3M Microbiología
• Placas Petrifilm® en Norma Mexicana para la Industria Láctea • Bacterias Ácido lácticas • Ficha coleccionable: Placa Petrifilm® para recuento de Aerobios
JULIO 2006
Junta anual
lectores: E
l tema de este nuevo número son los productos procesados, por lo que les hemos incluido todo lo relacionado con las pruebas para la detección de bacterias ácido lácticas con las Placas Petrifilm® de 3M para el Recuento de Aerobios, incluyendo las preguntas más frecuentes sobre este interesante tema. Uno de los principales productores de alimentos procesados nos platica su experiencia con 3M Microbiología, y hacemos un recorrido por el ámbito regulatorio para darles a conocer las últimas noticias en cuanto a la aprobación de las Placas Petrifilm® en la Industria de la Leche. La ficha coleccionable en esta ocasión es la de las Placas Petrifilm® para el Recuento de Aerobios. No olvides que tus comentarios y sugerencias son muy importantes para nosotros. Escríbenos a microbiologiamx@mmm.com y déjanos saber cuál es tu sección favorita y que opinas de éste, nuestro medio de comunicación contigo.
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l pasado mes de febrero llevamos a cabo nuestra Junta Anual con los Distribuidores Autorizados de 3M Microbiología. Además de tratar temas de actualización de productos 3M, tuvimos la gran oportunidad de compartir experiencias y mejores prácticas para lograr un enfoque de servicio para nuestros clientes con talleres y dinámicas de ventas, finalizando con un gran convivio de despedida. Si requieres información de los Distribuidores Autorizados de 3M Microbiología, por favor envíanos un correo a microbiologiamx@mmm.com ó comunícate al teléfono 52700400 ext. 1710.
Atentamente, 3M Microbiología
POR T.A. MÓNICA JUÁREZ
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ara conocer la política de calidad de La Costeña y su experiencia con los productos de 3M Microbiología, entrevistamos al Técnico en el Aseguramiento de Calidad de la empresa, IBQ Araceli Santana. ¿Cuál es la importancia de contar con un proceso de calidad para La Costeña? En nuestra política de calidad nos comprometemos a satisfacer las necesidades de nuestros clientes y consumidores, los cuales son el objetivo principal de La Costeña; además, nuestros logros los relacionamos siempre con esfuerzos de mejora continua. ¿Cómo afectan la calidad microbiológica, la sanidad y la higiene en la aceptación de sus productos por parte del consumidor? Como objetivo principal, siempre tomamos en cuenta que nuestros consumidores y clientes pueden ser nuestros propios familiares, de tal manera que las buenas prácticas de manufactura son parte fundamental en la empresa. Para La Costeña, microbiología no es sólo monitorear nuestro producto terminado, sino seguir un proceso sistematizado y continuo en cada uno de sus puntos para evitar contaminaciones cruzadas. Sabemos que la calidad se basa en hacer las cosas bien en todos los procesos, y por ello quiero destacar que trabajamos ampliamente y de manera continua en todos los puntos
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críticos, para evitar que nuestros consumidores pudieran encontrar uno de nuestros productos con algún contaminante, no sólo microbiológico, sino físico o químico, pensando que el motor que nos impulsa es la buena imagen que La Costeña le ha dado al consumidor por tantos años. ¿Por qué eligió a 3M como socio de negocios y/o proveedor para alcanzar sus objetivos de calidad? Definitivamente, comparado con otros métodos de prueba, 3M ha cubierto la necesidad práctica que requerimos para trabajar. Vivimos en una época de cambios, de vanguardia, en donde siempre tenemos que tomar en cuenta que la distancia más cercana entre dos puntos es la línea recta, de tal manera que tenemos que encontrar un método que no sólo nos reduzca tiempos y costos, sino que simultáneamente nos dé confiabilidad, nos proporcione resultados efectivos, que sean reproducibles, pero sobre todo que cuenten con una excelente calidad, porque es eso lo que La Costeña se esfuerza por dar siempre: calidad. ¿Desde cuándo utiliza las Placas Petrifilm® de 3M? 3M Microbiología ha estado con nosotros desde hace ya seis años. ¿Qué beneficios encuentra en trabajar con socios de negocios como 3M? 3M es innovador, siempre busca lo práctico pero efectivo, es por ello que La Costeña ha basado su confianza en la calidad que nos brinda. Uno de los principales beneficios es que es un excelente camino para reducción de tiempos y movimientos en el área de microbiología.
Placas Petrifilm
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para la Industria Láctea
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l pasado 25 de mayo de 2006 se publicó en el Diario Oficial de la Federación la declaratoria de vigencia de la Norma Mexicana NMX-F-717-COFOCALEC-2006: “Sistema Producto Leche-Alimentos-Lácteos-Análisis microbiológicos de leche y derivados-Métodos de prueba rápidos.” En esta norma se reconoce a las Placas Petrifilm® de 3M como método de prueba rápido para la determinación de microorganismos en leche y productos lácteos. El punto 5.1.1.1 de esta norma hace referencia a las Placas Petrifilm® de 3M como “Placa con medio seco rehidratable, sistema doble película”. Método aplicable a la determinación de mesófilos aerobios, organismos coliformes, mohos y levaduras, Staphylococcus aureus y Eschericia coli. El Consejo para el Fomento de la Calidad de la Leche y sus Derivados, AC (COFOCALEC) es un organismo privado sin fines de lucro, que tiene como objetivo promover la calidad de la leche y sus productos en México a través de la normalización, el fomento y la evaluación de la conformidad en cuanto al cumplimiento de las normas mexicanas y oficiales tanto de México como a nivel internacional. Su misión es contribuir como organismo nacional en la regulación y promoción de la calidad de la leche y sus derivados, desde el productor hasta el consumidor, brindando confianza y seguridad a sus servicios, integrando y buscando la participación de los diferentes actores de la cadena productiva en beneficio de la sociedad. COFOCALEC es una organización de alcance nacional, capaz de evaluar la calidad de la leche y sus derivados en el país, conforme a las Normas Mexicanas y Normas Oficiales Mexicanas aplicables, y de acuerdo con un Sistema de Aseguramiento de Calidad que brinda confianza y seguridad a sus servicios.
Con esto se da un gran paso en el ámbito regulatorio mexicano para promover tecnologías como las desarrolladas por 3M para eficientar y facilitar las labores de control de calidad microbiológico a través de métodos rápidos y convenientes, como las Placas Petrifilm® reconocidas mundialmente. Para consultar el texto completo de la norma NMX-F-717COFOCALEC-2006 puedes comunicarte con nuestro Asesor Técnico al teléfono 5270 0437 o a través del correo electrónico microbiologiamx@mmm.com. Puedes también comunicarte directamente a la sede de COFOCALEC o mandar un correo electrónico a cofocalec@megared.net.mx. Si perteneces a la Industria Láctea, te invitamos a participar en las reuniones quincenales organizadas por el Subcomité técnico de Normalización de Procesos – COFOCALEC, para establecer las recomendaciones y los requerimientos sobre las prácticas de higiene necesarias para la obtención de leche cruda, que garanticen su inocuidad, idoneidad y sanidad en el Anteproyecto de Norma Mexicana “Prácticas de Higiene para la Obtención de la Leche Cruda”.
Para mayor información contáctanos al 5270 0454.
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N T E R É S
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Recuento de Bacterias Descripción Las Placas Petrifilm® para el Recuento de Aerobios, en combinación con caldo MRS como diluyente e incubación anaeróbica, permiten el crecimiento de bacterias ácido lácticas heterofermentativas y homofermentativas. Las colonias son de color rojo a rojizo-café, y pueden tener o no una burbuja de gas asociada.
Interpretación y lectura Esta figura contiene tanto organismos heterofermentativos (productores de gas) como homofermentativos. El diluyente MRS proporciona un fondo sombreado que resalta la producción de gas de los organismos heterofermentativos (Ver el círculo 1). Las colonias heterofermentativas a ¼ de pulgada de la orilla del círculo quizás no producirán gas visible. (Ver el círculo 2).
El rango óptimo de conteo es de 25-250 colonias. Cuente todas las colonias sin importar el tamaño o la intensidad de color.
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Recomendaciones de uso: Es más conveniente usar una dilución 1:10 ya existente con un diluyente estándar, en lugar de preparar una nueva dilución 1:10 específicamente para la evaluación de bacterias ácido lácticas. 3M recomienda el procedimiento de pruebas múltiples descrito a continuación: 1. Prepare el caldo MRS a una concentración 4 veces más (4x) que la cantidad sugerida por el fabricante. Por ejemplo, si el MRS es preparado normalmente añadiendo 55 gramos de 1 litro, en su lugar añada 220 gramos a la misma cantidad de agua. Esterilice y atempere según instrucciones del fabricante. 2. Prepare una dilución 1: 10 con su diluyente estándar. Siembre hasta 8 mL para las otras pruebas microbiológicas (es decir, coliformes, hongos y levaduras, cuenta estándar, etcétera.) 3. Añada el caldo MRS concentrado (4x) a la solución existente 1:10 en las proporciones que se indican a continuación:
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a. Si la dilución involucra añadir 11 gramos de producto a 99 mL de diluyente, siembre las otras pruebas microbiológicas y luego añada 18 mL de la solución concentrada de caldo MRS (4x). Multiplique la cuenta final en la placa por 11 para cuenta/gramo. b. Si la dilución involucra añadir 25 gramos de producto a 99 mL de diluyente, siembre las otras pruebas microbiológicas y luego añada 41 mL de la solución concentrada de caldo MRS (4x). Multiplique la cuenta final en la placa por 11 para cuenta/gramo.
Tiempo y temperatura de incubación: • Coloque las placas con la película clara hacia arriba y procure no apilar más de 20 en la jarra. Se pueden incubar múltiples pilas de placas en la misma jarra si cada pila está dividida por un divisor rígido. • Incube las placas a 30-35 °C durante 48 h. • Si no se requiere diferenciación de heterofermentativas, puede realizar el recuento a las 24 horas de incubación.
O R T A D A
Placas Petrifilm
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para recuento de Aerobios Totales (AC)
R EG . N O . 0091E90SSA
No requieren preparaci贸n previa ni pasos posteriores.
Placas Petrifilm
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Descripción
Interpretación y lectura
La Placa Petrifilm® para recuento Aerobio permite el crecimiento de bacterias aerobias totales (cuenta total en placa o aerobios mesófilos). La Placa Petrifilm® para Recuento de Aerobios Totales (AC) es un sistema de medio de cultivo listo para ser empleado, que contiene nutrientes del Agar Cuenta Estándar, un agente gelificante soluble en frío y tetrazoilo que facilita la enumeración de las colonias.
La Placa Petrifilm® para Recuento de Aerobios Totales es de fácil interpretación. Para leer la placa, sólo cuente todas las colonias rojas sin importar su tamaño o la intensidad del tono rojo. En este ejemplo la placa presenta una cuenta 143 ufc*. *Unidades formadoras de colonias.
¿Tienes cuentas muy elevadas en tu producto? Un producto óptimo en la Placa Petrifilm® para AC puede hacerse cuando las cuentas son menores a 300 ufc/placa. Cuando tienes cuentas mayores a 300 ufc/mL o gr puedes tener placas como las que te mostramos a continuación. Ejemplo 1 Conteo estimado: 103 Esta es una placa con colonias que son Muy Numerosas Para Contar (MNPC). Cuando esto sucede puede observarse como una distribución de las colonias de forma desigual, no homogénea. Hay colonias pequeñas a la orilla de la placa y no se observa crecimiento evidente al centro.
(Figura 4 de la Guía de Interpretación)
Ejemplo 2 Conteo estimado: 105 Otro ejemplo de conteos muy altos es cuando el área total de crecimiento puede verse de color rosa, como se muestra en la figura. Esto también es un crecimiento MNPC. En ambos ejemplos, lo que se recomienda es realizar una dilución de la muestra y volver a sembrarla. (Figura 8 de la Guía de Interpretación)
(Figura 7 de la Guía de Interpretación)
Ventajas:
Tiempo y temperatura de incubación:
La Placa Petrifilm® para el Recuento de Aerobios puede ser usada para enumerar aerobios totales en todos los alimentos y cuenta con aprobaciones AOAC-OMA. Debido a que las colonias en la Placa Petrifilm® AC son de color rojo, se las puede diferenciar de las partículas de producto que tienen forma irregular y color opaco.
Incube las Placas Petrifilm® cara arriba en grupos de no más de 20 piezas. El tiempo de incubación y la temperatura varían según el método. Los métodos aprobados más conocidos son: • AOAC método oficial 986.33 & 989.10 (leche y productos lácteos) Incubar 48 h ± 3 h a 32 °C ± 1°C. • AOAC método oficial 990.12 Incubar 48 h ± 3 h a 35 °C ± 1° C. • AFNOR método validado 3M 01/1-09/89 Incubar 72 h ± 3 h a 30 °C ± 1 °C.
Recomendaciones de uso: • Verificar el pH de las muestras antes de inocular las Placas Petrifilm®. • Para productos ácidos, ajuste el pH de la muestra diluida a un 6.5 - 7.2 con NaOH 1N para asegurar que vire a rojo.
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Preguntas
más frecuentes
con Placas Petrifilm® para recuento de Aerobios partir de una dilución inicial de muestra. El procedimiento 4x MRS se añade a la dilución inicial de muestra después de que las otras pruebas microbiológicas han sido sembradas. La dilución inicial, junto con la adición de caldo MRS, puede luego usarse para sembrar las placas para la prueba de ácido lácticas. Este procedimiento proporciona una sensibilidad de <11 ufc/g a una dilución inicial de 1:10. El procedimiento 2x MRS es más rápido y efectivo en costos, porque el tiempo de preparación de muestra disminuye y se utiliza una cantidad significativamente menor de caldo MRS. Este procedimiento proporciona una sensibilidad de <20 ufc/g a una dilución inicial de 1:10. Dado que se puede preparar una dilución 1:2 usando el Pipetor Electrónico 3M® de 1mL, puedes inocular las pruebas de ácido lácticas en cualquier momento durante el procedimiento de siembra.
1. ¿Con las Placas Petrifilm® puedo obtener una cuenta actual de bacterias ácido lácticas productoras de gas? Sí. El procedimiento para ácido lácticas con las Placas Petrifilm® hace posible contar el número de heterofermentativos (organismos productores de gas). 2. ¿Qué debo usar para una cámara de anaerobiosis? Cualquier cámara sellada junto con un paquete de gas, para proporcionar un ambiente anaeróbico. 3. ¿Qué tipo de paquetes de gas debo usar con mi cámara de anaerobiosis? Usa un sobre que genere hidrógeno + dióxido de carbono, tal como los Sistemas GasPakTM de BBL (GasPak 100® y GasPak 150®). No uses sobres que contengan ácido ascórbico, ya que éste tiende a tornar las Placas Petrifilm® a color rosa. 4. ¿Puedo hacer una dilución de la muestra y usarla para mi prueba de ácido lácticas junto con mis otras pruebas microbiológicas? Sí. Prepara tu dilución como acostumbras; primero inocula tus otras placas y luego sigue el procedimiento de 2x MRS o el 4x MRS para la prueba de ácido lácticas.
6. Si uso el procedimiento 2x MRS, ¿cómo reporto mis resultados? Si tu dilución inicial es de 1:10, debes multiplicar la cuenta en tu placa por 20 (es decir, si hiciste una dilución 1:2 a partir de una dilución 1:10, tu factor de dilución se convierte en 20).
5. ¿Cuál es la diferencia entre el procedimiento 2x MRS y el 4x MRS? El 4x MRS es el procedimiento original que hace posible sembrar otras pruebas bacteriológicas a
7. ¿Cuál es el tiempo y la temperatura recomendados para incubar esta prueba? Se recomienda que incubes anaeróbicamente las placas a 30 - 35 °C (86 – 95 ºF) durante 48 + 3 h.
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O L U C I O N E S
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¿PROBLEMAS PARA MANTENER LA TEMPERATURA ADECUADA CUANDO TRANSPORTAS TUS PRODUCTOS? 3M te ofrece la solución para mantener la calidad de tus productos a un bajo costo con:
Monitor Mark® y Freeze Watch® Innovadores sistemas de monitoreo de temperatura que proporcionan evidencia visual cuando se rebasa el límite de temperatura establecida durante la transportación.
Beneficios: • Indican el tiempo que no se respetó el límite de temperatura. • La información no es reversible.
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• Fáciles de usar, no requieren entrenamiento: “Sólo pégalos en el empaque secundario”. • Económico.
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Evita que el producto se exponga a mayor temperatura que el límite determinado.
Evita que el producto se exponga a menor temperatura que el limite determinado.
MONITOREANDO LA TEMPERATURA Y MARCANDO EL TIEMPO PARA CONTROLAR LA CALIDAD.
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3M MICROBIOLOGÍA
CENTRO DE SERVICIO 3M
Tel. 5270 0400 Ext. 1043 y 1710 ó 01800 672 5518 Fax: 5270 0446 Centro de Respuesta al Cliente Tel.: 5270 0454 Fax: 5270 2224 Mándanos tus comentarios a: microbiologiamx@mmm.com www.3m.com/microbiologia
Si tienes alguna duda con alguno de tus equipos de 3M Microbiología puedes llamar y recibir asistencia gratuita al:
01800 640 8922