UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc. Alumno: Asalia Estefanía Fernández Álvarez Curso: Quinto Paralelo: B Grupo N° 6 Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes 11 de agosto del 2015 Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 18 de agosto del 2015 PRÁCTICA N° 10 Título de la Práctica: Intoxicación por Hierro. Animal de Experimentación: Rata Wistar Vía de Administración: Intraperitonial Tiempos: o
Inicio de la práctica: 07: 30 am
o
Deceso del animal: 16 minutos
o
Inicio del baño maría: 08:45 am
o
Finalización del baño maría: 09:45 am
o
Final de la práctica: 10:30 am
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta el animal ante la Intoxicación por cloruro férrico. 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el
toxico en el animal.
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3. Adquirir la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de
identificación del toxico en medios biológicos.
o
MATERIALES
Vasos de precipitación 200 y 500 ml.
o o o o o o o
Jeringa de 10 cc o
Equipo de destilación.
o
Tubos de ensayo
o
Pipetas
o
Guantes de látex
o
Mascarilla
o
Mandil
o
Gorro
Varilla Espátula Probeta Campana Panema Papel filtro
o
Embudo
o
Fosforo
o
Pinzas
o
Cocineta
o
Porta tubo
o
Tabla de disección
SUSTANCIAS
Cloruro férrico 10 ml o 200 gotas o
Cronómetro
o
Perlas de vidrio.
o
Equipo de disección
o
Bisturí
(FeCl3). Clorato de potasio 4 g (KClO3). Ácido clorhídrico concentrado 25
ml o 500 gotas (HCl). Hidróxido de potasio (KOH).
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Sulfocianuro de Potasio [KCNS]
Agua destilada (H2O).
Ferricianuro de Potasio
[Fe (CN)6K3] Ferrocianuro de Potasio
[Fe (CN)6K4] Ácido sulfhídrico (H2S)
EQUIPO:
Balanza.
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PROCEDIMIENTO
1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo además de tomar todas las medidas de
bioseguridad. 2. Colocamos la rata en el panema. 3. Tener todos los materiales a utilizar listos. 4. Administramos
al animal, 10 ml de solución de coluro férrico intraperitoneal, anotamos el tiempo.
por vía
5. Observamos los efectos que produce en el animal hasta que se produjo la
muerte. 6. Procedimos a la apertura de la rata con la ayuda del equipo de disección. 7. Observamos el estado de las vísceras. 8. En un vaso de precipitación recolectamos los líquidos que vertían de animal y
colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles). 9. Adicionamos a las vísceras 50 perlas de vidrio, 2 gramos de clorato de potasio y
ácido clorhídrico concentrado 25 ml y lo llevamos a baño maría por 30 minutos. 10. Cinco minutos antes de que se cumpliera el tiempo establecido del baño maría
adicionamos 2 gramos más de clorato de potasio. 11. Una vez finalizado el baño maría dejamos enfriar y filtramos. 12. Con el filtrado luego procedimos a realizar las reacciones de identificación de
mercurio en medios biológicos. 13. Una vez terminada la práctica se limpió todo el material y el área utilizada.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO 1.- CON LOS NaOH Y KOH: El hierro reacciona frente a los NaOH y KOH produciendo un precipitado blanco de Fe(OH)2; este precipitado rápidamente se oxida formándose primeramente verde sucio, luego negro y finalmente pardo rojizo. Fe2+ + (OH)
Fe(OH)2
2.- CON EL SULFOCIANURO DE POTASIO: El Fe2+ no reacciona frente a este reactivo, el Fe3+ reacciona originando un complejo color rojo sangre, esta reacción es más sensible para reconocer el hierro. 3.- CON EL FERRICIANURO DE POTASIO Fe (CN) 6K3: Frente a este reactivo, las sales ferrosas producen un precipitado, sino que forma un complejo color pardo oscuro. 4.- CON EL FERROCIANURO DE POTASIO Fe (CN) 6K4: Con este reactivo los iones ferrosos reaccionan dando un precipitado color blanco que rápidamente se hace azul, conocido como azul de Prusia. Fe (CN)6 + Fe2+ Fe(CN)6
5.- CON EL H2S: Con este gas, el hierro produce un precipitado negro de sulfuro de hierro. Fe2+ + H2S
SFe + 2H+
GRÁFICO
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS
•
CON HIDRÓXIDO DE POTASIO Reacción positivo característico
Antes
•
pardo rojizo
Después
CON EL SULFOCIANURO DE POTASIO Reacción positivo característico
color rojo sangre
Después
Antes
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•
CON EL FERRICIANURO DE POTASIO Reacción positivo característico
color verde
Antes
Después
•
CON EL FERROCIANURO DE POTASIO Reacción positivo característico
Antes •
color azul
Después
CON EL ACIDO SULFHIDRICO
Reacción
negativo
color amarillo
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Antes
Después
OBSERVACIONES
Hemos observado que al administrar el toxico (cloruro férrico) por vía intraperitoneal el animal presentó perdida de motilidad, hipoxia, convulsiones, coagulopatia y finalmente murió.
CONCLUSION
Al culminar esta práctica pudimos determinar que el hierro es una sustancia altamente tóxica, ya que actuó rápidamente en la motilidad, presentando hipoxia y convulsiones que produjeron la muerte del animal después de la administración de 10 ml de toxico y luego de esto se realizó las reacciones de identificación en las constatamos la presencia de cadmio en el filtrado obtenido de la decocción de las vísceras.
RECOMENDACIONES
Realizar la asepsia del área de trabajo. Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes,
mascarilla, zapatones si es necesario. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar la cámara de gases para realizar las pruebas y evitamos así intoxicaciones. Tener material para la toma de cada reactivo y evitar contaminación de los
reactivos que pueden llevar a un error en las reacciones.
CUESTIONARIO
¿PROPIEDADES FÍSICAS- QUÍMICAS DEL HIERRO? “ Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis “ Página
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Estado físico: Líquido Color: Marrón oscuro Olor: Débil, semejante al del ácido clorhídrico Temperatura de ebullición: > 100 ºC (depende de la pureza) Temperatura de la inflamación: No inflamable. Se descompone por el calor liberando ácido clorhídrico. Temperatura de autoignición: No inflamable Densidad del líquido: > 1,4g/ml, dependiendo de la pureza y la temperatura. Presión de vapor: Sin información Solubilidad en agua: 100% ¿DONDE SE ENCUENTRA EL HIERO? El hierro es un ingrediente en muchos suplementos minerales y vitamínicos. Los suplementos de hierro igualmente se venden solos y sus diversos tipos abarcan: Sulfato ferroso Gluconato ferroso Fumarato ferroso
¿CUAL ES LA FISIOPATOLOGÍA DE LA INTOXICACIÓN? Daño Gastrointestinal Las sales de hierro corroen y erosionan la mucosa GI. Generan una gastroenteritis hemorrágica que puede llegar a perforación (peritonitis). Al dañar la barrera de la mucosa gastrointestinal, facilitan el paso de las bacterias a la sangre llevando a diseminación hematógena y sepsis. Alteración Cardiovascular Las altas concentraciones de hierro aumentan la permeabilidad capilar generando salida de líquido a un tercer espacio. Lo anterior, sumado a la hemorragia gastrointestinal, genera hipovolemia e hipoperfusión tisular y shock. Acidosis Metabólica Es el producto de la hipoperfusión tisular que lleva al metabolismo anaeróbico y posteriormente a la acidosis láctica. Coagulopatía El Hierro elemental se une a los factores de coagulación, alterando su actividad, prolongando el PT y PTT.
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Disfunción Orgánica • Hepática: El hierro libre llega a los hepatocitos generando daños mitocondriales. • Renal: Por efecto directo el hierro produce necrosis tubular. • SNC: Por daño vascular y alteraciones metabólicas genera letargo y coma.
BIBLIOGRAFÍA
•
Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial CientíficoMédico. Madrid. España. 2010
WEBGRAFÍA
•
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002659.htm
•
http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S003498872001000600010
•
http://www.encolombia.com/medicina/revistas-medicas/pediatria/vp391/pedi39104-intoxicacion
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AUTORIA
FIRMAS DE LOS INTEGRANTES
Bioq. Farm. Carlos García MSc.
ASALIA ESTEFANIA FERNANDEZ ALVAREZ “ Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis “ Página
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GLOSARIO
CEFALALGIAS: hace referencia a los dolores y molestias localizadas en cualquier parte de la cabeza, en los diferentes tejidos de la cavidad craneana, en las estructuras que lo unen a la base del cráneo, los músculos y vasos sanguíneos que rodean el cuero cabelludo, cara y cuello. En el lenguaje coloquial cefalea es sinónimo de dolor de cabeza. VÉRTIGOS: El vértigo es una sensación ilusoria o alucinatoria de movimiento de los objetos que nos rodean o de nuestro propio cuerpo, por lo común, una sensación de giro. El vértigo suele deberse a un trastorno en el sistema vestibular. HIPOPERFUSIÓN TISULAR: Aporte insuficiente de los nutrientes y el oxígeno necesarios para la actividad normal de los tejidos y las células, también se denomina Shock. HEMATÓGENA: Que se produce en la sangre o derivado de ella. SEPSIS: Es la respuesta sistémica del organismo huésped ante una infección, con finalidad eminentemente defensiva.
ANEXOS
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