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Cuidados no manuseio do botijão de sêmen Muitos fazendeiros e técnicos de inseminação artificial têm dúvidas sobre o uso do botijão criogênico para a armazenagem e o transporte de sêmen congelado, única forma de conservar o material genético adquirido de uma central de tecnologia de sêmen bovino. Nesta seção serão respondidas algumas perguntas que chegaram ao departamento técnico da ABS Pecplan, demonstrando que os conhecimentos sobre estocagem e transporte do botijão são poucos e o sucesso de um programa de inseminação artificial começa no manuseio adequado do sêmen.
1. Como surgiu o botijão criogênico para conservação do sêmen congelado? Na década de 1950 o fundador da ABS, John Rockefeller Prentice tornou-se interessado no uso do nitrogênio líquido para a conservação do sêmen bovino na temperatura de -196ºC, quando vislumbrou a grande aplicação do sêmen congelado para o crescimento da inseminação artificial. A mistura do gelo seco (dióxido de carbono) e o álcool absoluto na temperatura de -79ºC era a principal forma de conservar o sêmen congelado naquele tempo. Após a primeira tentativa feita pela Corning Company para desenvolver um frasco isotérmico feito de vidro revestido com metal, para conservar o nitrogênio líquido, “Rock” Prentice então com seus próprios recursos financeiros, recrutou a Divisão Linde da Union Carbide para fabricar um frasco de Dewar feito de aço inoxidável. Os primeiros modelos, usados por muitos anos, não precisavam reabastecer com nitrogênio líquido por até 4 semanas. Graças aos novos sistemas de super isolamento, uso do alumínio e desenhos melhores, os recipientes tornaram-se mais leves, com baixo custo de recarga, podendo permanecer até 4 meses sem recarga de nitrogênio líquido.
2. Como o botijão criogênico é construído? Os botijões para armazenagem de sêmen são recipientes isotérmicos, com duas camadas de metal (alumínio) como “um botijão dentro de outro botijão”, com material isolante (folhas de alumínio e lã de vidro) e vácuo entre as capas internas e externas, semelhante a uma garrafa térmica. Os botijões para uso no campo possuem 6 canecos, com capacidade para receber de 10 a 12 raques. Cada raque tem capacidade para 10 palhetas médias ou 20 palhetas finas. O botijão recebe o nitrogênio líquido, que conserva o sêmen congelado a uma temperatura de -196ºC (cento e noventa e seis graus centígrados negativos) por tempo indeterminado, desde que se mantenha um determinado nível mínimo do líquido refrigerante, abastecendo-o
periodicamente,
conforme
recomendação do fabricante do equipamento.
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3. Onde e como devo guardar o botijão na minha
4. Qual o nível mínimo de nitrogênio líquido no
propriedade?
botijão e por quê?
O botijão criogênico deve ser guardado em local
Os botijões criogênicos estão disponíveis em diversos
ventilado, limpo, seco e ao abrigo do sol, de preferência
tamanhos, com diferentes capacidades para nitrogênio
sobre uma grade de madeira ou plástico para evitar
líquido. Porém, os modelos mais comuns são aqueles
possível corrosão devido ao contato do metal com
de 20 litros, para armazenar em torno de 600 palhetas
o cimento. Ele deve ser manuseado com o máximo
médias ou 1200 palhetas finas. O nível do nitrogênio
cuidado para evitar danos que possam resultar em
líquido é medido com a régua plástica adequada,
amassamento ou furo da capa externa e deslocamento
onde deve estar com 33 cm quando cheio (20 litros).
do gargalo, que pode ocasionar a perda prematura
A altura mínima é de 15 cm de nitrogênio liquido (em
do nitrogênio líquido. Para diminuir os riscos com o
torno de 9 litros), e é extremamente importante que
botijão, é aconselhável a construção de uma caixa
neste nível ele seja imediatamente reabastecido. Na
de madeira ou plástico para seu acondicionamento,
medida em que o nitrogênio líquido evapora, ocorre
evitando que sofra choques ou movimentos muito
uma troca de temperatura do meio ambiente para
bruscos, além de tombamento derramando todo o
dentro da câmara onde estão as doses de sêmen.
seu conteúdo. A caixa deve conter uma camada de
Toda a vez que o técnico inseminador ergue o
5 cm de isopor no fundo e uma forração nas laterais
caneco para retirar o sêmen, mais ar entra na câmara
para evitar riscos e avarias. A tampa da caixa pode ser
ocorrendo mais evaporação. No gargalo do botijão
vazada para possibilitar a visualização do botijão.
a temperatura fica próxima de -100ºC e na boca do botijão ela está na temperatura ambiente, crítica para
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o sêmen e onde poderão ocorrer danos irreversíveis se
proteção durante o seu manuseio. Em caso de estar
a dose não for retirada rapidamente.
em ambiente pouco ventilado, abra a porta para que o vapor do nitrogênio se dissipe para o meio ambiente.
5. Como devo reabastecer o botijão com nitrogênio líquido?
6. Para que servem as ampolas monitoras?
Quando o seu botijão estiver com 15 cm de nitrogênio,
Os botijões comercializados pela ABS Pecplan são
deve ser reabastecido imediatamente. Caso baixe
acompanhados de uma raque com duas ampolas
para 10 cm, significa que possui 5,5 litros restantes. Se
monitoras (uma azul e outra vermelha), que servem para
a capacidade é de 20 litros, faltam aproximadamente
monitorar a possível falta de nitrogênio liquido. Quando
15 litros para completá-lo. Nesse nível de 10 cm a
a ampola monitora azul estiver descongelada o sêmen
evaporação é maior ainda pela troca de ar com o
provavelmente está bom, mas é recomendável
ambiente toda a vez que removemos a tampa do
avaliá-lo
botijão para erguer o caneco. Então como regra
ampola monitora vermelha estiver descongelada,
geral, abasteça seu botijão o mais rápido possível,
provavelmente o sêmen está danificado e deve ser
quando atingir 15 cm de nível de nitrogênio líquido.
avaliado imediatamente. Nunca retira a raque com as
O botijão deve ser reabastecido pelos representantes
ampolas monitoras do botijão.
da ABS Pecplan, que estão habilitados para lidar com o nitrogênio líquido. Tome cuidado ao reabastecêlo porque o nitrogênio líquido é muito frio e provoca queimaduras quando em contato com a pele. O recomendado é utilizar luvas apropriadas e óculos de
num
laboratório.
Quando
também
a
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7. Como devo manusear o sêmen durante a sua retirada do botijão? Para evitar manuseios desnecessários, deve ser feito um inventário detalhado do sêmen, para que as palhetas possam ser localizadas facilmente e retiradas rapidamente do botijão, evitando exposição á temperatura ambiente. Toda a raque contém o número de identificação do touro na central, o que facilita a localização do sêmen. O caneco que contém o sêmen deverá ser levantado até no máximo 5 cm abaixo da boca do botijão para que a dose seja retirada. Neste manuseio é essencial o uso de uma boa pinça para remover a palheta. O tempo
8. Por que devo evitar a exposição do sêmen à temperatura ambiente?
máximo para a total retirada do sêmen de seu interior,
Porque as alterações causadas nos espermatozóides
não deve ser mais que 5 segundos para qualquer
tanto
tipo de embalagem (palheta media ou fina). Caso
citoplasmáticas, ocorrem acima de -79ºC. Estas lesões
não consiga identificar o sêmen e retirá-lo em cinco
não voltam ao normal depois que o sêmen retorna
segundos, deve-se abaixar a caneca até o fundo do
para a temperatura do nitrogênio líquido. A palheta
botijão e 10 segundos depois, recomeçar a operação.
fina é mais sensível e manuseios errados provocam
Após retirar o sêmen do botijão nunca o deixe sem a
alterações na temperatura interna da palheta, com
tampa, para evitar evaporação do nitrogênio líquido.
perda na qualidade e redução da fertilidade. O
na
motilidade
com
nas
membranas
sêmen sexado é envasado em palhetas finas (0,22 mL), contendo 2,1 milhões de espermatozóides. O menor diâmetro e a menor concentração a tornam mais sensível a erros de manuseio. Lembre-se que a temperatura ambiente afeta o tempo de exposição do sêmen na boca do botijão. Em temperaturas ambientes de 36ºC os efeitos são mais prejudiciais do que em temperaturas ambientes a 18ºC, por exemplo. Correntes de vento direto na boca do botijão de sêmen também prejudicam a qualidade do sêmen.
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9. Como devo fazer para transferir as raques ou os
10. Quais os cuidados no transporte do botijão de
canecos com sêmen de um botijão para outro?
sêmen?
Quando for necessário fazer a troca de raques de um
Os botijões criogênicos devem ser transportados com
botijão para outro, coloque os botijões um ao lado
muito cuidado, firmemente amarrados na caçamba
do outro. Para fazer esta operação são necessárias
do veículo, para evitar que tombe e derrame o
duas pessoas, sendo que uma levanta o caneco
nitrogênio líquido. De preferência transportá-los na
até o gargalo, o suficiente para apanhar a raque a
própria caixa de proteção. Não devemos transportar
transferir, baixando-o imediatamente até o fundo do
botijões em carros de passeio, porque com os vidros
botijão, enquanto a outra pessoa levanta o caneco
fechados o nitrogênio líquido ao evaporar, torna-se um
do outro botijão para introduzir a raque e colocar o
gás asfixiante pela remoção do oxigênio do ambiente,
mesmo imediatamente na sua posição. Os canecos
podendo provocar desmaios e morte nos casos mais
com as raques não devem ser levantados a uma altura
graves. Ao movimentá-lo fazer sempre com duas
superior a 5 cm abaixo do gargalo do botijão, devendo
pessoas para evitar tombamentos e danificar a sua
ser mantidos a esta altura o mínimo tempo possível.
estrutura interna.
Sendo necessário tempo adicional, desça o caneco durante 10 segundos para que volte à temperatura do nitrogênio líquido. A raque não pode ser exposta à temperatura ambiente por mais de 10 segundos.
Lembre-se: seu botijão criogênico é o cofre onde estão guardadas as doses de sêmen dos reprodutores valiosos que você escolheu para suas vacas. Então guarde-o com muito cuidado e usufrua dos seus Para a transferência de canecos entre botijões os procedimentos são muito semelhantes à transferência de raques. Os botijões devem ser colocados um ao lado do outro e depois de retiradas as tampas, deve-se proceder com rapidez a transferência de cada caneco. O tempo de exposição do caneco a temperatura ambiente não deve exceder 15 segundos, porque o caneco não conserva nitrogênio líquido no seu interior. Devemos tomar cuidado no encaixe dos canecos no aro separador do fundo do botijão e também no encaixe da alça do caneco no número do aro da boca do botijão. Esta mesma operação deve ser realizada com todos os canecos a transferir, terminando a operação com rapidez, precisão e cuidado.
benefícios. Mande suas dúvidas para serem respondidas pela equipe de especialistas da ABS: neimar@absnet. com.br