ISSN 0719-9457 Versión en línea
Revista de
Medicina Veterinaria e Investigación
Abril 2019
Volumen 2 –Número 1
7
Revista de Medicina Veterinaria e Investigación es publicada en forma semestral por la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad San Sebastián.
Volumen 2, Número 1, abril de 2019. ISSN:
0719-9457 Versión en línea.
Dirección:
Lientur 1457, Concepción, Región del Biobío, Chile.
Teléfono:
+56 41 248 7500
Correo electrónico:
meveditorial@uss.cl
Editora:
AnaLía Henríquez: ana.henriquez@uss.cl
Subeditor
Jorge Leichtle: jorge.leichtle@uss.cl
Página web:
http://www.uss.cl/medicina-veterinaria/publicaciones/
Revista de Medicina y Ciencias Veterinarias estará bajo licencia Creative Commons 3.0 (CC BY-NC-ND), autorizando la publicación del contenido, siempre y cuando sea correctamente citada su fuente y autoría.
1
ISSN: 0719-9457 Versión en línea ________________________________________________________________________________ Volumen 2
Número 1
Abril de 2019
________________________________________________________________________________
EDITORA
AnaLía Henríquez, MV, DCs. (Universidad San Sebastián)
SUBEDITOR
Jorge Leichtle, MV, MCs. (Universidad San Sebastián)
COMITÉ EDITORIAL
Antonio Bizama, MV, MCs. (Universidad San Sebastián) Claudio Cerda, MV, MCs. (Universidad San Sebastián) Frank Vera, MV, MCs. (Universidad San Sebastián) Guillermo Santibañez, MV, MCs. (Universidad San Sebastián) Hipólito Chávez, MV, MCs. (Universidad San Sebastián) René Garcés, MV, DMV. (Universidad San Sebastián)
2
COMITÉ CIENTÍFICO
Alfonso Sánchez Riquelme, MV, MCs. (Universidad de las Américas) Carlos Landaeta-Aqueveque, MV, DCs. (Universidad de Concepción) Edson Montero, MV, MCs. (Universidad San Sebastián) Esperanza Beltrami, MV, MCs. (Universidad Austral) Luis Riquelme, MV, MCs. (Universidad San Sebastián) Marcela Cabrera, MV, MCs. (Universidad San Sebastián) Marcos Pedreros, MV, MCs. (Universidad San Sebastián) Margarita Romero, MV, MCs. (Universidad San Sebastián) Óscar López Sandoval, MV, MCs. (Universidad Santo Tomas) Patricia Escárate, MV, MCs. (Universidad Iberoamericana de Ciencias y Tecnología) Patricio Guzmán, MV, MCs. (Universidad San Sebastián)
3
4
Contenido
Editorial ......................................................................................................................................................... 6
Articulos originales Prevalencia de osificación de cartílagos colaterales de la tercera falange en caballos chilenos de un club de rodeo de la comuna de Coronel (Chile) Isadora Adams e Hipólito Chávez. ................................................................................................................ 7 Prevalencia de huevos de parásitos gastrointestinales en caballos de Isla Mocha, Arauco (Chile) Luis Salgado-Zambrano e Hipólito Chávez. ................................................................................................. 21 Relación de actividad sérica de glutamato deshidrogenasa y transaminasas en vacas de carne clínicamente sanas de la comuna de Coelemu, Región de Ñuble. Carolina Andrea Velásquez-Valdenegro y Marcos Pedreros....................................................................... 33 Análisis de variabilidad de la glicemia a distintos tiempos post extracción con los anticoagulantes heparina de litio, fluoruro de sodio y citrato sódico en perro y gato doméstico Alessandra Ayala-Pío y AnaLía Henríquez. .................................................................................................. 41
Reporte de casos Reporte de leucismo parcial en ejemplar de pingüino de Magallanes (Spheniscus magellanicus) de la región del Biobío, Chile. Jorge Leichtle ............................................................................................................................................... 61
Instrucciones para los autores. ................................................................................................................... 66 Lista de comprobación de envíos ................................................................................................................ 71
5
Editorial La Medicina Veterinaria tradicional ha evolucionado con los tiempos. Hoy en día es un componente crucial no solo de la salud animal y humana, sino que también ecosistémica. El concepto de “Una Salud” (“One Health”) se ha instaurado a nivel global y ahí es donde desde el prisma de la fauna silvestre tenemos mucho camino por andar. Nuestra fauna nativa es integrante de esta cadena de interconexiones, más aún afectada por acción del hombre y últimamente por el cambio climático. Esto conlleva una necesidad por investigar factores que inciden en su conservación a nivel país. La Asociación de Médicos Veterinarios de Fauna Silvestre – AMEVEFAS, agrupa a más de 180 profesionales del área de distintas afiliaciones, y dentro de su misión está apoyar la conservación de la biodiversidad y fomentar la investigación y educación en fauna silvestre. Es así como hoy en día existe un canal transversal que agrupa a MVs que se desempeñan en la academia, gobierno, institucionalidad, zoológicos, centros de rehabilitación, ONGs, consultoras y sector privado, y a través del cual se presentan temas de preocupación. Se identifican áreas de interés, se desprenden líneas de investigación, acciones de respuesta y se colabora técnicamente con organismos públicos y privados. Así se ha avanzado como miembro de la Mesa Gestión del Riesgo de Desastres Dimensión Animal de ONEMI en materia de respuesta a grandes emergencias. Así también se colabora con la institucionalidad en varios frentes como el control del tráfico ilegal, respuesta, necropsias e investigación en varamientos de fauna marina. Se aúnan esfuerzos para desarrollar mejores herramientas de diagnóstico y líneas de acción para enfrentar las necesidades de nuestra fauna silvestre. La academia hoy ha incorporado la temática fauna silvestre en casi todos sus planes de estudio de pre y postgrado, acorde con la tendencia mundial y las necesidades nacionales. Cada día hay más tesis desarrolladas en este ámbito. Un camino con infinitas posibilidades para aportar a la conservación y marcar una diferencia, sigamos avanzando.
Dra. Betsy Pincheira Presidente de AMEVEFAS
6
Recibido: 02-01-2019 Aceptado: 28-03-2019
Rev. Med. Vet. Investig. 2(1):7-20, 2019 Artículo original
Prevalencia de osificación de cartílagos colaterales de la tercera falange en caballos chilenos de un club de rodeo de la comuna de Coronel (Chile). Isadora Adams1 e Hipólito Chávez1 1
Facultad de Medicina Veterinaria. Universidad San Sebastián, Concepción, Chile.
Isadora Adams: isaadams.m@gmail.com Resumen Los cartílagos colaterales de la tercera falange (CCF3) son estructuras anexas del pie equino de variadas funciones en la amortiguación y perfusión del dedo, y su osificación ha sido relacionada con algunas condiciones clínicas expresadas como algún grado de claudicación. Se realizaron radiografías en proyecciones dorso-palmar de ambos miembros torácicos de 33 caballos de raza chilena de un club de rodeo de la comuna de Coronel, con el objetivo de comprobar el grado de osificación de los CCF3 y relación con el sexo y edad. Los resultados demostraron distintos grados de osificación de los CCF3 en el 88% de la población estudiada. No se demostró relación estadísticamente significativa entre la osificación de los CC y sexo y edad. Palabras clave: Pie equino, claudicación, equino de rodeo, radiografía equinos, miembros torácicos, calcificación.
Abstract The collateral cartilages of the third phalanx (CCF3) are attached structures of the equine lombs with diverse functions in the cushioning and perfusion of the finger, and their ossification has been related to some clinical conditions expressed in some degree of claudication. Radiographs were made of dorso-palmar projections of both thoracic members of 33 chilean horses from a rodeo club in Coronel city, in order to verify the degree of ossification of the CCF3 and statistically relate them to sex and age. The results showed different degrees of ossification of the CCF3 in 88% of the population studied. There was no statistically significant relationship between the ossification of the CCF3 and sex or age. Key words: Equine foot, claudication, rodeo’s horse, equine X-rays, thoracic limbs, calcification.
asienta el mayor porcentaje de claudicaciones en el
Introducción
caballo (Agüera, 2008). Por lo que, de alguna manera, la
Tempranamente, luego de la domesticación, en las
conformación del pie, así como los aplomos de las
estepas euroasiáticas, hace aproximadamente 3500-
extremidades y el uso dado al caballo, son condiciones
3000 AC, el píe se ha identificado como la estructura que
7
que pueden gravitar en la presencia de cojeras en esta
asocian estructuralmente a los ligamentos colaterales de
especie (Reckmann, 1999).
la articulación inter falángica distal y los ligamentos fibrocartilaginosos, que se extienden hasta la base del
El caballo chileno es un animal con rasgos rústicos, que
tendón flexor (Bowker, 2011; Dyson y Nagy, 2011).
se destaca por la mansedumbre, fortaleza y agilidad para realizar uno de los deportes de las tradiciones culturales
Se han descrito como estructuras que tienen un papel
más longevas en nuestro país como es el “rodeo”,
fundamental en la reducción de contusiones o traumas
considerado hoy como el deporte ecuestre nacional
de las estructuras que se encuentran dentro del pie y
(Arms, 2003).
también ayudan en el flujo de sangre mediante la contracción de los plexos venosos durante el ejercicio
Desde el punto de vista del peso, proporciones del
(O’Grady y Poupard, 2003).
cuerpo y alzada, el caballo chileno se clasifica como eumétrico (350-500 kg), mediolíneo (caballos que se
Estos cartílagos contienen una serie de forámenes
inscriben en un cuadrado) y pony (< de 1,47 cm),
vasculares (Bowker, 2011) en los cuales se pueden
respectivamente (Pérez et al., 1997).
encontrar largas venas unidas a una red de pequeños vasos sanguíneos, por lo que, en el momento en que el
La forma en que el caballo se desplaza a alta velocidad
pie toma contacto con el suelo, se ejerce una presión
(6,95 ± 1,17 m/s) en este deporte, somete a todas las
negativa en la región palmar, permitiendo que la energía
estructuras del pie a variadas fuerzas, especialmente en
sea disipada mediante estos cartílagos y fluya a través de
aquellas disposiciones relacionadas con la amortiguación
los ligamentos y las estructuras óseas que se encuentran
del casco (Pérez et al., 1997).
dentro del pie y consecuentemente, permite un relleno
Los cartílagos del pie, también conocidos como cartílagos
rápido para preparar al pie para una próxima carga
ungulares o cartílagos colaterales de la tercera falange
(Down et al., 2007).
(CCF3), son pequeñas estructuras fibrocartilaginosas que
La causa más común de dolor en el pie del caballo incluye
se encuentran en la falange distal del digito equino y se
lesiones provocadas por daños en la falange distal,
extienden hacia proximal por la cara medial y lateral del
lesiones en la corona o en la articulación inter falángica
pie, llegando aproximadamente hasta el gínglimo. Este
distal (AIFD), así como también cambios estructurales
cartílago en animales jóvenes es de tipo hialino mientras
traducidos en la osificación de los cartílagos colaterales.
que en animales adultos es de tipo fibroso (Bowker,
La calcificación de los CCF3, que posteriormente se
2011).
osificara, es un signo de envejecimiento el cual se conoce como “side bone” o hueso lateral (Dyson y Nagy, 2011).
Los CCF3 pueden tener variabilidad de tamaños y están asociados al cojinete digital y a estructuras anexas como
Según algunos autores, el significado clínico de estos
el cojín palmar proximal, el centro y la parte distal de la
cambios en los CCF3 sería cuestionable (Colles, 1983;
tercera falange y el hueso navicular. Además, los CC se
Stashak, 2002; Mitchell et al., 2003; Ross, 2010), a pesar
8
de que una osificación extensa puede estar asociada a un
proceso palmar de la falange distal (Verschooten et al.,
acortamiento del paso (Butler y Kold, 2003; Dyson y
1996).
Trotter, 2003), asimismo, se ha sugerido que una Bowker (2003), notó que la parte distal de los CCF3
osificación extensa en un pie estrecho de talones, en
contienen una gran cantidad de vasos sanguíneos, lo cual
donde la capacidad de expansión es poca o nula, puede
puede explicar por qué la osificación comienza en ese
ser causa de laminitis (Moyer, 1989), sin embargo, se ha
lugar, al tiempo que en este lugar se concentra más
mencionado que esta situación es extremadamente rara
energía que disipar (Ruohoniemi, 1998).
(Johnson, 1982). Esto puede producir algún tipo de claudicación solo si es que es esta osificación llega a su
Una extensa osificación puede ser detectable mediante
nivel máximo interfiriendo con el tendón flexor digital
palpación (Ross, 2011), pero este método es un indicador
profundo o la segunda falange, o simplemente
ineficiente para poder examinar el tamaño del cartílago
provocando una fractura de éste (Stashak, 2002).
y el grado de osificación, por lo que para poder examinar de manera correcta una osificación leve o el grado que
La osificación de los CCF3 del pie ha sido reportada como
ésta presenta se debe hacer uso de radiografías (Dyson y
un hallazgo más común en los miembros anteriores de
Trotter 2003). Para ello, una vista dorso-palmar es la
caballos pesados o caballos de tiro (Colles, 1983;
proyección más eficiente para evaluar el grado de
Verschooten et al. 1996; Stashak, 2002; Butler y Kold,
osificación de los CCF3 (Colles, 1983; Ruohoniemi et al.
2003; Dyson, 2011), siendo esta patología rara en ponis
1993; Verschooten et al. 1996), lo que debe hacerse en
y caballos pura sangre (Verschooten et al., 1996).
ambos miembros (Down et al., 2007).
También se ha descrito que las hembras equinas son más Ruohoniemi et al. (1993), desarrollaron un sistema para
susceptibles a desarrollar esta condición (Ruohoniemi et
clasificar el grado de osificación de los CCF3 en 5
al., 1998).
categorías (Tabla I). Los grados de osificación 3, 4 y 5 son Algunas teorías que explican el desarrollo de la
considerados
como
“osificaciones
posiblemente
osificación de los CCF3 del pie incluyen la predisposición
significantes” según Ruohoniemi et al. (1997, 2003).
hereditaria, traumatismos en el casco, el desbalance de El objetivo de esta investigación fue determinar la
éste y una escasa conformación del casco (Ruohoniemi
prevalencia de osificación de los cartílagos colaterales de
et al., 1993; Stashak, 2002; Mitchell et al., 2003), pero las
la tercera falange en caballos chilenos pertenecientes a
causas específicas no están suficientemente claras
un Club de Rodeo de la común de Coronel, Región del
(Ruohoniemi et al., 1993).
Biobío (Chile). La osificación de los CCF3 puede comenzar en su base, en la unión con la falange distal e ir progresando hacia proximal (Down et al., 2007) o puede fusionarse con el
9
Material y Método
machos (incluyendo los machos castrados) y hembras. Así mismo, se establecieron dos grupos etarios: jóvenes
El estudio se realizó en caballos de raza chilena
(< 5 años de edad) y adultos (> 5 años de edad). En el
pertenecientes al Club de Rodeo Chileno de Coronel
estudio se incluyó toda la población muestral
(Concepción, Chile) ubicado en la ciudad del mismo
independiente de la edad, talla, sexo, y no se discrimina
nombre en las coordenadas 37°01′00″S 73°08′00″O y
sobre la presencia de cojeras y/o condición músculo
altitud de 11 m s. n. m. Los equipos utilizados fueron: -Equipo radiográfico Portable Xmodelo 1040hf (Concepción, Chile).
esquelética relacionada con éstas.
ECORAY®
Previo a la obtención de la radiografía el casco se limpió
-Equipo revelador Carestream® modelo vita CR LE.
prolijamente en la suela y los surcos de la ranilla con un
-Chasis Carestream® modelo CR Cassette.
limpia-casco y luego se lavó con abundante agua de
-Software para lectura de imágenes Carestream® ImageSuite V4.0.
manera de eliminar restos de suciedad (tierra, arena) y/o medicamentos aplicados que pudieran producir
-Vestimenta de protección radiológica.
opacidades que comprometieran el contraste y la
-Material de contención de caballos (jáquima, cabestro, acial).
interpretación de la imagen radiográfica.
El tamaño muestral se determinó empleando la
Para el examen radiográfico los caballos se posicionaron
siguiente fórmula para la estimación de una proporción
en estación, sobre una superficie horizontal, de manera
en una población finita, donde:
que sus cuatro miembros se ubicaron en posición vertical. Una vez lograda esta ubicación, se procedió a levantar el pie y ubicarla el casco sobre una superficie horizontal de madera a una altura de 10 cm del suelo.
Donde:
Técnica radiográfica
-Tamaño de la población (N): 50 caballos
Se realizaron proyecciones dorso-palmar en cada pie de
-Error alfa (a): 0.05
cada miembro torácico. La proyección dorso-palmar se ejecutó con el rayo entrando en un ángulo de 90º
-Nivel de confianza o seguridad (1-a): 0.95
respecto del pie. La dosis radiográfica empleada fue de
-Precisión (d): 0.1
60 Kpv y 25 mAs, a una distancia foco-película de 90 cm.,
-Z(1-a): 1,96
empleando un equipo radiográfico digital. El análisis
-Prevalencia de enfermedad (p): 0.97
radiográfico de las imágenes obtenidas lo realizaron
-Complemento de p (q): 0,85
separadamente tres profesionales Médico Veterinario (Dr. Hipólito Chávez, Dr. Mauricio Núñez y Dr. Claudio
-Tamaño de la muestra (n): 33 caballos.
del Campo), con experiencia en radiología equina. Para efectos del estudio, se consideraron ambos sexos: Para estimar los parámetros para cada variable
10
cualitativa (sexo, edad, altura, presencia y grado de
cartílagos colaterales de la tercera falange y el estrato
osificación), se determinó su frecuencia absoluta y
etario de la población muestreada.
frecuencia relativa. Posteriormente, para comparar la
En la tabla IV, de acuerdo a la prueba de Chi-cuadrado
variable del sexo con la variable de presencia/ausencia
(X2), no existe relación estadísticamente significativa
de osificación, se utilizó la prueba de Chi- cuadrado (X2),
entre el sexo y la osificación de los cartílagos colaterales
para determinar si existe algún tipo de relación entre
de la tercera falange de acuerdo al valor de p (0,136).
estas dos variables. Luego, para comparar la variable
En la tabla V, de acuerdo a la prueba de Chi-cuadrado
entre edad y grado de osificación, se empleó la prueba
(X2), no hay relación estadísticamente significativa entre
de coeficiente de correlación de Spearman, de manera
la osificación de los cartílagos colaterales de la tercera
de precisar si hay una asociación o interdependencia
falange y la lateralidad de los cartílagos del pie de
entre dos variables aleatorias continuas. La prueba que
acuerdo al valor de p (0,587).
se empleó para determinar si la prevalencia de nuestra En la tabla VI se puede observar que el cartílago colateral
investigación es igual a la prevalencia de una
de la tercera falange en donde más se presenta la
investigación realizada por Down et al., (2007) se utilizó
osificación es en el cartílago medial, con una prevalencia
la prueba de homogeneidad de frecuencias para grupos.
del 33%, en comparación al cartílago lateral, el cual
El alfa definida mediante la fórmula utilizada para
presenta una prevalencia del 30%.
determinar el número muestral fue de (0.05) y el beta
En la tabla VII se puede observar la prevalencia de este
será de (0.2).
estudio junto con la prevalencia del estudio realizado por Down et al. (2007) en donde de acuerdo a la prueba de homogeneidad de frecuencias entre grupos dio como Resultados
resultado que si hay variación entre ambas prevalencias con un p (0,03).
En la Tabla II se agrupan los caballos que dieron positivos a osificación de los cartílagos colaterales de la tercera falange, los que alcanzaron prevalencia del 88% del total de la población muestreada.
Discusión
En la tabla III podemos observar que hay un mayor La prevalencia general de osificación de cartílagos
porcentaje de adultos que presentaron osificación en
colaterales de la tercera falange (CCF3) en la población
grado I. De acuerdo a la prueba de coeficiente de
de caballos de raza chileno en el presente estudio fue
correlación de Spearman, dio como resultado -0,025 con
88%. En comparación, un estudio que evaluó la
un valor de p (0,884) lo que conlleva a que no hay relación
estadísticamente
significativa
entre
naturaleza de la osificación de los CCF3 en el pie anterior
la
de caballos noruegos de sangre fría jóvenes, mostró una
graduación determinada para la osificación de los
significativa osificación en uno o más de los cartílagos del
11
pie con una prevalencia total del 11,5% de la población
Ruohoniemi y Laukkanen, 1997). Con este propósito, se
(Holm et al., 2000). Por el contrario, una alta prevalencia
han agregado a la vista dorso-palmar horizontal una
de osificación de los CCF3 se ha encontrado en caballos
proyección latero-medial horizontal (Ruohoniemi et al.,
de salto, donde la lesión ha alcanzado el 93% de la
1997) u otras vistas adicionales, de acuerdo a hallazgos
población (Melo Silva y Vulcano, 2002).
clínicos o de técnicas imagenológicas realizadas de forma concomitante (Ruohoniemi et al., 2004).
La sola evaluación clínica de la osificación de los CCF3 resulta insuficiente para conocer la condición de estas
En contraste, un trabajo, que relacionó la osificación de
estructuras, por cuanto, gran parte de la anatomía está
los CCF3 con la apariencia radiográfica del hueso
cubierta por la cápsula del casco y sólo el extremo
navicular y de la articulación interfalangeal distal, utilizó
proximal es palpable sobre el aspecto dorso medial y
seis proyecciones radiológicas horizontales del pie,
dorso lateral de la cuartilla, inmediatamente por encima
cuatro de ellas de vistas oblicuas (Ruohoniemi et al.,
del rodete coronario (Dyson y Nagy, 2011). Por lo mismo,
1998). Y más recientemente, Jones y Dyson (2015)
la exploración imagenológica de los CCF3 se ha realizado
caracterizó la apariencia radiográfica de los CCF3
con muy buen rendimiento diagnóstico en el caballo
osificados, agregando vistas oblicuas con el pie flectado,
utilizando diversas técnicas radiográficas (Jones y Dyson,
donde el grado de osificación y la información clínica más
2015; Hedenströn y Wattle, 2014; Hedenströn et al.
útil se lograron de las proyecciones dorso-palmar y
2014; Dyson et al. 2010; Butler et al. 2008; Down et al.
oblicua flectada, respectivamente.
2007; Thrall, 2001). Sin embargo, existirían variaciones
La
en la técnica radiológica asociadas al posicionamiento
comparación
de
proyecciones
radiológicas,
dorsopalmar, dorsoproximal- palmarodistal oblicua, y
del pie, dirección y número de proyecciones, así como si
vistas radiográficas de vistas flectadas de los CCF3
el procedimiento se realiza sin retirar la herradura (Butler
osificados permitirían identificar la extensión de la
et al. 2008). En el presente estudio, este último hecho
osificación,
determinó estandarizar sólo una proyección radiológica
líneas
radiolúcidas
y
remodelaciones
asociadas (Dyson y Murray, 2010).
dorso palmar horizontal, con el caballo de pie, por la solicitud de no retirar el herraje realizada por los
Por otra parte, estudios en osificación de los CCF3 han
propietarios que facilitaron los caballos que participaron
empleado otras técnicas de imagen, en especial para
en el estudio.
conocer la relación entre la osificación de los CCF3 con lesiones en tejidos vecinos, como ultrasonido (Denoix et
Asimismo, una única proyección dorso palmar horizontal
al., 2011), resonancia magnética (Selberg y Werpy, 2011)
con el caballo de pie ha sido empleada en varios otros
y cintigrafía (Nagy et al., 2007).
trabajos que estudiaron la osificación de los CCF3 (Hedenströn y Wattle, 2014; Hedenströn et al. 2014;
El grado de osificación de los CCF3 parece presentar
Dyson et al. 2010; Mair y Sherlock, 2008; Dakin et al.
diferencias entre distintas edades, sexos, plano sagital,
2006; Melo E Silva y Vulcano 2002; Holm et al. 2000;
lateralidad, descendencia y raza de caballos. Nuestro
12
estudio en una población de raza chilena mostró
aún en grados intensos de osificación (Dyson y Nagy,
osificación prevalente de grado 1. Lo propio concluyó
2011; Stashak, 2002; McNeel y Riedesel, 2001). Un
una investigación en 1568 en los cartílagos del pie de
trabajo en caballos trotones que estudió el significado de
caballos Noruego de Sangre Fría, donde el mayor grado
la osificación de los CCF3 sobre el rendimiento deportivo,
de osificación encontrado fue 1, seguido de grado 2
concluyó que es más probable que esta lesión no sea
(Holm et al., 2000). Coincidentemente otro reporte que
causa de cojera clínica o subclínica en esta raza
investigó 383 CCF3de ambos pies anteriores de once
(Hedenströn y Wattle, 2014). Ahora bien, visualmente un
distintas razas, también mostró la más alta frecuencia
ensanchamiento medial o lateral en la región de la
(97%) de osificación en el grado 1 (Down et al., 2007).
cuartilla podría observarse, si el proceso de osificación de los CCF3 es extenso (Stashak, 2002).
En contraste, cuando se analizaron 652 CCF3 de caballos de raza brasileño de Salto la calcificación más prevalente
Por otra parte, se ha sugerido que la osificación de los
fue grado 2, hasta los 59 meses de edad (Melo E Silva y
CCF3 no debiera ser considerada irrelevante como causa
Vulcano, 2002). En el mismo sentido, un reporte sobre
de cojera, especialmente si el grado de osificación es
386 pies anteriores de caballos de distintas razas
intenso (≥ 3), sino, por el contrario, constituir un
realizado en el Reino Unido, la conclusión fue que existía
significativo factor de riesgo de claudicación asociada a
mayor prevalencia de osificación de los CCF 3 en grado 2,
trauma del CCF3 osificado (Dyson y Murray, 2010). Bajo
para ambos cartílagos ungulares medial y lateral (Jones y
estas circunstancias, una cojera podría ser explicada por
Dyson, 2015).
dolor de ubicación en la propia lesión primaria del cartílago osificado, lesiones en el aspecto ipsilateral de la
Asimismo, se ha demostrado un significativo efecto de la
falange distal, o de los ligamentos condrocoronal y
raza sobre la osificación de los CCF3 como se ha
condrosesamoidal,
demostrado en Razas Tipo-Cob y ponis nativos altos
así
como
también
por
una
desmopatía de los ligamentos colaterales de la
ingleses, donde coexistiría una correlación positiva
articulación interfalángica distal (Dyson y Nagy, 2011).
significativa entre peso corporal y grado de osificación (Down et al., 2007).
Del mismo modo, se ha estudiado la relación que pudiese tener la osificación de los CCF3 con otras lesiones
En la población de caballos chilenos en el presente
concomitantes de tejidos circundantes blandos y duros
estudio, el máximo grado de osificación de los CCF3
en el pie equino. Una investigación de Selberg y Werpy
diagnosticada fue grado 3. Sin embargo, no se
(2011) seleccionó caballos con osificación escrerótica de
observaron signos clínicos asociados a este nivel de
los CCF3 que además presentaban fractura ipsilateral de
osificación. Existe discusión respecto de si la osificación
la tercera falange y determinó que, tanto la osificación
de los CCF 3 estaría o no asociada a una signología
ungueal como los procesos palmares de la falange distal,
músculo esquelética, como cojera, por ejemplo,
estaban anormalmente mineralizados, y que, además,
independiente de la raza o actividad física del caballo,
los ligamentos y tejidos blandos adyacentes a esa
13
osificación se encontraban alterados en todos los
El presente estudio determinó una mayor prevalencia de
caballos.
osificación de los CCF3 mediales (33%) en comparación a los CCF3 lateral, donde esta cifra fue algo menor (30%).
La el rango de edad de los caballos del presente estudio
Sin embargo, contrastando nuestro estudio, una
fue de 9, 9 ± 4 años, y los casos diagnosticados de
investigación realizada por Ruohoniemi et al. (1993)
osificación de los CCF3 (grado 1 a 3) se registraron sobre
determinó una mayor osificación en los cartílagos
el promedio de edad (8-9 años). Al respecto, los
laterales (52,2%) en relación al cartílago medial (47,8%)
presentes resultados difieren de los determinados para
en caballos de raza finlandés.
otras razas de caballo, donde signos iniciales de calcificación de los CCF3 se han diagnosticado a edades
En atención al limitado número de caballos investigados
tan tempranas como 15 meses y 2,8 ± 0,38 años, para
en este estudio sería de interés que trabajos futuros
raza de Salto Brasileña (Melo E Silva y Vulcano, 2002) y
consideraran ampliar la cifra poblacional, de manera que
Trotones Noruegos de Sangre Fría (Hedenströn et al.,
las conclusiones sobre CCF3 en la raza chilena tengan un
2014), respectivamente.
mayor valor diagnóstico.
El presente estudio en caballos de Raza Chilena no mostró núcleos o centros de osificación separados de la base del CCF3 cartílago. La osificación de los CCF3 ocurre cuando el borde proximal presenta esta condición, más allá del margen dorsal del hueso navicular. Sin embargo, la osificación no siempre avanza progresiva y dorsal al margen proximal del hueso navicular y, a veces, es posible identificar centros distintos de osificación en los CCF3 (Dyson y Nagay, 2011). En contraste al presente estudio, una investigación en caballos de raza Noruega de Sangre Fría determinó una prevalencia de 2,8% y 2,2% para la presencia de uno o dos de centros de osificación separados, respectivamente (Holm et al., 2000). Por su parte, un trabajo en caballos de raza de Salto Brasileño, identificó núcleos de osificación separados en el 6% de la población estudiada (Melo E Silva y Vulcano, 2002). Asimismo, con posterioridad, un reporte en caballos de distintas razas inglesas determinó que el 10% de la población tenían centros de osificación separados en los CCF3 (Down et al., 2007).
14
Tablas e ilustraciones Tabla I. Grado y características de la osificación de los cartílagos colaterales (CCF 3), según Ruohoniemi et al. (1993). Grado
Características
0
No se presenta osificación
1
Osificación mínima de la base de ambos cartílagos
2
Leve osificación en la base de los CCF 3 a nivel palmar de la articulación interfalángica distal
3
Osificación de carácter moderado a nivel del borde proximal del hueso navicular
4
Avanzado grado con osificación, extendiéndose claramente por sobre el hueso navicular, pero llegando hasta el límite medial de la segunda falange
5
Grado de osificación extenso a nivel de la mitad de la primera falange
Tabla II. Identificación y prevalencia de la osificación de los cartílagos colaterales de la tercera falange CCF 3 en caballos chilenos de un Club de Rodeo de la comuna de Coronel, Chile.
15
Tabla III. Tabla de contingencia de variables edad y grado de osificación de los cartílagos colaterales de la tercera falange.
Tabla IV. Tabla de contingencia de la osificación de los cartílagos colaterales en relación al sexo del caballo.
16
Tabla V. Tabla de contingencia de osificación de los cartílagos colaterales de la tercera falange en relación a la lateralidad de ambos miembros anteriores.
Tabla VI. Prevalencia de osificación de los cartílagos colaterales de la tercera falange en relación a la lateralidad de ambos miembros anteriores.
17
Tabla VII. Prevalencia de osificación de los cartílagos colaterales de la tercera falange determinada en el estudio realizado por Down et al. (2007) y el presente estudio.
Referencias bibliográficas
Butler, J. y Kold, S. (2003). Radiography of the horse: Foot and pastern. In Practice, 25, 208215. doi: 10.1136/inpract.25.4.208
Agüera, E. (2008). Domesticación y origen de la doma y manejo del caballo. Recuperadode https://www.uco.es/organizacion/secretariag eneral/images/doc/memoria/ 2008/0/Ap_0_2.pdf
Butler, J., Colles, C., Dyson, S., Kold, S. y Poulos, P. (2008). Foot, pastern and fetlock. En: Clinical Radiology of the horse. (3rd ed.), Oxford: Wiley- Blackwell.
Arms, R. (2003). El Caballo Criollo Chileno. Recuperado de http://rodeoyrienda.cl/varias/1051-el-caballocriollo-chileno.html
Colles, C. (1983). Interpreting radiographs 1: The foot. Equine Veterinary Journal, 15(4), 297303. doi: 10.1111/j.2042-3306.1983.tb01804.x Dakin, S., Robson, K. y Dyson, S. (2006). Fractures of ossifield cartilages of the foot: 10 cases. Equine vet. Educ, 18(3), 130-138.
Bowker, R. (2003). Contrasting Structural Morphologies Of "Good" And "Bad" Footed Horses. Proceedings of the 49th Annual Convention of the American Association of Equine Practitioners. Department of Pathobiology and Diagnostic Investigation, New Orleans, Louisiana, USA. Recuperado de https://www.graysonjockeyclub.org/newsimages/910103000186_s m.pdf
Denoix, J. M., Bertoni, L., Heitzmann, A. G., Werpy, N. y Audigié, F. (2011). Ultrasonograaphic examination of the collateral ligaments of the distal interphalangeal joint in horses: Part A: Technique and normal images. Equine Vet. Educ., 23 (11), 574-580. Down, S., Dyson, S. y Murray, R. (2007). Ossification of the cartilages of the foot. Equine Veterinary Education, 19(1), 51-56. doi: 10.2746/095777307X177271
Bowker, R. (2011). Functional Anatomy of the Palmar Aspect of the Foot. En: Diagnosis and Management of Lameness in the Horse (2a ed., pp 320- 323). St. louis: Elsevier. doi: 10.1016/B978-1-4160-6069-7.00029-8
Dyson, S. y Trotter, G. (2003). The Distal Phalanx and Distal Interphalangeal Joint. Diagnosis and Management of Lameness in the Horse (pp.
18
310– 325). St. louis: Elsevier. 10.1016/B978-0-7216-8342-3.50041-3
doi:
McNeel, S. y Riedesel, E. (2001). Las falanges. En D. Thrall, tratado de diagnóstico radiológico veterinario (3a ed., pp. 250-273). Buenos Aires: Inter-Medica S.A.I.C.I.
Dyson, S., Brown, V., Collins, S. y Murray, R. (2010). Is there an association between ossification of the cartilages of the foot and collateral desmopathy of the distal interphalangeal joint or distal phalanx injury? Equine et. J., 42 (6), 504-511.
Melo E Silva, S. y Vulcano L. (2002). Collateral cartilage ossification of the distal phalanx in the brazilian jumper horse. Veterinary Radiology y Ultrasound, 43(5), 461-463.
Dyson, S. y Murray, R. (2010). Injuries associated with ossification of the cartilages of the foot. En AAEP Proceedings, 56, 152-165.
Mitchell, J., Mitchell, J., Nolan, P. y Ross, M. (2003). The North American Standardbred. In Diagnosis and Management of Lameness in the Horse (pp. 895–912). St. Louis: Elsevier. doi: 10.1016/B978-0-7216-8342- 3.50116-9
Dyson, S. y Nagy, A. (2011). Injuries associated with the cartilages of the foot. Equine Veterinary Education. 23(11), 581-593. doi: 10.1111/j.2042- 3292.2011.00
Moyer, W. (1989). Clinical examination of the equine foot. Vet Clin North Am Equine Pract, 5(1), 29–46.
Hedenströn, U., Olsson, U., Holm, A. y Wattle, O. (2014). Ossification of ungular cartilages in front feet of cold-blooded trotters – a clinical radiographic evaluation of development over time. Acta Veterinaria Scandinavica, 56 (1), 7379.
Nagy, A., Dyson, J. y Murray, R. (2007). Scintigraphic examination of the cartilages of the foot. Equine Vet. J., 39(3), 250-256. O’Grady, S. y Poupard, D. (2003). Physiologic Horseshoeing. Journal of Equine Veterinary Science, 23(3), 123-124.
Hedenströn, U. y Wattle, O. (2014). Significance of ossificated ungular cartilages regarding the performance of cold-blooded trotters. Acta Veterinaria Scandinavica, 56 (1), 74-79.
Pérez, R., García, M., Cabezas, I., Guzmán, R., Merino, V., Valenzuela, S. y Gonzalez, C. (1997). Actividad física y cambios cardiovasculares y bioquímicos del caballo chileno a la competencia de rodeo. Archivos de Medicina Veterinaria, 29(2), 221-234. doi: 10.4067/S0301- 732X1997000200007
Holm, A., Bjornstad, G. y Ruohoniemi, M. (2000). Ossification of the cartilages in the front feet of young Norwegian coldblooded horses. Equine Vet J, 32 (2), 156-160. Johnson, J.H (1982). The foot. En Mansmann, RA., McAllister ES. Equine Medicine and Surgery. (3rd ed., pp. 1052). Santa Barbara: American Veterinary Publications.
Reckmann, O. (1999). Evaluacion De Aplomos, Cascos Y Herraje En Caballos Fina Sangre Criollo Chileno. (Tesis de grado presentada como parte de los requisitos para optar al grado de licenciado en medicina veterinaria). Universidad Austral de Chile, Valdivia, Chile.
Jones, L. y Dyson, S. (2015). Radiographic characterization of ossification of the ungular cartilages in horses: 271 cases (2005-2012). JAVMA, 247 (7), 801-811.
Ross, M. (2010). Lameness in Horses: Basic Facts Before Starting. Diagnosis and Management of Lameness in the Horse (2nd ed., pp. 3–8). St. louis: Elsevier. doi: 10.1016/B978-1-41606069-7.00002-X
Kainer, R. (2002). Funcional anatomy of equine locomotor organs. En Adam´s Lameness in Horse. Ted S. Stashak. (5th ed., pp. 1-73). Philadelphia: Lippincott Williams y Wilkins.
Ross, M. (2011). Palpation Of The Forelimb Foot. Diagnosis and Management of Lameness in the Horse, 43–63. doi: 10.1016/B978-1-41606069-7.00006- 7
Mair, T. y Sherlock, C. (2008). Collateral desmitis of the distal interphalangeal joint in conjunction with concurrent ossification of the cartilages of the foot in nine horses. Equine Vet. Educ, 20(9), 485-492.
Ruohoniemi, M., Tulamo, R. y Hackzell, M. (1993). Radiographic evaluation of ossification of the
19
collateral cartilages of the third phalanx in Finnhorses. Equine Veterinary Journal, 25(5), 453–455. doi: 0.1111/j.20423306.1993.tb02989.x
Equine Veterinary Journal, 35(1), 55–9. doi: 10.2746/042516403775467397 Ruohoniemi, M., Makela, O. y Eskonen, T. (2004). Clinical significance of ossification of the cartilages of the front feet based on nuclear bone scintigraphy, radiography and lameness examinations in 21 Finnhorses. Equine Vet. J, 36(2), 143-148.
Ruohoniemi, M. y Laukkanen, H. (1997). Effects of the sex and age on the ossification of the colateral cartilages of the distal phalanx of the Finnhorse and the relationships between ossification and body size and type of horse. Research in Veterinary Science, 62(1), 34-83.
Selberg, K. y Werpy, N. (2011). Fractures of the distal phalanx and associated soft tissue and osseus abnormalities in 22 horses with ossified sclerotic ungula cartilages diagnosed with magnetic resonance imaging. Veterinary radiology y Ultrasound, 52 (4), 394-401.
Ruohoniemi, M., Raekallio, M., Tulamo, R. y Salonius, K. (1997). Relationship between ossification of the cartilages of the foot and conformation and radiographic measurements of the front feet in Finnhorses. Equine Veterinary Journal, 29(1), 44–48. doi: 10.1111/j.2042- 3306.1997.tb01635.x
Smith, M. (2014). Infection of the cartilages of the foot. Equine Vet. Educ, 26 (11), 580-583. Stashak, T. (2002). Ossification of the collateral cartilages of the distal phalanx (sidebones). En Adam’s Lameness in Horses. (5th ed., pp 715717). Philadelphia: Lippincott Williams y Wilkins.
Ruohoniemi, M., Ryhänen, V. y Tulamo, R. (1998). Radiographic Appearance of the Navicular Bone and Distal Interphalangeal Joint and Their Relationship with Ossification of the Collateral Cartilages of the Distal Phalanx in Finnhorse Cadaver Forefeet. Veterinary Radiology y Ultrasound, 39(2), 125-132. doi: 10.1111/j.1740-8261.1998.tb01978.x
Verschooten, F., Van Waerebeek, B. y Verbeeck, J. (1996). The ossification of cartilages of the distal phalanx in the horse: An anatomical, experimental, radiographic and clinical study. Journal of Equine Veterinary Science, 16(7), 291-305. doi: 10.1016/S0737-0806(96)802231
Ruohoniemi, M., Ahtiainen, H. y Ojala, M. (2003). Estimates of heritability for ossification of the cartilages of the front feet in the Finnhorse.
20
Rev. Med. Vet. Investig. 2(1):21-32, 2019 Artículo original
Recibido: 28-12-2018 Aceptado: 5-04-2019
Prevalencia de huevos de parásitos gastrointestinales en caballos de Isla Mocha, Arauco (Chile). Luis Salgado-Zambrano 1 e Hipólito Chávez1 1
Facultad de Medicina Veterinaria. Universidad San Sebastián, Concepción, Chile.
Luis Salgado-Zambrano: luis_salgado_139@hotmail.com Resumen El parasitismo gastrointestinal es uno de los problemas sanitarios de mayor importancia en animales, tanto domésticos como silvestres. Siempre ha sido de interés para el profesional clínico de equinos conocer de esta enfermedad debido a su implicancia en la salud animal. Dentro del ganado doméstico se dice que los caballos tienen el mayor recuento de parásitos. El objetivo de este estudio fue determinar la prevalencia de huevos de nemátodos y tremátodos en una población de caballos que habitan el territorio insular Isla Mocha, Arauco (Chile). El tamaño muestral (n=36) se determinó con un nivel de confianza del 95%, un margen de error del 10% y una prevalencia esperada de 10,4%. La presencia de huevos de nemátodos y tremátodos fue determinada mediante la técnica de Telemann modificada y la técnica de flotación con sulfato de zinc, respectivamente. Los resultados mostraron una prevalencia de 77,7% para huevos de nemátodos y 0% para huevos de tremátodos. Para la prevalencia según sexo y edad de los caballos, no se observó diferencia estadísticamente significativa (p>0,05) en ambas categorías. Palabras clave: parasitismo, nemátodos, tremátodos, equinos. Abstract Gastrointestinal parasitism is one of the most important health problems in animals, both domestic and wild. It has always been interesting for the clinical practitioner of equines to know this disease due to its implications for animal health. Within domestic livestock it is said that horses have the highest parasite count. The objective of this study was to determine the prevalence of nematode and trematode eggs from a population of horses that inhabit the island territory of Isla Mocha, Arauco (Chile). The sample size (n = 36) was determined with a confidence level of 95%, a margin of error of 10% and an expected prevalence of 10.4%. The presence of nematode and trematode eggs was determined using the modified Telemann technique and the zinc sulphate flotation technique, respectively. The results showed a prevalence of 77.7% for nematode eggs and 0% for trematode eggs. For the prevalence according to sex and age of the horses, no statistically significant difference was observed (p> 0.05) in both categories. Key words: Equine foot, claudication, rodeo’s horse, equine X-rays, thoracic limbs, calcification.
tal en el año 1988. No obstante que el reconocimiento de
Introducción
la importancia de protegerla data del año 1979, año en
La mayor parte del territorio de la isla se encuentra
el cual fue declarada Área de Protección. La condición de
dentro de la Reserva Nacional Isla Mocha, creada como
21
insularidad de la Reserva, ha determinado la existencia
El parasitismo gastrointestinal es uno de los problemas
de especiales ambientes ecológicos y de alto valor
sanitarios de mayor importancia en animales, tanto
científico, en los que concurren procesos naturales
domésticos como silvestres. Siempre ha sido de interés
únicos y de alta fragilidad necesarios de preservar, así
para el profesional clínico conocer esta problemática
como formas de adaptación y de evolución de
debido a su implicancia en la salud animal. Por esta
comunidades humanas en ambientes restringidos. Por
razón, a través de los años se han efectuado numerosas
ello, la Reserva posee una alta relevancia para la
investigaciones con el fin de evaluar su presencia en
conservación de la diversidad biológica y de recursos
especies animales, sobre todo en especies domésticas.
culturales asociados en el contexto del Sistema Nacional
La
de Áreas Silvestres Protegidas del Estado (Conaf, 1998).
enfermedades detectadas y seguir su evolución es de
necesidad
de
cuantificar
correctamente
las
vital importancia para los pacientes afectados (Barriga,
En el sector endémico, donde se ubica la reserva, se
2002).
presenta un clima templado húmedo de carácter oceánico. Las precipitaciones abundan durante todo el
Las endoparasitosis más abundantes están constituidas
año, alcanzando precipitaciones del orden de los 1.200
por nemátodos, éstos poseen características biológicas
mm anuales, observándose un periodo de aridez en los
que les garantizan su permanencia en sus respectivos
meses de enero y febrero, especialmente en el lado
hospederos,
sureste ya que el cordón montañoso provee una barrera
patógenas con variados efectos sobre el intestino y la
climática muy potente (Conaf, 1998).
economía corporal (Aguilera, 2011).
La Isla Mocha presenta una diversidad de especies
Los caballos son animales que potencialmente pueden
animales, algunas introducidas como el pudú, y también
ser infestados por un gran número de parásitos
una gran variedad de animales domésticos, en particular
gastrointestinales (Beyer, 2014). Así, el parasitismo
caballos criollos, que se encuentran en estado
gastrointestinal representa una de las patologías más
semisalvaje, sueltos en la isla hace varias décadas. Su
comunes que afecta la especie equina (Salas et al., 2014).
número bordea los 1400 equinos, los que en su gran
Se dice que los caballos tienen el mayor recuento de
mayoría se encuentran sin desparasitar. Muchas veces
parásitos de todo el ganado doméstico. No es raro que
no se reconoce un propietario de estos équidos, por lo
un caballo, aparentemente saludable, pueda albergar
que carecen de control sanitario (Follert, 2010). Sin
más de medio millón de nemátodos gastrointestinales,
embargo, según registros oficiales Sipecweb, en
que viven en equilibrio con el huésped. Estos parásitos
Declaración Existencia Animal – DEA 2016 / 2017, la
causan daño a los animales durante la fase de infección,
cantidad total de equinos es de 227 (Servicio Agrícola y
cuando las larvas invasoras están experimentando un
Ganadero, 2018).
desarrollo temprano en los tejidos del cuerpo y, luego de
donde
realizan
diferentes
acciones
estos estadios larvales, emergen y se desarrollan
22
plenamente los adultos que ponen huevos en el
pueden detectar rangos entre 7.000 y 230.000 parásitos
ambiente (Pilania et al., 2015).
adultos por equino (Salas et al., 2014).
Según Alcaino y Gorman (1999), los nemátodos que
Además Strongylus vulgaris, Strongylus edentatus y
afectan a los caballos en Chile son: Habronema
Strongylus equinus se cuentan entre los parásitos más
megastoma,
Habronema
destructivos del caballo. Estas tres especies son
microstoma, Trichostrongylus axei, Parascaris equorum,
“chupadoras” de sangre cuando son adultos, están
Strongyloides westeri, Oxyuris equi, Probstmayria
localizados en el ciego y el colon, pero lo que es aún más
vivípara,
vulgaris,
importante, sus larvas realizan migraciones que
capitatus,
provocan grandes destrozos, especialmente en los
Oesophagodontus robustus, Triodontophorus serratus,
potros de un año o menos. La presencia de feroces
Triodontophorus
Triodontophorus
dientes en la base de la cavidad bucal hace que
tenuicollis, Triodontophorus minor, Cylicostephanus
Triodontophorus spp. parezca un parásito chupador de
longibursatum,
Cilicocyclus
Cylicodontophorus
sangre. Sin embargo, los acúmulos de gusanos
bicoronatus,
Poteriostomum
imparidentatum,
Triodontophorus tenuicollis provocan ulceras localizadas
Habronema
Strongylus
Strongylus
muscae,
equinus,
edentatus,
Strongylus
Gyalocephalus
brevicauda,
sp.,
Poteriostomumm ratzii, Setaria equina. Y entre los
en la mucosa del colon (Bowman et al., 2004).
Platelmintos que parasitan caballos en Chile son: Anoplocephala
perfoliata,
Anoplocephala
Entre las enfermedades parasitarias del caballo la
magna,
fasciolasis tiene una importancia no menor en esta
Paranoplocephala mamillana, Echinococcus granulosus y
especie, la cual es descrita por primera vez hace más de
Fasciola hepatica.
45 años en Chile (Ruminot, 2015). La fasciolasis es una Según Beyer (2014), entre las parasitosis más comunes
zoonosis
que afectan el ciego e intestino grueso del equino, están
hermafrodita Fasciola hepatica; afecta principalmente al
las causadas por nemátodos del orden Strongylida
ganado ovino, bovino, caprino, porcino, equino, otros
(grandes y pequeños estrongilos). En los equinos, los
animales herbívoros y accidentalmente al hombre
llamados grandes estrongilos (Strongylus equinus,
(Carrada-Bravo, 2007). La infección hepática por F.
Strongylus edentatus y Strongylus vulgaris, además de
hepatica en los caballos puede estar sub-reportada en el
los géneros Triodontophorus y Oesophagodontus),
método rápido y confiable de diagnóstico. El diagnóstico
pertenecientes a
definitivo se basa en el recuento de huevos fecales (FEC),
la
subfamilia
Strongylinae,
los
parasitaria
más
detectando sólo el 60-70% de las infecciones por
conocidos como Ciatostomas, y Parascaris equorum, son
parásitos, otra forma de detección es post mortem
considerados
(Quigley et al., 2016).
actualmente
los
parásitos
más
importantes. En las infestaciones por Ciatostomas se
23
sensibilidad
tremátodo
especies de
Cyathostominae,
baja
el
pero
subfamilia
una
por
pequeños estrongilos representados por al menos 51 la
tienen
causada
diagnóstica,
El objetivo de esta investigación es determinar la
z = nivel de confianza del estudio (95%).
prevalencia
p = prevalencia esperada (10,4%).
de
nemátodos
gastrointestinales
y
B = precisión o error admitido (10%).
tremátodos en caballos residentes de la Reserva
Siendo,
Nacional Isla Mocha, Tirúa (Chile).
n = 36. Material y Método
z = 1.96. p = 0.104.
La población de estudio fueron caballos de la Isla Mocha,
B = 0.1.
provincia de Arauco (Chile) durante el mes de enero de 2018. Este territorio insular se encuentra situado a 34,2
Las
kilómetros de la costa de Tirúa, mar adentro en el
muestras
de
heces
se
obtuvieron
previa
inmovilización manual de los caballos en su pesebrera o
Pacífico, perteneciente a la Comuna de Lebu, en la
lugar de manejo, asistido por personal capacitado.
Región del Biobío, y se ubica a 38º23´06" latitud sur y
Luego, el autor, provisto de guantes de látex lubricados
73º52´00" longitud oeste.
con vaselina procedió a la extracción manual de una
El criterio de inclusión fue que los caballos fueran
muestra fecal del recto. Las muestras fueron envasadas
residentes en la Isla Mocha por más de tres meses, y que
en frascos estériles con tapa rosca que contenían
los propietarios facilitaran voluntariamente para realizar
solución PAF. Las muestras recolectadas fueron
el estudio. Se excluyeron aquellos caballos que estaban
almacenadas en una nevera con gel refrigerante para su
recién llegados (menores a 3 meses) al territorio insular,
envío al laboratorio. Cada muestra coprológica fue
así como aquellos que, por razones de seguridad de los
debidamente identificada con los siguientes datos:
operarios y del propio animal, no fue posible realizar una
nombre/número del animal, sexo y edad (la cual fue
inmovilización segura para la toma de muestra.
determinada por cronometría dentaria).
El tamaño muestral se determinó mediante la fórmula
Las muestras coprológicas fueron procesadas para
para la estimación de un parámetro de una variable
pesquisa e identificación de nemátodos y tremátodos en
cualitativa en una población infinita. El tamaño maestral
el Laboratorio Clínico de la Facultad de Medicina
se determinó con un nivel de confianza del 95%, un
Veterinaria de la Universidad de San Sebastián,
margen de error del 10% y una prevalencia esperada de
Concepción.
10,4% reportada por la literatura (Muñoz et al., 2008),
La presencia de huevos de nemátodos y tremátodos fue
de acuerdo a la siguiente formula:
determinada por la técnica de Telemann modificada y la técnica de flotación con sulfato de zinc. La placa con la muestra fue leída por el autor, con la supervisión de un tecnólogo médico calificado.
Donde,
Todas las variables estudiadas se consolidaron en una
n = tamaño de la muestra (36).
tabla Excel®.
24
Las relaciones de presencia/ausencia de huevos de
En la tabla IV, se observa la prevalencia de huevos de
nemátodos y tremátodos con las variables cualitativas:
nemátodos en heces de caballos < 4 años y ≥ 4 años de
sexo, edad, se evaluaron utilizando la prueba Z de
edad, con un 83,3 % y un 73,3 % de prevalencia de
comparación de proporciones
huevos de nemátodos respectivamente. Respecto a la
Para efectos del estudio, se consideraron ambos sexos:
prevalencia de huevos de tremátodos ésta resulto igual
machos (que incluyeron los machos castrados) y
a cero para ambos grupos de edad.
hembras. Así mismo, se establecieron dos grupos etarios
No se observó diferencia estadísticamente significativa
según edad: jóvenes (< 4 años de edad) y adultos (>4
en la prevalencia de nemátodos en caballos menores de
años de edad).
4 años y desde 4 años (p> 0,05).
En el estudio se incluyó toda la población muestral
En este estudio todos los huevos de nemátodos
independiente de la edad, talla, sexo, y no se discriminó
observados correspondieron a huevos del genero
sobre la presencia de cojeras y/o condición músculo-
Strongylus.
esquelética relacionada con éstas. Discusión Resultados El presente estudio de prevalencia de huevos de En la tabla I, se observa que, de un total de 36 muestras
nemátodos en una población de caballos que habitan un
fecales resultaron positivas a huevos de nemátodos 28
territorio insular como Isla Mocha (Chile), determinó un
de ellas, lo cual equivale a una prevalencia del 77,7% de
valor menor a la esperado (77,8), comparado con otras
presencia de nemátodos.
poblaciones. La prevalencia esperada fue inferior a la
En la tabla II, se observa que de un total de 36 muestras
obtenida por Schwerter (2012), en un estudio realizado
fecales, ninguna resultó
en equinos de tiro urbano de la ciudad de Valdivia, que
positiva a huevos de
comprobó una prevalencia de nemátodos del 97,3%.
tremátodos, lo que equivale a una prevalencia del 0% en la prevalencia de huevos de tremátodos.
Sin embargo, a pesar de la distancia geográfica, la
La tabla III, muestra la prevalencia de huevos de
prevalencia de huevos de nemátodos obtenida en el
parásitos en caballos según relación sexo, machos y
presente trabajo es compartida por poblaciones de
hembras, con un 80% y un 81,2% respectivamente. En
caballos de otras latitudes. Cifras similares de
cuanto a la prevalencia de huevos de tremátodos ésta
prevalencia son reportadas por Seyoum et al., (2015), en
resultó igual a cero (0%), tanto en machos como en
un estudio con equinos en Shashamane (Etiopía), dónde
hembras.
se demuestra valores de 73,4%; dónde es comparable la
No se observó diferencia estadísticamente significativa
pluviometría anual y el tipo de suelo, según sectores de
en la prevalencia de nemátodos según sexo de los
la isla.
caballos (p> 0,05).
25
Las parasitosis causadas por nemátodos del orden
edad sólo influye en la eliminación de huevos de
Strongylida, son una de las más comúnmente
ascáridos (Francisco, 2010)
encontradas en equinos (Irurzun, 2014). Los huevos tipo En relación a la prevalencia de huevos de nemátodos con
estrongílidos, los únicos identificados en nuestro
la variable sexo, nuestros resultados demuestran que no
estudio, coinciden con lo reportado como único huevo de
nemátodos
encontrado
en
otras
hay
parasitosis
una
diferencia
estadísticamente
significativa
(p>0,05) entre machos y hembras. Este hallazgo, coincide
investigadas por otros autores (Flanagan et al., 2013;
con un estudio realizado en caballos salvajes en el estado
Kuzmina et al., 2017).
Apure (Venezuela) por Pérez et al., (2010), quienes Por otra parte, otros nemátodos como el Parascaris
determinan una prevalencia de 80,95% y 85,71% en
equorum son parásitos comúnmente diagnósticados en
machos y hembras respectivamente.
potrillos y caballos de 4 años de edad (Kuzmina et al., Contrariamente, el análisis estadístico de los resultados
2017). Sin embargo, en nuestro estudio, que también
parasitológicos de un estudio realizado en caballos
tenía individuos de estas edades, no se encontró
primitivos polacos realizado por Slivinska et al. (2016),
presencia de huevos de este nemátodo. En futuros
reveló que el nivel de infección con estrongilidos fue
estudios, será interesante verificar si la infección por P.
significativamente mayor en hembras que en machos; no
equorum aparece en los potros nacidos en esta reserva
obstante, al incluir la estrategia de manejo como un
insular, o si realmente esta especie permanece ausente
segundo factor, la dependencia de la infección de
en esta población de caballos.
Strongylus sp. respecto del sexo de los caballos se
Así mismo, en un trabajo anterior realizado sobre
transformó en no significativa (p> 0,05).
prevalencia de endoparitosis en la Isla Mocha, determino
Por lo anterior, al tomar en cuenta valores extrínsecos
un 50,6% de presencia de Oxyuris equi, lo que indicaría
como la estrategia de manejo, se ha demostrado que
un aporte importante a la prevalencia general de
influye en la prevalencia parasitaria en caballos.
nemátodos en caballos de este territorio insular (Follert,
Francisco et al., (2009); comprobaron que los animales
2010).
que reciben menores cuidados y que se mantienen en
En el presente estudio, al separar los caballos por grupos
condiciones de silvopastoreo en forma continua,
de edad no se identificó una diferencia significativa
tuvieron valores más elevados de infección por
(p>0,05) en la prevalencia de nemátodos de la familia
nemátodos. Sin embargo, en équidos mantenidos en
Strongylidae, coincidentemente con lo reportado con
praderas
otros autores (Francisco, 2010; Pérez et al., 2010;
parasitarias elevadas, sobre todo de eliminación de
Slivinska et al., 2016). Este hecho también ha sido
huevos de estrongilidos y ascáridos. En un estudio de
observado en otros estudios y ha sido atribuido a que la
Kornass et al., (2004), encontraron prevalencias de
también
se
encontraron
prevalencias
parasitación por estrongilidos más altas (74%) en
26
caballos mantenidos en el pasto de forma continuada,
Lo mismo ocurre con el método de Telemann
que en aquellos que se mantenían siempre en la
modificado, el cual es una técnica de sedimentación
pesebrera, sin ingerir hierba verde.
(Moran y Vergara, 2012). En el diagnóstico, este examen coprológico es un método sencillo y de bajo costo, sin
El presente estudio demostró una prevalencia esperada
embargo, esta técnica no siempre logra pesquisar la
de huevos de tremátodos inferior a la obtenida por
infección y a veces requiere de repetidos exámenes para
Muñoz et al., (2008), en un estudio realizado en equinos
verificar la presencia de huevos, lo que sucede cuando la
fina sangre de carrera confinados de un hipódromo
carga parasitaria es muy baja o cuando la eliminación de
(Concepción, Chile), comprobándose una prevalencia de
huevos suele ser intermitente, como se ha descrito en la
10,41%. Sin embargo, años más tarde en el mismo lugar
especie equina (Aguilera, 2007).
el estudio de Ruminot (2015) demostró una prevalencia nula de tremátodos, lo cual coincide con los resultados
A diferencia de las técnicas de diagnóstico empleadas en
del presente estudio.
este estudio, se describen métodos inmunológicos de alta
Las prevalencias de huevos de tremátodos obtenida en
sensibilidad
y
especificidad
que
detectan
anticuerpos parasitarios (Aguilera, 2007; Gorman et al.,
este trabajo también son compartidas por otras
1994). Entre los métodos inmunológicos la prueba de
poblaciones de caballos de otras regiones. Un trabajo
ELISA ha sido usada en diversos estudios de parasitosis,
realizado en caballos en el Noroeste de España, en un
ofreciendo una adecuada sensibilidad y especificidad
área con clima oceánico, se observaron huevos de
particularmente en el diagnóstico de la fasciolasis
nemátodos gastrointestinales y cestodos en las heces de
(Gorman et al., 1998; Mezoet al., 2004; Aguilera, 2007).
los caballos, pero no obtuvieron huevos de tremátodos (Francisco et al., 2009).
Además, con el fin de optimizar los resultados se han realizado estudios tendientes a identificar y seleccionar
En otro contexto, las técnicas utilizadas en el presente
fracciones antigénicas de F. hepática relevantes en el
estudio para llevar acabo el examen coprológico de
diagnóstico de la fasciolasis animal en nuestro país
huevos de nemátodos y tremátodos, son las que con
(Aguilera, 2007).
habitualidad ocupan otros estudios reportados. La técnica de flotación con sulfato de zinc está descrita para
En un estudio realizado por Quigley et al., (2016) donde
tremátodos, ya que permite la flotación de huevos
se utilizó la prueba de ELISA usando un CL1
pesados como de Fasciola hepática, por ejemplo
recombinante, dio como resultado una prevalencia de
(Martínez et al., 1999). Sin embargo, cuando este
9,5% del tremátodos hepáticos; y al revisar las variables
tremátodo se encuentra migrando por el parénquima
grupo de edad, sexo, e inclusos raza, no hubo relación
hepático, o cuando recién se ha alojado en los conductos
entre estas. En el presente estudio no fue posible hacer
biliares, aún inmaduro y sin ovoposición, el método
una relación de prevalencia de tremátodos con las
podría generar falsos negativos (Gorman et al., 1994).
27
variables sexo y edad, ya que la prevalencia de este parásito resultó igual a 0. De acuerdo a información de la Autoridad Sanitaria Animal (SAG, 2018) de nuestro país, no existe una planta faenadora autorizada en la isla Mocha ni en la comuna de Tirúa desde dónde se podría realizar estudios de prevalencia de parásitos gastrointestinales en caballos de Isla Mocha. Tampoco se encontraron trabajos de personas naturales que estudiaran la prevalencia de nemátodos y tremátodos en equinos en otros territorios insulares similares en nuestro país. Por lo cual, sería interesante que futuras investigaciones puedan ampliar este trabajo (por ejemplo, con necropsias parasitarias) con el objeto de comprender mejor este parasitismo en caballos de territorios insulares, en la actualidad, pobremente entendido.
28
Tablas e ilustraciones Tabla I. Prevalencia parasitaria de huevos de nemátodos en heces de caballos de Isla Mocha (Chile).
Muestras de heces n=36
nº muestras positivas (%)
nº muestras negativas (%)
28 (77,7)
8 (22,2)
Tabla II. Prevalencia parasitaria de huevos de tremátodos en muestras fecales de caballos de Isla Mocha (Chile).
Muestras de heces n=36
Nº muestras positivas (%)
Nº muestras negativas (%)
0 (0)
36 (100)
29
Tabla III. Prevalencia de tremátodos y nemátodos en caballos de Isla Mocha según sexo del paciente (macho/hembra). Huevos de nemátodos
Huevos de tremátodos
Positivo
Negativo
Positivo
Negativo
MACHOS
16 (80%)
4 (20%)
0 (%)
20 (100%)
HEMBRAS
13 (81,2%)
3 (18,7%)
0 (%)
16 (100%)
Tabla IV. Prevalencia de huevos de tremátodos y nemátodos en caballos de Isla Mocha según su edad (<4años/≥4años). Huevos de nemátodos
Huevos de tremátodos
Positivo
Negativo
Positivo
Negativo
<4 años
5 (83,3%)
1 (16,6%)
0 (%)
6 (100%)
≥4 años
22 (73,3%)
8 (26,6%)
0 (%)
30 (100%)
30
Referencias bibliográficas Aguilera, M. (2011). Efectos del albendazol e ivermectina frente a nemátodos del equino en condiciones de campo. (Tesis Medicina Veterinaria). Universidad de Granma; Cuba.
Follert, R. (2010). Determinación de Prevalencia de Oxyuris Equi en Equinos Provenientes de la Isla Mocha, Provincia de Arauco, Chile. (Tesis presentada como parte de los requisitos para optar al Título de Médico Veterinario). Universidad San Sebastián, Concepción.
Aguilera, N. (2007). Evaluación de fracciones antigénicas, enzimáticas de Fasciola hepática en el diagnóstico inmunológico de fasciolosis en ovinos, equinos y porcinos. (Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario). Universidad de Chile, Santiago.
Francisco, M., Arias, F., Cortiñas, F., Francisco, R., Mochales, E., Dacal, V.... Paz-Silva, A. (2009) Intrinsic Factors Influencing the Infection by Helminth Parasites in Horses under an Oceanic Climate Area (NW Spain).Journal of parasitology reseach, doi: org/10.1155/2009/616173.
Alcaino, H. y Gorman, T. (1999). Parásitos de los animales domésticos en Chile. Parasitología al Día, 23(1-2), 33-41. doi: org/10.4067/S071607201999000100006.
Francisco, I. (2010). Epidemiología y control de las principales parasitismos del caballo gallego. (Tesis Doctoral para optar al título de Doctor en Veterinaria). Universidad de Santiago de Compostela, Lugo.
Barriga,O. (2002). Las enfermedades parasitarias en los animales domésticos en la América Latina. Santiago: Editorial Germinal.
Gorman, T., Concha, V., Fredes, F., y Alcaino, H. (1994). Detection of antigens with diagnostic potential in animals with F. hepatica infections. Parasitología al Día, 18, 26-32
Beyer, G. (2014). Comparación de la eficacia de eprinomectina y doramectina sobre la ovoposición de nemátodos gastrointestinales en un criadero de equinos de la decima región. (Memoria de titulo para optar al titulo de Medico Veterinario). Universidad San Sebastián, Puerto Montt.
Gorman, T., Sanchez, R., Fredes, F., Alcaino, H. (1998). Inmunodiagnóstico de fasciolosis bovina mediante ELISA y Western Blot. Parasitol. al Día, 22(1-2), 16-22. Recuperado de https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?pid=S 071607201998000100003&script=sci_arttext.
Bowman, D., Lynn, R., y Eberhard, M. (2004). Georgis Parasitología para veterinarios. (8ªed). Madrid: Elsevier.
Irurzun, E. (2014). Identificación de estróngilos en 3 explotaciones de equinos en pastoreo del Valle de Arakil. (Tesis para optar al título de Ingeniero agrónomo). Universidad Pública de Navarra, España.
Carrada-Bravo, T. (2007). Fasciola hepática: Ciclo biológico y potencial biótico. Rev Mex Patol Clin., 54(1), 21-27. CONAF. (1998) Plan de manejo Reserva Nacional Isla Mocha. Documento de trabajo 277. Concepción: CONAF.
Kornas, S., Nowosad, B., Skalska, M., y Bołoz, T. (2004). Intestinal parasites infection of horses from riding clubs in Kraków area. Wiad Parazytol, 50(2), 323‐327.
Flanagan, K., Morton, J., y Sandeman, R. (2013). Prevalence of infestation with gastrointestinal nematodes in Pony Club horses in Victoria. Australian Veterinary Journal, 91(6), 241-245.
Kuzmina, T., Zvegintsova, N., y Zharkikh. T. (2017). Gastrointestinal parasite community in a new population of the przewalski’s horse (Equus ferus przewalskii) in the Orenburg State reserve, Russia. Vestnik Zoologii,
31
51(3), 243–250. doi: 10.1515/vzoo-20170030.
assessment of a serological test for diagnosis of equine fasciolosis. Equine Veterinary Journal, 49(2), 183-188. doi: 10.1111/evj.12577.
Martínez, A., Muro, A., y Simón, F. (1999). Diagnóstico de las parasitosis. En M. Cordero del Campillo, F. Rojo Vázquez, Parasitología veterinaria. (pp. 158-177). Madrid: McGraw-Hill.
Ruminot, N. (2015). Prevalencia de Fasiola hepática determinada por examen coproparasitario de sedimentación en caballos fina sangre de carrera del Club Hípico de Concepción, Concepción (Chile). (Memoria de título para optar al título de Médico Veterinario). Universidad San Sebastián, Concepción.
Mezo, M., González-Warleta, M.,Carro, C., y Ubeira, F. (2004). An ultrasensitive capture elisa for detection of fasciola hepatica coproantigens in sheep and cattle using a new monoclonal antibody (mm3). Journal of Parasitology, 90(4), 845-852. Recuperado de https://doi.org/10.1645/GE-192R.
Salas, J., Mencho, J., Guerra. Y., y Mencho, J. (2014). Prevalencia de nemátodos intestinales y eficacia de Labiomec® en caballos de Camagüey, Cuba. Rev. Salud Anim., 36(3), 152-158.
Morán, C., y Vergara, D. (2012). Examen parasitológico seriado de deposiciones (epsd). Recuperado de https://es.slideshare.net/Fletcherxz/exm en-parasitolgico-seriado-dedeposiciones-epsd.
Schwerter, X. (2012). Descripción de la condición parasitaria y del manejo en equinos de tiro urbano de la ciudad de Valdivia. (Memoria de Título presentada como parte de los requisitos para optar al título de Médico Veterinario). Universidad Austral de Chile, Valdivia.
Muñoz, L., Rubilar, L. Zamora, D., Sepúlveda, O., Rehhof, C., y Ortiz, R. (2008). Fasciolosis en equinos fina sangre de carrera del Club Hípico Concepción, Chile. Parasitol Latinoam, 63(1,2,3,4), 88 – 91.
Servicio Agrícola y Ganadero. (2018). Declaración Existencia Animal (DEA 2016/2017). Santiago: Servicio Agrícola y Ganadero.
Pérez, A., García, M., Quijada, J., Aguirre, A., Cartañá, M., y Armas, S. (2010). Strongyles parasitism in wild Venezuelan horses from hato el frío, State of Apure, Venezuela: A preliminary study. Revista Científica, 20(1), 32-36. Recuperado de http://www.scielo.org.ve/scielo.php?scri pt=sci_arttext&pid=S079822592010000100005&lng=en&tlng=en.
Seyoum, Z., Tesfaye, M., Derso, S. (2015). Prevalence, intensity and risk factors of infestation with major gastrointestinal nematodes in equines in and around Shashemane, Southern Ethiopia. Trop Anim Health Prod, 47(8), 1515-1521. doi:10.1007/s11250-015-0893-5. Slivinska, K., Kharchenko, V., Wróblewski, Z., Gawor, J., y Kuzmina, T. (2016). Parasitological survey of Polish primitive horses (Equus caballus gmelini Ant.): influence of age, sex and management strategies on the parasite community. Helminthologia, 53(3), 233 – 242. Recuperado de 10.1515/helmin-20160023.
Pilania, P., Manohar, G., y Bhan, A. (2015). Prevalence of strongyle type infections in horses of animal fairs in rajasthan. Veterinary Practitioner, 16(2), 222-224. Quigley, A., Sekiya, S., Egan, S., Wolfe, C., Negredo, C., y Mulcahy, G. (2016). Prevalence of liver fluke infection in Irish horses and
32
Rev. Med. Vet. Investig. 2(1):33-40, 2019 Artículo original
Recibido: 16-01-2019 Aceptado: 5-04-2019
Relación de actividad sérica de glutamato deshidrogenasa y transaminasas en vacas de carne clínicamente sanas de la comuna de Coelemu, Región del Ñuble. Carolina Andrea Velásquez-Valdenegro 1 y Marcos Pedreros1 1
Facultad de Medicina Veterinaria. Universidad San Sebastián, Concepción, Chile.
Carolina Andrea Velázquez-Valdenegro: carovelasquezvaldenegro@gmail.com Resumen La enzimología clínica es una herramienta de gran utilidad para la determinación de patologías en la medicina veterinaria. Parámetros anormales respecto a valores de referencia enzimáticos pueden orientar a la detección de daño en distintos tejidos. Para la detección de daño hepático se usa comúnmente la determinación de enzimas ALT y AST. En el presente estudio se buscó correlacionar los valores de GDH respecto a los valores de ALT y AST en un grupo de 30 vacas de carne clínicamente sanas. Los resultados arrojaron que no hay relación entre transaminasas respecto a GDH. Palabras clave: Daño hepático, bovinos de carne, enzimas séricas, hígado, bovinos.
Abstract Clinical enzymology is a very useful tool for the determination of pathologies in veterinary medicine. Abnormal parameters to the enzymatic reference values can guide the detection of damage in different tissue tissues. For the detection of liver damage, the determination of ALT and AST enzymes is commonly used. In the present study, we sought to correlate GDH values with respect to ALT and AST values in a group of 30 clinically healthy beef cows. The results showed that there is no relationship between transaminases with respect to GDH. Key words: hepatic marker, beef cattle, seric enzymes, liver, cattle.
diferenciación de alteraciones o enfermedades que se
Introducción
presentan en los distintos órganos, como hígado, riñón,
El médico veterinario dispone de diversas herramientas
corazón, músculos y páncreas. Cada órgano posee un
para la determinación de patologías que afectan a
típico patrón enzimático (Noro y Wittwer , 2004).
distintos órganos de los animales. Entre estas, la enzimología clínica puede determinar la actividad
El hígado es un órgano de vital importancia que cumple
plasmática de enzimas que demuestren daño en algún
con funciones como gluconeogénesis, ureagenesis,
tejido. La determinación de la actividad enzimática en
detoxificación y metabolismo de lípidos. El examen
suero o plasma es de utilidad para el diagnóstico y
33
directo del hígado no es realizable en rumiantes, siendo
propósitos diagnósticos (Carobbio et al., 2008; Aulbach y
necesario recurrir a pruebas complementarias para
Amuzie., 2016).
detectar lesiones o disfunciones discretas, cuya El
magnitud no culmina en una alteración clínica. Las
las
enzimas
gamma
glutamil
son indicativos de daño hepático, hepatocelular o
en el epitelio de los canalículos biliares, de modo que su
canalicular. Se describe una mayor asociación de GDH
lesión condiciona un aumento en la circulación
con AST ya que ambas enzimas son hepatocelulares, GGT
sanguínea (Noro et al., 2013). Entre las enzimas hígado-
en cambio es canalicular (Noro et al., 2013). La enzima
específicas se incluyen Alanino-aminotransferasa (ALT),
GDH es considerada la prueba de oro para el diagnóstico
anteriormente conocida como transaminasa glutámico
de daño hepático, por su ubicación intra-mitocondrial en
pirúvico (GPT). Ésta cataliza la transaminación reversible
la zona centrolobulillar del hígado, también conocida
de L-alanina y 2-oxoglutarato a piruvato y L-glutamato.
como la zona 3, y está aumentada en procesos tóxicos o
La actividad ALT se encuentra en varios órganos del
agudos. La GDH se incrementa en plasma antes que la
magnitud de la actividad varía
GGT, y retorna precozmente a sus valores fisiológicos por
dramáticamente entre las especies animales. Otra
su corta vida media, es por esto que no se observa
enzima de importancia es la aspartato transaminasa
incrementada en procesos hepatológicos crónicos (Noro
(AST) anteriormente conocida como Transaminasa Glutámico Oxaloacética (GOT) que
de
transpeptidasa (GGT), GDH y AST en el perfil bioquímico
enzimas hepáticas están presentes en los hepatocitos o
cuerpo, pero la
aumento
et al., 2013).
cataliza la
transaminación de L-aspartato y 2-oxoglutarato a
El incremento de GDH se manifiesta en enfermedades
oxaloacetato y glutamato. La enzima AST aumenta luego
producidas por agentes hepatotóxicos, no así en
del daño de miocitos e indica que ha ocurrido daño en
procesos inflamatorios como hepatitis o cirrosis, y se
músculo o hígado, pero se requieren más pruebas para
considera un buen indicador de fasciolasis temprana ya
identificar donde se produjo la injuria. La glutamato
que se describe su aumento dos semanas posterior a la
deshidrogenasa (GDH) es una enzima mitocondrial que
infestación por el parásito, no así la GGT que aumenta a
cataliza la eliminación de hidrógeno a partir de L-
partir de la sexta semana (Noro y Wittwer, 2004). La
glutamato. El hígado tiene lejos la mayor concentración
aparición de la GDH es indicativo de fasciolasis aguda, y
de actividad de GDH. También se describe como una
la GGT es indicativa de fasciolasis subaguda a crónica
enzima mitocondrial que convierte de forma reversible
(Perez et al., 2017).
el glutamato en alfacetoglutarato como parte del ciclo de Un importante trastorno metabólico en ganado vacuno
la urea (Aulbach y Amuzie, 2016). En todas las especies
de alta producción
el aumento de la actividad sérica de GDH se considera
es la lipidosis hepática, que
compromete el rendimiento de los animales y por lo
hígado específico, sin embargo, ha habido poco o ningún
tanto provoca grandes pérdidas económicas en todo el
interés en la investigación de isoenzimas GDH para
mundo. Actualmente e independientemente de los
34
exámenes clínicos que se hacen de rutina, el diagnóstico de hígado graso sólo se hace a través de biopsia. Por esto se plantea la hipótesis de que la enfermedad de hígado graso puede ir acompañado de un perfil bioquímico alterado de los metabolitos en sangre de los animales afectados relacionados
(Imhasly con
deshidrogenasa,
et el
al., hígado
2014). como
Donde,
Parámetros
N = 40 (Total de la población).
succinato
Za² = 1.96 (seguridad es del 95%).
GDH, GGT y bilirrubina no son
p = proporción esperada (23% = 0.23).
significativos, a pesar de que GDH si se muestra elevado
q = 1 – p (en este caso 1-0.05 = 0.95).
en algunos casos de bovinos con hígado graso. En dos
d = precisión (en este caso un 5%= 0.05).
estudios no se pudo discriminar la actividad de GDH entre daño hepático e hígado graso. Si se detectó mayor
Se seleccionaron 30 vacas de carne clínicamente sanas,
actividad de GDH en hígado graso, pero la diferencia fue
identificadas con sistema DIIO y un peso promedio de
poco relevante. También existe un factor de confusión ya
550 kg. La selección de los bovinos se hizo mediante un
que los niveles GDH se incrementan en todas las vacas
muestreo al azar.
postparto, 2 a 6 semanas después del parto (Gerspach et
Se desinfectó profundamente la base de la cola con
al., 2016). El objetivo de esta investigación fue
algodón y alcohol 95%, utilizando como barrera de
determinar si existe relación entre el valor de GDH, ALT
protección guantes estériles de látex y mascarilla. A
y AST en vacas de carne clínicamente sanas en un predio
partir de la vena coccígea se obtuvieron de 10 mL de
de la comuna de Coelemu, Región de Ñuble.
sangre (Figura 1),
que se depositaron en tubos
‘Vacutainer’ sin anticoagulante y fueron rotulados con el
Material y Método
mismo número de identificación animal. Se realizó un estudio de tipo observacional transversal
Las muestras se mantuvieron a 4°C y luego fueron
en la comuna de Coelemu, ubicada al noroeste de
llevadas al Laboratorio Clínico de la Facultad de
Chillán, Provincia del Itata, Región de Ñuble.
Medicina Veterinaria de la Universidad San Sebastián
El tamaño muestreal se calculó utilizando la fórmula
sede Concepción, donde se centrifugaron a 3000rpm,
para estimar un parámetro en una población finita. Se
para la obtención de suero libre de hemólisis.
utilizó 4% de precisión, nivel de seguridad de 95%,
La determinación de actividad de ALT, AST y GDH se
proporción esperada de 5%, de una población total de
realizó mediante análisis fotométrico cinético en equipo
40 animales, con lo que se obtuvo un n = 30.
Microlab 200®. A una longitud de onda de 340 nm. Los resultados finales se expresaron en UI/L. Los datos fueron llevados a una planilla Excel donde se ordenaron y clasificaron sus niveles de GDH, ALT y AST.
35
Luego fueron evaluados por medio del programa
posibilidades de encontrar actividades enzimáticas
computacional SPSS V 21.0. El análisis estadístico fue
elevadas
expresado por Chi cuadrado de Pearson, se utilizaron
hepatocelular o canalicular.
asociadas
a
enfermedad
hepática,
para modelar la relación entre la predicción correcta / Un estudio donde se relacionaron biomarcadores con
incorrecta de los niveles de GDH y los niveles de AST y
lipidosis hepática se mencionan actividad sérica de
ALT. Teniendo dos variables, una dependiente que
enzimas hepáticas con intervalos de referencia para ALT
expresó los resultados de los niveles de AST y ALT y una
de 57 – 103(U/L) y GDH 4-18,2(U/L) (Imhalsy et al., 2014).
independiente que expresó los niveles de GDH. No se
Esto es coincidente con lo demostrado en una
pudo aplicar la determinación de sensibilidad y
investigación acerca de perfiles bioquímicos en ganado
especificidad, ni el coeficiente Kappa de Cohen ya que
bovino (Gerspach et al. 2016) donde se mencionan
todos los valores obtenidos se encontraron dentro de
actividades para ALT y GDH de 82,3 ± 23,7 (U/L) y 50,3 ±
los rangos de referencia.
34,70 (U/L), respectivamente. Xiliang et al. (2017) trabajó comparando un grupo de vacas que cursaban con cetosis Resultados
y otro grupo control de vacas sanas, en el cual se
En la tabla I se muestran las medias obtenidas de
determinó la media de actividad enzimática para
actividad sérica, obteniendo resultados de 14(UI/L) para
animales sanos de 85(U/L) para ALT, 22(U/L) para AST y
la enzima GDH, 81(UI/L) para ALT y 42 (UI/L) para AST.
18(U/L) para GDH.
En la figura 2 se demuestra que no hay relación entre los
En contraposición, en un estudio de valoración de
niveles de ALT con GDH, ya que la bondad de ajuste a la
enzimas hepáticas en bovinos (Noro et al., 2013) en el
normal es 0,97 (p>0,05).
que el universo de animales estudiados fue de 1566
En la figura 3 se demuestra que no hay relación entre los
vacas sí se pudo encontrar animales enfermos,
niveles de AST con GDH ya que la bondad de ajuste a la
detectándose actividades séricas de las enzimas ALT y
normal es 0,085 (p>0,05).
GDH fuera de su intervalo de referencia, esto relacionado al alto número de animales estudiados en aquella investigación. Esto puede asociarse a patologías como
Discusión
hígado graso bovino, donde actividades de ALT se En el presente estudio, la actividad sérica de ALT, AST en
encuentran
vacas clínicamente sanas no mostraron variaciones
independiente del estadío de la patología. También
respeto a la enzima GDH, ubicándose dentro de los
cuadros de cetosis bovina
intervalos de referencia. Un universo limitado de un
significativamente altas de ALT, AST y GDH, pudiendo
n=30, características clínicas sanas de los animales,
potenciar una correlación entre estas enzimas (Xiliang et
supervisión y control permanente por un médico
al., 2017); o en el caso de enfermedades parasitarias
veterinario, además de la dieta controlada y escasas
donde las formas inmaduras y maduras de Fasciola
36
elevadas
(Gerspach
et
al.,
2016)
presentan actividades
hepatica generan daños en el hígado (Pérez et al., 2017) promoviéndose la liberación de GDH al torrente sanguíneo y así puede ser detectado en la enzimología clínica, ya que GDH y GGT son indicadoras de patología aguda y subaguda del hígado (Cardozo, 2003). Al encontrarse la actividad de las enzimas estudiadas dentro de intervalos de referencia, no se pudo realizar la determinación de sensibilidad y especificidad, tampoco el kappa de Cohen ya que es necesario obtener por lo menos un parámetro alterado para realizar estas pruebas de correlación. Al aplicar la prueba de bondad de ajuste a la normal para ALT con GDH y AST con GDH por separado no se determinó relación con un p>0,05. Noro et al., (2013) encontró baja concordancia entre ALT y GDH, ya que ALT además de ser hepática tiene isoformas citosólicas y mitocondriales en otros órganos, como células musculares esqueléticas y cardiacas, incluso en eritrocitos y por eso no se puede determinar que sea especifica de hígado, esto concuerda con el resultado obtenido en el presente estudio, ya que no se determinó relación entre ellas.
37
Tablas e ilustraciones Tabla I. Valores séricos de enzimas hepáticas en hembras bovinas de carne .
Figura 1. Extracción de muestras de sangre partir de la vena coccígea.
38
Figura 2. Relación entre valores séricos en (UI/L) de GDH respecto de ALT para 30 hembras bovinas en la comuna de Coelemu.
Figura 3. Relación entre valores séricos en (UI/L) de GDH respecto de AST para 30 hembras bovinas en la comuna de Coelemu.
39
Referencias bibliográficas
Clinical Biochemistry of Domestic Animals. (pp.351-358). Washington: Elsevier Inc.
Aulbach, A. y Amuzie, C. (2016). Biomarkers in Nonclinical Drug Development. En A. S. Faqi (ed), A Comprehensive Guide to Toxicology in Nonclinical Drug Development (pp.448-453). EEUU: Elsevier Inc.
Noro, M., Cid, P., Wuagemann, F., Arnes, V. y Wittwer, F. (2013). Valoración diagnóstica de enzimas hepáticas en perfiles bioquímicos sanguíneos de vacas lecheras. Revista MVZ Cordoba, 18(2), 3474-3479.
Cardozo, H. (2003). Diagnóstico de Fasciola hepática. Recuperado de www.produccion-animal.com.ar
Noro, M. y Wittwer, F. (2004). Enzimas hepáticas de utilidad diagnóstica en la clínica de los animales domésticos. VETERMAS, 13(6),6-10.
Carobbio, S., Frigerio, F., Rubi, B., Vetterli, L., Bloksgaard, M., Gjinovci, A… Maechler, P. (2009). Deletion of Glutamate Dehydrogenase in ß-Cells Abolishes Part of the Insulin Secretory Response Not Required for Glucose Homeostasis. The Journal of Biological Chemistry 284(2), 921-929. doi:10.1074/jbc.M806295200.
Pérez, M., Lautaro, N., Cabral, L. y Álvarez, L. (2017). Asociación entre Fasciola hepatica y Clostridium haemolyticum como causal de mortandad en bovinos de carne del sistema serrano de Ventania.(Tesis de memoria de título para optar al grado de veterinario). Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires, Tandil, Argentina.
Gerspach, C.,Rueten, M. y Riond, B. (2016). Investigation of coagulation and serum biochemistry profiles in dairy cattle with different degrees of fatty liver. Zurich Open Repository and Archive. 158(12), 811-816. doi:10.17236/sat00096.
Xiliang, D., Liang, C., Dan, H., Zhicheng, P., Chenxu, Z., Yuming, Z... y Guowen, L. (2017). Elevated Apoptosis in the Liver of Dairy Cows with Ketosis. Cell Physiol Biochem, 43(2), 568-578. doi:10.1159/0004-80529.
Hoffmann, W. y Solter, P. (2008). Diagnostic Enzymology of Domestic Animals. En J. J. Kaneko, J. W. Harvey y M. L. Bruss (eds),
40
Recibido: 14-12-2018 Aceptado: 20-03-2019
Rev. med. vet. Investig. 2(1):41-60, 2019 Artículo original
Análisis de variabilidad de la glicemia a distintos tiempos post extracción con los anticoagulantes heparina de litio, fluoruro de sodio y citrato sódico en perro y gato doméstico. Alessandra Ayala-Pío 1 y AnaLía Henríquez 1 1
Facultad de Medicina Veterinaria. Universidad San Sebastián, Concepción, Chile.
Alessandra Ayala: alenolante@gmail.com Resumen La determinación de la glicemia es esencial para evaluar a los pacientes y tomar decisiones diagnósticas, por lo que se requiere precisión en la medición de ésta. El tiempo de preanalítica es clave para la correcta determinación de la glicemia, ya que los anticoagulantes utilizados difieren en el momento en que comienzan a ser eficaces deteniendo la glucólisis, proporcionando un rango de variación de la glicemia debido al consumo de glucosa in vitro realizada por las células sanguíneas. Se tomaron muestras de sangre a nueve caninos y siete felinos clínicamente sanos en el Hospital Clínico Veterinario de la Universidad San Sebastián (HCV-USS), Concepción durante enero del año 2018. Las muestras de sangre fueron dispuestas en 3 tubos con los anticoagulantes Heparina, Fluoruro de sodio y Citrato sódico y se conservaron a 4°C. La glicemia se registró a distintos tiempos y los resultados fueron dispuestos en una planilla Excel®. La glicemia basal media una hora post extracción con heparina como anticoagulante fue de 90,1±20,1 en perros y 99,0±13,8 en gatos. En general, la glicemia descendió en el tiempo con todos los anticoagulantes utilizados. Las muestras con heparina tuvieron un descenso estadísticamente significativo entre las 4 y 24 horas de preanalítica, las muestras con fluoruro de sodio no revelaron cambios estadísticamente significativos y las muestras con citrato sódico mostraron diferencias estadísticamente significativas también entre las 4 y 24 horas de preanalítica; sin embargo, este último presentó los valores más bajos de glicemia media a las 48 horas (46,5mg/dL) y el descenso más pronunciado de la misma. Con base en los resultados obtenidos, se recomienda utilizar fluoruro de sodio para muestras que serán procesadas hasta 72 horas post extracción, y heparina para aquellas que serán procesadas antes de 4 horas de preanalítica. Palabras clave: Coagulación, glucólisis, glicemia en caninos, glicemia en felinos.
Abstract Accurate measurement of blood glucose is essential to make correct diagnostic decisions. The preanalytical time is key for the correct determination of glycemia, because the anticoagulants used differ at the moment when they begin to be effective stopping glycolysis providing a range of variation of glycemia due to in vitro glucose consumption made by blood cells. Blood samples were taken from nine canines and seven cats, clinically healthy at the San Sebastián Clinical Veterinary Hospital (HCV-USS), Concepción, during January 2018. The blood samples were placed in 3 tubes with the anticoagulants Heparin, Sodium Fluoride and Sodium Citrate and were stored at 4°C. The glycemia was recorded at different times and the results were arranged in an Excel® spreadsheet. The basal mean blood sugar one hour post extraction with heparin as anticoagulant was 90.1 ± 20.1 in dogs and 99.0 ± 13.8 in cats. In general, glycemia
41
decreased over time with all the anticoagulants used. The samples with heparin had a statistically significant decrease between 4 and 24 hours of preanalytical, the samples with sodium fluoride did not reveal statistically significant changes and the samples with sodium citrate showed statistically significant differences also between 4 and 24 hours of preanalysis; however, the latter had the lowest values of mean glycaemia at 48 hours (46.5mg/dL) and the most pronounced decrease in it. Based on the results obtained, it is recommended to use sodium fluoride for samples that will be processed up to 72 hours post extraction, and heparin for those that will be processed before 4 hours of preanalysis Key words: Coagulation, glycolysis, glycemia in dogs, glycemia in cats.
monitorear a sus mascotas en el domicilio (Arenas, 2014).
Introducción La determinación de la glicemia es un procedimiento analítico que se realiza constantemente en el laboratorio. El análisis del nivel sistémico de glucosa es esencial para poder monitorizar su variación en la concentración sanguínea, lo cual puede reflejar alteraciones primarias del metabolismo de los glúcidos o estar asociado a otras patologías (Díaz et al., 1997). La medición de glucosa en sangre es sugerida a pacientes que clínicamente presentan debilidad, coma, poliuriapolidipsia, cambios de conducta o convulsiones, así como también para monitorizar estos parámetros en casos de insuficiencia hepática o adrenal, neoplasia pancreática, glucosuria y en enfermos que reciben insulina o nutrición parenteral total. Así mismo existen distintas patologías que cursan con hiperglicemia, tales como diabetes mellitus, hiperadrenocorticismo, exceso de hormona del crecimiento (acromegalia), pancreatitis aguda, exceso de progesterona, insuficiencia renal y neoplasias como feocromocitoma, así como también la administración de acetato de megestrol y fluidoterapia con glucosa (SuizaVet, 2017). Los resultados de muestras sanguíneas se ven afectadas por muchas variables como estrés, inapetencia, cantidad de insulina administrada a pacientes diabéticos y antagonismo a la insulina causado por hormonas diabetogénicas (Briggs et al., 2000), por lo que es necesario una medición lo más exacta posible para evitar interpretaciones erróneas en la clínica.
Durante mucho tiempo se ha reconocido que las muestras de sangre están sujetas a glicólisis ex vivo, que se potencia por la presencia de leucocitosis y se disminuye mediante refrigeración de muestra (Le Roux et al., 2004). La Asociación Americana de Química Clínica (AACC) y la Asociación Americana de Diabetes (ADA) recomiendan el uso de tampón de citrato que se considera un rápido inhibidor de la glucólisis u otros anticoagulantes que cumplan la misma función (Gupta y Kaur, 2013). Para una medición confiable de la glicemia en mamíferos se utiliza la adición de fluoruro de sodio a la muestra de sangre para inhibir la glucólisis (Arenas, 2014). La coagulación de la sangre se produce gracias a una serie de reacciones en cadena denominada “cascada de la coagulación”, la cual depende de una serie de sustratos, enzimas y productos de reacciones enzimáticas (García, 2007a y b). Los anticoagulantes tienen la propiedad de interrumpir este proceso por distintas vías produciendo otros efectos además de la no coagulación, algunos anticoagulantes al inhibir una enzima interrumpen una vía metabólica, se acumula el sustrato correspondiente de esa enzima, y eventualmente el de otras sustancias relacionadas con la vía bloqueada, de esta forma se produce la detención de la glucólisis (Roskoski, 1998 a y b).
Actualmente, en medicina veterinaria la glicemia se mide mediante técnicas de laboratorio o con pequeños monitores portátiles (también llamados glucómetros), significando para los clínicos una gran ayuda y, para los dueños de los pacientes diabéticos, la posibilidad de
Para facilitar el entendimiento global acerca de la comercialización de los tubos de muestreo sanguíneo la Organización Mundial de la Salud (OMS) en sus
42
directrices sobre extracción de sangre estandarizó el color, fórmula y recomendaciones para cada uno de los distintos elementos utilizados en laboratorio clínico (Anexo 3) (Organización Mundial de la Salud, 2010).
coagulación, sin embargo, no entendía el mecanismo. Más tarde se descubrió que el efecto se debía a la afinidad del calcio con el ácido cítrico. Posteriormente se supo que el citrato, en una dosis de aproximadamente 1,7 g/L de sangre de perro, previene la coagulación al reducir la concentración de calcio por debajo del mínimo necesario para la coagulación. En 1943 se señaló que con la solución de citrato de sodio se obtuvo más glucosa en la muestra, la concentración de citrato en la mezcla de plasma con diluyente era bastante superior a 20 mmol/L, sin embargo, la aparición de coágulos ocasionales era todavía un problema (Mollison, 2000). Finalmente se estableció que al utilizar citrato de sodio al 3.8% no se producen coágulos ocasionales y se logra una completa precipitación del calcio (Mollison, 2000).
Fluoruro de sodio/oxalato (tapón gris claro): Según Bender y Mayes (2013), el fluoruro de sodio, actúa como inhibidor de la glucólisis mediante la formación del complejo fluorfosfato de magnesio e inhibe la enolasa, enzima que cataliza una deshidratación formando fosfoenolpiruvato y de esta forma detiene el Ciclo de krebs. En la actualidad se sabe que el fluoruro de sodio desde las cuatro horas cumple su rol inhibidor de glucólisis y estabiliza el nivel de glucosa en sangre, el cual se mantiene hasta 72 horas a temperatura ambiente. En suero separado, no hemolizado y estéril sin fluoruro la concentración de glucosa es estable por 8 horas a 25°C y 72 horas a 4°C (Sacks et al., 2011). Sin embargo, dado que la estabilización de la glucosa ocurre recién a las 4 horas después de la recolección de la muestra, durante las primeras horas la concentración de glucosa en plasma disminuye y la concentración es similar a la de los tubos sin fluoruro de sodio.
Según Mussart (2010), se recomienda usar citrato trisódico (3.8%) para uso in vivo o in vitro el que actúa formando un complejo con el calcio (quelante) e interfiriendo la acción de la protrombina. Es útil para determinar tiempos de protrombina, tiempo de tromboplastina parcial activada (KPTT) y fibrinógeno, así como también para efectuar recuento de plaquetas y eritrosedimentación. La perdurabilidad de la inhibición de la glucólisis por disminución de pH en la muestra de sangre se estima en 8 horas, manteniéndola a 4-5°C. También es ampliamente utilizado como anticoagulante base para sangre destinada a transfusión.
Adicionalmente, los tubos con fluoruro de sodio son inapropiados para medir otras sustancias como Na+, K+ y enzimas (Bowen y Remaley, 2014).
Heparina (tapón verde oscuro): Como anticoagulante opera bloqueando el paso de protrombina a trombina (potencia la acción de la antitrombina III). También inhibe los factores VII, IXa, Xa y XIa, además ejerce acciones como anti-agregante plaquetario. La perdurabilidad de la muestra de sangre sin coagular es de 10-12 horas ya que no evita la coagulación, solamente la retrasa unas 12 horas (Wiener laboratorios S.A.I.C., 2000).
El oxalato de potasio que se adiciona junto con el fluoruro de sodio al tubo de tapa gris y actúa como anticoagulante. Su acción se basa en la fijación del calcio y así detienen la cascada de coagulación. Se utiliza 0.01ml de una solución al 30 % para cada mL de sangre (Garófalo y Yépez, 2013). Citrato sódico (tapón celeste):
La concentración recomendada de anticoagulante es de 10uL por mL de sangre (Mussart, 2010). debido a que en dosis más altas la heparina cataliza la inactivación de la trombina por un segundo cofactor de plasma, cofactor II de heparina (Instituto Químico Biológico, 2012). Una
En 1890 se concluyó que las sales de calcio eran absolutamente necesarias para la coagulación. Posteriormente, Griesbach en 1891 (citado por Mollison, 2000) afirmó que el citrato de amonio interfiere con la
43
desventaja al utilizar heparina es que interfiere la coloración de los leucocitos y suele provocar acúmulos de plaquetas por lo que sólo se recomienda para química sanguínea (Mussart, 2010).
El objetivo de este trabajo es determinar el efecto del retraso en el procesamiento de las muestras refrigeradas para la medición de glicemia con distintos anticoagulantes, en muestras de caninos y felinos atendidos en un hospital clínico veterinario universitario de la ciudad de Concepción.
En un estudio realizado por Vargas et al. (1986) se establece que el tiempo mínimo para la estabilización de la glucosa en una muestra varía según el método utilizado. De acuerdo a los antecedentes proporcionados anteriormente, se desprende que el tiempo transcurrido entre la obtención de la muestra y la realización del análisis (tiempo de preanalítica) es clave para la correcta determinación de la glucosa sanguínea, ya que los anticoagulantes utilizados difieren en el momento en que comienzan a ser eficaces deteniendo la glucólisis proporcionando un rango de variación de la glicemia debido al consumo de glucosa in vitro realizada por las células presentes en la sangre. Por otra parte, hay evidencia de que los anticoagulantes tienen un tiempo específico respecto a la duración de su acción, el cual varía según las propiedades de cada anticoagulante, lo que establece un tiempo límite para realizar las pruebas de laboratorio desde el minuto en que se extrae la sangre. Lo anteriormente señalado significa un problema para aquellos médicos veterinarios que no cuentan con la proximidad de un laboratorio clínico, así como también para los mismos laboratorios cuando no procesan las muestras el mismo día de su recepción. Además, según los antecedentes descritos, la velocidad del metabolismo de la glucosa in vitro depende también de la temperatura a la cual se mantiene la sangre, por lo que la temperatura de conservación de la muestra en el tiempo de preanalítica debe ser, en condiciones ideales, 4°C.
Material y Método La investigación fue realizada durante el mes de enero 2018 en el Hospital Clínico Veterinario de la Universidad San Sebastián (HCV-USS), Campus Tres Pascualas, en la ciudad de Concepción, Chile. Se obtuvo una muestra de 7.5 mL de cada animal, la que fue repartida en tubos distintos, uno con Citrato sódico, otro con Heparina de Litio y otro con Fluoruro de sodio, éstos fueron mantenidos a 4°C en un refrigerador dentro del laboratorio. Se midió la glicemia en cada tubo en alícuotas de 5 uL a los siguientes tiempos post obtención de la muestra: -T1: 1 hora post extracción -T2: 4 horas post extracción -T3: 24 horas post extracción -T4: 48 horas post extracción Los valores obtenidos se registraron en una planilla Excel® en la que se encuentran individualizados todos los sujetos del estudio para realizar el análisis estadístico correspondiente. El número del tamaño muestral se definió mediante la fórmula de comparación de dos medias en parámetros numéricos en una población infinita. Tipo de test: bilateral.
Por lo anterior, es necesario identificar cuál de los anticoagulantes que se utilizarán en el estudio proporciona información más confiable y precisa respecto a la medición de la glucosa sanguínea y cuál de ellos evita el consumo de glucosa por mayor tiempo, para así proporcionarle a los clínicos un antecedente válido para decidir qué anticoagulante utilizarán al minuto de extraer muestras sanguíneas según su proximidad al laboratorio y el tiempo estimado de demora para el procesamiento de la muestra.
En donde:
44
Zα= Valor probabilístico de alfa (5% = 1,96).
-Muestras sanguíneas que cumplieron más de 1 hora transcurrida desde la extracción de la muestra y su llegada al laboratorio.
Zβ= Valor probabilístico de beta (18% = 0,842).
-Muestras sanguíneas no conservadas a 4°C.
S = Desviación estándar del grupo de referencia (Rojas, 2009) (17,08).
-Muestras sanguíneas de un volumen menor a 7.5 mL.
S2= Varianza de la variable cuantitativa del grupo de referencia (Rojas, 2009) (291.69).
-Muestras sanguíneas de perros o gatos con historial de administración endovenosa de cualquier fármaco con acción anticoagulante o administración de dextrosa en las 72 horas previas.
n = Tamaño de la muestra.
d= Valor mínimo de la diferencia que se desea destacar (18,00).
-Tubos de muestra sin identificación o mal rotulados.
Población de estudio
-Muestras provenientes de animales cuyos dueños no firmaron el consentimiento informado para la participación del estudio.
Se obtuvieron las muestras sanguíneas de gatos (Felis catus) y perros (Canis lupus familiaris) clínicamente sanos sobre 3.0 kg de peso que acudieron al HCV-USS por procedimientos de rutina o previo a la realización de castración.
Toma de muestras Se realizó un examen clínico general, registrando las constantes
fisiológicas
(temperatura,
frecuencia
Criterios de inclusión.
respiratoria, frecuencia cardiaca, tiempo de llenado
-Pacientes clínicamente sanos.
capilar y tiempo de pliegue cutáneo), peso y se descartaron signos clínicos patológicos evidentes (Anexo
-Pacientes con 3,0 o más kg de peso.
5). Cuando el paciente presentó todos los parámetros -Pacientes de edad igual o mayor a 1 año.
dentro de los rangos normales y fue aceptado dentro de
-Pacientes de edad igual o menor a 6 años.
los criterios de inclusión, se procedió a solicitar la
Criterios de exclusión.
autorización a los propietarios, la cual fue firmada en un documento
-Pacientes con signos clínicos sospechosos de cualquier enfermedad.
de
consentimiento
informado.
Posteriormente se procedió a la extracción de 7.5 mL de sangre desde la vena yugular, cefálica o safena. En los
-Peso menor a 3,0 Kg.
casos en que el paciente mostró moderado malestar con
-Condición corporal bajo 3.
el procedimiento, no se realizó la extracción de la
-Menores de 1 año de edad.
muestra.
-Mayores de 6 años de edad.
Una vez obtenida la muestra se vertió la cantidad de
-Pacientes excesivamente alterados al momento de la toma de muestra.
sangre recomendada por el fabricante en cada tubo con
Criterios de eliminación de muestras.
rotulado (2 mL en tubo Fluoruro de sodio, 3.5 mL en
los distintos anticoagulantes, cada uno correctamente
tubo citrato sódico y 2 mL en tubo heparina). Los tubos se ingresaron inmediatamente al laboratorio donde se
45
mantuvieron a temperatura de refrigeración (4°C)
estadísticamente significativas, se realizó también un
durante el tiempo previo al procesamiento de las
ANOVA y gráfico de medias a cada uno de los
primeras alícuotas y durante el resto del proceso.
anticoagulantes en los distintos tiempos según especie
Una vez en refrigeración se procedió a la medición de
y a aquellos que presentaban diferencias significativas
glicemia en cada tubo según los tiempos previamente
entre los tiempos se les aplicó, además, el test de
determinados. La medición de glicemia se realizó por
Scheffé. Finalmente se realizó ANOVA de las distintas
espectrofotometría a través del método GOD-PAP
concentraciones de glicemia junto con los tres
(Kovalent do Brasil Ltda., 2014), para lo cual se agregó a
anticoagulantes en relación a cada especie.
un tubo Khan un volumen de 5 uL de plasma más 250 uL de reactivo de glucosa, se agitó el tubo en el vórtex
Resultados
durante 3 segundos y luego se incubó durante diez el
Al analizar la variación de la glicemia de perros y gatos en
espectrofotómetro. Los resultados de la medición se
conjunto, con los distintos anticoagulantes, se obtuvo
expresan en mg/dL.
por resultado que el grupo tratado con fluoruro de sodio,
minutos
a
37°C.
Finalmente
se
leyó
con
luego de una caída inicial de la glicemia, mantuvo estable Los valores referenciales para la glicemia utilizados en el
las concentraciones en el transcurso del tiempo
estudio son los del laboratorio del HCV-USS:
estudiado (p > 0,05) a diferencia de lo ocurrido con
1.
Perros: 80-120 mg/dL
heparina y citrato sódico las que, a contar de las 24 horas,
2.
Gatos: 60-130 mg/dL
experimentan variaciones significativas de la glicemia tras una caída lineal de ésta (p< 0,05). Por otra parte, las
Debido a la nula capacidad de la heparina para inhibir la
muestras
glucólisis, los valores obtenidos en las muestras procesadas
en
los
tubos
con
el
procesadas
con
citrato
sódico
como
anticoagulante demostraron lograr la menor estabilidad
respectivo
de la glicemia en relación al tiempo (Figura 1).
anticoagulante son consideradas como muestra control de la curva fisiológica de glucosa en sangre ex – vitro y se
La glicemia basal media (X ± D.S.) medida en el tiempo 1
comparó la acción inhibidora de glucólisis de los otros
(una hora post extracción de la muestra) considerando
dos anticoagulantes en relación a éste.
los tres anticoagulantes fue de 90,1± 20,1 mg/dL en
Una vez obtenidos los resultados de laboratorio, se
caninos y 99,0 ± 13,8 mg/dL en felinos. No se observaron
realizó la prueba de homogeneidad de las varianzas
diferencias estadísticamente significativas (p = 0,342)
(estadístico de Levene) a los valores, los cuales
entre ellas, independiente del anticoagulante utilizado.
resultaron homogéneos , se continuó con un ANOVA
A continuación, se detallan las medias al tiempo uno de
comparativo entre perros y gatos utilizando los datos del
cada anticoagulante por separado:
tiempo 1 con heparina como anticoagulante para
-Heparina: 99,00 mg/dL con una desviación estándar de
comparar el comportamiento de los valores de glicemia
13,89 mg/dL.
entre especies, los cuales no presentaron diferencias
46
-Fluoruro de sodio: 94,55 mg/dL con una desviación
(p> 0,05)) en el transcurso del tiempo estudiado, siendo
estándar de 15,41 mg/dL.
el anticoagulante que logró la mayor estabilidad de la glicemia a lo largo del tiempo (figura 7).
-Citrato sódico: 84,44 mg/dL con una desviación
Por último, la glicemia con citrato sódico como
estándar de 12,87 mg/dL
anticoagulante mostró diferencias estadísticamente Los estadígrafos de las glicemias basales según especie
significativas (p< 0,05) entre los tiempos T1 respecto a
se muestran en la Figura 2.
T3-T4 y T2 respecto a T4 dando lugar a dos subconjuntos homogéneos siendo el anticoagulante con la glicemia
Caninos:
más inestable en el transcurso del tiempo, tal como se En los caninos muestreados, al utilizar heparina como
grafica a continuación en la figura 8.
anticoagulante para la determinación de glicemia, se observaron diferencias estadísticamente significativas Discusión
(p< 0,05), entre los tiempos T1-T2 y T3-T4, tal como se muestra en la figura 3, no así entre T1 y T2 y tampoco
La glicemia basal de caninos y felinos (90.1 mg/dL y 99.0
entre T3 y T4.
mg/dL
Por otra parte, en el transcurso del tiempo no se
significativas respecto al anticoagulante utilizado
observaron diferencias estadísticamente significativas
(heparina, fluoruro de sodio o citrato sódico). Benson et
(p> 0,05) en la glicemia media al utilizar fluoruro de
al. (2004) reportortaron una glicemia en caninos de 98 ±
sodio como anticoagulante (figura 4).
5, utilizando plasma refrigerado.Devitt et al. Registraron
respectivamente)
no
tuvo
diferencias
(2005) 85 ± 14.5 mg/dL, utilizando un medidor
La glicemia al utilizar citrato sódico como anticoagulante
automatizado manual AccuCheck©. Dimeski et al.
mostró diferencias estadísticamente significativas (p<
(2014)
0,05) entre los tiempos T1 con T3-T4 y T2 con T4 dando
reportortaron
88,2
mg/dl
en
muestras
preservadas con citrato y 96,2 mg/dL utilizando
lugar a tres subconjuntos homogéneos tal como se
Glucomedics © una mezcla de EDTA, fluoruro de sodio,
grafica en la figura 5.
ácido cítrico y citrato de sodio. Por último, Pereira et al., en el 2006, reportortaron 77± 6.4, en tubos con Fluoruro
Felinos:
de Sodio.
En los felinos estudiados, la glicemia con heparina como
En términos generales, en el presente trabajo, la glicemia
anticoagulante
disminuyó en el periodo de estudio en todos los
sólo
manifestó
diferencias
estadísticamente significativas (p< 0,05) entre los
anticoagulantes y en ambas especies.
tiempos T1 y T4 (T1≠T4) tal como se grafica en la figura
En las muestras obtenidas de caninos y procesadas con
6.
heparina en el presente estudio, se observó una
La glicemia con fluoruro de sodio como anticoagulante
disminución lineal en la glicemia causando diferencias
no mostró diferencias estadísticamente significativas
significativas entre los tiempos 1 y 2 con 3 y 4, no así las
47
muestras obtenidas de felinos y procesadas con el
establecen que la estabilización de la glucosa ocurre
mismo
presentaron
recién a las 4 horas después de la recolección de la
variaciones significativas entre las glicemias de los
muestra y que durante las primeras horas la
tiempos 1 y 4, ésta diferencia puede explicarse por el
concentración de glucosa en plasma disminuye, por lo
acotado número de muestras, por lo que se sugiere
que se recomienda adicionar al fluoruro de sodio
ampliar el estudio ya que entre especies no existe una
agentes acidificantes del plasma como citrato sódico
diferencia significativa de la glicemia a los distintos
para evitar la glucólisis de esas primeras 4 horas
tiempos. La disminución de la glicemia en el tiempo
(Gambino et al., 2009).
concuerda con otros estudios tanto de medicina
En las muestras analizadas con citrato de sodio, tanto en
veterinaria como en medicina humana ya que la
muestras de caninos como de felinos hay una
heparina no inhibe la glucólisis (Echeverría et al., 1999).
disminución de la glicemia, en donde se presentaron
Cabe destacar que en el presente estudio el tiempo 2
diferencias significativas entre las glicemias de los
corresponde 4 horas post extraída la muestra y el
tiempos 1 respecto a 3 y 4, así como también del tiempo
tiempo 3 a 24 horas de preanalítica, por tanto, las
2 respecto al tiempo 4, pero manteniendo variaciones
variaciones que ocurren entre las 4 y 24 horas no fueron
no significativas entre las glicemias de los tiempos 2 y 3.
medidas en el estudio.
Este anticoagulante presentó la menor efectividad para
anticoagulante,
las
cuales
mantener estable la glicemia en el tiempo, en Por otra parte, en las muestras de caninos y felinos
comparación a los otros dos anticoagulantes utilizados, y
domésticos procesadas con fluoruro de sodio no se
sus valores de glicemia fueron incluso más bajos que los
aprecian variaciones de glicemia estadísticamente
de las muestras con heparina, tal como postulan algunos
significativas, a pesar de que hay un descenso de ésta, lo
autores como Gambino et al., (2009) quién reportó que
que se ajusta a las recomendaciones de la Organización
la glucosa es un 0.9% más alta en tubos con heparina
Mundial de la Salud para estabilizar la glicemia, donde
que con citrato, mientras que Dimeski et al., (2014)
recomiendan el uso de fluoruro de sodio (6g/l) más
reportaron un alza de glucosa en un 3.1%. Esto puede
maleinimida
Kanagasabapathy,
ser explicado ya que el tubo de citrato presenta un
Heuck, 2003), Se aprecia una disminución en la glicemia
anticoagulante líquido, por tanto, si el llenado del tubo es
en el tiempo 1 (una hora post extracción de sangre) que
insuficiente, el anticoagulante provoca un efecto de
revela glicemias más bajas en comparación a los valores
dilución, a diferencia de los tubos con heparina o
de las muestras trabajadas con heparina en el mismo
fluoruro de sodio. Para tener resultados óptimos se debe
tiempo, esto coincide también con lo que postula
respetar los índices de llenado de los tubos. En el mismo
Gambino (2007), quien reportó que el fluoruro de sodio
estudio de Dimeski et al., se comprobó que sólo, el
no previene la metabolización de la glucosa plasmática
citrato mantiene estable la glicemia más allá de una hora
durante los primeros 30-90 minutos o más de
después de la toma de muestra, pero luego de dos horas
(Reinauer,
Home,
preanalítica, también Bowen y Remaley (2014)
ésta disminuye en un 2,5% (Dimeski et al., 2014).
48
Dimeski et al., (2014), afirma que la mejor opción sigue
dispuesto como líquido y no en aspersión a diferencia
siendo el procesamiento rápido de la muestra o su
del fluoruro y la heparina, pero la clara inestabilidad en
refrigeración inmediata, junto con preservante o
el tiempo le resta confiabilidad.
estabilizador de glucosa, y respetar los volúmenes
La importancia de la exactitud al momento de medir la
especificados ya que muchas veces los tubos llegan con
glucosa radica en que la mayoría de los perros diabéticos
una cantidad inadecuada de sangre, con deficiencia o
que no tienen signos clínicos causados por hiperglicemia
exceso. En el presente estudio, se comprueba que las
o hipoglicemia tienen un peso estable y no presentan
mediciones más cercanas a la glicemia real inicial de las
anormalidades al examen clínico (Briggs et al., 2000). Se
muestras se obtienen midiendo dentro de las primeras
presume, en cambio, que cuando los dueños reportan
horas de preanalítica, sin embargo, de igual manera
signos clínicos es porque la glicemia está por sobre los
existen variaciones en
250 mg/dL. Si la glucosa se mantiene entre los 100 y 250
la
glicemia
respecto
al
anticoagulante utilizado.
mg/dl se reducen los signos clínicos observados
Según Dimeski et al., (2014) y concordando con Gambino
producidos por la hiperglicemia y glicosuria, y se
et al. (2009) una nueva mezcla de EDTA sódico, Fluoruro
previenen las complicaciones agudas y crónicas
de Sodio, ácido cítrico y citrato de sodio acidifica la
asociadas con la diabetes mellitus y su tratamiento
sangre, la preserva y es la mejor opción para medir la
(Feldman y Nelson, 2000).
glicemia. La segunda mejor opción, según estos autores,
En clínica, una medición incorrecta de la concentración
es el uso de citrato, sin embargo, otros autores afirman
de la glucosa sanguínea puede llevar a ajustes
que hay que realizar una corrección para el volumen
inapropiados en el tratamiento insulínico y el desarrollo
final por ser un anticoagulante líquido, así mismo otros
o la perpetuación de un inadecuado control de la glicemia
autores no han considerado este hecho, incluso cuando
siendo
este tipo de tubos se ha elegido como el estándar por
administrados a los pacientes, por tanto, a la luz de estos
distinto países y organizaciones de salud (Sacks et al.,
resultados y, fundamentando en el presente estudio, se
2011; Del Pino et al., 2013). En el presente estudio,
sugiere como tubo de elección aquel que contenga
difiere de la postulación de estos autores debido a que
fluoruro de sodio para muestras que serán conservadas
las muestras procesadas con citrato sódico, además de
a 4°C por no más de 72 horas y, con seguridad por el
marcar los valores más bajos de glicemia en
estudio realizado, hasta 48 horas. En caso de no contar
comparación con los otros dos anticoagulantes,
con los tubos primeramente mencionados, también es
demostró ser el menos capaz de mantener estables los
confiable utilizar tubos con heparina para recolectar
niveles de glucosa en el transcurso del tiempo. Los
muestras sanguíneas con la condición de que sean
valores bajos en las glicemias medidas a tiempo uno
analizadas idealmente dentro de la primera hora de
(una hora post extracción de la muestra) podrían
preanalítica, pudiendo extender este periodo por un
explicarse por la dilución que realizaría el citrato sódico
máximo de 4 horas.
al mezclarse con la sangre ya que en el tubo está
49
contraproducente
en
los
tratamientos
Respecto al citrato sódico, no se recomienda utilizar por sí solo con el fin de inhibir el consumo de glucosa por su inestabilidad en el tiempo.
Resultados
Los estadígrafos de las glicemias basales según especie se muestran en la Figura 2.
Al analizar la variación de la glicemia de perros y gatos en
Caninos:
conjunto, con los distintos anticoagulantes, se obtuvo por resultado que el grupo tratado con fluoruro de sodio,
En los caninos muestreados, al utilizar heparina como
luego de una caída inicial de la glicemia, mantuvo estable
anticoagulante para la determinación de glicemia, se
las concentraciones en el transcurso del tiempo
observaron diferencias estadísticamente significativas
estudiado (p > 0,05) a diferencia de lo ocurrido con
(p< 0,05), entre los tiempos T1-T2 y T3-T4, tal como se
heparina y citrato sódico las que, a contar de las 24 horas,
muestra en la figura 3, no así entre T1 y T2 y tampoco
experimentan variaciones significativas de la glicemia tras
entre T3 y T4.
una caída lineal de ésta (p< 0,05). Por otra parte, las
Por otra parte, en el transcurso del tiempo no se
muestras
como
observaron diferencias estadísticamente significativas
anticoagulante demostraron lograr la menor estabilidad
(p> 0,05) en la glicemia media al utilizar fluoruro de
de la glicemia en relación al tiempo (Figura 1).
sodio como anticoagulante (figura 4).
La glicemia basal media (X ± D.S.) medida en el tiempo 1
La glicemia al utilizar citrato sódico como anticoagulante
(una hora post extracción de la muestra) considerando
mostró diferencias estadísticamente significativas (p<
los tres anticoagulantes fue de 90,1± 20,1 mg/dL en
0,05) entre los tiempos T1 con T3-T4 y T2 con T4 dando
caninos y 99,0 ± 13,8 mg/dL en felinos. No se observaron
lugar a tres subconjuntos homogéneos tal como se
diferencias estadísticamente significativas (p = 0,342)
grafica en la figura 5.
procesadas
con
citrato
sódico
entre ellas, independiente del anticoagulante utilizado. A continuación, se detallan las medias al tiempo uno de
Felinos:
cada anticoagulante por separado:
En los felinos estudiados, la glicemia con heparina como
-Heparina: 99,00 mg/dL con una desviación estándar de
anticoagulante
13,89 mg/dL.
sólo
manifestó
diferencias
estadísticamente significativas (p< 0,05) entre los
-Fluoruro de sodio: 94,55 mg/dL con una desviación
tiempos T1 y T4 (T1≠T4) tal como se grafica en la figura
estándar de 15,41 mg/dL.
6.
-Citrato sódico: 84,44 mg/dL con una desviación
La glicemia con fluoruro de sodio como anticoagulante
estándar de 12,87 mg/dL
no mostró diferencias estadísticamente significativas (p> 0,05)) en el transcurso del tiempo estudiado, siendo
50
el anticoagulante que logró la mayor estabilidad de la
mismo
anticoagulante,
las
cuales
presentaron
glicemia a lo largo del tiempo (figura 7).
variaciones significativas entre las glicemias de los
Por último, la glicemia con citrato sódico como
tiempos 1 y 4, ésta diferencia puede explicarse por el
anticoagulante mostró diferencias estadísticamente
acotado número de muestras, por lo que se sugiere
significativas (p< 0,05) entre los tiempos T1 respecto a
ampliar el estudio ya que entre especies no existe una
T3-T4 y T2 respecto a T4 dando lugar a dos subconjuntos
diferencia significativa de la glicemia a los distintos
homogéneos siendo el anticoagulante con la glicemia
tiempos. La disminución de la glicemia en el tiempo
más inestable en el transcurso del tiempo, tal como se
concuerda con otros estudios tanto de medicina
grafica a continuación en la figura 8.
veterinaria como en medicina humana ya que la heparina no inhibe la glucólisis (Echeverría et al., 1999). Cabe destacar que en el presente estudio el tiempo 2
Discusión
corresponde 4 horas post extraída la muestra y el La glicemia basal de caninos y felinos (90.1 mg/dL y 99.0
tiempo 3 a 24 horas de preanalítica, por tanto, las
mg/dL
variaciones que ocurren entre las 4 y 24 horas no fueron
respectivamente)
no
tuvo
diferencias
significativas respecto al anticoagulante utilizado
medidas en el estudio.
(heparina, fluoruro de sodio o citrato sódico). Benson et al. (2004) reportortaron una glicemia en caninos de 98 ±
Por otra parte, en las muestras de caninos y felinos
5, utilizando plasma refrigerado.Devitt et al. Registraron
domésticos procesadas con fluoruro de sodio no se
(2005) 85 ± 14.5 mg/dL, utilizando un medidor
aprecian variaciones de glicemia estadísticamente
automatizado manual AccuCheck©. Dimeski et al.
significativas, a pesar de que hay un descenso de ésta, lo
(2014)
muestras
que se ajusta a las recomendaciones de la Organización
preservadas con citrato y 96,2 mg/dL utilizando
Mundial de la Salud para estabilizar la glicemia, donde
Glucomedics © una mezcla de EDTA, fluoruro de sodio,
recomiendan el uso de fluoruro de sodio (6g/l) más
ácido cítrico y citrato de sodio. Por último, Pereira et al.,
maleinimida
en el 2006, reportortaron 77± 6.4, en tubos con Fluoruro
Heuck, 2003), Se aprecia una disminución en la glicemia
de Sodio.
en el tiempo 1 (una hora post extracción de sangre) que
En términos generales, en el presente trabajo, la glicemia
revela glicemias más bajas en comparación a los valores
disminuyó en el periodo de estudio en todos los
de las muestras trabajadas con heparina en el mismo
anticoagulantes y en ambas especies.
tiempo, esto coincide también con lo que postula
En las muestras obtenidas de caninos y procesadas con
Gambino (2007), quien reportó que el fluoruro de sodio
heparina en el presente estudio, se observó una
no previene la metabolización de la glucosa plasmática
disminución lineal en la glicemia causando diferencias
durante los primeros 30-90 minutos o más de
significativas entre los tiempos 1 y 2 con 3 y 4, no así las
preanalítica, también Bowen y Remaley (2014)
muestras obtenidas de felinos y procesadas con el
establecen que la estabilización de la glucosa ocurre
reportortaron
88,2
mg/dl
en
51
(Reinauer,
Home,
Kanagasabapathy,
recién a las 4 horas después de la recolección de la
siendo el procesamiento rápido de la muestra o su
muestra y que durante las primeras horas la
refrigeración inmediata, junto con preservante o
concentración de glucosa en plasma disminuye, por lo
estabilizador de glucosa, y respetar los volúmenes
que se recomienda adicionar al fluoruro de sodio
especificados ya que muchas veces los tubos llegan con
agentes acidificantes del plasma como citrato sódico
una cantidad inadecuada de sangre, con deficiencia o
para evitar la glucólisis de esas primeras 4 horas
exceso. En el presente estudio, se comprueba que las
(Gambino et al., 2009).
mediciones más cercanas a la glicemia real inicial de las
En las muestras analizadas con citrato de sodio, tanto en
muestras se obtienen midiendo dentro de las primeras
muestras de caninos como de felinos hay una
horas de preanalítica, sin embargo, de igual manera
disminución de la glicemia, en donde se presentaron
existen variaciones en
diferencias significativas entre las glicemias de los
anticoagulante utilizado.
tiempos 1 respecto a 3 y 4, así como también del tiempo
Según Dimeski et al., (2014) y concordando con Gambino
2 respecto al tiempo 4, pero manteniendo variaciones
et al. (2009) una nueva mezcla de EDTA sódico, Fluoruro
no significativas entre las glicemias de los tiempos 2 y 3.
de Sodio, ácido cítrico y citrato de sodio acidifica la
Este anticoagulante presentó la menor efectividad para
sangre, la preserva y es la mejor opción para medir la
mantener estable la glicemia en el tiempo, en
glicemia. La segunda mejor opción, según estos autores,
comparación a los otros dos anticoagulantes utilizados, y
es el uso de citrato, sin embargo, otros autores afirman
sus valores de glicemia fueron incluso más bajos que los
que hay que realizar una corrección para el volumen
de las muestras con heparina, tal como postulan algunos
final por ser un anticoagulante líquido, así mismo otros
autores como Gambino et al., (2009) quién reportó que
autores no han considerado este hecho, incluso cuando
la glucosa es un 0.9% más alta en tubos con heparina
este tipo de tubos se ha elegido como el estándar por
que con citrato, mientras que Dimeski et al., (2014)
distinto países y organizaciones de salud (Sacks et al.,
reportaron un alza de glucosa en un 3.1%. Esto puede
2011; Del Pino et al., 2013). En el presente estudio,
ser explicado ya que el tubo de citrato presenta un
difiere de la postulación de estos autores debido a que
anticoagulante líquido, por tanto, si el llenado del tubo es
las muestras procesadas con citrato sódico, además de
insuficiente, el anticoagulante provoca un efecto de
marcar los valores más bajos de glicemia en
dilución, a diferencia de los tubos con heparina o
comparación con los otros dos anticoagulantes,
fluoruro de sodio. Para tener resultados óptimos se debe
demostró ser el menos capaz de mantener estables los
respetar los índices de llenado de los tubos. En el mismo
niveles de glucosa en el transcurso del tiempo. Los
estudio de Dimeski et al., se comprobó que sólo, el
valores bajos en las glicemias medidas a tiempo uno
citrato mantiene estable la glicemia más allá de una hora
(una hora post extracción de la muestra) podrían
después de la toma de muestra, pero luego de dos horas
explicarse por la dilución que realizaría el citrato sódico
ésta disminuye en un 2,5% (Dimeski et al., 2014).
al mezclarse con la sangre ya que en el tubo está
Dimeski et al., (2014), afirma que la mejor opción sigue
la
glicemia
respecto
al
dispuesto como líquido y no en aspersión a diferencia
52
del fluoruro y la heparina, pero la clara inestabilidad en
o la perpetuación de un inadecuado control de la glicemia
el tiempo le resta confiabilidad.
siendo
La importancia de la exactitud al momento de medir la
administrados a los pacientes, por tanto, a la luz de estos
glucosa radica en que la mayoría de los perros diabéticos
resultados y, fundamentando en el presente estudio, se
que no tienen signos clínicos causados por hiperglicemia
sugiere como tubo de elección aquel que contenga
o hipoglicemia tienen un peso estable y no presentan
fluoruro de sodio para muestras que serán conservadas
anormalidades al examen clínico (Briggs et al., 2000). Se
a 4°C por no más de 72 horas y, con seguridad por el
presume, en cambio, que cuando los dueños reportan
estudio realizado, hasta 48 horas. En caso de no contar
signos clínicos es porque la glicemia está por sobre los
con los tubos primeramente mencionados, también es
250 mg/dL. Si la glucosa se mantiene entre los 100 y 250
confiable utilizar tubos con heparina para recolectar
mg/dl se reducen los signos clínicos observados
muestras sanguíneas con la condición de que sean
producidos por la hiperglicemia y glicosuria, y se
analizadas idealmente dentro de la primera hora de
previenen las complicaciones agudas y crónicas
preanalítica, pudiendo extender este periodo por un
asociadas con la diabetes mellitus y su tratamiento
máximo de 4 horas.
(Feldman y Nelson, 2000).
Respecto al citrato sódico, no se recomienda utilizar por sí
En clínica, una medición incorrecta de la concentración
solo con el fin de inhibir el consumo de glucosa por su
de la glucosa sanguínea puede llevar a ajustes
inestabilidad en el tiempo.
inapropiados en el tratamiento insulínico y el desarrollo
53
contraproducente
en
los
tratamientos
Tablas e ilustraciones
Figura 1. Glicemia media (mg/dL) de las muestras con los distintos anticoagulantes en función al tiempo. T1: 1 hora post extracción; T2: 4 horas post extracción; T3: 24 horas post extracción; T4: 48 horas post extracción.
Figura 2. Estadígrafos de glicemia basal media en caninos y felinos. (n=14)
54
Figura 3. Glicemia (mg/dL) en caninos según tiempo al utilizar heparina como anticoagulante. T1: 1 hora post extracción; T2: 4 horas post extracción; T3: 24 horas post extracción; T4: 48 horas post extracción. La diferencia de color indica p<0.05. (n=14)
Figura 4. Glicemia (mg/dL) en caninos según tiempo al utilizar fluoruro de sodio como anticoagulante. T1: 1 hora post extracción; T2: 4 horas post extracción; T3: 24 horas post extracción; T4: 48 horas post extracción. (n=14)
55
Figura 5. Glicemia (mg/dL) en caninos según tiempo al utilizar citrato de sodio como anticoagulante. T1: 1 hora post extracción; T2: 4 horas post extracción; T3: 24 horas post extracción; T4: 48 horas post extracción. La diferencia de color entre cajas indica p<0,05.
Figura 6. Glicemia (mg/dL) en felinos según tiempo al utilizar heparina como anticoagulante. T1: 1 hora post extracción; T2: 4 horas post extracción; T3: 24 horas post extracción; T4: 48 horas post extracción.
56
Figura 7. Glicemia (mg/dL) en felinos según tiempo al utilizar fluoruro de sodio como anticoagulante. T1: 1 hora post extracción; T2: 4 horas post extracción; T3: 24 horas post extracción; T4: 48 horas post extracción. (n=14)
Figura 8. Glicemia (mg/dL) en felinos según tiempo al utilizar citrato sódico como anticoagulante. T1: 1 hora post extracción; T2: 4 horas post extracción; T3: 24 horas post extracción; T4: 48 horas post extracción. (n=14).
57
Referencias bibliográficas Arenas, M. (2014). Comparación de los valores de glucemia en sangre completa, suero y plasma de una población de caninos clínicamente sanos en Bogotá (Proyecto de trabajo de grado). Universidad de La Salle, Bogotá D.C. Recuperado de: http://hdl.handle.net/10185/17544.
Díaz, J., Fernández del Barrio, M. T. y Paredes F. (1997). Metabolismo de los hidratos de carbono. En Díaz, J., Fernández del Barrio, M. T. y Paredes F. Aspectos básicos de bioquímica clínica. (pp. 29-43). Madrid: Ediciones Díaz de Santos. Dimeski, G; Yow, K. y Brown, N. (2014). What is the most suitable blood collection tube for glucose estimation?. Annals of Clinical Biochemistry,52 (2), 270 275. doi: 10.1177/0004563214544708
Bender, D y Mayes, P. (2013). Glucólisis y la oxidación de piruvato. En Murray, R; Bender, D; Botham, K; Kennelly, P; Rodwell, V; Wiel, P. Harper Bioquímica ilustrada. (29°Ed., pp. 170173). México D.F.; McGraw-Hill.
Echeverría E., Bello F., Riquelme M., Vega R., Goecke H. y Henríquez L. (1999). Variación de la glicemia durante el test de tolerancia a la glucosa según el anticoagulante utilizado y su repercusión en el diagnóstico de diabetes gestacional. Revista Chilena de Obstetricia y Ginecología. 64(2), 5-111. Recuperado de http://bases.bireme.br/cgibin/wxislind.exe/iah/online/?IsisScript=iah/ia h.xis&src=google&base=ADOLEC&l ang=p&nextAction=lnk&exprSearch=245483& indexSearch=ID
Benson, G; Grubb, T; Neff‐Davis, C; Olson, W; Thurmon, J; Lindner, D; y Vanio, O. (2004). Perioperative stress response in the dog: effect of pre‐emptive administration of medetomidine. Veterinary surgery, 29(1), 8591. doi: 10.1111/j.1532-950X.2000.00085.x Bowen, R. A., Remaley, A.T (2014). Interferences from blood collection tube components on clinical chemistry assays. Biochemia Medica (Zagreb), 24(1), 31-44. doi: 10.11613/BM.2014.006.
Facultad de Medicina Veterinaria Universidad de Buenos Aires. (2016). Manual de Semiología Veterinaria. Buenos Aires: Universidad de Buenos Aires.
Briggs, C; Nelson, R; Feldman, E; Elliott, D. y Neal, L. (2000). Reliability of history and physical examination findings for assessing control of glycemia in dogs with diabetes mellitus: 53 cases (1995-1998). Journal of the American Veterinary Medical Association, 217(1), 48-53. doi: 10.2460/javma.2000.217.48
Feldman, E. & Nelson R. (2000). Endocrinología y reproducción en perros y gatos. (2ª. ed). México: Mc Graw-Hill interamericana.
Chávez, G. (2010). Exámenes de laboratorio en emergencias veterinarias. Presentado en 2° Congreso ECVECCS Emergencia y cuidados críticos veterinarios. Sociedad Ecuatoriana de Emergencias y Cuidados Críticos Veterinarios (ECVECCS), Guayaquil. Recuperado de http://www.ivis.org/proceedings/ecveccs/201 0/toc.asp.
Gambino R. (2007). Glucose: a simple molecule that is not simple to quantify. Clinical Chemistry, 53(12), 2040-2041. doi: 10.1373/clinchem.2007.094466. Gambino, R; Piscitelli, J; Ackattupathil, A; Theriault, L; Andrin, D; Sanfilippo, L. y Etienne, M. (2009). Acidification of blood is superior to sodium fluoride alone as an inhibitor of glycolysis. Clinical Chemistry, 55 (5), 1019–21. doi: 10.1373/clinchem.2008.121707
Devitt, C; Cox, R. y Hailey, J. 2005. Duration, complications, stress, and pain of open ovariohysterectomy versus a simple method of laparoscopic-assisted ovariohysterectomy in dogs. Journal of the American Veterinary Medical Association, 227(6), 921-927. doi: 10.2460/javma.2005.227.921
García, R. (2007a) Hemostasia. En Núñez, L y Bouda, J. Patología Clínica Veterinaria. (pp. 6673) México D. F.: Universidad Nacional Autónoma de México.
58
García, R. (2007b) Transfusión sanguínea. En Núñez, L y Bouda, J. Patología Clínica Veterinaria. (pp. 74-86) México D. F.: Universidad Nacional Autónoma de México.
antiglycolytic agent. Annals Of Clinical Biochemistry, 41 (1), 43-46. doi: 10.1258/000456304322664681. Mollison, P.L. (2000). The introduction of citrate as an anticoagulant for transfusion and of glucose as a red cell preservative. British Journal of Haematology, 108 (1), 13- 18. doi: 10.1046/j.1365-2141.2000.01827.x.
Garófalo, C y Yépez, G. (2013). Utilización del sagmanitol y cpda en hematíes del grupo sanguíneo abo, para prolongar su vigencia y efectividad de reacción como reactivos caseros que identifiquen, anticuerpos al enfrentarlos con suero o plasma, utilizando muestras de sangre de estudiantes del tercer año de la carrera de laboratorio clínico de la UNACH, durante el periodo diciembre 2011 a marzo 2012 (Licenciatura en laboratorio clínico e histopatológico). Universidad Nacional de Chimborazo, Riobamba. Recuperado de http://dspace.unach.edu.ec/bitstream/51000 /1007/1/UNACH-EC-LAB.CLIN20120002..pdf.
Mussart, N. (2010). Técnicas de extracción y envío de muestras. En Coppo, J.Interpretación de análisis clínicos en perros y gatos. (pp. 37-48). Salta: EUCASA. Organización Mundial de la Salud. (2006). What diagnostic tests should be used to define glycemic status. En Definition and diagnosis of diabetes mellitus and intermediate hyperglycemia. [pp.29-33]. Recuperado de https://www.who.int/diabetes/publications/D efinition%20and%20diagnosis%20of%20diabe tes_new.pdf
Griep, J (2002). Metabolismo eritrocitario. En Rodak, B. Hematología. Fundamentos y Aplicaciones Clínicas. (2da ed., pp. 101-105). Philadelphia: Elsevier.
Organización Mundial de la Salud. (2010). Procedure for drawing blood. En WHO guidelines on drawing blood: best practices in phlebotomy. [pp.16]. Recuperado de http://www.euro.who.int/ data/assets/pdf_file/0005/268790/WHOguidelines- on-drawing-blood-best-practicesin-phlebotomy-Eng.pdf?ua-1
Gupta, S y Kaur, H. (2013). Inhibition of Glycolysis for Glucose Estimation in Plasma: Recent Guidelines and their Implications. Indian Journal of Clinical Biochemistry, 29(2), 262264. doi: 10.1007/s12291-013-0405-1. Harris, R. (2004) Metabolismo glucídico I: Principales rutas metabólicas y su control. En Devlin, T. Bioquímica. Libro de texto con aplicaciones clínicas. (4° ed., pp. 600- 615). Barcelona: Reverté.
Pereira, F; Martins, O; Vieira, M. y Da Silva, C. (2006). Cortisol sérico e glicemia em cadelas tratadas com tramadol e submetidas à ováriohisterectomia. Ciência Rural, 36(1), 155-160.
Instituto Químico Biológico (IQB). (2012). Heparina en Vademecum. [online] Recuperado de: http://www.iqb.es/cbasicas/farma/farma04/h 004.htm
Reinauer, H., Home P. D., Kanagasabapathy, A. S., Heuck C.C. (2003). Laboratory Diagnosis and Monitoring of Diabetes Mellitus. World Health Organization. Madrid.: Momento Médico Iberoamericana.
Kovalent do Brasil Ltda. (2014). Instrucciones de Uso Solamente para uso diagnóstico in vitro: GLICOSE GOD-PAP. Recuperado de http://www.biosys.com.br/wpcontent/uploads/2015/08/BL-0243-INSERTOGLUCOSA-GOD-PAP-5-Rev001- 01-2014.pdf.
Revista para auxiliares de medicina veterinaria (2007). Procedimientos clínicos: Extracción de sangre. Auxiliar Veterinario, 8 (6-9) . Recuperado de: http://www.amvac.es/docs/revistaAV/av08.p df.
Le Roux, C., Wilkinson, S., Pavitt, D., Muller, B., y Alaghband-Zadeh, J. (2004). A new
Rojas, P. (2009). Valores Referenciales Hematológicos y Bioquímicos de Felino
59
Domésticos de Heredia y San José de Costa Rica. (Licenciatura en Medicina Veterinaria). Universidad Nacional, Heredia. Recuperado de http://repositorio.una.ac.cr/bitstream/handle /11056/12985/Pamela-RojasLor%C3%ADa.pdf?sequence=1&isAllowed=y.
Cuadernos de cirugía, 18, 83-90. Recuperado de http://mingaonline.uach.cl/pdf/cuadcir/v18n1 /art14.pdf. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias exactas y naturales y Agrimensura. Química Biológica II, Guías de laboratorio. (2013). Laboratorio N°1: Evaluación del efecto del fluoruro como inhibidor de la glucólisis anaeróbica. pp. Recuperado de https://www.google.com/url?q=http://ecaths 1.s3.amazonaws.com/quimicabiologi ca2/1106393298.TP%2520N%25C2%25BA%25 201%2520Metabolismo%2520d e%2520H%2520de%2520C%2520-
Roskoski, R. (1998a). Glucólisis y vía de la pentosa fosfato. En Bioquímica. Roskoski,R. (pp. 96113). México D.F.: McGraw-Hill. Roskoski, R.(1998b). Hemoglobina, Hem y coagulación sanguínea. En Bioquímica. Roskoski, R. (pp. 96-113). México D.F.: McGraw-Hill. Sacks, D., Arnold, M., Bakris, G., Bruns, D., Horvath, A., y Kirkman, M., Lernmark, A., Metzqer, B., Nathan, D. (2011). Guidelines and Recommendations for Laboratory Analysis in the Diagnosis and Management of Diabetes Mellitus. Diabetes Care, 34(6), e61-e99. doi: 10.2337/dc11-9998.
%2520Fluoruro%2520como%2520inhibidor%252 0de%2520la%2520Gluc%25C 3%25B3lisis.pdf. Vargas, M., Schoslnky, K., Brilla, S., Vinocour, E., Esquivel, J. (1986). Estudio comparativo de exactitud en la determinación de glucosa sérica por cuatro métodos. Revista Costarricense de Ciencias Médicas, 7(2), 173179. Recuperado de http://www.binasss.sa.cr/revistas/rccm/v7n2/ art8.pdf.
SuizaVet. (2017). Manual veterinario, Bioquímica sanguínea. Recuperado de: http://www.suizavet.com/manuales/bioquimi ca.pdf.
Wiener laboratorios S.A.I.C. (2000). Anticoagulantes. (870070022 p.3/9). Rosario, Argentina. Recuperado de http://www.wienerlab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademe cum%20espanol/anticoagulantes_ sp.pdf.
Tolstoi, E. (1924). Glycolysis in bloods of normal subjects and of diabetic patients.Journal of Biological Chemistry, 60, 69-75. doi: 10.1136/jcp.2006.039925. Trejo, C. (2004). Anticoagulantes: Farmacología, mecanismos de acción y usos clínicos.
60
Recibido: 12-12-2018 Aceptado: 15-03-2019
Rev. med. vet. Investig. 2(1):61-65, 2019 Reporte de caso
Reporte de leucismo parcial en ejemplar de pingüino de Magallanes (Spheniscus magellanicus) de la región del Biobío, Chile. Jorge Leichtle 1 1
Facultad de Medicina Veterinaria. Universidad San Sebastián, Concepción, Chile.
Jorge Leichtle: Jorge.leichtle@uss.cl Resumen Se documenta el caso de un ejemplar de pingüino magallánico con aberración en la coloración de su plumaje, identificado como leucismo parcial. Hasta donde tienen información los autores, corresponde al primer caso reportado para dicha especie en las costas de la región del Biobío. Palabras clave: Aberraciones de pigmento en plumas, Sphenisciformes, aves acuáticas.
Abstract The case of a Magellanic penguin specimen with aberration in the coloration of its plumage, identified as partial leucism, is documented. As far as the authors have information, it corresponds to the first case reported for this species in the coasts of the Biobío region. Key words: Pigment aberrations in feathers, Sphenisciformes, waterfowl.
2005; Van Grouw, 2006; 2013).
Introducción
En la Tabla I se
nombran algunas alteraciones de pigmentación
Las aberraciones de pigmentación o cromáticas han
descritas para aves.
sido descritas en diversos grupos animales, incluidas las aves (López-González, 2011;). Para la fauna silvestre,
El leucismo es una condición de fácil identificación, ya
aberraciones en la pigmentación ocurren raramente,
que se caracteriza por la pérdida total o parcial de
ya que la supervivencia de estos ejemplares se ve
melaninas
comprometida al aumentar su probabilidad se ser
phaeomelanina), dando como resultado la presencia
presa, reducir sus habilidades de caza o enfrentar
total o parcial de plumaje blanco, sin que la
dificultades a la hora de buscar pareja (Acosta-Broche,
pigmentación de otras partes del cuerpo se vea
61
en
el
plumaje
(eumelanina
y
afectada (Van Grouw, 2006; 2013). El leucismo se ha
correspondía a un ejemplar adulto con leucismo parcial
descrito en numerosos géneros de aves y tiende a ser
(figura 1). El ave presentaba modificaciones al patrón
más común en aves sociales o de crianza comunitaria
normal descrito para la especie (Jaramillo, 2013;
(Forrest y Naveen, 2000).
Boersma et al., 2013), principalmente en la zona dorso craneal del plumaje: La corona era totalmente blanca y
Dentro del orden Sphenisciformes, a la fecha existen
se encontraba fusionada con ambas cejas (lista
registros de alteraciones de pigmentación en pingüino
supraciliar). La banda pectoral superior era de
rey (Aptenodytes patagonicus) en la Isla Marion,
tonalidad
pingüino real (Eudyptes schlegeli) en la Isla Macquarie,
café
grisácea
en
lugar
del
negro
característico. Dorso, lomo y rabadilla eran de
pingüino adelaida (Pygoscelis adeliae) en el mar de
coloración café grisáceo, incluyendo zonas blancas. El
Ross, pingüino papúa (Pygoscelis papua) en la base
pico, ojos, lorum, tarso y pie mantenían la coloración
antártica chilena Gabriel González Videla (Forrest y
normal para la especie. Al encontrarse en buenas
Naveen, 2000) y pingüino macaroni (Eudyptes
condiciones, fue trasladado por SERNAPESCA a
chrysolophus) en la Isla Marión (Carpenter-Kling et al.,
Fundación Mundomar.
2017). Respecto al género Spheniscus, Trainsel et al (2018) informan leucismo parcial en ejemplares de
Hasta
pingüino del cabo (S. demersus). Para el pingüino de
corresponde al primer caso
Magallanes Fuentes
reportado para la especie en las costas de la región del
y González-Acuña (2011)
informaron de de leucismo parcial en un individuo de
donde
tienen
información
los
autores,
de leucismo parcial
Biobío.
pingüino de Magallanes, reportado en isla Magdalena, Agradecimientos
Estrecho de Magallanes, mientras que Petry et al. (2017) informaron de un ejemplar juvenil el Sur de
Valeria Astorga (SERNAPESCA Biobío), Patricio Ulloa
Brasil con esquizocroismo phaeo.
(SERNAPESCA Biobío) Betsy Pincheira (AMEVEFAS).
Caso clínico En diciembre de 2018, personal de SERNAPESCA Biobío capturó un ejemplar adulto de pingüino de Magallanes encontrado en la Comuna de Coronel (37°01′00″S 73°08′00″O), que presentaba una inusual coloración de plumaje. Fue ingresado al Centro de Rehabilitación de Fauna Silvestre de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad San Sebastián de la sede Tres Pascualas (CEREFAS-USS Concepción). Luego del examen clínico, se determinó que el individuo
62
Tablas e ilustraciones Tabla I. Principales aberraciones de pigmentación descritas para aves (Fuentes y González-Acuña 2011). Aberración de pigmentación Características
Albinismo
Plumaje totalmente blanco, iris rojo (ausencia total de pigmentos)
Leucismo
Plumaje total o parcialmente blanco, manteniendo color en otras estructuras (pico, pies)
Esquizocroismo phaeo
Plumaje carece de pigmentos negros u oscuros (Disminución o desaparición de eumelanina)
Esquizocroismo gris
Plumaje carece de pigmentos café-rojizo (Disminución o desaparición de phaeomelamina)
Dilución
Plumaje pálido debido a la reducción en concentración de pigmentos
Melanismo
Plumaje negro (Aumento de eumelanina)
63
Figura 1. Ejemplar de pingĂźino de Magallanes ingresado al CEREFAS-USS con cuadro de leucismo parcial (A y C) comparado con un pingĂźino de la misma especie con plumaje normal (B y D).
64
Referencias bibliográficas Jaramillo, A. (2013). Aves de Chile. Lynx, Barcelona.
Acosta-Broche, L. (2005). Primer caso conocido de leucismo parcial en Tiaris olivacea en Cuba. HUITZIL, Revista Mexicana de Ornitología, 6(2), 14-15.
López-González C. A. (2011). Record of a white-colored coyote (Canis latrans) in the Chihuahuan Desert of Durango, Mexico. Acta Zoológica Mexicana, 27, 871- 873.
Carpenter-Kling T., Dyer B., Makhado A. y·Pistorius P. (2017). Plumage aberrations in Macaroni Penguins Eudyptes chrysolophus at subAntarctic Marion Island. Polar Biol, 40(9), 1907– 1911.
Petry M. A., Costa L., Fontoura V. y Bandasz G. (2017). Brown plumage aberration records in kelp gull (Larus dominicanus) and magellanic penguin (Spheniscus magellanicus) in southern Brazil. Revista Brasileira de Ornitologia, 25(2),125-127.
Boersma D. P., Frere E., Kane O., Pozzi L., Pütz K., Raya A., Rebstock G., Simeone A., Smith J., Van Burden A., Yorio P. y García-Borboroglu P. (2013). Magellanic penguin (Spheniscus magellanicus). En García-Borboroglu P. y Boersma D. P. Penguins natural history and conservation. Seattle y Londres: University of Washington Press.
Traisnel G., Picheguru L., Visser H.G. y Edwars L.C. (2018) Colour aberrations in African Penguins Spheniscus demersus. Marine Ornithology, 46, 19–22. Van Grouw H. (2006). Not every white bird is an albino: Sense and nonsense about color aberrations in birds. Dutch Birding 28, 79-89.
Forrest S. C. y Naveen R. (2000). Prevalence of leucism in pygocelid Penguins of the Antarctic peninsula. Waterbirds, 23 (3), 283-285.
Van Grouw H. (2013). What colour is that bird? British Birds,106: 17-29
Fuentes D. y González-Acuña D. (2011). Aberraciones cromáticas del plumaje en aves: Nuevos reportes en Chile. Boletín Chileno de Ornitología, 17(2), 113-121.
65
Instrucciones para los autores. Información general
●
Reporte de caso: Este tipo de artículo debe incluir al menos 10 artículos en las
La
Revista
de
Medicina
Veterinaria
e
referencias. No debe exceder las 2000
Investigación (Rev. med. vet. investig.) publica
palabras tanto en español como en
semestralmente
portugués y 1500 en inglés.
contribuciones
científicas
originales del tipo artículo científico, artículo de revisión, comunicación breve y reporte de casos en idioma español, inglés y portugués, en todas las
Normas de autor
áreas de las ciencias veterinarias. Solo se aceptarán manuscritos que no hayan sido
Los manuscritos deberán ser enviados en formato
publicados en otras revistas y en la cual todos sus
word.doc a los editores al correo electrónico
autores hayan aprobado la versión del manuscrito.
meveditorial@uss.cl.
El
responsable de la
correspondencia
Formato de contribuciones ●
apellido
del
autor deberá
aparecer en el nombre del archivo (Ej: Soto.doc).
Artículo científico: Este tipo de artículo
Proceso de revisión
debe incluir al menos 30 artículos en las
●
●
referencias. No debe exceder las 5000
El proceso de revisión consta de 4 etapas
palabras tanto en español como en
correlativas: 1) Evaluación preliminar del tema,
portugués y 4500 en inglés.
calidad y presentación del manuscrito, a cargo de
Artículo de revisión: Este tipo de artículo
los Editores. 2) Evaluación del contenido, a cargo
debe incluir al menos 60 artículos en las
de 2 miembros del Comité Editorial y 2 del Comité
referencias, no considerando libros o
Científico. 3) El dictamen sobre el manuscrito
capítulos de libros. este tipo de artículo
podrá ser: I- Rechazado sin opción de ser enviado
no debe exceder las 7000 palabras tanto
nuevamente. II- Evaluado con correcciones
en español como en portugués y 6500 en
mayores, que deberán ser nuevamente revisadas
inglés.
por los mismos examinadores. III-Evaluado con
Comunicación breve: Este tipo de
correcciones
artículo debe incluir al menos 10 artículos
correcciones. 4) El autor tendrá un plazo de 4
en las referencias. No debe exceder las
semanas para enviar las correcciones del
2500 palabras tanto en español como en
manuscrito o argumentando la no aceptación de
portugués y 2000 en inglés.
los mismos.
66
menores.
IV-
Aceptado
sin
Se debe incluir una carta a los Editores, firmada
De la forma
por todos los autores, señalando expresamente
Los trabajos deben ser escritos en formato tamaño
que el manuscrito ha sido leído y aprobado y que
carta, letra Calibri 12, espacio 1,5 líneas, con
no ha sido publicado total o parcialmente o
márgenes laterales de 2.5 cm. El trabajo debe ser
enviado simultáneamente a otra revista. El autor correspondiente
puede
sugerir
hasta
organizado de acuerdo a lo siguiente: Título,
tres
Resumen y Palabras Clave en español (El resumen
revisores y se deben señalar los conflictos de
en inglés o portugués será traducido al español),
interés.
Introducción, Materiales y Métodos, Resultados, En aquellos artículos que correspondan a
Discusión,
resultados obtenidos en memoria de título, el
Bibliográficas. Los Resultados y Discusión pueden
alumno memorista se considerará como primer
ser combinados.
autor. A fin de promover la publicación por parte
opción de ir como autores principales en el caso
●
de que quieran publicar su tesis en formato
autor o autores, señalando el autor
mayor interés en la publicación, y mediante un
correspondiente con su mail, filiación.
poder simple, autorizara al profesor guía a ser el artículo,
quedando
Título: En el idioma que corresponda. Los
traducción para el español. El nombre del
secundario. En el caso que el estudiante no tenga
del
Referencias
trabajos en inglés o portugués con
artículo, quedando el profesor guía como autor
principal
y
Cada trabajo deberá presentar
de los estudiantes, estos tendrán la primera
autor
Agradecimientos
Aquellos trabajos que se hayan realizado
el
con fondos de concurso público o
estudiante como autor secundario. En el caso que
privado, deben señalar el patrocinio al
el profesor quiera publicar un artículo en base a
pie de la página.
una serie de tesis de las que fue profesor guía, este
●
podrá ir como autor principal siempre que los
Resumen: En el idioma que corresponda, no excediendo 300 palabras. Deberá
estudiantes lo autoricen mediante un poder
constar de al menos 3 Palabras clave. Los
simple, quedando estos como autores secundarios
trabajos en inglés o portugués con
de dicho artículo
traducción para el español. ●
En caso de que un docente de la Facultad de
Resumen en inglés (Abstract): En todos los trabajos se debe incluir un resumen
Medicina Veterinaria San Sebastián desee enviar
en inglés con las palabras clave en el
un artículo, este será excluido temporalmente del
mismo idioma. No debe exceder 250
comité editorial y/o comité científico que revisara
palabras.
dicho artículo en particular, con el fin de evitar conflictos de interés.
67
●
●
●
Texto: Introducción, Material y Método,
publicación, punto, título del artículo, punto,
Resultados y Discusión.
nombre completo de la revista en itálica, volumen,
Tablas e ilustraciones: Tablas numeradas
dos puntos y páginas separadas por un guion. El
con números romanos e ilustraciones con
nombre de la revista se escribe completo y en
números arábicos, deberán estar en
itálica. Aquellas publicaciones que cuenten con
hojas separadas del texto.
número Doi debe ser incluido. Ejemplo:
Imágenes: Deben estar en formato JPJ. Henríquez, A.; Landaeta-Aqueveque, C. A. y
Pueden ser enviadas en color o en blanco
Larenas, J. 2012. Cinética del algor mortis:
y negro. Para la reproducción de las
Primeros pasos para estimar data de
ilustraciones, se aceptarán solamente
muerte en animales. Archivos de Medicina
buenos diseños a trazo. Las abreviaturas
Veterinaria
utilizadas en las figuras deben ser
doi:
10.4067/S0301-732X2013000100013
definidas en la leyenda y deben coincidir
●
45(1):77-81.
exactamente con las utilizadas en el
Los libros o publicaciones no periódicas seguirán
texto.
el siguiente formato: Autor, año. Título. Editor y/o
Agradecimientos.
editorial. Ciudad de edición. Ejemplo: Bonacic, C.; Leichtle, J. y Ohrens, O. 2015. El puma
Referencias bibliográficas
del altiplano de Tarapacá. Fauna Australis. Deben incluirse artículos de revistas científicas
Santiago de Chile.
publicados recientemente (10 años o menos), a Si es capítulo de libro debe ir: Autor. Año. Título
menos que su importancia justifique el uso de
del capítulo: páginas del capítulo. «En:» Editor/es
artículos de años anteriores. Solo pueden citarse artículos
ya
publicados
(No
se
seguido de (ed/s.), Título del libro. Editorial,
permiten
Ciudad de edición. Ejemplo:
referencias de artículos simplemente enviados).
Novoa, F; Leichtle, J.; Ossa, G y Bonacic, C. 2016.
Las referencias deben ser estar en orden
Fauna nativa en el valle central de la Región
alfabético. Para las publicaciones periódicas el
de O´Higgins: 46-87. En: Muñoz, A.;
formato a seguir será: en primer lugar el apellido
Arellano, E. y Bonacic, C (ed.), Manual de
del primer autor, coma, seguido por las iniciales de
conservación de biodiversidad en predios
su nombre seguidas por un punto y sin espacios
agrícolas de Chile central. Fauna Australis.
entre las iniciales; luego el apellido del siguiente
Santiago de Chile.
autor seguido por las iniciales de los nombres; los autores se separan con puntos y comas y el último
Si es un recurso publicado en internet, y
con “y”. Luego del último autor punto, año de
suficientemente reconocido como material válido
68
de consulta debe ir: Autor, año. Título. Versión
corresponder a sus leyendas. Se permite el envío
(fecha de la versión si la tuviere). «Disponible en:
de imágenes en color. En el texto deben citarse
» (dirección http://). Último acceso: (fecha de la
con la primera letra en mayúscula y abreviado. Ej:
última visita a la página o al recurso). Ejemplo:
Sólo en un sitio no fue registrada ninguna especie (Figura 1).
Frost, D.R. 2014. Amphibian Species of the World: an
Online
Reference.
Version
Disponible
6.0.
CARGOS DE PUBLICACIÓN
en:
El envío de manuscritos para revisión, así como su
http://research.amnh.org/herpetology/am phibia/index.html.
Último
acceso:
publicación, es gratuito.
12
diciembre 2014.
OTRAS DIRECTRICES IMPORTANTES
Resúmenes de Congreso, Jornadas o Reuniones
Nombres
que no hayan sido publicados en revistas
Animales y vegetales en el resumen y texto debe
periódicas o Anales de Congresos que posean ISBN
incluir nombre común y científico (en cursiva).
o ISSN no serán considerados como citas y
Confirme la nomenclatura en una fuente confiable
deberán indicarse en el cuerpo del texto como
y actualizada.
científicos:
Primera
mención
de
comunicaciones personales o datos no publicados. Número: En el texto, los números del uno al nueve se escriben en su totalidad, excepto cuando
Leyendas de Tablas y Figuras
incluyen unidades de medida o se mencionan Deben referirse primero las Tablas y luego las
varios números, por ejemplo, "seis eventos de
Figuras.
riego", "6, 9 y 12 eventos de riego" o "8 kg" ". Para o
separar los números en intervalos de uno o más
alfanuméricos. Deben ser elaboradas utilizando un
años, use un guion (por ejemplo, período de 2002
editor de texto que permita construir tablas y no
a 2005).
Tablas:
comprenden
datos
numéricos
utilizar tabulaciones ni espaciados para separar
Abreviaciones y símbolos: Si bien ahorran espacio
columnas. No incluya líneas verticales. En el texto
y tiempo, su uso excesivo puede hacer que el texto
deben citarse con la primera letra en mayúscula.
sea más difícil de entender. Algunas abreviaturas
Ej.: Las especies se distribuyen diferencialmente
no
en sectores bajos o altos (Tabla I).
necesitan
ser
definidas
porque
son
ampliamente utilizadas y conocidas, como las unidades SI o los elementos químicos. Todas las
Figuras: Comprenden los dibujos, mapas, gráficas
abreviaturas deben escribirse en su totalidad en su
o fotos. Como originales se aceptarán imágenes
primera mención del Resumen, texto, tablas y
digitalizadas con un mínimo de 300 ppp y en
figuras.
formato JPG. La numeración de las figuras debe
69
Hora: Use el sistema horario de 24 horas con dos dĂgitos para ambas horas y minutos (por ejemplo, 14:30 h en lugar de 2:30 p. M.).
70
Lista de comprobación de envíos Como parte del proceso de envío, los/as autores/as se comprometen a cumplir con todos los criterios que se nombran a continuación. Además, los/as autores/as aceptan que los envíos que no cumplan con estas indicaciones pueden ser devueltos y/o rechazados por el Comité Editorial de la revista. 1.
El trabajo presentado cumple con las Normas de Autor.
2.
El trabajo no ha sido publicado en ningún medio y no será enviado a otra revista científica o a cualquier otra forma de publicación, mientras dure la evaluación en Revista de Medicina Veterinaria e Investigación.
3.
Todos los autores son responsables del contenido del artículo.
4.
Todos los autores manifiestan tácita o explícitamente si hubo o no, conflicto de intereses.
5.
Se ha cumplimentado el listado de verificación antes del envío del material.
71
72
73
74
Volumen 2 –Número 1- 2019
Contenido Editorial ......................................................................................................................................................... 6
Articulos originales Prevalencia de osificación de cartílagos colaterales de la tercera falange en caballos chilenos de un club de rodeo de la comuna de Coronel (Chile) Isadora Adams e Hipólito Chávez................................................................................................................. 7 Prevalencia de huevos de parásitos gastrointestinales en caballos de Isla Mocha, Arauco (Chile) Luis Salgado-Zambrano e Hipólito Chávez. ................................................................................................. 21 Relación de actividad sérica de glutamato deshidrogenasa y transaminasas en vacas de carne clínicamente sanas de la comuna de Coelemu, Región de Ñuble. Carolina Andrea Velásquez-Valdenegro y Marcos Pedreros ...................................................................... 33 Análisis de variabilidad de la glicemia a distintos tiempos post extracción con los anticoagulantes heparina de litio, fluoruro de sodio y citrato sódico en perro y gato doméstico Alessandra Ayala-Pío y AnaLía Henríquez. .................................................................................................. 41
Reporte de casos Reporte de leucismo parcial en ejemplar de pingüino de Magallanes (Spheniscus magellanicus) de la región del Biobío, Chile. Jorge Leichtle .............................................................................................................................................. 61
Instrucciones para los autores. ................................................................................................................... 66 Lista de comprobación de envíos................................................................................................................ 71
75