UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA DOCENTE: Bioq. Farm. Carlos García MSc. ESTUDIANTE: Ochoa Verzosa Stefanny Ximena CURSO: Quinto Año PARALELO: “A” GRUPO N°: 7 FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 14/09/2015 FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 21/09/2015
CALIFICACIÓN:
PRÁCTICA N° 15 TÍTULO DE LA PRÁCTICA:
INTOXICACIÓN POR ALUMINIO TÓXICO:
Administrar 20 mL (mililitros) de Cloruro de Aluminio
ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Rata wistar VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Intraperitoneal T. DE MUERTE: 10 minutos SINTOMAS:
Daño al Sistema Nervioso Central Pérdida de la memoria Apatía, temblores severos.
TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 7:30 am Hora de muerte: 7:40 am Hora de disección: 7:50 am Hora del baño maría: 8:00 am Finalización del baño maría: 8:30 am Final de la práctica: 10:30 am
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA: 1. Observar las reacciones que presenta el animal de experimentación ante la Intoxicación por Aluminio como Cloruro de Aluminio. 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones clínicas (síntomas) y controlar el tiempo en que actúa el toxico e ir adquiriendo la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de identificación. MATERIALES:
Bisturí, Gradilla, Panema, Fósforos, Piola larga, Mandil largo, Perlas de vidrio, Varilla de vidrio, Tubos de ensayo, Jeringa de 10 mL, Gorro desechable, Agitador de vidrio Espátula de metal, Tabla de disección, Mechero de Alcohol, Equipo de disección, Equipo de destilación, Guantes desechables, Tapa tubos de caucho, Mascarilla desechable, Zapatones desechables, Recipientes de aluminio, Tubos de ensayo de vidrio, Pipeta graduada de 10 mL, Pinza para tubos de ensayo, Papel para realizar pesadas, Vaso de precipitación 250 mL Vaso de precipitación 600 mL
SUSTANCIAS:
Agua destilada, Cloruro de Aluminio Aluminón Carbonato de sodio Fosfatos alcalinos
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
MUESTRAS:
Muestra de medios biológicos.
EQUIPOS:
Balanza analítica, Cocineta eléctrica,
PROCEDIMIENTO: 1. Inmediatamente al ingreso de los estudiantes al Laboratorio de Toxicología se debe equipar adecuadamente con mandil largo, limpio, sin manchas, gorro desechable, mascarilla desechable, guantes desechables y zapatones desechables. Todo esto se realiza siguiendo las normas del Laboratorio para evitar posibles contaminaciones y contribuir con el orden. 2. Desinfectar el área de trabajo para realizar la práctica de Toxicología, siempre se debe tener limpio el mesón de trabajo y tener listo a disposición los respectivos materiales que se utilizaran en la práctica correspondiente en el Laboratorio de Toxicología. 3. Se procede a la administración del tóxico en este caso es el Aluminio como Cloruro de Aluminio y la dosis es de veinte mililitros al animal en experimentación que es la rata wistar; con la dosis de veinte mililitros ocasiona la muerte del animal en experimentación. 4. Se prepara la solución tóxica de Cloruro de Aluminio y con ayuda de dos jeringas de diez mililitros se procede a la administración del tóxico por vía intraperitoneal y una vez transcurrido el tóxico al animal en experimentación, se observan los síntomas inmediatamente. 5. A dosis de veinte mililitros causa la muerte del animal, observando la sintomatología del animal, transcurrido este tiempo se coloca a la rata wistar en el panema se procede a afeitar el área a realizar la incisión. 6. Con la ayuda de un bisturí estéril se disecciona todo el dorso del animal evitando perforar las vísceras luego se recogen las vísceras en un vaso de precipitación. 7. Observamos los cambios que presentan sus órganos y con la ayuda de una jeringuilla se recoge el líquido que hay en su cavidad abdominal
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
8. Triturar las vísceras lo más fino posible, agregar las 50 perlas de vidrio más 2 gramos más solución Clorato de potasio e ir añadiendo con pipeta graduada de 10 mililitros los 25 mililitros de Ácido clorhídrico concentrado, llevamos a baño maría por 30 minutos con agitación regular. Este paso se lo realiza en la campana extractora de gases tóxicos. 9. Una vez finalizado el baño maría dejar enfriar, filtrar y con el filtrado realizar las reacciones de identificación. Al finalizar la práctica, se procede al levantamiento de todos los medios biológicos y materiales de Laboratorio, se desinfecta nuevamente el área de trabajo, se desechan los materiales y que queden en su lugar y en orden luego desinfectarse las manos. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS: Destruida la materia orgánica se realizan las reacciones de reconocimiento, después de haber filtrado la mezcla. Estas reacciones son: Con el Aluminón: En un medio ligeramente acidificado con ácido acético, en un tubo de ensayo se añaden os gotas de reactivo, se alienta a ebullición y se centrifuga. En presencia de aluminio se produce una laca color rosa claro. También se puede realizar esta prueba con medio ligeramente amoniacal o en un medio regulador acético – acetato, debiéndose evitar el exceso de colorante. Al +++ + colorante + NH3 + Aluminón --------------- Laca color rosa claro Con el Carbonato de Sodio: Frente a este reactivo, el aluminio produce un precipitado blanco gelatinoso de hidróxido de aluminio, insoluble en exceso de reactivo, soluble en ácidos y álcalis. Al
+++
+ 3CO3 --------------------- Al (OH)3 + 3CO2
Con los Fosfatos Alcalinos: Los Fosfatos alcalinos al reaccionar con el aluminio forman un precipitado blanco gelatinoso de fosfato de aluminio, insoluble en ácido acético y en exceso de reactivo, soluble en Ácido clorhídrico y en Hidróxido de sodio. Al +++ + PO4 ---------------------- PO4Al.4H2O
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GRÁFICOS:
1. Animal de experimentación rata wister
2. Inyectar 10 ml del tóxico
1
2
4. Colocar las sales de mercurio y agitar
4
7. Una vez finalizado el baño maria dejar enfriar y filtrar.
7
3. Obseravr los síntomas de la rata luego de haber administrado el tóxico
3
5. Extraer y triturar las víceras, colocar 50 perlas de vidrio
6. Llevar a baño maria por 30 minutos con agitación regular
5
6
8. Obtener el filtrado para realizar las reacciones correspondientes
8
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS CON LA SOLUCIÓN PROBLEMA: 1. REACCIÓN CON EL ALUMINÓN: REACCIÓN POSITIVA En un medio ligeramente acidificado con ácido acético, en un tubo de ensayo se añaden os gotas de reactivo, se alienta a ebullición y se centrifuga. En presencia de aluminio se produce una laca color rosa claro. También se puede realizar esta prueba con medio ligeramente amoniacal o en un medio regulador acético – acetato, debiéndose evitar el exceso de colorante. Al +++ + colorante + NH3 + Aluminón ----------- Laca color rosa claro RESULTADO: NEGATIVO
REACCIÓN ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO: Negativo
2. REACCIÓN CON CARBONATO DE SODIO: REACCIÓN POSITIVA Frente a este reactivo, el aluminio produce un precipitado blanco gelatinoso de hidróxido de aluminio, insoluble en exceso de reactivo, soluble en ácidos y álcalis. Al +++ + 3CO3 --------------------- Al (OH)3 + 3CO2 RESULTADO: POSITIVO NO CARACTERÍSTICO
REACCIÓN ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO: Positivo no característico
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3. REACCIÓN CON FOSFATOS ALCALINOS: REACCIÓN POSITIVA Los Fosfatos alcalinos al reaccionar con el aluminio forman un precipitado blanco gelatinoso de fosfato de aluminio, insoluble en ácido acético y en exceso de reactivo, soluble en Ácido clorhídrico y en Hidróxido de sodio. Al +++ + PO4 ---------------------- PO4Al.4H2O RESULTADO: POSITIVO CARACTERÍSTICO (precipitado blanco gelatinoso)
REACCIÓN ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO: Positivo no característico (precipitado blanco gelatinoso)
OBSERVACIONES:
En la realización de ésta práctica al haber administrado los siete mililitros de Solución tóxica de cloruro de aluminio por vía intraperitoneal en la rata wistar y se pudo observar el deceso del animal.
RECOMENDACIONES:
Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar accidentes. Toda sustancia a manipular en la práctica se las debe de realizar bajo la campana extractora de gases.
CONCLUSIONES:
En esta práctica se pudo observar la intoxicación aluminio como cloruro de aluminio y con dosis de veinte mililitros de este tóxico ocasionó la muerte del animal con un tiempo de diez minutos, debido a la alta toxicidad que tiene este compuesto produciendo así diferentes manifestaciones o síntomas como pérdida de la memoria, daño al sistema nervioso central, temblores severos a
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todo el organismo vivo que se intoxique con este tóxico de aluminio. Y así comprobamos que en las reacciones de identificación la presencia del tóxico de cloruro de aluminio.
CUESTIONARIO: 1. CUAL ES EL INTOXICACIÓN ALIMENTICIA
COMPUESTO MÁS CONOCIDO EN LA POR ALUMINIO EN LA INDUSTRIA
El fosfato de aluminio o FA es el fumigante sólido usado como sustancias ideal para la conservación de granos de la cosecha, ya que es altamente tóxico. 2. A QUE DOSIS PODUCE UNA INTOXICACIÓN EL FOSFATO DE ALUMINIO La dosis letal reportada por este gas varia de los 50 a los 500 miligramos sin embargo esta dosis puede ser menor e incluso la inhalación en niños puede ser letal. 3. EN QUÉ CONTINENTE ES MÁS USADO PARA CASOS DE TOXICIDAD DE ALUMINIO COMO FOSFATO DE ALUMINIO Es muy común en zonas rurales como la zona sur del estado de México, que involucra a pacientes jóvenes e incluso niños predominando el sexo femenino, previamente sanos, originarios de medios rurales, nivel socioeconómico generalmente bajo.
GLOSARIO FOSFATO DE ALUMINIO: El fosfato de aluminio (AlPO4) es una sal del ácido fosfórico (o fosfato) de aluminio. Su forma mineral cuando aparece hidratado es la variscita (AlPO4·2 H2O). Se emplea en mezclas para mejorador del pan que funciona como las levaduras. ZONA SUR DE MEXICO: Se encuentra en el Valle de México, en la zona sur de la Cuenca de México, es de alrededor de 8,8 millones de habitantes. DOSIS LETAL: La dosis letal, también conocida por sus siglas en inglés LD, es una forma de expresar el grado de toxicidad de una sustancia
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ANEXOS:
BIBLIOGRAFÍA Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial CientíficoMédico. Madrid. España
AUTORIA Ochoa Verzosa Stefanny Ximena BQF. García González Carlos
FIRMA DE RESPONSABILIDAD:
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FECHA DE ENTREGA: Lunes 21 de Septiembre del 2015
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“