DE AGOSTO

VALORES BIOQUIMICOS SÉRICOS EN GALLINAS REPRODUCTORAS PESADAS CON ALTA EFICIENCIA EN PRODUCCIÓN DURANTE LAS 23 A 63 SEMANAS DE EDAD

Eugenio R. Machin 1*, Vet.; Adrián E. Urquia 2, Ing. Agr.; Fernando L. Mattioli 3, Méd. Vet.; Raúl A. Fasan 4, Méd. Vet.

1 Práctica privada, BioMercados S.R.L., Buenos Aires, República Argentina. 2 Práctica privada, Lauri Agropecuaria S.A., La Rioja, República Argentina. 3 Práctica privada, New Gen Breeders, Grupo Soychu, Buenos Aires, República Argentina. 4 Práctica privada, Novolab Diagnóstico Veterinario, Buenos Aires, República Argentina.

La intensidad del esfuerzo, la recuperación, el estado nutricional y el bienestar animal podrían promover manifestaciones en analíticas sanguíneas. En ausencia de información para avicultores, se generaron rangos de referencia y se estudió la forma de la distribución para los analitos: proteínas totales, albúminas, globulinas, triglicéridos, colesterol, calcio total, fósforo, aspartato aminotransferasa y creatinfosfoquinasa, de gallinas reproductoras Arbor Acres®, entre las 23 a 63 semanas de edad, con altos índices productivos. Se evaluaron en forma retrospectiva un total de 458 resultados de muestras de sueros obtenidas durante los años 2020 y 2021, procedentes de la provincia de La Rioja, Argentina. Para el análisis, se utilizó metodología no paramétrica con los percentiles 2,5 y 97,5 como límites de los valores de referencia. Se analizaron submuestras de las 23, 28, 29, 33, 41 ,42 ,50 y 63 semanas de edad, así como el resultado de la comparación y combinación del conjunto de ellas. Entre las 23 a 63 semanas de vida, se determinó el rango de referencia para proteínas totales (4,23 - 6,43 g/dl); albúminas (1,61 - 2,29 g/dl); globulinas (2,39 - 4,37 g/dl); aspartato aminotransferasa (150 - 655 U/L); creatinfosfoquinasa (1.788 - 10.711 U/L) y colesterol (94 - 273 mg/dl); entre las 23 a 50 semanas fósforo (7,01 - 15,72 mg/dl); entre las 28 a 50 semanas calcio total (16,58 - 24,10 mg/dl) y triglicéridos (721 - 3.504 mg/dl). Los valores plasmáticos de proteínas totales, albúminas, globulinas, calcio total (excepto semana 33), y fósforo por grupo etario presentaron distribución normal; sin embargo, algunas edades requirieron la transformación de Box y Cox. Se rechazó la hipótesis de normalidad para las determinaciones de as-

partato aminotransferasa en la semana 63, y triglicéridos en semanas 23 y 63 de edad. Los valores de creatinfosfoquinsa y colesterol tuvieron diferentes resultados bajo la hipótesis de distribución gaussiana.

Palabras clave:

Bioquímica, calcemia, enzimas, metabolitos, metabolismo, proteínas, gallinas reproductoras. *Autor correspondiente: Eugenio R. Machin, eugeniomachin@gmail.com

INTRODUCCIÓN

En la producción avícola industrial, las respuestas profesionales requieren amplio conocimiento y, en este sentido, se ha avanzado en diferentes aspectos. Sin embargo, algunos recursos tecnológicos básicos no han encontrado un tratamiento específico. Tal es el caso de las pruebas bioquímicas. En el ciclo productivo de gallinas reproductoras se producen diferentes registros, tales como, las pruebas serológicas para la supervisión de programas de vacunación y determinación de enfermedades, (Girón Solsona, 2014; Zavala, 2015), entre otros, análisis individuales que se infieren a su población. Los analitos aquí propuestos no tienen condicionamiento alguno que impidan darles similar tratamiento, y podrían utilizarse para referir el estado metabólico de las aves. Por ello, se generó información sobre rangos de referencia y se evaluó su utilidad, bajo el supuesto de distribución gaussiana, en inferencias estadísticas para las determinaciones bioquímicas de proteínas totales, albúminas, globulinas, triglicéridos, colesterol, calcio total, fósforo, aspartato aminotransferasa (AST) y creatinfosfoquinasa (CPK).

MATERIALES Y MÉTODOS:

Se analizo un total de 458 muestras de suero de gallinas de genética Arbor Acres® que pertenecían a lotes de 23, 28, 29, 33, 41, 42, 50 y 63 semanas de edad, sin manifestación clínica de enfermedad y con altos rendimientos productivos, obtenidas en los años 2020 y 2021, en un establecimiento de la provincia de La Rioja, República Argentina. Todas las muestras de sangre fueron tomadas por venopunción alar con jeringa y, posteriormente, desueradas en el lugar de muestreo, para luego ser refrigeradas y enviadas al laboratorio de diagnóstico veterinario. En su recepción se rotularon apropiadamente y se sometieron a centrifugación, el suero obtenido se conservó a temperatura de -20 grados centígrados hasta su posterior procesamiento. El estudio fue realizado con 46 muestras de sueros por grupo etario, sin presentación de manifestaciones atípicas, y 90 muestras para la validación de los resultados. Siguiendo las recomendaciones de la International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, Clinical and Laboratory Standards Institute, (CLSI and IFCC. C28-A3, 2008) y la American Society for Veterinary Clinical Pathology (Friedrichs y col, 2012), se obtuvieron los valores de referencia de la población utilizando los percentiles 2,5 y 97,5, esperando que, al menos, el 95% de los valores de la población se encuentren entre los rangos obtenidos y que como máximo no se incluya un 2,5% en su extremo inferior y un 2,5% en su extremo superior, con un intervalo de confianza del 90% para el límite superior e inferior como medida de incertidumbre de los mismos, (ASVCP, 2020). Para la obtención de los perfiles bioquímicos se utilizaron los siguientes métodos y reactivos, proteínas totales (AA-Wiener Lab.); albúmina (AA-Wiener Lab.); calcio total Color (AA-Wiener Lab.); fosfatemia (AA-Wiener Lab.); aspartato aminotransferasa (AST) GOT UV (AA Líquida-Wiener Lab.); creatinfosfoquinasa (CPK) CK-NAC UV (AA Líquida-Wiener Lab.); triglicéridos Liquid Plus método enzimático (GPO/

PAP-GT Lab.); colesterol Liquid Plus Método enzimático (CHOD/PAD-GT Lab.).

PROCEDIMIENTO Y ANÁLISIS ESTADÍSTICO:

Se agruparon las muestras por lote y edad (Wright y Royston, 1999), se observó su distribución y la presencia de posibles valores atípicos. El supuesto de distribución normal se puso a prueba con las pruebas de Anderson-Darling y de Shapiro-Wilk modificada por Mahibbur y Govindarajulu. Se utilizaron las pruebas de Dixon y de Tukey para la eliminación de valores atípicos (Horn y Pesce, 2001). Solo fueron eliminados los valores considerados extremos por la prueba de Dixon, (de baja sensibilidad) y, además, cuando no se pudo rechazar la hipótesis de normalidad, también se eliminaron los valores atípicos extremos Q3+3*IQ y Q1+3*IQ indicados por el test de Tukey. No fueron eliminados los valores considerados medios o sospechosos Q3+1,5*IQ y Q1-1,5*IQ del mismo test. Cuando el número de muestras fue ≥ a 40 se tuvo en cuenta el resultado del método no paramétrico independiente de la distribución y con el uso de Bootstrap para el cálculo del intervalo de confianza para los límites superior e inferior de los valores de referencia, o método Robusto con transformación de Box-Cox (Horn y Pesce, 1998), cuando el tamaño muestral fue < 40, observando previamente el resultado de la prueba Anderson-Darling/simetría, (Geffré y Concordet, 2011). Para las muestras en las que no se rechazó la hipótesis distribución normal y que no requirieron de la aplicación de los métodos anteriores, el intervalo de referencia fue calculado bajo esta forma de distribución de manera directa o con la aplicación de transformación de potencia propuesta por Box y Cox (1964). Con los resultados se estudió la conveniencia de realizar particiones o subclases (Ceriotti y Ferruccio, 2009; Harris y Boyd, 1990). Para el caso en donde fueron eliminados valores de una observación alejada del comportamiento general, también se excluyeron del estudio los demás valores del mismo individuo para los analitos fisiológicamente correlacionados, por ejemplo, en el análisis de proteínas totales, albúminas o calcio total, cuando un valor de cualquiera de esos analitos fue considerado un “outlier” fueron excluidos del estudio las demás determinaciones para ese individuo, con similar sentido al estudio “Realab projet” (Grossi y Colombo, 2005) con diferente metodología. Los análisis estadísticos y gráficos fueron realizados utilizando el software Infostat desarrollado por docentes e investigadores de la Universidad Nacional de Córdoba (FCAUNC), Argentina (Di Rienzo y Casanoves, 2008) y el software Reference Value Advisor desarrollado por investigadores del Departamento de Ciencias Clínicas, Escuela Nacional de Veterinaria, Toulouse, France, que provee de macros específicos para Excel, (Geffré y Concordet, 2011). Los valores de referencia así obtenidos fueron validados utilizando datos provenientes de muestras no incluidas en las determinaciones originales.

RESULTADOS:

Para la especie, genética y condiciones bajo estudio se determinaron valores de referencia entre las 23 a 63 semanas de edad de proteínas totales (4,23 - 6,43 g/dl); globulinas (2,39 - 4,37 g/dl); albúminas (1,61 - 2,29 g/dl); AST (150 - 655 U/L); CPK (1.788 - 10.711 U/L); colesterol (94 - 273 mg/dl). Se representaron las distribuciones para el rango de referencia, límites del rango inferior (L.R.I.) y límites del rango superior (L.R.S.) con un intervalo de confianza del 90% para cada uno.

En la evaluación del analito CPK el aumento de valores producidos en la semana 23 de edad (fig. 4b), no modifico sustancialmente el resultado del conjunto del intervalo, no fue necesario realizar partición.

Para la determinación de calcio total fue necesario realizar la partición de su rango de referencia y favorecer la homogeneidad de subpoblaciones (fig. 6b), disminuyendo la variabilidad entre individuos y estrechando el intervalo, dejando las edades de 23 y 63 semanas por fuera del conjunto de valores en estudio.

En el caso del fósforo, por estar relacionado al metabolismo del calcio, se trabajó con igual partición y se observó que los valores de la semana 23 de edad resultaron abarcados en aquel intervalo, (fig. 7b), por esa causa se determinó un rango de referencia de fósforo (7,01 - 15,72 mg/dl) abarcando el intervalo de valores de semana 23 a 50 de edad, (fig. 7a).

Para los valores de triglicéridos se realizó la partición en el intervalo de 28 a 50 semanas de edad por tener valores más homogéneos, se produjo la exclusión de las muestras de 23 y 63 semanas de edad, las muestras de 23 semanas mostraron valores menores y las muestras de 63 semanas de edad un cambio en la forma de su distribución con aumento del desvío estándar, (fig. 8b).

En el contraste de hipótesis con el supuesto de cumplimiento de Normalidad para cada submuestra por edad en los valores plasmáticos de proteínas totales, albúminas, globulinas, calcio total y fósforo no se obtuvo evidencia suficiente para rechazar la hipótesis de distribución Normal (p˃0,05), en forma directa o luego de aplicar la transformación propuesta por Box y Cox, con la excepción de la determinación del calcio total en muestras de 33 semanas de edad que presentó una distribución simétrica no gaussiana a igual nivel de significación, (tab. 10).

Comportamiento diferente mostraron los valores de CPK y colesterol (tab. 11, 12), los resultados obtenidos en los contrastes de hipótesis demostraron diferentes resultados según la edad de muestreo con casos de evidencia para rechazar la hipótesis de distribución Normal y casos en ausencia de esta.

Se rechazó la hipótesis de normalidad para la distribución de los valores de AST (tab. 13) registrados a las 63 semanas de edad utilizando los datos originales o los datos transformados. Similares resultados fueron los obtenidos para los valores de triglicéridos (tab. 14) en las semanas 63 y 23 de edad.

DISCUSIÓN:

La realización del presente estudio tuvo como objetivo, conocer el perfil bioquímico esperable, en gallinas reproductoras pesadas Arbor Acres®, durante su etapa productiva. Con la finalidad de facilitar su aplicación, para el control zootécnico y sanitario de los planteles reproductivos. En el análisis de los resultados se observó que, los cambios en los valores promedios séricos por grupo etario de proteínas totales y globulinas pueden ser coincidentes con cambios en la alimentación (Tóthová y col., 2019). Además, la fracción de albúminas se mantiene estable a excepción de la semana 23 de edad, en donde el valor promedio fue levemente menor, en este sentido se sospecha de la influencia hormonal sobre su síntesis (Ahmed y col., 2014; Kavitha y col, 2020), la misma deberá ser estudiada considerando aves de otras edades. La enzima CPK, (fig. 4b), presentó mayores valores en la semana 23 de edad, etapa de inicio de la actividad reproductiva con la adecuación a factores ambientales y el aumento de la actividad muscular, probablemente como consecuencia de la alteración en la permeabilidad del sarcolema de la fibra muscular (Mitchell y Sandercock, 1994). Los valores inferiores de la enzima CPK, en las edades posteriores, se pueden asociar con los cambios en la actividad ovárica y la actividad mioprotectora de los estrógenos (Mitchell y Sandercock, 1996). El incremento de los valores del calcio total en las muestras de la semana 28 de edad en adelante, (fig. 6b), es coincidente con el mayor aporte de calcio en la dieta y con la etapa reproductiva. El cambio de forma de la distribución del calcio total en semana 33 coincidió con la etapa de máxima producción, mientras que el aumento del desvío estándar en la semana 63 de edad corresponde con un menor consumo de alimento y ciclo reproductivo disminuido; y en igual sentido para el fósforo, (fig. 7b). Se ha demostrado previamente que los valores de calcio plasmático pueden variar, entre otras causas, según la forma física de presentación y los niveles del calcio (Ansar y col., 2004), y de la vitamina D3 en la alimentación (Li, D., 2021). Consideramos, por tal sentido, que los registros de esta determinación pueden ser de utilidad práctica. Los triglicéridos aumentan junto a la actividad reproductiva y finalizan con mayor variabilidad hacia la semana 63 de edad con el final del ciclo productivo, posiblemente por efecto hormonal y consumo de alimento, (fig. 8b), de forma similar a lo observado en la producción de pavos (Hocking y col., 1998). Recientemente se ha presentado un reporte preliminar que incluyen valores bioquímicos plasmáticos obtenidos de reproductoras pesadas en la etapa de producción (Rezende y Fonseca, 2021) realizado en la universidad de Uberlândia, Minas Gerais, Brasil, utilizando reproductores de la línea genética Cobb®. Algunos valores allí mencionados se encuentran dentro de los rangos por nosotros observados con la genética Arbor Acres®, sin embargo, las comparaciones estadísticas que consideren la variabilidad de origen genético y otros factores deberán ser abordadas con mayor detalle en otros estudios. Sobre la presencia de valores atípicos o “outliers” en los análisis, hay que considerar lo que se conoce como paradoja de “RAO” (Salinas y Garrigós, 2011; Xavier Fuentes, 2011), siendo que los límites de referencia biológicos sólo consideran el 95% central de los individuos de una población, esto significa que al medir una magnitud biológica en un individuo sano, existe una probabilidad igual a 0,05 de que se obtenga un resultado fuera del intervalo de referencia biológico, por razones probabilísticas si en un mismo individuo sano en lugar de medir una

magnitud se miden n magnitudes independientes entre sí, la probabilidad de observar al menos un resultado fuera del intervalo de referencia biológico correspondiente es 1-0,95n; sin embargo, cuando las magnitudes están claramente correlacionadas estas probabilidades son menores. En nuestro estudio la eliminación de valores atípicos no se realizó con reposición de nuevas muestras por ser un análisis retrospectivo. Los límites de los valores de referencia se expresan junto al intervalo de confianza (IC) de 90% para el límite inferior y para el límite superior, sin embargo, no se pudo alcanzar en varios de estos intervalos la consigna de Boyd y Harris (1990) que recomiendan que el intervalo de confianza de los limites (IC) no supere 0,2 veces el ancho del rango de referencia (RR) de modo que (WIC/WRR< 0,2), donde WIC es el ancho del IC y WRR es el ancho del RR. Esta situación puede deberse a deficiencias de la técnica de boostrap, (Linnet, 2000; Guzmán, 2011), para el cálculo del IC de los límites, o quizás a los métodos preanalíticos empleados que son un reflejo a situaciones subóptimas que se pueden dar en la práctica veterinaria cotidiana de producción animal. La posibilidad de alcanzar este objetivo deberá ser tenido en cuenta en futuras investigaciones. Las observaciones realizadas permiten concluir que es posible realizar controles y establecer rangos de referencia para cada población específica de gallinas reproductoras, que para fines productivos es beneficioso considerar rangos de referencia para grupos etarios agrupados por etapa de ciclo productivo, estimando las particiones en las fases de alimentación, y que su registro puede ser de utilidad como prueba complementaria para evaluar el estado de salud, la alimentación y situaciones de estrés. Los resultados obtenidos brindan información sobre la consideración de utilizar medidas estadísticas con modelos teóricos de distribución normal, según el analito, en registros con similares características.

AGRADECIMIENTOS:

Se agradece la colaboración recibida por la Veterinaria Eliza Pozzobon (Soychu S.A.), al personal de la empresa Lauri Agropecuaria S.A. .

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BROMATOLOGÍA Y TECNOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS

BIOACUMULACIÓN DE CADMIO EN VIEIRAS Z. PATAGONICA DEL MAR ARGENTINO: ¿CONTAMINACIÓN ANTROPOGÉNICA O NATURAL?

AÓN, Ayelén1 ; BELLONIO, Débora2 ; GOYA, Alejandra3

1 Departamento de Contaminantes Químicos Inorgánicos, Laboratorio Regional Mar del Plata, SENASA. 2 Laboratorio Medioambiental CEDEAC, Mar del Plata. 3 Departamento Toxinas Marinas, Laboratorio Regional Mar del Plata, SENASA.

maon@senasa.gob.ar

INTRODUCCIÓN

Los moluscos bivalvos son organismos que se alimentan por filtración, y por tanto capaces de bioacumular diversos componentes presentes en el medio marino. Por esta característica suelen utilizarse como indicadores de contaminación. Metales pesados como el cadmio (Cd) generalmente son considerados contaminantes de origen antropogénico, para los que las regulaciones sanitarias establecen límites máximos permitidos (LMP) en los productos pesqueros destinados a consumo. En los moluscos el LMP para Cd es de 2 mg/kg (o de 2 ppm) de peso húmedo de muestra según lo dispuesto en nuestro país por el Código Alimentario Argentino (CAA). La vieira patagónica (Zygochlamys patagonica) es la principal especie de molusco bivalvo de explotación comercial en Argentina. Son extraídas por buques factoría que operan en altamar en las zonas del frente del talud a lo largo de la isóbata de 100 m. Las vieiras capturadas con redes de arrastre son procesadas a bordo, obteniendo como producto final músculos aductores congelados, denominados “callos de vieira”. Durante los días en que cada buque opera en altamar, muestras de vieiras enteras y de callos son obtenidas por personal oficial (observadores a bordo). Al arribar a puerto, las muestras son enviadas a los laboratorios del Senasa para controles microbiológicos y toxinológicos (biotoxinas marinas). La mayor parte de la literatura relacionada a niveles de Cd en moluscos hace referencia a especímenes

recolectados en zonas marítimas costeras y a poca profundidad. El objetivo del presente trabajo es presentar los valores de cadmio hallados en muestras de vieiras patagónicas extraídas en altamar a profundidades de entre 80 a 110 m, así como su relación con el producto final destinado a consumo (callos de vieira congelados). Por los resultados obtenidos podría considerarse que la biodisponibilidad de este elemento es una característica oceanográfica propia del Mar Argentino.

MATERIALES Y MÉTODO

Catorce (14) muestras de vieiras patagónicas (cuerpo entero) y catorce (14) de músculos aductores congelados, fueron obtenidas entre los años 2016 y 2017 de diversas zonas marítimas, georreferenciadas por Latitud Sur/Longitud Oeste. Cada muestra de músculo aductor estuvo asociado a vieiras enteras capturadas en la misma zona el mismo día. Los análisis de Cd se efectuaron por Espectrofotometría de Absorción Atómica (EEA) en base al Procedimiento interno validado PCP LRG MDQ CQI N°002. La digestión se realizó mediante vía seca en mufla (temperatura máxima 500°C) hasta reducción a cenizas que luego fueron disueltas en solución de ácido clorhídrico y ácido nítrico hasta el volumen final requerido. La lectura se efectuó con un Espectrofotómetro de absorción atómica Perkin Elmer AAnalyst 700, con detector de llama (Aire- acetileno). Previamente se realizó una curva de calibración con soluciones patrones de Cd certificados.

RESULTADOS

En todas las muestras de vieiras enteras lo niveles de Cd superaron el LMP, con valores entre 14.0 a 36.5 ppm (mg/kg). En cambio, los músculos aductores obtenidos de esas vieiras mostraron niveles de Cd entre 74 ppb y 286 ppb (µg/kg).

DISCUSIÓN

Los niveles de Cd detectados en vieiras Z. patagonica representaron hasta 18 veces más que el LMP establecido en la legislación argentina. No obstante, la concentración de Cd en los callos provenientes de esas vieiras no superó en ningún caso el LMP, mostrando valores muy por debajo del máximo (menor a una quinta parte del LMP). Estudios realizados en mejillones (Mytilus edulis) y cholgas (Aulacomya atra) recolectados en zonas costeras de la Patagonia continental (Gil et al, 2006) indicaron concentraciones de Cd equivalentes a 0,22 y 1,15 ppm. En vieiras Aequipecten tehuelchus procedentes de los golfos Nuevo y San José (Chubut) los niveles hallados fueron de hasta 13 ppm sobre peso seco (Gil et al, 1988) equivalentes a 2.6 ppm en peso húmedo. En ambos trabajos el Cd no fue detectable en sedimentos. Los autores expresan que este tipo de relación entre ambos sustratos estaría relacionada con una mayor solubilidad de este elemento en sistemas oxidados, respecto de los otros metales. Bajo condiciones aeróbicas, el Cd es un débil competidor en la adsorción sobre oxihidróxidos metálicos y por tanto es factible que predominen las formas disueltas, con mayor disponibilidad para la biota. En otro estudio con muestras de M. edulis recolectadas en el Golfo San Jorge (Pérez et al,2005) los niveles de Cd oscilaron entre 3.31 y 9.72 ppm sobre peso seco (aproximadamente 0.6 y 1.94 ppm en peso húmedo) en la zona de Punta Maqueda (Santa Cruz), sitio considerado de “aguas limpias” al estar alejado de actividades antropogénicas. Teniendo en cuenta de que no existían fuentes industriales o minerales de Cd en las proximidades de los lugares de procedencia de los moluscos analizados en los estudios anteriormente

citados, podría suponerse que su origen es natural. Con respecto a otras especies comerciales del Mar Argentino, una investigación llevada a cabo por el Senasa y la AESA (Agencia Española de Seguridad Alimentaria) demostró que los niveles de Cd en anchoíta (Engraulis anchoita) no se debían a contaminación antropogénica sino a causas naturales, por lo que la legislación europea y argentina modificaron el LMP de cadmio para esta especie (de 0,1 mg/kg a 0,3 mg/kg).

CONCLUSIONES

Los moluscos bivalvos suelen considerarse organismos centinela por su capacidad como indicadores de contaminación. El cadmio es uno de los elementos generalmente asociado a actividades humanas (industrias, minería, petroleras). Las altas concentraciones detectadas en vieiras Z. patagonica de bancos naturales distantes a más de 20 millas de las costas y a profundidades de 100 metros sugiere que este elemento es un componente natural, propio de las aguas del Mar Argentino. Las causas estarían asociadas a las características de las corrientes marinas y al fenómeno físico de las surgencias, con un ciclo biogeoquímico para el Cd propio de esta región que ocasiona una mayor biodisponibilidad y por tanto una mayor acumulación en la biota. Independientemente de su origen, altas concentraciones de cadmio en los alimentos son considerados un riesgo para la salud. En el caso de la vieira patagónica, extraída por buques factoría, solo se destinan a consumo los músculos aductores, en los que diversos contaminantes incluyendo el cadmio han sido detectados en valores muy por debajo a los límites de seguridad alimentaria.

BIBLIOGRAFÍA

Código Alimentario Argentino. Cap.III, Productos alimenticios, actualizado 2021. anmat_caa_capitulo_iii_prod_alimenticiosactualiz_2021-03

Gil MN, Torres A, Harvey M, Esteves JL. Metales pesados en organismos marinos de la zona costera de la Patagonia argentina continental. Rev. Biol. Mar. Oceanogr.(2006) 41(2):167-176

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DISCIPLINA: EPIDEMIOLOGÍA Y SALUD PÚBLICA

AVES, PECES, CANINOS Y BOVINOS COMO CENTINELAS DE SALUD EN AMBIENTES SILVESTRES, URBANOS Y AGROPECUARIOS

FERRÉ, Daniela1,2; CALIRI Martina 1,2; MENDEZ Sofía1, QUERO Martin 1; PALMA LEOTTA María1; GORLA Nora1,2

1 Laboratorio de Genética, Ambiente y Reproducción (GenAR). Universidad Juan Agustín Maza, Mendoza, Argentina. 2 Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET). Argentina. danielamarisolferre@gmail.com

INTRODUCCIÓN

El biomonitoreo es la evaluación de la exposición a un compuesto químico xenobiótico contaminante ambiental, a través de la determinación de éste o sus metabolitos en sangre, orina, leche, saliva, tejido adiposo u otros tejidos del hombre o animales (Bizjak et al., 2022). En salud pública, lo ideal es poder evaluar la exposición a sustancias tóxicas a través de estas mediciones que constituyen biomarcadores (BM) de exposición, y al mismo tiempo los posibles efectos biológicos de esos tóxicos, que signifiquen un riesgo para la salud lo cuales se denominan BM de efecto. En el uso de BM de exposición, la medición de químicos en sangre requiere de tecnología con instrumental analítico de última generación, mientras que los BM de efecto consisten en la identificación y cuantificación de los impactos, lesiones o daños sobre las biomoléculas, estructuras celulares y tisulares, enzimas, y/o también sobre parámetros fisiológicos e incluso del comportamiento animal. Por lo que, los BM de efecto son una alternativa más accesible, como las mediciones de actividades enzimáticas y análisis de morfología nuclear que se presentan en esta comunicación. En el concepto de “Una Salud”, propiciado por la Organización Mundial de la Salud, se apuesta al vínculo estrecho de la salud humana, animal y ambiental, donde la información obtenida en cada una de las partes, sirve a todas y viceversa. Bajo este precepto, es propicio que en los biomonitoreos se

estudien a los animales como bioindicadores, esto es, especies que se utilizan para valorar las condiciones de salud de los ambientes a través de la valoración de BM. El objetivo general de este resumen es valorizar el uso de animales como bioindicadores de calidad ambiental, y evaluar cuáles son los biomarcadores más factibles de estudiar en cada especie, de forma rutinaria o sencilla, para aportar al constructo de “Una Salud”.

MATERIALES Y MÉTODOS

Todos los animales y sitios estudiados fueron de la provincia de Mendoza. En la Reserva natural protegida de Ñacuñan y a 60 km distancia en una Finca agrícola donde se había aplicado clorpirifos a los cultivos 9 días antes, se capturaron ejemplares de gorrión común (Passer domesticus) (n= 24). Se cuantificaron BM hematológicos, enzimáticos y de genotoxicidad: hematocrito, recuento total eritrocitario (RTE), recuento total leucocitario, proporción de cada tipo de leucocito, índice heterófilos/ linfocitos; actividad acetilcolinesterasa (ACh); y alteraciones nucleares (AN) de los eritrocitos como la frecuencia de micronúcleos (MN), brotes nucleares (BN), células binucleadas (BN), puentes nucleoplásmicos (NP), colas nucleares, hendiduras nucleares (Notch), eritroplástidos (E), núcleos periféricos, y AN totales. En el embalse el Nihuil se capturaron con red n= 43 percas criolla (Percichtys trucha). Se tomaron muestras de sangre para analizar en eritrocitos MN, BN, PN, Notch, brotes nucleares y núcleos lobulados; y se les extrajo branquias, hígado y riñones para estudios histológicos estándares. En bovinos Abeerden Angus y cruzas machos de 15- 18 meses se evaluó el potencial tóxico de CPF combinado con cipermetrina (CIP) en animales sin y con tratamiento (n=12). En este caso se efectuó una aproximación “ex vivo” de BM de genotoxicidad a través del ensayo de MN con bloqueo de la citocinesis (CBMN), BM hematológicos, de función hepática y renal antes y 24h después de la aplicación de los antiparasitarios. En este ensayo y en animales de otros establecimientos (n=25) se midieron los valores de ACh eritrocitaria y butiril colinesterasa (BCh) sanguínea determinados por espectrofotometría. En caninos adultos con linfoma (n=3) se analizan 100 metafases por individuo obtenidas a partir de cultivos de sangre entera y en linfonódulos, con el objetivo de identificar posibles puntos de ruptura cromosómicos recurrentes marcadores o característicos de esta neoplasia. Algunos de estos resultados ya han sido presentados por especie en otras reuniones científicas, son aquí presentados en forma conjunta para aportar al objetivo general planteado. Según corresponda, se aplicó el test de ANOVA paramétrico o no paramétrico para valorar diferencias estadísticas entre grupos en estudio por especie, y el análisis de componentes principales para determinar asociaciones entre BM y sitios en estudio.

RESULTADOS

Se observó una diferencia estadísticamente significativa en los RTE entre los gorriones de la Reserva natural respecto de la finca fumigada (p=0,0190). Podría existir una potencial asociación entre las frecuencias de NP y E y las aves del sitio. Existió una reducción promedio del 53,3% en la actividad ACh en el grupo de aves posterior a la aplicación del plaguicida (p= 0,0047). En perca criolla se obtuvieron los valores de referencia de MN y otras AN. Se definieron por primera vez las características histológicas de branquias, hí-

gado y riñón para la especie. En bovinos, se definieron los valores referenciales de ACh y BCh, y el efecto del CPF sobre las mismas. No hubo diferencias significativas en los valores de los BM hematológicos, de funcionalidad hepática ni BM de genotoxicidad. Se observa uremia aumentada (p≤0,05) entre 24-168 h post tratamiento. Se observan núcleos de morfología irregular y presentación simultánea de MN y BN en linfocitos. Se presentan cariotipos de caninos con bandeo G. Se observan rupturas cromosómicas sin poder precisarse recurrencias específicas.

DISCUSIÓN

En gorriones se destacan importantes reducciones en los niveles de la actividad de ACh plasmática, más que en la variación en la frecuencia de AN, y hematológicas. Lo que se interpreta como que esta especie es sensible al efecto de anticolinesterásicos. En perca criolla se dispone de valores de referencia de seis tipos de AN en eritrocitos que podrán utilizarse comparativamente en situaciones como episodios de mortandad masiva de peces que se produzcan en este embalse, ya registradas, o en otros con sospecha de componentes medioambientales. Además, se definieron las características de branquias, hígados y riñón para disponer de BM histológicos específicos para la especie. En bovinos, se confirma la utilidad de medir ACh en lugar de BCh para evaluar el impacto de agentes anticolinesterásicos, Se promueve su uso pre faena para ampliar a los actuales controles post faena de residuos químicos en carnes. La presentación simultánea de Mn y BN no estaba descripta. Se desalienta el uso de CPF debido a su reciente prohibición a nivel nacional. CIP en dosis terapéuticas no produciría efectos tóxicos agudos. Las metafases de caninos tienen un alto número de cromosomas (2n= 78) de pequeño tamaño y similar, lo que dificulta su análisis citogenético convencional. Se sugiere complementar con técnicas citomoleculares. Debido a que algunos BM pueden ser más sensibles que otros se recomienda el uso de una batería de BM. Ante la presencia de múltiples contaminantes en el ambiente, añadir BM de exposición.

CONCLUSIONES

Es posible realizar estudios de BM en animales domésticos y silvestres en sus ambientes naturales. Disponer de los BM más aptos para la especie y de valores referenciales de los mismos es el primer paso para poder evaluar sucesos de exposición a xenobióticos en forma accidental y/o en prácticas agropecuarias habituales. El daño generado por los xenobióticos se presenta de diferentes maneras según la especie, pero advertir este daño mediante biomonitoreos, permite obtener información acerca de un efecto tóxico que podría también producirse en las personas en relación al concepto de Una Salud. El rol adjudicado a los animales bioindicadores para alertar sobre situaciones de riesgo tiene un valor intrínseco que los profesionales de la salud debemos valorizar para considerarlos componentes necesarios e imprescindibles de los ambientes que habitan.

BIBLIOGRAFÍA

BIZJAK, T.; CAPODIFERRO, M.; DEEPIKA, D.; DINÇKOL, Ö.; DZHEDZHEIA, V. et al. Human Biomonitoring Data in Health Risk Assessments Published in Peer-Reviewed Journals between 2016 and 2021: Confronting Reality after a Preliminary Review. International Journal of Environmental Research and Public Health. 2022. 19(6), 3362, 3- 18.

MICROBIOLOGÍA, ENFERMEDADES INFECCIOSAS Y PARASITARIAS

INFECCIÓN ANTROPOGÉNICA EN GATOS DOMÉSTICOS CON SARSCOV-2 VARIANTE ALFA LINAJE B.1.1.7 EN BUENOS AIRES

Malacari Dario 2 , Pecora Andrea 1, Mozgovoj Marina 3,4, Díaz María de los Ángeles 5, Verónica Peralta Andrea 6, Cacciabue Marco 6, Puebla Andrea 6, Carusso Cristian 7, , Mundo Silvia 7 , Gonzalez Lopez Ledesma María 8, Gamarnik Andrea 8, Rinald Osvaldo 9, , Vidal Osvaldo 9, Mas Javier 2,10 y Dus Santos María José 1,3 .

1. CyCV, Instituto de Virología, INTA, CONICET. 2. Diagnogen S.A., Buenos Aires, Argentina. 3. Instituto deBiotecnología, Universidad Nacional de Hurlingham, Buenos Aires, Argentina. 4. Centro de Agroindustria, Instituto de Ciencia y Tecnología de Sistemas Alimentarios Sustentables, INTA, CONICET. 5. Secretaria de Salud de la Municipalidad de la Matanza, Ministerio de Salud, Buenos Aires, Argentina. 6. CyCV,Instituto de Virología, INTA, CONICET. 7, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina. 8. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBBA, CONICET-Fundación InstitutoLeloir), Buenos Aires, Argentina. 9. Veterinaria Rinaldi Vidal, Buenos Aires, Argentina. 10. Diagnotest SRL, Buenos Aires, Argentina

INTRODUCCIÓN

SARS-CoV-2 es un coronavirus emergente del género Betacoronavirus causante de la enfermedad por coronavirus 2019 (COVID- 19). La pandemia provocada por el SARS-CoV-2 ha llegado acasi todos los países del mundo con una extraordinaria tasa de transmisión de persona a persona (1). Los Betacoronavirus tiene una amplia gama de huéspedes incluyendo diferentes grupos de vertebrados pudiendo, eventualmente, cruzar las barreras

de especies generando eventos de spillover, causando importantes enfermedades infecciosas respiratorias, entéricas y sistémicas (2), (3). Se ha reportado que los animales salvajes y de compañía son susceptibles a la infección por SARS-CoV-2. Por esta razón, aunque la transmisión de persona a persona es la principal forma de propagación del virus, existe una creciente preocupación con respecto a las zoonosis inversas, particularmente en el papel potencial que los animales de compañía infectados podrían jugar en la perpetuación de la propagación de la enfermedad (4). En este trabajo, se describe la infección natural de dos gatos por SARS-CoV-2, en Argentina, cuyo dueño había sido infectado previamente por SARS-CoV-2. Se identificó la variante alfa (linaje B.1.1.7) con una única mutación adicional, lo que sugiere fuertemente la ruta de transmisión de humano a gato.

MATERIALES Y MÉTODOS.

Caso Clínico Humano; el 10 de abril, un hombre de 39 años con malestar general, tos, fiebre, dolor de cabeza y anosmia (signos clínicos consistentes de COVID-19) fue muestreado para el diagnóstico de SARSCoV-2 en un nosocomio de la Zona Oeste del Gran Buenos Aires. Manifestó no presentar comorbilidades ni haber sido vacunado contra el SARSCoV-2. El hombre compartía un departamento con su familia (ubicado en un distrito al oeste de Zona Metropolitana de Buenos Aires) con cuatro mascotas felinas. Caso Clínico Animal; el caso de estudio animal comprende 4 felinos, común europeo, quienes cohabitan la vivienda en estrecho contacto con los humanos. El examen físico implicó examen objetivo general (EOG), auscultación, palpación, temperatura rectal, grado de deshidratación y examen de mucosas y por otro lado se realizaron estudios complementarios, incluyendo radiografías torácicas y ecografía. Se realizó hisopado nasofaríngeo y orofaríngeo utilizando hisopos de dacron y medio de transporte para el posterior estudio molecular. Se tomaron muestras de sangre con EDTA para el posterior análisis serológico. Estudios complementarios. Se realizó la determinación de anticuerpos anti SARS-CoV- 2 mediante ELISA y seroneutralización viral. La detección de SARS-CoV-2 de las muestras de hisopados de los felinos se realizó mediante RT-qPCR diseñada para amplificar la región ORF del SARS-CoV-2 (GENESIG), según las instrucciones del fabricante. La PCR detecta SARSCoV-2 pero no otros coronavirus. Las muestras de hisopados que resultaron positivas, tanto para los humanos como los felinos, fueron sometidas a secuenciación y a un análisis filogenético.

RESULTADOS

El 26 de abril, el Gato Nº1, macho castrado de 2 años de edad, presentó leve letargia por lo que fue trasladado a la clínica veterinaria. El EOG mostró 39,9 ° C de temperatura rectal y se palpó una masa en el mesogastrio. Se realizó un estudio ecográfico el cual mostró efusión peritoneal, se recuperó ese material y se realizó una RT-qPCR (Diagnogen S.A.) para descartar Coronavirus Felino, a su vez se confirmó la infección por SARS-CoV-2 por RT-qPCR en tiempo real de hisopado orofaríngeo. Tres días después los signos clínicos se agudizaron y el pronóstico fue desfavorable, teniendo varios parámetros en cuenta y por criterio del profesional a cargo se decidió realizar la eutanasia. Teniendo en cuenta lo ocurrido con el Gato Nº1, en mayo y en junio el veterinario examinó a los demás gatos que compartían el mismo ambiente (Nº2, Nº 3 y Nº 4). Los gatos 2 y 4 mostraron buen estado general, los

hisopados realizados en estos felinos resultaron “no detectable” a la detección de SARS-CoV-2 mediante RT-qPCR. El gato Nº3 también tenía un buen estado general, pero presentaba tos seca (asma felina) la cual persistió hasta el 19 de agosto, el estudio de RT-qPCR para SARS-CoV-2 resultó “Detectable” para este felino. Teniendo en cuenta estos resultados se decidió realizar un estudio radiológico al gatyo Nº3. El examen mostró un patrón bronquial e intersticial marcado en la zona diafragmática compatible con bronconeumonía intersticial. Este patrón ya había sido descripto por otros investigadores en gatos infectados con SARS-CoV-2 variante alfa. Para los Gatos Nº 2, Nº 3 y Nº 4, se obtuvieron muestras de suero del día 30 y 56 después del inicio de los síntomas en el paciente humano y se realizó detección de anticuerpos anti-proteína Spike mediante ELISA y ensayo de seroneutralización viral. Se observó que los gatos Nº2 y Nº4 no presentaron una respuesta humoral detectable contra SARS-CoV-2 mientras que el gato Nº 3 presento una fuerte respuesta de anticuerpos. Por otro lado. Las muestras de los tres gatos resultaron no reactivas a la detección de anticuerpos anti Coronavirus Felino realizado mediante inmunocromatografía lateral descartando de esta manera el posible cruzamiento entre anticuerpos de ambos virus. La secuenciación del genoma completo de SARS-CoV-2 de las muestras de hisopados del gato Nº 3 y del humano permitió caracterizar al virus detectado como variantes Alfa (linaje B1.1.7), además se observó una mutación adicional, la C22997A, que produce el cambio de aminoácido P479T en la glicoproteína Spike. El árbol filogenético determinó que las muestras del gato Nº 3y del humano están estrechamente relacionadas.

DISCUSIÓN

Este trabajo describe un evento de zoonosis inversa ocurrido entre un humano y dos gatos domésticos en la zona oeste del Área Metropolitana de Buenos Aires. En este caso en particular, los gatos del estudio presentaban signos respiratorios preexistentes como comorbilidad, probablemente por enfermedades o deficiencias nutricionales sufridas antes de su adopción. Esta condición pudo haber predispuesto a los gatos a infectarse con SARS-CoV-2. Los análisis filogenéticos determinaron que el humano y el gato Nº3 se infectaron con la variante Alfa (linaje B.1.1.7) de SARS-CoV2, la cual se encontraba circulando en la zona donde ocurrió este caso. Aún se desconoce el efecto de las variantes descritas en animales, en términos de transmisibilidad, gravedad de la enfermedad y patogénesis. La presencia de SARS-CoV-2 en mascotas también fue indirectamente identificado en varios estudios, mediante la detección de anticuerpos específicos contra la proteína Spike o anticuerpos neutralizantes. En este trabajo, la muestra de sangre del gato Nº 3 presentó una fuerte reactividad en la técnica de ELISA utilizada y una clara inducción de anticuerpos anti-spike. Las mascotas que habitaban la casa eran gatos callejeros adoptados que eran adultos en el momento de este estudio, y tres de ellos tenían signos respiratorios crónicos preexistentes como comorbilidad. El gato Nº1 fue el primero en mostrar unos síntomas compatibles con COVID-19, y se confirmó la presencia del SARS-CoV-2. Unos días más tarde, el gato Nº 2 y Nº 3 mostraron signos clínicos leves, y por otro lado, este último mostró un resultado positivo claro a RTqPCR de SARS-CoV-2. Es importante mencionar que 101 días después de este resultado, se realizó un estudio radiográfico al gato Nº3 el cual mostró bronconeumonía intersticial, esto también fue observado por Zoccola y col.,

2021 (5) en un gato infectado con SARS-CoV-2 variante alfa. Teniendo en cuenta que los cuatro gatos habían estado en estrecho contacto entre sí, y la convivencia con el propietario quien presentó la infección en una primera instancia, la posibilidad de transmisión entre el gato Nº 1 y el Nº 3 no puede ser descartada. La transmisión de gato a gato es factible a través del contacto directo o aerosoles, lo que se ha demostrado en infecciones experimentales (6 - 10).

CONCLUSIÓN

Teniendo en cuenta el impacto de la actual pandemia de COVID-19 y la notoria relevancia de los animales en la epidemiología de coronavirus (spill-over, salto entre especies y características zoonóticas), el concepto “Una salud”, ahora más que nunca, se vuelve extremadamente importante. Los servicios de Salud Pública y Medicina Veterinaria deben compartir información y trabajar juntos integrando perspectivas humanas, animales y ambientales para abordar futuros problemas de salud.

BIBLIOGRAFIA

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(2) Saif LJ. Animal coronaviruses: what can they teach us about the severe acute respiratory syndrome? Rev Sci Tech. (2004) 23:643–60. doi: 10.20506/rst.23.2.1513

(3) Corman VM, Landt O, Kaiser M, Molenkamp R, Meijer A, Chu DK, et al. Detection of 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) by real-time RT-PCR. Euro Surveill. (2020) 25:2000045. doi: 10.2807/15607917.ES.2020.25.3.2000045

(4) Leroy EM, Ar Gouilh M, Brugère-Picoux J. The risk of SARS-CoV-2 transmission to pets and other wild and domestic animals strongly mandates a one-health strategy to control the COVID-19 pandemic. One Health. (2020) 10:100133. doi: 10.1016/j.onehlt.2020.100133

(5) Zoccola R, Beltramo C, Magris G, Peletto S, Acutis P, Bozzetta E, et al. First detection of an Italian human-tocat outbreak of SARS-CoV-2 Alpha variant - lineage B.1.1.7. One Health. (2021) 13:100295. doi: 10.1016/j.onehlt.2021.100295

(6) Shi J, Wen Z, Zhong G, Yang H, Wang C, Huang B, et al. Susceptibility of ferrets, cats, dogs, and other domesticated animals to SARS-coronavirus 2. Science. (2020) 368:1016–20. doi: 10.1126/ science.abb7015.

(7) Halfmann PJ, Hatta M, Chiba S, Maemura T, Fan S, Takeda M, et al. Transmission of SARS-CoV-2 inDomestic Cats. N Engl J Med. (2020) 383:592–4. doi: 10.1056/NEJMc2013400

(8) Bosco-Lauth AM, Hartwig AE, Porter SM, Gordy PW, Nehring M, Byas AD, et al. Experimental infection of domestic dogs and cats with SARS-CoV-2: pathogenesis, transmission, and response to reexposure in cats. Proc Natl Acad Sci USA. (2020) 117: 26382–8. doi: 10.1073/pnas.2013102117

(9) Gaudreault NN, Trujillo JD, Carossino M, Meekins DA, Morozov I, Madden DW, et al. SARS-CoV-2 infection, disease and transmission in domestic cats. Emerg Microbes Infect. (2020) 9:2322–32. doi: 10.1080/22221751.2020.1833687

(10)Lakdawala SS, Menachery VD. The search for a COVID-19 animal model: a comparison of SARS-CoV-2 replication, transmission, and disease in mice to monkeys. Science. (2020) 368:942–3. doi: 10.1126/science.abc6141

GRANDES ANIMALES

DIAGNÓSTICO DE MASTITIS BOVINA SUBCLINICA: DETECCIÓN PATÓGENOS POR PCR EN TIEMPO REAL Y DE CÉLULAS INFLAMATORIAS EN LECHE

VINTIÑI Elisa1*, MEDINA Marcela2, GUTHER Verónica1, LÓPEZ Natalia1, ACOSTA Virginia1 y PALAZÓN Eliana2

*e-mail: eovintini14@yahoo.com.ar

1 LARIVENOA (Lab. de Referencia y Diagnóstico de Infecciones Microbianas Veterinarias del NOA) - Fac. Agronomía y Zootecnia - UNT. Tucumán – Argentina 2 Fac. Bioquímica, Química y Farmacia - UNT. Tucumán - Argentina

INTRODUCCIÓN

La mastitis subclínica (MSC) corresponde al proceso inflamatorio de una o más glándulas mamarias, que no afecta la apariencia de la glándula, pero conduce a una alteración significativa de los componentes químicos de la leche. La respuesta inflamatoria (RI) inducida provoca alteraciones físicas, químicas y celulares de la leche, como respuesta del tejido secretor a la agresión por agentes infecciosos (Richardetab et al., 2016). Staphylococcus aureus (S. aureus) y Streptococcus agalactiae (Str. Agalactiae) son los principales patógenos involucrados en esta mastitis. Ambos patógenos sobreviven en la ubre formando una pseudocápsula lipoproteica, que dificulta la fagocitosis (Cervantes et al., 2017). Estudios en tambos de Argentina mostraron un predominio de ambos como causantes de MSC y su control requiere una identificación diagnóstica temprana de las vacas infectadas. S. aureus es el principal responsable del aumento de mastitis subclínicas en vacas (Dieser et al., 2014, Calvinho L.F. 2009;) y causa las mayores pérdidas económicas en comparación con otros patógenos. Se multiplica en vacuolas citoplasmáticas de la célula alveolar y sobrevive

en neutrófilos y macrófagos, resistiendo a la acción de agentes antibacterianos. Además, está involucrado en brotes de enfermedades trasmitidas por alimentos, como leche y derivados lácteos, puede encontrarse en leche sin pasteurizar, por lo cual su detección es de gran importancia para la salud animal y la salud pública. Str. Agalactiae puede diseminarse rápidamente dentro de un rebaño y persistir indefinidamente dentro de la glándula mamaria. Los animales infectados actúan como reservorio del patógeno, eliminando grandes cantidades de esta bacteria al tanque. La identificación de estos patógenos se realiza por métodos microbiológicos convencionales laboriosos y que requieren tiempo prolongado para la obtención de resultados. Es de fundamental importancia realizar el diagnóstico con pruebas más específicas y rápidas. Las técnicas de biología molecular como PCR en tiempo real (Huertas Caro et al., 2018) con alta especificidad y sensibilidad, proporcionan un método eficaz y rápido para la identificación temprana de S. aureus, Str. agalactiae en leche. La entrada de agentes infecciosos en la glándula mamaria durante la mastitis conduce al aumento de la permeabilidad de los capilares sanguíneos y a la destrucción de las uniones intercelulares, permitiendo el pasaje de elementos de la sangre a la leche. En un animal sano, las células somáticas (CS), incluyen leucocitos polimorfonucleares (PMN), macrófagos (MA), linfocitos (L) y células epiteliales (CEs). La modificación de la proporción y el incremento de estos elementos celulares, se alteran con la severidad de la inflamación. Objetivos: a) Detección por PCR en tiempo real de S. aureus, Str.agalactiae, causantes de mastitis subclínica y b) Evaluación del % de células de la RI en muestras de leche.

MATERIALES Y METODOS

El trabajo se llevó a cabo en LARIVENOA de la Fac. de Agronomía y Zootecnia-UNT. Se evaluaron animales Holando-Argentino, Jersey y mestizos destinados al ordeñe, que no presentaban ningún problema sanitario clínico. Los animales pertenecen a Tambo localizado en la cuenca Tapia Trancas–Tucumán, alimentados con pasturas, principalmente alfalfa y alimento balanceado completo. Al momento del muestreo, se encontraban entre los 120 y 150 días de lactación. Se tomaron 18 muestras de leche, cada una correspondiente a un pool de los cuatro cuartos de la ubre en tubos estériles, realizando previamente la desinfección de la glándula mamaria con alcohol 70 y posterior despunte. Las muestras fueron trasladadas al laboratorio con refrigeración para realizar el procesamiento de las mismas. La detección de S. aureus y Str.agalactiae por PCR en tiempo real se realizó por amplificación del gen 16S rRNA específico para cada patógeno, empleando SyBR Green como fluorocromo intercalante. Se emplearon cepas patrón como control (+), E. coli como control (-) y como control de técnica se usó el gen del citocromo-B de CBS, presentes en la leche. La extracción de ADN se hizo con kit comercial según especificaciones del fabricante. La identificación de las células de RI se realizó en extendidos de leche. La evaluación se hizo por microscopia óptica, usando la coloración “Tinción 15”.

RESULTADOS

Se detectaron los genes rRNA 16S específico de S. aureus en las 18 muestras evaluadas y de la cepa patrón por PCR en tiempo real (Tm: 53, 45 ciclos). En contraste, las 18 muestras fueron negativas para Str.agalactiae. Las muestras positivas mostraron diferentes valores de ct. Las células de la res-

puesta inflamatoria mostraron diferentes patrones porcentuales, según el tipo celular. Se observó un marcado incremento de PMN en todas las muestras analizadas, con excepción de la M1 y M5. Los MA mostraron valores inferiores al control en todas las muestras evaluadas. Los Linfocitos, mostraron patrones muy variables y en algunas muestras tales como 5, 10, 13 y 15, los % fueron mayores al control. Las CEs mostraron valores significativamente mayores al control en las muestras 1, 2, 3, 5, 8, 12, 14 y 17.

DISCUSIÓN

La mastitis es una “enfermedad polifactorial y la de mayor prevalencia en el rodeo es la subclínica. El riesgo de la infección depende del sistema Inmune de la vaca, del tipo, número y patogenicidad de las bacterias presentes en el hato y, fundamentalmente, de las condiciones del medio ambiente y del manejo del ordeño en el establecimiento. Las modificaciones observadas en los porcentajes de los distintos tipos de células de la RI en la leche, nos da una valiosa información para identificar las vacas infectadas y adoptar estrategias de manejo adecuadas e inmediatas. Asimismo, la detección temprana de S. aureus, S agalactiae, por técnicas moleculares y la evaluación de las modificaciones de los porcentajes de las distintas células de la RI, en muestras de leche de bovinos de tambos de Tucumán, permitió la aplicación de tratamientos adecuados y específicos para cada patógeno. Conclusiones La detección rápida de patógenos en leche por técnicas moleculares constituye una valiosa herramienta de diagnóstico para detectar animales enfermos y portadores en un sistema de explotación bovina. Ello permitirá adoptar estrategias preventivas eficaces para controlar la diseminación de la enfermedad y realizar una caracterización de la predominancia de una infección u otra en cada establecimiento lechero, facilitando la implementación de programas preventivos para control de estos patógenos. El desbalance celular observado en leche de vacas con MSC asociada a S. aureus abre la posibilidad de un control exhaustivo y efectivo del estado de sanidad y calidad de la leche, lo que redundará en la obtención de un alimento sano para el consumidor. En ese sentido la salud animal promueve la salud humana.

BIBLIOGRAFÍA

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GRANDES ANIMALES

DIAGNÓSTICO PRECOZ E OSTEOPERIOSTITIS METACARPIANA EN SPC MEDIANTE ULTRASONOGRAFÍA MODO B Y DOPPLER DE PODER.

BOFFA, María.1; FERREIRA, Violeta1; OLGUIN, Silvia1; MONINA, Marta2 . 1. Hospital Escuela. Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad Nacional de La Plata. 2. Práctica privada en medicina equina. La Plata, Argentina. mfboffa@fcv.unlp.edu.ar

INTRODUCCIÓN

La osteoperiostitis metacarpiana dorsal es una afección aguda y dolorosa sobre la superficie dorsal del tercer hueso metacarpiano (Mc III). Se presenta con mayor frecuencia en equinos jóvenes de entre 2 y 3 años de edad, en los miembros torácicos, en condiciones de entrenamiento y carrera. Puede ser tan severa que termina retirando al paciente de las pistas (Nunamaker, 2010). La remodelación del hueso perióstico se presenta como respuesta a la fatiga cíclica de alta tensión y deja al hueso susceptible a futuras fracturas catastróficas en el área de lesión inicial. El diagnóstico precoz permite instaurar el tratamiento adecuado y modificar la carga del ejercicio para prevenir estas complicaciones. El diagnóstico suele ser a través de la historia clínica. Poca información se obtiene por medio de la anestesia por infiltración local directa del área álgica, debido a que sólo produce un alivio parcial de la claudicación. Con respecto a la radiología, no suele evidenciar anormalidades en los casos leves o agudos de la enfermedad. La gammagrafía evidencia un aumento focal de la captación de radiofármacos sobre la cortical, dando información precisa del

área problema (Bertone y Ortved, 2020); pero es poco específica y no está disponible en nuestro país. Respecto a la ultrasonografía (USG), en la actualidad no existen reportes en la bibliografía de su uso para la evaluación de la inflamación del periostio en equinos y mucho menos en el diagnóstico y seguimiento de la osteoperiostitis metacarpiana dorsal. Sin embargo; la USG de alta resolución revela cambios sutiles de la superficie ósea, como pequeñas reacciones del periostio o soluciones de continuidad, a veces no detectables por radiografía simple. En ausencia de signos claros o evidentes de remodelación ósea con Modo B (MB), la evaluación con Modo Doppler de Poder (DPI) permite estimar la actividad cortical mediante la determinación del aumento de la vascularización a nivel del periostio (Mariano y col, 2016). El objetivo de este trabajo fue describir el uso de la USG en MB y con DPI en eldiagnóstico precoz y control de la evolución de las osteoperiostitis metacarpiana en equinos SPC (Sangre Pura de Carrera).

MATERIALES Y MÉTODOS

Se evaluaron tres equinos SPC, entre 2 y 3 años de edad, de ambos sexos, en entrenamiento, con signología compatible con osteoperiostitis dorsal del hueso Mc III. En todos los casos se realizó examen clínico, estudio radiológico y ecográfico en MB y Modo DPI de la región metacarpiana dorsal de ambos miembros torácicos. Se utilizó un equipo de radiología X Diagnostic portable x-ray unit AJEX9020H y un ecógrafo Doppler Portátil, QSONO, Q8 con sonda lineal de frecuencia 4.5-10MHz acoplada a un pad de silicona. El examen clínico consistió en evaluar el grado de claudicación, inspección y palpación de la región metacarpiana dorsal de ambos miembros torácicos, el estudio radiológico comprendió las incidencias latero-medial (LM), dorso-palmar (DP) y oblicuas sobre el área a evaluar, para el estudio ecográfico en MB se utilizó una frecuencia entre 7,5-9 MHz, para el Modo DPI un PRF promedio de 1.5 y ganancia promedio de 30. La región metacarpiana dorsal de ambos miembros torácicos fue rasurada y se dividió en6 zonas, en sentido proximal a distal, para sectorizar los hallazgos. Las zonas 1 y 2 correspondientes al tercio proximal, 3 y 4 al tercio medio y 5 y 6 al tercio distal. Para la evaluación en MB los cambios observados en la cortical se clasificaron en función de la presencia de deformación de la superficie dorsal del Mc III y signos de remodelación en leve, moderada o severa de la cortical ósea. Con el Doppler DPI se evaluó la presencia de flujo sanguíneo a nivel de la cortical ósea y para estandarizar la señal Doppler DPI se clasificó en leve, moderada e intensa. En todos los casos se realizaron controles ecográficos cada 7 días desde el primer estudio hasta la remisión de la señal Doppler DPI y un estudio radiológico al inicio y otro coincidente con el último control clínico y última evaluación ecográfica.

RESULTADOS

El examen clínico arrojó en todos los casos claudicación de grado variable, sensibilidad a la palpación y deformación del aspecto dorsal de la región metacarpiana en las zonas 2 y 3. El estudio radiológico del hueso Mc III no detectó anomalías óseas evidentes en los tres casos tanto en el primer estudio como en el estudio final. La ultrasonografía en MB evidenció leve irregularidad de la superficie dorsal del hueso Mc III en dos de los casos en el aspecto dorsomedial de la zona 2 y en el tercer caso en el aspecto dorsal de la zona 3; es decir principalmente en el tercio proximal y aspecto medial de la región

metacarpiana. Con respecto a la evaluación con el Modo DPI todos los casos evaluados presentaron señal leve sobre la cortical ósea en el área lesional detectada con el MB, mientras que no se obtuvo señal DPI en la superficie perióstica de las demás zonas evaluadas. En todos ellos la señal Doppler DPI desapareció a las 4 semanas de la evaluación. La remisión de la señal Doppler DPI coincidió con el alta clínica y aun no eran evidentes los cambios en los estudios radiológicos control. Eso permitió al paciente reanudar su actividad siempre dentro de un programa de entrenamiento progresivo.

DISCUSIÓN

En la actualidad, en medicina veterinaria, existen escasos reportes del uso de la USG en MB con Modo DPI en la detección de cambios en el periostio asociados a la inflamación. En medicina humana, las periostitis se detectan precozmente con el MB como alteraciones, irregularidades y/o engrosamiento en la cortical ósea siendo la USG más sensible que la radiología. La utilización del Modo DPI sobre la cortical ósea alterada identifica el aumento de la vascularización del área comprometida, determinando si la cortical se encuentra o no reactiva (Mariano y col, 2016). En nuestro trabajo la USG en MB con Modo DPI permitió identificar el aumento de la vascularización del periostio del área de lesión y determinar si la cortical alterada se encontraba o no reactiva similar a lo reportado en medicina humana (Bodner y col,2005, Leininger 2010).

CONCLUSIONES

La ecografía es un valioso complemento, eficaz y no invasivo para el diagnóstico, evolución y seguimiento de la osteoperiostitis metacarpiana dorsal del SPC. Conociendo las ventajas del método y sus aplicaciones se puede estimar su utilidad en la evaluación predictiva de la adaptación del hueso al ejercicio, en la determinación precoz de la inflamación periostal y el seguimiento de su evolución. El hecho de poder detectar precozmente cambios en la cortical ósea, incluso cuando los estudios radiológicos no son concluyentes, la convierten en un método complementario de inestimable valor para el diagnóstico de este tipo de afecciones (Iagnocco y col., 2011), evitando futuras lesiones catastróficas además de evaluar la efectividad de la terapéutica y controlar el programa de entrenamiento de los pacientes.

BIBLIOGRAFÍA

1. BERTONE, A., ORTVED, k. (2020) The metacarpus and metatarsus. In: Baxter, G. Adams and Stashak’s Lameness in horses. 7a. Edición. USA, 2020. p.563-566. 2. BODNER, G., Stöckl, B., Fierlinger, A., Schocke, M., & Bernathova, M. (2005). Sonographic findings in stress fractures of the lower limb: preliminary findings. European radiology, 15(2), 356-359.

3. IAGNOCCO, A., CECCARELLI, F., PERRICONE, C., & VALESINI, G. (2011, April). The role of ultrasound in rheumatology. In Seminars in Ultrasound, CT and MRI Ed WB Saunders,2011. Vol. 32, No. 2, pp. 66-73

4. LEININGER, A. P., & Fields, K. B. (2010). Ultrasonography in early diagnosis of metatarsal bone stress fractures. Sensitivity and specificity. The Journal of Rheumatology, 37(7), 1543-1543.

5. MARIANO, J., JUANA, L., ITURBIDE, I., MASSE, P., PASZKIEWICZ, M. R., y ROSS, J. Rol de la ecografía en la evaluación de la cortical ósea. Revista argentina de radiología,2016, 80(2), p127-135.

6. NUNAMAKER. The bucked Shin Complex in: Ross, Ross, M. W., & Dyson, S. J., Diagnosis and Management of Lameness in the Horse, Ed Elsevier Health Sciences, 2010, p 847-852.

ANIMALES NO TRADICIONALES

PREVALENCIA DE HEPATOZOON SP. EN BOAS CURIYÚ (EUNECTES NOTAEUS) EN SILVESTRÍA

MAÑEZ Mariané¹; UCEDO Vanesa²; DIAZ Julia ¹; Palumbo E¹; DRAQUE Juan³ y BARROS Mariano³.

¹ CEPAVE (Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectores) CONICET-UNLP. correo: marianemanez@cepave.edu.ar ² Cátedra de Histología y embriología, Laboratorio de Histología y Embriología Descriptiva, Experimental y Comparada (LHYEDEC) ³ Fundación Biodiversidad.

INTRODUCCIÓN

Los Haemogregarines son hemoparásitos Apicomplexa, entre los que se encuentran los miembros del género Hepatozoon, el grupo más común de protozoos intracelulares encontrados en las serpientes. El ciclo de vida completo de estos parásitos aún no se conoce con exactitud en reptiles. Se sospecha que la infección se produce por dos caminos distintos. Uno a partir de la acción hematófaga de invertebrados (i.e. garrapatas, piojos, pulgas, sanguijuelas y dípteros) y el otro por la ingesta de vectores o animales infectados. La presencia de parásitos dentro de una población hospedadora puede comprometer el sistema inmune de los individuos, volviéndolos susceptibles a enfermedades y disminuyendo su fitness reproductivo.

MATERIALES Y MÉTODO

Se colectó sangre de la vena coccígea de 23 adultos de boas Curiyú ( Eunectes notaeus) provenientes del Programa para la conservación y el aprovechamiento sustentable de la boa Curiyú en el Bañado La Estrella, Formosa durante Mayo y Junio del 2019, y de 32 adultos durante Junio de 2021. Con las muestras obtenidas se realizaron frotis sanguíneos que fueron fijados a campo con metanol y poste-

riormente teñidos con Tinción Giemsa en laboratorio. Se realizó recuento diferencial de leucocitos y se identificaron los hemoparásitos y se cuantificó la cantidad de gamontes presentes en 100 eritrocitos. Se calcularon las prevalencias y las cargas parasitarias por año y por sexo del hospedador.

RESULTADOS

En el 86,95 % (20/23) de los hospedadores adultos analizados en 2019 y el 62,5% (20/32) se observaron gamontes de Hepatozoon sp. Del total de individuos positivos analizados en ambos años 19 fueron hembras y 21 fueron machos. Todos los individuos positivos presentaron cargas parasitarias de entre 1 y 4 gamontes/100 eritrocitos, excepto dos hembras, una de 2019 que presentó 13 gamontes/100 eritrocitos y otra de 2021 que presentó 14 gamontes/100 eritrocitos.

DISCUSIÓN

La prevalencia de gamontes de Hepatozoon sp. en 2019 fue mayor que la encontrada en 2021. No hubo diferencias significativas entre machos y hembras (p= 0.54). Si bien ambas prevalencias fueron altas, las cargas parasitarias fueron bajas y no parecieran provocar una alteración hematológica.

CONCLUSIONES

De los 55 individuos evaluados en este trabajo el 72,72% fue positivo a Hepatozoon sp. No hubo diferencias significativas entre ambos sexos ni alteraciones hematológicas. Los parámetros parasitológicos hallados tendrían un bajo impacto sobre la salud de los animales.

BIBLIOGRAFÍA

ENRÍQUEZ C., ELÍAS R., MONTES D Y SALDARRIAGA F. Presencia de hemoparásitos de los géneros Hepatozoon y Haemoagregina en ejemplares de cocodrilo americano (Crocodylus acutus) mantenidos en cautiverio en Tumbes, Perú. zooLógica 1(1): 1-7, 2014. Págs 44-49

TELFORD, S. Hemoparasites of the Reptilia: color atlas and text. CRC Press Taylor & Francis Group. 2009. Págs 200-245

ZAMUDIO ZULUAGA N. Y RAMÍREZ MONROY M. Presencia de Hepatozoon spp. en serpientes del centro de atención y valoración de fauna silvestre (cav) del área metropolitana del valle de aburrá, Barbosa – Antioquia. Revista CES .Medicina Veterinaria y Zootecnia 2 (2) 2007. Págs 33-35

PEQUEÑOS ANIMALES

CIENCIAS BÁSICAS: ANATOMÍA EVALUACIÓN A LARGO PLAZO DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON EL USO DE LA SOLUCIÓN FIJADORA DE MC CORMICK

AUTORES Borges Brum Gonzalo1; Casalonga Osvaldo2; Vera Ana Lía1; Miño , Martín 1 Blanco Carlos3 1. Ayudante de Primera 2. Jefe de Trabajos Prácticos 3. Profesor Adjunto Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad de Buenos Aires, Cátedra de Anatomía gborgesbrum@fvet.uba.ar

INTRODUCCION

En la Cátedra de Anatomía de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad de Buenos Aires hace varios años estamos trabajando en la sustitución del formol en el aula de anatomía en el marco de un proyecto de investigación UBACYT. La solución para fijación y conservación utilizada en la cátedra es la solución acuosa de formaldehido al 10% En este trabajo evaluamos los resultados obtenidos en preparados anatómicos que fueron fijados y conservados en solución de Mc Cormick en el año 2015. Esta solución fue preparada en tres variantes, con formol al 5% y 10% en su fórmula y con alcohol isopropilico en lugar de formol.

MATERIALES Y METODO

Este trabajo se realizó en la cátedra de Anatomía en el año 2022. Los preparados utilizados fueron diversos cortes de corazones, riñones, laringes y bazos de caninos. Algunos fueron conservados en solución de Mc Cormick con formol al 5%, otros con Mc Cormick con formol al 10% y los restantes con Mc Cormick con alcohol isipropilico. La solución de Mc Cormick está constituida por fosfato de potasio (PO4K3) 3 gr, fosfato de sodio (PO4Na3) 11,5 gr, ácido ascórbico (C6H8O6) 7,5 gr, sal de Praga (NO3Na) 38,5 gr, Formaldehído 500 ml y agua destilada 4500 ml. En la otra variante solo se sustituye el formol por alcohol isopropilico.

Estos preparados fueron conservados en su correspondiente solución desde el año 2015 a la actualidad. Se observaron sus características organolépticas, forma, tamaño y color Se tomaron registros fotográficos de los distintos preparados.

RESULTADOS

Los preparados se encontraban en perfecto estado de conservación, manteniendo en todos los casos la forma y el tamaño original. No presentaron olor irritante y fueron fáciles de manipular. En algunos casos se mantuvo el color original y en otros casos sufrieron variaciones de color, asociadas a la predominancia de tejido muscular.

DISCUSIÓN

El formol es un excelente fijador y de valor muy económico por lo cual su remplazo total en el corto plazo es muy difícil, aunque nuestro principal objetivo es reducir su utilización al mínimo indispensable. La solución de Mc Cormick es una solución tanto fijadora como conservadora y mantiene los colores mejor que la solución de formaldehido. Nos queda como reto seguir probando variaciones para mejorar el color de las preparaciones que resultaron alteradas

CONCLUSIONES

El uso de la solución de Mc Cormick demostró conservar en condiciones aceptables piezas anatómicas de diferente composición (tejidos conectivos, parenquimatosos, y vísceras huecas) durante un período largo de tiempo de hasta 7 años.

BIBLIOGRAFIA

Giménez Mas, J.A. y col. “Alternativas al formol como fijador de piezas y tejidos anatómicos” Libro Blanco de Anatomía Patológica en España. 2011. 101-106. Suplemento.. Raymond, C. “Reducing the levels of formaldehyde exposure in gross anatomy laboratories”. The Anatomical Record. 1995; 243: 531-533 Prat, G; Costi, D; Siris Machado, F; Raiti Sposato, E; Pallaro, R; Bonini, M. “Mc. Cormick, nuestra experiencia en preparados anatómicos frescos y formolizados”. Tercera época. Revista científica de la Facultad de ciencias médicas. 2014; vol 4, N°3, 1-11.

PEQUEÑOS ANIMALES

RESOLUCIÓN QUIRÚRGICA DE URÉTER ECTÓPICO EN CANINO ADULTO POR LA TÉCNICA DE REIMPLANTACIÓN URETERAL EXTRAVESICAL LICH-GREGOIRE

DE ANDREA, María José1; VECCHIO, Leandro2; ROBLEDO, Oscar3; DE PALMA, Viviana4; BASCHAR, Hugo5 . mjdeandrea@fcv.unlp.edu.ar

1, 2 Y 3 JTP Cátedra de Cirugía, 4 JTP Cátedra de Clínica de Pequeños Animales y 5 Dr. Prof. Titular Cátedra de Cirugía. FCV UNLP

INTRODUCCIÓN

La reimplantación ureteral está indicada luego de una lesión iatrogénica, traumatismo, neoplasias malignas y en las anomalías congénitas. La ectopia ureteral es una anomalía congénita del uréter distal, esta puede ser intra o extra mural, en la que uno o los dos uréteres desembocan de forma anómala en la uretra o en la vagina en lugar de hacerlo en el trígono vesical. El signo clínico principal es la incontinencia urinaria, que puede ser continua o intermitente desde el nacimiento o el destete. El tratamiento de elección es el quirúrgico, existiendo diferentes técnicas en función del tipo de ectopia ureteral. En la especie canina, la gran mayoría de los uréteres ectópicos son intramurales; entran en la vejiga en la ubicación anatómica normal; sin embargo, en lugar de terminar en el trígono de la vejiga continúan viajando submucosamente para abrirse dentro de la uretra o la vagina. En la ectopia extramural el uréter desemboca directamente en uretra o vagina. A menudo se asocia con otras anomalías urogenitales, incluido hidroureter, riñones pequeños, deformes o ausentes; y anomalías vestibulovaginales como restos paramesonéfricos.

MATERIALES Y MÉTODOS

Se presentó a consulta un paciente canino, mestizo, hembra de 2 años de edad. El motivo de consulta fue por presentar incontinencia urinaria desde cachorra. Un año atrás se le había realizado una ecografía llegando al diagnóstico de uréter ectópico. Los datos más relevantes del examen físico fueron el hallazgo de una vejiga pequeña y firme a la palpación. En el momento de la consulta se procedió a extraer sangre para perfil prequirúrgico, en el cual se observó alterado los valores de uremia y de globulinas. En el ECG prequirúrgico se observó arritmia sinusal trastornos en la repolarización ventricular. Para completar el diagnostico se indicó ecografía y radiografía contrastada. En la ecografía se observó relación cortico medular alterada en el RI, en zona de proyección de pelvis renal se manifiesta una distensión de la misma en 1.66 cm (valores de referencia normal hasta 0.35cm), continuándose el recorrido del uréter en diferentes mesuras 1.16-0.81-0.72 cm. El RD sin particularidades al momento del estudio. LN iliaco medio izquierdo reactivos en el presente estudio. En la radiografía contrastada se observó cambios morfológicos en el riñón izquierdo con distensión el líquido de contraste en la región de la pelvis el mismo y dilatación del uréter en forma generalizado y flexuosa con diámetro de 1.7 cm en la porción inicial del uréter del lado izquierdo. Desembocadura anormal del mismo con llegada por detrás del cuello vesical en forma dilatada y flexuosa. Signos sugerentes de mal formación renal izquierda, uréter dilatado y flexuoso del mismo lado y desembocadura ectópica por detrás del cuello vesical.

RESULTADO

Se realizó una reimplantación ureteral por la técnica extra vesical LICH GREGOIRE de una anomalía extramural. Se preparó al paciente para realizar un abordaje abdominal estándar, siguiendo los protocolos de la técnica aséptica. Se colocó al paciente en decúbito dorsal en Trendelenburg y una ligera inclinación hacia el lado opuesto del uréter en el que se vaya a trabajar. Luego de abordar la cavidad abdominal se colocaron puntos directrices para exponer la unión vesicoureteral. Luego de incidir el peritoneo, se identificó y aisló el uréter afectado, se ligó distalmente a su entrada en vagina para poder disecarlo en su trayecto hacia la vejiga. Se lo movilizo para lograr una longitud suficiente para un reimplante sin tensión. Se colocó punto directriz en uréter luego de la sección y se procedió a la especulación del uréter. Se realizó una miotomía vertical del detrusor utilizando instrumental delicado para crear un túnel submucoso lateral óptimo con una longitud de aproximadamente cuatro veces el tamaño del uréter (Ley de Paquin.) Se llenó parcialmente la vejiga con solución fisiológica, el musculo detrusor y todas las fibras musculares se diseccionaron hasta exponer la mucosa. Se incidió la misma y por medio de una sutura discontinua de puntos simples se anastomosa el uréter a la vejiga. El uréter se coloca en el túnel creado y una sutura absorbible es usada para aproximar el musculo detrusor, cerrando sobre la anastomosis, creando un mecanismo de antirreflujo en el pequeño túnel submucoso. Durante la intervención se dejó colocado un catéter ureteral doble J, con salida desde la uretra a la vagina, para ser retirada sin la necesidad de una nueva intervención. La paciente permaneció internada para su control post quirúrgico, donde se pudo comprobar que orinaba con normalidad. En el seguimiento, 9 meses después del alta, el paciente no presentó alte-

ración alguna, ni tampoco cuadro de cistitis a repetición. Sería un procedimiento a considerar en caninos con uréter ectópico.

DISCUSIÓN:

Dentro de las técnicas comúnmente utilizadas para la corrección de la ectopia ureteral, se encuentra la técnica de resolución de la ectopia intramural, la cual requiere una neoureterocistostomia con exposición de la luz de la vejiga a través de una cistotomía ventral. Con la técnica extravesical no se realiza una cistotomía ventral, en su lugar, se hace una pequeña incisión en la pared vesical cercano al vértice y el uréter espatulado se sutura a la mucosa de la vejiga. Creando de esta manera una válvula antirreflujo. El objetivo principal de esta técnica es mejorar la relación túnel- diámetro ureteral por medio del avenamiento del túnel.

CONCLUSIONES:

La técnica de Lich-Gregoir es efectiva para la corrección del uréter ectópico. El paciente operado con el procedimiento extravesical tienen un mejor postoperatorio inmediato que los operados con los intravesicales, manifestando menores molestias, dolor y hematuria. La técnica de Lich-Gregoir puede ocasionar disfunción vesical transitoria en los procedimientos bilaterales. Es un procedimiento de corta estancia hospitalaria. El éxito del mismo se basa en la correcta localización del uréter, en un buen diseño del sentido del túnel, evitar dobleces en el espatulamiento y en el uso de sonda vesical.

BIBLIOGRAFíA:

- SLATTER D, Tratado de cirugía en pequeños animales. Vol. 3 Sección 12 Capitulo 110 Uréteres. Editorial Inter médica. Buenos Aires 3ra edición. 2003 Pags.1857 – 1860.

-FOSSUM T, Cirugía en pequeños animales. Editorial Inter Medica 3er Edición Parte 2 Capitulo 24Cirugia del riñón y del uréter. Pags. 646 – 654.

-TOBIAS K, Veterinary surgery: small animal. Vol 2 Seccion XI capítulo 115 Ureters. Pags 1962- 1977

-ZUBIETA R. Cirugía de neoimplante vesico ureteral por vía extravesical: modificaciones técnicas y consejos basados en más 30 años de experiencia. Arch. Esp. Urol. [Internet]. 2008 Oct [citado 2022 Ago 11]; 61(8 ): 873-881. Disponible en: http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0004-06142008000800004&lng=es.

- Seideman CA. Laparoscopic ureteral reimplantation: technique and outcomes. THE JOURNAL OF UROLOGY, 2009 DOI:10.1016/j. juro.2008.11.102. Vol. 181, Pags 1742-1746