UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA. Profesor: Dr.- Carlos García MSc. Alumno: Oswaldo Luis Silva Oyola. Curso: 5to Bioq. Farm. Grupo: # 7
Paralelo: “B“
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Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes 18 de Agosto del 2015. Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 25 de Agosto del 2015. PRÁCTICA N° 11 Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR COBRE. Animal de Experimentación: Rata wistar de color: blanco. Vía de Administración: Vía Parenteral. (INTRAPERITONIAL.) Volumen Administrado: 8 ml TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 7:50 am Dosis administrada: 8 ml Animal de experimentación: Rata wistar. Color del animal de experimentacion: blanco. Hora de administración del toxico a la rata wistar: 7:53 am Deceso del animal: 7:58 am (8 minutos) Hora de disección: 8:10 am Inicio del Baño María: 8:35 am Finalización del Baño María.: 9:00 am Final de la práctica: 10:30 am
SÍNTOMATOLOGIA DE LA RATA WISTAR.
Irritación en los ojos. Dolor de cabeza. Mareos. Vomito. diarrea Muerte.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:
Observar la reacción que presenta el animal de experimentación ante una intoxicación.
Distinguir la sintomatología de la intoxicación por cobre con relación a otras sustancias toxicas.
Identificar la presencia de cobre en la sangre del animal mediante pruebas de reconocimiento.
MATERIALES.
Bata de laboratorio Equipo de destilación Mechero Guantes de látex Gorro Campana Zapatones Espátula Mascarilla Pipetas Erlenmeyer Tubos de ensayo Vasos de precipitación Jeringuilla de 10cc Instrumentos de disección
SUSTANCIAS.
Hidróxido de Sodio. (NaOH) Clorato de potasio (KCl) Ácido clorhídrico . (HCl) Ferrocianuro de Potasio. (C6N6FeK4) Amoniaco. (NH3) Cuprón (C6H5CH(OH)C(=NOH)C6H5) Solución de cobre. (CuSO4) Yoduro de potasio. (KI) Cianuros Alcalinos. (NaCN)
EQUIPO. Cocineta. Equipo de destilación.
PROCEDIMIENTO: 1. Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área donde se la realizara y así mismo tener los materiales limpios y secos que se emplearan en la práctica. 2. Llevamos al cobayo a la campana de gases para aplicar 8 ml de cobre. 3. Una vez administrado el toxico se procede a colocarlo en el panema. 4. Se observaran toda la sintomatología que presente por la intoxicación de cobre hasta que muera tomando en cuenta el tiempo transcurrido. 5. Se coloca el cobayo en la tabla de disección previamente puesta una funda encima de la tabla y lo sujetamos por las extremidades con ayuda de unas piolas para facilitar abrirlo. 6. Una vez correctamente ubicado se procede a raspar el área donde se realizara el corte con el bisturí y después se abrirá con cuidado para evitar cortar los órganos.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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7. Luego se observa detenidamente los órganos que se han afectado por la intoxicación de cobre. 8. Seguido se coloca las vísceras afectadas en un vaso de precipitación picando lo más fino posible estas. 9. Agregamos las 50 perlas de vidrio, en el balón de destilación y añadimos 2gramos de KClO3 y 25ml HCl concentrado 10. Llevamos a baño maría por 30 minutos con agitación regular 11. A los 5 minutos antes que se cumpla con el tiempo establecido añadimos 2 gramos de KClO3. 12. Una vez finalizado el baño María, dejamos enfriar y lo filtramos 13. El filtrado realizamos las reacciones de reconocimiento 14. Culminada la práctica se limpiara y desinfectara el área donde se realizó la práctica y se dejara los reactivos en el lugar correcto bien cerrados y los materiales empleados limpios y secos. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO: Después de destilar el material de investigación, se realizan las reacciones de reconocimiento. 1. CON EL FERROCIANURO DE POTASIO: En un medio acidificado con ácido acético, el cobre reacciona dando un precipitado rojo oscuro de ferrocianuro cúprico, insoluble en ácidos diluidos, soluble en amoniaco dando color azul. K4Fe(CN)6 + 2Cu(NO3)
Cu2Fe(CN)6 + KNO3
2. CON EL AMONIACO: La solución muestra tratada con amoniaco, forma primero un precipitado verde claro pulverulento que al agregarle un exceso de reactivo se disuelve fácilmente dando un hermoso colr azul por formación de un compuesto cupro-amónico. Cu(NO3)2 + 4NH3
Cu(NH3)4 . (NO3)2
3. CON EL CUPRÓN: En solución alcohólica al 1 % al que se le adiciona gotas de amoniaco, las sales de cobre reaccionan produciendo un precipitado verde insoluble en agua, amoniaco diluido, alcohol, ácido acético, soluble en acidos diluidos y poco solubles en amoniaco concentrado. C6H5-C=NOH C6H5-CHOH + Cu(NO3)2
C6H5-C=N-O Cu + 2HNO3 C6H5-C-N-O
4. CON EL YODURO DE POTASIO: Adicionando a la solución muestra gota a gota, primeramente se forma un precipitado blando que luego se transforma a pardo-verdoso o amarillo. Cu(NO3)2 + IK + I3-
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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5. CON LOS CIANUROS ALCALINOS: A una pequeña cantidad de muestra se agregan unos pocos cristales de cianuro de sodio formando un precipitado verde de cianuro de cobre, a este precipitado le agregamos exceso de cianuro de sodio y observamos que se disuelve por formación de un complejo de color verde-café. (NO3)Cu + 2CNNa
(CN)2Cu + NO3- + Na+
(NO3)Cu + 3CNNa
[Cu(CN)3]= + 3Na+
6. CON EL HIDRÓXIDO DE AMONIO: A la solución muestra, agregarle algunas gotas de NH4OH, con lo cual en caso positivo se forma un precipitado color azul claro de solución NO3(OH)Cu. Este precipitado es soluble en exceso de reactivo, produciendo solución color azul intenso que corresponde al complejo [Cu(NH3)4]++. (NO3)2Cu + NH3 (NO3)2Cu +3 NH3
Cu(OH)NO3 2[Cu(NH3)4+++ NO3H + H2O
7. CON EL HIDRÓXIDO DE SODIO: A 1ml de solución muestra, agregamos algunas gotas de de NaOH, con lo cual en caso de ser positivo se debe formar un precipitado color azul pegajoso por formación de Cu(OH)2.Este precipitado es soluble en ácidos minerales y en álcalis concentrados. Cu++ + 2OH
Cu(OH)2
8. CON EL SH2: A la solución muestra, hacerle pasar una buena corriente de SH2, con lo cual en caso de ser positivo se forma un precipitado color negro este precipitado es insoluble en exceso de reactivo, en KOH 6M, en ácidos minerales diluidos y fríos . (NO3)2Cu + SH2
SCu+ 2NO3H
9. CON EL IK: A una pequeña porción de solución muestra agregarle gota a gota de solución de IK, con lo cual en caso de ser positivo se forma inicialmente un precipitado color blanco que luego se transforma en pardo verdoso o por formaciones de iones tri yoduros, el mismo que se puede volar con Tio sulfato de sodio. (NO3)Cu + Tri yoduros
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS. REACCIÓN CON EL FERROCIANURO DE POTASIO: Reacción Positivo característico Debe tener un precipitado rojo oscuro de ferrocianuro cúprico.
Antes (Tiene un color verde oscuro)
Después (Positivo característico) dio color rojo oscuro.
REACCIÓN CON EL AMONIACO: Reacción Positivo característico Debe tener un precipitado verde claro pulverulento que al agregarle un exceso de reactivo se disuelve fácilmente dando un hermoso color azul por formación de un compuesto cupro-amónico.
Antes (Tiene un color verde oscuro)
Después (Positivo característico) dio color azul.
REACCION CON EL YODURO DE POTASIO: Reacción Positivo No característico Debe tener un precipitado blando que luego se transforma a pardo-verdoso o amarillo. Azul de Prusia.
Antes (Tiene un color verde oscuro)
Después (Positivo No característico) dio color café.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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REACCIÓN CON EL CIANUROS ALCALINOS. Reacción Positivo Característico Debe reaccionar un precipitado le agregamos exceso de cianuro de sodio y observamos que se disuelve por formación de un complejo de color verde-café.
Antes (Tiene un color verde oscuro).
Después (Positivo Característico dio color verde.
REACCIÓN CON EL HIDRÓXIDO DE AMONIO: Reacción Positivo Característico Se debe formar un precipitado color azul pegajoso por formación de Cu(OH)2.
Antes (Tiene un color verde oscuro).
Después (Positivo Característico dio precipitado celeste,
REACCIÓN CON EL HIDRÓXIDO DE SODIO. Reacción Positivo Característico Debe formar un precipitado color azul pegajoso por formación de Cu(OH)2.Este precipitado es soluble en ácidos minerales y en álcalis concentrados. .
Antes (Tiene un color verde oscuro).
Después (Positivo Característico dio color celeste.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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REACCIÓN CON EL SULFURO DE HIDROGENO SH2: Reacción Positivo Característico Se forma un precipitado color negro.
Antes (Tiene un color verde oscuro).
Después (Positivo Característico dio precipitado negro.
OBSERVACIONES. En la realización de ésta práctica al haber administrado los 8 ml de cromo por vía peritoneal en la rata wistar se pudo observar el deceso del animal, durante su agonía presentó mareos, perdida de la visión, convulsiones y seguidamente la muerte por la intoxicación con cobre. Es importante mencionar que a través de la aplicación de las reacciones de identificación en medios biológicos, observamos la coloración de las reacciones lo cual corroboro para determinar la presencia del (toxico) en la rata wistar. CONCLUSIONES.
En la realización de esta práctica de esta práctica se aprendió a reconocer los efectos o síntomas provocados por la administración del toxico (cobre) al organismo de un animal de experimentación, así como también hemos identificado la presencia de este en la sangre del animal mediante pruebas específicas para el reconocimiento de este compuesto que puede originar a su vez coma o hasta incluso la muerte como se ha demostrado en esta práctica.
RECOMENDACIONES. Asegurarse que el equipo esté correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilación, evitando así una intoxicación. Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, gorro, zapatones, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar pipetas específicas para cada reactivo. Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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Acatar las sugerencias y guías expuestas por el ayudante, para de esta manera obtener muy buenos resultados en la realización de la práctica. CUESTIONARIO. 1. INDIQUE EN QUE ARTICULOS PODEMOS ENCONTRAR EL COBRE Ciertas monedas: todas las monedas de un centavo en los Estados Unidos hechas antes de 1982 contenían cobre Ciertos insecticidas y fungicidas Alambre de cobre Algunos productos de acuario Suplementos minerales y vitamínicos (el cobre es un micronutriente esencial, pero demasiada cantidad puede ser mortal) 2. ¿CUÁLES SON LOS SÍNTOMAS QUÉ SE PRESENTAN FRENTE A UN CUARO DE ENVENENAMIENTO? Al ingerir grandes cantidades de cobre puede causar vómitos, dolor abdominal, diarrea y piel amarilla (ictericia). Asimismo, el contacto con grandes cantidades de cobre puede ocasionar decoloración del cabello (verde).
Anemia Sensación de ardor Escalofríos Convulsiones Diarrea (a menudo con sangre y puede ser de color azul) Fiebre Insuficiencia hepática Sabor metálico Dolores musculares Náuseas Ausencia de gasto urinario Dolor Shock Vómitos Debilidad Ojos amarillos Piel amarilla
3. ¿CUÁLES SON LAS FUNCIONES QUE REALIZA EL COBRE EN EL ORGANISMO? Estas son algunas de las funciones que el cobre realiza en el organismo:
Participa activamente en la síntesis de la hemoglobina. Es necesario para la correcta síntesis del Hierro.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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Participa de forma igualmente activa en la síntesis de las células rojas de la sangre. Su presencia es necesaria para que el organismo pueda utilizar la tirosina, facilitando con ello la pigmentación de la piel y el cabello. Nuestro organismo lo precisa para poder utilizar correctamente la vitamina C. Está presente en la síntesis de determinadas sustancias que son esenciales en la formación de las vainas protectoras de mielina que envuelven las fibras nerviosas. Es necesario tanto para la formación como para el mantenimiento de los huesos. Su presencia evita la excesiva coagulación de la sangre. Es necesario para el correcto funcionamiento del tiroides. Ayuda a regular los niveles de colesterol en sangre. Puede tener mucho que ver en la prevención y tratamiento del cáncer. Es importante su consumo para prevenir y luchar contra las enfermedades degenerativas. Tiene una reconocida acción antirreumática. Interviene en la formación del ARN.
4. ¿QUÉ ALIMENTOS SON RICO EN COBRE? Estos son algunos de los alimentos más ricos en cobre: Quesos: Edam. Emmental. Pescados: Arenques. Salmón. Bacalao. Aves: Pollo. Ganso. Pato. Carnes: Carnes magras. Hígado. Riñones. Mollejas. Mariscos: Ostras. Todos los mariscos. Cereales: Avena. Centeno. Mijo. Trigo. Pan: Centeno. Trigo. Trigo integral. Hortalizas: Alcachofas. Boniato. Brécol. Guisantes. Remolacha. Legumbres: Guisantes amarillos. Judías blancas. Habas Lima. Lentejas. Setas: Champiñones. Níscalos. Frutas: Frutas secas. Frutos secos: Nueces. Agua potable. 5. INDIQUE EN QUE ENFERMEDADES EL RECOMENDABLE EL USO DE COBRE. Estas son algunas de las enfermedades donde el uso del cobre puede estar indicado: Dermatología: Vitíligo. Trastornos en la pigmentación de la piel. Sistema circulatorio/Vascular: Flebitis. Mala coagulación. Varices. Sistemanervioso/Neurología: Ansiedad. Angustia. Depresión. Trastornos del sistema nervioso. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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Tiroides/Endocrinología: Trastornos del tiroides. Trastornos del metabolismo: Exceso de colesterol. Traumatología/Reumatología: Artrosis. Artritis. Espondiloartritis anquilosante. Osteoporosis. Reuma.
GLOSARIO: 1. TOXICOCINÉTICA: Conjunto de fenómenos que experimenta el tóxico desde el momento que se pone en contacto con el hombre hasta que es eliminado por el mismo. 2. HEPATORENAL: Se caracteriza por una insuficiencia renal funcional con función tubular normal en un paciente con insuficiencia hepática 3. OSTEOMALACIA: Es una enfermedad metabólica ósea que se caracteriza por una alteración de la mineralización ósea, con frecuencia relacionada con alteraciones del metabolismo de la vitamina D y del fosfato. 4. HIPOPERFUSIÓN TISULAR: Aporte insuficiente de los nutrientes y el oxígeno necesarios para la actividad normal de los tejidos y las células, también se denomina Shock. 5. HEMATÓGENA: Que se produce en la sangre o derivado de ella. 6. SEPSIS: Es la respuesta sistémica del organismo huésped ante una infección, con finalidad eminentemente defensiva. BIBLIOGRAFÍA.
LORÍA J .BERMEO A. RAMÍREZ A. FERNÁNDEZ D. Archivos de Medicina de Urgencia de México. Intoxicación por cadmio, reporte de un caso. (Consultado el 19 de Junio del 2014). Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/urgencia/aur-2009/aur092f.pdf
Armendaris
G,
Gerardo
(2007). Química
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AUTORIA. Dr.- Carlos García MS
FIRMA DEL RESPONSABLE. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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ANEXOS: DATOS OBTENIDOS DE LA PRACTICA DE INTOXICACION POR COBRE, MEDIANTE LA SINTOMATOLOGIA DE LA RATA WISTAR Y LAS REACCIONES DE RECONOCIMIENTO.
AQUÍ ESTA EL GRUPO # 2 TRABAJANDO Y MOSTRANDO LA REACCION DE RECONOCIMEINTO CON: INTOXICACION POR COBRE.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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