Test de connaissances

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Biochimie SNV, Li, FSB, USTHB GLUCIDES- LIPIDES –PROTEINES -ENZYMOLOGIE

2010-2011

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Test d'évaluation des connaissances Recommandations: -Lire attentivement ce qui suit avant de répondre aux questions. -Les réponses doivent obligatoirement être transcrites sur la grille ci-dessous. -Compléter cette, grille soigneusement. -Cocher votre réponse sur la grille de la manière suivante: A - B - C - D -E ou vrai ou faux. -Eviter rature ou surcharge. Glucides -Répondre par A, B, C, D ou E à chaque question. Question 1: Le pouvoir rotatoire d'une substance est lié à la: A Présence de carbone substitué asymétriquement. B Dissymétrie moléculaire. C Nature glucidique de la substance. D Concentration de la substance. E Structure cyclique. Question 2: L'épimérisation des oses: A Est une réaction équilibrée provoquant la transformation partielle d'un aldose en C n en un cétose en Cn. B N'affecte que les aldoses. C Conduit à deux structures ne différant entre elles que par la configuration spatiale d'un seul centre d'asymétrie moléculaire dans une molécule qui en contient plusieurs. D Ne peut se faire que par voie chimique. E De série D conduit obligatoirement à des oses de série L. Question 3: Les objections à la formule linéaire des oses sont: A Les oses recolorent la fuschine décolorée par le bisulfite. B Les fonctions alcools des oses permettent la formation d'hémi-acétals. C L'action du méthanol sur le D-glucose conduit à deux méthyl-D-glucosides différents par leur pouvoir rotatoire. D Le phénomène de mutarotation des oses. E L'obtention d'un dérivé heptaméthylé par action du sulfate de méthyle sur le glucose. Question 4: Le traitement du D-glucose par l'acide périodique: A Libère deux molécules d'acide formique. B Consomme deux molécules de formol. C Ne libère pas d'aldéhyde formique. D Consomme deux molécules d'acide périodique. E Libère de l'eau oxygénée. Question 5: Les anomères du D-glucose: A Sont des épimères au niveau de l'atome de carbone C 1. B Sont dénommés α et β. C ne diffèrent que par la configuration stéréochimique du seul centre d'asymétrie situé au niveau de l'atome de carbone C1. D α ont les hydroxyles portés par les atomes de carbone C1 et C2 en position cis. E α ont le pouvoir rotatoire le plus élevé. Ahmedi Mohammed laïd

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Question 6: La réduction des oses: A Affect la fonction alcool primaire. B peut se faire par hydrogénation catalytique sur nickel Raney. C Est possible par voie enzymatique. D peut conduire à l'obtention de deux polyalcools épimères. E Nécessite la présence d'acide périodique. Question 7: Choisir le (s) pentose (s): A D-ribulose. B L-arabinose. C Desoxy-2-D-ribose. D D-érythrose. E Sedoheptulose. Question 8: L'acide neuraminique: A est un cétose à 9 atomes de carbone. B Résulte de la condensation de l'acide oxalo-acétique avec la D-mannosamine. C N'existe pas à l'état libre. D Se retrouve dans les glycoprotéines sous forme d'acides sialiques. E A le même nombre d'atomes de carbone que l'acide N-acétyl-muramique. Question 9: La détermination de la configuration anomérique α où β de la liaison osidique d'un diholoside peut se faire avec: A Acide périodique. B Osidase spécifique. C Méthylation. D pouvoir rotatoire. E acide borique. Question 10: Le glycogène: A Est hydrolysé par les amylases. B A une structure arborescente. C Possède plus de liaisons α (1 6) que de liaisons α (1 4) D Est la réserve glucidique des mammifères. E Ne donne pas de réaction colorée avec l'iode. Question 11: La cellulose: A Est un polymère exclusivement linéaire. B Renferme des liaisons osidiques α (1 4). C Est stabilisée par des liaisons hydrogènes. D Est constituée de chaînes parallèles s'organisant en microfibrilles. E Est dégradée dans le tube digestif de l'homme par les amylases. Question 12: L'aglycone d'un O-hétéroside se condense avec un: A Hydroxyle phénoilique. B Groupement thiol. C Groupement aminé. D Hydroxyle alcoolique. E Groupement iminé. Ahmedi Mohammed laïd

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-Répondre aux question par vrai ou faux. Question 13: -L'acide galacturonique et l'acide glucuronique sont identiques parce que le galactose et le glucose dont ils dérivent respectivement sont épimères en C4. Question 14: -L'hexose D-idose est un glucide réducteur parce qu'il comporte dans sa molécule au moins une fonction alcool primaire qui peut être transformée en fonction acide. Question 15: -L'osazone du D-glucose et celle du D-mannose sont identiques parce que lors de la formation des osazones chez les aldoses, la phénylhydrazine attaque les 2 premiers atomes de carbone de ces aldoses. Question 16: -Le saccharose est un diholoside non réducteur parce que les fonctions réductrices du galactose sont impliquées dans la formation de la liaison osidique. Question 17: -La détermination de la configuration anomérique de la liaison osidique d'un diholoside réducteur se fait par la technique de méthylation de Haworth parce que l'examen des produits méthylés obtenus permet de préciser quel est l'ose qui engage sa fonction réductrice dans la liaison osidique. Question 18: -L'amylose est un polymère constitué d'unités glucose reliées par des liaisons β (1 4) parce que ce polymère est hydrolysable par la β-amylase. Question 19: -La cellulose est un aliment énergétique pour l'homme parce que la cellulose est un polymère du glucose. Question 20: -Le dosage des glucides réducteurs par utilisation de ce pouvoir réducteur en milieu alcalin et à chaud est impossible parce que la stoechiométrie de la réaction n'est pas connue avec précision. Question 21: - Le dosage polarimétrique des glucides ne s'adresse qu'aux glucides non réducteurs parce que les glucides réducteurs sont soumis au phénomène de la mutarotation. Question 22: -Il est possible de doser le glucose en milieu acide fort et à chaud parce qu'il se forme un dérivé furfuralique susceptible de réagir avec une amine aromatique pour former un composé dosable colorimétriquement.

-Répondre dans l'espace réservé. Question 23: Un hexose X est réduit par l'amalgame de Na donnant du D-sorbitol, par traitement avec la phénylhydrazine, il donne une osazone différente de celle du D-glucose. Par traitement à l'iode en milieu alcalin, il conduit à un acide onique. Donner la structure cyclique et la structure linéaire de l'hexose X. Réponse :

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Question 24: -Au cours d'un test d'un liquide biologique, on a obtenu les résultats suivants: Réaction de Molush+ Seliwanoff+ et Bial+ Donner le principe de la réaction mise en jeu. Nature de la substance présente dans le liquide biologique.

Question 25: On veut déterminer la structure d'un tétraholoside hétérogène. Soumis à une hydrolyse, ce sucre révèle la présence dans l'ordre de: -Un épimère du D glucose, qui peut donner par réduction un produit inactif sur la lumière polarisée. Nom usuel du sucre: Formule cyclique: -Un pentose constitutif des RNA Nom usuel de ce sucre: Formule linéaire: -Un dérivé du D-glucose pouvant être obtenu par oxydation après protection de la fonction carbonyle. Nom de ce dérivé: Formule cyclique: -Un ose obtenu par interconversion du D-glucose en milieu basique Nom usuel de ce sucre:

Formule cyclique:

-Quels procédés utiliser pour déterminer le mode de liaison des différents oses constitutifs?

-Quel procédé utiliser pour déterminer l'anomérie des liaisons? Ahmedi Mohammed laïd

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-Soumis à une perméthylation suivie d'hydrolyse, le sucre hétérogène libère: - 2, 3, 4,6 tétraméthylose - 2, 3 diméthylose - acide 2, 3 diméthyl uronique - 1, 2, 3, 6 tétraméthyloside Aucune β osidase n'est active sur ce tétraholoside. Quelle conclusion tirez-vous?

Formule du sucre complet

-Nom complet selon la nomenclature classique.

-Combien de moles de HIO4 sont nécessaires pour oxyder 1 mole de ce sucre?

- quels sont les produits libérés (nombre et noms)?

- Formule de l'énantiomère du sucre complet.

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Grille de Réponses aux tests d'évaluation des connaissances: Questions

Réponses A A A A A A A A A A A A

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22

Vrai Vrai Vrai Vrai Vrai Vrai Vrai Vrai Vrai Vrai

B B B B B B B B B B B B

C C C C C C C C C C C C

D D D D D D D D D D D D

E E E E E E E E E E E E

Faux Faux Faux Faux Faux Faux Faux Faux Faux Faux

Question23: Structure linéaire de l'ose

Structure cyclique de l'ose

Question24: Réaction mise en jeu

Nature de la substance dans le liquide biologique

Question25: Répondre dans l'espace réservé. Ahmedi Mohammed laïd

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Lipides : Questions à choix multiple= QCM. Encerclez l’astérisque qui précède la réponse exacte. Questions à choix simple : QCS. Encerclez la lettre V = vrai si l’alternative proposée est exacte ou la lettre F = faux si cette alternative est fausse N.B : A l’intérieur d’une même question une réponse fausse annule une juste I) – Structure des lipides : On hydrolyse un lipide X pales phospholipases D puis C On obtient : un composé A insoluble dans l’eau , du phosphate et un composé B QCM : la phospholipase C Hydrolyse les liaisons entre : • Le glycérol et l’acide gras en α • Le glycérol et l’acide gras en β • Le glycérol et le groupement phosphate • Aucune de ces liaisons Le composé A est traité par la potasse on obtient du glycérol et deux composés C et D qui forment des solutions micellaires stables avec l’eau et qui possèdent des propriétés détergentes Question : C et D sont des QCM : la réaction avec la potasse est : • Une salification • Une hydrolyse • Une saponification • Une oxydation Le composé A est hydrolysé par la lipase pancréatique on obtient du glycérol et 2 composés C’ et D’ C’ traité par NaOH donne un composé de formule brute C18 H35 O2 Na QCM : la réaction est • Une saponification • Une salification • Une hydrolyse • Une oxydation Si l’on traite C’ par CH3OH on obtient un composé de formule brute C19 H38 O2 D’ fixe une molécule d’iode par molécule de D’ . Traité par KOH, il donne un savon. On traite D’ par un oxydant énergique l’on obtient 2 composés de formule brute : C 9 H 18 O2 et C9 H16 O4. Ces deux composés peuvent réagir avec NaOH pour donner des esters de formule brute : C9 H17 O2 Na C9 H14O4 Na QCM: Le composé D’ est • Un aciude gras saturé • Un acide gras mono insaturé • Un acide gras di insaturé • Ne peut être un acide gras Ahmedi Mohammed laïd Biochimie SNV, Li, FSB, USTHB GLUCIDES- LIPIDES –PROTEINES -ENZYMOLOGIE

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Le composé B réagit positivement avec la ninhydrine,, sa formule brute est la suivant : C3 H7 O3 N , il possède des propriétés amphotères QCM : Le composé B est : • La choline • La sérine • L’éthanolamine • L’inositol QCM : sachant que la phospholipase A libre une fonction alcool primaire du glycérol et le composé C’ le lipide X initial est : • L’α oleyl / β stéaryl phosphatidyl choline • L’α stéaryl / β oleyl phosphatidyl choline • L’α oleyl / β stéaryl phosphatidyl sérine • L’α stéaryl / β oleyl phosphatidyl sérine • L’α stéaryl / β oleyl phosphatidyl éthanolamine • L’α oleyl / β stéaryl phosphatidyl inositol Exercice: • On isole du tissu nerveux un lipide complexe formé de 2 composants; le premier est un composé à 18 carbones, avec 2 fonctions alcools et une fonction amine. Nom de ce composé : Formule : Le deuxième composé est un monoacide gras de Ii nul et à 24 carbones ; Nom de ce composé : Formule : Est-il acide gras indispensable ? Structure du lipide complet.

A quelle classe appartient ce lipide complexe ?

• Représenter l’α palmityl β linoléyl glycérophosphorylsérine.

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Donner les produits obtenus sous l’effet de la phospholipase D (noms et formules).

Quelle est l’action du KmnO4 sur l’acide gras insaturé de cette structure ? Quels sont les produits obtenus ?

QCM • L’acide gras C18 : 3∆9, 12,15 : A est polyinsaturé B appartient à la famille n-6 C a ses soubles liaisons en position succinique D donne naissance à C18 : 0 après saturation totale E possède des doubles liaisons surtout en configuration géométrique cis. • Choisir la ou les méthodes chromatographiques les plus couramment utilisées pour l’étude des lipides : A chromatographie d’adsorption en phase liquide. B chromatographie d’affinité en milieu apolaire. C chromatographie d’exclusion - diffusion. D chromatographie d’adsorption en phase gazeuse. E chromatographie d’affinité en milieu polaire. • L’hydrogénation des acides gras insaturés d’une huile végétale s’accompagne d’une : A diminution du point de fusion. B augmentation de stabilité. C augmentation possible de la teneur en isomères trans dans le cas d’une hydrogénation partielle. D diminution de la résistance à l’oxydation. E diminution possible de la valeur nutritionnelle. • L’autoxydation des acides gras insaturé : A conduit à la formation de peroxydes. B est réalisée par un mécanisme radicalaire dépendant de certains paramètres (température, lumière, présence de certains ions). C est catalysée par la superoxyde dismutase cytosolique et mitochondrial. D est augmentée par la glutathion peroxydase et la catalase. E est un mécanisme protecteur des acides gras des membranes cellulaires. Ahmedi Mohammed laïd Biochimie SNV, Li, FSB, USTHB GLUCIDES- LIPIDES –PROTEINES -ENZYMOLOGIE

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• Quels sont les renseignements que l’on peut tirer des indices de saponification suivants : - Lard de porc : 196 - Graisse humaine : 196 - Beurre : 225 - Huile d’olive : 185 A Les acides gras du beurre sont plus insaturés que ceux de l’huile d’olive. B les acides gras de la graisse humaine et de la graisse de porc ont une même longueur de chaîne. C Les acides gras de l’huile d’olive sont les plus courts. D les acides gras du beurre ont des longueurs de chaîne plus courtes que celle des autres. E les acides gras du lard de porc et de graisse humaine ont une insaturation équivalente. • On traite un acide gras polyinsaturé X par le KMn O4. On obtient les trois composés suivants : CH3 (CH2)4 — COOH HOOC—(CH2)6 —COOH HOOC—(CH2)2—COOH A X possède trois doubles liaisons carbone- carbone. B X appartient à la série n-6. C X peut s’écrire C18 :2,∆4, 12 ou C18 : 2∆8, 12. D chaque molécule de X fixe trois molécules d’iode. E la nature des produits obtenus renseigne sur l’isomérie géométrique du produit X. • L’hydrolyse enzymatique digestive des triglycérides : A est assurée par la lipase pancréatique. B donne naissance à des monoglycérides. C se fait en présence de Ca++ qui précipite les monoglycérides. D fait intervenir un cofacteur protéinique appelé colipase. E ne libère pas d’acides gras polyinsaturés.

• Choisir la (ou les) molécule(s) renfermant plusieurs molécules de glycérol : A triglycéride. B phosphatidyl-inositol. C phosphatidyl-glycérol. D cardiolipide. E acide phosphatidique. • Choisir la (ou les) molécule(s) renfermant des oses ou des dérivés d’oses : A sphingomyéline. B cérébrosides. C phosphatidyl - inositol. D ganglioside. E phosphatidyl - sérine Ahmedi Mohammed laïd Biochimie SNV, Li, FSB, USTHB GLUCIDES- LIPIDES –PROTEINES -ENZYMOLOGIE

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• Les phosphatidylcholines : A ont un caractère amphipathique. B portent des charges négatives sur la choline. C ont un caractère amphotère lié uniquement à la présence d’une bas azotée. D sont utilisés pour la préparation de liposomes. E ont un pôle hydrophobe lié aux chaînes d’acide gras. • La dégradation d’une molécule de phosphatidyl – inositol par une phospholipase C donne naissance à : A diglycéride. B insitol – phosphate. C acide phosphatidique. D phosphoryl – choline. E glycérol – phosphate.

Protéines: Exercice 1: Soit les 2 listes suivantes relatives à l’étude d’une protéine pure. L’une comporte 10 informations désignées de A à j. L’autre comporte 10 méthodes numérotées de 1 à 10. Choisir la méthode qui vous parait la plus appropriée pour répondre à chaque information. (Faire correspondre dans vos réponses un numéro et un seul à chaque lettre sans commentaire) Exemple de réponse : D10 Information à déterminer A- Masse moléculaire de la forme native

méthodes 1- Absorption aux environs de 280 nm.

B- Existence d’une ou plusieurs chaînes polypeptidiques. C- Présence d’une ou plusieurs méthionines non terminales. D- Présence d’une ou plusieurs cystéines.

2- Utilisation de phénylisothiocyanate.

E- Présence de LYS ou de ARG nom terminales.

5- Utilisation du fluordinitrobenzène.

F- Nature de L’AA NT et l’action se poursuit de façon récurrente. G- Présence de TRP, de TYR ou de PHE.

I- Composition globale en AA

6-Hydrolyse chimique, suivie d’analyse chromatographique sur résine d’échanges d’ions. 7- Electrophorèse dans les conditions dénaturantes. 8- Observation d’un dégagement d’ammoniac après hydrolyse acide 9- Hydrolyse par la trypsine.

J- Présence de ASN ou de GLN.

10- Alkylation par l’acide iodoacétique.

3-Utracentrifugation. 4- Coupure par le bromure de cyanogène.

H- Nature du ou des AA N terminaux

Réponses :

D10 Ahmedi Mohammed laïd

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Exercice 2: Un hexapeptide X nous donne après hydrolyse 6 AA :THR, TYR, LYS, MET, PRO, LEU. L’aminopeptidase n’a aucun effet sur X. Le bromure de cyanogène aboutit à la formation d’un tripeptide A et d’un tripeptide B finissant par une homoséryllactone. L’action du réactif d’Edman sur A libère une P.T.H de LEU. La chymotrypsine n’a aucun effet sur X L’action de la trypsine sur X aboutit au détachement de TYR. Séquence de X : Exercice 3: a) Un heptapeptide possédant dans sa molécule un pont disulfure, est réduit et ne donne qu’un seul dérivé de réduction comportant 2 fonctions thiols. Que pouvez-vous en conclure ? Réponse : b) sur ce dérive de réduction,on réalise séparément les 3 opérations suivantes : -Hydrolyse complète suivie de la chromatographie de partage sur papier. On observe que 6 taches après coloration par la ninhydrine. Pourquoi ce nombre de taches est limité à 6 ? Ces taches correspondent aux AA suivants par ordre alphabétique : ARG, CYS, GLU, ILE, PHE Réponse :

QCM : • A propos des amino-acides : A les acides aminés à chaîne latérale non ionisable ne renferment pas de variétés indispensables. B les chaînes glycanniques de type O-glycanne sont liées à un résidu asparaginyl. C l’acide aspartique et l’acide glutamique ont un pHi inférieur à celui de la lysine. D l’arginine est le précurseur du monoyde d’azote sous l’action de NO -synthases. E L’histidine grâce à son noyau indole joue un rôle important en catalyse enzymatique.

• A propos des acides aminés aromatiques : A la tyrosine est un acide aminé indispensable. B la phénylcétonurie est un déficit en phénylalanine hydroxylase. S la tyrosine est un acide aminé porteur d’une fonction phénol. D le tryptophane est un acide aminé fragile détruit par hydrolyse alcaline. E la tyrosine est le précurseur métabolique de la Dopa, Dopamine et catécholamines.

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• Les acides aminés peuvent être séparés par : A chromatographie d’échange d’ions. B chromatographie d’exclusion – diffusion. C chromatographie phase gazeuse. D HPLC. E chromatographie d’affinité. • On sépare le mélange d’amino – acide suivants : Valine (Val), cystéine (Cys), acide glutamique (Glu), lysine Lys), méthionine (Met) sur résine sulfonique (— SO3H). Sachant que la valine sort en 3e position, choisir la séquence d’élution : A Lys – met – val – cys - glu B Glu – cys – val – met - lys C glu – met – val – cys - lys D Lys – cys – val – met - glu E Glu – lys – val – cys - met • Les acides aminés: A possèdent tous un centre de chiralité au niveau du carbone α. B dis acides ont un phi inférieur à celui des acides dits basiques. C hydroxyproline et hydroxylysine sont incorporés en tant que tels dans les protéine D donnent tous une coloration violet pourpre avec la ninhydrine. E indispensables ne donnent pas de réaction avec le chlorure de dansyle.

• La liaison peptidique : A est une liaison solide B peut être coupée par voie enzymatique C a un caractère partiellement double. D ne peut pas être créée par voie chimique. E est une liaison dite « riche en énergie »

• Choisir les réactifs permettant une identification des résidus amino–acyls N-terminaux : A chlorure de dansyle. B hydrazine. C endopeptidases. D 1- fluoro-2,4 dinitrobenzène. E chymotrypsine.

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• La trypsine: A est un enzyme protéolytique. B est une exopeptidase. C hydrolyse les liaisons peptidiques renfermant les carboxyles de la valine et de l’arginine. D hydrolyse les glycosaminoglycuronoglycannes. E ne coupe que les liaisons peptidiques renfermant un résidu méthionyl. • Un peptide de 50 amino – acides referme 5 résidus valyl, 3 résidus arginyl et 2 résidus lysyl dont un est situé à l’extrémité C-terminale. Son hydrolyse par la trypsine libère A 11 fragments. B 5 fragments. C 6 fragments. D 10 fragments. E 4 fragments. • Choisir la (ou les) méthode (s) de séparation des protéines dont le principe est fondé pour tout ou partie sur l’utilisation de leur masse molaire : A chromatographie d’exclusion – diffusion. B chromatographie d’affinité. C chromatographie d’échange d’ions. D électrofocalisation sur gel d’amidon. E électrophorèse sur gel de polyacrylamide- SDS. • Choisir la (ou les) méthode (s) susceptible (s) d’être utilisée (s) pour vérifier la pureté d’une protéine : A chromatographie d’affinité. B immuno – électrophorèse. C ultracentrifugation analytique. D précipitation par les solvants organiques à froid. E chromatographie d’adsorption. • choisir la (ou les) méthode (s) de séparation des protéines dont le principe est fondé pour tout ou partie sur l’utilisation de leur charge électrique : A électrofocalisation. B chromatographie hydrophobe. C chromatographie d’échange d’ions. D électrophorèse bidimensionnelle. E chromatographie d’exclusion- diffusion. Soit un mélange de quatre protéines P1 , P2 , P3 , P4 P1 P2 P3 P4 pHi 5,2 pHi 9,5 pHi 4,0 pHi 5,8 PM 30000 Pm 180000 PM 80000 PM120000 On dispose d’un gel dont le seuil de coupure est égal à 50000 (G 50000), de résines échangeuses de cations, de résines échangeuses d’anions, de tampons à différents pH et d’anticorps spécifiques dirigés contre P3 et P4. Ahmedi Mohammed laïd Biochimie SNV, Li, FSB, USTHB GLUCIDES- LIPIDES –PROTEINES -ENZYMOLOGIE

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•Choisir la (ou les) méthode (s) permettant de purifier en une seule étape la protéine P1 : A électrofocalisation sur gel entre pH 5,8 et pH 9,8 B chromatographie d’affinité. C chromatographie d’exclusion – diffusion sur G-50000. D chromatographie sur résines échangeuses d’anions à pH 7. E chromatographie sur résines échanges de cations à pH 7. • Même question pour la protéine P2 : A chromatographie d’affinité B chromatographie d’exclusion – diffusion sur G-50000 C chromatographie sur résines échangeuses d’anions à pH 7. D chromatographie sur résines échanges de cations à pH 7. E aucune réponse précédente n’est exacte. • Même question pour la protéine P3: A chromatographie d’affinité B chromatographie sur résines échanges de cations à pH 3,5. C chromatographie sur résines échangeuses d’anions à pH 7. D chromatographie sur résines échanges de cations à pH 7. E chromatographie sur résines échangeuses d’anions à pH 4,5.

Enzymologie : Le site actif enzymatique : A est situé dans la zone hydrophobe externe de la protéine globulaire. B renferme de nombreux acides aminés fonctionnels, noms polaires, responsables de la catalyse chimique. C est une entité tridimensionnelle rassemblant des résidus amino –acyls éloignés au sein de la structure primaire. D est doué des deux fonctions : reconnaissance du substrat et transformation chimique du substrat. E est une structure absolument fixe et rigide. • Les groupements fonctionnels du site actif enzymatique : A peuvent établir différents liaisons avec la molécule du substrat, à l’exception de liaisons covalentes. B sont situés dans la zone hydrophobe interne dont la constante diélectrique est augmentée. C fonctionnent, pour certains, alternativement comme accepteurs ou donneurs de protons. D appartiennent à des amino-acides non polaires. E sont capables de s’adapter minutieusement à la molécule de substrat grâce à une certaine flexibilité de la chaîne polypeptidique. Ahmedi Mohammed laïd Biochimie SNV, Li, FSB, USTHB GLUCIDES- LIPIDES –PROTEINES -ENZYMOLOGIE 2010-2011

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• Au cours de la phase stationnaire d’une réaction enzymatique : A la combinaison [ES] est à concentration maximale et constante. B la vitesse de la réaction augmente régulièrement. C la cinétique est d’ordre nul par rapport au temps. D la vitesse de formation de [ES] est égal à la vitesse de disparition. ds dp E - —— =—— dt dt • La constante de Michaelis : A est la constante de dissociation du complexe enzyme- substrat [ES]. B est d’autant plus élevée que la dissociation du complexe [ES] est plus faible. C est d’autant plus faible que l’affinité de l’enzyme pour le substrat est plus forte. D peut s’exprimer en mole l -1 . s -1 E est caractéristique d’un enzyme pour un substrat donné dans des conditions physicochimiques déterminées. • L’équation de Michaelis-Menten s’écrit :

• Un inhibiteur compétitif : A se fixe sur le site actif enzymatique. B entre en compétition avec le substrat pour occuper le site actif. C peut être un analogue structural de l’état de transition. D entraîne une diminution de la constante de Michaelis. E ne modifie pas la vitesse maximale de la réaction. • L’inhibition non compétitive d’un enzyme E agissant sur un substrat S par un inhibiteur I est caractérisée par : A la formation d’un complexe ternaire [ESI selon un mécanisme séquencé. B une constante de Michaelis non modifiée. C une diminution de la vitesse maximale indépendante de la concentration d’inhibiteur. D une modification d’affinité de l’enzyme pour le substrat. E la fixation de l’inhibiteur sur l’enzyme à un site différent du site actif. • Dans l’inhibition incompétitive : A le complexe ternaire [ESI] se forme suivant un mécanisme aléatoire. B I ne se fixe que sur le complexe [ES]. C on observe une augmentation de la constante de Michaelis. D il y a une diminution de la vitesse maximale. E tout se passe comme si la fixation de l’inhibiteur favorise la formation du complexe intermédiaire mais avec diminution de la vitesse de réaction. Ahmedi Mohammed laïd

Biochimie SNV, Li, FSB, USTHB GLUCIDES- LIPIDES –PROTEINES -ENZYMOLOGIE 2010-2011

Section F 16


Le graphe suivant représente l’activité d’une enzyme E en présence de différentes concentrations de S, en absence de tout inhibiteur (droite A), en présence d’un inhibiteur I1 de concentration 5.10 -5 M (droite B) et en présence d’un inhibiteur I2 à 4.10-5M (droite C).

Pente de A= 8.103 mn-1 Pente de B= 1,6.104 mn-1 Déterminer les paramètres suivants : Vmax A= Km A= Equation complète de la droite A ([I]=0) Vmax B= Km B= Type d’inhibition exercée par I1 Equation complète de B (en présence de I1) Vmax C= KmC= Equation complète de c (en présence de I2). Inhibition exercée par I2 Représentation graphique des 3 droites selon Eadie – Hofstee.

Ahmedi Mohammed laïd

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