Labo 1. Chemie Modeltraject 1
Mieke Catry Sofie Van Holle Inhoudstafel
Inhoudstafel Luik Microbiologie ............................................................................................................ 1 1
INLEIDING ................................................................................................................................... 2
2
RICHTLIJNEN EN AFSPRAKEN VOOR HET LABO .......................................................................... 3
3
4
2.1
Laboreglement ...................................................................................................................... 3
2.2
Benodigdheden ..................................................................................................................... 4
BIOVEILIGHEID ............................................................................................................................ 5 3.1
Inleiding tot bioveiligheid ...................................................................................................... 5
3.2
Indeling in risicoklassen......................................................................................................... 5
3.3
Risico- en inperkingsniveaus ................................................................................................. 7
3.4
Goede werkpraktijken ........................................................................................................... 8
3.5
Afvalverwerking in het labo ................................................................................................ 10
VOEDINGSBODEMS OF MEDIA ................................................................................................. 13 4.1
Inleiding ............................................................................................................................... 13
4.2
Samenstelling van voedingsbodems ................................................................................... 13
4.3
Indeling van voedingsbodems ............................................................................................. 14
4.3.1 Indeling volgens aggregatietoestand ............................................................................. 14 4.3.2 Indeling volgens toepassingsmogelijkheden.................................................................. 15 4.4
Bereiden van voedingsbodems ........................................................................................... 18
4.4.1 Stap voor stap: vaste voedingsbodem bereiden............................................................ 18 4.4.2 Stap voor stap: gieten van platen .................................................................................. 19 4.4.3 Stap voor stap: vloeibare voedingsbodem bereiden ..................................................... 21 4.5
Sterilisatiemethoden ........................................................................................................... 22
4.5.1 Vochtige sterilisatie door hitte ....................................................................................... 22 4.5.2 Droge sterilisatie door hitte ........................................................................................... 23 4.5.3 Sterilisatie door filtratie ................................................................................................. 24 4.5.4 Andere sterilisatiemethoden ......................................................................................... 25 5
OPGROEIEN VAN MICRO-ORGANISMEN .................................................................................. 26
5.1
Inleiding ............................................................................................................................... 26
5.2
Isoleren van micro-organismen........................................................................................... 26
5.3
Entingsmethoden ................................................................................................................ 27
5.3.1 Overenten met de oogentnaald ..................................................................................... 27 5.3.2 Uitdunningsenting (reinstrijk) met de oogentnaald ...................................................... 31 5.3.3 Maken van strijk- en gietplaten ..................................................................................... 34 5.4
Aanmaken van verdunningsreeksen ................................................................................... 35
5.5
Incuberen van geënte voedingsbodems ............................................................................. 37
5.5.1 Zuurstofbehoefte ........................................................................................................... 37 5.5.2 Temperatuur .................................................................................................................. 39 5.5.3 Andere milieufactoren ................................................................................................... 39 5.6 6
Beoordeling van koloniekenmerken ................................................................................... 40
MICROSCOPISCH ONDERZOEK VAN MICRO-ORGANISMEN ..................................................... 43 6.1
Inleiding ............................................................................................................................... 43
6.2
Het immersieobjectief ......................................................................................................... 44
6.3
Maken van preparaten ........................................................................................................ 46
6.3.1 Nat preparaat ................................................................................................................. 46 6.3.2 Uitstrijkje ........................................................................................................................ 47 6.3.3 Labelen van preparaten ................................................................................................. 48 6.4
Kleuren van preparaten....................................................................................................... 49
6.4.1 Het kleurproces en belangrijke invloedsfactoren .......................................................... 49 6.4.2 Tips bij het uitvoeren van kleuringen ............................................................................. 49 6.4.3 Vitaalkleuring ................................................................................................................. 50 6.4.4 Enkelvoudige kleuring .................................................................................................... 51 6.4.5 Gramkleuring.................................................................................................................. 52 6.4.6 Praktische tips bij het uitvoeren van kleuringen............................................................ 55 6.5
Microscopisch onderzoek van bacteriën............................................................................. 56
6.5.1 Algemene bacteriekenmerken ....................................................................................... 56 6.5.2 Gramnegatieve bacteriën............................................................................................... 58 6.5.3 Grampositieve bacteriën ................................................................................................ 59 6.5.4 Onderzoek uit te voeren in het labo .............................................................................. 61 6.6
Microscopisch onderzoek van gisten .................................................................................. 62
6.6.1 Algemene kenmerken van gisten ................................................................................... 62
6.6.2 Onderzoek uit te voeren in het labo .............................................................................. 63 6.7
Microscopisch onderzoek van schimmels ........................................................................... 64
6.7.1 Algemene bouw van schimmels..................................................................................... 64 6.7.2 De voortplanting ............................................................................................................ 65 6.7.3 Classificatie van schimmels ............................................................................................ 66 6.7.4 Onderzoek uit te voeren in het labo .............................................................................. 70 7
AFKORTINGEN .......................................................................................................................... 71
8
PLANNING ................................................................................................................................. 72
9
NOTIES EN AANTEKENINGEN ................................................................................................... 74 9.1
Labo 1 .................................................................................................................................. 74
9.2
Labo 2 .................................................................................................................................. 75
9.3
Labo 3 .................................................................................................................................. 76
9.4
Labo 4 .................................................................................................................................. 77
9.5
Labo 5 .................................................................................................................................. 78
9.6
Labo 6 .................................................................................................................................. 79
9.7
Labo 7 .................................................................................................................................. 80
9.8
Labo 8 .................................................................................................................................. 81
9.9
Labo 9 .................................................................................................................................. 82
10
BIBLIOGRAFIE............................................................................................................................ 83
Bijlagen microbiologie ....................................................................................................... I Luik Organische chemie .................................................................................................... 1 1
INLEIDING ................................................................................................................................... 2
2
RICHTLIJNEN EN AFSPRAKEN VOOR HET LABO .......................................................................... 3 2.1
Labozaal ................................................................................................................................. 3
2.2
Persoonlijke uitrusting .......................................................................................................... 3
2.3
Rapportering ......................................................................................................................... 3
2.4
Planning ................................................................................................................................. 5
2.5
Veilig werken tijdens het labo ............................................................................................... 5
2.6
Eerste hulp bij ongevallen ..................................................................................................... 8
2.6.1 Snijwonden....................................................................................................................... 8
2.6.2 Brandwonden ................................................................................................................... 8 2.6.3 Contact met chemicaliën ................................................................................................. 9 2.6.4 Spatten in de ogen ........................................................................................................... 9 2.7
GHS-symbolen ....................................................................................................................... 9
2.8
Naam van courant labomateriaal ........................................................................................ 10
Deel 1: zuiveringstechnieken........................................................................................... 12 3
DESTILLATIE .............................................................................................................................. 13 3.1
Principe ................................................................................................................................ 13
3.2
Kookpunt van een zuivere stof ............................................................................................ 13
3.3
Eenvoudige destillatie ......................................................................................................... 16
3.3.1 Theorie ........................................................................................................................... 16 3.3.2 Praktijk............................................................................................................................ 18 3.4
Gefractioneerde destillatie of rectificatie ........................................................................... 20
3.4.1 Principe........................................................................................................................... 20 3.4.2 Materiaal ........................................................................................................................ 22 3.4.3 Azeotropen ..................................................................................................................... 23 3.5
Stoomdestillatie .................................................................................................................. 26
3.6
Labo destillatie: praktische uitvoering ................................................................................ 27
3.6.1 Destillatie van wijn met een eenvoudige destillatie opstelling ..................................... 27 3.6.2 Destillatie van wijn met een gefractioneerde destillatie opstelling .............................. 28 4
OMKRISTALLISATIE ................................................................................................................... 32 4.1
Theoretische aspecten ........................................................................................................ 32
4.2
Labo omkristallisatie: praktische uitvoering ....................................................................... 35
4.2.1 Uitvoeren van de omkristallisatie van onzuiver benzoëzuur ......................................... 35 4.2.2 Testen oplosbaarheid verschillende vaste stoffen in verschillende solventen.............. 37 5
EXTRACTIE................................................................................................................................. 40 5.1
Theoretische aspecten ........................................................................................................ 40
5.2
Praktische aspecten............................................................................................................. 41
5.3
Labo extractie: scheiden van benzoëzuur, eugenol en limoneen door extractie ............... 43
5.3.1 Afzonderen van benzoëzuur .......................................................................................... 43 5.3.2 Afzonderen eugenol ....................................................................................................... 44 5.3.3 Afzonderen limoneen..................................................................................................... 45
Deel 2: synthese oefeningen ........................................................................................... 47 6
Nucleofiele substitutie.............................................................................................................. 48 6.1
Theoretische achtergrond ................................................................................................... 48
6.2
Proefbuisproefjes ................................................................................................................ 49
6.2.1 Invloed substitutiegraad koolstofketen op reactiviteit halogeenalkanen in nucleofiele substitutie ................................................................................................................. 49 6.2.2 Invloed aard leaving groep op reactiviteit halogeenalkanen in nucleofiele substitutie 50 6.3 7
Synthese van 2-chloor-2-methylbutaan .............................................................................. 51
Eliminatie .................................................................................................................................. 53 7.1
Theoretische achtergrond ................................................................................................... 53
7.2
Synthese van 2-methylbut-1-een en 2-methylbut-2-een ................................................... 54
7.2.1 E2-condities .................................................................................................................... 54 7.2.2 E1-condities .................................................................................................................... 56 8
9
Nucleofiele acylsubstitutie: synthese van amylacetaat ........................................................... 57 8.1
Theoretische achtergrond ................................................................................................... 57
8.2
Praktische uitvoering........................................................................................................... 59
Acetylsalicylzuur ....................................................................................................................... 61 9.1
Theoretische achtergrond ................................................................................................... 61
9.2
Praktische uitvoering........................................................................................................... 62
9.2.1 Deel A: synthese acetylsalicylzuur ................................................................................. 62 9.2.2 Deel B: isolatie acetylsalicylzuur uit aspirine ................................................................. 63 9.2.3 Deel C: zuiverheidstest van acetylsalicylzuur monsters................................................. 63
Bijlagen organische chemie ................................................................................................ I