UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA DOCENTE: Bioq. Farm. Carlos García MSc. ESTUDIANTE: Stefanny Ximena Ochoa Verzosa CURSO: Quinto Año PARALELO: “A” GRUPO N°: 7 FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 06/Julio/2015 FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 13/Julio/2015
CALIFICACIÓN:
PRÁCTICA N° 6 TÍTULO DE LA PRÁCTICA:
INTOXICACIÓN POR PLOMO TÓXICO:
Administrar 5 mL (mililitros) de PLOMO
ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Rata wister VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Intraperitoneal T. DE MUERTE: 9 minutos SINTOMAS:
Vómito Cefalea Vértigo Nauseas Somnolencia
TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 8:10 am Hora de muerte: 8:19 am Hora de disección: 8:24 am Hora del baño maría: 8:35 am Finalización del baño maría: 9:05 am Final de la práctica: 10:30 am
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA: 1. Observar la reacción que presenta el animal de experimentación ante la Intoxicación por Plomo. 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el toxico y adquirir la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de identificación. MATERIALES:
Mandil Mascarilla desechable Guantes desechables Gorro desechales Pipeta 10 mL Tubos de ensayo Pinza para tubos de ensayo Fósforos Bisturí Varilla de vidrio Jeringa de 10 mL Agitador de vidrio Vaso de precipitación 250 mL Mechero de Alcohol Probeta de 50 Ml Gradillas Equipo de destilación Zapatones desechables Espátula Panema Tabla de disección Equipo de disección
SUSTANCIAS:
Agua destilada Solución de Plomo Cromato de Potasio Yoduro de potasio Difenil tio carbazona Tetrametil diamina metano Bencidina
difenil
MUESTRAS:
Muestra de medios biológicos
EQUIPOS:
Equipo de destilación Balanza analítica
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
PROCEDIMIENTO: 1. Inmediatamente al ingreso de los estudiantes al Laboratorio de Toxicología se debe equipar adecuadamente con mandil largo para Laboratorio limpio y sin manchas, gorro desechable, mascarillas desechables, guantes desechables y zapatones. Todo esto se realiza siguiendo las normas del Laboratorio para evitar posibles contaminaciones y contribuir con el orden. 2. Desinfectar el área de trabajo para realizar la práctica de control de calidad de un producto farmacéutico sólido, siempre se debe tener limpio el mesón de trabajo y tener listo a disposición los respectivos materiales que se utilizaran en la práctica correspondiente en el Laboratorio de Toxicología. 3. Se procede a la administración del tóxico en este caso es el Cloroformo también, la dosis es diez mililitros al animal en experimentación que es la rata wister. 4. Se prepara la solución tóxica de Clorofromo empleando una jeringa de diez mililitros, la vía de administración es intraperitoneal y una vez transcurrido el tóxico al animal en experimentación, se observan los síntomas inmediatamente como son convulsiones y una muerte rápida. 5. A dosis de cinco mililitros a causado la muerte del animal, se procede a realizar una incisión con ayuda de un bisturí estéril. Con un bisturí se disecciona todo el dorso del animal evitando perforar las vísceras luego se recogen las vísceras en un vaso de precipitación. 6. Observamos los cambios que presentan sus órganos y con la ayuda de una jeringuilla se recoge el líquido que hay en su cavidad abdominal y agregamos las 50 perlas de vidrio mas 2g KClO3 con 25ml de HCl concentrado, llevamos a baño maría por 30 minutos con agitación regular. 7. Luego 5 minutos antes de que se cumpla el tiempo establecido añadir 2g más KClO3. Una vez finalizado el baño maría dejar enfriar, filtrar y con el filtrado realizar las reacciones de identificación. 8. Al finalizar la práctica, se procede al levantamiento de todos los medios biológicos y materiales de Laboratorio. Se desinfecta nuevamente el área de trabajo, se desechan los materiales y que queden en su lugar y en orden luego desinfectarse las manos.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS: El líquido proveniente de la destrucción de la materia orgánica, es tratado con amoniaco para disminuir la acidez y luego se realizan las reacciones de identificación que a continuación se detallan. 1) Reacción con el Cromato de Potasio.- Se pone una porción del líquido en un tubo de ensayo, o en una cápsula de porcelana, se neutraliza con hidróxido de sodio, luego se acidifica con ácido acético y se trata con solución de cromato de potasio, obteniéndose un precipitado amarillo de cromato de potasio. Pb (NO3)2 + K2CrO4 --------------- CrO4Pb + 2KNO3 2) Reacción con el Yoduro de Potasio.- Con este reactivo en solución, al hacerlo reaccionar con la muestra que contenga plomo, se debe producir un precipitado amarillo cristalino de l2Pb soluble en caliente con agua y precipilable en frío como agujillas amarillas. Pb (NO3)2 + 2IK --------------- PbI2 + 2KNO3 3) Reacción con la DifeniltioCarbazona.- Esta sustancia disuelta en tetracloruro de carbono al reaccionar con el plomo produce un color rojo. 4) Reacción con el Ácido Sulfúrico.- En solución diluida, produce un precipitado blanco de sulfato de plomo; este precipitado después de ser lavado se le adicionan gotas de una mezcla de cloruro estannoso, yoduro de potasio y nitrato de cadmio, hasta que se disuelva el ptecipnado produce un color anranjado. 5) Reacción con el Tetrametildiaminodifenilmetano.- En solución acética. Para realizar esta reacción, se humedece el papel filtro en algunas gotas de solución amoniacal de peróxido de hidrógeno al 3%, se agregan al papel unas pequeñas gotas de la solución muestra; el papel Oro humedecido se lo coloca sobre un vidrio de reloj y se calienta a baño de maría para eliminar el exceso de peróxido y precipitar al plomo corno óxido de plomo. Así, se hace caer sobre el papel una gota de reactivo cerca de la zona donde se dejó caer las gotas de muestra. En caso positivo, en el punto de contacto aparece un color azul por la formación del hidrosol respectivo. 6) Reacción con Bencidina.- A 1 ml de la solución muestra se añade hidróxido de sodio hasta que la Mezcla de reacción francamente alcalina (si aparece algún precipitado se centrifuga para separarlo). A la solución clara se añade 1/2 ml de peróxido de hidrógeno al 3%, se hierve un momento, se separa y lava el precipitado (por centrifugación o filtración) con agua y finalmente se añaden gotas de bencidina sobre el precipitado. Un color azul nos indica, la presencia de plomo. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
GRÁFICOS: 1. Animal de experimentación rata wister
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2. Inyectar 10 ml del tóxico
3. Obseravr los síntomas de la rata luego de haber administrado el tóxico
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4. Colocar la rata en la tabla de disección
4
5. Extraer y triturar las víceras, colocar 50 perlas de vidrio
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7. Una vez finalizado el baño maria dejar enfriar
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6. Llevar a baño maria por 30 minutos con agitación regular
8. Obtener el filtrado para realizar las reacciones correspondientes
8
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS CON LA SOLUCIÓN PROBLEMA: 1. REACCIÓN CON EL CROMATO DE PATASIO: REACCIÓN POSITIVA Se neutraliza con NaOH y se acidula con ácido acético se formará un precipitado amarillo de cromato de potasio REACCIÓN DE PRECIPITACIÓN: Pb (NO3)2 + K2CrO4 ----------------- CrO4Pb + 2KNO3
RESULTADO: Positivo Característico
REACCIÓN ANTES
DESPÚES RESULTADO: Positivo característico
2. REACCIÓN CON YODURO DE POTASIO: REACCIÓN POSITIVA Se forma un precipitado amarillo cristalino de Yoduro de Plomo II soluble en caliente con agua. REACCIÓN DE COLORACIÓN: Pb (NO3)2 + 2IK ---------------- PbI2 + 2KNO3
RESULTADO: Positivo No Característico
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES Resultado Positivo no Característico
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
3. REACCIÓN CON DIFENIL TIO CARBAZONA: REACCIÓN POSITIVA Al agregar tetracloruro de carbono se formará una coloración rojiza. REACCIÓN DE COLORACIÓN: Sol. Plomo + Tetracloruro de carbono = Coloración rojiza
RESULTADO: Positivo Característico
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES Resultado Positivo Característico
4. REACCIÓN CON EL ÁCIDO SULFÚRICO: REACCIÓN POSITIVA Produce un precipitado blanco de Sulfato de Plomo al adicionar los reactivos se disuelve produciendo un color anaranjado REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Sol. Plomo + SnCl2 + KI+ Ca(NO3)2 = Precipitado blanco de PbSO4 se disuelve produciendo color anaranjado RESULTADO: Positivo No Característico
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES Resultado Positivo No Característico
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
5. REACCIÓN CON TETRAMETIL DIAMINA DIFENIL METANO: REACCIÓN POSITIVA En solución acética se agrega Peróxido de Hidrógeno y precipita el plomo como óxido de plomo y al humeder el papel indicador se tornará de color azul por formación del hidrosol respectivo. REACCIÓN DE COLORACIÓN: Sol. Plomo + H2O2 + = PbO (Óxido de Plomo) el papel se colorea de azul
RESULTADO: Positivo Característico
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES Resultado Positivo Característico
6. REACCIÓN CON LA BENCIDINA: REACCIÓN POSITIVA Se adiciona Peróxido de Hidrógeno y bencidicina se formará un precipitado dando también color azul a la reacción REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Sol. Plomo + H2O2 + Bencidina = Precipitado de color azul RESULTADO: Positivo No Característico
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES Resultado Positivo No Característico
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
OBSERVACIONES:
Esta vez el tiempo de muerte se prolongo mas de los esperado debido a que el cloroformo no es un toxico altamente peligroso y al momento de armar el equipo de destilación hay que tener mucho cuidado ya que son equipos de altos costos. A la solución madre de medios biológicos se le adiciona dos gramos de KClO3 solo para identificar plomo.
RECOMENDACIONES:
Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar accidentes. Toda sustancia a manipular en la práctica se las debe de realizar bajo la campana extractora de gases. Culminada la práctica se debe dejar el área de trabajo desinfectada, para evitar contaminación con las sustancias químicas utilizadas.
CONCLUSIONES:
En esta práctica se pudo observar la intoxicación que tiene el plomo con 5 ml de este en el cual ocasionó la muerte del animal con un tiempo de nueve minutos, debido a su toxicidad que tiene este compuesto produciendo así diferentes manifestaciones.
CUESTIONARIO: 1. ¿Qué es el plomo? El plomo es un metal pesado es flexible, inelástico, se funde con facilidad, las valencias químicas normales son 2 y 4. Es relativamente resistente al ataque de los ácidos sulfúrico y clorhídrico. Pero se disuelve con lentitud en ácido nítrico. El plomo es anfótero, ya que forma sales de plomo de los ácidos, así como sales metálicas del ácido plúmbico. El plomo forma muchas sales, óxidos y compuestos organometálicos. 2. ¿Los efectos del ambiente en el plomo? El Plomo ocurre de forma natural en el ambiente, pero las mayores concentraciones que son encontradas en el ambiente son el resultado de las actividades humanas. Debido a la aplicación del plomo en gasolinas un ciclo no natural del Plomo tiene lugar.
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3. ¿Qué efectos produce el plomo en la salud?
Daño a los riñones Abortos y abortos sutiles Perturbación del sistema nervioso Daño al cerebro Disminución de la fertilidad del hombre a través del daño en el esperma Disminución de las habilidades de aprendizaje de los niños Perturbación en el comportamiento de los niños, como es agresión, comportamiento impulsivo e hipersensibilidad. El Plomo puede entrar en el feto a través de la placenta de la madre. Debido a esto puede causar serios daños al sistema nervioso y al cerebro de los niños por nacer
INVESTIGACIÓN BIBLIOGRÁFICA: INTOXICACIÓN POR PLOMO El plomo es un elemento químico de la tabla periódica, cuyo símbolo es Pb (del latín plumbum) y su número atómico es 82 según la tabla actual, ya que no formaba parte en la tabla de DmitriMendeléyev. Este químico no lo reconocía como un elemento metálico común por su gran elasticidad molecular. Cabe destacar que la elasticidad de este elemento depende de la temperatura ambiente, la cual distiende sus átomos, o los extiende. El plomo es un metal pesado de densidad relativa o gravedad específica 11,4 a 16 °C, de color plateado con tono azulado, que se empaña para adquirir un color gris mate. Es flexible, inelástico y se funde con facilidad. Su fusión se produce a 327,4 °C y hierve a 1725 °C. Las valencias químicas normales son 2 y 4. Es relativamente resistente al ataque del ácido sulfúrico y del ácido clorhídrico, aunque se disuelve con lentitud en ácido nítrico y ante la presencia de bases nitrogenadas. El plomo es anfótero, ya que forma sales de plomo de los ácidos, así como sales metálicas del ácido plúmbico. Tiene la capacidad de formar muchas sales, óxidos y compuestos organometálicos. El plomo se encuentra en: Pintura casera antes de 1978. Incluso si la pintura no se está pelando, puede ser un problema. La pintura a base de plomo es muy peligrosa cuando se está quitando o lijando, ya que estas acciones liberan polvo de plomo diminuto al aire. Los bebés y niños que viven en casas construidas antes de 1960 (cuando la pintura a menudo contenía plomo) tienen el
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mayor riesgo de intoxicación con plomo, dado que los niños pequeños con frecuencia ingieren astillas o polvo de pintura a base de plomo.
Juguetes y muebles pintados antes de 1976. Juguetes pintados y decoraciones fabricados fuera de los Estados Unidos. Perdigones de plomo, plomadas de pesca, pesos de cortina. Artículos de plomería, tuberías, grifos. El plomo se puede encontrar en el agua potable en casas cuyos tubos hayan sido conectados con soldadura de plomo. Aunque los nuevos códigos de la construcción exigen soldadura libre de plomo, este elemento aún se encuentra en algunos grifos modernos. Suelo contaminado por décadas de emisiones de los carros o años de raspaduras de pinturas de las casas. Por esto, el plomo es más común en los suelos cerca de las autopistas y las casas. Pasatiempos que impliquen soldadura, vidrio de color, fabricación de joyas, barnizado de cerámica, figuras de plomo en miniatura (siempre mire las etiquetas). Elementos de pintura y suministros de arte para los niños (siempre mire las etiquetas). Jarras y vajillas de peltre. Baterías de almacenamiento.
EFECTOS AMBIENTALES DEL PLOMO El Plomo ocurre de forma natural en el ambiente, pero las mayores concentraciones que son encontradas en el ambiente son el resultado de las actividades humanas. Debido a la aplicación del plomo en gasolinas un ciclo no natural del Plomo tiene lugar. En los motores de los coches el Plomo es quemado, eso genera sales de Plomo (cloruros, bromuros, óxidos) se originarán. Estas sales de Plomo entran en el ambiente a través de los tubos de escape de los coches. Las partículas grandes precipitarán en el suelo o la superfice de aguas, las pequeñas partículas viajarán largas distancias a través del aire y permanecerán en la atmósfera. Parte de este Plomo caerá de nuevo sobre la tierra cuando llueva. Este ciclo del Plomo causado por la producción humana está mucho más extendido que el ciclo natural del plomo. Este ha causad contaminación por Plomo haciéndolo en un tema mundial no sólo la gasolina con Plomo causa concentración de Plomo en el ambientel. Otras actividades humanas, como la combustión del petróleo, procesos industriales, combustión de residuos sólidos, también contribuyen.
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EFECTOS DEL PLOMO EN NUESTRO ORGANISMO El plomo puede causar varios efectos no deseados, como son: Perturbación de la biosíntesis de hemoglobina y anemia. Incremento de la presión sanguínea. Daño a los riñones. Aborto espontáneo Perturbación del sistema nervioso. Daño al cerebro. Disminución de la fertilidad del hombre a través del daño en el esperma. Disminución de las habilidades de aprendizaje de los niños. Perturbación en el comportamiento de los niños, como es agresión, comportamiento impulsivo e hipersensibilidad. Alteraciones graves en la propiocepción, equilibriocepción, nocicepción y electrocepción, magnetocepción, ecolocalización en ciertos animales. La formación de depositos plúmbicos en las encias que forman una línea de color gris claro azulado llamada "la línea del plomo" o "la línea de Burton". El plomo puede entrar en el feto a través de la placenta de la madre. Debido a esto puede causar serios daños al sistema nervioso y al cerebro de los niños por nacer.
GLOSARIO Bencidina: es un producto manufacturado que no se encuentra naturalmente en el medio ambiente. Es un sólido cristalino de color amarillo grisáceo, blanco o rojo grisáceo. La bencidina se usó para producir tinturas para telas, papel y cuero. Hipersensibilidad: clásicamente se refiere a una reacción inmunitaria exacerbada que produce un cuadro patológico causando trastornos, incomodidad y a veces, la muerte súbita. Cromato de potasio: es un sólido cristalino de color amarillo limón, muy estable y soluble en agua. Es una sal tóxica y ecotóxica, como muchas sales de cromo.
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ANEXOS:
BIBLIOGRAFÍA Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial CientíficoMédico. Madrid. España
AUTORIA BQF. Carlos García González
FIRMA DE RESPONSABILIDAD:
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FECHA DE ENTREGA: Lunes 12 de Julio del 2015
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