakci، 2001‬ويفيد تنديد درجة التـ يكابم الـييوراثي بين‬ ‫األنواذ وبمناا في برامﺞ تربية النبات‪ ،‬من خ‬

‫ت لي عدد المدخ ت المـيييييمتخدمة في التاجين‪ ،‬وا عتماد‬

‫وراثيا التي تﺅمن النصو علا قاعدة وراثية مبيرة (‪.)Muzher، 2004‬‬ ‫ﹰ‬ ‫علا اآلباﺀ المتباعدة‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪17‬‬

‫وهناك بعض التقنيات التي تندرج تحت أساليب حفظ األصول الوراثية وتطبمق لليمات التقنيمة الحيويمة‪ ،‬وممن‬ ‫هذل التقنيات مايلي ‪:‬‬ ‫الواسمات )المعلمات) الجزيئية‬ ‫اوفر الوا مات الجز طية ا نية مفينة لل ا ة لت ييط ال ينات للمنافظة علا المصادر الوراثية للنبات وا تخناماا‪،‬‬ ‫كما امال انليل ومراقبة التنوذ النيوي‪ ،‬وا ييط وانن ن ميزات واصاهص المورثات التي اط جم اا‪ ،‬وكيصلك‬ ‫ا ييط التنوذ في المجموعات النبااية المتوفرة‪ ،‬ومن المزا ا األارﻯ لاصف الت نية أااا ا‪-‬‬ ‫‪ .1‬امثل فرةة‬

‫مثيل لايا لتيوف ير الم لوميات يو التنيوذ اليصي وجين ليب ة األايواذ الخاةية‬

‫يمن‬

‫األقيياليط المنلييية و‪:‬ييين البليينان‪ ،‬وكييصلك يينود الثبييات الييوراثي لﻸجيييا المنتجيية ميين الجيينس أو النييوذ‬ ‫الوا ن‪.‬‬ ‫‪ .2‬اوفر دقة متناهية و ر ة مو وعية‪ .‬في انن ن ماهية انوذ األةو الوراثية ‪ ،‬و ن هصا مفيناً علا‬ ‫األاص في اكر الم لومات النقي ة ‪:‬ين الكبمات اإلقليمية وال المية‪.‬‬ ‫و‪:‬كمل ا ليني فإن الوا مات الجز طية المت ل ة ‪:‬كمل النبات واإل زوا مات اط ا تخناماما لاصف الت ييمات‪ ،‬إ‬ ‫أن كلياميييا منييينودة ‪ ،‬ليييصا ايييأاي أهميييية ا نييييات الفصيييل‬ ‫الجز طييييييييييييييييييييييييييي للمورثييييييييييييييييييييييييييات مثييييييييييييييييييييييييييل‬ ‫(‪ ،)RFLP,RAPD,AFLP,VNTR‬والتييييييي ا يييييين‬ ‫‪:‬مثا‪:‬ة ثورة في الوةو إلا الاين‬

‫المتبيمن مراقبية‬

‫التنوذ النيوي والوراثي النبااي‪.‬‬ ‫و و ييب شييمل ( ‪ )5‬اطبيييف ا نييية (‪ )RAPD‬علييا‬ ‫أاييواذ النخيييل ‪:‬المملمييـة للت يير‬

‫علييا ميينﻯ التنـييـوذ‬

‫الوراثيييـي ومييينﻯ الناجييية اليييا فيييظ ‪ :‬ييية األةيييـو‬ ‫الماـمة مناا (‪.)Al-Khalifah & Askari, 2003‬‬ ‫شكل ( ‪ )5‬مراقبة التنوع الوراثي بالنخيل‬ ‫و‪:‬نا ة فإن الوا مات الجز طية تمون ذات قيمة عالية في ا ن ر وا ييط التنوذ وا‬

‫ت رار اليوراثي‪ ،‬و‪:‬يالرغط‬

‫من هصف اإلممااية‪ ،‬فيإن التنن ينات الناليية لت نيية الوا ميـات الجز طيية اتطليب م يـنات غاليـية اليثمن‪ ،‬واينر ب‬ ‫األفراد ال املين علياا‪ ،‬و‪:‬ص جاـن كبيــر في البنث لتوفير إمماايـة اطبي ـات وا ة لمنﻯ م ين من األاواذ‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪18‬‬

‫تعريف بالتقنية )‪:Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD‬‬ ‫هي ا نية‬

‫ن ثة امبيا ً ‪:‬نأ ال مل ‪:‬اا مطلا التم ينات من ال رن المنصرم‪ .‬اممب ‪:‬ممب كامل الايطة‬

‫المرمو ومية للماهن عكواهيا ً للمكا عن أي ا يرات وراثية في م لوماام الوراثية ‪.‬‬ ‫‪ ‬ا نية ا تمن علا ‪PCR‬‬

‫يث تط فياا ابخيط قط ة من ‪DNA‬‬

‫امثل جينا (جز عكواهي‬

‫من ‪: )DNA‬نيث ا طا ا ند مظارﻯ ‪Polymorphism‬‬ ‫‪‬‬

‫و متخنم من أجل ذلك ‪:‬ادهات عكواهية ‪ Random primers‬يث مت مل في هصف الت نية ‪:‬ادئ‬ ‫_‪ _Primer‬ةن ي (وليس بي ي) و ين (وليس مزدوج) ممون من ‪ 10-8‬ايوكليتينة (ذات اتا‪ :‬ات‬ ‫عكواهية لمن غالبا ً ما انتوي علا ‪: GC‬نمبة ‪ % 50‬علا األقل)‪...‬‬

‫خصائص ‪: Primers‬‬ ‫‪: ‬ادئ قصير من ‪ 8‬إلا ‪ 12‬قاعنة ‪،‬وهو ‪:‬ادئ وا ن مل علا ك الكر طين‬ ‫‪ ‬هصا البادئ ليس متخصصا ل ز جين ما‬ ‫‪ ‬اظرا ألن البادئ قصير فينتمل أن تواجن التتا‪:‬ا المممل مرات عن نة علا ك الكر طين و‪:‬التالا‬ ‫ممن أن ننا ابخيط وعز ل ط ة من ‪ DNA‬فا الممافة ‪:‬ين إرابا البادهين‪.‬‬ ‫خطوات اإلختبار (‪ )RAPD‬وكشف النتائج ‪.‬‬ ‫‪ .1‬في البنا ة ارفا درجة النرارة إلا (‪ )96‬درجة مطو ة فتبنأ عملية فصل لملتي (‪ )DNA‬عن‬ ‫‪ :‬باما‪) Denaturation) .‬‬ ‫امن منند اخفّة درجة النرارة وما إن اصل درجة رارة الو ط إلا النرجة التي ا هط‬ ‫‪ .2‬و‪ :‬ن‬ ‫ٍ‬ ‫التصاق البادئ بنأ هصا األاير ‪ :‬ملية ا لتصاق (‪ )Primer annealing‬عكواهيا ً في أي ممان‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪19‬‬

‫من جينوم الماهن ‪:‬مجرد اطا‪:‬ف اململم النمليوايني ما اململ امليوايني موجود علا لملة‬ ‫(‪...)DNA‬أي أن عملية التصاق تتط ‪:‬كمل عكواهي وليس ‪:‬كمل اات اهي‪.‬‬ ‫‪ .3‬ثط اأاي ‪ :‬ن ذلك عملية ا‬

‫تطالة (‪ )Extension‬لمنة منندة وانتاي النورة األولا لتبنأ النورة‬

‫الثااية ‪.‬‬ ‫في الناا ة تط انميل ال ينة النااجة في جيل ا جاروا فتنفصل ال ينة إلا ‪:‬با قطا (‪ .)Bands‬اآلن‪.‬ا ين‬ ‫التجر‪:‬ة افماا ‪:‬نفس البادئ وافس الزمن (امتخنم افس البراامﺞ في جااا ‪ )PCR‬لمن ما ابات آار من افس‬ ‫النوذ وهمصا ممن الم اراة ‪:‬ين ال ن ن من ا اواذ فا افس الوقت ما ‪:‬ادئ وا ن للتفرقة ‪:‬يناط‬ ‫عدد الحزم الناتجة يتوقف على‪:‬‬ ‫‪‬‬

‫و الجينوم فملما ااد و الجينوم ااد عند النزم المتوق ة‬

‫‪ ‬اتا‪:‬ا ال واعن فإذا كان التتا‪:‬ا الخاص ‪:‬البادئ موجودا‬

‫طا‬

‫زمة‬ ‫‪ ‬وإذا كان التتا‪:‬ا الخاص ‪:‬البادئ غير موجود‬

‫طا زمة‬

‫و‪:‬التالا ختلا عند النزم النااجة من ةنا ابااا ار رغط‬ ‫اافاقاما فا و الجينوم‬ ‫‪ ‬الممافة ‪:‬ين البادهين جب أن ا ل عن ‪ 3‬كيلوقاعنة‬ ‫‪ ‬ااجاف البنا‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫يث جب أن مون إاجاف البنا علا ك الكر طين‬

‫‪20‬‬

‫‪...‬فإذا‬

‫ي ا ير في اواجن ال طا النااجة عن عينة ما ال طا النااجة عن عينة ااري فاصا ن قط ا ً‬ ‫ظنا أ ّ‬

‫علا وجود اات فات وراثية ما‪:‬ين ال ينتين و‪:‬التالي ممننا التنبؤ عن الة مالميادة والتننيم في النبااين او‬ ‫ال ينات منل النرا ة او الة وجود فرة من عنمم ‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪21‬‬

‫ملخص عن هذل التقنية ‪:‬‬ ‫‪ ‬ا نية ‪ RAPD‬ا نية ذات يادة ‪ Dominant‬يث‬ ‫و‪:‬التالي فأانا‬

‫ممن امييز المظار الوراثا الن ا عن الخليط‬

‫امتطيا النمط ‪:‬نقة‪.‬‬

‫‪‬‬

‫طا الفرد اتيجة موجبة( زمة) إذا نا ‪:‬نا ل ط ة ‪: DNA‬إاناد قط تين من البادئ ما قالبا ‪DNA‬‬

‫‪‬‬

‫طا الفرد اتيجة البة (عنم إعطا النزمة) إذا نا ‪:‬نا علا شر ط وا ن ف ط أو إذا لط ننا البنا‬ ‫علا أﻯ من الكر طين و‪:‬التالا ا‬

‫‪ ‬ظاور النزمة األليل األو (الماهن) ‪A‬‬ ‫‪ ‬غياب النزمة األليل الثااا (المتننا) ‪a‬‬

‫‪ ‬و‪:‬التالي مون الفرد الن ا الماهن ‪ AA‬م طيا افس النزمة التا‬ ‫و‪:‬التالا‬

‫طياا الفرد الماهن الخليط ‪Aa‬‬

‫ممن امييز الفرد الماهن الن ا عن الفرد الخليط‬

‫‪ ‬و‪:‬التالا مون التركيب الوراثا ل فراد إما اهن ‪ A-‬أو ‪aa‬‬ ‫كيفية تحديد وحساب االختالفات بين االصناف بواسطة هذل التقنية ‪:‬‬ ‫اظرا لوجود أكثر من موقا وراثا (أكثر من زمة ‪:‬وان جز طا مختلا علا الجيل) مون لمل زمة ‪:‬وان‬ ‫جز طا مختلا رمز مختلا للتركيب الوراثا كما تبب من المثا التالاا‬ ‫‪ .1‬اكتب التركيب الوراثا لمل عينة مما لاا‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪22‬‬

‫بما أن هناك ‪ 4‬حزم مختلفة الومن الجزيئي "إذن هناك ‪ 4‬مواقع وراثية ‪"A, B, C, D‬‬ ‫‪2‬‬

‫‪3‬‬

‫‪A- aa aa A‬‬‫‪B- B- B- bb‬‬ ‫‪C- cc cc C‬‬‫‪D-‬‬

‫‪D-‬‬

‫‪D-‬‬

‫‪D-‬‬

‫‪A‬‬ ‫‪B‬‬ ‫‪C‬‬

‫‪A‬‬ ‫‪B‬‬ ‫‪C‬‬

‫‪D‬‬

‫‪D‬‬

‫يث ان هصف الت نية امتخنم لتفرقة ‪:‬ين ا اواذ ومني التكا‪:‬ة او ا ات‬ ‫التكا‪:‬ة وا ات‬

‫‪1‬‬

‫‪:‬يناط عن ر ف ماب امبة‬

‫ا‬

‫‪ ‬ماب امبة التكا‪:‬ة =‬

‫عند النزم المتماثلة فا جميا ال ينات ‪100 X‬‬ ‫عند النزم الملي لجميا ال ينات‬

‫‪ ‬ماب امبة ا ات‬

‫=‬

‫عند النزم المختلفم فا جميا ال ينات ‪100 X‬‬ ‫عند النزم الملي لجميا ال ينات‬

‫مما بف امتنتﺞ أن كثافة ال طا علا جيل ا جاروا غير ماط‪ .‬إاما ابرا األهمية في هصف الت نية من وجود أو‬ ‫غياب هصف ال ط ة (‪. )Bands‬‬ ‫التفرقة بين الحزم ‪:Bands‬‬ ‫‪Polymorphism‬‬

‫‪Monomorphism‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪23‬‬

‫محاسن وعيوب تقنية (‪:)RAPD‬‬ ‫عيوبها وسلبياتها ‪:‬‬

‫محاسنها ومميزاتها ‪:‬‬ ‫اطبف علا مختلا األاواذ (إامان ‪ ،‬يوان ‪ ،‬ابات ‪ ،‬ا نية عكواهية ‪.‬‬ ‫‪:‬متير ا‪....‬الخ‬ ‫اولة اطب اا في أ ّ‬ ‫ي م مل في ال الط‬

‫ امكا عن وجود الميادة أو عنم وجودها ف ط أي‬‫أااا اميز ‪:‬ين النمطين الوراثيين (‪)AA & aa‬‬ ‫وا جز عن التميز ‪:‬ين النمطين (‪. )AA & Aa‬‬

‫ا نية ر ة و‪:‬ميطة‬ ‫اهينة‬

‫انتاج لخبرة كما ان اماليفاا اتاهجاا غير قا‪:‬لة للتمرار‪...‬أي‬

‫ممن م اراة اتاهﺞ‬

‫ااتبار (‪ )RAPD‬ل ينة ما و‪:‬نفس الكرو‬

‫في‬

‫مختبر ن اثنين و ب ا ً هصا اااﺞ عن كون هصف الت نية‬ ‫عكواهية‬ ‫المراجع‪:‬‬ ‫‪http://www.uidaho.edu/~/media/Files/orgs/Law/law-review/2012-symposium/Trade-wreck-bobo.ashx‬‬ ‫‪http://www.stratec.com/en/molecular/Products_Molecular/Genomic_DNA/Invisorb_Genomic_DNA_Kit_ii/Invisorb‬‬ ‫‪_Genomic_Kit_ii.php‬‬ ‫‪http://a9eel2012.wordpress.com/‬‬ ‫‪http://www.damascusuniversity.edu.sy/mag/farm/images/stories/3-2013/131-149.pdf‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪24‬‬

‫التدريب العملي الثالث‬ ‫‪ .1‬في تجربة فى المعمل للتفرقة بين العديد من‬ ‫االنواع النباتية الستخدامها فى حفظ هذل االصول‬ ‫بواسطة تقنية ‪ RAPD‬وبعد التفريد على جيل‬ ‫االجاروم كانت النتيجة كما هو فى الصورة اذكر‬ ‫بنسبة التشابة واالختالف بين هذل اال نواع؟‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪25‬‬

‫ثانيا‪ :‬تقينات حفظ االصول الوراثية عن طريق‬ ‫المعشبات‬

‫المعشبة النباتية‬

‫المعشبة الحيوانية‬

‫معشبة الفطريات‬

‫المعشبة الحشرية‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪26‬‬

‫الدرس العلمي الرابع‬ ‫المعشبة النباتية‬ ‫"اصنعها بنفسك ج‪"1‬‬ ‫االهداف العامة‬ ‫هو تعريف الطالب علي احدي تقنيات حفظ االصول الوراثية وهي المعشبات‪.‬‬ ‫االهداف الخاصة‬ ‫ان يتعرف الطالب على كيف يقوم بعمل نموذج للمعشبة مصغر خالل هذه المادة‪.‬‬ ‫تعريف المعشبة النباتية‪:‬‬ ‫المعشبات هي مجموعة من العينات النباتات المحفوظة‪ .‬ويمكن أن تكون العين ة‬ ‫من اجزاء أو نبات بالكامل‪ .‬وعادة م ا تك ون ف ي ص ورة مجفف ة ملص وقة عل ى‬ ‫الواح‪ ,‬لكن ذلك يعتمد على نوعية العينة حيث أنها يمكن أن تكون محفوظة ف ي‬ ‫كح ول أو أي م ادة حافظ ة أخري‪.‬ويس تعمل ه ذا المص طلح أيض ا ف ي عل م‬ ‫الفطريات لوصف مجموعة الفطريات المحفوظة‪.‬‬ ‫ويمكن أن يشير مصطلح المعشبات إلي المبني الذي يتم فيه تخ زين العين ات أو‬ ‫إلي المؤسسة العلمية والتي تحتوي أيضا على العينات باإلضافة إلي األبحاث المتعلقة بها‬ ‫كيف يمكن تجهيز العينة للحفظ داخل المعشبة ‪:‬‬ ‫تمر الع ينات المعشبة بمراحل إجبارية قبل ان تنتظم في خزائنها التصنيفية‪ ,‬وهذه المراحل في غايتها تهدف‬ ‫إلي الحفظا على شكل العينة النباتية ألطول فترة ممكنه وذلك بإنتزاع العصير الخلوي من العينة أي تجفيفها‬ ‫والحفاظ عليها من العوامل البيئية واالصابات الحشرية‪ ,‬لذا فإن مراحل إعداد العينات المعشبية تأتي حسب‬ ‫الترتيب التالي‪:‬‬ ‫‪ .1‬مرحلة الجمع‬

‫‪ .2‬مرحلة الحجر والفرز‬

‫‪ .4‬مرحلة التثبيت‬

‫‪ .5‬مرحلة التعريف‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪ .3‬مرحلة الكبس‬

‫‪27‬‬

‫‪ .1‬مرحلة الجمع‪Collection Sample :‬‬ ‫ا‪ .‬جمع البذور وتنظيفها وتجفيفها‬ ‫إن طرق جمع البذور تختلف م ن نب ات رخ ر ‪ ،‬وذل ك نتيج ة الخ تالف حم ل ه ذه النبات ات لثماره ا‪ .‬ل ذا ف إن‬ ‫عملية جمع البذور تتم يدويا ً في بعض األنواع النباتية وآليا ً في أنواع أخ رى‪ .‬فعن د جم ع الب ذور ي دويا ً يج ب‬ ‫فرش األرض تحت النب ات بغط اء بالس تيكي وم ن ث م تحري ك األغص ان والف روع بالي د لتس قط الب ذور ف وق‬ ‫الغطاء البالستيكي تم تجميع البذور‪ .‬أما إذا كان الحصاد آليا ً فيتم بواسطة آالت (مكائن شفط) لها القدرة على‬ ‫فرط البذور وشفطها في خزانات البذور‪ .‬ويمكن تقليم األجزاء النباتية التي تحمل الب ذور الناض جة باس تخدام‬ ‫مقص التقليم ومن ثم فرط البذور في المعمل ‪.‬‬ ‫تبدأ عملية تنظيف البذور وذلك باستخدام مناخل ميكانيكية أو يدوية ذات فتحات مختلفة الحجم‪ .‬المناخل الت ي‬ ‫فتحاتها واس عة لتمري ر الب ذور دون البقاي ا النباتي ة األخ رى والحج ارة أم ا المناخ ل ذوات الفتح ات الص غيرة‬ ‫فتستخدم لتنظيف البذور من األتربة‪ .‬ويوجد آالت متط ورة لعملي ة فص ل الب ذور حي ث تحم ل مناخ ل داخلي ة‬ ‫ويمر خالل هذه ارالت تيار هوائي يقوم بفصل البذور عن الشوائب والمواد األخرى ‪.‬‬ ‫ويتم تجفيفها هوائيا ً وذلك ع ن طري ق نش رها عل ى ف رش ف ي غرف ة خاص ة تح ت درج ات ح رارة ورطوب ة‬ ‫مناسبة‪ .‬ويجب تقليب البذور من وقت رخر تفاديا ً لحدوث تعفن لها ‪.‬‬ ‫ب‪ -‬اختبارات البذور‪ :‬ويقصد بها تحديد نسبة اإلنبات وحيوية البذور‬ ‫‪ .1‬اختبار نسبة اإلنبات ‪:‬‬ ‫ويقصد بذلك ‪ -‬بزوغ الجذير من خالل غالف البذرة‪ -‬والذي من خالله يتم قب ول الب ذور أو رفض ها‪.‬إلجراء‬ ‫هذا االختبار تؤخذ عينة عشوائية وتوزع في أطب اق بتري ة تحت وي عل ى أوراق ترطي ب أو قط ن‪ .‬ك ل طب ق‬ ‫بتري يعبر عن مكررة‪ ،‬ونحتاج إلى ‪ 10-5‬مكررات للقيام بالتحليل اإلحصائي‪ .‬توضع األطب اق البتري ة ف ي‬ ‫جهاز اإلنبات ( الحضانات) المتحكم بدرجة الحرارة والرطوبة فيها‪ .‬يسجل عدد البذور المنبتة يوميا إل ى أن‬ ‫توقف عملية اإلنبات تماماً‪ .‬ويحسب نسبة اإلنبات على أساس متوسط نسب اإلنبات للمكررات‪:‬‬ ‫نسبة اإلنبات‬

‫( عدد البذور النابتة ‪ /‬عدد البذور الكلي)× ‪100‬‬

‫ومن عيوب هذا االختبار أن البذور الكامنة ال تنبت لذا فهو ال يعبر عن مدى الحيوية لدى البذور المفحوصة‬ ‫ألنه ال يظهر نسبة البذور الحية ‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪28‬‬

‫‪ .2‬اختبار نسبة حيوية البذور‪:‬‬ ‫يقصدون بحيوية البذور‪ ،‬قدرتها على اإلنبات وإعطاء بادرة طبيعية ‪.‬‬ ‫إن اختبار التترازوليم من الطرق الدقيقة شائعة االستعمال لتقدير حيوية البذور‪ .‬ويتميز بأنه‪:‬‬ ‫‪ ‬اختبار سريع ‪.‬‬ ‫‪ ‬يمكننا من معرفة حيوية البذور الكامنة ‪.‬‬ ‫أساس هذه االختبار هو التفريق ب ين األنس جة الحي ة والميت ة لجن ين الب ذرة بن اءاً عل ى المع دل النس بي لت نفس‬ ‫األنسجة الرطبة‪ .‬ويعتمد اختبار التترازوليم على نشاط أنزيمات الديهيدروجينيز ‪.‬‬ ‫فتتفاعل أنزيمات الديهيدروجينيز مع األنسجة منتجة أيونات الهيدروجين والتي ب دورها تخت زل محل ول مل ح‬ ‫التت رازوليم الع ديم الل ون والمتأكس د وتحول ه إل ى مركاب الفاورمزان )‪ (Formazan‬المخت زل ذو الل ون‬ ‫الزهري أو األحمر‪ ،‬وتقدر حيوية البذرة طبقا ً لطبوغرافية نمط التلوين وكثافته في الجنين ‪.‬‬ ‫وتعد البذور التي تحولت كليا ً أو جزئيا ً إلى اللون األحمر والتي تعتبر حية وكذلك تعد الب ذور الت ي ل م يتغي ر‬ ‫لون أجنتها والتي تعتبر بذور ميتة ومن ثم تحتسب نسبة حيوية البذور ‪.‬‬ ‫نسبة الحيوية للبذور‬

‫( عدد البذور الحية‪ /‬عدد البذور الكلي) × ‪100‬‬

‫‪ .3‬اختبار درجة نقاوة البذور ‪:‬‬ ‫م دى وج ود الش وائب والم واد الغريب ة م ع الب ذور‪ ،‬ولتق دير النق اوة ي وزن مجموع ة م ن العين ات العش وائية‬ ‫وتفرز المواد الغربية والشوائب منها بعناية ثم توزن مرة أخرى ونحدد منها نسبة النقاوة‪.‬‬ ‫الشغل العملي لهذه الخطوة‪:‬‬ ‫وه ي مرحل ة الت ي يق وم فيه ا الج امع ب الخروج ال ي البيئ ة الطبيعي ه ف ي ج و‬ ‫صحو (غير ممطر او عاصف)‪ ,‬حامال ادواته من‪:‬‬ ‫‪ ‬دفتر لتسجيل المعلومات‬ ‫‪ ‬وعدسات مكبرة وحقائب لجمع العينات‬ ‫‪ ‬وجروف ومقص نباتات وما الي ذلك من مستلزمات حقل‪.‬‬ ‫‪ ‬باالضافة الي كاميرا حت ي يق وم بتص وير بع ض العين ات النباتي ه ف ى‬ ‫بيئتها الطبيعيه‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪29‬‬

‫وقبل ان تمتد يده ليلتقط العينات‪ ,‬عليه ان يُراعي ان النوع الذي سوف يقوم بجمعه مت وفر ف ى المنطق ة وف ي‬ ‫اعمار مختلفه حتي تكون العينة التي سيختارها ممثلة قدر االمكان للنبات في مرحلة نموه المختلفه ( من اول‬ ‫بادرة الي وصله لنبات بالغ)‪ ،‬بمعنى اشتمالها على كافة اجزاءه م ن مجم وع ج ذري ومجم وع خض ري بم ا‬ ‫ف ي ذل ك عل ى اش تمالها عل ى ثم ار أو ازه ار وياحب ذا ان تك ون ناض جة (به ا ب ذور) وان تك ون خالي ه م ن‬ ‫االم راض ا و االص ابات الحش رية (تس تخدم االكي اس البالس تيك او حقائ ب م ن الص اج محكم ة الغل ق لحف ظ‬ ‫العينات من العوامل الجوية لحين الوصول بها الى المعشبة مع كتاب ة ت اريو ومك ان الجم ع ب القلم الرص اص‬ ‫على ورقة ترفق بالعينات)‪.‬‬ ‫في أثنــاء تجميـع العينــات في الحقــل البد من رصد للبيانات التاليــة‪:‬‬ ‫‪ o‬تاريو جمع العينة ‪.‬‬ ‫‪ o‬االسم الدارج (كما يسميه أبناءالمنطقة)‪.‬‬ ‫‪ o‬المكان (البعد واالتجاه من أشهر مكان معروف)‪.‬‬ ‫‪ o‬الوسط من حيث مالمحه (بركه‪ -‬كثبان رملية‪-‬أرض ‪-‬حشائش)‪.‬‬ ‫‪ o‬استخدامات هذا النبات (هل هو نبات طبي أم اقتصادي أم زينة)‪.‬‬ ‫‪ o‬ويمكن تسجيل بعض الصفات أثناء الجمع مثل هوية الســاق ‪,‬‬ ‫‪ o‬نوع التربة ‪ ,‬وصف النورة ‪ ,‬وجود لبن نباتي ‪ ,‬وجود رائحة ‪..‬الو‪.‬‬ ‫‪ o‬درجات التواجد ‪.‬‬ ‫‪ o‬تأخذ العينات المجمعة رقمـًا مسلسال ًوتـ ـدون البيـ ـانات الس ـابقة ف ي كراس ة خاص ة بالعم ل‬ ‫الحقلي تحت نفس رقم العينة ‪.‬‬ ‫‪ o‬يدون اسم الشخص القائم بالجمع ‪.‬‬ ‫عينات ذات طراز خاص في التجميع‪:‬‬ ‫‪- 1‬العينات العصيرية‪:‬‬ ‫مثل نبات الصبار والذي يتميز بسمك اعضائه واحتواءه على نسبة عالية من الماء‪ ،‬وعينات كهذه يتبع معه ا‬ ‫مايلي‪:‬‬ ‫أ‪ -‬تقتل االنسجة سريعا اما بالغمر بالماء الساخن لمدة ثوان أو معاملتها بأحد محاليل الغمر كالكحول او‬ ‫الفورمالين‪.‬‬ ‫ب‪-‬يتم نزع األنسجة الزائدة الداخلية للعضو‪.‬‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪30‬‬

‫‪ -2‬العينات الصغيرة‪:‬‬ ‫مثل عدس الماء ويتبع مع العينات الصغيرة ارتي‪:‬‬ ‫أ‪ -‬يتم تجميعه في مجموعات وليس كعينة فردية‪.‬‬ ‫ب‪-‬يتم تجفيفها بواسطة الشمس‪.‬‬ ‫ج‪ -‬توضع على ورق التحميل داخل مظروف من السيلوفان او البالستيك الشفاف‪.‬‬ ‫د‪ -‬يمكن حفظها في احد سوائل الحف ظ مث ل(الكحول اإليثيل ي او الفورمالدهي د او الم اء) حت ى يمك ن بع د‬ ‫ذلك اجراء الدراسات عليها مثل دراسة التركيب التشريحي‪.‬‬ ‫هـ‪ -‬تحفظ هذه العينات داخل اواني زجاجية ويتم تسجيل البيانات الخاصة بها على رقائق من الخارصين‬ ‫أو صفائح من الصيني وتوضع داخل اإلناء ويٌغلق بإحكام وتحفظ العينات داخل المعشبة‪.‬‬ ‫‪ -3‬العينات المالية‪:‬‬ ‫أ‪ -‬توضع بعد جمعها في اناء مسطح به ماء ويتم فرد العينة في الماء‪.‬‬ ‫ب‪ -‬توضع بحرص اسفل العينة وهي في الماء قطعة من الورق األبيض او قم اش الميس يلين ‪muslin‬‬ ‫والموضعة فوق شبكة من السلك و ٌترفع العينة المفرودة على الورق‪.‬‬ ‫ج‪ -‬تسحب الورقة من اسفل العينة برفق شديد وبالتدريج‪.‬‬ ‫د‪ -‬توض ع العين ة بع د ذل ك عل ى ورق المك بس داخ ل المك بس م ع مراع اة وض ع كمي ة اكب ر م ن ورق‬ ‫التجفيف مقارنة بالحاالت العادية‪.‬‬ ‫هـ‪ -‬يتم تغير ورق المكبس على فترات متقاربة‪.‬‬ ‫و‪ -‬في حالة العينات التي يستلزم جمعها نزعها بجزء م ن الص خر الملتص ق عليه ا فه ذه يج ب ان تحف ظ‬ ‫داخل السوائل الحافظة‪.‬‬ ‫‪ -4‬السراخس‪:‬‬ ‫أ‪ -‬ي تم جم ع ه ذا الن وع م ن العين ات ب الجزء الس فلي له ا (الماس ك او الري زوم) حي ث انه ا تعتب ر ص فة‬ ‫تصنيفية هامة‬ ‫ب‪ -‬في حالة األوراق الكبيرة يجب ان يؤخذ معها الجزء الس فلي م ع الج زء القاع دي ويج ب ان يحت وي‬ ‫على البثرات‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪31‬‬

‫‪ -5‬األبصال والدرنات‪:‬‬ ‫أ‪ -‬مثل هذه العينات يجب قتل انسجتها اوال اما باحدى محاليل القتل او بالتسخين اثناء عملية التجفيف مع‬ ‫استمرار تهوية العينات داخل المكابس وذلك ألنها قد تستمر في النمو حتى اثناء عملية الكبس‪.‬‬ ‫ب‪ -‬يجب تقليل حجم العينة مع عدم تغيير شكلها الخارجي وذلك بنزع األنسجة الداخلية للعينة ثم حفظه ا‬ ‫في سوائل الحفظ أو بالحفظ العادي بعد التجفيف بالمكبس‪.‬‬ ‫وهناك أولويات خاصة لألنواع النباتية التي تجمع البذور منها مرتبة كالتالي ‪:‬‬ ‫‪ ‬النباتات المهددة بالفناء ‪.‬‬ ‫‪ ‬النباتات الفريدة من حيث التطور والتصنيف‪.‬‬ ‫‪ ‬النباتات التي يراد إعادة استزراعها في المواقع الطبيعية المتدهورة‪.‬‬ ‫‪ ‬النباتات ذات األهمية الزراعية أو الطبية أو الصناعية‪.‬‬ ‫‪ .2‬مرحلة الحجر والفرز‪:‬‬ ‫قبل تفريغ العينات من اكياس الجمع او العلب وقب ل ادخاله ا ال ي‬ ‫طاولة العمل فى المعشبة توضع فى فريزر تثليج لمدة ‪ 24‬ساعة‬ ‫لقت ل االاف ات النباتي ه‪ ,‬حي ث ي تم بع دها ف رز العين ات الس تبعاد‬ ‫المص اب منه ا والتاك د م ن خلوه ا تم ام م ن اي عوال ق غريب ة‬ ‫(حش رية – فطري ة – اتراب ة) حت ي ال ي ؤدي ذل ك ال ي انتق ال‬ ‫االصابة لباقي العينات المعش بة‪ ,‬وياتم سسالها بالمااء الجااري (‬ ‫أو نفضها من االترابة دون الغسل) وفردها لتجف ف ف ى اله واء‪,‬‬ ‫ثم تجمع مره اخري لتصنف فى مجموعات‪.‬‬ ‫‪.3‬مرحلااة الكاابس "ضااغط وتتجفيااف العينااة"‪Pressing :‬‬ ‫‪and Drying of Specimen‬‬ ‫تعريفها‪:‬‬ ‫ه ي المرحل ة الت ي ي تم فيه ا انت زاع الج زء األكب ر م ن الم اء‬ ‫الموجود في العينة لتصبح جاف ة ويس تخدم له ذه العملي ة مايس مى‬ ‫بالمكابس (الضواغط)‪.‬‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪32‬‬

‫وعلى طاولة العمل يتم تجهيز المكابس الخشبية (لوحان م ن الخش ب مقي اس ع المي – بهم ا ثق ب للتهوي ة –‬ ‫واوراق جرائد مطوية – واوراق كرتون للتشرب الماء) حيث يوضع احد الل وحين عل ى الطاول ة ث م يوض ع‬ ‫طبقة من الكرتون والجرائد‪ ,‬وترص العين ات ف ي طبق ات تفص ل بينه ا الجرائ د او اوراق التجفي ف‪ ,‬عل ي ان‬ ‫تفرد اوراق كل عينة فرداً كامالً‪ ,‬وترص طبقة اخري‪ .‬وهكذا حتي يتكون مجلد كبير من الطبقات ث م تغط ي‬ ‫باللوح الخشبي الث اني ‪ .‬ويربط اللوحين بالحبل للضغط على العينات ثم تقفد محتواها المائي ومن ث م تتش ربه‬ ‫اوراق الجرائد‪ .‬وتت رك لم دة ي ومين ف ى مك ان جي د التهوي ة ‪ ,‬ث م يُع اد تغي ر الجرائ د بجرائ د اخ ري جدي ده ‪,‬‬ ‫وهكذا لمدة ث الث او ارب ع م رات حس ب طبيع ة العين ات النباتي ه والتق دير الشخص ي لم دي جف اف العين ات ‪,‬‬ ‫فكلم ا كان ت العين ات النباتي ه عص يرية كلم ا احتاج ت ال ي تب ديل اوراق التجفي ف عل ى فت رات متقارب ة ع دة‬ ‫مرات‪.‬‬ ‫يلجأ بعض الهواه الي ضغط العينات النبايته بين اوراق بعض الكتب القديمة‪ ,‬ووضع ثقاالت وقوال ب ط وب‬ ‫عليها‪ .‬وهي طريقة مقبولة وال تحتاج الى ادوات‪.‬‬ ‫مرحلة التسميم ‪:Poisoning‬‬ ‫تعريفها‪:‬‬ ‫قتل األنسجة النباتية بالمواد السامة الت ي تعم ل ايض ا عل ى تك وين طبق ة حماي ة عل ى س طح العين ة‪.‬و تس مم‬ ‫العينات عموما ً مباشرة بعد عملية الجمع أو أثن اء عملي ة الك بس ‪ ،‬وق د يك ون بع د عملي ة التحمي ل عل ى ورق‬ ‫المعشبة‪ .‬ومن محاليل التسميم نذكر‪:‬‬ ‫‪ .1‬محلول كلوريد الزلبق‪:‬‬ ‫يحضر المحلول من ‪ 15‬جرام كلوريد زئبق مع ‪ 35‬جرام أمونيوم كلوريد ويذابا في لتر من الكحول ‪%96‬‬ ‫يصب المحلول في حوض زجاجي (تستبعد األواني واألدوات المعدنية) ‪ ،‬تغم س العين ات لم دة م ن ‪20-15‬‬ ‫ثانية ثم ترفع وتعاد إلى المكبس ‪ ،‬تجفف لمدة ‪ 24‬ساعة تصبح بعدها صالحة للتثبيت على ورق المعشبة‪ .‬قد‬ ‫يستخدم المحلول بعد تثبي ت العين ة وذل ك ب دهان العين ات بفرش اة‪ .‬يراع ى ع دم لم س األي دي وأج زاء الجس م‬ ‫وباألخص األجزاء التي بها جروح لهذا المحلول ‪ ،‬ويستخدم ماسك من الخشب لرفع العينات بعد غمرها ف ي‬ ‫الحوض‪.‬‬ ‫‪ )2‬الفورمالين‪:‬‬ ‫وف ي هذه الحالة يتم تسميم النباتات بعد الجمع مباشرة ‪ .‬وتستخدم في حالة الرحالت الطويل ة والت ي ال ي تمكن‬ ‫فيها م ن القي ام بعملي ة ف رد وتجفي ف العين ات لم دة ق د تص ل إل ى أربع ة أش هر (تعتب ر طريق ة لحف ظ العين ات‬ ‫أيضاً)‪ .‬ويستخدم لذلك فرومالين ‪.%10‬تجهيز العينات على هيئة مجموعات (حزم) ملفوفة بورق الجرائ د ‪،‬‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪33‬‬

‫توضح كل مجموعة داخل كيس بالستيك ‪ ،‬يصب فوقها المحلول بكمية تكف ي لتش بع ورق الجرائ د فق ط دون‬ ‫أن يبقى جزء من المحلول داخل الكيس ‪ ،‬يغلق الكيس ‪ ،‬ويحفظ حتى نتمكن من القيام بعملية التجفيف‪.‬‬ ‫‪ )3‬التبخير‪:‬‬ ‫وفي هذه الحالة يتم تبخير العينات سواء قبل إتمام عملية التحميل أو بعدها‪.‬ويستخدم لذلك أحد السوائل السامة‬ ‫المتطايرة مثل ميثيل برومايد ‪ ،‬رابع كلوريد الكربون ‪ ،‬توضع ه ذه المحالي ل ف ي طب ق بت ري داخ ل دوالي ب‬ ‫المعشبة‪ ،‬وتغل ق لم دة أس بوع ‪ ،‬وق د يك ون هن اك غ رف خاص ة لمحكم ة الغل ق له ذه العملي ة‪ .‬ولك ن ف ي ه ذه‬ ‫ال طريقة ال يتم قتل بيض الحشرات ‪ ،‬وبذلك يجب تكرار عملية التبخير على فترات دورية منتظمة‪.‬‬ ‫وهذه المرحلة يمكن ان يتجاوزها الهواه لخط ورة الم ادة المس تخدمة ف ى التس ميم أو اس تبدالها ب رش العين ات‬ ‫النباتيه التي تم تجفيفها جيدا بمبيد حشري قوي التأثير مع الحذر المعتاد بعدم استنشاق الرذاذ وذلك لالحتفاظ‬ ‫بالعينات لمدة طويلة‪ .‬أما المش تغلون ف ى المعش بات العلمي ة القومي ة فعل يهم تس ميم العين ات بمحل ول كح ولي‬ ‫(بنسب ‪ 1‬جرام كلوريد زئبقيك ‪ :‬ا لتر من كحول ايثيلي) حيث ُتغمر العينات للحظات ثم تنشل بملقط وتترك‬ ‫لتجفف‪ ,‬حيث تكون جاهزه للتثبيت‪.‬‬ ‫‪ .4‬مرحلة التثبيت‪:‬‬ ‫تثب ت العين ات بع د ذل ك عل ى لوح ات الع رض (ورق بريس تل‬ ‫اب يض مق اس ‪ 28 *42‬س م) عل ى ان تك ون اج زاء العين ة‬ ‫متساوية وواضحة‪ ,‬وذلك بلصق االجزاء بالص ق س لوتيب او‬ ‫بالغراء‪ ,‬وتوضع الب ذور ف ي ك يس بالس تيك ص غير يثب ت ف ي‬ ‫الجانب االيمن العلوي من لوحة العرض‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪34‬‬

‫‪ .5‬مرحلة التعريف‪:‬‬ ‫تلصق على لوحة العرض فى الجانب االيمن السفلي بطاقة البيانات المتضمنة ‪:‬‬ ‫‪ ‬االسم العلمي‪:‬‬

‫‪.................................................................‬‬

‫‪ ‬االسم الشائع (العام)‪:‬‬

‫‪.................................................................‬‬

‫‪ ‬تاريو الجمع‪:‬‬

‫‪.................................................................‬‬

‫‪ ‬الجــــــــامع‪:‬‬

‫‪.................................................................‬‬

‫‪ ‬مكان الجمع‪:‬‬

‫‪.................................................................‬‬

‫ويقوم متخصص (عالم لتصنيف النبات) بتعريف اسم العينة‪ .‬وبالتالي تكون العينة المعشبية جاهزة للحفظ فى‬ ‫خزائن المعشبة أو فى ملفات المجموعة المعشبية الخاصة بالهواه‪.‬‬

‫‪Reference:‬‬ ‫‪/page/92/‬أخبار‪-‬ونشاطات‪-‬بيئية‪http://theenvironment.maktoobblog.com/category/‬‬ ‫‪http://www.clipartpal.com/clipart/flower/grass_147794.html‬‬ ‫‪http://forum.nooor.com/t51863.html‬‬ ‫‪/‬هيئة‪-‬حماية‪-‬البيئة‪-‬والتنمية‪-‬في‪-‬رأس‪-‬الخي‪http://theenvironment.maktoobblog.com/8105/‬‬ ‫‪http://www.back4allah.com/kids/play.php?catsmktba=227‬‬ ‫معشبة‪http://www.marefa.org/index.php/‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪35‬‬

‫التدريب العملي الرابع‬ ‫‪ .1‬تقسيم الطالب الي مجاميع بحيث كل مجموعة تقوم بعمل نموذج للمعشبة النباتية‪.‬‬ ‫‪ .2‬وعرض مجهود المجموعة في صورة مجلة تعرض خطوات عمل المجموعة‪.‬‬ ‫جــــــدول المتابعة‬ ‫رقم المجموعة‪:‬‬ ‫اسماء افراد المجموعة‪:‬‬ ‫توزيع المهام الداخلية‪:‬‬ ‫المدة المقترحه النهاء المعشبة‪:‬‬ ‫تاريخ تقديم المشروع‪:‬‬ ‫مقدم المشروع‪:‬‬ ‫عدد الدرجات‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪36‬‬

‫الدرس العملي الخامس‬ ‫المعشبة الحيوانية‬ ‫"اصنعها بنفسك"‬ ‫االهداف العامة‬ ‫هو ا ر ا الطالب علي ا ني ا نيات فظ ا ةو الوراثية وهي الم كبات‪.‬‬ ‫االهداف الخاصة‬ ‫ان ت ر‬

‫الطالب علا كيا وم ‪ :‬مل اموذج للم كيبة مصي ر اي‬

‫هيصف الميادة‬

‫ين الماهنيات الممثليم‬

‫للمجتما وهي النيوااات‪.‬‬ ‫مقدمة‪:‬‬ ‫اننيط المواا هو فظ جثث المواا ‪:‬وا طة ميواد كيمياهيية‪ ،‬فينيافظ جميط اإلاميان عليا مظايرف و بينو كأايم‬ ‫ي‪ ،‬عنن امجيتم في ممان عام قبل إجرا مرا ط النفن ‪,‬وذلك أل باب بية أو از ينية؛ ‪:‬اإل افة إلا أام في‬ ‫‪:‬متطلبات ‪ :‬ة الن ااات التي اؤار النفن ل نة أ ام‪ ،‬أو ابطر لن ل الجثة إلا ممان آار‪ ،‬فيمنا التننيط ا فّن‬ ‫الجثة‪.‬‬ ‫وقدماء المصريين هم أول من مارس هذه العملية في العصور الغابرة ‪ ،‬وكان الغ رض م ن ه ذه العملي ة ه و‬ ‫حفظ أجساد الموتى من التحلل والفناء ‪ ،‬واالحتفاظ بالمظهر الخارجي للشخص الميت واإلبقاء عل ى مالمح ه‬ ‫الشخصية‪.‬‬ ‫وكان يدفعهم إلى ذلك عقيدتهم ‪ ،‬حيث كانوا يؤمنون بأن الروح تعود إلى الجسد بعد الم وت ‪ ،‬حي ث يواص ل‬ ‫الميت حياته الثانية في العالم ارخر ‪ ،‬وكانوا يظنون أن الروح قد تظل الطريق في عودتها وال تتعرف عل ى‬ ‫جثتها إذا تحللت وتعفنت ‪ ،‬فكانوا يحرصون على أن تبقى الجثة في حالة جيدة ‪ ،‬وله ذا أيض ا ً ك انوا يض عون‬ ‫مع الجثة بعض المواد كالحلي وارنية والطعام وغيرها حتى يج د المي ت زاده ومتاع ه ف ي رحلت ه إل ى حي ث‬ ‫يقضي حياته الباقية‪.‬‬ ‫تعريف المعشبة الحيوانية او طرق حفظ الحيوانات عن طريق "التحنيط"‬ ‫اننيط النيوااات هو فن فظ النيوااات وإظاارها كما لو كاات ية‪ .‬ا ره متا ا التار خ الطبي ي أاواعا‬ ‫من النيوااات في هيطتاا الطبي ية‪.‬‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪37‬‬

‫األساس العلمي للحفظ بواسطة التحنيط‪:‬‬ ‫هو ازذ ما الجمط واجفيفم اماميا ً ‪ ،‬وا يتخ ص أي قط ية مين اللنيط داايل الجميط ‪ ،‬تيا‬

‫ايتممن ‪:‬متير يا‬

‫الت فن من أن ا يب علياا أو ات صﻯ ‪:‬اا‪.‬‬ ‫االدوات المستخدمة في الحفظ او التحنيط‪:‬‬

‫الطرق المتبعه للحفظ‪ .1 :‬قديمة‬ ‫‪ .2‬حديثة‬ ‫اوالا‪ :‬الطريقممة القديمممة للتحنمميط ‪ :‬من واقع التجربة كان يتم التحن يط ل رأس الب دن بالطريق ة التقليدي ة والت ي‬ ‫(بالملح والقرنفل )‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫مازال يتبعها أكثر القناصين في وقتنا الحاضر‪ .‬ومراحلها كاالتي‪:‬‬

‫‪38‬‬

‫‪ .1‬مرحلة التنظيف‬ ‫‪ .2‬مرحلة التعويض‬ ‫‪ .3‬مرحلة البناء‬ ‫‪ .4‬مرحلة الزبرقة والتجميل‬

‫المرحلة األولى ‪( :‬التنظيف)‬ ‫لخ الرأس ‪:‬المكر من انت الننك ثط انظيا الرأس من جميا اللنوم ‪:‬ما فياا اللمان ‪.‬‬

‫‪.1‬‬

‫‪ .2‬عملية إاراج المخ ‪:‬مل ة أو انر ك الممين داال الجمجمة ثط إداا الما ورجم جينا ثط خرج المخ‬ ‫و‬

‫خفا عليمط موقا إداا الممين (‪:‬ين ال ظمين ) ما إمتناد فتنة النخاذ الكوكي ‪.‬‬

‫‪ .3‬عملية إاراج ال يون وهي عملية م نة لميي انيافظ عليا رميوظ الظبيي كميا هيي ‪:‬ين مين النقية فيي‬ ‫قطا الجفون ‪ .‬ثط ازذ ال ين ‪:‬مل ة وانظيا منجر ال ين من الكنوم ‪.‬‬ ‫‪ .4‬غمل الرأس جينا ‪:‬الما ‪.‬‬

‫المرحلة الثانية ‪( :‬التعويض)‬ ‫‪ .5‬ا وم ‪:‬ت و ة جميا ما أاصاا من لنوم ‪:‬ال طن أو ‪:‬الخيب وأاا أفبل الخيب ‪.‬‬ ‫‪ .6‬اجاز ‪:‬‬

‫تيك كبم أذن النيوان مين أي هيوا أ مير انمييم عليا النيار واميون شيمل األذن ‪ .‬لينيافظ‬

‫علا إمتناد وإعتنا األذن ‪.‬‬ ‫‪ .7‬اجاييز األ ي‬

‫والخيييو ال و يية مثييل ييلك المييبنة ‪ .‬واجاييز أةييلب أاييواذ اإل‪:‬يير ألن الجليين ة ي ب‬

‫إاتراقم ‪.‬‬ ‫‪ .8‬ابنأ ‪:‬و ا ال رافل ‪:‬الطا ون ‪ .‬ثط اخلطم ما الملب ‪.‬‬ ‫‪ .9‬انبر كوراين من الب‬

‫تيك أو الزجاج ‪ .‬لت و باما عن ال ينين‪.‬‬

‫المرحلة الثالثة‪ ( :‬البناء )‬ ‫‪ .10‬ابا الملب وال رافل داال الجمجمة ‪:‬مميات كبيرة ‪ .‬ثط امن الفتنة ‪ :‬طن ‪.‬‬ ‫‪ .11‬ابا الملب وال رافل ‪:‬ين الجلن وال ظط ‪.‬‬ ‫‪ .12‬ابا قطا الخيب و الننمين و امثر من الخيب لمي‬

‫نتفخ و كوف المنظر‪.‬‬

‫‪ .13‬انال المراين منل ال يون وابا قبلاما قلي من ال طن والملب وال رافل ‪.‬‬ ‫‪ .14‬ابا قطن أو ايب داال األاا ‪.‬‬ ‫‪ .15‬ابا ‪:‬ين األ نان والبر ط قط ة ايب ة يرة انافظ علا ‪:‬رواهما ‪:‬كمل ‪:‬ميط ‪.‬‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪39‬‬

‫‪ .16‬ابا الب‬

‫تيك المناكي لكمل األذن داال اجو ا األذن وانمط عليم ‪:‬ر‪:‬ا ‪.‬‬

‫‪ .17‬اخيط الجلن و ‪ :‬بم الب ة ‪.‬‬ ‫‪ .18‬اأاي ‪ :‬نر متو ط النجط وابا فيم الما ثيط امزجيم ‪:‬خلييط المليب وال رافيل ‪ ،‬وابيا اليرأس فييم مين‬ ‫الخلا من جاة األذاين ‪.‬‬ ‫‪ .19‬ار‪:‬ط بل و ال راين لمي اكين األذايين فييم ولميي ا ليف اليرأس فيي الكيمس ‪ .‬واألايا إليا األ يفل‬ ‫ليخرج جميا الما من الرأس لمنة ث ثة أ ام ‪.‬‬

‫المرحلة الرابعة ‪ ( :‬الزبرقة والتجميل )‬ ‫‪ .20‬اأاص الرأس وانظفم من الملب وذلك ‪:‬نمم ‪:‬مكيط ‪:‬‬

‫يتيمي ‪:‬رفيف وليين لميي‬

‫تنتيا الكي ر (فيتكيوف‬

‫الرأس)‪.‬‬ ‫‪ .21‬اصبغ ال يون ‪:‬أي ‪:‬و ة وأفبل شي (المناكير)‬ ‫‪ .22‬دهن ال رون ‪:‬الفاالين ‪:‬ممية قليلة ‪ .‬ودهن الك ر ‪:‬الجرجنز‪ .‬و مااا من دهن ال ود و الممك‪.‬‬ ‫ثانيممماا‪ :‬الطريقمممة الحديثمممة وهي الة جنا وا تمن علا مر لتين ف ط ا‬ ‫(الفورمالين)‪:‬‬

‫‪ ( .1‬مر لة الن ن والخيا ة )‬ ‫‪ ( .2‬مر لة التز ين والز‪:‬رقة)‬

‫أوالا ‪ :‬إحضار مادة الفرملين بعد حشو األنف وربط األذنين تحقن المادة ‪:‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪40‬‬

‫ثانيا ‪ :‬تنشيف الرأس في الشمس وتزيينة بعد ثالثة أيام‪:‬‬

‫صور من ميارة متحف الحيوان في حديقة الحيوان لعام ‪2016-2015‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪41‬‬

‫التدريب العملي الخامس‬ ‫‪ .1‬تقسيم الطالب الي مجاميع بحيث كل مجموعة تقوم بعمل نموذج للمعشبة الحيوانية‪.‬‬ ‫‪ .2‬وعرض مجهود المجموعة في صورة مجلة تعرض خطوات عمل المجموعة‪.‬‬ ‫جــــــدول المتابعة‬ ‫رقم المجموعة‪:‬‬ ‫اسماء افراد المجموعة‪:‬‬ ‫توزيع المهام الداخلية‪:‬‬ ‫المدة المقترحه النهاء المعشبة‪:‬‬ ‫تاريخ تقديم المشروع‪:‬‬ ‫مقدم المشروع‪:‬‬ ‫عدد الدرجات‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪42‬‬

‫الدرس العملي السادس‬ ‫المعشبة الفطرية‬ ‫"اصنعها بنفسك "‬ ‫االهداف العامة‬ ‫هو ا ر ا الطالب علي ا ني ا نيات فظ ا ةو الوراثية وهي الم كبات‪.‬‬ ‫االهداف الخاصة‬ ‫ان ت ر‬

‫الطالب علا كيا وم ‪ :‬مل اموذج للم كيبة مصي ر اي‬

‫هيصف الميادة‬

‫ين الماهنيات الممثليم‬

‫للمجتما وهي الفطر ات‪.‬‬

‫تعريف الفطريات‪:‬‬ ‫• الفطر ات ليموا من النبااات أو النيوااات‪ .‬ييث اكينت‬ ‫أوجم الت نم ال لمية التي أجر ت مؤارا‪ ،‬واصوةا في‬ ‫مجا علط الوراثة‪ ،‬أن الفطر يات هيي شيمل مين أشيما‬ ‫النياة متميزة‪ ،‬أكثر ارابا ا ‪ Fauna‬من النبااات‪.‬‬ ‫• علييييا عمييييس النبااييييات والفطر ييييات‬

‫انتييييوي علييييا‬

‫الملوروفييييييل‪ .‬م ظيييييط الفطر يييييات المجار ييييية‪ ،‬ولمييييين‬ ‫‪ :‬ة)‪ (Macro-Fungi‬انتﺞ ‪:‬كيمل مت طيا األجميام‬ ‫الثمر ة )‪ (sporocarps‬التي هي وا نة لل ا ة‪.‬‬

‫متي تنتج الفطريات االجسام الثمرية؟‬ ‫•‬

‫مميين لييـ ‪ Macro Fungal‬أن نيينا ا ثمييار فييي م ظييط أوقييات الميينة‪ ،‬شيير طة درجييات ييرارة‬ ‫المنا يبة وهنيا ر و‪:‬ية كافيية فيي النظيام البيطيي‪ ،‬ولمين التوقييت الينقيف فيي كثيير مين األ ييان اوعيا‬ ‫منندا‪ .‬اتطلب األاواذ المختلفة الظرو‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫البيطية المختلفة لبن الجمط ا ثمار‪.‬‬

‫‪43‬‬

‫ماهي االسباب التي تجعل للفطريات اهمية؟‬ ‫• وابيييط ‪ Macro-fungal‬أ ييين المموايييات الماميييم لل ا ييية وغيييير‬ ‫المتجاامييية مييين التنيييوذ البيوليييوجي النظيييام اإل موليييوجي و يييؤدي‬ ‫وظييياها الييينظط اإل مولوجيييية النيو ييية‪ : .‬ييية األايييواذ ‪Macro-‬‬ ‫‪ fungal‬هييي الطفيلييية‪ ،‬المكيييجة المتميياثرة دااييل أامييجة النبااييات‬ ‫المبييفم وا يتخراج المركبيات ال بيو ة فيي اينفف الم يص ات فيي‬ ‫ااجييياف وا ييين‪ .‬ييييث ان النباايييات المبييييفم غيييير الصييينية اميييوت‬ ‫و متمر الفطر في انليل المواد ال بو ة الميتية‪ .‬و‪:‬ايصف الطر ية‪ ،‬يتط اطايير النباايات الميتية و نينا‬ ‫اجن ن النظام البيطي‪.‬‬

‫نموذج من الفطريات ‪:Macro-fungal‬‬ ‫•‬

‫تمون فطر عيب ال راب قلنموة م ل ية ‪:‬مياق نميل ال لنميوة‪،‬‬ ‫و نميييو فيييي األمييياكن الر بييية كال ا‪:‬يييات‪ ،‬وهيييو مصييينر غنيييي‬ ‫‪:‬البرواينات‪ ،‬إ أام ف ير ‪:‬المر‪:‬وهينرات‪.‬‬

‫اوالا‪ :‬خطوات حفظ المزارع الفطرية للفطريات ‪:Macro-fungal‬‬ ‫فإاييم ميين الممتنميين للنفيياظ علييا ال ينييات فييي اليية ااجيية قيينر‬ ‫اإلممان ان تط التجميا في الصباح البياكر‪ .‬ثيط ‪ :‬ين ذليك يتط الت يا‬ ‫ال صيييور فواوغرافيييية‪ ،‬والتفيييا‬

‫عليييا الفيييور ال ينيييات فيييي رقييياهف‬

‫األلومنيوم أو ورق الكما‪ ،‬ما النرص علا ابمين ع مة جما‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪44‬‬

‫خطوات التجميع والتجفيف للعينات الفطريه‬ ‫اوالا‪ :‬ااتيار ال ينات التي هي في الة جينة وممثل عن ابا ن ال كيرة‪.‬‬ ‫ثانياا‪ :‬ا تخنام مين الجيب‬

‫تخراج عينات من الطب ة المفلية للتر‪:‬ة‪.‬‬

‫ثالثاا‪ :‬ااص الصور الفواوغرافيةا ‪:‬كر‬ ‫ان امون ال ينة ااميم في ‪:‬يطتاا الطبي ية عره افاةيل ال ينة مثل الخياشيط أو الممام‬‫ اصو ر أي مات غير عاد ة‪ ،‬مميزة أو مثيرة ل هتميام وال مية المجيوهرات لتيوفير اطياق وككياهن عليا‬‫رقط مرج ي فر ن من اوعم‪.‬‬

‫(‪)1‬‬

‫(‪)2‬‬

‫(‪)3‬‬

‫رابعاا‪ :‬نب ي أن امون ال ينات ملفوفة في ورق مكيما أو فو يل ( اميمب‬ ‫لل ينيات للصي يا أو اجمييين‪ .‬ا ييبط الث جيية فييي ‪ .)˚7-5‬و ييا أي عينييات‬ ‫ال امة المجار ة ال ميل أو الميمياهيية ا اتبيارات فيي الث جية ودرا يتاا‬ ‫ا‬

‫‪ 48‬اعة‪.‬‬

‫خامساا‪ :‬تسجيل الرموم الميكروسكوبية الرئيسية التي فحصت بشكل عام مثال‪:‬‬ ‫‪ .1‬شمل أ‪:‬واغ‪.‬‬ ‫‪ .2‬جييط أ‪:‬ييواغ والطييو و تييراوح ال ييره والمتو ييطات ‪ -‬قييياس فييي ميمييرون‬ ‫(ميمرون)‪.‬‬ ‫‪ .3‬جط النعامات وشملاا‪.‬‬ ‫‪ .4‬وجود ‪ Cystidia‬والكمل والممان‪.‬‬ ‫‪ Pileipellis .5‬البنية الخلو ة (النوذ)‪.‬‬ ‫‪ .6‬أاواذ ايو النا ر‬ ‫‪ .7‬أ‪ :‬اد او يا مجموعة من ا عراه‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪45‬‬

‫سادسماا‪:‬‬

‫ييا جميييا ال ينييات المتب ييية علييا مجففييات الخاةيية (و ي ت فييي‬

‫درجة رارة اتراوح ‪:‬يين ‪ (˚55-42‬ميا ال ميات التيي اكيمل الم‬

‫ظيات‬

‫المينااية‪.‬‬ ‫سممابعاا‪ :‬انفيييص أي ااتبييارات كيمياهييية دقي يية مطلو‪:‬يية‪ ،‬وامييجيل النتيياهﺞ علييا‬ ‫ورقة جل عينة‬

‫ثانياا‪ :‬طريقة بسيطة للحفال على المزارع الفطرية‪:‬‬

‫• الخطوة األولى ‪ :‬هي عز الفطر ات في مزرعة ا يم‪.‬‬ ‫• الخطمموة الثانيممة ‪ :‬ا طيييا قط يية ميين ورق الترشيييب ميين ييوالي يينتيمتر وا يين مر‪:‬ييا وا يماييا فييي‬ ‫األواوك‬ ‫• الخطوة الثالثة‪ :‬ااص جراثيط جن نة أو قط ة ة يرة من مزرعة ا ية يث تط ااص جز من مميت مرة‬ ‫جن نة‪ ،‬و‬

‫اا كل قط ة من ورق الترشيب (اأكن لل مل في ‪:‬يطة م مة)‪.‬‬

‫الخطمموة الرابعممه‪ :‬الحفممظ فممي الثالجممات الخاصممة بعممد‬ ‫التعريف والتوصيف‪:‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪46‬‬

‫التدريب العملي السادس‬ ‫‪ .1‬تقسيم الطالب الي مجاميع بحيث كل مجموعة تقوم بعمل نموذج للمعشبة الحيوانية‪.‬‬ ‫‪ .2‬وعرض مجهود المجموعة في صورة مجلة تعرض خطوات عمل المجموعة‪.‬‬ ‫جــــــدول المتابعة‬ ‫رقم المجموعة‪:‬‬ ‫اسماء افراد المجموعة‪:‬‬ ‫توزيع المهام الداخلية‪:‬‬ ‫المدة المقترحه النهاء المعشبة‪:‬‬ ‫تاريخ تقديم المشروع‪:‬‬ ‫مقدم المشروع‪:‬‬ ‫عدد الدرجات‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪47‬‬

‫الدرس العملي السابع‬ ‫المعشبة الحشرية‬ ‫"اصنعها بنفسك "‬ ‫االهداف العامة‬ ‫هو ا ر ا الطالب علي ا ني ا نيات فظ ا ةو الوراثية وهي الم كبات‪.‬‬ ‫االهداف الخاصة‬ ‫ان ت ر‬

‫الطالب علا كيا وم ‪ :‬مل اموذج للم كيبة مصي ر اي‬

‫هيصف الميادة‬

‫ين الماهنيات الممثليم‬

‫للمجتما وهي النكرات‪.‬‬

‫المقدمة‪:‬‬ ‫قبل الب دء ف ي التع رف عل ى الحش رات ودراس تها لغ رض تص نيفها أو لدراس ة الش كل الخ ارجي أو التش ريح‬ ‫الداخلي‪ ،‬يجب إتباع الخطوات التالية لتجميع وحفظ الحشرات ليسهل دراستها‪.‬‬

‫خطوات العمل‪:‬‬ ‫‪ .1‬التجميع‬ ‫‪ .2‬قتل الحشرات‬ ‫‪ .3‬حفظ الحشرات‬

‫أوال ‪ :‬التجميع‪:‬‬ ‫للبدء في عملية تجميع أي نوع من أنواع الحشرات يجب تحديد ارتي‪:‬‬ ‫‪ .1‬اختيار األدوات المناسبة لتجميع الحشرات‪.‬‬ ‫‪ .2‬اختيار الطريقة المالئمة لتجميع الحشرات‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪48‬‬

‫أ – األدوات المستخدمة في تجميع الحشرات‪:‬‬ ‫‪ .1‬شبكة حشرات‬

‫‪ .2‬الشفاطة لسحب الحشرات الصغيرة الحجم‬

‫‪ .3‬زجاجات لقتل الحشرات‬

‫‪ .4‬أنابيب زجاجية سعة (‪25*75‬مم) أو ( ‪10*50‬مم)‬

‫‪ .5‬ملقط وإبرة ومقص‬

‫‪ .6‬حافظة خاصة ألدوات التجميع‬

‫‪ .7‬عدسة يد مكبرة‬

‫‪ .8‬كراسة مالحظات وقلم‬

‫‪ .9‬سكين مطوي ومصائد‬

‫ب‪ -‬طرق تجميع الحشرات‪:‬‬ ‫بع د إع داد األدوات الالزم ة لتجمي ع الحش رات يج ب إتب اع إح دى ط رق التجمي ع المناس بة ارتي ة‪:‬‬ ‫‪.1‬االلتقاط باليد‪:‬‬ ‫تستخدم هذه الطريقة في تجميع الحشرات األرضية كبي رة الحج م كالخن افس والصراص ير والنم ل حي ث ي تم‬ ‫التقاطها باليد ووضعها في زجاجة القتل‪ .‬كما تستخدم ه ذه الطريق ة ف ي جم ع الحش رات المختبئ ة تح ت قل ف‬ ‫األش‬

‫جار ‪ ,‬أو عل‬

‫ى األوراق واألزه‬

‫ار ‪ ,‬أو الحش‬

‫رات المتطفل‬

‫ة عل‬

‫ى العائ‬

‫ل‪.‬‬

‫‪ .2‬التجميع بواسطة الشبكات‪:‬‬ ‫تستخدم شبكات خاصة لتجمي ع معظ م أن واع الحش رات الط ائرة والمائي ة‪ ,‬وتص نع الش بكة م ن قم اش خ اص‬ ‫طول ه ح والي ‪ 65‬س م ‪ ,‬وقط ر الفتح ة المعدني ة للش بكة ‪ 30‬س م لت دعيم حلق ة الش بكة ‪ .‬ويتص ل بالحلق ة ي د‬ ‫مصنوعة من الخشب أو االلومنيوم أو النحاس المجوف يصل طولها حوالي ‪ 40‬سم ‪ .‬وتجهز شبكة التجمي ع‬ ‫ويوج‬

‫د ثالثااااااااااة أنااااااااااواع مختلفااااااااااة ماااااااااان شاااااااااابكات تجميااااااااااع الحشاااااااااارات هااااااااااي‪:‬‬

‫أ‪.‬شبكة الفراشات‪:‬‬ ‫شبكة مصنوعة من قماش أبيض خفيف من النايلون المسامي الشفاف لكي يس هل‬ ‫رؤية الحشرات داخل الشبكة ‪ ,‬وتستعمل هذه الش بكة ع ادة ف ي تجمي ع الفراش ات‬ ‫والرعاش‬

‫ات‪.‬‬

‫ب‪ .‬شبكة الكنس‪:‬‬ ‫مصنوعة من قماش سميك نوعا ما‪ ,‬وتستعمل في تجميع معظم أنواع الحشرات الموجودة عل ى المزروع ات‬ ‫الحقل ية كالقمح والبرسيم والبطاطس واألعشاب والحشائش ‪ .‬ويتم تجميع الحشرات بحركة الكنس (امتداد اليد‬ ‫على الجانبين من الجسم ) على المحاصيل بالشبكة عدة مرات ‪ ,‬ثم تلف الشبكة أو تثنى بالتواء الي د بس رعة ‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪49‬‬

‫تثنى الشبكة بعد ذلك على حلقة السلك المع دني ح اجزة الحش رات داخله ا ث م تنق ل الحش رات المص طادة إل ى‬ ‫زجاجة القتل‪.‬‬ ‫ج‪ .‬الشبكات المالية‪:‬‬ ‫تس تخدم لتجمي ع الحش رات المائي ة وتص نع م ن قم اش س ميك أو م ن الت ل‬ ‫المسامي ‪ .‬وتتميز شبكة الماء بصغر حجمها وثقلها ‪ ,‬وبها يد طويلة لتصل‬ ‫إلى العمق المطلوب ‪ .‬تج ر الش بكة عل ى أرض ية الق اع ومنه ا بس رعة إل ى‬ ‫السطح ‪ ,‬يتسرب الماء وتبقى الحشرات في قاع الشبكة ويتم نقلها إل ى إن اء‬ ‫ع‪.‬‬

‫التجمي‬ ‫‪.3‬الضرب‪:‬‬

‫تس تخدم طريق ة الض رب ف ي تجمي ع الحش رات الموج ودة عل ى األش جار والش جيرات بض رب األغص ان‬ ‫والفروع بعصا فيتساقط ما عليها من حشرات في مختلف أطوار نموها على قطع ة قم اش مش دودة الجوان ب‬ ‫أو إن‬

‫اء تجمي‬

‫ع مس‬

‫طح أس‬

‫فل األغص‬

‫ان واألف‬

‫رع‪.‬‬

‫‪ .4‬التجميع باستخدام الشفاطة‪:‬‬ ‫تس تخدم ه ذه الطريق ة ف ي جم ع الحش رات‬ ‫الص غيرة ج دا وخاص ة الم راد جمعه ا حي ة‬ ‫مث ل الم ن والنم ل وغيره ا م ن الحش رات‬ ‫الصغيرة الدقيقة التي يصعب تجميعها باليد‬ ‫‪ .‬وتتك ون الش فاطة م ن وع اء زج اجي ب ه‬ ‫س دادة م ن المط اط أو الفل ين تنف ذ منه ا‬ ‫أنبوبتان من الزجاج أو النحاس ‪ ,‬توضع األنبوبة القصيرة على الحشرات عن طريق الش فط ‪ ,‬ويمن ع دخ ول‬ ‫الحشرات التي جمعت داخل الشفاطة إلى الفم وجود قطعة من الشاش حول فتحة األنبوبة ‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪50‬‬

‫‪ .5‬المصالد‪:‬‬ ‫تس تخدم المص ائد بجمي ع أنواعه ا لتجمي ع العدي د م ن أن واع الحش رات وم ن أه م أنواعه ا‪:‬‬ ‫أ‪ .‬المصالد الضولية‪:‬‬ ‫تستخدم هذه الطريقة ف ي ص يد الحش رات الت ي ي زداد نش اطها ل يال وتترك ب المص ائد الض وئية‪ .‬م ن مص در‬ ‫ض وئي ( مص باح كهرب ائي ) ‪ 200‬وات وقم ع مع دني أمل س الج دران ‪ ,‬يوج د أس فله مباش رة إن اء تجمي ع‬ ‫يحتوي على مادة حافظة ( ‪ %70‬كحول )‪.‬‬ ‫ب‪ .‬المصالد الالصقة‪:‬‬ ‫تستخدم هذه الطريقة في جمع الحشرات النشطة ليال ونهارا ‪ ,‬وهي عبارة ع ن‬ ‫اسطوانة أو أنبوبة زجاجية مغط اة بم ادة الص قة ‪ ,‬وتوض ع عل ى دعام ة عل ى‬ ‫االرتفاع المطلوب ويتم دراسة وحصر والتعرف على الحشرات الملتصقة‪.‬‬ ‫ج‪ .‬المصالد المالــــية‪:‬‬ ‫تستخدم هذه الطريقة لجمع أنواع كثيرة من الحشرات مثل المــن والذباب ‪ ,‬وهي عبارة عن أوان مطلية م ن‬ ‫الداخل باللون األصفر أو األبيض لجذب الحشرات إليها‪ ,‬دائرية أو مستطيلة الشكل من الزجاج أو اللدائن أو‬ ‫المعدن وتعبأ اواني الجمع بالماء المضاف إليه قليل م ن الص ابون فيعم ل عل ى ن زول الحش رات م ن الس طح‬ ‫إل ى ق اع اإلن اء ‪ ,‬كم ا يض اف أيض ا ‪ %5‬م ن الفورم الين لحف ظ الحش رات م ن ال تعفن‪.‬‬ ‫توض ع المص ائد عل ى ارتفاع ات مختلف ة ‪ ,‬وينص ح بمالحظته ا باس تمرار حت ى ال يظه ر الم اء أثن اء س قوط‬ ‫األمطار أو يتبخر نتيجة لحرارة الشمس العالية ‪.‬ولزي ادة كف اءة ه ذه المص ائد يوض ع ب داخل اإلن اء ل وح م ن‬ ‫اج أو ص‬

‫الزج‬

‫فيحتان م‬

‫ن االلومني‬

‫وم ف‬

‫ي وض‬

‫د‬

‫ع متعام‬

‫د‪.‬المصالد المستوردة‪:‬‬ ‫تستخدم هذه الطريقة في تجمي ع الحش رات األرض ية مث ل الخن افس‪ ,‬النم ل وصراص ير الحق ل وتترك ب ه ذه‬ ‫المص ائد م ن إن اء زج اجي أو م ن ل دائن ذات فوه ة واس عة ويغم ر اإلن اء ف ي حف رة تح ت س طح الترب ة‪.‬‬ ‫وعن‬

‫د هط‬

‫ول األمط‬

‫ار يوض‬

‫ع غط‬

‫اء لمن‬

‫ع دخ‬

‫ول الم‬

‫اء إل‬

‫ى المص‬

‫يدة‬

‫‪.6‬الغربلة‪:‬‬ ‫يستخدم في هذه الطريقة بعض انواع م ن المناخ ل او قم ع ب ارليز ‪ .‬والتجمي ع باس تخدام طريق ة المناخ ل ي تم‬ ‫بجمع الحشرات الصغيرة التي توجد على بقايا النباتات واالوراق المتساقطة وكذلك الحش رات الموج ودة م ع‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪51‬‬

‫المواد الغذائية والحبوب المخزونة ‪ .‬ويتم غربلة هذه المواد المختلطة بوضع كمية منه ا ف ي المنخ ل وتغرب ل‬ ‫ببطء على قطع ة م ن القم اش او ال ورق المق وى االب يض وتجم ع الحش رات المتس اقطة بواس طة الش فاطة او‬ ‫فرشة مبللة‪.‬‬ ‫وفي حالة استعمال قمع بارليز توضع العينة المحتوية على الحشرات وبقايا النبات ات عل ى حام ل منخل ي ف ي‬ ‫قم ع كبي ر م ن الزج اج يوض ع اس فله إن اء يحت وي عل ى ‪ %70‬كح ول لتس قط في ه الحش رات ‪ ,‬ويعل و القم ع‬ ‫مصباح كهربائي لتسليط الضوء والحرارة على بعد مناسب من العين ة تجع ل الحش رات تتح رك اس فل القم ع‬ ‫وتسقط في إناء التجميع‪.‬‬

‫ثانيا ‪ :‬قتل الحشرات‪:‬‬ ‫الخط وة الت ي تل ي تجمي ع الحش رات الحي ة ‪ ,‬وي تم فيه ا‬ ‫وض ع الحش رات الت ي جمع ت ف ي زجاج ات القت ل‬ ‫الخاص ة‪ .‬وه ذه الزجاج ات ذات أحج ام مختلف ة وفوه ة‬ ‫واس عة وغط اء محك م ‪ ,‬ويوض ع داخله ا م ادة كيميائي ة‬ ‫لقتل الحشرات‪.‬‬ ‫ومن اهم المواد الكيميائية المستخدمة ف ي قت ل الحش رات‬ ‫سيانور الصوديوم أو البوتاسيوم ‪ ,‬الكلورو فورم ‪ ,‬راب ع‬ ‫كلوريد الكربون ‪ ,‬وخالت اإليثايل ‪ .‬وتعتبر كل من مادتي سيانور الصوديوم والبوتاسيوم من الم واد الس امة‬ ‫جدا‪.‬‬

‫وتجهز زجاجة قتل الحشرات كاآلتي‪:‬‬ ‫‪ ‬احضار زجاجة قتل ذات فوهة واسعة نظيفة جافة‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪52‬‬

‫‪ ‬توض ع طبق ة م ن مس حوق س يانور الص وديوم او البوتاس يوم ف ي ق اع الزجاج ة‪.‬‬ ‫يغطي السيانور بطبقة من الجبس الجاف ‪ ,‬تليها طبقة اخرى من الجبس المبلل‪.‬‬ ‫‪ ‬تترك الزجاجة دون غطاء في مكان مالئم حتى يجف الجبس لمدة يوم او يومين ‪ ,‬ث م يحك م الغط اء‬ ‫وتصبح جاهزة لالستعمال بعد مدة تتراوح بين ‪ 48-24‬ساعة‪.‬‬ ‫‪ ‬يل ف ش ريط الص ق ح ول ق اع الزجاج ة م ن الخ ارج لمن ع تبعث ر الم ادة الكيميائي ة ف ي حال ة كس ر‬ ‫الزجاجة ‪ ,‬كما تلصق عالمة (خطر) على الزجاجة من الخارج‪.‬‬ ‫اما بالنسبة للمواد الكيميائية االخرى ( الكلوروف ورم ‪ ,‬راب ع كلوري د الكرب ون ‪ ,‬وخ الت اإليثاي ل ) فه ي أق ل‬ ‫سمية من مادة السيانور ‪ ,‬وتجهز زجاجة القتل لهذه المواد بوض ع قطع ة قط ن مبلل ة بغح دى ه ذه الم واد ف ي‬ ‫ق اع الزجاج ة كم ا يج ب إض افة الم واد المس تعملة ك ل ‪ 24‬س اعة ف ي حال ة تك رار اس تخدامها للحف اظ عل ى‬ ‫فعاليتها لمدة طويلة ‪ .‬وتعتبر مادة اإليثاي ل غي ر ض ارة باالنس ان ‪ ,‬ام ا م ادتي الكل ورو ف ورم وراب ع كلوري د‬ ‫الكربون فهي من المواد السامة لإلنسان وينصح بعدم استنشاقها‪.‬‬

‫ثالثا ‪ :‬حفظ الحشرات‪:‬‬ ‫توج د ط رق مختلف ة لحف ظ وتخ زين الحش رات لفت رة طويل ة م ن ال زمن أهمه ا‪:‬‬

‫اوال‪ :‬التدبيس والتجفيف (الحفظ الجاف )‪.‬‬ ‫يفضل استخدام هذه الطريقة لحفظ الحشرات داخل صناديق وأدراج الحشرات ‪ .‬وتستخدم هذه الطريق ة ع ادة‬ ‫للحش رات ذات الجلي د الص لب حت ى تج ف وه ي ف ي حال ة جي دة ‪ .‬ث م تحف ظ العين ات ف ي ص ناديق خاص ة‬ ‫مصنوعة من الخشب ذات غطاء زجاجي محك م وق اع فلين ي ‪ ,‬ويك ون مق اس الص ندوق ع ادة ‪64*30*23‬‬ ‫س م‪ ,‬وترت ب النم اذ ج الحش رية داخ ل ه ذه الص ناديق غالب ا وفق ا للترتي ب التقس يمي للرت ب والع ائالت‪.‬‬ ‫ولحماية النماذج الحشرية من التلف بواسطة الحشرات األخرى مثل النمل وخنافس الجلود‪ ,‬توضع في زوايا‬ ‫الصندوق كمية من النفتالين على هيئة كرات أو على هيئة مسحوق في صرة من الشاش ‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪53‬‬

‫وتاااااااااااااااتم عملياااااااااااااااة التااااااااااااااادبيس والتجفياااااااااااااااف فاااااااااااااااي المراحااااااااااااااال اآلتياااااااااااااااة‪:‬‬ ‫أ‪ .‬التدبيس المباشر‪:‬‬ ‫تس تخدم دب ابيس م ن ف الذ غي ر قاب ل للص دأ ذات احج ام مختلف ة ‪ ,‬وبع د قت ل‬ ‫الحشرة مباشرة وقبل جفافها يغرز الدبوس عادة عموديا في منطقة الص در ‪,‬‬ ‫بحي ث يت رك ح والي ‪ 1/4‬ط ول ال دبوس أعل ى جس م الحش رة ‪ .‬وف ي حال ة‬ ‫الحشرات من رتبة غمدية األجنحة يغرز الدبوس اماما في الغمد األيم ن‪ ,‬ام ا‬ ‫الحشرات نصفية االجنحة فيجب ان يمر الدبوس بالص فيحة الوس طى المثلث ة‬ ‫للحلقة الصدرية الثانية‪ .‬كما توضع أسفل الدبوس قصاصة او قصاصتين من‬ ‫الورق لكتابة المعلومات الخاصة‪ .‬والمعلومات الهامة التي يجب كتابتها على‬ ‫قصاصات الورق تشمل ارتي ‪:‬‬ ‫اسم الحشرة‬ ‫تاريو التجميع‬ ‫العائل (المحصول )‬ ‫اسم الجامع‬ ‫مكان التجميع‬ ‫ب‪ .‬التحميل على قصاصة ورقية‪:‬‬ ‫تجهز الحشرات الص غيرة الحج م كالحش رات المتطفل ة وبع ض الحش رات غش ائية االجنح ة وثنائي ة األجنح ة‬ ‫ونصفية األجنحة ‪ ,‬بهذه الطريقة حيث تلصق الحشرة على قصاصة ورق بيضاء بغراء شفاف اوال ثم يغرز‬ ‫الدبوس في موض ع مناس ف ف ي قصاص ة ال ورق يقاب ل موض ع الحش رة ‪ .‬وتك ون قصاص ة ال ورق مثلث ة او‬ ‫مس تطيلة الش كل كم ا توض ع قصاص ة ورقي ة اخ رى اس فل العين ة لكتاب ة المعلوم ات الخاص ة بالحش رة‪.‬‬ ‫ج‪.‬التحميل المزدوج‪:‬‬ ‫تستخدم هذه الطريقة للحشرات الص غيرة ج دا ‪ ,‬حي ث يغ رز دب وس رفي ع ف ي ص در الحش رة ث م عل ى ط رف‬ ‫قطعة من الفلين ويحمل طرفها ارخر على الدبوس العادي ‪ .‬توضع قصاصة او قصاصتين من الورق اس قل‬ ‫العينة لكتابة المعلومات الخاصة بالحشرة ‪.‬‬ ‫د‪ .‬التصليب (الفرد)‪:‬‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪54‬‬

‫في هذه العملية تفرد األجنحة واألرجل وق رون االستش عار ف ي وض ع افق ي م ع مس توى جس م الحش رة حت ى‬ ‫تج‬

‫ف هيييييييييييييييييصف الزواهييييييييييييييييين فيييييييييييييييييي الكيييييييييييييييييمل الطبي يييييييييييييييييي للنكيييييييييييييييييرة‪.‬‬

‫و تط الفرد او الصلب ‪:‬ا ت ما الص ‪:‬ة التي اتركب مين شير نتين مين الخكيب إ يناهما متنركية واألايرﻯ‬ ‫ثا‪:‬تة علا قاعنة خشبية بينهما مجرى يتناسب مع جسم الحشرة‪.‬‬ ‫توض ع الحش رة الم راد ص لبها ( فراش ة م ثال ) حي ث يك ون‬ ‫كل من الصدر والبطن في مجرى الصالبة ‪ ,‬يغ رز ال دبوس‬ ‫ف ي ص در الحش رة وتثب ت نهايت ه بمج رى الص البة بحي ث‬ ‫يك ون الس طح العل وي لجس م الحش رة وس طحي ش ريحتي‬ ‫الص البة ف ي مس توى واح د ‪ .‬تف رد االجنح ة عل ى ش ريحتي‬ ‫الصالبة من الج انبين وتثب ت بواس طة ش ريطين م ن ال ورق‬ ‫يثبت ان بال دبابيس وتوج ه زوائ د الحش رة األخ رى (األرج ل‬ ‫وقرون االستشعار) في وض عها الطبيع ي كم ا ف ي ‪ ,‬وتت رك‬ ‫الحشرة على الصالبة لبضعة ايام لتجف بعي دة ع ن هجم ات‬ ‫النمل والحشرات األخرى‪ ,‬ثم تنقل إلى صندوق الحفظ‪.‬‬

‫ثانيا‪:‬الحفظ في محاليل‪:‬‬ ‫تستخدم هذه الطريقة في حفظ الحشرات التي يصعب حفظها جافة ‪ ,‬او للحش رات الت ي ت م تجميعه ا بواس طة‬ ‫المصائد الضوئية باعداد كبيرة وتحفظ في مادة حافظة تتكون م ن ‪ %70‬كح ول م ع قط رات م ن الجلس رين‬ ‫لمنع تصلب زوائد الحشرة ‪ .‬توضع ورقة المعلومات الخاصة بالعين ة مكتوب ة بقل م الرص اص داخ ل زجاج ة‬ ‫الحفظ وتحكم الزجاجة بغطاء محكم مع إضافة الكحول من وقت رخر‪.‬‬

‫ثالثا‪:‬الحفظ المؤقت‪:‬‬ ‫تحفظ الحشرات مؤقتا بين طبقتين من قطن صوفي وتلف أغلفة من الورق مع كمية من النفت الين او قط رات‬ ‫من مادة رابع كلوريد الكربون‪ ,‬وتجهز اغلفة الورق بأخذ فطع ة مس تطيلة م ن ال ورق وتط وي م ن زاويت ين‬ ‫متقابلتين على هيئة ظرف‪ .‬وتكتب البيان ات الخاص ة بالعين ة عل ى الغ الف وتوض ع االغلف ة ف ي ص ناديق أو‬ ‫إدراج لحفظها لحين استعمالها‪.‬‬

‫رابعا‪:‬الحفظ بواسطة الشرالح المجهرية‪:‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪55‬‬

‫تستخدم هذه الطريقة في حفظ الحشرات الصغيرة جدا كالقمل والبراغي ث والم ن والت ريس ‪ .‬او لحف ظ بع ض‬ ‫االجزاء او الزوائد في جسم الحشرة مثل االرجل وقرون االستشعار واالجنحة واجزاء الفم والثغور التنفسية‬ ‫والقصبات الهوائية وغيرها‪.‬‬ ‫يااااااااااااااتم تحضااااااااااااااير الشاااااااااااااارالح المجهريااااااااااااااة باتباااااااااااااااع الخطااااااااااااااوات التاليااااااااااااااة‪:‬‬ ‫أ‪ .‬التفكـــك‪:‬‬ ‫تغل ى العين ات (أج زاء الحش رة) ف ي محل ول ‪ %5‬او ‪ %15‬م ن هيدروكس يد الص وديوم (ص ودا كاوي ة) او‬ ‫هيدروكس يد البوتاس يوم (البوت اس ) ‪ ,‬وتعتم د م دة الغلي ان عل ى م دى ص البة ه ذه االج زاء‬ ‫اما بالنسبة لتحضير شرائح مجهرية لحشرة كاملة رهيفة مثل السمك الفضي او البعوض ‪ ,‬تنق ع الحش رة ف ي‬ ‫محل ول هيدروكس يد الص وديوم او البوتاس يوم الب ارد او ال داف لم دة ‪ 20‬دقيق ة ‪ .‬تنق ل العين ة م ن المحل ول‬ ‫وتوضع في ص حن ب ه م اء للغس ل وغزال ة الش وائب المتفكك ة بعناي ة ‪ ,‬ث م تنق ل العين ة م رة اخ رى إل ى م اء‬ ‫يحتوي على قليل من حامض الخليك الثلجي‪.‬‬ ‫ب‪ .‬إزالة الماء‪:‬‬ ‫تتم عملية إزالة الماء من العينة بنقلها من الماء الحامض ووضعها في تركيزات تص اعدية م ن الكح ول‪ ,‬م ع‬ ‫مراعاة تسلسل التركيزات والزمن المحدد لكل تركيز كارتي‬ ‫‪ .1‬كحول ‪ %30‬لمدة ‪ 10-5‬دقائق‬

‫‪ .2‬كحول ‪ %50‬لمدة ‪ 10 - 8‬دقائق‬

‫‪ .3‬كحول ‪ %70‬لمدة ‪ 15 - 10‬دقيقه‬

‫‪ .4‬كحول ‪ %85‬لمدة ‪ 20 - 15‬دقيقه‬

‫‪ .5‬كحول ‪ %95‬لمدة ‪ 20 - 15‬دقيقه‬

‫‪ .6‬كحول ‪ %100‬لمدة ‪ 30 - 20‬دقيقه‬

‫وينصح عند نقل الع ينه من تركيز كحولي الى اخر بالضغط بحذر على العينه بواسطة ملقط غير حاد ليتخلل‬ ‫الكحول انسجة العينه وفي حالة التحضير المجهري للحشرات الدقيقة او الرهيف ة يج ب تعريض ها لتركي زات‬ ‫الكحول بزمن اقل‪.‬‬ ‫ج‪ .‬الترويق‬ ‫يستعمل الزيلول في عملية الشفافية كما يستخدم البنزين وزيت القرنفل لنفس الغرض ‪ .‬تجفف العينات كبي رة‬ ‫الحجم من الكحول المطل ق بوض عها عل ى ورق ة ترش يح ث م تنق ل مباش رة ال ى الزيل ول م ن ‪ 20 - 15‬دقيق ة‬ ‫لتصبح رائقة او شفافة بعض الشي ويجب اال تبقى العينه لمدة طويله في محلول الزيلول قبل إعدادها حتى ال‬ ‫تتكسر أجزاؤها‪.‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪56‬‬

‫د‪ .‬إعداد العينة على الشريحة‪:‬‬ ‫بعد عملية الترويق تنظف الشريحة الزجايجية جيدا ب الكحول‬ ‫المطلق ويوضع في منتصفها كمية قليله من صمغ كندا بلس م‬ ‫عل ى العين ة وتغط ى بم اء الش ريحة الزج اجي بوض ع مائ ل‬ ‫بمساعدة إب رة لتجن ب تك وين فقاع ات هوائي ة ف ي العين ة بع د‬ ‫ذل ك تلص ق بطرف ي الش ريحة بطاق ة أو بط اقتين وتكت ب‬ ‫البيان ات أالزم ة عل ى ك ل بطاق ة ب الحبر الهن دي ث م تجف ف‬ ‫وتحفظ في علب أو إدراج خاصة بالشرائح‪.‬‬ ‫‪http://lab-plant.blogspot.com.eg/2014/02/blog-post.html‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪57‬‬

‫التدريب العملي السابع‬ ‫‪ .1‬تقسيم الطالب الي مجاميع بحيث كل مجموعة تقوم بعمل نموذج للمعشبة الحيوانية‪.‬‬ ‫‪ .2‬وعرض مجهود المجموعة في صورة مجلة تعرض خطوات عمل المجموعة‪.‬‬ ‫جــــــدول المتابعة‬ ‫رقم المجموعة‪:‬‬ ‫اسماء افراد المجموعة‪:‬‬ ‫توزيع المهام الداخلية‪:‬‬ ‫المدة المقترحه النهاء المعشبة‪:‬‬ ‫تاريخ تقديم المشروع‪:‬‬ ‫مقدم المشروع‪:‬‬ ‫عدد الدرجات‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪58‬‬

‫ثالثا‪ :‬تقنيات حفظ االصول الوراثية عن‬ ‫طريق وسالل التكنولوجيا الحيوية وهي‬ ‫"زراعة االنسجة"‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪59‬‬

‫الدرس العملي الثامن‬ ‫الحفظ المعملي لألصول الوراثية‬ ‫"بواسطة زراعة االنسجة"‬ ‫االهداف العامة‬ ‫هو تعريف الطالب علي احدي تقنيات حفظ االصول الوراثية وهي زراعة االنسجة‪.‬‬ ‫االهداف الخاصة‬ ‫ان يقوم بالتعريف علي ادوات زراعة االنسجة واستخدامها في حفظ االصول الوراثية‪.‬‬

‫تعريف زراعة األنسجة النباتية‪:‬‬ ‫هي عملي ة زراع ة خلي ة أو نس يج أو عض و نب اتي داخ ل المعم ل ف ي وس ط غ ذائي و تح ت ظ روف خاص ة‬ ‫ومالئمة لنمو النسيج النباتي‪.‬ومن منطلق هذا التعريف يسمي هذا النوع من الزراعة باألسماء التالية‪:‬‬ ‫‪ .1‬زراعة الخاليا النباتية ‪Plant Cell Culture‬‬ ‫‪ .2‬زراعة األنسجة النباتية ‪Plant Tissue Culture‬‬ ‫‪ .3‬زراعة األعضاء النباتية ‪Plant Organ Culture‬‬ ‫ماهو الوسط العذالي‪:‬‬ ‫هو وسط صناعي يحضر في المعمل حسب نوع النبات لينمو فيه وبعض معامل زراعة األنسجة تشتريه‬ ‫محضر من الشركات ولكنه يكون ذات تكلفة عالية‪ ،‬وهو يتكون من‪:‬‬ ‫‪ .1‬العناصر الغذائية الكبري‬

‫‪ .2‬العناصر الغذائية الصغري‬

‫‪ .3‬مركبات الحديد‬

‫‪ .4‬الفيتامينات‬

‫‪ .5‬هرمونات النمو‬

‫‪ .6‬وكربوهيدرات (سكروز)‬

‫‪ .7‬تعديل الرقم الهيدروجيني‪PH‬‬

‫‪ .8‬األجار‬

‫‪ .9‬الفحم المنشط (يستخدم في بعض األوساط وهو يعمل علي إزالة المركبات الفينولية وتمنع التاثير‬ ‫السلبي علي اإلنسجة)‪.‬‬

‫ماهي اهداف استخدام زراعة االنسجة كوسية للحفظ المعملي لألصول الوراثية ‪:‬‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪60‬‬

‫تعتبر طريقة الحفظ المعملي أفضل الطرق للمحافظة على المادة النباتية التي تتك اثر خض ريا ‪ ،‬األن واع ذات‬ ‫البذور وكذلك األنواع المهندسة وراثيا ومن أهم مميزات هذه الطريقة ‪:‬‬ ‫‪ o‬الحاجة إلى مساحة صغيرة للمحافظة على أعداد كبيرة من النباتات المتكاثرة خضريا ‪.‬‬ ‫‪ o‬الحفاظ على المادة الوراثية بعيدا عن مصادر اإلصابة المرضية والحشرية ‪.‬‬ ‫‪ o‬الحماية من الظروف المناخية غير المناسبة‬ ‫‪ o‬سهولة اإلكثار النتاج أعداد كبيرة من النباتات عند الحاجة إليها في أي وقت ‪.‬‬ ‫‪ o‬تقلي ل العوائ ق واإلض رار الت ي ق د تتس بب بواس طة نظ ام الحج ر الزراع ي حي ث أن ه ذه األن واع‬ ‫موجودة وتنقل تحت ظروف تعقيم وتطهير كاملة ‪.‬‬

‫وسااوف نتناااول فقااط تطبيقااات زراعااة الخاليااا واألنسااجة فااي عمليااة المحافظااة علااى األصااول‬ ‫الوراثية‪.‬‬ ‫صور األصول الوراثية المحفوظة ‪Materials Used For Conservation :‬‬ ‫المواد الوراثية التي تحفظ في المعمل قد تكون بروتو بالست معزول – خالي ا م ن م زارع س ائلة – م زارع‬ ‫كالوس ‪ ،‬قمم مرستيمية ‪ ،‬وحدات تكاثرية في مراحل مختلفة من التكشف ونباتات كاملة‪.‬‬ ‫حفظ المادة الوراثية عان طرياق إعاادة الزراعاة ‪ Subculture‬علاى فتارات متقارباة لاه بعا‬

‫العياوب‬

‫منها‪:‬‬ ‫‪ .1‬خطورة فقد هذه المواد نتيجة الخطأ البشري في الحفاظ على هذه األنسجة داخل المعمل أو تعرض ها‬ ‫لمسببات األمراض ‪.‬‬ ‫‪ .2‬أيضا عدم الثبات الوراثي والذي يظهر كنتيجة لتكرار الزراعة وظهر هذا العيب بص فة أساس ية ف ي‬ ‫الخاليا واألنسجة غير التكشفية (كالوس) وتتراوح التغيرات الوراثية م ا ب ين إض افة أو نق ص تت ابع‬ ‫جينى ‪.‬‬

‫لتفادي مشاكل ‪:subculture‬‬ ‫وقد وجد أن المحافظة على المادة الوراثية في صورة نباتات كاملة وم ن ث م إكثاره ا بواس طة اس تخدام قط ع‬ ‫الس الميات (بط اطس) أو التفص يص (م وز) يقل ل م ن فرص ة التع رض لع دم الثب ات ال وراثي وه و أح د‬ ‫المتطلبات األساسي ة في الحفاظ على األصول الوراثية أيضا تقليل عملية إعادة الزراعة بأقل صورة ممكنة ‪.‬‬ ‫وهذا يمكن أن يتم بواس طة ع دة ط رق منه ا التخ زين الب ارد وأيض ا تح ت ض غط ج وي م نخفض وأكس جين‬ ‫منخفض وأيضا يمكن الحفظ بالتجميد‪.‬‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪61‬‬

‫وعموم ا ال يمك ن حف ظ الم ادة النباتي ة عل ى درج ة الح رارة العادي ة للنم و ألنه ا تس تمر بنش اطها مم ا ي ؤدي‬ ‫لتدهورها ويتم المحافظة عليها إما بتخفيض نش اطها ونموه ا إل ى الح د األدن ى وب ذلك يمك ن حفظه ا لم دة ق د‬ ‫تصل من عدة شهور إلى سنة أو اثنين أو يتم وقف نموها تماما عن طريق تجميدها بالنيتروجين السائل‪.‬‬

‫ومن هنا تنقسم طرق الحفظ المعملي إلى طريقتين حسب مدة الحفظ‪:‬‬ ‫(‪ )1‬حفظ األنسجة النباتية لمدة قصيرة لمتوسطة‬

‫(‪ )2‬حفظ األنسجة النباتية لمدة طويلة‬

‫‪Short to medium term storage‬‬

‫‪Long Term Storage‬‬

‫أوال ‪ :‬حفظ األنسجة النباتية لمدة قصيرة او متوسطة ‪:‬‬ ‫يتم حفظ األنسجة النباتية لفترة زمنية تستمر من عدة أشهر ألكثر من سنة عن طريق تقليل نمو األنسجة للحد‬ ‫األدنى ويتم ذلك بعدة طرق ‪:‬‬ ‫‪ -1‬التحكم في درجة الحرارة واإلضاءة ‪Control of temperature and lighting‬‬ ‫وفي هذه الطريقة تقلل درجة الحرارة عن الح د األمث ل للنم و وك ذلك تقل ل ش دة اإلض اءة أو حت ى التحض ين‬ ‫والحفظ في ظروف اإلظالم التام وبهذا يتم تقليل نمو األنسجة وتطول فترة بقائها داخل أوعية الزراعة ‪(Al‬‬ ‫)‪Maari,1986‬‬ ‫وتختلف درجة حرارة الحفظ باختالف النوع النباتي فنباتات المناطق االستوائية وشبه االستوائية تحفظ عل ى‬ ‫درجات حرارة مرتفعة نسبيا ‪ 20-14‬م‬ ‫مثال ‪ :‬حفظ األجنة الخضرية لنخيل البلح على درجة ‪18‬م لمدة ‪ 10‬أشهر )‪ ) Hassan 2002‬وكذلك‬ ‫حفااظ المااوز صاانف ‪ William’s‬لماادة ساانة علااى درجااة ‪º15‬م ) ‪ (Hassan,1996‬بينمااا نبااات‬ ‫الفراولة أمكن حفظه على درجة حرارة ‪ º4‬م والعنب على درجة ‪º9‬م ( نباتات مناطق معتدلة)‬ ‫‪ -2‬تعديل بيلة الزراعة ‪Modification of culture medium‬‬ ‫ويشمل هذا التعديل ما يلي ‪:‬‬

‫أ‪ -‬تقليل أو زيادة تركيز السكر في البيلة‬ ‫‪Decreasing or increasing sugar concentration‬‬ ‫تقليل او انعدام مستوي السكروز في البيلة‬

‫زيادة السكروز في البيلة‬

‫استخدام تركيز السكروز كمصدر للطاقة بنسبة قليلة أيض ا زيااادة السااكروز فااي البيلااة يعم ل عل ى رف ع‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪62‬‬

‫أو حتى غياب السكر يؤدي لتقليل النمو للحد األدنى‬

‫الضغط األسموزي وتقليل نمو النبات‬

‫مثال ‪ - :‬أمكن تخزين وحفظ زراعات لنبات‬

‫مثااال ‪ - :‬حف ظ نب ات الطم اطم بيئ ة تحت وي عل ى‬

‫البن ‪ Coffee‬لمدة سنتين في البيئة خالية من السكر ‪ %5‬سكروز‬ ‫مع تقليل قوة األمالح إلى النصف في وجود‬ ‫اإلضاءة‪.‬‬ ‫ب‪ -‬تقليل تركيز المغذيات المعدنية‬ ‫‪Decreasing the supply of inorganic nutrients‬‬ ‫في هذه الطريقة تقلل قوة األمالح الكاملة إلى ‪ 4/1 ، 2/1 ، 4/3‬أو حسب النبات فيقل النمو‬ ‫مثال ‪ :‬حفظ القرنف ل ف ي بيئ ة تحت وي عل ى ‪ 4/1‬أو ‪ 2/1‬ق وة أم الح موراش يجي وس كوج م ع زي ادة نس بة‬ ‫الس كروز ل ـ ‪ %5‬وك ذلك أمك ن حف ظ زراع ات العن ب ف ي بيئ ة تحت وي عل ى ‪ 4/1‬تركي ز أم الح نت رات‬ ‫األمونيوم لبيئة موراشيجي وسكوج (‪.)Murashige and Skoog medium‬‬ ‫حـ ‪ -‬تعديل القوة األسموزية لبيلة الزراعة‬ ‫‪Changing the osmotic potential‬‬ ‫وذلك بإضافة السكريات الكحولية مثل الس وربيتول ‪ ،‬الم انيتول أو زي ادة تركي ز الس كروز ف ي البيئ ة وك ذلك‬ ‫استخدام الجليسرول‪.‬‬ ‫‪ -3‬استخدام منظمات النمو ‪The use of growth regulators‬‬ ‫م ن ه ذه األن واع ح امض األبسيس ك )‪ ، (ABA‬سيكوس يل )‪( Paclobutrazol، (CCC‬ب اكلوبوترازول‬ ‫هي مادة كيميائية تستعمل كمثبط لنمو النبات وتعمل بعكس هرمون الجبرلين‪ .‬تؤثر عل ى النب ات ع ن طري ق‬ ‫من ع إنت اج الجب رلين‪ ،‬فت ؤدي إل ى إبط اء تثبي ت الكرب ون (التمثي ل الض وئي) ونم و رواح ب قص يرة فيص بح‬ ‫النب ات أقص ر وتخ ف وتي رة نم وه‪ .‬يس تعمل ه ذا المرك ب لزي ادة تحم ل النب ات للجف اف ع ن طري ق‬ ‫تقليل النتح واالحتياجات المائية)‪.‬‬ ‫وينحصر عمل هذه المركبات في األتي‪:‬‬ ‫‪ ‬سكون األعضاء النباتية‬ ‫‪ ‬تقليل البناء الخلوي‬ ‫‪ ‬منع انقسام الخاليا‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪63‬‬

‫‪ ‬تقليل حساسية الخاليا لدرجة الحرارة المنخفضة وبذا يمكن حفظ األنسجة النباتية لمدة طويلة ‪.‬‬ ‫‪ -4‬الحفظ تحت ضغط وأكسجين منخف‬

‫‪Low pressure and low - oxygen‬‬

‫حي ث ي ؤدي تقلي ل الض غط الج وي ح ول النبات ات لتقلي ل النم و وك ذلك تقلي ل األكس جين باس تخدام الزي وت‬ ‫المعدنية بإضافتها على سطح بيئة نمو النباتات ي ؤدي لمن ع تب ادل وانتش ار الغ ازات مم ا يس مح بتقلي ل النم و‬ ‫للحد األدنى‪.‬‬ ‫‪ -5‬يمكن استخدام أكثر من طريقة من الطرق سالفة الذكر معا لزيادة مدة الحفظ ‪.‬‬ ‫ثانيا ‪ :‬الحفظ لفترات طويلة ‪Long term storage (Cryopreservation ) :‬‬ ‫يتم حفظ األنسجة النباتية لفترات طويلة عن طريق استخدام النيتروجين السائل‪ Liquid nitrogen‬وفي ‪(-‬‬ ‫)‪ . 196º c‬هذه الطريقة يتم وقف كافة العمليات الحيوية ونشاط النمو نهائيا ادخلت هذه التقنية لإلستخدام في‬ ‫تجميد النباتات منذ عام ‪ 1975‬وقد استخدمت هذه الطريقة في عدد كبير م ن األن واع النباتي ة مث ل البس لة –‬ ‫القم ح – ج وز الهن د – نخي ل الزي ت ونخي ل ال بلح )‪ .(Bajaj, 1987‬ويحت اج العم ل ف ي ه ذا المج ال إل ى‬ ‫مهارات خاصة البد من توافرها في القائمين على العمل ومن الضروري حماية الخاليا المجمدة م ن ج روح‬ ‫التجميد أثناء عملية التجميد نفسها وحمايتها من تكون بلورات الثلج داخل العضو حي ث تك ون ه ذه البل ورات‬ ‫يؤدي لفقدان الحيوية‪.‬‬

‫وتشتمل عملية الحفظ بالتجميد على الخطوات التالية‪:‬‬ ‫أ‪ -‬مرحلة تمهيدية ‪Pretreatment stage‬‬ ‫في هذه المرحلة يتم زراعة األنسجة النباتي ة الم راد تجمي دها ب النيتروجين عل ى محل ول مغ ذى يحت وى عل ى‬ ‫المحلول المستخدم في إكثار األنسجة نفسها مضافا له بعض المواد التي تعمل على رف ع الض غط األس موزي‬ ‫لبيئة الزراعة ويحدث بلزمة للخاليا بخروج جزء م ن الم اء إل ى خ ارج الخلي ة فتص بح أكث ر مقاوم ة لعملي ة‬ ‫التجمد من هذه المواد السكريات مثل السكروز والجلوكوز بتراكيز مرتفعة ‪.‬‬ ‫‪ ‬السكريات الكحولية مثل السوربيتول والمانيتول‬ ‫‪ ‬البولي إثيلين جليكول )‪Polyethlelene glycol (PEG‬‬ ‫‪ ‬بعض األحماض األمينية مثل ‪Proline‬‬ ‫‪ ‬كذلك قد تضاف مادة )‪Dimethyl sulfoxide ( DMSO‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪64‬‬

‫وطبيعة عم ل ه ذه الم ادة ي تلخص ف ي اختراقه ا للخالي ا بس هولة وس رعة نفاذيته ا إل ى ال داخل وب ذلك تحم ى‬ ‫الغش اء البالزم ي م ن التش قق أثن اء عملي ة التجمي د‪ .‬ويمك ن اس تخدام م زيج م ن ع دة م واد حافظ ة مث ل‬ ‫‪ %8 + PEG %10‬جلوكوز ‪ DMSO%10 +‬والذي استخدم مع نخيل البلح صنف مدجول‬ ‫ب‪ -‬مرحلة التجميد ‪Freezing‬‬ ‫توضع الخاليا ف ي الوس ط الغ ذائي م ع ت وفر م ادة للحماي ة م ن التجمي د ث م تنق ل إل ى أنبوب ة م ن م ادة الب ولي‬ ‫برولين مغطاة ثم تجمد بإحدى الطرق التالية ‪-:‬‬ ‫‪-1‬‬

‫طريقة التجميد البطئ ‪Slow Freezing Method‬‬

‫تجمد الخاليا بطريقة بطيئة على درجات حرارة منخفضة بسرعة تت راوح م ا ب ين ‪º4–5‬م‪ /‬دقيق ة بداي ة م ن‬ ‫الصفر المئوي حتى تصل إلى – ‪º100‬م ثم تنقل بعد ذلك إلى النيتروجين السائل‪.‬‬ ‫‪-2‬‬

‫طريقة التجميد السريع ‪Rapid Freezing Method‬‬

‫وت تلخص ف ي أخ ذ الوع اء المحت وى عل ى الم ادة النباتي ة ووض عه مباش رة ف ي النيت روجين الس ائل وكمي ة‬ ‫المحتوى المائي للعينة ه ي أح د العوام ل المح ددة الس تخدام أي طريق ة م ن ط رق التجمي د س واء الس ريع أو‬ ‫البط فالعينات التي تحتوي عل ى كمي ة قليل ة م ن الم اء مناس بة أكث ر للتجمي د الس ريع مث ل الب راعم الطرفي ة‬ ‫لنبات الفراولة ويعاب على طريقة التجميد السريع فقدان بعض الخالي ا النباتي ة لحيويته ا ول ذا يج ب اس تخدام‬ ‫طرقة التجميد التدريجي‪.‬‬ ‫‪ -3‬طريقة التجميد التدريجي ‪Stop-wise Freezing Method‬‬ ‫وفيها تدمج الطريقتين السابقتين حي ث تب رد العين ة النباتي ة بواس طة التبري د بس رعة تت راوح م ا ب ين ‪º5-1‬م‪/‬‬ ‫دقيقة حتى الوصول لدرجة متوسطة وتحفظ عليها لمدة ‪ 30‬دقيقة ثم تغمس بعدها في النيتروجين السائل‪.‬‬ ‫‪ -4‬طريقة التجميد الجاف ‪Dry Freezing Method‬‬ ‫هنا ينزع بعض الماء م ن الم ادة الم راد تجمي دها بواس طة التجفي ف ف ي أح د األف ران وتح ت تفري غ ‪ .‬الفك رة‬ ‫األساسية لعملية التجميد الجاف نبعت من الحقيقة السائدة من أن البذور الجافة غير النابت ة ق ادرة عل ى الحي اة‬ ‫عند تجمي دها عل ى درج ات ح رارة منخفض ة مقارن ة بالب ذور المتش ربة لكمي ة عالي ة م ن الم اء ‪ .‬عل ى نف س‬ ‫المنوال فإن عملية التجفيف لألعضاء النباتية تؤدي إلى نسبة حيوية عالية لألعضاء ‪.‬‬ ‫جـ‪ -‬إذابة الثلج ‪ Thawing‬أو مرحلة التسخين‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪65‬‬

‫تغم س األنس جة المجم دة مباش رة ف ي حم ام م ائي عل ى درج ة ح رارة ‪º40 -37‬م لم دة دقيق ة حي ث ت زال‬ ‫البلورات الثلجية من األنسجة ‪.‬‬ ‫د – إعادة الزراعة ‪Re-culture‬‬ ‫تنقل النبا تات المحفوظة بعد الخطوات السالفة الذكر لوسط غذائي جديد مناسب لحثها على النمو واإلكثار من‬ ‫جديد مع توفر كافة الظروف المالئمة للنمو‪.‬‬ ‫حيوية الخاليا واألنسجة المحفوظة ‪Viability of Preserved Cells and Tissues‬‬ ‫س واء ت م حف ظ األنس جة النباتي ة لم دة قص يرة أو لم دة طويل ة فبع د م دة الحف ظ الب د م ن التأك د م ن بق اء ه ذه‬ ‫النباتات حية ودراسة مقدرتها على النمو والتطور بعد مدة الحفظ ويتحقق ذلك بنقل األجزاء الت ي ت م حفظه ا‬ ‫إلى ظروف النمو الطبيعية ومتابعتها للوقوف على مدى حيويتها ويتم تقدير نسبة الحيوية بمعادلة بسيطة جدا‬ ‫هي كالتالي ‪:‬‬ ‫نسبة الحيوية‬ ‫) عدد الخاليا واألعضاء التي نمت تحت الظروف الطبيعية ×‪ / (100‬عدد الخاليا واألعضاء الكلية التي تم‬ ‫حفظها‪.‬‬ ‫وهن اك العدي د م ن الوح دات الت ي تس تخدم ف ي إج راء عملي ات التجمي د للعين ات النباتي ة أبس طها يطل ق‬ ‫عليه ا ‪ Dewar flask‬والت ي تمل‬

‫ب النيتروجين الس ا ئل حي ث تغم س ب ه األمب والت المحتوي ة عل ى العين ة‬

‫النباتية المراد حفظها‪.‬‬

‫تأثير عملية الحفظ على الثبات الوراثي لألنسجة النباتية‪:‬‬ ‫إن عملية حفظ األنسجة النباتية هامة جدا فيما لو حافظت على الثب ات ال وراثي للنبات ات بش كل يش ابه النب ات‬ ‫األم ‪ .‬وقد دلت األبحاث التي اجريت على عدد من النباتات مث ل الج ذر ‪ ،‬القم ح ‪ ،‬البطاط ا والت ي ت م حفظه ا‬ ‫بالتجميد لفترة من الزمن قد حافظت على حيويتها وتشابهت النباتات المحفوظة في نموها وسلوكها مع النبات‬ ‫األم مما يدل عل ى أن عملي ة التجمي د حافظ ت عل ى الثب ات ال وراثي للنبات ات ‪ .‬ك ذلك دل ت األبح اث عل ى أن‬ ‫كالوس نخيل البلح المجمد قد حافظ على حيويت ه وقدرت ه عل ى إعط اء أجن ة خض رية ونبات ات كامل ة وكان ت‬ ‫النباتات الناتجة مشابهة وراثيا لل نبات األم ‪ .‬كما تشابهت النباتات الناتج ة م ن األجن ة الخض رية لنخي ل ال بلح‬ ‫والتي تم حفظها معمليا لمدة ‪ 10‬أشهر م ع النب ات األم وت م قي اس االختالف ات باس تخدام طريق ة ‪RAPD-‬‬ ‫‪.PCR‬‬ ‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪66‬‬

Reference: 256 ‫ ص‬. ‫ إكثار النخيل بواسطة تقنيات زراعة األنسجة النباتية جامعة دمشق كلية الزراعة‬: )1995 ( ‫ المعرى خليل‬-George , E. F. (1993) : Plant propagation by tissue culture by Bulter Tanner Ltd. -Hassan, M.M. (1996): Micro propagation of some tropical fruit trees ( Banana ) . M. Sc. Thesis. Cairo University. Egypt -Hassan, M.M. (2002): In vitro studies on somatic embryogenesis conservation of date palm . Ph. D. thesis .Cairo University. Egypt -Tisserate , B; J.M. Ulrech and B.J.Finkle (1981) : Cryogenic preservation and regeneration of date palm tissue . Hortscience, 16 (1) = 47-48

67

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫التدريب العملي الثامن‬ ‫‪ .1‬ان يقوم الطاالب بعمال تجرباة زراعاة انساجة علاي ان ياتم تقسايمهم مجااميع لتطبياق كال اناواع الحفاظ‬ ‫المتاحه معمليا‪.‬‬

‫جــــــدول المتابعة‬ ‫نوع النبات‪:‬‬ ‫اسم النبات‪:‬‬ ‫اسم البيئة‪:‬‬ ‫عدد البرطمانات‪:‬‬ ‫تاريخ المالحظة‪:‬‬ ‫نسبة التلوث‪:‬‬ ‫نوع التلوث‪:‬‬ ‫مالحظات اخري‪:‬‬ ‫عدد الدرجات=‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪68‬‬

‫مادة حفظ االصول الوراثية‬

‫‪69‬‬