UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
PROFESOR: BIOQ. FARM. CARLOS GARCÍA MSC. ALUMNA: ESPINOSA ESPINOZA LISSETH CAROLINA CURSO: QUINTO PARALELO: A GRUPO N° 3 FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: LUNES 17 DE AGOSTO DEL 2015 FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: LUNES 24 DE AGOSTO DEL 2015 PRÁCTICA N° 10 TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR HIERRO. Animal de Experimentación: Rata Wistar Vía de Administración: Intraperitonial TIEMPOS: o Inicio de la práctica: 07: 30 am o Toxico administrar: 10 ml o Deceso del animal: 08:12 am (6 minutos) o Inicio del baño maría: 09:00 am o Finalización del baño maría: 09:30 am o Final de la práctica: 10:30 am o Sintomasd: dolor abdominal, hemorragia digestiva, Fiebre, coma. OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Observar la reacción que presenta la Rata Wistar ante la Intoxicación por cloruro férrico. 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el toxico en el animal. 3. Adquirir la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de identificación del toxico en medios biológicos. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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MATERIALES
o Jeringa de 10 cc
Cloruro férrico 10 ml o 200 gotas
o Varilla
SUSTANCIAS (FeCl3).
o Espátula
Clorato de potasio 4 g (KClO3).
o Probeta
Ácido clorhídrico concentrado 25
o Campana
ml o 500 gotas (HCl).
o Panema
Hidróxido de potasio (KOH).
o Papel filtro
Sulfocianuro de Potasio [KCNS]
o Embudo
Ferricianuro de Potasio
o Fosforo
[Fe (CN)6K3]
o Pinzas
Ferrocianuro de Potasio
o Cocineta
[Fe (CN)6K4]
o Porta tubo
Ácido sulfhídrico (H2S)
o Tabla de disección
Agua destilada (H2O).
o Cronómetro o Perlas de vidrio. o Equipo de disección o Bisturí
EQUIPO: Balanza.
o Vasos de precipitación 200 y 500 ml. o Equipo de destilación. o Tubos de ensayo o Pipetas o Guantes de látex o Mascarilla o Mandil o Gorro
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PROCEDIMIENTO 1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo además de tomar todas las medidas de bioseguridad. 2. Colocamos la Rata Wistar en el panema. 3. Tener todos los materiales a utilizar listos. 4. Administramos 10 ml de solución de coluro férrico por vía intraperitoneal, anotamos el tiempo. 5. Observamos los efectos que produce hasta que se produjo la muerte del animal. 6. Procedimos a la apertura del animal con la ayuda del equipo de disección. 7. Observamos el estado de las vísceras. 8. En un vaso de precipitación recolectamos los líquidos que vertían de animal y colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles). 9. Adicionamos a las vísceras 50 perlas de vidrio, 2 gramos de clorato de potasio y ácido clorhídrico concentrado 25 ml y lo llevamos a baño maría por 30 minutos. 10. Cinco minutos antes de que se cumpliera el tiempo establecido del baño maría adicionamos 2 gramos más de clorato de potasio. 11. Una vez finalizado el baño maría dejamos enfriar y filtramos. 12. Con el filtrado luego procedimos a realizar las reacciones de identificación de mercurio en medios biológicos. 13. Una vez terminada la práctica se limpió todo el material y el área utilizada. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO 1.- CON LOS NaOH Y KOH: El hierro reacciona frente a los NaOH y KOH produciendo un precipitado blanco de Fe(OH)2; este precipitado rápidamente se oxida formándose primeramente verde sucio, luego negro y finalmente pardo rojizo. Fe2+ + (OH)
Fe(OH)2
2.- CON EL SULFOCIANURO DE POTASIO: El Fe2+ no reacciona frente a este reactivo, el Fe3+ reacciona originando un complejo color rojo sangre, esta reacción es más sensible para reconocer el hierro.
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3.- CON EL FERRICIANURO DE POTASIO Fe (CN)6K3: Frente a este reactivo, las sales ferrosas producen un precipitado, sino que forma un complejo color pardo oscuro. 4.- CON EL FERROCIANURO DE POTASIO Fe (CN)6K4: Con este reactivo los iones ferrosos reaccionan dando un precipitado color blanco que rápidamente se hace azul, conocido como azul de Prusia. Fe (CN)6 + Fe2+ Fe(CN)6 5.- CON EL H2S: Con este gas, el hierro produce un precipitado negro de sulfuro de hierro. Fe2+ + H2S
SFe + 2H+
GRÁFICOS 1. ADMINISTRACION DE 10 ML DE CLORURO FERRICO
2. DISECCIÓN Y TROCEAR VÍSCERAS
6. OBTENER EL FILTRADO PARA REALIZAR LAS REACCIONES CORRESPONDIENTES.
5. UNA VEZ FINALIZADO EL BAÑO MARÍA, DEJAR ENFRIAR Y FILTRAR
3. TRITURAR LAS VÍSCERAS, COLOCAR 50 PERLAS DE VIDRIO Y 2G DE KCLO3 Y 25 ML DE HCL
4. LLEVAR A BAÑO, MARÍA POR 30 MINUTOS CON AGITACION
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GRÁF REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS CON LOS NaOH Y KOH: Reacción
positivo característico
Antes
precipitado rojo
Después
CON EL SULFOCIANURO DE POTASIO: Reacción
positivo característico
precipitado rojo Sangre
Antes
Después
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CON EL FERROCIANURO DE POTASIO Reacción
positivo característico
color amarillo
Después
Antes
CON EL ACIDO SULFHIDRICO
Reacción
positivo no característico
amarillo –naranja
OBSERVACIONES Hemos observado que al
administrar
el toxico (cloruro férrico) por vía
intraperitoneal la Rata Wistar presentó dolor abdominal, hemorragia digestiva. Fiebre, coma. Finalmente murió.
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CONCLUSION Al culminar esta práctica pudimos determinar que el hierro es una sustancia altamente tóxica, ya que actuó rápidamente en la motilidad, presentando hipoxia y convulsiones que produjeron la muerte del animal después de la administración de 10 ml de toxico y luego de esto se realizó las reacciones de identificación en las constatamos la presencia de cadmio en el filtrado obtenido de la decocción de las vísceras. RECOMENDACIONES Realizar la asepsia del área de trabajo. Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla, zapatones si es necesario. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar la cámara de gases para realizar las pruebas y evitamos así intoxicaciones. Tener material para la toma de cada reactivo y evitar contaminación de los reactivos que pueden llevar a un error en las reacciones.
CUESTIONARIO
¿PROPIEDADES FÍSICAS- QUÍMICAS DEL HIERRO? Estado físico: Líquido Color: Marrón oscuro Olor: Débil, semejante al del ácido clorhídrico Temperatura de ebullición: > 100 ºC (depende de la pureza) Temperatura de la inflamación: No inflamable. Se descompone por el calor liberando ácido clorhídrico. Temperatura de autoignición: No inflamable Densidad del líquido: > 1,4g/ml, dependiendo de la pureza y la temperatura. Presión de vapor: Sin información Solubilidad en agua: 100%
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¿DONDE SE ENCUENTRA EL HIERO? El hierro es un ingrediente en muchos suplementos minerales y vitamínicos. Los suplementos de hierro igualmente se venden solos y sus diversos tipos abarcan: Sulfato ferroso Gluconato ferroso Fumarato ferroso
¿CUAL ES LA FISIOPATOLOGÍA DE LA INTOXICACIÓN? Daño Gastrointestinal Las sales de hierro corroen y erosionan la mucosa GI. Generan una gastroenteritis hemorrágica que puede llegar a perforación (peritonitis). Al dañar la barrera de la mucosa gastrointestinal, facilitan el paso de las bacterias a la sangre llevando a diseminación hematógena y sepsis. Alteración Cardiovascular Las altas concentraciones de hierro aumentan la permeabilidad capilar generando salida de líquido a un tercer espacio. Lo anterior, sumado a la hemorragia gastrointestinal, genera hipovolemia e hipoperfusión tisular y shock. Acidosis Metabólica Es el producto de la hipoperfusión tisular que lleva al metabolismo anaeróbico y posteriormente a la acidosis láctica. Coagulopatía El Hierro elemental se une a los factores de coagulación, alterando su actividad, prolongando el PT y PTT. Disfunción Orgánica
Hepática: El hierro libre llega a los hepatocitos generando daños mitocondriales.
Renal: Por efecto directo el hierro produce necrosis tubular. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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BIBLIOGRAFÍA
Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial Científico-Médico. Madrid. España. 2010 WEBGRAFÍA http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002659.htm http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S003498872001000600010 http://www.encolombia.com/medicina/revistas-medicas/pediatria/vp391/pedi39104-intoxicacion
AUTORIA Bioq. Farm. Carlos García MSc.
FIRMA DE RESPONSABILIDAD:
__________________ LISSETH ESPINOSA ESTUDIANTE
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GLOSARIO CEFALALGIAS: hace referencia a los dolores y molestias localizadas en cualquier parte de la cabeza, en los diferentes tejidos de la cavidad craneana, en las estructuras que lo unen a la base del cráneo, los músculos y vasos sanguíneos que rodean el cuero cabelludo, cara y cuello. En el lenguaje coloquial cefalea es sinónimo de dolor de cabeza. VÉRTIGOS: El vértigo es una sensación ilusoria o alucinatoria de movimiento de los objetos que nos rodean o de nuestro propio cuerpo, por lo común, una sensación de giro. El vértigo suele deberse a un trastorno en el sistema vestibular. HIPOPERFUSIÓN TISULAR: Aporte insuficiente de los nutrientes y el oxígeno necesarios para la actividad normal de los tejidos y las células, también se denomina Shock. HEMATÓGENA: Que se produce en la sangre o derivado de ella. SEPSIS: Es la respuesta sistémica del organismo huésped ante una infección, con finalidad eminentemente defensiva.
ANEXOS
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