UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA. Profesor: Dr.- Carlos García MSc. Alumno: Oswaldo Luis Silva Oyola. Curso: 5to Bioq. Farm. Grupo: # 7
Paralelo: “B“
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Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes 11 de Agosto del 2015. Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 18 de Agosto del 2015. PRÁCTICA N° 10 Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR HIERRO. Animal de Experimentación: Rata wistar de color: blanco. Vía de Administración: Vía Parenteral. (INTRAPERITONIAL.) Volumen Administrado: 10 ml TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 7:47 am Dosis adminstrada: 10 ml Animal de experimentacion: Rata wistar de color: blanco. Hora de administración del toxico a la rata wistar : 8:05 am Deceso del animal: 8: 21 am ( 16minutos ) . Hora de diseccion: 8: 30 am Inicio del Baño Maria: 8: 45 am Finalización del Baño Maria: 9:15am Final de la práctica: 10:30 am
SÍNTOMATOLOGIA DE LA RATA WISTAR.
Daño gastrointestinal. Alteracion cardiovascular. Acidosis metabolica. Coagulopatia. Disfuncion organica. Muerte.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:
Observar la reacción que presenta el animal de experimentacion ante una intoxicación.
Distinguir la sintomatología de la intoxicación por hierro con relación a otras sustancias toxicas.
Identificar la presencia de hierro en la sangre del animal mediante pruebas de reconocimiento.
MATERIALES.
Bata de laboratorio Equipo de destilación Mechero Guantes de látex Gorro Campana Zapatones Espátula Mascarilla Pipetas Erlenmeyer Tubos de ensayo Vasos de precipitación Jeringuilla de 10cc Instrumentos de disección
SUSTANCIAS.
Cloruro férrico (FeCl3). Clorato de potasio 2 g (KClO3). Ácido clorhídrico concentrado 25 ml o 500 gotas (HCl). Hidróxido de potasio (KOH). Sulfocianuro de Potasio [KCNS] Ferricianuro de Potasio [Fe (CN)6K3] Ferrocianuro de Potasio [Fe (CN)6K4] Ácido sulfhídrico (H2S) Agua destilada (H2O). EQUIPO.
Cocineta. Equipo de destilacion.
PROCEDIMIENTO: 1. Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área donde se la realizara y así mismo tener los materiales limpios y secos que se emplearan en la práctica. 2. Llevamos al cobayo a la campana de gases para aplicar 10 ml de plata. 3. Una vez administrado el toxico se procede a colocarlo en el panema. 4. Se observaran toda la sintomatología que presente por la intoxicación de Mercurio hasta que muera tomando en cuenta el tiempo transcurrido. 5. Se coloca el cobayo en la tabla de disección previamente puesta una funda encima de la tabla y lo sujetamos por las extremidades con ayuda de unas piolas para facilitar abrirlo. 6. Una vez correctamente ubicado se procede a raspar el área donde se realizara el corte con el bisturí y después se abrirá con cuidado para evitar cortar los órganos.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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7. Luego se observa detenidamente los órganos que se han afectado por la intoxicación de hierro. 8. Seguido se coloca las vísceras afectadas en un vaso de precipitación picando lo más fino posible estas. 9. Agregamos las 50 perlas de vidrio, en el balón de destilación y añadimos 2gramos de KClO3 y 25ml HCl concentrado 10. Llevamos a baño maría por 30 minutos con agitación regular 11. A los 5 minutos antes que se cumpla con el tiempo establecido añadimos 2 gramos de KClO3. 12. Una vez finalizado el baño María, dejamos enfriar y lo filtramos 13. El filtrado realizamos las reacciones de reconocimiento 14. Culminada la práctica se limpiara y desinfectara el área donde se realizó la práctica y se dejara los reactivos en el lugar correcto bien cerrados y los materiales empleados limpios y secos. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO: Después de destilar el material de investigación, se realizan las reacciones de reconocimiento. 1. CON LOS NaOH Y KOH: El hierro reacciona frente a los NaOH y KOH produciendo un precipitado blanco de Fe(OH)2; este precipitado rápidamente se oxida formándose primeramente verde sucio, luego negro y finalmente pardo rojizo. Fe2+ + (OH)
Fe(OH)2
2. CON EL SULFOCIANURO DE POTASIO: El Fe2+ no reacciona frente a este reactivo, el Fe3+ reacciona originando un complejo color rojo sangre, esta reacción es más sensible para reconocer el hierro. 3. CON EL FERRICIANURO DE POTASIO Fe (CN)6K3: Frente a este reactivo, las sales ferrosas producen un precipitado, sino que forma un complejo color pardo oscuro. 4. CON EL FERROCIANURO DE POTASIO Fe (CN)6K4: Con este reactivo los iones ferrosos reaccionan dando un precipitado color blanco que rápidamente se hace azul, conocido como azul de Prusia. Fe (CN)6 + Fe2+
Fe(CN)6
5. CON EL H2S: Con este gas, el hierro produce un precipitado negro de sulfuro de hierro. Fe2+ + H2S
SFe + 2H+
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GRÁFICOS DE LA PRACTICA:
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS. REACCIÓN CON HIDROXIDO DE SODIO Y POTASIO : Reacción Positivo característico Debe tener un precipitado blanco de Fe(OH)2; este precipitado rápidamente se oxida formándose primeramente verde sucio, luego negro y finalmente pardo rojizo.
Antes (Tiene un color amarillo transparente)
Despues (Positivo caracteristico ) dio color pardo rojizo.
REACCION CON EL FERRICIANURO DE POTASIO: Reacción Positivo No caracteristico tener un precipitado, color pardo oscuro.
Debe
Despues (Positivo No caracteristico ) dio color azul intenso. REACCION CON EL FERROCIANURO DE POTASIO: Reacción Positivo caracteristico Debe tener un precipitado color blanco que rápidamente se hace azul, conocido como azul de Prusia. Antes (Tiene un color amarilo transparente)
Antes (Tiene un color amarillo transparente)
Despues (Positivo caracteristico ) dio color azul oscuro de prusia.
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REACCIÓN CON EL SULFOCIANURO DE POTASIO. Reacción Positivo Característico Debe reaccionar originando un complejo color rojo sangre, esta reacción es más sensible para reconocer el hierro.
Antes (Tene un color amarillo transparente).
Despues (Positivo Caracteristico dio color rojo sangre.
REACCIÓN CON EL SULFURO DE HIDROGENO H2S . Reacción Positivo No Característico produce un precipitado negro de sulfuro de hierro.
Antes (Tene un color amarillo transparente).
El hierro
Despues (Positivo No Caracteristico dio color amarillo intenso.
OBSERVACIONES. En la realización de ésta práctica al haber administrado los 10 ml de Cetona por vía peritoneal en la rata wistar se pudo observar el deceso del animal después de 16 minutos, durante su agonía presentó mareos, perdida de la visión, convulsiones y seguidamente la muerte por la intoxicación con hierro. Es importante mencionar que a través de la aplicación de las reacciones de identificación en medios biológicos, observamos la coloración de las reacciones lo cual corroboro para determinar la presencia del (toxico) en la rata wistar.
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CONCLUSIONES.
En la realización de esta práctica de esta práctica se aprendió a reconocer los efectos o síntomas provocados por la administración del toxico (hierro) al organismo de un animal de experimentación, así como también hemos identificado la presencia de este en la sangre del animal mediante pruebas específicas para el reconocimiento de este compuesto que puede originar a su vez coma o hasta incluso la muerte como se ha demostrado en esta práctica.
RECOMENDACIONES. Asegurarse que el equipo esté correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilación, evitando así una intoxicación. Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, gorro, zapatones, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar pipetas específicas para cada reactivo. Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida Acatar las sugerencias y guías expuestas por el ayudante, para de esta manera obtener muy buenos resultados en la realización de la práctica. CUESTIONARIO. 1. ¿PROPIEDADES FÍSICAS- QUÍMICAS DEL HIERRO? Estado físico: Líquido Color: Marrón oscuro Olor: Débil, semejante al del ácido clorhídrico Temperatura de ebullición: > 100 ºC (depende de la pureza) Temperatura de la inflamación: No inflamable. Se descompone por el calor liberando ácido clorhídrico. Temperatura de autoignición: No inflamable Densidad del líquido: > 1,4g/ml, dependiendo de la pureza y la temperatura. Presión de vapor: Sin información Solubilidad en agua: 100% 2. ¿DONDE SE ENCUENTRA EL HIERO? El hierro es un ingrediente en muchos suplementos minerales y vitamínicos. Los suplementos de hierro igualmente se venden solos y sus diversos tipos abarcan: Sulfato ferroso Gluconato ferroso Fumarato ferroso 3. ¿CUAL ES LA FISIOPATOLOGÍA DE LA INTOXICACIÓN?
Daño Gastrointestinal. Las sales de hierro corroen y erosionan la mucosa GI. Generan una gastroenteritis hemorrágica que puede llegar a perforación (peritonitis). Al “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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dañar la barrera de la mucosa gastrointestinal, facilitan el paso de las bacterias a la sangre llevando a diseminación hematógena y sepsis.
Alteración Cardiovascular. Las altas concentraciones de hierro aumentan la permeabilidad capilar generando salida de líquido a un tercer espacio. Lo anterior, sumado a la hemorragia gastrointestinal, genera hipovolemia e hipoperfusión tisular y shock.
Acidosis Metabólica. Es el producto de la hipoperfusión tisular que lleva al metabolismo anaeróbico y posteriormente a la acidosis láctica. 4. ¿QUÉ SUCEDE CUANDO EL HIERRO ENTRA EN CONTACTO CON EL SUELO? El hierro y sus compuestos pueden movilizarse a través del suelo, pero su movilidad depende de varios factores tales como el pH y la cantidad de materia orgánica, los que varían según el ambiente local. Generalmente, el cadmio se adhiere fuertemente a la materia orgánica en la cual permanece inmóvil en el suelo y puede ser incorporado por plantas, entrando así a la cadena alimentaria. 5. EFECTOS QUE CAUSA LA INGESTION DE HIERRO EN LOS ALIMENTOS. Ingerir alimentos o tomar agua con niveles de cadmio muy altos produce irritación grave del estómago, lo que produce vómitos y diarrea y en ciertas ocasiones la muerte. Ingerir niveles de cadmio más bajos durante un período prolongado puede producir acumulación de hierro en los riñones. La exposición a niveles de cadmio más bajos durante un período prolongado puede aumentar la fragilidad de los huesos de manera que se pueden quebrar fácilmente GLOSARIO: 1. TOXICOCINÉTICA: Conjunto de fenómenos que experimenta el tóxico desde el momento que se pone en contacto con el hombre hasta que es eliminado por el mismo. 2. HEPATORENAL: Se caracteriza por una insuficiencia renal funcional con función tubular normal en un paciente con insuficiencia hepática 3. OSTEOMALACIA: Es una enfermedad metabólica ósea que se caracteriza por una alteración de la mineralización ósea, con frecuencia relacionada con alteraciones del metabolismo de la vitamina D y del fosfato. 4. HIPOPERFUSIÓN TISULAR: Aporte insuficiente de los nutrientes y el oxígeno necesarios para la actividad normal de los tejidos y las células, también se denomina Shock. 5. HEMATÓGENA: Que se produce en la sangre o derivado de ella. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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6. SEPSIS: Es la respuesta sistémica del organismo huésped ante una infección, con finalidad eminentemente defensiva. BIBLIOGRAFÍA.
LORÍA J .BERMEO A. RAMÍREZ A. FERNÁNDEZ D. Archivos de Medicina de Urgencia de México. Intoxicación por cadmio, reporte de un caso. (Consultado el 19 deJunio del 2014). Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/urgencia/aur-2009/aur092f.pdf
Armendaris
G,
Gerardo
(2007). Química
orgánica
3 (en
español) (Tercera edición). Quito-Ecuador: Gruleer. pp. 140–141.
Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial CientíficoMédico. Madrid. España. 2010
WEBGRAFÍA
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AUTORIA. Dr.- Carlos García MSc
FIRMA DEL RESPONSABLE.
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ANEXOS: DATOS OBTENIDOS DE LA PRACTICA DE INTOXICACION POR HIERRO, MEDIANTE LA SINTOMATOLOGIA DE LA RATA WISTAR Y LAS REACCIONES DE RECONOCIMIENTO.
AQUÍ ESTA EL GRUPO # 2 TRABAJANDO Y MOSTRANDO LA REACCION DE RECONOCIMEINTO CON: INTOXICACION POR HIERRO.
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