Publinota Hipra

Publinota Hipra ¿Es posible desarrollar una respuesta protectiva mediante vacunación frente a las diferentes variantes de parvovirus?

Baratelli, M.; Cardona-Colom, M.; Sánchez-Díaz, E.*; Porquet-Garanto, L. HIPRA, Amer (Girona), España. *Autor de contacto: elena.sanchez@hipra.com

Objetivo

Evaluar la reactividad cruzada entre variantes de CPV-2 (CPV-2, CPV2a, CPV-2b y CPV-2c), tras programa vacunal con vacuna viva atenuada CPV-2.

Materiales y métodos

Se reclutaron cachorros de perro de 8 semanas de edad de propietarios privados. Estos se vacunaron con HIPRADOG DP o HIPRADOG 7 (Laboratorios HIPRA S.A., España) según las instrucciones del fabricante; dichas vacunas están formuladas con virus vivo atenuado de una cepa CPV-2 (≥ 107 DICT50 y ≥ 106 DICT50 por dosis, respectivamente). Para comprobar la correcta inmunización de los animales, se valoró la producción de anticuerpos frente CPV mediante ELISA (Eurofins Technologies Ingenasa, España) en sueros obtenidos durante el proceso de vacunación y 21 días post-vacunación. La respuesta cruzada entre CPV-2 y las variantes CPV-2a, CPV-2b y CPV-2c, se evaluó en los sueros de 21 días post vacunación (n=15 por vacuna) y en suero de animales no vacunados (control, n=5) mediante un ensayo de inhibición de la hemaglutinación (IHA). Los títulos de IHA se utilizaron para inferir el estado de protección de los animales frente a CPV como descrito previamente por otros autores [2]. Específicamente, los perros con títulos iguales o superiores a 1/80 (6,32 Log2) se consideraron protegidos contra la cepa probada.

Resultados

Los resultados de ELISA demostraron la correcta seroconversión de los cachorros (Fig.1); las muestras de 21 días después de administrar la segunda dosis de las vacunas se seleccionaron para valorar la reacción cruzada entre variantes.

65536 32768 16384 8192 4096 2048 1024 512 256 128 64 32 16 8 4 2 1

1ª dosis

HIPRADOG 7

HIPRADOG DP

Cut-off

2ª dosis 21 DPV

Figura 1. Respuesta de anticuerpos de los animales vacunados. Los sueros se recogieron antes de vacunar (8 semanas), antes de adminstrar la segunda dosis (12 semanas) y 21 dias despues de la segunda dosis (15 semanas). Los resultados de ELISA se representan como media geométrica. La respuesta media de anticuerpos inhibidores de la hemaglutinación contra CPV-2 producida por las vacunas osciló entre 8,39 y 8,41 Log2 y ninguno de los perros mostró valores por debajo del umbral protector (1/80 o 6,32 Log2). Las variantes CPV2-a y CPV-2c mostraron una respuesta de anticuerpos similar a la CPV-2 que se caracterizó por una disminución leve pero no significativa del título de IHA y la presencia de títulos protectores en todos los perros (Tabla 1). La diferencia promedio de los títulos de los mismos perros entre las variantes oscilaron entre 0,33 y 0,62 y, por tanto, por debajo de 1 Log2.

Por el contrario, la variante CPV-2b presentó una respuesta de anticuerpos significativamente diferente en comparación con la CPV2, independientemente de la vacuna administrada. El título promedio de IHA fue de 7,72 y 7,31 Log2 mientras que la disminución individual de los títulos fue de 0,69 y 1,08 en perros vacunados con HIPRADOG DP e HIPRADOG 7, respectivamente. A pesar de esto, todos los perros tuvieron valores iguales o superiores al umbral de protección; en concreto, 2 perros mostraron un título de 1/80 mientras que el resto de ellos mostraron títulos superiores. Finalmente, en las muestras control de animales no vacunados, no se detectó respuesta de anticuerpos contra ninguno de los virus analizados.

Tabla 1. Respuesta media de IHA frente a diferentes variantes de CPV de perros vacunados con una cepa viva atenuada de CPV-2. Los resultados se representan como desviación estándar y promedio de los títulos IHA (Log2). Las variantes con diferentes letras indican que hay una diferencia estadísticamente significativa entre ellas (Prueba de Kruskal-Wallis, n=15, p<0,05).

CPV-2 CPV-2 aVa cuna cpv-2b CPV-2c

HIPRADOG DP HIPRADOG 7 8,41±0,53(a) 7,88±0,50(a,b) 7,72±0,59(b) 7,79±0,52(a,b) 8,39±0,43(a) 7,84±0,71(a,b) 7,31±0,74(b) 8,06±0,84(a,b)

Conclusiones

El estudio demostró que las vacunas estudiadas producen un nivel de anticuerpos inhibidores de la hemaglutinación similar entre las variantes CPV-2, CPV-2a y CPV-2c. Por otro lado, los niveles producidos frente a la variante CPV-2b son ligeramente inferiores a los obtenidos para la variante CPV-2. A pesar de esto, la respuesta generada por ambas se considera protectora frente a las 4 variantes de CPV-2, cuando la eficacia se evalúa utilizando la respuesta IHA como indicador de protección.