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Automatización de un ensayo ELISA

Izasa Scientific

Este artículo recoge la automatización de un ensayo ELISA, con preparación de los ensayos ELISA en el sistema de manejo de líquidos Biomek 4000, con opción de integración de lavador automático, y lectura del ELISA en lector de microplacas.

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l flujo de trabajo del ensayo ELISA está totalmente automatizado, con opción de lector y lavador integrados.

Las transferencias de líquidos optimizadas nos aportan gran fiabilidad de pipeteo en placas de 96 o 384 pocillos, con ajustes según viscosidades, total ausencia de errores, así como la mayor minimización posible de los falsos positivos. Nos permite una total trazabilidad de muestras, volúmenes y procesos, compatible también con trazabilidad de códigos de barras en distintos formatos y datos fácilmente exportables vía hojas de cálculo o archivos de texto.

Los ensayos inmunoabsorbentes ligados a enzimas (ELISA) son una herramienta analítica común para detectar la presencia de una proteína u otras moléculas de interés. Si bien el flujo de

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trabajo está ampliamente conservado (Figura 1), numerosos pasos de adición y lavado de reactivos hacen que esta tarea requiera mucha mano de obra. La automatización de estos pasos no solo alivia esta carga de trabajo, sino que puede conducir a mejoras en la consistencia del resultado. Aquí demostramos la automatización de un IL-22 ELISA.

La Tabla 1 muestra la consistencia entre los valores por triplicado con todos los CV por debajo del 5%. Esto refleja la capacidad del Biomek 4000 para procesar muestras de manera uniforme a través de una placa. La Figura 2 muestra la recta/curva patrón resultante con una linealidad de 0,991, que ilustra el excelente rendimiento del Biomek 4000 en la preparación de las diluciones seriadas de la solución patrón de IL-22. Estos excelentes resultados pueden ser obtenidos en menos de 90 minutos por placa, para el procesamiento completo del ELISA, incluyendo preparación de patrones por diluciones seriadas, lavados y lectura en el Epoch. Si se quiere aumentar la capacidad y velocidad, Izasa Scientific puede ofrecer niveles superiores de automatización basados en las plataformas Biomek i-series, como el ejemplo que se muestra en la Figura 4, con el Biomek i-5, que cuenta con hasta 25 posiciones de trabajo.

Figura 1: Protocolo automatizado del IL-22 ELISA, con integración de agitador orbital Peltier en el Biomek 4000, así como comunicación de datos automática entre robot, lavador y lector ELISA

Tabla 1: Datos de lectura absorbancia IL-22 ELISA Figura 2: Recta patrón del proceso ELISA automatizado IL-22. La linealidad de 0,991 indica una dilución serial consistente y una preparación de muestra fiable y repetitiva. Las barras de error muestran desviaciones estándares de triplicado

Figura 3: Análisis de cut-off en el lector Epoch de Agilent-BioTek, interfaz software Gen5

A B

Figura 4: Sistema de manejo de líquidos BIomek i-5 (A) y ejemplo de diseño del ensayo ELISA completo (B), incluyendo lavados integrados en el robot, y con capacidad de procesar hasta cuatro placas en automático, con toda la preparación y pipeteo de reactivos, así como lavados del ELISA, y opción de integración completa del lector Epoch

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