UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA DOCENTE: Bioq. Farm. Carlos García MSc. ESTUDIANTE: Stefanny Ximena Ochoa Verzosa CURSO: Quinto Año PARALELO: “A” TRIMESTRE: Segundo GRUPO N°: 7 FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 03/Agosto/2015 FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes,17/Agosto/2015
CALIFICACIÓN:
PRÁCTICA N° 9 TÍTULO DE LA PRÁCTICA:
INTOXICACIÓN POR CADMIO TÓXICO:
Administrar 5 mL (mililitros) del Tóxico Cadmio
ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Rata wistar VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Intraperitoneal T. DE MUERTE: 9 minutos SINTOMAS:
Diarrea, Vómito, Convulsiones.
TIEMPOS:
CADMIO
Inicio de la práctica: 8:10 am Hora de muerte: 8:19 am Hora de disección: 8:24 am Hora del baño maría: 8:35 am Finalización del baño maría: 9:05 am Final de la práctica: 10:30 am
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA: 1. Observar la reacción que presenta el animal de experimentación ante la Intoxicación por Cadmio. 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el toxico y adquirir la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de identificación. MATERIALES:
Mandil Mascarilla desechable Guantes desechables Gorro desechales Pipeta 10 mL Tubos de ensayo Pinza para tubos de ensayo Fósforos Bisturí Varilla de vidrio Jeringa de 10 mL Agitador de vidrio Vaso de precipitación 250 mL Mechero de Alcohol Probeta de 50 Ml Gradillas Equipo de destilación Zapatones desechables Espátula Panema Tabla de disección Equipo de disección
SUSTANCIAS:
Agua destilada Solución de Cadmio Ácido Clorhídrico concentrado, Hidróxido de sodio, Hidróxido de amonio, Cianuro de sodio, Gas sulfhídrico.
MUESTRAS:
Muestra de medios biológicos
EQUIPOS:
Equipo de destilación Balanza analítica
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
PROCEDIMIENTO: 1. Inmediatamente al ingreso de los estudiantes al Laboratorio de Toxicología se debe equipar adecuadamente con mandil largo para Laboratorio limpio y sin manchas, gorro desechable, mascarillas desechables, guantes desechables y zapatones. Todo esto se realiza siguiendo las normas del Laboratorio para evitar posibles contaminaciones y contribuir con el orden. 2. Desinfectar el área de trabajo para realizar la práctica Toxicología, siempre se debe tener limpio el mesón de trabajo y tener listo a disposición los respectivos materiales que se utilizaran en la práctica correspondiente en el Laboratorio de Toxicología. 3. Se procede a la administración del tóxico en este caso es el Cadmio, la dosis es cinco mililitros al animal en experimentación que es la rata wistar. 4. Se prepara la solución tóxica de Cadmio y empleando una jeringa de diez mililitros se ingresa por la vía de administración intraperitoneal y una vez transcurrido el tóxico se observan los síntomas inmediatamente como son convulsiones y una muerte rápida. 5. A dosis de cinco mililitros causa la muerte del animal en experimentación, se procede a realizar una incisión con ayuda de un bisturí estéril. Con un bisturí se disecciona todo el dorso del animal evitando perforar las vísceras luego se recogen las vísceras en un vaso de precipitación. 6. Observamos los cambios que presentan sus órganos y con la ayuda de una jeringuilla se recoge el líquido que hay en su cavidad abdominal y agregamos las 50 perlas de vidrio, 2 gramos de KClO3 y 25 mililitros de HCl concentrado y llevamos a baño maría por 30 minutos. 7. Luego 5 minutos antes de que se cumpla el tiempo establecido añadir 2g más KClO3. Una vez finalizado el baño maría, dejar enfriar, filtrar y con el filtrado realizar las diferentes reacciones de reconocimiento. 8. Al finalizar la práctica, se procede al levantamiento de todos los medios biológicos y materiales de Laboratorio. Se desinfecta nuevamente el área de trabajo, se desechan los materiales y que queden en su lugar y en orden luego desinfectarse las manos.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS: El líquido proveniente de la destrucción de la materia orgánica, es tratado con amoniaco para disminuir la acidez y luego se realizan las reacciones de identificación que a continuación se detallan. 1. A una pequeña porción de la muestra , agregar algunas gotas de hidróxido de sodio Na(OH)-, en caso positivo , se debe formar un precipitado blanco de Cd(OH)2
Cl2Cd+Na (OH)
2.
Cd (OH)2+2Cl-+2Na+
A otra pequeña cantidad de muestra , se le adiciona gotas de hidróxido de amonio (NH4OH), observamos que se produce un precipitado blanco de Cd(OH)2, , el mismo que es soluble en exceso de reactivo ya que se forma el complejo [Cd (NH3)4]=. Cl2Cd + NH4 (OH)
Cd (OH)2+2Cl-+2NH4+
Cd (OH)2 + NH4(OH)
[Cd (NH3)4]++
3. Cuando a una pequeña cantidad de muestra que contiene cadmio, se la hace reaccionar con unas cuantas gotas de cianuro de sodio (CNNa) , debe producir un precipitado blanco de (CN)2Cd, el mismo que es soluble en exceso de reactivo por formación de complejo [Cd (CN)4] . Cl2Cd + CNNa (CN) 2Cd + CNNa
(CN) 2Cd +2Cl-+2Na+ [Cd (CN)4]
4. Al hacer circular a una pequeña cantidad de muestra una buena corriente de gas sulfhídrico, se observa la formación de un precipitado color amarillo intenso por formación de SCd. El mismo que es insoluble en exceso de reactivo, y soluble en NO3H diluido y caliente, dejando un depósito de azufre coloidal. Cl2Cd + SH2
SCd +2H +2Cd-
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
GRÁFICOS: 1. Animal de experimentació n rata wister
3. Obseravr los síntomas luego de haber administrado el tóxico
2. Inyectar 10 ml del tóxico
2
1
4. Colocar la rata en la tabla de disección
4
3
5. Extraer y triturar las víceras, colocar 50 perlas de vidrio
6. Llevar a baño maria por 30 minutos con agitación regular
5
7. Una vez finalizado el baño maria dejar enfriar
7
6
8. Obtener el filtrado para realizar las reacciones correspondientes
8
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS CON LA SOLUCIÓN PROBLEMA: 1. REACCIÓN CON EL HIDRÓXIDO DE SODIO: REACCIÓN POSITIVA A una pequeña porción de la muestra , agregar algunas gotas de hidróxido de sodio Na(OH)-, en caso positivo , se debe formar un precipitado blanco de Cd(OH)2 REACCIÓN DE PRECIPITACIÓN:
Cl2Cd+Na (OH)
Cd (OH)2+2Cl-+2Na+ RESULTADO: Negativo: No cambios de coloración ni precipitación
ANTES: Reacción de coloración
DESPÚES RESULTADO: Negativo ningún cambio de coloración
2. REACCIÓN CON HIDRÓXIDO DE AMONIO: REACCIÓN POSITIVA A otra pequeña cantidad de muestra , se le adiciona gotas de hidróxido de amonio (NH4OH), observamos que se produce un precipitado blanco de Cd(OH)2, , el mismo que es soluble en exceso de reactivo ya que se forma el complejo [Cd (NH3)4]=. REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Cl2Cd + NH4 (OH) Cd (OH)2+2Cl-+2NH4+ Cd (OH)2 + NH4(OH) [Cd (NH3)4]++ RESULTADO: Positivo No Característico
ANTES Reacción de coloración:
RESULTADO: Positivo No Carcateristico hay cambio de coloración a café intenso
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
3. REACCIÓN CON CIANURO DE SODIO: REACCIÓN POSITIVA Cuando a una pequeña cantidad de muestra que contiene cadmio, se la hace reaccionar con unas cuantas gotas de cianuro de sodio (CNNa) , debe producir un precipitado blanco de (CN)2Cd, el mismo que es soluble en exceso de reactivo por formación de complejo [Cd (CN)4] REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Cl2Cd + CNNa (CN) 2Cd +2Cl-+2Na+ (CN) 2Cd + CNNa [Cd (CN)4] RESULTADO: Positivo No Característico cambio de coloración a café marrón intenso
DESPÚES: Resultado Positivo No Característico cambio de coloración a marrón intenso
ANTES Reacción de coloración:
4. REACCIÓN CON GAS SULFHÍDRICO: REACCIÓN POSITIVA Al hacer circular a una pequeña cantidad de muestra una buena corriente de gas sulfhídrico, se observa la formación de un precipitado color amarillo intenso por formación de SCd. El mismo que es insoluble en exceso de reactivo, y soluble en NO3H diluido y caliente, dejando un depósito de azufre coloidal. REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Cl2Cd + SH2
SCd +2H +2Cd-
RESULTADO: Positivo No Característico Precipitado amarillo
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES Resultado: Positivo No Característico con precipitado amarillo
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
OBSERVACIONES:
A la solución madre de medios biológicos se le adiciona dos gramos de KClO3 solo para identificar cadmio. El cadmio es un toxico altamente peligroso debido a su interacción inmediata dentro del organismo produciendo la muerte instantánea.
RECOMENDACIONES:
Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar accidentes. Obtener una buena cantidad del destilado para así realizar las diferentes reacciones de reconocimiento.
CONCLUSIONES:
En esta práctica se pudo observar la intoxicación que tiene el Cadmio con 5 ml de este en el cual ocasionó la muerte del animal con un tiempo de nueve minutos, debido a su toxicidad que tiene este compuesto produciendo así diferentes manifestaciones.
CUESTIONARIO: 1) ¿CUALES SON LOS CASOS DE INTOXICACIÓN AGUDA POR CADMIO? Agudos: fiebre de vapores de metal (metal fume fever) causada por una exposición severa; los síntomas son equivalentes a los de la gripe en 24 horas se desarrolla un edema pulmonar agudo. 2) ¿CUALES SON LOS CASOS DE INTOXICACIÓN CRÓNICAPOR CADMIO? Crónicos: la consecuencias más seria del envenenamiento por Cadmio es el cámcer, los efectos crónicos que primero se observan son daño en los riñones. 3) ¿QUE TRATAMIENTO PUEDE SUMINISTRAR A UNA PERSONA INTOXICADA CON CADMIO? Intoxicación aguda: lavado gástrico (carbón activado no es de utilidad) y reposición electrolítica, administrando antídote específico. Intoxicación crónica: antídoto específico (EDTACa 50mg/kg/día en solución dextrosa al 5% por vía intravenosa lenta (5 horas) durante 5 días. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
GLOSARIO Carbón activado: El carbón activado es un producto obtenido a partir del carbón amorfo de origen vegetal o mineral, el cual se ha sometido a un tratamiento, que atrapa compuestos, principalmente orgánicos, presentes en un gas o en un líquido. Solución de dextrosa: La dextrosa (glucosa) es la forma en que el organismo utiliza los carbohidratos de la dieta alimenticia. Las soluciones isotónicas se usan para suministra a pacientes en estado débil.
ANEXOS:
BIBLIOGRAFÍA Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial CientíficoMédico. Madrid. España AUTORIA BQF. Carlos García González FIRMA DE RESPONSABILIDAD:
----------------------------------------------FECHA DE ENTREGA: Lunes 17 de Agosto del 2015 “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“