1.5.6. Phương pháp sắc ký khí (GC-FID

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL 1.5.6. Phương pháp sắc ký khí (GC-FID) Sắc ký là một trong những phương pháp phổ biến để xác định đồng thời nhiều thành phần có mặt trong mẫu nhờ vào khả năng phân tách mạnh mẽ của những cột sắc ký. Sắc ký dựa vào nguyên lý chung là dựa sự tương tác của chất phân tích với pha tĩnh và pha động trong cột sắc ký. Phương pháp sắc ký được sử dụng hầu như cho các hợp chất hữu cơ. Sắc ký khí là phương pháp được sử dụng cho những hợp chất có thể hóa hơi ở điều kiện làm việc và bền nhiệt, trong đó pha động là chất khí (gọi là khí mang) và pha tĩnh chứa trong cột (thông dụng nhất là cột mao quản) là một lớp rắn hoặc lỏng phủ lên bề mặt bên trong của cột. Nguyên lý phân tách của sắc ký khí dựa trên sự khác biệt về nhiệt độ sôi và khác biệt về độ mạnh tương tác giữa các chất phân tích với pha tĩnh và pha động (tức độ phân cực). Pha động trong sắc ký khí là các khí trơ và có độ tinh khiết cao. Pha tĩnh thường là lỏng hoặc rắn. Sau khi chất phân tích đi vào cột sắc ký, chúng bị hấp phụ vào và nhả hấp ra liên tục trên pha tĩnh và được vận chuyển trong cột và đưa đến đầu dò nhờ dòng khí mang. Quá trình này lặp lại và diễn ra liên tục trong suốt quá trình phân tách cho đến khi tách các chất ra hoàn toàn và được đầu dò ghi nhận tín hiệu. Các chất được xác định nhờ giá trị thời gian lưu trên sắc ký đồ.

Có nhiều loại đầu dò dùng cho sắc ký khí, trong nghiên cứu này sử dụng đầu dò ion hóa ngọn lửa (FID). Ưu điểm của đầu dò này là nhạy với hầu hết các hợp chất hữu cơ, giới hạn phát hiện rất thấp khoảng 2 pg/s và khoảng tuyến tính của đầu dò có thể lên đến 107, thiết bị ổn định và dễ vận hành. Trong đầu dò FID, chất sau khi rửa giải được đốt cháy bằng hỗn hợp H2 và không khí. Những nguyên tử carbon hữu hiệu (ngoại trừ carbon của nhóm carbonyl và carboxyl) sẽ chuyển thành các gốc CH tự do và cuối cùng tạo ra ion CHO+ và e - di chuyển về các điện cực trái dấu, hình thành dòng điện hai tín hiệu trong đầu dò. Tín hiệu được ghi nhận, khuếch đại và chuyển thành tín hiệu kỹ thuật số. Cường độ tín hiệu thu được tỷ lệ thuận với số mole và tỷ lệ với số nguyên tử carbon có trong phân tử chất phân tích. Tuy nhiên, nhược điểm của đầu dò FID là không thể thu hồi mẫu và kém nhạy đối với các hydrocacbon không hữu hiệu.