UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA DOCENTE: Bioq. Farm. Carlos García MSc. ESTUDIANTE: Ochoa Verzosa Stefanny Ximena CURSO: Quinto Año PARALELO: “A” GRUPO N°: 7 FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 17/Agosto/2015 FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes,24/Agosto/2015
CALIFICACIÓN:
PRÁCTICA N° 10 TÍTULO DE LA PRÁCTICA:
INTOXICACIÓN POR HIERRO TÓXICO:
Administrar 10 mL (mililitros) de Hierro
ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Rata wistar VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Intraperitoneal T. DE MUERTE: 10 minutos SINTOMAS:
Dolor abdominal, Hemorragia digestiva, Fiebre, Coma.
TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 7:30 am Hora de muerte: 8:00 am Hora de disección: 8:10 am Hora del baño maría: 9:00 am Finalización del baño maría: 9:30 am Final de la práctica: 10:30 am
HIERRO
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA: 1. Observar la reacción que presenta el animal de experimentación ante la Intoxicación por Hierro. 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el toxico y adquirir la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de identificación. MATERIALES:
Mandil Mascarilla desechable Guantes desechables Gorro desechales Pipeta 10 mL Tubos de ensayo Pinza para tubos de ensayo Fósforos Bisturí Varilla de vidrio Jeringa de 10 mL Agitador de vidrio Vaso de precipitación 250 mL Mechero de Alcohol Probeta de 50 Ml Gradillas Equipo de destilación Zapatones desechables Espátula Panema Tabla de disección Equipo de disección
SUSTANCIAS:
Agua destilada, Clorato de potasio KClO3 Solución de Hierro, Hidróxido de sodio, Hidróxido de potasio, Ferrocianuro de potasio, Ferricianuro de potasio, Sulfuro de hidrógeno.
MUESTRAS:
Muestra de medios biológicos
EQUIPOS:
Equipo de destilación Balanza analítica
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
PROCEDIMIENTO: 1. Inmediatamente al ingreso de los estudiantes al Laboratorio de Toxicología se debe equipar adecuadamente con mandil largo para Laboratorio limpio y sin manchas, gorro desechable, mascarillas desechables, guantes desechables y zapatones. Todo esto se realiza siguiendo las normas del Laboratorio para evitar posibles contaminaciones y contribuir con el orden. 2. Desinfectar el área de trabajo para realizar la práctica de Toxicología, siempre se debe tener limpio el mesón de trabajo y tener listo a disposición los respectivos materiales que se utilizaran en la práctica correspondiente en el Laboratorio de Toxicología. 3. Se procede a la administración del tóxico que es el Hierro, la dosis es diez mililitros al animal en experimentación que es la rata wistar. Se prepara la solución tóxica de Hierro, con 10 mililitros de la solución de Hierro con una jeringuilla de 10cc se le administra a la rata wistar por vía intraperitoneal. Anotar la hora de administración. 4. Colocar la rata wistar en el panema y observar su sintomatología tomando en cuenta el tiempo hasta su deceso. Muerto el animal colocarlo en la tabla de disección se lo amarra con la ayuda de una piola. 5. Realizar la disección con un bisturí, pero antes se debe afeitar el área. Colocar las vísceras y líquido visceral en un vaso de precipitación, triturarlas lo más finamente posible. 6. Agregar las 50 perlas de vidrio y añadir 2 gramos de Clorato de Potasio KClO3 y 25 ml de Ácido Clorhídrico concentrado. Para disolver el ácido, disolver en 20 ml de agua. 7. Mezclar bien y llevar a baño maría por 30 minutos. con agitación regular. A los 5 minutos que se cumpla con el tiempo establecido añadir 2 gramos más de KClO3. 8. Una vez finalizado el baño María, dejar enfriar, filtrar y con el filtrado realizar las reacciones de reconocimiento. Al finalizar la práctica, se procede al levantamiento de todos los medios biológicos y materiales de Laboratorio. Se desinfecta nuevamente el área de trabajo, se desechan los materiales y que queden en su lugar y en orden luego desinfectarse las manos.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS: El líquido proveniente de la destrucción de la materia orgánica, es tratado con amoniaco para disminuir la acidez y luego se realizan las reacciones de identificación que a continuación se detallan. 1.- Con los NaOH y KOH: El hierro reacciona frente a los NaOH y KOH produciendo un precipitado blanco de Fe(OH)2; este precipitado rápidamente se oxida formándose primeramente verde sucio, luego negro y finalmente pardo rojizo. Fe2+ + (OH)
Fe(OH)2
2.- Con el Sulfocianuro de Potasio: El Fe2+ no reacciona frente a este reactivo, el Fe3+ reacciona originando un complejo color rojo sangre, esta reacción es más sensible para reconocer el hierro. 3.- Con el Ferricianuro de Potasio Fe (CN)6K3: Frente a este reactivo, las sales ferrosas producen un precipitado, sino que forma un complejo color pardo oscuro. 4.- Con el Ferrocianuro de Potasio Fe (CN)6K4: Con este reactivo los iones ferrosos reaccionan dando un precipitado color blanco que rápidamente se hace azul, conocido como azul de Prusia. Fe (CN)6 + Fe2+ -------------- Fe(CN)6 5.- Con el H2S: Con este gas, el hierro produce un precipitado negro de sulfuro de hierro. Fe2+ + H2S -------- SFe + 2H+
GRÁFICOS: 1. Animal de experimentación rata wister
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2. Inyectar 10 ml del tóxico que es hierro
2
3. Obseravr los síntomas de la rata luego de haber administrado el tóxico
3
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
5. Extraer y triturar las víceras, colocar 50 perlas de vidrio
4. Colocar la rata en la tabla de disección
5
4
6
7. Una vez finalizado el baño maria dejar enfriar
7
6. Llevar a baño maria por 30 minutos con agitación regular
8
8. Obtener el filtrado para realizar las reacciones correspondientes
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS CON LA SOLUCIÓN PROBLEMA: 1. REACCIÓN CON LOS NAOH Y KOH: REACCIÓN POSITIVA El hierro reacciona frente a los NaOH y KOH produciendo un precipitado blanco de Fe(OH)2; este precipitado rápidamente se oxida formándose primeramente verde sucio, luego negro y finalmente pardo rojizo. REACCIÓN DE PRECIPITACIÓN:
Fe2+ + (OH) Fe(OH)2 RESULTADO: Positivo Característico (Precitado rojo-oscuro)
ANTES: Reacción de Coloración
DESPÚES RESULTADO: Positivo característico (Precitado rojo-oscuro)
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
2. REACCIÓN CON SULFOCIANURO DE POTASIO: REACCIÓN POSITIVA El Fe2+ no reacciona frente a este reactivo, el Fe3+ reacciona originando un complejo color rojo sangre, esta reacción es más sensible para reconocer el hierro. REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Fe3+ + KSCN
Fe(SCN)3 + 3K+
RESULTADO: Positivo Característico (Complejo rojo sangre)
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO: Positivo Característico (Complejo rojo sangre)
3. REACCIÓN CON FERRICIANURO DE POTASIO: REACCIÓN POSITIVA Frente a este reactivo, las sales ferrosas producen un precipitado, sino que forma un complejo color pardo oscuro. REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Sales ferrosas + Fe (CN)6K3 ---------- Complejo pardo oscuro RESULTADO: Positivo No Característico (Precipitado verdoso)
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO: Positivo No característico (Precipitado verdoso)
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
4. REACCIÓN CON FERROCIANURO DE POTASIO: REACCIÓN POSITIVA Con este reactivo los iones ferrosos reaccionan dando un precipitado color blanco que rápidamente se hace azul, conocido como azul de Prusia. REACCIÓN DE COLORACIÓN: Fe (CN)6 + Fe2+ -------------- Fe(CN)6
RESULTADO: Positivo Característico (Precipitado azul verdoso)
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO: Positivo Característico (Precipitado azul verdoso)
5. REACCIÓN CON SULFURO DE HIDRÓGENO: REACCIÓN POSITIVA Con este gas, el hierro produce un precipitado negro de sulfuro de hierro. REACCIÓN DE COLORACIÓN: Fe2+ + H2S -------- SFe + 2H+
RESULTADO: Positivo No Característico (Precipitado amarillo)
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO: Positivo No Característico (Precipitado amarillo)
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
OBSERVACIONES:
A la solución madre de medios biológicos se le adiciona dos gramos de KClO3 para identificar hierro. Al realizar la disección de la rata wistar, se pudo observar que el hierro provoco daños en órganos. La mayoría de las reacciones de reconocimiento dieron como resultado positivo, comprobando la presencia de este toxico en los órganos afectados.
RECOMENDACIONES:
Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar accidentes. Toda sustancia a manipular en la práctica se las debe de realizar bajo la campana extractora de gases. Culminada la práctica se debe dejar el área de trabajo desinfectada, para evitar contaminación con las sustancias químicas utilizadas.
CONCLUSIONES:
En esta práctica se pudo observar la intoxicación con hierro a dosis de diez mililitros es letal en el cual ocasionó la muerte de la rata wistar, con un tiempo de muerte de diez minutos debido a su toxicidad que tiene este compuesto que es el cobre se producen así diferentes manifestaciones o síntomas como vómito, diarrea, cefalea y mediante las pruebas de reconocimiento se pudo comprobar la presencia de cobre en los órganos afectados del animal.
CUESTIONARIO: 1. ¿CÚALES SON SÍNTOMAS DE UN INTOXICACIÓN AGUDA DE HIERRO? INTOXICACIÓN AGUDA POR HIERRO: se trata de una urgencia médica potencialmente letal. Su rango de toxicidad incluye efectos sobre el sistema gastrointestinal, cardiovascular, efectos metabólicos y sobre el sistema nervioso central. Es una de las principales causas de intoxicación en la edad pediátrica, sobre todo por ingesta accidental. En la edad adulta se trata de una situación infrecuente casi siempre relacionada con intentos de suicidios.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
2. ¿FUENTES DE EXPOSICIÓN A INTOXICACIÓN POR HIERRO? El hierro se toma casi siempre a partir de preparados farmacológicos, pese a esta fuente de tóxico tan limitada, la intoxicación por hierro continua siendo un problema común y grave dentro de las intoxicaciones accidentales en niños. La razón se debe a la amplia difusión de estos preparados farmacológicos que se encuentran en casi todos los hogares y a veces son administrados a los niños de forma empírica por sus padres. 3. ¿NOMBRE LAS MAS IMPORTANTES MANIFESTACIONES CLÍNICAS EN INTOXICACIÓN POR HIERRO? Irritación local de la mucosa intestinal por contacto por hierro el tiempo de manifestación es de 30 minutos a dos horas los síntomas son nauseas, vómitos, diarrea, dolor abdominal, hemorragia digestiva.
GLOSARIO Dolor abdominal: Es el dolor que se siente en el área entre el pecho y la ingle, a menudo denominada región estomacal o vientre. Hemorragia digestiva: Se entiende por hemorragia digestiva, la pérdida de sangre que se origina en cualquier segmento del tubo digestivo, desde el esófago hasta el ano. Puede ser alta o baja; la alta es aquélla que se produce sobre el ángulo de Treitz, y la baja, la que tiene su origen bajo él.
ANEXOS:
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
BIBLIOGRAFÍA Fuentes de exposición al hierro. Manifestaciones clínicas de intoxicación por hierro En línea (www.savittdltheradiopacityofingestedmedication.pdf)
AUTORIA Ochoa Verzosa Stefanny Ximena BQF. García González Carlos
FIRMA DE RESPONSABILIDAD:
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FECHA DE ENTREGA: Lunes 24 de Agosto del 2015
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“