UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA DOCENTE: Bioq. Farm. Carlos García MSc. ESTUDIANTE: Ochoa Verzosa Stefanny Ximena CURSO: Quinto Año PARALELO: “A” GRUPO N°: 7 FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 24/Agosto/2015 FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes,31/Agosto/2015
CALIFICACIÓN:
PRÁCTICA N° 12 TÍTULO DE LA PRÁCTICA:
INTOXICACIÓN POR ESTAÑO TÓXICO:
Administrar 10 mL (mililitros) de Estaño
ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Rata wistar VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Intraperitoneal T. DE MUERTE: 10 minutos SINTOMAS:
Irritación de ojos y piel, Vómitos,
Mareos, Cefalea.
ESTAÑO
TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 7:30 am Hora de muerte: 7:40 am Hora de disección: 7:45 am Hora del baño maría: 8:12 am Finalización del baño maría: 8:42 am Final de la práctica: 10:30 am
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA: 1. Observar la reacción que presenta el animal de experimentación ante la Intoxicación por Estaño. 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones clínias por la intoxicación de estaño y controlar el tiempo en que actúa el toxico adquiriendo la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de identificación. MATERIALES:
Mandil Mascarilla desechable Guantes desechables Gorro desechales Pipeta 10 mL Tubos de ensayo Pinza para tubos de ensayo Fósforos Bisturí Varilla de vidrio Jeringa de 10 mL Agitador de vidrio Vaso de precipitación 250 mL Mechero de Alcohol Probeta de 50 Ml Gradillas Equipo de destilación Zapatones desechables Espátula Panema Tabla de disección Equipo de disección
SUSTANCIAS:
Agua destilada Clorato de potasio KClO3 Solución de Estaño Hidróxido de sodio Sales de bismuto Sulfuro de hidrógeno Zinc metálico Azul de metileno Cloruro mercurio II
MUESTRAS:
Muestra de medios biológicos
EQUIPOS:
Equipo de destilación Balanza analítica
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
PROCEDIMIENTO: 1. Inmediatamente al ingreso de los estudiantes al Laboratorio de Toxicología se debe equipar adecuadamente con mandil largo para Laboratorio limpio y sin manchas, gorro desechable, mascarillas desechables, guantes desechables y zapatones. Todo esto se realiza siguiendo las normas del Laboratorio para evitar posibles contaminaciones y contribuir con el orden. 2. Desinfectar el área de trabajo para realizar la práctica de Toxicología, siempre se debe tener limpio el mesón de trabajo y tener listo a disposición los respectivos materiales que se utilizaran en la práctica correspondiente en el Laboratorio de Toxicología. 3. Se procede a la administración del tóxico que es el Estaño, la dosis es diez mililitros al animal en experimentación que es la rata wistar. Se prepara la solución tóxica de Estaño, con 10 mililitros de la solución con una jeringuilla de 10 mililitros y administrarle a la rata wistar por vía intraperitoneal. Anotar la hora de administración. 4. Colocar la rata wistar en el panema y observar su sintomatología tomando en cuenta el tiempo hasta su deceso. Muerto el animal colocarlo en la tabla de disección se lo amarra con la ayuda de una piola. 5. Realizar la disección con un bisturí, pero antes se debe afeitar el área. Colocar las vísceras y líquido visceral en un vaso de precipitación, triturarlas lo más finamente posible. 6. Agregar las 50 perlas de vidrio y añadir 2 gramos de KClO3 y 25 ml de Ácido Clorhídrico concentrado. Para disolver el ácido, disolver en 20 ml de agua. 7. Mezclar bien y llevar a baño maría por 30 minutos. con agitación regular. A los 5 minutos que se cumpla con el tiempo establecido añadir 2 gramos más de KClO3. 8. Una vez finalizado el baño María, dejar enfriar, filtrar y con el filtrado realizar las reacciones de reconocimiento. Al finalizar la práctica, se procede al levantamiento de todos los medios biológicos y materiales de Laboratorio. Se desinfecta nuevamente el área de trabajo, se desechan los materiales y que queden en su lugar y en orden luego desinfectarse las manos.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS: El líquido proveniente de la destrucción de la materia orgánica, es tratado con amoniaco para disminuir la acidez y luego se realizan las reacciones de identificación que a continuación se detallan. 1. Con el NaOH. A 1 ml de solución muestra, agregamos algunas gotas de NaOH, con lo cual en caso positivo se debe formar un precipitado color blanco por formación de Sn(OH)2. Este precipitado es soluble en exceso de reactivo por formación de Estanito [Sn(OH)3]-. Sn++ + 2 OH
Sn(OH)2
2. Con las sales de bismuto. Al Estannito formado en la reacción anterior, agregarle algunas gotas de sales de Bismuto, en caso positivo se forma un precipitado color negro Bismuto metálico. [Sn(OH)3]- + Bi +++ Bi metálico color negro 3. Con el SH2. Si la muestra contiene Estaño, debe formarse un precipitado negro al hacerle pasar una buena corriente de SH 2, por formarse un precipitado SSn. Este precipitado es insoluble en exceso de reactivo, en KOH 6M, en ácidos minerales diluidos y fríos Sn++ + SH2 SSn + 2H 4. Con el Zinc metálico. Todos los metales que se encuentran por encima del estaño en la escala de fuerza electromotriz, reducen a los iones Sn3+ y Sn 2+ a estaño metálico color blanco en forma de cocos. Zn0 + Sn3+ y Sn
2+
Sn0 (estaño metálico) color blanco
5. Con azul de metileno. Este reactivo es reducido a la forma incolora al hacerlo reaccionar frente al estaño bivalente. A la solución con posible presencia de Sn+2 (por reducción del Sn+4) se le agregan gotas de azul de metileno (al 0,01% en HCl), el Sn+2 se oxida a Sn+4 y el azul de metileno se reduce, decolorándose. Sn+2 ↔ Sn+4 + 2 e6. Con el Cloruro de mercurio II. Para identificar Sn+4 es necesario reducirlo previamente a Sn+2. Para ello se acidifica la solución con posible presencia de Sn+. Se agrega unas gotas del reactivo que puede realizarse para la identificación del Estaño, es el HgCl2. Sn+2 ↔ Sn+4 + 2 e2 HgCl2 + 2 e- ↔ Hg2Cl2 + 2 Cl-(calomel, blanco) O continuar: Hg2Cl2 + 2 e ↔ 2 Hg° + 2 Cl- (negro)
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
GRÁFICOS: 1. Animal de experimentación rata wister
3. Obseravr los síntomas de la rata luego de haber administrado el tóxico
2. Inyectar 10 ml del tóxico
2
1
3
5. Extraer y triturar las víceras, colocar 50 perlas de vidrio
4. Colocar la rata en la tabla de disección
5
4
6
7. Una vez finalizado el baño maria dejar enfriar
7
6. Llevar a baño maria por 30 minutos con agitación regular
8. Obtener el filtrado para realizar las reacciones correspondientes
8
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS CON LA SOLUCIÓN PROBLEMA: 1. REACCIÓN CON EL HIDRÓXIDO DE SODIO: REACCIÓN POSITIVA A 1 ml de solución muestra, agregamos algunas gotas de NaOH, con lo cual en caso positivo se debe formar un precipitado color blanco por formación de Sn(OH)2. Este precipitado es soluble en exceso de reactivo por formación de Estanito [Sn(OH)3]-. REACCIÓN DE PRECIPITACIÓN:
Sn++ + 2 OH RESULTADO: Positivo Característico (Precipitado blanco)
Sn(OH)2
DESPÚES RESULTADO: Positivo característico (Precipitado blanco)
ANTES: Reacción de Coloración 2. REACCIÓN CON SALES DE BISMUTO:
REACCIÓN POSITIVA Con las sales de bismuto. Al Estannito formado en la reacción anterior, agregarle algunas gotas de sales de Bismuto, en caso positivo se forma un precipitado color negro Bismuto metálico. REACCIÓN DE COLORACIÓN:
[Sn(OH)3]- + Bi
Bi metálico color negro RESULTADO: Positivo no característico
ANTES Reacción de coloración:
+++
DESPÚES RESULTADO: Positivo no característico
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
3. REACCIÓN CON SULFURO DE HIDRÓGENO: REACCIÓN POSITIVA Si la muestra contiene Estaño, debe formarse un precipitado negro al hacerle pasar una buena corriente de SH2, por formarse un precipitado SSn. Este precipitado es insoluble en exceso de reactivo, en KOH 6M, en ácidos minerales diluidos y fríos. REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Sn++ + SH2 SSn + 2H+ RESULTADO: Negativo
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES ESULTADO: Negativo
4. REACCIÓN CON ZINC METÁLICO: REACCIÓN POSITIVA Con el Zinc metálico. Todos los metales que se encuentran por encima del estaño en la escala de fuerza electromotriz, reducen a los iones Sn3+ y Sn 2+ a estaño metálico color blanco en forma de cocos. REACCIÓN DE COLORACIÓN: Zn0 + Sn3+ y Sn 2+ Sn0 (estaño metálico) color blanco RESULTADO: Positivo No Característico (Precipitado Color plomo)
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO: Positivo Característico (Precipitado Color plomo)
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
5. REACCIÓN CON AZUL DE METILENO: REACCIÓN POSITIVA Este reactivo es reducido a la forma incolora al hacerlo reaccionar frente al estaño bivalente. A la solución con posible presencia de Sn+2 (por reducción del Sn+4) se le agregan gotas de azul de metileno (al 0,01% en HCl), el Sn+2 se oxida a Sn+4 y el azul de metileno se reduce, decolorándose. REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Sn+2
↔ Sn+4 + 2 eRESULTADO: Positivo No Característico
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES ESULTADO: Positivo Característico
6. REACCIÓN CON CLORURO DE MERCURIO II. REACCIÓN POSITIVA Para identificar Sn+4 es necesario reducirlo previamente a Sn+2. Para ello se acidifica la solución con posible presencia de Sn+. Se agrega unas gotas del reactivo que puede realizarse para la identificación del Estaño, es el HgCl2 REACCIÓN DE COLORACIÓN:
2 HgCl2 + 2 e- ↔ Hg2Cl2 + 2 Cl-(calomel, blanco) continuar: Hg2Cl2 + 2 e- ↔ 2 Hg° + 2 Cl- (negro) RESULTADO: Positivo Característico (Precipitado blanco)
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO: Positivo Característico (Precipitado blanco)
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
OBSERVACIONES:
A la solución madre de medios biológicos se le adiciona dos gramos de KClO3 para identificar Estaño. Al realizar la disección de la rata wistar, se pudo observar que la intoxicación por estaño provoca daños en los órganos.
RECOMENDACIONES:
Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar accidentes. Toda sustancia a manipular en este caso la solución de estaño se las debe de realizar bajo la campana extractora de gases. Culminada la práctica se debe dejar el área de trabajo desinfectada, para evitar contaminación con las sustancias químicas utilizadas.
CONCLUSIONES:
En esta práctica se pudo observar la intoxicación con estaño a dosis de diez mililitros es letal en el cual ocasionó la muerte de la rata wistar, con un tiempo de muerte de diez minutos debido a la toxicidad que tiene este compuesto que es el estaño se producen así diferentes síntomas como irritación en ojos y piel, vómitos, mareos, cefalea y mediante las pruebas de reconocimiento se pudo comprobar la presencia de estaño en los órganos afectados del animal en experimentación.
CUESTIONARIO: 1. ¿CÓMO AFECTA LA SALUD EL ESTAÑO Y LOS COMPUESTOS DE ESTAÑO? El estaño metálico no es muy tóxico debido a que es pobremente absorbido en el tracto gastrointestinal, pero respirar vapores del metal derretido puede afectar los pulmones. Los estudios de seres humanos y animales han demostrado que la ingestión de grandes cantidades de compuestos inorgánicos de estaño puede producir dolores de estómago, anemia, y alteraciones del hígado y los riñones.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
2. ¿CÓMO PODRÍA YO ESTAR EXPUESTA AL ESTAÑO Y A LOS COPUESTOS DE ESTAÑO? Al consumir alimentos o tomar bebidas de latas revestidas con estaño (actualmente más del 90% de las latas revestidas con estaño que se usan para alimentos están protegidas con laca). 3. ¿QUÉ POSIBILIDADES HAY QUE EL ESTAÑO Y LOS COMPUESTO DE ESTAÑO PRODUSCAN CÁNCER? No hay ninguna evidencia de que el estaño o los compuestos de estaño produzcan cáncer en seres humanos. Los estudios de compuestos inorgánicos de estaño en animales han sido negativos. Un estudio en ratas y otro en ratones demostraron que el hidróxido de trifenilestaño, puede producir cáncer luego de exposición oral prolongada.
GLOSARIO LACA: Sustancia resinosa, formada en las ramas de distintos árboles de Asia meridional con la exudación producida por las picaduras de ciertos insectos, que se emplea en la fabricación de barnices y colorantes. LATAS: La lata es un envase opaco y resistente que resulta adecuado para envasar líquidos y productos en conserva. Los materiales de fabricación más habituales son la hojalata y el aluminio TRACTO GASTROINTESTINAL: El tracto gastrointestinal es parte del sistema digestivo, que también incluye las glándulas salivales, la boca, el esófago, el hígado, el páncreas, la vesícula biliar y el recto.
ANEXOS:
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
BIBLIOGRAFÍA Agencia para Sustancias Tóxicas y el Registro de Enfermedades. División de Toxicología y Medicina Ambiental. 1600 Clifton Road NE, MS F-32. Atlanta. En línea [http://www.atsdr.cdc.gov/es/] BQF. García, C. Universidad Técnica de Machala. Unidad Académica de Ciencias Químicas y de la Salud. Carrera de Bioquímica y Farmacia. Cátedra de Toxicología. Teoría del Estaño.2015
AUTORIA Ochoa Verzosa Stefanny Ximena BQF. García González Carlos
FIRMA DE RESPONSABILIDAD:
------------------------------------------------Stefanny Ximena Ochoa Verzosa
FECHA DE ENTREGA: Lunes 31 de Agosto del 2015
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“