ISSN 0719-9457 Versión en línea
Volumen 1 –Número 1
Abril 2018
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Revista de Medicina Veterinaria e Investigación es publicada en forma semestral por la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad San Sebastián.
Volumen 1, Número 1, abril de 2018. ISSN:
0719-9457 Versión en línea.
Dirección:
Lientur 1457, Concepción, Región del Biobío, Chile.
Teléfono:
+56 41 248 7500
Correo electrónico:
meveditorial@uss.cl
Editores:
AnaLía Henríquez: ana.henriquez@uss.cl Jorge Leichtle: jorge.leichtle@uss.cl
Página web:
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Revista de Medicina y Ciencias Veterinarias estará bajo licencia Creative Commons 3.0 (CC BY-NC-ND), autorizando la publicación del contenido, siempre y cuando sea correctamente citada su fuente y autoría.
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ISSN: 0719-9457 Versión en línea ________________________________________________________________________________ Volumen 1
Número 1
Abril de 2018
________________________________________________________________________________
EDITORES
AnaLía Henríquez, MV, Dr. (Universidad San Sebastián) Jorge Leichtle, MV, MSc. (Universidad San Sebastián)
COMITÉ EDITORIAL
Antonio Bizama, MV, MSc. (Universidad San Sebastián) Claudio Báez, MV, MSc. (Universidad San Sebastián) Claudio Cerda, MV, MSc. (Universidad San Sebastián) Frank Vera, MV, MSc. (Universidad San Sebastián) Guillermo Santibañez, MV, MSc. (Universidad San Sebastián) Hipólito Chávez, MV, MSc. (Universidad San Sebastián) René Garcés, MV, Dr. (Universidad San Sebastián)
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COMITÉ CIENTÍFICO
Alfonso Sánchez Riquelme, MV, MSc. (Universidad de las Américas) Carlos Landaeta-Aqueveque, MV, Dr. (Universidad de Concepción) Edson Montero, MV, MSc. (Universidad San Sebastián) Esperanza Beltrami, MV, MSc. (Universidad Austral) Luis Riquelme, MV, MSc (C). (Universidad San Sebastián) Marcela Cabrera, MV, MSc. (Universidad San Sebastián) Marcos Pedreros, MV, MSc. (Universidad San Sebastián) Margarita Romero, MV, MSc. (Universidad San Sebastián) Óscar López Sandoval, MV, MSc. (Universidad Santo Tomas) Patricia Escárate, MV, MSc. (Universidad Iberoamericana de Ciencias y Tecnología) Patricio Guzmán, MV, MSc. (Universidad San Sebastián)
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Editorial Estimados Colegas, con mucho agrado les presento el primer volumen de la Revista Medicina Veterinaria e Investigación, formato digital, de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad San Sebastián, con sedes en las ciudades de Concepción y Puerto Montt.
La facultad desde sus inicios planificó las etapas de su desarrollo estratégico, siendo prioritario consolidar el pregrado y obtener certificación oficial de calidad, a través de la acreditación, para lo cual se sometió al proceso en dos oportunidades, el año 2012 y obtuvo 5 años de acreditación y el año 2017 obteniendo 7 años de acreditación.
Luego de esta trascendente etapa inició el desarrollo del postgrado, teniendo vigentes en la actualidad tres programas de Magíster en Medicina Veterinaria: mención Salud de Salmónidos (sede Puerto Montt), mención Clínica de Pequeños Animales (sede Concepción) y mención en Calidad e Inocuidad de los Alimentos de Origen Animal y Gestión de la Empresa Alimentaria (sede Concepción).
Posteriormente, fiel a su misión y coincidente con el quincuagésimo aniversario de la Facultad, se decide potenciar el desarrollo de la investigación, creando la presente revista, con el objeto de fomentar la investigación y difundir el conocimiento científico.
Al entregar a la comunidad científica este primer volumen, es propicia la ocasión para agradecer a todos quienes han colaborado en su creación y, en forma muy especial, a los autores que han confiado en nuestra revista como medio de difusión de sus investigaciones.
Dr. Alvaro Berríos Salas Decano Facultad de Medicina Veterinaria Universidad San Sebastián
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Contenido Editorial.......................................................................................................................................................................... 5 Artículos originales Determinación de agregaciones espacio-temporales de murciélagos y casos de virus rábico mediante el método de Knox en las comunas de Concepción, Chiguayante y San Pedro de la Paz en el período 2014-2016. Catalina Sáez y Claudio Báez-Beltrán. ............................................................................................................................. 7 Determinación de la presencia de huevos de helmintos en lodos provenientes de una planta de tratamiento de aguas servidas de la comuna de Coronel, región del Biobío. Carla Rodríguez-Gajardo, Claudio Báez-Beltrán y Juan Gonzalo Monroy ................................................................... 26 Estimación de la prevalencia de Giardia spp. mediante análisis coproparasitológico seriado en perros clínicamente sanos de la ciudad de Lota (Chile), periodo enero -marzo 2017. Dariel Monsalves, Claudio Báez-Beltrán y Juan Gonzalo Monroy................................................................................ 45 Determinación del fierro sérico en perros no anémicos con y sin policromasia en el Hospital Clínico Veterinario de la Universidad San Sebastián sede Concepción. Constanza Hervera-Riffo, Antonio Bizama y Juan Gonzalo Monroy ............................................................................ 60 Estudio comparativo de doppler tisular en anillo mitral lateral y septal en caninos cardiópatas severos ISACHC Clase IIIA estabilizados bajo control farmacológico.. Francisca I. Martinez-Santos y Edson F. Montero ........................................................................................................ 74 Artículos de revisión Análisis de registros de ataques a fauna silvestre chilena por carnívoros domésticos perro (Canis lupus familiaris) y gato (Felis silvestris catus) entre los años 2000 y 2016.. Rommi Barrera ............................................................................................................................................................. 92 Reporte de casos Adaptación de osteotecnia para el montaje de un ejemplar de Delfín de Risso Grampus griseus (Cuvier, 1812). Luis Riquelme, Roberto Abarzúa y Jorge Leichtle....................................................................................................... 102 Instrucciones para los autores. ................................................................................................................................. 109 Lista de comprobación de envíos ............................................................................................................................... 113
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Rev. med. vet. Investing. 1(1):7-25, 2018 Artículo original
Determinación de agregaciones espacio-temporales de murciélagos y casos de virus rábico mediante el método de Knox en las comunas de Concepción, Chiguayante y San Pedro de la Paz en el período 2014-2016. CATALINA SÁEZ1 y CLAUDIO BÁEZ-BELTRÁN1 1
Facultad de Medicina Veterinaria. Universidad San Sebastián, Concepción, Chile.
CATALINA SÁEZ: cata_2oo9@hotmail.cl
Resumen Los quirópteros, más conocidos como murciélagos, representan aproximadamente el 20% de todas las especies de mamíferos presentes en el mundo y su principal importancia en salud pública radica en ser reservorio del virus rábico. El objetivo de este estudio fue determinar la existencia de agregaciones espaciales y temporales de murciélagos, y casos positivos a virus rábico en las comunas de Concepción, Chiguayante y San Pedro de la Paz, durante el periodo febrero 2014 a marzo del 2016. Para tales efectos, se obtuvieron los datos de capturas de murciélagos del período indicado, directamente de la Unidad de Zoonosis de la Seremi de Salud de Concepción, para luego proyectar su ubicación en un mapa digital de la ciudad, utilizando el software Google Earth y posteriormente ser procesados utilizando en método de Knox a través del programa Epidat. De 85 capturas de murciélagos analizadas, 8 resultaron positivas a virus rábico, lo que representa una prevalencia de 9,4% (IC95% 2,6-16,2%). En relación con la distribución espacial de las capturas de murciélagos, un 54% se localizó en el cuadrante I (nororiente), lo que coincide con lo reportado por otros autores nacionales. Se evidenciaron asociaciones espacio-temporales a 30, 90 y 180 días y 1 kilómetro de distancia espacial crítica, sólo para la presencia de murciélagos, mientras que para capturas positivas a virus rábico, sólo se registró agregación espacio-temporal cuando la distancia temporal crítica fue de 30 días (p<0,05). Los resultados permiten concluir que, si bien los murciélagos en Concepción tienden a agruparse en determinadas áreas de la ciudad, este patrón no se evidencia entre individuos positivos a virus rábico, no obstante, la condición de endemia del virus en los quirópteros. Palabras clave: Murciélagos, agregaciones, rabia, Knox
Abstract Bats represent approximately 20% of all mammal species present in the world and their main importance in public health lies in being a reservoir of rabies virus. The objective of this study was to determine the existence of spatial and temporal clusters of bats and positive cases of rabies virus in the communes of Concepción, Chiguayante and San Pedro de la Paz during the period from February 2014 to March 2016. For this purpose, bat catch data were obtained from the indicated period, directly from the Zoonosis Unit of the Seremi de Salud de Concepción, to then project their location on a digital map of the city using Google Earth software and later be processed using the Knox
7
method through Epidat program. Of 85 catches of bats analyzed, 8 were positive for rabies virus, representing a prevalence of 9.4% (95% CI 2.6-16.2%). In relation to the spatial distribution of the catches of bats, 54% was in quadrant I (Northeastern), which coincides with the reports of other national authors. There were evidences of spatio-temporal associations at 30, 90 and 180 days and 1 kilometer of critical spatial distance, only for the presence of bats, whereas for positive rabies virus captures, only spatio-temporal clusters were recorded when the critical temporal distance was 30 days (p <0.05). The results allow to conclude that although bats in Concepción tend to cluster, in certain areas of the city, this pattern is not evident among individuals positive to rabies virus, despite the condition of endemic virus in chiroptera. Keywords: Bats, aggregations, rabies, Knox
Introducción
schnablii (insectívoras) (Ossa, 2010; Sierra y Rodríguez,
El orden Chiroptera, más conocidos como murciélagos,
2015). representa aproximadamente un 20% de todas las
Respecto de sus refugios, los murciélagos utilizan una
especies de mamíferos presentes en el mundo,
gran variedad de hábitats, sean estos naturales o
incluyendo más de 1.300 especies (Sierra y Rodríguez,
construidos por el hombre (Díaz y Linares, 2012). En
2015). La mayoría de los integrantes del orden
particular, T. brasiliensis (murciélago guanero, cola de
Chiroptera son insectívoros o frugívoros, existiendo sólo
ratón) y en general, todas las especies de la familia
tres
Molossidae,
especies
hematófagas:
Desmodus
rotundus
son
consideradas
como
especies
(vampiro común), Diphylla ecaudata (vampiro de patas
“antropofílicas”, debido a su notoria preferencia a
peludas) y Diaemus youngi (vampiro de alas blancas). De
utilizar edificaciones humanas como refugio diurno en
estas especies, la única que se encuentra en Chile, es
zonas urbanas y semi-urbanas (Rodríguez-San Pedro et
Desmodus rotundus con una distribución comprendida
al., 2014). Otros como el género Lasiurus, suelen habitar
entre las regiones de Tarapacá y Coquimbo (Uieda, 2014;
sitios naturales como bosques, pero también se les
Betancurth et al., 2015).
puede encontrar en cultivos frutales y viñedos.
Si bien Sudamérica posee una gran variedad de quirópteros, Chile tiene una baja diversidad específica, ya que sólo cuenta con 11 representantes de dicho
Normalmente
los
murciélagos
insectívoros
se
concentran en lugares húmedos, cercanos a fuentes de agua y alumbrados públicos, debido a la gran concentración de insectos que se produce (Ossa, 2010).
orden: Desmodus rotundus (hematófago), Platalina genovensium
(frugívoro
y
nectarívoro),
Myotis
A lo largo del mundo, los murciélagos tienen un
chiloensis, Histiotus macrotus, Histiotus montanus,
importante rol en diversos ecosistemas. Algunas plantas
Lasiurus borealis, Lasiurus cinereus, Mormopterus
dependen parcial o totalmente de ellos para polinizar
kalinowskii, Tadarida brasiliensis y Amorphochilus
sus flores y esparcir sus semillas, mientras que otros ayudan a controlar los insectos. Sin embargo, estos
8
mamíferos tienen también un papel especialmente
libre de rabia canina (variantes virales V1 y V2). Desde
perjudicial para la salud pública al ser transmisores del
1991, sólo se ha aislado virus rábico procedente de
virus de la rabia (Viveros, 2010; Betancurth et al., 2015;
murciélagos, es decir, del ciclo de rabia silvestre (Escobar
Bat Conservation Trust, 2016).
et al., 2014), caracterizando un patrón epidemiológico de endemia en murciélagos (Alvarado, 2010).
La rabia es una enfermedad zoonótica, provocada por un virus ARN del género Lyssavirus, el cual provoca una
La importancia de los murciélagos como reservorios del
infección aguda del sistema nervioso, cuyo resultado casi
virus rábico radica en que la infección en ellos, a
siempre es la muerte (Favi et al., 2011). La transmisión
diferencia de lo que ocurre en los mamíferos terrestres,
del virus puede ocurrir principalmente mediante el
no incrementa la mortalidad en la colonia; por el
contacto directo con saliva de un animal infectado o a
contrario, la colonia genera una gran respuesta
través de mordeduras, pero también se adquiere por
inmunitaria
medio de aerosoles, exposición a tejidos del sistema
aproximadamente 12 meses, lo que les permitiría
nervioso central, heridas en la piel y ocasionalmente por
permanecer como fuente del virus por largos períodos
ingestión
procesos
de tiempo (Carrera et al., 2006). Actualmente en el país
quirúrgicos como el trasplante de córnea (Iowa State
se describen 4 variantes genéticas de virus rábico
University, 2010; Berríos, 2016). Desde el punto de vista
transmitido por murciélago, que corresponden a los
epidemiológico es posible describir dos formas de rabia:
reservorios T. brasiliensis, Histiotus sp., Lasiurus sp. y M.
la rabia urbana o canina, en la que el perro es el principal
chiloensis (ISP, 2013).
de
material
contaminado
o
reservorio y transmisor del virus a los humanos, y la rabia silvestre, donde distintas especies tales como zorros, mapaches y murciélagos son sus transmisores (Núñez et al., 2012).
humoral
que
perdura
durante
Los quirópteros son animales muy sociables, forman colonias en sus refugios las que pueden llegar a un millón de individuos y utilizan vibraciones de la laringe para generar ondas de ultrasonido las que liberan aerosoles
En Chile, la rabia urbana ha experimentado una
que pueden transmitir la enfermedad al interior de la
disminución
colonia (Han et al., 2016).
significativa,
cambiando
su
patrón
epidemiológico, desde una forma endémica en la década de 1950 a 1960, con numerosos casos humanos y animales, a la presentación de casos esporádicos en la década de 1970 (Favi et al., 2011). Lo anterior es consecuencia de la instauración del programa nacional de prevención la rabia humana, el cual consistió en educar a la comunidad y realizar campañas masivas de vacunación, tanto en las personas expuestas como en la población canina (Laval y Lepe, 2008; Alvarado, 2010). Producto de lo anterior, el año 2010 el país es declarado
Además, el hecho de que los quirópteros desarrollaran huesos huecos (para reducir su peso y así facilitar el vuelo), conduce a la ausencia de médula ósea lo que limita la producción de linfocitos B, de esta forma, se cree que los murciélagos son capaces de conservar una gran cantidad de virus sin llegar a enfermarse (Han et al., 2016). Por otra parte, el murciélago tiene una gran facilidad para cambiar de localización constantemente y no posee muchos depredadores naturales, lo que
9
permite una alta distribución del virus (Allendorf et al.,
del virus, se identificó la variante viral asociada a T.
2012).
brasiliensis, por lo que se concluyó que este último fue la fuente de infección (ISP, 2015).
T. brasiliensis es un quiróptero insectívoro de mediano tamaño que se caracteriza principalmente por tener una cola que sobresale del uropatagio, además de realizar largos y rápidos vuelos. Es el murciélago más común de las áreas urbanas, ya que busca a los insectos que son atraídos por la luz de las ciudades (Carrera et al., 2006).
Durante el período 2010-2014, la Sección de Rabia recibió un total de 9.253 muestras de origen animal para la vigilancia de presencia de virus rábico. De dichas muestras, un 11,6% procedían de la región del Biobío, de las cuales 36 eran positivas a rabia, siendo 15 de éstas recibidas el año 2014 (ISP, 2015).
Actualmente, T. brasiliensis es el reservorio más
Un conglomerado o cluster se define como una
importante de virus rábico en centros urbanos y rurales
agregación inusual, real o percibida, de eventos de salud
de Chile, a pesar de haber otras especies de murciélagos
que se agrupan en el tiempo y el espacio (Idrovo,
involucradas (Favi et al., 1999; Yung, 2013; Berríos,
2000).El
2016).
conocimientos útiles para las intervenciones en salud
estudio
de
los
clusters
proporciona
pública, tales como el screening, la prevención y la Un estudio realizado por el Instituto de Salud Pública de Chile, entre los años 2008 y 2013, determinó que la incidencia del virus rábico fue notoriamente mayor en T. brasiliensis (91,3%) con 297 casos de un total de 325, mientras que el menor porcentaje (0,61%) se obtuvo en la especie M. chiloensis, con sólo 2 casos (Yung, 2013).
vigilancia epidemiológica. Por este motivo, se han desarrollado variadas pruebas estadísticas para la detección de conglomerados espaciales o espaciotemporales (Kirby et al., 2016).Las agrupaciones espaciotemporales ocurren cuando un número excesivo de casos se observan dentro de pequeñas ubicaciones
El último caso de rabia humana en Chile fue
geográficas, pero sólo por períodos cortos de tiempo
diagnosticado en agosto de 2013, situación que no
(McNally y Colver, 2008). Es decir, si muchos de los casos
ocurría desde 1996. Se trató de un joven de 24 años,
que están cerca en el tiempo están también cerca en el
procedente de Quilpué, el cual fue mordido por perros
espacio, o viceversa, entonces se habla de una
durante un paseo en motocicleta. Debido a la
interacción espacio-temporal; esto podría indicar que se
imposibilidad de muestrear a un ser vivo, no se logró
trata de una enfermedad infecciosa, como lo es la rabia,
identificar la variante antigénica del virus causante
o de un evento provocado por algún agente que aparece
(Berríos, 2013).
localmente en momentos específicos, como una
En cuanto a la rabia animal, el caso más reciente de rabia
intoxicación alimentaria (Kulldorff y Hjalmars, 1999).
fue diagnosticado en mayo de 2015, cuando la Sección Rabia del Instituto de Salud Pública (ISP) recibió una muestra de un perro de 3 meses de edad proveniente de la Región del Biobío, el cual presentaba un cuadro de encefalitis. Al realizar la tipificación antigénica y genética
El método de Knox es una de las pruebas más utilizadas para la detección de interacciones espacio-temporales. Se trata de una prueba que examina los intervalos de tiempo entre todas las parejas de eventos posibles, siendo su gran particularidad y ventaja que no es
10
necesario conocer las características ni el tamaño de la
referencia el norte real y un acercamiento de 54 km de
población a estudiar (Ministerio de Salud Pública de
altura respecto al terreno. Posteriormente, sobre el
Cuba, 1999; Federación de Enseñanza de CC.OO. de
plano
Andalucía, 2009). Sin embargo, este método cuenta
incluyendo todo el diámetro de las comunas de
también con un problema, ya que la estadística de Knox
Concepción, San Pedro y Chiguayante. La circunferencia
recoge cualquier tipo de interacción espacio-temporal,
se dividió en cuatro cuadrantes (a modo de sistema
sin distinguir si ésta se debe a la distribución cambiante
cartesiano) de 30 x 30 km de extensión y en 15
de la población o a los fenómenos relacionados con la
circunferencias concéntricas, con una distancia de 1 km
enfermedad (Kulldorff y Hjalmars, 1999).
entre ellas, quedando el origen ubicado en el centro del
digitalizado
Puente
Llacolén
se
trazó
una
(coordenadas
circunferencia,
36°49’57.37”
S;
73°04’29.36” O). En base a esta planimetría, se Material y Método
generaron cuatro ubicaciones territoriales (nororiente I,
Para la realización del estudio, a partir de los datos de
norponiente II, sur poniente II y suroriente IV) donde se
capturas de murciélagos proporcionados por la Seremi
georreferenció (latitud y longitud) la localización
de Salud del Biobío, se recolectó la siguiente
individual de cada una de las capturas y los resultados
información:
del análisis de la presencia de virus rábico, considerando el punto inicial del eje X en el extremo izquierdo y en el
-
Fecha de captura de la muestra (mes y año).
-
Lugar donde fue recolectada la muestra, especificada como latitud (X), longitud (Y) y
Utilizando el modo “Street view” de Google Earth, y a
datum
partir del registro de dirección y coordenadas entregado
(coordenadas
de
localización
por la Seremi de Salud, se determinó el tipo de
geográfica). -
eje Y el extremo superior (Figura 1).
Resultado
de
análisis
de
virus
rábico
procedente del Instituto de Salud Pública
edificación en la que fueron encontrados los murciélagos (vivienda, edificio, centro comercial, iglesia, otro).
(positivo / negativo) mediante la técnica oficial
El análisis estadístico de los datos se llevó a cabo
de inmunofluorescencia directa.
mediante
el
método
de
Knox
para
vigilancia
epidemiológica en salud pública, mediante el uso del Una vez obtenida dicha información, cada captura de
software Epidat v.3.11.
murciélago y su correspondiente resultado de análisis de
Para la aplicación del método de Knox, se contó con los
laboratorio del ISP, fue proyectada en un mapa digital de
siguientes datos:
la ciudad del gran Concepción (Concepción, Chiguayante y San Pedro de la Paz), utilizando el software Google
Las
coordenadas
espaciales
X
e
Y,
Earth. Para realizar la proyección de los hallazgos de
correspondientes a cada uno de los casos
murciélagos y georreferenciación de las coordenadas de
capturados durante el período de estudio, las
localización geográfica, en Google Earth se utilizó como
cuales se determinaron en el sistema cartesiano
11
descrito con anterioridad, tomando como origen el norte magnético y expresados en unidades de latitud y longitud asociadas a una distribución en el plano cartesiano.
Las fechas de ocurrencia de los casos (dd/mm/aaaa).
Por su parte, la distancia temporal es la diferencia, en valor absoluto, entre las fechas de ocurrencia de los dos casos:
El resultado de la prueba oficial de detección de virus rábico procedente del ISP.
A partir de estos valores se clasificaron los N(N-1) /2 Además, se definió la proximidad espacial y temporal. Para ello, se fijaron dos valores críticos e y t, los cuales representan, respectivamente, la distancia máxima
pares de casos en una tabla de doble entrada (2x2), según las cuatro posibilidades que existen, bajo el siguiente formato de entrada (Tabla I)
aceptada entre dos casos para que puedan ser considerados cercanos espacialmente (distancia espacial
El criterio de proximidad en cada dimensión se definió
crítica) y, el tiempo máximo entre la ocurrencia de dos
teniendo en cuenta la distancia espacial crítica e y la
casos para ser considerados próximos en tiempo
distancia temporal crítica t:
(distancia temporal crítica). Donde: -
e (distancia espacial crítica) correspondió a 1 Km.
-
t (distancia temporal crítica) correspondió a 1, 3 y 6 meses.
El valor de p de la prueba se calculó asumiendo una
El procedimiento consistió en calcular las distancias
distribución de Poisson
espaciales y temporales entre todos los pares de casos y,
que:
, de tal forma
a partir de los valores críticos establecidos, se definieron dos variables dicotómicas que expresan si un par de casos están o no próximos en el espacio y tiempo y, por ende, poseen nexo epidemiológico. Para calcular la distancia espacial entre dos casos (xi, yi)
La prevalencia de virus rábico en las capturas se determinó utilizando la siguiente fórmula:
y (xj, yj) se utilizó la distancia euclídea (la recta más corta que une dos puntos):
12
Los intervalos de confianza al 95% de la prevalencia
muestra los registros de capturas de murciélagos según
fueron calculados mediante la fórmula que se muestra a
ubicación geográfica en las comunas estudiadas. La
continuación, valor que fue adicionado y sustraído al
Tabla IV muestra los resultados de los análisis espacio-
valor de la prevalencia obtenida.
temporales mediante el método de Knox, utilizando una distancia espacial crítica de 1 km y distancias temporales críticas de 30, 90 y 180 días, respectivamente. En todos los casos analizados (30, 90 y 180 días) se observó
Donde:
la
existencia
de
agregaciones
espacio-
temporales (p < 0,05) en las capturas de murciélagos. E= Error La Tabla V muestra los resultados de los análisis espaciop= Prevalencia de la variable q= Complemento de la prevalencia n= Tamaño de la población Z α= Nivel de confianza
temporales de pares de capturas de murciélagos positivos a virus rábico, utilizando los mismos parámetros críticos de la Tabla IV. Únicamente a una distancia temporal de 30 días, se evidenció agregación espacio-temporal significativa (p < 0,05).
En todos los análisis se consideró una significancia de
La frecuencia y proporción de capturas según sector del
0,05, donde los resultados del valor de p calculado
plano de la ciudad y tipo de edificación, mostró un
menores que alfa (p < 0,05) fueron considerados
comportamiento homogéneo (p = 0,283), destacando en
significativos.
todos los sitios la mayor proporción de capturas en
Resultados De un total de registros de capturas de murciélagos (85
viviendas y edificios. Discusión
en total), todos pertenecientes a la especie T.
Los murciélagos son uno de los grupos de vertebrados
brasiliensis, analizados desde febrero 2014 a marzo del
menos estudiados en Chile; sin bien es cierto que a
2016, 8 resultaron positivos a virus rábico, lo que
contar del año 2013 se han duplicado las publicaciones
representa una prevalencia general de 9,4%. De ellas, 5
respecto a estos mamíferos (Rodríguez-San Pedro et al.,
corresponden al año 2014 y 3 al año 2016, tal como se
2016), existe un reducido número de estudios nacionales
muestra en la Tabla II. En relación con la distribución
respecto de su agregación espacial y temporal conjunta.
espacial de las capturas de murciélagos, la mayor cantidad (46) se localizó en el cuadrante I (nororiente),
Este estudio evidenció una prevalencia de virus rábico,
mientras que la menor (2), fue en el cuadrante II
en capturas de murciélagos efectuadas por de la Seremi
(norponiente). Se observó relación estadísticamente
de Salud de 9,4%, superior al 2,83% reportado por Favi
significativa (p < 0,05) entre el número y proporción de
et al. (2011), en una serie que comprendió los años 2000-
capturas y el cuadrante estudiado (Tabla III). La figura 2
2009 en la región Metropolitana. Cifras más cercanas
13
son publicadas por Alegría-Moran et al. (2017), quienes,
2014), siendo a su vez, esta especie, la de mayor
tras recolectar la información de 13.008 capturas de
incidencia dentro de las capturas (Favi et al., 2011).
murciélagos, obtenidas mediante vigilancia pasiva en todo Chile, reportan una prevalencia de 7,02%. Si bien esta discrepancia numérica, no es significativa, refleja la importancia de la región del Biobío en el aporte a la prevalencia nacional (ISP, 2015).
Sumado a lo anterior, la dieta insectívora de los quirópteros, especialmente compuesta por polillas (Lepidoptera), zancudos y mosquitos (Diptera), atraídos por las luces de la ciudad durante la noche, explicarían la mayor presencia de esta especie en áreas que presenten
Las diferencias parecieran estar influenciadas por la gran
estas características (Galaz y Yáñez, 2006). Gillam y
variación en el número de capturas realizadas, junto a la
McCracken (2007), reportaron que la búsqueda de
diversidad de especies analizadas; mientras que Favi et
alimento es uno de los principales factores que regulan
al. (2011) encontraron murciélagos de los géneros
la actividad de murciélagos insectívoros en un
Tadarida, Lasiurus, Histiotus y Myotis, siendo L. cinereus
determinado sector, quienes incluso pueden llegar a
el segundo reservorio más importante de virus rábico en
comer hasta la mitad de su peso en insectos durante la
el país (Favi et al., 1999; Favi et al., 2011; Yung, 2013;
noche (Lutz y Merino, 2011). Lo anterior es consistente
Berríos, 2016), en este trabajo, en cambio, sólo se
a lo descrito por Krauel y LeBuhn (2016), quienes
detectaron quirópteros pertenecientes a la especie T.
sostienen que la actividad de los murciélagos suele estar
brasiliensis.
directamente relacionada con la actividad y abundancia
Si bien L. cinereus se encuentra en la región del Biobío (Ossa, 2015), a diferencia de T. brasiliensis, este quiróptero no suele vivir en colonias, siendo más bien de hábitos solitarios, lo que dificulta el muestreo, además
de insectos, lo que, según el mismo estudio, se ve influenciado por la presencia de agua y bosques en las cercanías, condiciones claramente presentes en la ciudad de Concepción.
de preferir hábitats naturales por sobre los urbanos, lo
La agrupación de murciélagos dentro de un mismo
cual explicaría su ausencia en las capturas realizadas en
cuadrante, como se observa en la figura 2 y confirmada
la ciudad de Concepción (Jury, 2014).
por los resultados de la Tabla VI, puede deberse a un
La heterogénea distribución de quirópteros evidenciada en este estudio (donde el 54% de las capturas se concentró en la comuna de Concepción), puede ser explicada por la mayor densidad poblacional de este sector, respecto a las otras comunas (Instituto Nacional
compartimiento de refugios. Esta idea es apoyada por Díaz y Linares (2012), quienes sostienen que el refugio provee de beneficios tales como la reducción de su costo de termorregulación y de crianza, además de disminuir el riesgo de depredación.
de Estadística, 2017), lo que sumado a la preferencia de
Los hábitos migratorios de T. brasiliensis son conocidos
T. brasiliensis por zonas urbanas, a consecuencia de la
y frecuentemente descritos en la literatura (García,
utilización de las edificaciones humanas como refugio,
2006; Rodríguez-San Pedro et al., 2017). Cuando se
explicarían dicho hallazgo (Rodríguez-San Pedro et al.,
aproximan los meses invernales, gran parte de la colonia viaja a lugares más cálidos, quedando sólo unos poco
14
individuos en el refugio, en un estado de sopor profundo
donde el número de casos de rabia disminuye entre los
(Lutz y Merino, 2011). Dicha práctica es muy común en
meses de mayo y agosto (fines de otoño e invierno),
colonias de murciélagos dentro de muchas poblaciones
mientras que se incrementa durante los meses calurosos
de Norteamérica (Krauel y LeBuhn, 2016), en Chile, sin
(diciembre a marzo), lo que fue confirmado mediante la
embargo, no existen antecedentes sobre migraciones de
prueba de Ljun-Box (p<0,0001). Esto se explicaría por el
esta especie (Rodríguez-San Pedro et al., 2017), lo que
ya mencionado estado de sopor en el cual entran los
permitiría inferir que cuando una colonia se instala en un
murciélagos durante los meses fríos; al estar menos
refugio lo hace de modo permanente, más aún cuando
activos, se reduciría el contacto entre ellos y, por ende,
T. brasiliensis es el principal murciélago presente en
la posibilidad de trasmitirse enfermedades dentro de la
Chile (Favi et al., 1999; Yung, 2013; Berríos, 2016),
colonia o a otras especies susceptibles (Canals y Cattan,
explicando
2008).
así
la
agregación
espacio-temporal
observada en este estudio a 30, 90 y 180 días. Si bien Krauel y LeBuhn (2016) también reportaron una Como muestra la Tabla IV, a medida que se amplía la
mayor actividad de T. brasiliensis durante los meses
distancia temporal crítica, las agregaciones espacio-
calurosos (mayo a septiembre) y un notorio descenso al
temporales de quirópteros aumentan. Lo anterior puede
comenzar el invierno (diciembre) en el hemisferio norte,
ser explicado debido a que las ventanas temporales de
Pierson
menor duración incorporan en su análisis los meses
absolutamente
invernales como elemento único. Si se consideran los
actividad de esta especie durante el verano en el Presidio
hábitos de los quirópteros, los que enfrentados a las
de San Francisco.
y
Rainey
(1995)
contrarios,
obtuvieron registrando
resultados una
baja
bajas temperaturas y/o a la baja disponibilidad de insectos durante el período invernal, pasan a un estado de sopor (Muñoz, 2006) y, por lo tanto disminuyen su metabolismo y su actividad, de tal forma que en los meses invernales, se reduce la cantidad de capturas, siendo este hecho demostrado en los reportes del Instituto de Salud Pública (ISP, 2013;ISP, 2015). Por lo mismo, al ampliar la ventana temporal y así incluir los meses de verano en conjunto, se evidencia una mayor cantidad de agregaciones espacio-temporales, ya que en la época estival la concentración de insectos aumenta significativamente, lo que permite que los murciélagos
Los murciélagos positivos a rabia sólo se consideraron cercanos en tiempo y espacio cuando se consideró una distancia temporal crítica de 30 días (p<0,05), mientras que, al aumentar en 90 y 180 días, ya no se revelaron cercanías epidemiológicas significativas entre ellos (p>0,05). Esto puede explicarse gracias a la tendencia de los murciélagos de excluir a los integrantes enfermos de sus colonias; el animal afectado es capaz de desplazarse en un radio de 20 km o más, por lo cual el agrupamiento de la enfermedad no se limitaría exclusivamente a las zonas de colonización (Favi et al., 2011).
salgan a cazar con mayor frecuencia y se les vea en
Como muestra la Tabla III, de 85 capturas de
abundancia tanto en zonas rurales como urbanas (Favi
murciélagos, 46 se localizaron en el sector nororiente,
et al., 2011). De igual manera lo demuestra Alegría-
repitiendo esta tendencia con los quirópteros positivos a
Moran et al. (2017) en un estudio realizado en Chile,
virus rábico, donde de un total de 8, 6 se encontraron en
15
el sector ya mencionado. Esto coincidiría con los
afectados por la fragmentación de los bosques, lo que se
resultados obtenidos por Alegría-Moran et al. (2017) en
complementa con lo reportado por Rodríguez-San Pedro
la región Metropolitana, donde la mayoría de los casos
y Simonetti (2015), quienes sostienen que T. brasiliensis
positivos a virus rábico se localizaron en el sector oriente
no parece verse afectado por la fragmentación del
de la región, el cual correspondería a las áreas más
paisaje, posiblemente debido a que es una especie
pobladas.
adaptada a volar en espacios abiertos y no depende de zonas forestadas para forrajear. De hecho, los mismos
Lo mismo ocurriría en Valdivia, según Alvarado, en un estudio realizado en 2010, en el cual se evidenció que la mayoría de los murciélagos afectados por virus rábico se encontraban concentrados en el centro de la ciudad. Los casos correspondieron por excelencia a T. brasiliensis, a excepción de uno ocurrido en 2005, identificado como M. chiloensis.
autores mencionan que es muy común encontrar a esta especie en ambientes urbanos, áreas agrícolas e incluso en plantaciones forestales (Pinus radiata) en la zona central de Chile. Galaz y Yáñez (2006) mencionan que los murciélagos son animales muy sociales y de hábitos gregarios, pudiendo encontrar millones de individuos en un refugio. Esto
Segun nuestros resultados, más del 50% de los
provoca que haya una gran proximidad física entre ellos,
murciélagos capturados se encontraron en viviendas y
lo que podría aumentar la posibilidad de que el virus de
aproximadamente el 27% en edificios, lo que podría ser
la rabia se transmita con facilidad entre los integrantes
explicado por la tendencia
antropofílica de T.
de una colonia (Han et al., 2016). Sin embargo, según
brasiliensis, el cual utiliza habitaciones humanas como
Davis et al. (2012), la rabia tendría una baja
abrigo y acostumbra a vivir en tejados y piezas
transmisibilidad dentro de las colonias, debido a que
abandonadas, no así L. cinereus y H. macrotus, los que
únicamente
tienden a tener hábitos más bien solitarios (Galaz y
desarrollan la enfermedad. Por otra parte, afirma que las
Yáñez, 2006; Alegría-Moran et al., 2017). De hecho,
cepas virulentas resultan fatales para los murciélagos
según Loeb et al. (2009), las edificaciones de la ciudad
durante la fase centrífuga de la migración del virus, por
pueden proporcionar una mayor variedad de opciones
lo que éste no lograría alcanzar las glándulas salivales
de descanso que las que se encuentran en sectores no
antes de la muerte del murciélago, en consecuencia, no
urbanizados.
alcanzaría a ser transmisible. Por su parte, Han et al.
los
animales
inmunocomprometidos
(2016) sostienen dentro de su mismo estudio, que Según Ossa (2010), el aumento de casos de murciélagos positivos a virus rábico en algunas regiones, podría ser explicado por la urbanización intensiva, lo que conllevaría a la fragmentación de los bosques y, en consecuencia, a la pérdida de hábitats de quirópteros, lo que los obligaría a desplazarse hacia las zonas urbanas. Sin embargo, De Lucca et al. (2013) postulan que los
durante el invierno los murciélagos que hibernan, como es el caso de T. brasiliensis en Chile, disminuyen su tasa metabólica, lo que conseguiría suprimir la respuesta inmune y, por lo tanto, retrasar la eliminación del virus rábico de los murciélagos y así disminuir su trasmisión. Esto, complementado al hábito que tienen los murciélagos de exiliar a los integrantes enfermos, podría
murciélagos son los mamíferos que se ven menos
16
explicar el bajo hallazgo de agregaciones espacio-
non-hematophagous bats. Virus Res., 165(2), 119-
temporales al ampliar la ventana temporal, como se
125.
muestra en la Tabla V.
Alvarado, J. (2010). Situación actual de la rabia en Chile:
A lo anterior se suma el hecho de que los murciélagos
Ecoepidemiología. Diagnóstico y procedimientos
infectados
estar
frente a un posible contagio. (Memoria de Título
desorientados, lo que los lleva a volar de forma errática,
presentada como parte de los requisitos para optar
pudiendo incluso chocar con obstáculos, resultando
al título de Médico Veterinario). Universidad Austral
heridos en el trayecto (Galaz y Yáñez, 2006).
de Chile, Valdivia, Chile.
con
virus
rábico
tienden
a
Otra posible causa de una baja presentación de agregaciones
espacio-temporales
de
murciélagos
Bat Conservation Trust. (2016). Why bats matter. Recuperado de:
positivos a virus rábico, puede deberse a que la vigilancia
http://www.bats.org.uk/pages/why_bats_matter.html
de rabia en Chile se realiza de forma pasiva, es decir,
Berríos, P. (2013). Rabia en Chile: Caso humano – 2013.
mediante denuncias de la población. El monitoreo activo sólo comienza cuando se registra un espécimen
Hospitales veterinarios, 6(1), 5-9. Berríos,
P.
(2016).
Rabia.
Actualización
2016.
infectado y es llevado a cabo mediante un muestreo de
Recuperado de:
las colonias cercanas a la proveniencia de éste (Escobar
http://virusberriostechegaray.blogspot.cl/2016/07/r
et al., 2013). Así, una vigilancia netamente pasiva podría
abia-actualizacion-2016-patricio.html
provocar la omisión de capturas de quirópteros positivos
Betancurth, C., Lengua, C. y Calderón, A. (2015).
a virus rábico. Además, como se indicó, los murciélagos
Determinación del virus rábico en murciélagos
tienden a exiliar a los integrantes enfermos, pudiendo
hematófagos del Alto Sinú (Córdoba, Colombia).
ser capturados en una localización lejana a su colonia y,
Veterinaria y Zootecnia, 9(1), 87-98.
por lo tanto, inducir un fallo en la consecuente vigilancia
Carrera, N., Quevedo, N., Urbieta, S., San Miguel de Vera, MC. y Irala, L. (2006). Rabia en murciélagos frugívoros
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virus
distribution
in
tissues
and
experience of measures toward bats after the halt of
17
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20
Tablas e ilustraciones
I Figura 1. Sistema de radiales y plano cartesiano para georreferenciación de capturas de murciélagos en el período de febrero 2014 a marzo 2016.
Figura 2. Mapa de distribución geográfica de murciélagos capturados durante el período 2014-2016 en la ciudad de Concepción (San Pedro, Chiguayante y Concepción).
21
Tabla I. Contingencia para la determinación de agregaciones espacio-temporales en el período de febrero 2014 a marzo 2016.
Casos cercanos en el tiempo
Cercanos
Sí
No
Total
Sí
A
B
A+B
No
C
D
C+D
Total
A+C
B+D
espacialmente
n= A+C+B+D
A: Murciélagos cercanos en tiempo y espacio B: Murciélagos cercanos sólo en espacio C: Murciélagos cercanos sólo en tiempo D: Murciélagos sin cercanía de ningún tipo
22
Tabla II. Prevalencia e intervalo de confianza al 95% de virus rábico en registros de capturas de murciélagos en las comunas de Concepción, San Pedro y Chiguayante, período 2014-2016. Capturas Año
positivas (n)
Capturas negativas
Capturas
(n)
totales (n)
Prevalencia (IC 95%)*
2014
5
52
57
8,8% (2,9- 19,2)
2015
0
14
14
0,0% (0,0- 23,1)
2016
3
11
14
21,4% (4,6- 50,7)
Total
8
77
85
9,4% (2,6-16,2)
٭Intervalo de confianza al 95%. Límites inferior y superior.
Tabla III. Distribución del registro de capturas de murciélagos en la ciudad de Concepción, según cuadrante, periodo 2014-2016.
Cuadrante
Capturas totales (n)
Frecuencia relativa (%)
I
46
54%
II
2
2%
III
15
18%
IV
22
26%
Total
85
100%
Valor de p
<0.05
23
Tabla IV. Determinación de agregaciones espacio-temporales de capturas de murciélagos, según el método de Knox, utilizando parámetros críticos de 1 km. y 30, 90 y 180 días, período febrero 2014 a marzo 2016, comunas de San Pedro, Chiguayante y Concepción.
Pares cercanos en el tiempo 30 días
Pares cercanos
90 días
180 días
Sí
No
Sí
No
Sí
No
Sí
64
274
121
217
194
144
No
416
2816
882
2350
1570
1662
en el espacio (1 km)
Valor p
0,0054
0,0057
0,0221
Tabla V. Determinación de agregaciones espacio temporales de capturas de murciélagos positivas a virus rábico, según el método de Knox con parámetros críticos de 1 km y 30, 90 y 180 días. Período febrero 2014 a marzo 2016, comunas de San Pedro, Chiguayante y Concepción.
Pares cercanos en el tiempo 30 días
Pares cercanos
90 días
180 días
Sí
No
Sí
No
Sí
No
Sí
2
0
2
0
2
0
No
1
25
4
22
5
21
en el espacio (1 km)
Valor p
0,0199
0,0694
0,0902
24
Tabla VI. Distribución de capturas de murciélagos según tipo de edificación y cuadrante.
Sector
Edificación
Total
I
II
III
IV
n (%)
n (%)
n (%)
n (%)
n (%)
Viviendas
21 (45,7%)
2 (100%)
6 (40%)
15 (68,2%)
44 (51,8%)
Edificios
12 (26,1%)
0 (0,0%)
8 (53,3%)
3 (13,6%)
23 (27,1%)
Centros
3 (6,5%)
0 (0,0%)
0 (0,0%)
0 (0,0%)
3 (3,5%)
Iglesias
0 (0,0%)
0 (0,0%)
0 (0,0%)
0 (0,0%)
0 (0,0%)
Otros
7 (15,2%)
0 (0,0%)
0 (0,0%)
2 (9,1%)
9 (10,6%)
3 (6,5%)
0 (0,0%)
1 (6,7%)
2 (9,1%)
6 (7,1%)
46 (100%)
2 (100%)
15 (100%)
22 (100%)
85 (100%)
comerciales
Sin visualización Total
25
Rev. med. vet. Investing. 1(1):26-44, 2018 Artículo original
Determinación de la presencia de huevos de helmintos en lodos provenientes de una planta de tratamiento de aguas servidas de la comuna de Coronel, región del Biobío. CARLA RODRÍGUEZ-GAJARDO1*, CLAUDIO BÁEZ-BELTRÁN1 y JUAN GONZALO MONROY1 1
Facultad de Medicina Veterinaria. Universidad San Sebastián, Concepción, Chile.
Carla Rodríguez-Gajardo: carla.rodriguezgajardo@gmail.com
Resumen Disponder de una adecuada técnica que permita estimar de mejor manera la incidencia de huevos de parásitos, de modo de lograr un mejor entendimiento en el manejo de lodos, es fundamental para evaluar el riesgo ambiental e indirectamente la posible exposición de personas a huevos de parásitos. El objetivo de este estudio fue determinar la presencia de huevos de helmintos en muestras de lodos crudos y estabilizados de la Planta de Tratamiento de Aguas Servidas de la comuna de Coronel. Mediante un muestreo por conveniencia, se recolectaron 12 muestras compuestas, durante el periodo comprendido entre enero y marzo del año 2017, que fueron procesadas en el Laboratorio Clínico Veterinario perteneciente a la Facultad Medicina Veterinaria de la Universidad San Sebastián, sede Concepción. } De las 6 muestras recolectadas, 1 fue positiva, lo que representa una prevalencia de 16,6% (IC 95% 0,4 -64,1%), mientras que enmuestras de lodo crudo no se evidenciaron estructuras parasitarias. En la única muestra positiva se logró identificar el género Strongyloides spp. La prevalencia obtenida fue similar a la reportada por algunos autores en estudios internacionales, mientras que surgieron discrepancias con otros autores. Los resultados permiten concluir que no se demostraron diferencias estadísticamente significativas (p > 0,05) en la prevalencia de huevos de helmintos en muestras de lodos crudos y estabilizados. Además, se hace imperativo consensuar una técnica universalmente aceptada en la recuperación de huevos de helmintos.
Palabras clave: Helmintos, lodos, huevos, Fonrouge
Abstract The determination of an adequate technique to better estimate the incidence of parasite eggs, to achieve a better understanding of sludge management, is fundamental to evaluate the environmental risk and indirectly the possible exposure of people to eggs of parasites. The objective of this study was to determine the presence of helminth eggs in samples of crude and stabilized sludge from the Wastewater Treatment Plant of the commune of Coronel. For this purpose, by means of a convenience sampling, 12 composite samples were collected during the period between January and March of 2017, and then processed in the Clinical Veterinary Laboratory belonging to the Faculty of Veterinary Medicine of the University of San Sebastián, headquarters Concepción. Of the 6 composite samples collected from stabilized sludge, 1 positive sample was searched, representing a prevalence of 16.6% (95% CI 0.4-64.1%), while the 6 samples of crude sludge were not evidenced parasitic structures. In the positive sample, only the genus was identified as Strongyloides spp. The prevalence obtained in this study was like that reported by some international authors, however, discrepancies arose with other authors. The results allow
26
to conclude that no statistically significant differences (p> 0.05) were found in the prevalence of helminth eggs in samples of crude and stabilized sludge. In addition, a consensus on the use of a universally accepted technique for the recovery of helminth eggs is imperative. Key words: Helminths, sludge, eggs, Fonrouge.
Introducción El agua es fundamental para la vida y su demanda ha
operaciones
aumentado junto con el crecimiento de la población y de
químicos, biológicos (o una combinación de ellos),
las economías de muchos países, por lo que puede ser
natural o artificial, que tienen como propósito
considerada actualmente como un recurso estratégico.
reducir la carga contaminante de las aguas
Como consecuencia de este crecimiento poblacional y
residuales para adecuarlas a las exigencias de
del amplio desarrollo de actividades industriales, la
descarga al cuerpo receptor. Bajo este concepto se
producción de aguas servidas es cada vez mayor (Vidal y
incluyen, entre otros, lagunas de estabilización,
Araya,
tratar
lodos activados y emisarios submarinos aprobados
adecuadamente las aguas residuales, teniendo en
por la autoridad competente (Ministerio de Obras
cuenta la eliminación de patógenos, dejando cantidades
Públicas de Chile, 2000).
adecuadas de nutrientes y otros compuestos para
De acuerdo con la U.S. Environmental Protection
aumentar la productividad (Jiménez et al., 2007).
Agency (2016), el término lodo residual hace
2014).
Existe
la
necesidad
de
Según la Superintendencia de Servicios Sanitarios (2016), el término Aguas Residuales hace referencia a efluentes que resultan del uso del agua en las viviendas, el comercio o la industria como resultado de actividades urbanas, industriales o agrícolas. Contienen
materia
orgánica
e
inorgánica,
y
procesos
secuenciales
físicos,
referencia a los sólidos separados durante el tratamiento de aguas residuales de las ciudades, incluidos residuos sépticos. Debido a esto, los lodos serían una consecuencia inherente del tratamiento de las aguas servidas (Lepe, 2002). Barañao y Tapia (2004), indican que para la obtención de los lodos se utilizan tres procesos:
organismos vivos, elementos tóxicos, entre otros, que las hacen inadecuadas para su uso, y es
Tratamiento preliminar: el que busca eliminar
necesaria su evacuación, recolección y transporte
cualquier elemento que pueda entorpecer
para su tratamiento y disposición final. En el caso
alguna de las etapas siguientes del tratamiento.
particular de los residuos líquidos provenientes de
Los principales elementos objetivos son los
las viviendas, reciben la denominación de Aguas
sólidos gruesos, la arena, los aceites y grasas. En
Servidas.
Chile, el 64% de las plantas de tratamiento de
En Chile, los tratamientos a los cuales son sometidas
aguas servidas utiliza este tipo, que incluye el
las aguas servidas, corresponden a un conjunto de
empleo de rejas en el tratamiento preliminar de
27
lodos, la más común y la mayoría de las plantas
nutrientes (nitrógeno y fósforo). Actualmente
de tratamiento que no cuentan con esta etapa
sólo el 8% de las plantas de tratamiento de aguas
corresponden, en general, a plantas compactas
servidas en Chile tienen algún tipo de
que atienden apequeñas poblaciones.
tratamiento terciario, de las cuales el 65% remueven nitrógeno y fósforo, y un 30% sólo
Tratamiento
primario:
Consistente
en
la
remoción de la materia orgánica suspendida que logra una relativa alta remoción de materia orgánica a bajo costo, pero en Chile sólo un 11% tiene implementado este tratamiento. La sedimentación es la técnica más utilizada (90%), que técnicamente presenta mayores ventajas debido a que utiliza dosis bajas de polímero y requiere tiempos más bajos para alcanzar eficiencias comparándola
de
remoción con
la
adecuadas,
tecnología
del
espesamiento (Gutiérrez et al., 2014).
Tratamiento Secundario: Su objetivo es la remoción de la materia orgánica disuelta mediante lagunas, sistemas de medio fijo, lombrifiltros o lodos activados, siendo estos últimos utilizados por un 61% de las plantas en sus diferentes variaciones: lodos activados convencionales, aireación extendida, zanjas de oxidación y reactores batch secuenciales, entre los cuales la aireación extendida es la técnica más utilizada. Según Alarcón (2009), en el proceso de lodos activados, se distinguen los siguientes componentes: estanque de aireación, aireación y agitación, sedimentador secundario, sistema de retorno de lodos, sistema de purga de lodos.
remueven el fósforo (Barañao y Tapia, 2004). El tratamiento de lodos puede ser de tipo aeróbico, cuando los microorganismos utilizan la materia orgánica presente en el residuo en presencia de oxígeno disuelto, generando CO2 y aguas residuales; o anaeróbico, cuando los residuos orgánicos se transforman en metano y CO2 en ausencia de oxígeno. Los microorganismos que intervienen en ambos procesos pueden estar dispuestos en suspensión o como cultivo fijo (Bureau Veritas Formación, 2008). Del total de plantas que utilizan tratamiento terciario, el 80% se ubica en la Xa Región. Esta situación se debería, en parte, a que la norma de emisión de nutrientes (N y P) a lagos es cinco veces menor que aquella para la descarga de nutrientes en ríos. No obstante, es posible observar que el 54% de las plantas de tratamiento de aguas servidas que poseen tratamiento terciario no descargan sus aguas a lagos, ni a ríos que descarguen posteriormente en lagos, por lo que, en teoría, no requerirían esta etapa de tratamiento. Por el contrario, existiría un alto número de plantas de tratamiento de aguas servidas que, descargando a lagos, no poseen tratamiento avanzado ni remoción de nutrientes (Barañao y Tapia, 2004). Los lodos pueden ser de tipo doméstico o industrial,
Tratamiento Terciario: tiene como objetivo
dependiendo del origen de las aguas residuales. Los
remover cualquier otro elemento no deseado,
primeros
generalmente enfocado a la remoción de
contaminantes. También pueden ser líquidos,
generalmente
contienen
menos
33
deshidratados o secos, de acuerdo con su contenido
aumentar la masa de residuos sólidos producidos
de humedad y como resultado de procesos en las
diariamente por la sociedad. Ambos objetivos se
plantas de tratamiento de aguas residuales (Ortiz,
deben lograr de manera simultánea, buscando una
2010). Aunque los datos registrados son sólo
combinación de requisitos y condiciones a un costo
aproximados y dan cuenta de una data de poco
relativamente razonable. Independiente del destino
tiempo (1 a 2 años), la tasa de producción de lodos
final de los lodos producidos, estos deberán
en g/habitante/día se acerca a lo registrado en
someterse
países más desarrollados, pudiendo estimarse como
acondicionamiento, que permitan reducir al mínimo
una buena aproximación para nuestro país una tasa
los riesgos sanitarios, los cuales tienen relación con
de 25 g/ habitante/día (Lepe y Coronado, 2003).
la reducción del potencial de atracción de vectores y
Según Alarcón (2009), la producción de lodos a lo
requisitos de higienización que permitan reducir o
largo de los años y por regiones tiene los siguientes
eliminar el contenido de patógenos (Lepe, 2002).
valores en toneladas:
Para considerar un lodo estable como tal, se deben
En Chile, según el Reglamento para el Manejo de Lodos Generados en Plantas de Tratamiento de Aguas Servidas (Ministerio Secretaría General de la Presidencia, 2010), de acuerdo a sus características sanitarias, los lodos se clasifican de dos tipos: lodos clase A, para aquellos lodos sin restricciones sanitarias para su aplicación benéfica al suelo (contenido de ova helmíntica menor a 1 en 4 gramos de sólidos totales) y lodos clase B, a aquellos aptos para aplicación benéfica al suelo, con restricciones sanitarias de aplicación según tipo y localización de los suelos (en los que no existe limitación de ovas helmínticas determinada). Los lodos han sido depositados en rellenos sanitarios y receptáculos, que con el transcurrir del tiempo se han
tornado
insuficientes,
producto
de
los
crecientes volúmenes generados, siendo necesaria la búsqueda de mejores opciones de utilización de suelos (Castro et al., 2007). La utilización benéfica de los lodos en los suelos tiene dos objetivos: aprovechar su potencial fertilizante y disponer adecuadamente de ellos, sin
a
algunos
procesos
de
tener en cuenta las siguientes características: (I) el contenido de sólidos volátiles debe estar disminuido un 17% digestión aeróbica y 38% en caso de digestión aeróbica, (II) la tasa máxima específica de oxígeno en casos de digestión aeróbica debe ser igual o inferior a 1,5 mg de o/g/h de sólidos totales, (III) el pH debe ser elevado a 12 o más, mediante agregación de material alcalino, (IV) humedad reducida a 75% o igual o superior 90% con y sin lodos crudos respectivamente, y (V) su tiempo de residencia en el sistema debe ser igual o superior a 25 días (Ministerio Secretaria General de la Presidencia, 2010). Si bien, los lodos tienen un alto contenido de materia orgánica que favorecen las propiedades físicas intrínsecas del suelo, y mejoran la productividad, siendo una alternativa como fertilizantes (Lepe y López, 2003), también aportan otros compuestos, tales como elementos traza metálicos (ETM) y altas cargas de microorganismos patógenos (Henríquez, 2011; Itzel, 2008) lo cual es el principal problema de su uso.
34
Ahora bien, el contenido de huevos de helmintos en
habría una pérdida de viabilidad (Pérez et al., 2000).
lodos varía de acuerdo a cada país; por ejemplo, en
El tratamiento primario tiene limitaciones en la
México, Brasil, Estados Unidos y Alemania, se han
remoción de huevos de helmintos, puesto que, la
recuperado 73 a 177, 75, 2 a 13 menos de 1 Huevos
densidad de éstos no es lo suficientemente alta, y los
por H/g Sólidos Totales, respectivamente (Jiménez,
que sedimentan tienden a acumularse en los lodos
2007; Hays, 1977). Esto Debido a la diferencia en las
residuales, donde pueden permanecer en estado de
condiciones de salud de las personas que viven en
latencia conservando su viabilidad (Silva y Martínez,
los países desarrollados y los países en desarrollo,
2000).
por lo tanto, la metodología de tratamiento de aguas
Un estudio de Maya et al. (2012), sostiene que para
residuales y lodos difiere significativamente (Jiménez
la completa inactivación de los huevos de helmintos
et al., 2007).
es necesaria temperatura superior a 60°C. Si los
En general, los agentes infecciosos en los lodos son
huevos están en estado larval, son más sensibles, y
los huevos y no los individuos adultos, puesto que,
por lo tanto, una combinación apropiada de pH,
desde las etapas larvales, estos no pueden sobrevivir
desecación y tiempo de contacto podría ser
en aguas residuales o lodos ya que necesitan un
suficiente para su inactivación.
huésped, por lo que la remoción de los huevos es
El parásito más resistente en estado no larval
fundamental en el control de las helmintiasis
(huevo) es Ascaris spp, seguido de Taenia spp y
(Jiménez, 2007).
Toxocara spp, los más sensibles son Trichuris spp e
La concentración de huevos viables, más que la
Hymenolepsis spp. En estado larval, si bien Áscaris
concentración de huevos totales (viables y no
sigue siendo el más resistente, Trichuris spp es más
viables) es esencial para determinar el riesgo de
resistente que Toxocara spp; Esto demuestra la
contaminación por parásitos, ya que la fase infectiva
importancia del estado larval en la resistencia de los
y el desarrollo de la enfermedad se relacionan
huevos (Maya et al., 2012).
directamente con la fase viable del parásito. En un estudio realizado en la ciudad de Bogotá se determinó, en promedio, un total de 0,14 huevos viables en 4 g peso seco, mientras que, para protozoos, se obtuvieron valores menores a 1 quiste viable en 4 g peso seco (Guzmán y Campos, 2004). Es necesario considerar que la concentración de huevos puede aumentar en lodos que hayan sido tratados, ello debido a la reducción del contenido de
Este estudio determinó la presencia de huevos de helmintos en
muestras de lodos crudos y
estabilizados de una Planta de Tratamiento de Aguas Servidas (PTAS) de la ciudad de Concepción, durante el periodo comprendido entre enero y marzo del año 2017. Material y Método Lugar de estudio
materia volátil a medida que avanza la digestión del lodo, donde los huevos permanecen sin eliminarse, aumentando así su concentración, aun cuando
El estudio se realizó en la Planta de Tratamiento de Aguas Servidas (PTAS) San Pedro S.A., ubicada en
35
Avenida Carbonífera 925, Coronel, que trata aguas
aproximadamente 0,25 por 0.25 m y 0,3- 0,4 m de
servidas de aproximadamente 15.550 habitantes de las
profundidad, utilizando una horquilla de mano.
comunas de San Pedro y Coronel.
Posteriormente, se introdujo una pala de mano en 4 lugares equidistantes dentro de cada ventana y se
Toma de muestras
recogió en cada punto el volumen de sólido
Se realizó un muestreo no probabilístico (por
equivalente al total de la pala (Figura 2).
conveniencia) de lodos crudos y estabilizados, hasta
Luego se depositó el contenido de las muestras en 5
completar un total de 12 muestras, durante los meses
bolsas sobre una superficie sólida, plana y limpia. Se
de enero a marzo del 2017
mezclaron y homogenizaron generando una muestra que se depositó en un envase de 500 mL de
Cada muestra de lodo crudo se recolectó desde un testigo de la tubería de polimerización en un frasco de vidrio opaco, con tapa, hasta alcanzar un volumen aproximado de 1 litro. Se identificó el envase colocando la siguiente información: nombre del establecimiento, apellido y nombre de la persona que realizo el muestreo, fecha de muestreo, sitio de donde proviene la muestra y tipo de lodo.
capacidad. Por último, se introdujo el envase en la conservadora con refrigerantes y trasladó al laboratorio para su posterior análisis. El procesamiento y análisis de las muestras se efectuó en el Laboratorio Clínico Veterinario de la Facultad Medicina Veterinaria de la Universidad San Sebastián, sede Concepción.
Por último, se introdujo el envase en una conservadora
Para el procesamiento de las muestras se efectuó la
con refrigerantes y se trasladó al laboratorio para su
técnica descrita por Fonrouge et al. (2000),
posterior análisis.
modificada por Armstrong et al. (2011), siguiendo los siguientes pasos:
Dada la heterogeneidad del lodo, se procedió a aplicar
un muestreo estratificado con una distribución regular o
bolsa en la que se obtuvo, agregando un
sistemática. Cada unidad muestral estuvo conformada por 5 sub-muestras representativas, constituidas por la
volumen de 60 mL de agua.
mezcla homogénea de lodos procesados. La toma de muestra se realizó en el sitio de acopio de los lodos.
Cada muestra se homogenizó en la misma
Se extrajeron cuatro alícuotas de 5 g que se diluyeron individualmente en 50 mL de agua.
Se filtraron por un colador de alambre,
Para tales efectos, en cada pila de lodo, se identificaron
previamente flameado, recubierto de un trozo
5 sitios de muestreo, los que se para su posterior
de gasa, el filtrado se recolectó en un vaso de 250 mL.
visualización (Figura 1).
Posteriormente, se dejó sedimentar por 20
El muestreo se inició desde el tercio inferior de la pila
minutos y el sobrenadante fue eliminado. El
de lodo hasta llegar a la parte superior, haciendo un
sedimento fue recogido en un tubo de
recorrido en espiral. En cada sitio seleccionado se
centrífuga, y nuevamente sedimentar por 5
confeccionó
una
ventana
de
muestreo
de
36
minutos. Se eliminó el sobrenadante y al sedimento agregó una solución de sulfato de zinc sobresaturado (d = 1,20) y centrifugado a 2000 r.p.m. durante 5 minutos.
Posterior al centrifugado, cada tubo fue llenado con la solución de sulfato de zinc hasta su borde formando un menisco, sobre el que se aplicó un portaobjetos de 18x18 mm para dejar luego el tubo en perfecta posición vertical y en reposo por un lapso de 10 min. Concluido este tiempo, se retiró cuidadosamente el cubre-objeto para depositarlo sobre un porta- objeto y luego someterlo a observación microscópica con aumento de 10X (aumento menor).
Los géneros parasitarios presentes en las muestras fueron organizados en tablas de frecuencia absoluta y relativa en una planilla de Excel, de acuerdo con el tipo de lodo (crudo o estabilizado). Los datos fueron evaluados por medio del programa computacional SPSS V 21.0. Para
determinar
la
existencia
de diferencia
La identificación de géneros parasitarios fue
estadísticamente significativa en la prevalencia de
efectuada mediante inspección microscópica, según
huevos de helmintos, en muestras de lodos crudos y
características morfológicas de los huevos y
estabilizados, se utilizó la prueba Z de comparación
comparadas con las ilustraciones del texto de
de proporciones.
parasitología de Madrid (2014).
Para determinar homogeneidad en la frecuencia de huevos de helmintos en lodos crudos y estabilizados,
La prevalencia de huevos de parásitos se determinó
se utilizó la prueba de chi cuadrado.
utilizando la siguiente fórmula:
Se consideró un valor de α (significancia) de 0.05, estableciendo como significativo todo valor de p menor a α (p<0.05).
Se entendió como muestra positiva toda aquella muestra que presentara al menos una forma parasitaria, independiente del número y/o la especie encontrada. El valor de los intervalos de confianza al 95% de la prevalencia fue adicionado y sustraído al valor de la prevalencia, calculado mediante la fórmula que se muestra a continuación, valor que
Resultados El resultado de la pesquisa de huevos de helmintos realizado en muestras compuestas de lodos crudos (N= 6), procedentes de PTAS San Pedro S.A, fue igual a cero, lo que equivale a una prevalencia de 0% (Tabla II). En el caso de muestras de lodos estabilizados, la prevalencia de huevos de helmintos fue 16,6% (1/6 muestras recolectadas) (Tabla III).
37
En la muestra de lodo estabilizado positiva a huevos
cifras de 556 huevos de helmintos en 1 g/ST. Sin
de helmintos, sólo se identificó un género
embargo, nuestros resultados se asemejan a lo
parasitario: Strongyloides spp. (Tabla IV).
reportado por Scaglia et al. (2014), quienes no
La prueba de comparación de proporciones
lograron recuperar huevos de helmintos en lodos
determinó aceptar la hipótesis nula (p > 0,05)
tratados en una PTAS en Italia, (bajo condiciones de
respecto de la igualdad en la prevalencia de huevos
digestión aeróbica) y a Gaspard y Schwartzbrod
de helmintos en muestras de lodos crudos y
(2003), quienes obtuvieron una media entre 3 y 13,4
estabilizados (Figura 3). No se determinaron
huevos de helmintos en 2 g de materia seca
diferencias estadísticamente significativas en la
destacando la gran variabilidad que existe en la
proporción de muestras según el tratamiento de
capacidad de recuperación de HdH desde los lodos.
lodos. Las diferencias anteriores pueden ser explicadas en función de la utilización de distintas técnicas de Discusión
recuperación y recuento de HdH. Al no existir una técnica que sea universalmente aceptada (Bowman
El presente estudio confirmó una prevalencia de
et al., 2003; Sidhu y Toze, 2008), se dificultan las
huevos de helmintos (HdH) en lodos crudos
evaluaciones comparativas, más aún si proceden de
provenientes de la Planta de Tratamiento de Aguas
matrices y/o localizaciones diferentes (Gyawali et al.,
Servidas (PTAS) San Pedro S.A de 0 (IC95%; 0 -
2015; Amoah et al., 2017). El gran impedimento,
45,9%), notablemente inferior a la obtenida en el
según Vieira da Rocha et al. (2016), radicaría en la
estudio de Ortiz (2010) en una PTAS del municipio El
falta de consenso sobre la técnica a utilizar, como
Rosal, Colombia, de 100%. De modo similar, Vera-
consecuencia de la falta de información para validar
Reza et al. (2006), reportaron cifras de 51 huevos de
la calidad de los distintos métodos.
helmintos en 10 g de lodo crudo en una PTAS habitacional en México.
Por otra parte, e intentando explicar dicha variabilidad, Amoah et al. (2017), Pecson et al.
La prevalencia de huevos de helmintos en lodos
(2007) y Sidhu y Toze (2008), reportan que la
estabilizados obtenida en este estudio de 16,6 % (IC
subjetividad y la experiencia del analista, así como el
95%; 0,4 -64,1) es también inferior a la reportada por
tiempo utilizado para procesar y analizar las
Ortiz (2010) de 100%.
muestras, además de las discrepancias en la
Respecto del número de huevos presentes en los lodos, los resultados del presente análisis son inferiores a lo reportado en Ciudad de México por Pecson et al. (2007), quienes detectan como
identificación de huevos de especies similares o, la diferenciación de huevos del mismo género en diferentes especies, afectan significativamente los resultados obtenidos.
promedio 137 huevos de helmintos en 2 g de lodo y
El efecto del operador o analista puede explicar la
Konaté et al. (2013) que reportan para Burkina Faso
baja y nula prevalencia de HdH en lodos
38
estabilizados y crudos obtenida en este estudio. En
investigador para el desarrollo de un nuevo
efecto, Bowman et al. (2003) y Sidhu y Toze (2008),
protocolo de muestreo y que basará principalmente
sumado a lo propuesto por Vieira da Rocha et al.
en la exactitud y precisión de los resultados que se
(2016), consideran que la cuantificación mediante
obtengan mediante los ensayos (Vieira da Rocha et
visualización microscópica, es un procedimiento que
al., 2016).
requiere de alta agudeza visual y experiencia, debido a la presencia de interferencias habituales, tales como celulosa, levadura, granos de polen y suciedad, siendo comunes los resultados falsos positivos o negativos, sumado al efecto desinfectante e inhibitorio del desarrollo de los HdH que tienen los diferentes tratamientos químicos a los que son expuestos los efluentes en las PTAS.
Bowman et al. (2003) señalan que los diferentes procesos a los que son sometidos los lodos afectan el número de huevos recuperados en términos de exactitud y precisión. En efecto, el pH juega un importante papel, a medida que este aumenta, hasta alrededor de 12 (estabilización alcalina), la precisión del procedimiento disminuye de 75% a 58%, por lo que es necesario aplicar métodos de preservación y
Otros factores que pueden afectar el rendimiento de
almacenamiento de manera que no continúe el
recuperación de HdH están representados por la
proceso de inactivación en los biosólidos, que
intensidad del muestreo y la cantidad de muestra. El
reducirá la capacidad de recuperación de huevos
muestreo efectuado sólo en estación estival (como
desde el lodo.
en este estudio) difiere a lo señalado por Gaspard y Schwartzbrod (2003), quienes sostienen que la frecuencia de muestreo suficiente y adecuado, para maximizar la recuperación de huevos debiese ser cada tres o siete meses. En relación con la cantidad de muestra recolectada, el procedimiento adoptado en este trabajo difiere a lo descrito por otros autores, ya que la cantidad de la muestra de ensayo debe contener una masa equivalente entre 5 g y 50 g de sólidos totales, puesto que con valores mayores el porcentaje de recuperación es menor (Bowman et al., 2003; Vieira da Rocha et al., 2016). De esta manera, el porcentaje de recuperación de huevos de Ascaris spp fue casi dos veces mayor (de 4,50% a 9,61%) cuando las muestras de los lodos espesados fueron más pequeñas (Bowman et al., 2003). En virtud de lo anterior, las diferentes concentraciones de sólidos pueden
ser establecidas por el
En cuanto a las técnicas para la recuperación de HdH, Gyawali et al. (2015), indica que las tasas de recuperación del método de flotación fueron muy pobres (de 0,02% a 3,7%), por lo que varios factores tales como la matriz de muestra, el volumen recolectado y las concentraciones de ovas presentes en las muestras, pueden influir significativamente en la tasa de recuperación. Debido a esto, se hace necesario desarrollar un método fiable, sensible y rápido para detectar concentraciones bajas de HdH (de 1 a 10 ovas) en matrices de aguas residuales. Frente a esto Bowman et al. (2003) consideraron que, a la muestra inicial de biosólidos espesados, debe
añadir
un
volumen
de
agua
de
aproximadamente 10 veces o más que el volumen de la muestra, con el fin de obtener una adecuada hidratación y una completa homogeneización
39
durante el mezclado, de no efectuar esta etapa, se
la visualización de las larvas en las heces de un
dificultaría conseguir una buena sedimentación de
paciente parasitado sea difícil (Hernández, 2001).
sólidos, dado el alto contenido de estos. Por otra parte, grandes cantidades de sedimento en el paso final del procedimiento de concentración dificultan el examen microscópico, con la consecuente probabilidad de resultados falsos negativos. En su investigación, Bowman et al. (2003) también compararon el uso de distintos detergentes, llegando a
la
conclusión
que
se
obtienen
mejores
recuperaciones cuando se utiliza el detergente 7X por sobre otros detergentes como MgSO4 o ZnSO4 (este último utilizado en el presente estudio), debido a que no se formarían precipitados al mezclarse con las soluciones de sal. Sumado a esto, Satchwell (1986) afirma que, de acuerdo con los resultados obtenidos en su estudio, los HdH se pierden en cada una
de
las
etapas
del
procedimiento
de
recuperación, sobre todo antes de la flotación, por lo que se hace imperativo ser capaces de detectar y enumerar diferentes patógenos en los biosólidos con un grado conocido de confianza (Sidhu y Toze, 2008). Caso interesante es lo que ocurre con el único huevo de helminto encontrado en una muestra de lodo estabilizado, donde se identificó el género como
La presencia de huevos de Strongyloides spp. En este estudio, si bien es escasa, podría estar explicada por su singular y complejo ciclo de vida, puesto que este parásito consta de una etapa de vida libre, en la cual las larvas rabditiformes eliminadas con las heces pueden mudar dos veces y convertirse en larvas filariformes infectantes (ciclo directo) o bien, mudar cuatro veces, diferenciándose sexualmente. Una vez convertidas en hembras y machos adultos, pueden vivir libremente para luego aparearse y como consecuencia producir huevos, los cuales harán eclosión a larvas rabditiformes, siendo estas últimas, las que a su vez den origen a una nueva generación de adultos de vida libre o a larvas filariformes infectantes. Este ciclo indirecto (heterogónico) incluye varias generaciones de vida libre, facilitando así la propagación y multiplicación amplificada del parásito, realizada principalmente en los ambientes fecaloides contaminados y carentes de servicios sanitarios (Llop et al., 2001; Mercado et al., 2001; World
Gastroenterology
Organisation
Practice
Guidelines, 2004; Carrada, 2008).
Strongyloides spp., lo cual difiere a lo que describe
En el caso particular de Chile, se han descrito casos
Jiménez et al. (2016), quienes señalan que los
aislados y brotes de S. stercoralis en algunas
parásitos más comunes para América del Sur son
instituciones.
Ascaris
trichiura,
seroprevalencia de 12,1% en pacientes psiquiátricos y
Hymenolepis nana y Taenia solium. Puesto que S.
de 0,25% en donantes de sangre (Mercado et al., 2001;
stercoralis ovipone muy pocos huevos por día (los
Mühlhauser y Rivas, 2013). El hecho de que exista una
que no son liberados a la luz del intestino, sino que
baja prevalencia podría estar determinada por que la
son depositados en el epitelio intestinal y maduran a
helmintiasis ocurre principalmente en países con menor
larvas rabditiformes y luego son expulsados con las
desarrollo (Vieira da Rocha et al., 2016) producto de
heces) y que su liberación no es continua, hace que
prácticas de higiene deficientes, suministro de agua
lumbricoides,
Trichuris
Estudios
han
comunicado
una
40
insatisfactorio, manejo inadecuado de la basura y un
2008). Además, en las zonas urbanas las condiciones
nivel de saneamiento deficiente en hogares (Garbossa
higiénicas son mejores y se dan campañas regulares de
et al., 2013), es atendible inferir que la presencia y las
desparasitación, lo que hace que la frecuencia y la
cifras de helmintos presentes en los lodos varían con la tasa
intensidad de helmintiasis sean menores que en zonas
de infección prevalente en la población (Sidhu y Toze,
rurales (Caraballo, 2016).
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40
Tablas e ilustraciones
Figura 1. Secuencia de los sitios de muestreo.
Figura 2. Ventana que indica los puntos equidistantes para la toma de sub-muestras.
41
70
60
50
30
IC inferior 95% IC superior 95%
20
10
Figura 3. Prueba de comparaciรณn de proporciones para la prevalencia de huevos de helmintos en muestras de lodos crudos y estabilizados.
42
Tabla I. Producción de lodos por región de Chile, entre los años 1996-2015
Región
Año 1996
Año 2000
Año 2010
Año 2015
693
809
935
1.041
1.149
II
85
2.252
2.496
2.740
2.983
III
1.375
2.561
3.110
3.507
3.819
IV
1.530
2.234
2.744
3.029
3.314
1.581
3.616
8.903
9.889
10.912
1.435
2.882
11.939
14.524
16.792
VII
47
3.684
10.446
11.744
13.041
VIII
624
4.531
11.052
12.590
13.560
0
397
10.418
11.396
12.376
713
4.140
9.636
10.889
11.877
133
1.472
1.753
1.974
2.510
XII
0
487
798
863
929
RM
3.097
32.091
58.363
178.396
195.361
Total
11.313
61.156
132.593
262.582
288.623
I
V VI
IX X XI
Año 2005
43
Tabla II. Prevalencia e intervalo de confianza de huevos de helmintos en muestras de lodos crudos de la Planta de Tratamiento de Aguas Servidas San Pedro S.A, período enero-marzo del 2017. Región del Biobío, Chile
Muestras de lodos crudos N de muestras positivas / N muestras recolectadas / (prevalencia %; IC 95%*) 0
/
*
6
/
( 0;
0 - 45,9 )
IC95%: Límites inferior y superior de la proporción al 95% de confianza
Tabla III. Prevalencia e intervalo de confianza del número de huevos de helmintos en muestras de lodos estabilizados de la Planta de Tratamiento de Aguas Servidas San Pedro S.A, período enero-marzo del 2017. Región del Biobío, Chile
Muestras de lodo estabilizado N de muestras positivas / N muestras recolectadas / (prevalencia % ; IC 95%*) 1
/
*
6
/
( 16,6 ; 0,4 - 64,1 )
IC95%: Límites inferior y superior de la proporción al 95% de confianza
Tabla IV. Géneros parasitarios presentes en muestras de lodos estabilizados de la Planta de Tratamiento de Aguas Servidas San Pedro S.A, período enero- marzo 2017. Región del Biobío, Chile.
Género
Casos positivos (n)
Proporción (%)
Número medio de huevos / 100 g de lodo
Strongyloides spp.
1
100
1
44
Rev. med. vet. Investing. 1(1):45-59, 2018 Artículo original
Estimación de la prevalencia de Giardia spp. mediante análisis coproparasitológico seriado en perros clínicamente sanos de la ciudad de Lota (Chile), periodo enero -marzo 2017. DARIEL MONSALVES1, CLAUDIO BÁEZ-BELTRÁN1 y JUAN GONZALO MONROY 1 1
Facultad de Medicina Veterinaria. Universidad San Sebastián, Concepción, Chile.
Dariel Monsalves: noirasdasdasd@gmail.com
Resumen Giardia spp. es un protozoario parásito, que habita el intestino delgado de los seres humanos y de muchos otros vertebrados. Es una de las causas más comunes de diarrea en todo el mundo, constituyendo un verdadero problema en salud pública. El objetivo de este estudio fue estimar la prevalencia de quistes de Giardia spp. en muestras fecales de caninos clínicamente sanos de la comuna de Lota (Chile). Para tales efectos, se recolectaron 40 muestras de material fecal, durante el periodo comprendido entre enero y marzo del 2017, seleccionadas mediante un muestreo aleatorio estratificado y procesadas en el Laboratorio de Parasitología del Hospital Clínico Veterinario de la Universidad San Sebastián, Sede Concepción, mediante un análisis coproparasitológico seriado (serie de tres muestras en tres días alternados) basado en el método de Telemann modificado. De las 40 muestras analizadas, ninguna resultó positiva a Giardia spp., lo que representa una prevalencia de 0% (IC95% 0 – 8,8%). El rango intervalar de la prevalencia obtenida en este estudio, fue similar a la prevalencia obtenida por autores internacionales y nacionales, no obstante, surgieron algunas diferencias respecto a algunos estudios, principalmente respecto de los métodos de detección. Los resultados permiten concluir que, la baja prevalencia de Giardia spp. en perros clínicamente sanos, también reportada en la literatura internacional, sumado a la baja frecuencia con que ocurriría la transmisión zoonótica de la parasitosis, hacen que su importancia epidemiológica sea menor en comparación a otras patologías de carácter zoonótico.
Palabras clave: Perros, zoonosis, protozoos, Giardia spp.
Abstract Giardia spp is a protozoan parasite that inhabits the human small intestine as well as of other vertebrate's and is one of the most common causes of diarrhea in the world, which is a veritable problem in public health. The aim of this study is to estimate the Giardia spp. cyst prevalence in fecal samples of clinically healthy
45
canines from the city of Lota. For this purpose, 40 samples of fecal material were collected during the period comprised between january and march of 2017. These were selected by stratified random sampling and processed in the Veterinary Clinical Hospital’s Parasitological Laboratory of Universidad San Sebastián, located in Concepción, using a coproparasitological serial analysis (series of three samples on three alternate days) based on the modified Telemann method. From the 40 analysed samples, none were positive for Giardia spp. which represents a 0% prevalence (IC95% 0 – 8,8%). The prevalence interval range obtained in this study was like the prevalence obtained by national and international authors, however some differences emerged concerning other studies, mainly about detection methods. The results allow to conclude that, while it is feasible to find parasitosis by Giardia spp. in clinically healthy dogs, the low prevalence obtained and reported by the consulted literature, in addition to the low frecuency with which this parasitosis zoonotic transmission would occur, its epidemiological importance is low. Keywords: Dogs, zoonosis, protozoans, Giardia spp.
Introducción De los demás grupos genotípicos, el C – D están bajo Giardia spp. es un protozoo flagelado cuyo hábitat es el tracto intestinal de varias especies animales y el hombre (Thompson, 2008). Se han descrito 3 grandes grupos morfológicos para Giardia: G. muris correspondiente a ratones, G. agilis para anfibios y G. duodenalis (conocida también como G. intestinalis o G. lamblia) capacitada para la infección de humanos y animales de sangre caliente (Ballweber et al., 2010). En relación con G. duodenalis, se han identificado 7 grupos genotípicos clasificados en letras de la A – G (Ballweber et al., 2010). El grupo genotípico A se caracteriza por poseer el mismo nombre de la especie, es decir G. duodenalis, mientras que el grupo B se conoce como G. entérica. Ambos grupos tienen afinidad primaria por el hombre, sin embargo, también se les ha identificado en varios animales domésticos (Pallant et al., 2014).
el nombre de G. canis, el E como G. bovis, el F como G. cati y G como G. simondi. Todos ellos con afinidad primaria hacia animales (Pallant et al., 2014). Se ha descrito recientemente un nuevo grupo genotípico conocido como H, el cual habita en focas grises (Halichoerus grypus) (Rodríguez et al., 2014). La infección se adquiere por la ingesta de quistes o, en menor medida, trofozoítos. En ambos casos, la transmisión puede ser directa vía oro-fecal, como indirecta a consecuencia de la ingesta de agua y/o alimentos contaminados o, por el contacto con animales principalmente asintomáticos (ISP, 2012; Huamancayo y Chávez, 2015). Para adquirir la infección, es necesaria la ingestión de al menos 10 quistes de este protozoo. Post-ingestión, los quistes de Giardia circulan a través del tracto gastrointestinal, donde son activados por el pH ácido del jugo gástrico y el pH alcalino duodenal. Gracias a la activación, los quistes pasan a trofozoítos
46
capacitados
para
su
división
asexual,
- Test de SNAP® para Giardia, es otra opción que
específicamente fisión binaria, colonizando el
también
utiliza
duodeno y yeyuno, donde son ayudados por la
utilización de una muestra fecal recogida por una
presencia de sales biliares y colesterol. Todo este
esponja con un reactivo. Si el antígeno está presente,
proceso tardará aproximadamente entre 6 a 20 horas
el anticuerpo conjugado se le unirá, dando paso a
(Flores y Cabello, 2004).
una reacción colorimétrica azul (Epe et al., 2010).
Luego de colonizar, los trofozoítos que van
Es evidente que Giardia es considerado uno de los
avanzando hacia el tercio posterior del duodeno, se
protozoos
comienzan a enquistar debido a que requieren
enfermedades
obtener colesterol del medio, el cual es escaso en
desarrollados como en desarrollo, por este hecho se
dicho segmento (Mosquera, 2016). Posteriormente
considera como un riesgo para la salud pública como
se adhieren a las heces pasando al estado de
para la de los animales de compañía (Bouzid et al.,
infectantes (Thompson, 2008). Su excreción será
2015). En septiembre de 2004, Giardia fue incluida
entre los 5 a 7 días de iniciada la infección (Ballweber
en la “Iniciativa de Enfermedades Desatendidas” de
et al., 2010).
la OMS (Thompson, 2008).
En relación con el diagnóstico de Giardia, es básico
La presentación clínica de Giardia puede variar desde
realizar un frotis directo de heces con tinción de
una infección asintomática hasta la enfermedad
lugol, con el fin de visualizar trofozoítos y/o quistes.
aguda o crónica, asociada a diarrea y un síndrome de
La presencia de estos dependerá del estado de las
malabsorción (Pablo et al., 2012; Huamancayo y
heces. Los trofozoítos son más frecuentes en heces
Chávez, 2015; Bouzid et al., 2015).
blandas y los quistes en heces sólidas o semi-sólidas
Si bien la patogénesis es un poco desconocida, es
(Mosquera, 2016).
claro que está relacionada con la presencia de los
Otros métodos de diagnóstico coproparasitológico
trofozoítos en la pared intestinal e involucra eventos
que se han utilizado son:
que desencadenan en diarreas. Algunos de estos
- Flotación fecal, donde destaca el uso de sulfato de
posibles eventos son el aumento de la apoptosis de
zinc (Flores y Cabello, 2004; Rishniw et al., 2010).
los enterocitos, la disfunción de la barrera intestinal,
- Estudio inmunológico por medio del ELISA, donde
la activación de linfocitos, el acortamiento de las
se miden las concentraciones de copro-antígenos
microvellosidades con o sin atrofia de éstas y la
(Thompson, 2008).
hipersecreción de aniones (Cotton et al., 2011).
- Pruebas mixtas, es decir, combinar la flotación fecal
Debido a lo anterior, el área de absorción se ve
y ELISA para aumentar la sensibilidad. Ambos
reducida durante la Giardiasis, dando paso a
métodos son fáciles de realizar y se consideran una
deficiencias en enzimas digestivas (lactasa, proteasa
excelente opción al momento de hacer diagnóstico
y lipasas) y mala absorción. Las lesiones en las
en pequeños animales (Alves y Santos, 2016).
microvellosidades alteran la absorción de glucosa y
más
copro-antígenos,
prevalentes entéricas,
mediante
como
ya
sea
causa en
la
de
países
47
electrolitos lo que disminuye aún más la absorción de
en los perros es alta, existe en condición de
agua favoreciendo la diarrea (Cotton et al., 2011).
asintomático, no obstante, su importancia radica en
Los caninos (Canis lupus familiaris) son los animales
la seriedad del cuadro cuando emergen los signos, su
que, con mayores probabilidades, podrían estar
potencial
implicados en la transmisión directa de la infección
diagnosticarla (Montejo, 2012).
por Giardia, debido a la relación estrecha entre éstos
Xu et al. (2016), estudiaron la presencia de los
y los humanos. Siendo diseminada por éstos
distintos tipos de genotipos de G. duodenalis en un
mediante la contaminación de los suelos con materia
grupo de 121 perros positivos al protozoo y
fecal o el contacto directo (Fonte y Ali, 2010; Alarcón
demostraron que: 23 de ellos albergaban el genotipo
et al., 2015).
A; 1 el genotipo B, 26 el genotipo C y 58 el genotipo
También existe evidencia de casos donde la
D. Los 13 casos restantes poseían infección mixta, es
transmisión es hacia animales, quedando como
decir, combinaban dos genotipos. Los perros con los
reservorio
genotipos A y D estaban en tiendas de mascotas o en
y
otorgándole
un
carácter
de
zoonótico
y
las
dificultades
para
antropozoonosis, (Alcaraz, 2002).
clínicas veterinarias (contacto con animales y
El riesgo de la infección por Giardia está íntimamente
humanos), mientras que los que poseían el genotipo
relacionado con las tasas de prevalencia y los
A provenían de viviendas (contacto sólo con
patrones de infección (excreción de hospedadores)
humanos).
(Bouzid et al., 2015). Teniendo en consideración que
Un estudio realizado en Europa por Epe et al. (2010)
la prevalencia aumenta en los climas cálidos,
quienes estratificaron la prevalencia de Giardia de
templados
riesgo
acuerdo con la edad, sexo y signos, demostró que las
corresponderían a cachorros e inmunodeprimidos
hembras tendrían una frecuencia levemente menor
(Mosquera, 2016).
que los machos (23,6% y 25,8% respectivamente). En
Estudios realizados sobre presencia de protozoos en
relación con la edad, los individuos menores de 6
animales domésticos apuntan que Giardia spp.
meses tuvieron un 42,8% de positividad a Giardia,
corresponde a una de las mayores frecuencias,
mientras que aquellos ejemplares que superaban los
estando presente en 1/6 de los perros con cuadros
5 años solo tenían un 12,3% de positividad, lo que
diarreicos. Esto le otorga el tercer lugar en relación
implica un menor riesgo. Respecto de la presencia de
con las parasitosis que afectan animales domésticos
signos clínicos, la positividad a Giardia en perros con
(Mosquera, 2016).
diarrea aguda, crónica y sin signos fue de 26,9%, 28%
Estudios sobre la prevalencia de Giardia spp. en
y 15,9% respectivamente.
poblaciones caninas, han demostrado su presencia
Muy similares fueron los resultados de las
en el 10% de individuos mantenidos en buenas
investigaciones realizadas por Alves y Santos (2016)
condiciones sanitarias; 26% a 50% en cachorros y
en Portugal, quienes reportaron que el 60% de un
hasta un 100% en criaderos. Es necesario tener en
grupo de perros positivos a Giardia eran menores a 6
y
los
grupos
de
mayor
cuenta que aun cuando la prevalencia de la infección
48
meses de edad. Cabe mencionar que ninguno de los
sedimentación Telemann modificado (Crespo et al.,
ejemplares estudiados presentó signos clínicos.
2015).
Según reportes de estimación de prevalencia de Giardia en caninos chilenos, se describe un nivel de infección
comprendido
entre
4,0%
y
21,7%
(presentando signos digestivos) (Luzio et al., 2015). La población canina con o sin dueños se ha incrementado,
aumentando
el
contacto
con
humanos (Llanos et al., 2010). Sumado a esto, Giardia
es
considerada
como
una
de
las
enfermedades parasitarias importantes en términos de morbilidad humana (Bianciardi et al., 2004). Dichos factores hacen necesaria la realización de más estudios sobre su prevalencia en caninos para evaluar el impacto que tiene este protozoo (Pablo et al., 2012).
El tamaño muestral se determinó mediante la fórmula para la estimación de un parámetro de una variable categórica en una población infinita, utilizando una prevalencia referencial de 9,35% (Pablo et al., 2012; Huamancayo y Chávez, 2015). Se utilizó un nivel de seguridad de 95% y una precisión del 9%, obteniendo un total de 40 muestras que fueron extraídas de puntos aleatorios luego de dividir la ciudad de Lota en 4 sectores. La estratificación fue en base al total de canes, de manera similar a la estratificación realizada en los estudios de Tortolero et al. (2008) y Huamancayo y Chávez (2015) para la presencia del parásito en relación con el sexo y edad del paciente; además, fue
Material y Método
extrapolado a las otras variables del estudio. Es importante destacar que se consideraron
El estudio correspondió al tipo observacional,
positivas aquellas muestras que presentaron al
analítico de corte transversal y se llevó a cabo entre
menos un quiste Giardia spp. el que fue
los meses de Enero - Marzo del 2017. Se incluyeron
identificado mediante observación morfológica al
caninos categorizados como clínicamente sanos
microscopio óptico, tomando como referencia las
procedentes en la comuna de Lota, VIII Región del
ilustraciones de Madrid (2012).
Biobío.
Para comparar la prevalencia de quistes de Giardia
Se utilizaron heces frescas de caninos que fueron
spp., se utilizó la prueba Z de comparación de
obtenidas por expulsión natural. Las muestras se
proporciones y la asociación entre las variables de
obtuvieron durante tres días alternados en cada
interés y la presencia de Giardia spp se analizó
indiciduo con el fin de mejorar la sensibilidad, debido
mediante
a la irregularidad en la eliminación de quistes de
independencia con un nivel de significancia de 0,05.
Giardia spp. y fueron conservadas en frascos con
Los datos fueron analizados con los softwares
Fenol-Alcohol-Formaldehido (PAF) para su posterior
estadísticos SPSS v. 23.0 para Windows y Epidat 3.1.
la
prueba
de
Chi
cuadrado
de
transporte al Laboratorio Parasitológico del Hospital Clínico Veterinario de la Universidad San Sebastián (HCV-USS) y análisis mediante la técnica de
49
Resultados De 40 muestras fecales procedentes de perros clínicamente sanos de distintos sectores de la comuna de Lota, no se encontraron quistes de Giardia spp. (0% positivos). Con base en estos resultados se determinó el intervalo de confianza para la prevalencia obtenida el cual varió entre 0 y 8,8%, tal como se indica en la Tabla I. Relacionado con lo anterior, al no existir individuos positivos a la presencia de quistes de Giardia spp., no se determinó relación estadísticamente significativa entre la prevalencia del parásito y las variables de interés (Tabla II).
De modo similar, la baja prevalencia de Giardia spp. obtenida en el presente análisis, es también concordante con el metaanálisis realizado por Bouzid et al. (2015), quienes analizaron un total de 127 publicaciones
internacionales
respecto
de
la
prevalencia de este parásito en caninos y felinos, tanto con signos como sin signos, concluyendo que de 4.309.451 muestras analizadas, sólo 112.513 (2,61%) resultaron positivas en caninos con signos, mientras que la prevalencia se redujo 1,6% en individuos sin signos. Comparando nuestros resultados con estudios realizados en Perú, el panorama es notablemente distinto. Un estudio realizado por Sotelo et al. (2013), demostró una prevalencia de Giardia spp. en perros
Discusión
con “heces formadas” (considerados como sin signos) de un 11,7%. De manera similar, en Japón,
Durante los últimos años las infecciones transmitidas por mascotas al ser humano han ido adquiriendo mayor relevancia (López et al., 2006). La transmisión de Taenia spp., Echinococcus spp., Diphylidium caninum, Toxocara canis, Ancylostoma spp. Giardia spp., y Cryptosporidium spp., por perros domésticos (Canis lupus familiaris) se encuentra ampliamente documentada (López et al., 2006; Gharekhani, 2014). Si bien este estudio determinó una prevalencia de quistes de Giardia spp. en muestras fecales de 0% (IC 95% 0 – 8,8), es consistente en relación a estudios internacionales que reportan bajos porcentajes en individuos asintomáticos: 0,1% en Republica Checa (Dubná et al., 2007), 8,4% en Reino Unido (Batchelor et al., 2008), 5,2% en Islas Galápagos (Gingrich et al., 2010), 6,7% en E.E.U.U. (Covacin et al., 2011), 4,8% en Rumania (Mircean et al., 2012), 4,8% en Brasil (Quadros et al., 2013), 0,4% en E.E.U.U. (Mohamed
otros estudios también indican altas prevalencias del parásito en caninos sin signos. Itoh et al. (2001) reportan cifras de 10%, sin embargo, los caninos fueron muestreados en criaderos, lo que supone hacinamiento y menor higiene ambiental. Con relación a nuestro país, consultadas diversas bases de datos académicas, no fue posible constatar publicaciones que determinaran la prevalencia de infecciones por Giardia spp. en perros clínicamente sanos o sin signos. A pesar de esto, hay trabajos enfocados en perros con y sin signos clínicos. Un claro ejemplo de ello es el trabajo realizado por Luzio et al. (2015) en la ciudad de Los Ángeles, cuyo fin fue examinar restos fecales caninos presentes en plazas y parques de dicha ciudad, determinando una prevalencia de 2,21%, lo cual contrasta con el reporte de López et al. (2006) que señala una prevalencia del 22% en perros con signos clínicos.
et al., 2013) y 7,4% en Portugal (Neves et al., 2014).
50
La bibliografía consultada indica que la tasa de
Este hecho también es corroborado por el trabajo de
prevalencia de Giardia spp. en las heces de los
Bouzid et al., (2015), quienes al comparar varios
perros, varía considerablemente de un estudio a otro
métodos de diagnóstico de Giardia spp., reportaron
(López et al., 2006; Dubná et al., 2007; Gingrich et al.,
que ELISA, IFA y PCR poseían tasas de prevalencia
2010; Itoh et al., 2001; Covacin et al., 2011; Mircean
entre 2,6 y 3,7 veces mayores a los estudios que
et al., 2012; Mohamed et al., 2013; Quadros et al.,
utilizan microscopía para su diagnóstico. Aun así,
2013; Neves et al., 2014; Gharekhani, 2014; Luzio et
señalan que no hay que subestimar los estudios
al., 2015) y además, esta prevalencia heterogénea,
basados en microscopía directa en comparación a los
dependerá de varios factores (Tangtrongsup y
otros métodos mencionados.
Scorza, 2010) los cuales se mencionarán a lo largo de
Además de la baja sensibilidad del método, Geurden
la discusión.
et al. (2008), sostienen que la excreción intermitente
Uno de los factores que ayudan a explicar la
de quistes puede afectar la prevalencia, por lo que
prevalencia de 0% determinada en este estudio, es la
Mircean
técnica empleada. En efecto, cuando se investiga en
incrementar la sensibilidad de la técnica de
los datos de prevalencia, es claro que el principal
microcopía, se deben recolectar muestras fecales
factor que promueve las diferencias es el método de
durante 5-7 días.
detección utilizado. En particular, se ha demostrado
Un aspecto menos estudiado, pero no menos
que el método de detección por microscopía tiene
probable y que es necesario considerar es la
menor rendimiento en comparación con otros
“experiencia en diagnóstico microscópico” por parte
métodos (inmunológicos o moleculares), ya que las
del examinador. Así lo recalca Mircean et al. (2012)
etapas y pasos en la preparación y/o concentración
quienes señalan que la sensibilidad al momento de
de las muestras, pueden afectar significativamente la
analizar las muestras dependerá en gran medida de
sensibilidad de la técnica (Gharekhani, 2014).
la habilidad del microscopista.
Estudios comparativos entre los métodos de
Por otro lado, Bouzid et al. (2008) señalan otros
microscopía convencional (usando sedimentación) y
aspectos relevantes, para todos los métodos de
PCR muestran una menor detección de Giardia spp.
detección: cantidad y calidad del material patógeno
lo cual, frente a bajas prevalencias en el medio,
en las muestras.
puede ser una posible explicación al hecho de no
Es necesario tener en consideración, que si bien no
encontrar dicho protozoo. En particular, en el trabajo
se demostró presencia de Giardia spp. en las
realizado por Puebla et al. (2017) quienes
muestras, el cálculo de los intervalos de confianza
compararon la eficiencia de ambos métodos, de 98
sugiere un mayor riesgo de infección en los extremos
muestras fecales analizadas por microscopía solo 7
etarios. Específicamente en cachorros, la prevalencia
fueron positivas, mientras que por PCR la cifra se
comprende un rango (IC 95%) de 0 – 24,7%. Este
elevó a 11 (un 57% más).
hallazgo se corrobora con otros estudios que
et
al.
(2012)
proponen
que,
para
también señalan este aumento en la prevalencia en
51
los cachorros como es el caso de Japón con un 51,1%
climáticas y ambientales favorables para los
(Itoh et al., 2001), Finlandia con un 19% (Rimhanen-
parásitos, sumado a un nivel socioeconómico (NSE)
Finne et al., 2007), Reino Unido con un 16,3%
bajo, son indicadoras de altas prevalencias (mayores
(Batchelor et al., 2008), Europa con un 42,8% (Epe et
a un 20%) para parásitos gastrointestinales. Pese a
al., 2010) y China con un 25,5% (Li et al., 2012).
que en la comuna de Lota el 74,4% de la población
En el otro extremo, los individuos seniles,
pertenece a los NSE bajos, D (41,8%) y E (32,6%)
presentaron el más alto intervalo de riesgo de
(Instituto Nacional de Estadística, 2010), la ausencia
contagio (IC 95% 0 – 36,9); pero no se encontró dicha
de Giardia spp. en las muestras, podría estar
relación en ninguno de los trabajos consultados en
explicado por Gorman et al. (2006), quienes
las diversas bases académicas, es más, se demostró
realizaron un estudio de base para determinar la
lo contrario. Esta discrepancia podría estar explicada
presencia de parásitos gastrointestinales en los
por el bajo número de perros seniles muestreados (n
diferentes NSE y lograron establecer que no existían
= 8) en el presente estudio.
diferencias significativas en la tasa de parasitación en
La forma bimodal de la prevalencia según estrato
familias pertenecientes a los grupos D y ABC1, pero
etario es parcialmente coincidente con lo señalado
sí con el grupo E. Aun así, otro estudio realizado en
por Kostopoulou et al. (2017), respecto que las
Chile menciona que el 92% de los perros de NSE alto
probabilidades
Giardia spp.
y, el 42% de NSE medio y bajo, se encuentran bajo
disminuyen en 1,9% por cada mes de edad de los
control veterinario (López et al., 2006). Por ende,
caninos. De modo similar a este estudio, y
independiente del NSE del hogar, existirían cuidados
corroborando los datos anteriormente mencionados,
médico veterinarios básicos hacia la mascota,
otra investigación determinó que la prevalencia
especialmente el uso de antiparasitario. Esto se vio
de Giardia spp. es significativamente mayor en los
reflejado en que al menos un 80% de los propietarios
perros más jóvenes (menores de 12 meses)
encuestados en este estudió declaró desparasitar a
independiente del método de detección utilizada
su mascota de manera ocasional o rutinaria.Dentro
(ELISA o microscopía) (Mircean et al., 2012; Qi et al.,
de los antiparasitarios de elección por los dueños
2016).
destacó Drontal®, cuya composición es 144 mg de
Con respecto al sexo, los estudios señalan que hay
Embonato de Pirantel, 150 mg de Febantel y 50 mg
una mayor prevalencia en machos por sobre las
de Praziquantel. Donde la acción sinérgica del
hembras, con cifras de un 25,8% (Epe et al., 2010) y
Febantel y Pirantel generan lisis celular de los
11,3% (Li et al., 2012). Sin embargo, los incrementos
trofozoítos, teniendo una eficacia aproximada del
registrados en machos no son estadísticamente
92,1% en la eliminación de Giardia spp. naturalmente
significativos (Fontanarrosa et al., 2006).Según
adquirida por los canes (Barutzki et al., 2002;
Soriano et al. (2010), al momento de efectuar
Montoya et al., 2008). Lo anterior es un importante
interpretaciones
factor protector y que claramente está relacionado
de
es
detección de
importante
tener
en
consideración otros factores. Las características
52
con la ausencia del protozoo en el muestreo
gastrointestinales zoonóticos en caninos con
microscópico.
dueño del área urbana del municipio de la
El hecho de que sea una mascota restringida al
mesa, Cundinamarca. Revista de la Facultad
interior de las viviendas le otorga al ejemplar, un
de Medicina Veterinaria y de Zootecnia, 62 (1),
factor protector para la presencia de Giardia spp.
20 – 36.
(Bouzid et al., 2015). Al ya mencionado uso de
Ballweber, L., Xiao, L., Bowman, D., Kahn, G. y
antiparasitario, se le suma la poca interacción con
Cama, V. (2010). Giardiasis in dogs and cats:
otros individuos de su misma o diferente especie,
update on epidemiology and public health
declarada por los propietarios. El 40% de los canes
significance. Trends in Parasitology, 26 (4),
muestreados en este estudio no poseía contacto con
180 – 189.
otros animales lo cual disminuye drásticamente el
Barutzki, D., Schimmel, A., y Schaper, R. (2002).
contagio por contacto. Lo anterior se ve apoyado por
Efficacy of pyrantel embonate, febantel and
los estudios realizados por Fontanarrosa et al. (2006),
praziquantel against Giardia spp. in naturally
Batchelor et al. (2008), Upjohn et al. (2010) y Mircean
infected dogs. Am. J. Vet. Res, 59, 1134-1136.
et al. (2012) quienes coinciden en señalar un mayor
Batchelor, D. J., Tzannes, S., Graham, P. A.,
riesgo en los caninos que poseen contacto con otros,
Wastling, J. M., Pinchbeck, G. L., y German, A.
ya sea que vivan en comunidades, o en contacto
J. (2008). Detection of endoparasites with
ocasional.
zoonotic
Corroborando
la
asociación
potential
estadísticamente significativa entre los factores
gastrointestinal
“tener contacto con otros animales” y el “registro de
UK. Transboundary
enfermedades parasitarias” (Kostopoulou et al.,
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2017) en particular de Giardia spp.
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and Giardia duodenalis in dogs and cats in
Estado falcón, Venezuela. Revista Científica FCV-LUZ, 18 (3), 312 – 319.
Enterocytozoon
bieneusi
Shanghai, China. Parasites y Vectors, 9 (1), 121 – 131
.
57
Tablas e ilustraciones
Figura 1. Mapa de la cuidad de Lota dividida en los 4 sectores a muestrear. Fuente: Google Maps (2016) Tabla I. Prevalencia e intervalo de confianza al 95% de quistes de Giardia spp. en muestras fecales de 40 perros de la comuna de Lota, VIII Región - Chile, periodo de Enero – Marzo 2017.
Especie
Canino
Método
Telemann Microscopía
Muestras positivas a quistes de
Total de muestras
Giardia spp.
analizadas
(n)
(n)
(IC95%)*
0
40
0% (0,0-8,8)
Prevalencia de Giardia spp
٭Intervalo de confianza al 95%. Límites inferior y superior.
58
Tabla II. Prevalencia e intervalo de confianza al 95% de quistes de Giardia spp, estratificado según sexo, grupo etario, uso de antiparasitario y contacto con otras mascotas en muestras fecales de 40 perros de la comuna de Lota, VIII Región - Chile, periodo de Enero – Marzo 2017.
Estrato Positivos a Variable
quistes de Giardia spp n (%)
Negativos a quistes de Giardia spp
Total de muestras
Prevalencia%; (IC 95%*)
p
n ( %)
Grupo etario Cachorro
0 (0)
13 (100)
13
0; (0,0 – 24,7)
-
Adulto
0 (0)
19 (100)
19
0; (0,0 – 17,6)
-
Senil
0 (0)
8 (100)
8
0; (0,0 – 36,9)
-
Macho
0 (0)
15 (100)
15
0; (0,0 – 21,8)
-
Hembra
0 (0)
25 (100)
25
0; (0,0 – 13,7)
-
Nunca
0 (0)
8 (100)
8
0; (0,0 – 36,9)
-
Ocasional
0 (0)
11 (100)
11
0; (0,0 – 28,4)
-
Siempre
0 (0)
21 (100)
21
0; (0,0 – 16,1)
-
Sexo
Uso de antiparasitario
Contacto con otras mascotas Sí
0 (0)
24 (100)
24
0; (0,0 – 14,2)
-
No
0 (0)
16 (100)
16
0; (0,0 – 20,5)
-
٭Intervalo de confianza al 95%. Límites inferior y superior.
59
Rev. med. vet. Investing. 1(1):60-73, 2018 Artículo original
Determinación del fierro sérico en perros no anémicos con y sin policromasia en el Hospital Clínico Veterinario de la Universidad San Sebastián sede Concepción. CONSTANZA HERVERA-RIFFO1, ANTONIO BIZAMA1 y JUAN GONZALO MONROY1 1
Facultad de Medicina Veterinaria. Universidad San Sebastián, Concepción, Chile.
Constanza Hervera-Riffo: constanzaabelen@live.cl Resumen La policromasia es una característica citológica anormal de eritrocitos inmaduros, denominados reticulocitos, estas células indican una actividad eritropoyética aumentada asociada generalmente a hemólisis, hemorragias o anemias. El fierro se encuentra formando parte del anillo hemo dentro del glóbulo rojo permitiendo la unión con el oxígeno para transportarlo hasta los tejidos. Cuando es escaso, la síntesis de hemoglobina disminuye y se prolonga el tiempo de maduración de los eritrocitos, dando paso a cuadros anémicos. El objetivo de este trabajo fue evaluar los contenidos de fierro en pacientes caninos sin anemia, con y sin polocromasia en el Hospital Clínico Veterinario de la Universidad San Sebastián (HCV- USS), Sede Concepción. La población de estudio incluyó a 44 caninos. La muestra se obtuvo por punción única de la vena cefálica en el miembro anterior derecho, obteniendo 4 ml de sangre por paciente, y se dividió en dos tubos estériles, un tubo color lila y un tubo color rojo. Así, se definieron 2 grupos de procesamiento, el primer grupo (lila) tratado como grupo control, los cuales no contaban con policromasia y otro grupo con policromasia. Los resultados de esta investigación demostraron que no existe una diferencia estadísticamente significativa en el nivel de fierro entre ambos grupos (p>0,05). Los resultados obtenidos en esta investigación únicamente pueden aplicarse al Laboratorio Clínico del HCV-USS, Sede Concepción, ya que dependen de las condiciones de trabajo, del método analítico empleado y del equipo utilizado, aunque sí pueden servir de guía y referencia para los laboratorios que deseen realizar sus propios estudios sobre este tema. Palabras clave: Policromasia, fierro, anemia, reticulocitos, recuento reticulocitario, eritrocito, hemoglobina
Abstract Polychromy is an abnormal cytological feature of immature erythrocytes, called reticulocytes, these cells indicate an erythropoietic activity associated with generalized haemolysis, hemorrhages or anemia. The iron, vital mineral, is part of the heme ring inside the red blood cell, allowing its union with oxygen to transport it to the tissues. When it is scarce, the synthesis of hemoglobin decreases and the time of maturation of the erythrocytes is prolonged, giving way to anemic states. To evaluate the iron levels in canine patients without anemia, with and without polychromatofilia in the Veterinary Clinical Hospital of the San Sebastián University (VHC- USS), Concepción. The study population includes 44 canines. The sample was obtained by single puncture of the cephalic vein in the right anterior limb, obtaining 4 ml of blood per patient, and divided into two sterile lines, a purple cap tube and a red cap tube. Thus, 2 processing groups were defined, the first group treated as a control group, which did not have polychromy and another group with polychromy. The results of this investigation showed that there is no statistically significant difference in the level of iron between
60
both groups (p> 0.05). The results obtained in this research may affect the Clinical Laboratory of the HCV-USS, Concepción, which may depend on the working conditions, the analytical method used, and the equipment used, although they can serve as a guide and reference for laboratories that wish to carry out their own studies on this subject. Key words: Polychromasia, iron, anemia, reticulocytes, reticulocyte count, erythrocyte, hemoglobin
producido por la oxidación celular (Naranjo, 2008; Mejía Introducción
y Alzate, 2015). En gran parte de los mamíferos
La hematopoyesis es un proceso imprescindible para la
presentan forma de disco bicóncavo, el que le da lugar a
vida, que ocurre principalmente en la medula ósea y
una palidez central característica observada en el frotis
tiene como fin la producción y maduración de células
sanguíneo. Entre los mamíferos domésticos, los caninos
sanguíneas a partir de una célula madre pluripotencial
presentan ciertas particularidades como una palidez
(Aceña y Gascón, 2001; Carr y Rodak, 2010). Esto ocurre
central más pronunciada y un glóbulo rojo de mayor
gracias a la acción de la eritropoyetina (EPO), hormona
tamaño (Harvey, 2001). Una característica distintiva de
glucoproteica de origen renal, encargada de la
estas células es su capacidad para sufrir grandes
regulación de la producción de eritrocitos, secretada
deformaciones durante el paso repetitivo a través de los
por el riñón en respuesta a hipoxia celular (Naranjo,
capilares de la microcirculación (Mohandas y Gallagher,
2008). En 1961 Till y Mc Lollough ya demostraban
2008), aun cuando el diámetro de estas células oscila
experimentalmente la existencia de la célula madre
entre los 7-8 µm (Naranjo, 2008; Carr y Rodak, 2010).
(Naranjo, 2008). Ésta por efecto de citoquinas y
Los eritrocitos representan aproximadamente el 45%
hormonas hematopoyéticas proliferará y diferenciará
del total del volumen de la sangre, poseen una vida
en células madres mieloides (CMM) o linfoides (CML)
media de 120 días en seres humanos y caninos (Pulido y
(Naranjo, 2008; Carr y Rodak, 2010). La célula madre
Sunyer, 2003; Campuzano, 2008). Carecen de núcleo y
mieloide, genera una célula madre intermedia, que
de la mayoría de los organelos (Harvey, 2001; Mejía y
luego puede dar origen a eritrocitos, megacariocitos,
Alzate, 2015). Durante el proceso de maduración de las
granulocitos o monocitos (Carr y Rodak, 2010). Luego
células sanguíneas, éstas disminuyen de tamaño y no
vendrá un proceso de maduración celular en donde se
hay presencia de núcleos, ya que se eliminan mediante
producirán cambios bioquímicos, morfológicos y
un proceso donde son envueltos en una doble
funcionales a nivel del núcleo y citoplasma, como la
membrana para formar autofagosomas, los que serán
pérdida del ácido ribonucleico (ARN) desde el citoplasma,
expulsados fuera de la célula (Griffiths et al., 2012). Todo
así finalmente se forma una célula terminal madura, la
esto ocurre de forma sincronizada y tarda alrededor de
cual ya no se divide (Naranjo, 2008).
5 a 7 días y cuando no se realiza de forma paralela recibe
El eritrocito es una célula altamente especializada, cuya
el nombre de asincronismo, lo que indica anormalidad
función es transportar el oxígeno a todas las células del
(Naranjo, 2008). Los índices eritrocitarios son de gran
cuerpo, además de la remoción del dióxido de carbono
importancia, ya que aportan información para encauzar,
61
desechar o confirmar diagnósticos presuntivos. Cuando
núcleo al pasar por los poros del endotelio de los senos
la demanda de eritrocitos aumenta, ya sea por pérdida
venosos de la médula ósea (diámetro de 1 - 4 µm), poros
o mayor consumo de ellos, la médula ósea aumenta y
por los cuales sólo atraviesa el citoplasma (los núcleos
acelera su respuesta, lo que se observa como un
expulsados son digeridos por los macrófagos de la
aumento en el tamaño de los glóbulos rojos que van a
medula ósea), luego de eso maduran gradualmente,
circulación (Aguiló, 2001).
parte en la médula ósea (3 días en promedio) y en la
La polocromasia o policromasia es una característica
sangre periférica (1 día) (Naranjo, 2008; Alonso, 2013).
citológica
inmaduros,
El fierro puede entrar en el reticulocito debido a que
denominados reticulocitos, la cual se observa como
éste en su membrana presenta receptores para
células con una coloración azul. Estas células se
transferrina (Naranjo, 2008).
caracterizan por la presencia intracitoplasmática de
La anemia es un cuadro producido por la disminución en
ribosomas, los que le dan su color característico, su
el número de eritrocitos circulantes en sangre, también
tamaño es un 28% mayor que el tamaño de la población
se produce por la disminución de hemoglobina, o ambos
de eritrocitos restantes (Campuzano, 2008). La
factores a la vez. En estos cuadros se encuentra
policromasia
eritrocitos
disminuida la capacidad de la sangre para transportar
inmaduros, el aumento de estas células en la sangre
oxígeno a los tejidos y se caracteriza por anorexia en
periférica es un signo de actividad eritropoyética
algunos casos, pérdida de peso, intolerancia al ejercicio
aumentada, generalmente asociada a hemólisis,
y palidez de las mucosas (Fragío et al., 2009; Barrios et
hemorragia reciente, respuesta al tratamiento con
al., 2010). Según Pérez et al., (2005). “La patogénesis ha
fierro o Ácido fólico (Grinspan, 1985). El volumen
sido atribuida a deficiencias en varias etapas de la
eritrocitario medio (VCM) se expresa en fentolitros (fL), y
eritropoyesis: inhibición de la respuesta de los
lo normal en caninos es de 60 a 72 fL, valores mayores a
progenitores eritroides a la eritropoyetina, disminución
este rango son considerados ‘macrocitosis’. La
de la vida media de los eritrocitos maduros y reducción
macrocitosis se relaciona con la anemia y este aumento
del fierro disponible”. Para compensar la anemia, el
en tamaño de los glóbulos rojos puede deberse a una
organismo utiliza dos mecanismos fisiológicos: aumenta
eritropoyesis acelerada y en respuesta a una fuerte
el gasto cardiaco y aumenta los contenidos de 2,3-
estimulación de la médula ósea, detonada por hipoxia
difosfoglicerato
tisular, pérdida de sangre o hemólisis, provocando que
favoreciendo la cesión de oxígeno en los tejidos, ambos
se liberen a circulación los reticulocitos almacenados en
procesos actúan en las anemias crónicas (hemolíticas o
la médula ósea. (Aguiló, 2001). Los reticulocitos
hipoproliferativas), sin embargo, en anemias agudas
representan a los eritrocitos inmaduros en su etapa final
(hemolíticas o hemorragias agudas) el tiempo de
de diferenciación, no presentan núcleo y los organelos
reacción es muy corto, por lo tanto, solo actúa el primer
que quedan dentro del reticulocito mantienen activa la
mecanismo compensatorio (Fragío et al., 2009).
síntesis de hemoglobina. Se originan de los eritrocitos
El fierro es un mineral vital, ya que se encuentra como
ortocromáticos, después de que éstos expulsan el
componente de enzimas y otros complejos moleculares.
anormal
indica
de
la
eritrocitos
presencia
de
(2,3-
DPG)
en
los
eritrocitos,
62
Dentro de sus funciones principales se encuentra el
al oxígeno en los pulmones para su transportado a los
transporte de oxígeno a través de la hemoglobina,
tejidos (Gaw et al., 2001; Bishop et al., 2005) Cuando el
formar parte de la enzima ribonucleótido reductasa en
fierro es escaso, se produce una disminución de la
la síntesis de ADN, y el transporte de electrones por
síntesis de hemoglobina, lo que prolonga el tiempo de
tener la capacidad de aceptarlos y donarlos (Toxqui et
maduración de los precursores eritroides, para
al., 2010). En el organismo del canino, el fierro se
completar su contenido con ésta, dando paso a cuadros
almacena de dos formas moleculares diferentes: como
anémicos (Aceña y Gascón, 2001). Las principales causas
ferritina o hemosiderina, y lo hace principalmente en la
de la deficiencia de fierro pueden ser: pérdida de sangre,
médula ósea y a travez de proteínas trasportadoras
dieta deficiente o inadecuada (pobre en fierro o con
específicas a hígado, bazo y tejido muscular. Se
exceso de inhibidores de la absorción del metal),
transporta gracias a la transferrina (Tf) y ferritina,
aumento de la demanda en la gestación y mala
quienes son, respectivamente, las responsables del
absorción por patologías gastrointestinales (Pérez et al.,
transporte y almacenamiento de fierro. Estas proteínas
2005).
se unen fuertemente de forma reversible al metal para
Según Grinspan (1985): “El estudio e interpretación del
evitar que el fierro libre forme sustancias tóxicas para el
frotis de sangre periférica como parte del hemograma,
organismo, o que se pierda vía filtración glomerular
representa la extensión morfológica del estado de los
(Pérez et al., 2005). De los 3-5 gramos de fierro
elementos celulares de la sangre. Constituye un examen
contenidos en el cuerpo del individuo, 2-2,5 gramos de
rutinario, que cuando es debidamente interpretado por
él se encuentran en los glóbulos rojos de la sangre o sus
el observador, tiene una enorme utilidad diagnóstica
precursores de la médula ósea (Bishop et al., 2005). Por
para el médico y puede considerarse el paso más
lo tanto, cerca del 55% del fierro total está
importante en la identificación del mecanismo
constituyendo la molécula de hemoglobina, en la que el
responsable de una anemia”. En el extendido de sangre
fierro es necesario para la conformación del anillo hemo
periférica, es posible observar alteraciones relacionadas
(Liste et al., 1994). En los animales domésticos, los
con la morfología de los eritrocitos, leucocitos y las
requerimientos de fierro varían según las necesidades
plaquetas (Campuzano, 2008).
de cada individuo, edad, crecimiento y biodisponibilidad
Al realizar un extendido de sangre periférica en un
efectiva. En el canino, los requerimientos de fierro se
paciente sano, solo se espera encontrar tres tipos de
estiman en 80 ppm diarios (Chausow y Czarnecki-
células, todas provenientes de la médula ósea: los
Mauden, 1987). Como la excreción del fierro es muy
eritrocitos, leucocitos y plaquetas (Campuzano, 2008).
baja, su ingestión también debe ser baja y sólo el 10%
En algunas patologías, células inmaduras pueden ser
del metal es absorbido, siendo el duodeno la zona del
observadas en sangre periférica, lo que se aprecia por
tracto digestivo más eficiente en esto (Bishop et al.,
distintas características citológicas como: diferencia de
2005; Pérez et al., 2005).
tamaño, núcleo y citoplasma (Naranjo, 2008).
El fierro es un componente esencial de la hemoglobina
Por lo expuesto anteriormente, se plantearon las
ya que con este metal es posible la unión del eritrocito
siguientes preguntas: ¿Por qué algunos pacientes
63
caninos que no cursan con cuadros anĂŠmicos presentan
atendidos en el HCV-USS, que cumplieron con los
policromatĂłfilos en frotis sanguĂneo? ÂżLa policromasia
criterios de inclusiĂłn y exclusiĂłn, cuyos propietarios
tendrĂĄ relaciĂłn con el contenido sĂŠrico de fierro? Se ha
aceptaron y firmaron el consentimiento informado.
establecido que, al realizar un frotis de sangre y
El tamaĂąo de muestra se estableciĂł mediante la fĂłrmula
posterior anĂĄlisis microscĂłpico, la policromasia se
correspondiente a tamaĂąo de muestra para la
considera un indicador de anemia. Sin embargo, en el
comparaciĂłn de medias en una poblaciĂłn infinita.
laboratorio del HCV-USS, sede ConcepciĂłn, tras realizar numerosos hemogramas se ha observado la presencia de policromatĂłfilos en pacientes caninos que contaban con hemogramas dentro de rangos normales para la especie. Como no hay registros de investigaciones locales relacionadas con policromasia positiva en caninos sin cuadro anĂŠmico, se considerĂł necesario llevar a cabo esta investigaciĂłn de manera de obtener antecedentes
Donde:
que fundamenten o ayuden a entender esta condiciĂłn.
ď&#x201A;ˇ
đ?&#x2018;&#x203A; = tamaĂąo de la muestra.
El objetivo de este estudio fue evaluar el contenido de
ď&#x201A;ˇ
đ?&#x2018;?đ?&#x203A;ź = valor Z correspondiente.
ď&#x201A;ˇ
đ?&#x2018;?đ?&#x203A;˝ = valor Z correspondiente.
ď&#x201A;ˇ
đ?&#x2018;&#x2020; 2 = varianza de la variable cuantitativa que
fierro en pacientes caninos sin anemia, con y sin policromasia.
Material y MĂŠtodo
tiene el grupo control o de referencia (Liste et al., 1994).
El presente estudio fue de tipo observacional, analĂtico
ď&#x201A;ˇ
de corte transversal y evaluĂł la relaciĂłn entre los
đ?&#x2018;&#x2018; = valor mĂnimo de la diferencia que se desea detectar (datos cuantitativos).
contenidos de fierro en sangre perifĂŠrica con la presencia de policromatĂłfilos en pacientes caninos domĂŠsticos no anĂŠmicos, atendidos en el Hospital ClĂnico Veterinario de la Universidad San SebastiĂĄn, Sede ConcepciĂłn (HCV-USS). Entre los meses de enero y
Se incluyeron en el estudio aquellos pacientes que cumplieron con todos los siguientes criterios:
ď&#x201A;ˇ
Caninos domĂŠsticos sin distinciĂłn de raza y sexo.
ď&#x201A;ˇ
Pacientes que asistieron a control mĂŠdico o
mayo, 2017. Considerando dentro del grupo positivo todo valor superior a 2,5% de reticulocitosis y, como grupo negativo, todos los valores inferiores a este.
cirugĂas
electivas
como:
ovariectomĂa,
histerectomĂa y castraciĂłn. La poblaciĂłn estuvo constituida en su totalidad por pacientes caninos domĂŠsticos (Canis lupus familiaris),
ď&#x201A;ˇ Edades entre los 1 y 8 aĂąos. ď&#x201A;ˇ ClĂnicamente sanos, sin antecedentes de 64
enfermedad
(inspección
clínica
general
y
hemograma dentro de rangos normales),
Sin tratamiento farmacológico.
USS para su procesamiento. Para el hemograma se utilizó un contador hematológico veterinario KT-6200 VET. Para los resultados se confeccionó una planilla Excel
Adecuada condición corporal según raza y tamaño el paciente.
donde se registró el nombre, sexo, edad, resultados de hematocrito (%), hemoglobina (gr/dl), recuento de eritrocitos (Nro/uL), leucocitos (Nro/uL), plaquetas
Pacientes con vacunas y antiparasitarios al día.
(Nro/uL), contenido de fierro (μg/dL), VMC y CHCM. Para los frotis sanguíneos se utilizaron 9 microlitros (μL)
Se excluyeron del estudio todos aquellos pacientes que
de sangre desde el tubo tapa lila, los cuales fueron
presentaban alguna de las siguientes condiciones:
depositados en un extremo de un portaobjeto nuevo; con la ayuda de un cubreobjetos se realizó un extendido
Menores de 1 año y mayores de 8 años.
de sangre, una vez seco fue sometido a tinción Diff-
Enfermos
Quick, que tiñó todos los elementos celulares
o
que
cursaban
cuadros
inflamatorios.
Todas las muestras obtenidas fueron sometidas a la
Inadecuada condición corporal.
Hembras preñadas, en lactancia y/o cercanas a su ciclo estral.
cuantificación de reticulocitos mediante el colorante vital azul cresil brillante. Lo que permitió determinar el índice reticulocitario, que fue expresado en porcentaje. Este método contempló el conteo de 1.000 eritrocitos.
Sin vacunas y no desparasitados.
Anémicos o con antecedentes de pérdida de sangre 30 días previos al estudio.
sanguíneos.
Con enfermedad periodontal.
Para esto se incubaron 100 μL de sangre con un volumen equitativo de azul cresil brillante en un tubo khan por 15 minutos a 37ºC. Al término de este periodo se realizaron extensiones sanguíneas para el conteo de reticulocitos en la cantidad indicada.
Donadores de sangre el último mes.
El criterio para diferenciar e identificar los reticulocitos se
Las muestras de sangre fueron obtenidas por punción
basó en la presencia de reticulina, adecuadamente
de la vena cefálica del miembro anterior derecho,
teñida sobre la superficie celular. Cualquier célula que no
recolectándose 4mL de sangre. Cada muestra se dividió
cumplió este requisito fue descartada para la
en 2 tubos rotulados con nombre y número de ficha del
cuantificación definitiva.
paciente. Los primeros 2mL en un tubo con EDTA (tapa
Para la determinación del fierro sérico se realizó una
lila) para Hemograma y los 2 mL restantes en un tubo
centrifugación
sin aditivos (tapa roja) para evaluar contenidos de fierro
rpm/5minutos. Con el suero obtenido se midió la
sérico.
ferremia a través de la reacción colorimétrica
Inmediatamente luego de obtenidas las muestras,
cuantificada por espectrofotometría. La unidad en la
fueron trasladadas hasta el laboratorio clínico del HCV-
que
se
de
2
expresaron
mL
los
de
sangre
resultados
a
fue
3.500
en
65
microgramos/decilitro (μg/dL).
En condiciones normales, deberíamos encontrar en la
Mediante el paquete estadístico IBM® SPSS® Stadistics
sangre principalmente células maduras, sin embargo,
v. 23.0.0.0 los datos fueron sometidos a la prueba de
debido a situaciones particulares fisiológicas o
Shapiro-Wilk para comprobar que se distribuían de
patológicas se pueden observar células inmaduras. Para
forma normal, ya que resultaron de libre distribución, se
que la hematopoyesis se lleve a cabo en forma normal
utilizó la prueba U de Mann-Whitney para muestras
se requiere un equilibrio fisiológico, con nutrientes
independientes. Se trabajó con un nivel de confianza del
adecuados como proteínas, vitaminas y minerales como
95%. El análisis estadístico consideró un alfa del 5%
el fierro (Pérez y Gómez, 2014).
(α=0,05), donde los resultados del valor de p calculados
Es normal encontrar en sangre periférica hasta un 2,5%
menores que alfa fueron considerados significativos.
de reticulocitos, por lo tanto, en este estudio cualquier paciente que superó este porcentaje fue considerado con reticulocitosis. Generalmente valores superiores a
Resultados En tal Tabla I se detallan los resultados en el grupo positivo de perros con reticulocitosis (> a 2,5%). Registro de porcentaje reticulocitario y contenido de fierro sérico en la población de perros con recuentro reticulocitario mayor a 2,5%. Los resultados son expresados en porcentajes y números absolutos respectivamente. La Tabla II detalla los resultados obtenidos en el grupo negativo. Se registró el porcentaje reticulocitario y contenido de fierro sérico en la población de perros con recuentro reticulocitario menor a 2,5%. Los resultados son expresados en porcentajes y números absolutos respectivamente. La Figura 1 indica medianas entre ambos grupos, la caja representa el percentil 25 – 75, la línea dentro de la caja representa las medianas; los bigotes representan valores altos y bajos. La variación en el contenido de fierro arrojó un valor de p= 0,149 por lo que no hay diferencia significativa entre ambos grupos. La Figura 2 indica los registros de medias del contenido de fierro sérico y porcentaje reticulocitario en grupo positivo y grupo negativo.
2,5% están asociados anemia reciente, anemias ferropénicas o como una respuesta fisiológica a la hipoxia, entre otros. Al analizar los contenidos de fierro sérico de los 44 pacientes estudiados, sólo 3 pacientes (6,8%) (Tabla I pacientes 9 y 16; Tabla II paciente 27) registraron contenidos de fierro significativamente bajo lo normal (181.7+-30.3 μg/dL), de éstos sólo dos se encuentran en el grupo positivo a policromasia. Sin embargo, en este estudio no se observó una diferencia significativa entre los contenidos de fierro en pacientes no anémicos con policromasia y sin policromasia (Figura 2). Los contenidos de fierro fueron analizados con espectrofotometría utilizando un equipo calibrado y de alta precisión lo que garantiza el proceso de determinación del fierro. Pattullo et al. (2015), describe en caninos la presencia de policromasia sin anemia en ciertas patologías como alteraciones cardiovasculares, condiciones autoinmunes,
dermatológicas, hepáticas,
cáncer,
enfermedades enfermedades
ortopédicas, crisis convulsivas y enfermedades renales. Considerando estas variables, en este estudio todos los
Discusión
66
pacientes fueron sometidos a exámenes clínicos y
sodio, cloro, fierro, cobre y manganeso.
pruebas de laboratorio por lo que solo se trabajó con
Hay que considerar que la industria de alimentos
pacientes sanos.
caninos ha tenido un crecimiento explosivo en los
Posiblemente hubiese sido necesario integrar en este
últimos 10 años, por lo que sería importante tener
estudio alguna encuesta que permitiera descartar otros
información actualizada al respecto. Por lo mismo no
factores predisponentes para esta condición como lo son
estaría completamente dilucidado si en la actualidad los
el nivel de ejercicio, nivel de estrés, diferencia entre
alimentos ofrecidos por el mercado nacional cumplen
perros
con los requerimientos de fierro necesarios lo cual
indoor
y
outdoor,
enfermedades
de
progenitores, entre otros.
podría ser una posible variable para la el hallazgo de
Pattullo et al. (2015), en su estudio retrospectivo
policromasia.
determinó un aumento en el porcentaje de reticulocitos
En consecuencia, podríamos inferir que la baja de fierro
en algunas razas como Labradores, mientras que otras
sérico no está siendo una variable significativa en la
como Border Collies, Cocker Spaniels y Pastores
presentación de policromasia, ya que solo el 9% de los
Alemanes presentaron una disminución en el tiempo,
pacientes con policromasia no anémicos presentaron
por lo que existiría una variable asociada a
esta condición.
características genéticas. Variable que no se analizó en
El aporte principal de este estudio sugiere que los
este estudio.
niveles de polocromasia y recuento reticulocitario
El requerimiento de fierro dietético en un perro adulto
elevados no estarían asociados a los contenidos séricos
se ha estimado en 80 ppm diarios para una correcta
de fierro, como ocurre por ejemplo en humanos
hematopoyesis (Chausow y Czarnecki-Mauden, 1987).
(Alonso, 2013). Aparentemente la elevación de
Sin embargo, en algunos casos esta ingesta no está
policromatófilos en sangre periférica estaría asociada a
garantizada. En nuestro país un estudio realizado por el
múltiples entidades clínicas que ya fueron detalladas
departamento de calidad y seguridad de productos
anteriormente y, por lo tanto, promueven una
detectadó una diferencia entre lo declarado en las
adecuada interpretación de este fenómeno en el
tablas de información nutricional de las bolsas de
examen de hemograma. Bajo este concepto, el clínico
alimentos y los resultados obtenidos en análisis de
debe sopesar la presencia de polocromasia en perros
laboratorio, en donde sólo 6 marcas de alimentos para
sanos no anémicos con la existencia de alguna de las
perros coincidieron con lo declarado en su etiqueta, los
patologías que ya fueron descritas y no necesariamente
parámetros analizados fueron proteínas, grasas, fibra
con una alteración en la ingesta o metabolismo del
cruda, humedad y cenizas (SERNAC, 2014).
fierro.
Sin embargo, otro estudio similar en nuestro país
Es necesario concluir que, los resultados obtenidos en
realizado por Hodgkinson et al. (2004), determinó que
esta investigación únicamente pueden aplicarse al
todos los alimentos estudiados satisficieron los
Laboratorio Clínico del HCV-USS, Sede Concepción, ya
requerimientos según The Association of American Feed
que dependen de las condiciones de trabajo, del método
Control Officials (AAFCO) en su contenido de fosforo,
analítico empleado y del equipo utilizado, aunque sí
67
pueden servir de guía y referencia para los laboratorios
Fragío, C., Daza, M., y García, E. (2009). Transfusiones
que deseen realizar sus propios estudios sobre este
sanguíneas en perros y gatos. Clínica Veterinaria de
tema.
Pequeños Animales, 29(4), 229-238.
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69
Tablas e ilustraciones TABLA I Resultados obtenidos en grupo positivo, población de perros con reticulocitosis (> a 2,5%) PACIENTE
% RETICULOCITARIO
AÑOS DE EDAD
SEXO
FIERRO μg/dL
1
4,5
6
M
181,1
2
3,8
1
H
187,3
3
5,4
3
M
208,4
4
2,8
2
M
232,2
5
2,7
6
H
207,8
6
3,3
8
H
226,1
7
2,9
2
M
184,2
8
2,7
6
M
205,7
9
2,5
8
H
99,8
10
2,7
3
M
140,8
11
2,6
8
M
232,6
12
2,6
8
H
204,9
13
3,4
3
H
411,8
14
2,5
1
M
281,3
15
2,6
5
H
156,2
16
2,5
1
M
99,7
17
2,8
1
M
256,5
18
2,6
5
M
409,3
19
3,3
2
H
144,7
20
2,7
1
M
168,2
21
3,0
3
H
146,2
22
2.5
2
H
358,0
70
TABLA II Resultados obtenidos en el grupo negativo.
PACIENTE
% RETICULOCITARIO
23
1,9
24
EDAD (Años)
SEXO
FIERRO μg/dL
2
M
270,5
2,2
8
H
148,5
25
1,8
7
H
164,9
26
1,4
7
H
178,8
27
1,0
8
H
85,6
28
1,9
8
H
143,7
29
2,2
2
H
134,6
30
2,0
5
M
212,2
31
1,6
2
H
173,5
32
2,2
8
H
144,5
33
2,2
1
H
187,3
34
1,8
2
H
281,7
35
1,4
5
M
157,3
36
0,4
3
H
163,2
37
0,8
1
M
122,7
38
0,7
4
M
156,5
39
1,9
3
H
144,3
40
0,6
1
H
207,5
41
2,1
2
H
175,0
42
1,2
6
M
199,3
43
1,0
3
H
273,6
44
0,7
4
M
249,7
71
Fe Îźg/dL FIGURA 1 Medianas entre ambos grupos, la caja representa el percentil 25 â&#x20AC;&#x201C; 75, la lĂnea dentro de la caja representa las medianas; los bigotes representan valores altos y bajos.
72
FIGURA 2 Registro de medias del contenido de fierro sĂŠrico y porcentaje reticulocitario en grupo positivo y grupo negativo.
73
Rev. med. vet. Investing. 1(1):74-91, 2018 Artículo original
Estudio comparativo de doppler tisular en anillo mitral lateral y septal en caninos cardiópatas severos ISACHC Clase IIIA estabilizados bajo control farmacológico. FRANCISCA I. MARTINEZ-SANTOS1 y EDSON F. MONTERO CABRERA 1 1
Facultad de Medicina Veterinaria. Universidad San Sebastián, Concepción, Chile.
Francisca I. Martinez-Santos: frannciscaignacia@gmail.com
Resumen La degeneración valvular mixomatosa de la valva mitral (MMVD) es la principal anormalidad cardiovascular de pacientes caninos, constituyéndose en la principal causa de insuficiencia cardiaca congestiva, sobre todo en aquellos pacientes ISACHC (International Small Animal Cardiac Health Council), clase IIIA. La ecocardiografía Doppler tisular (DTI) aparece como una nueva técnica no invasiva que permite evaluar la diástole durante la relajación ventricular, analizando las velocidades del anillo mitral sin dependencia de la precarga, factor incidente en la determinación de los flujos transmitralicos. Evaluar las velocidades del anillo mitral lateral y septal en caninos cardiópatas severos ISACHC Clase IIIA estabilizados bajo control farmacológico en HCV-USS. La población de estudio incluyó a 6 pacientes cardiópatas ISACHC clase IIIA estabilizados bajo control farmacológico. Los pacientes se sometieron a examen ecocardiográfico mediante DTI por abordaje en ventana paraesternal izquierda apical donde se obtuvo una imagen de eje largo de cuatro cámaras ubicando el caliper de 5 mm del anillo mitral lateral y septal en que se registró: velocidad sistólica (Sa) velocidad diastólica precoz (Ea) y velocidad diastólica tardía (Aa). Los resultados de correlación en este trabajo demostró que solo existe relación entre velocidad diastólica precoz del anillo mitral lateral (Eaw) y velocidad diastólica precoz del anillo mitral septal (Eas) en cardiópatas caninos severos ISACHC clase IIIA (p=0,0374) con un nivel de determinación (r2=0,7015). Existe correlación entre las velocidades diastólica precoz en el anillo mitral septal y lateral, la onda del flujo Ea es estable y se presenta en valores similares sin importar su sitio de registro. Pablabras Claves: Doppler Tisular, ecocardiograma, precarga.
Abstract Myxomatous valvular degeneration of the mitral valve (MMVD) is the main cardiovascular abnormality of canine patients, constituting the main cause of congestive heart failure, especially in those patients ISACHC (International Small Animal Cardiac Health Council), class IIIA. Tissue Doppler echocardiography (DTI) appears as a new non-invasive technique that allows evaluating diastole during ventricular relaxation, analyzing mitral ring velocities without dependence on preload, an incident factor in the determination of transmitral flows. To evaluate the velocities of the lateral and septal mitral ring in severe canine heart patients ISACHC class IIIA stabilized under pharmacological control in HCV-USS. The study population included 6 patients with ISACHC class IIA heart disease stabilized under pharmacological control. The patients underwent echocardiographic examination by
74
DTI by apical left parasternal window approach where a four-chamber long axis image was obtained, locating the caliper 5 mm from the lateral and septal mitral annulus in which it was recorded: systolic velocity (Sa) diastolic velocity early (Ea) and late diastolic velocity (Aa). The correlation results in this study showed that there is only a relationship between early diastolic velocity of the lateral mitral annulus (Eaw) and early diastolic velocity of the septal mitral annulus (Eas) in severe canine heart disease ISACHC class IIIA (p = 0.0374) with a level of determination (r2 = 0.7015). There is a correlation between the early diastolic velocities in the septal and lateral mitral annulus, the flow wave Ea is stable and occurs in similar values regardless of its registration site. Key words: Tissue Doppler, echocardiogram, preload.
Introducción
Esta patología está caracterizada por un proceso
La degeneración valvular mixomatosa de la valva mitral (MMVD), también denominada endocardiosis mitral, fibrosis crónica, fibrosis valvular, degeneración mucoide o prolapso mitral; es la principal anormalidad cardiovascular de los perros (Mucha, 2007; Atkins et al., 2009; Gómez-Duarte, 2011). Asimismo, es considerada la principal causa de Insuficiencia Cardiaca Congestiva (ICC) en perros geriátricos. Ésta cuenta con la mayor
degenerativo no infeccioso de la valva, cuyo signo patognomónico es la presencia de un soplo de regurgitación mitral (Mucha, 2007), lo que conlleva una disminución del gasto cardiaco que viene determinado por la cantidad de sangre que pasa al atrio izquierdo. Lo anterior, determina una sobrecarga de volumen que provocará una hipertrofia excéntrica del ventrículo izquierdo.
prevalencia en patologías cardiacas: el 75% de los
Para poder comprender la patogenia de la MMVD,
pacientes caninos llevados a consulta cardiológica son
primero debemos tener claro cómo funciona el complejo
diagnosticados en diferentes estadios de la enfermedad
mitral en condiciones fisiológicas normales, la función de
en EE. UU. (Kittleson, 1999; Häggström et al., 2004;
este complejo mitral, es la de mantener la valva
Gómez-Duarte, 2004; Atkins et al., 2009; Gomez-Duarte,
ampliamente abierta durante la diástole para permitir el
2011).
correcto llenado del ventrículo y cerrar el orificio auriculo ventricular sin permitir el regreso de la sangre
La presentación de MMVD es más frecuente en perros adultos a geriátricos, de raza pequeña (menor a 20 kg) como
lo
son:
Poodle,
Daschsunds,
Chihuahua,
Schnauzer, Pincher y mestizos. La incidencia de la enfermedad aumenta proporcionalmente con la edad del can (Mucha, 2007). Según Kittleson (1999), la manifestación clínica generalmente aparece después de los 10 años, aunque la degeneración mixomatosa de válvulas aurículoventriculares puede ocurrir en perros de edad media (5 a 7 años).
durante la sístole ventricular (Mucha, 2007). En la degeneración valvular mixomatosa, en un 60 % de los casos se ve afectada sólo la valva mitral; en un 30% la valva mitral y la tricúspide, y en un 10% solo la tricúspide (Gomez-Duarte, 2011; Benavides et al., 2014). Si este complejo mitral se ve afectado en alguno de sus componentes, que en el caso de la MMVD el componente a fallar es la valva mitral, éste no funcionará de manera correcta, lo que llevará a la regurgitación de
75
sangre desde el ventrículo al atrio por una falla en la
A-
Pacientes
ambulatorios.
Que
al
examen
coaptación de las valvas (Mucha, 2007).
electrocardiográfico los signos presentes son: Onda P mitral, complejos QRS de amplitud y duración
Clasificación ISACHC
aumentados. Además, podrán presentar arritmias:
Antiguamente se utilizaba la clasificación funcional de la
fibrilación auricular, taquiarritmias ventriculares y
New York Heart Association (NYHA), la cual valoraba la
alteraciones en la conducción intraventricular En
actividad física del paciente con ICC, definiendo cuatro
ocasiones bloqueos de conducción AV de tercer grado.
clases en base a la valoración subjetiva que hace el
En la radiografía torácica, los signos en la vista latero-
médico durante la anamnesis sobre la presencia y
lateral derecha son: aumento generalizado de la silueta
severidad de la disnea. Esta clasificación presenta el
cardiaca, índice Buchanan elevado para la especie y
inconveniente de que en caninos no se realizan pruebas
ocupando más de 3.5 EIC, elevación de la silueta traqueal
de esfuerzo físico, por lo que el Consejo Internacional de
hacia dorsal y patrón intersticial o alveolar en los lóbulos
Salud Cardiovascular en pequeños animales, conocido
diafragmáticos. En la vista dorso-ventral se observa
como ISACHC (International Small Animal Cardiac Health
asimetría de los cuartos torácicos con predominio de los
Council) propuso una nueva clasificación en medicina
cuartos cardiacos en detrimento de los cuartos
veterinaria
es
pulmonares, distracción abaxial de los bronquios
actualmente utilizada (ISACHC, 1995; Freeman et al,
principales, patrón intersticial y alveolar en los lóbulos
2005).
pulmonares y, signos de efusión pleural.
de
pequeños
animales,
la
cual
BClase I: Paciente asintomático A-
Presenta signos de enfermedad cardiaca, pero
Pacientes
que
requieren
hospitalización
(Mucha, 2007). Ecocardiograma
sin signos de compensaciones evidentes. Presenta signos de enfermedad cardiaca, con
Los primeros estudios ecocardiográficos en la especie
signos de compensación como remodelación cardiaca
canina, fueron realizados en animales saludables con el
detectada radiográfica o ecográficamente.
objetivo de estandarizar y correlacionar las medidas
B-
cardiacas en modo M y los índices de función cardiaca Clase II: Falla cardiaca leve a moderada
con la superficie y el peso corporal (Boon et al., 1983;
Intolerancia al ejercicio, tos, taquipnea, distress
Lombard, 1984). Actualmente, la ecocardiografía se ha
respiratorio, leve ascitis.
convertido en el método no invasivo estándar para la evaluación tanto de la función sistólica como diastólica
Clase III: Falla cardiaca avanzada Signos evidentes de falla cardiaca avanzada, disnea,
del
ventrículo
izquierdo
(Nishimura et
al., 1989;
Bonagura y Miller, 1998; Chetboul, 2008).
profunda intolerancia al ejercicio, hipoperfusión en
La
reposo, paciente moribundo o en shock cardiogénico.
habitualmente en humanos y en pequeños animales
ecocardiografía
convencional
se
realiza
para evaluar de una manera no invasiva la función
76
miocárdica,
se
utilizan
a
menudo
registros
ciclo cardiaco en comparación con la sístole que abarca
bidimensionales (2D) y de modo M, como el diámetro
sólo 1/3 del ciclo, sin embargo, las patologías causadas
ventricular sistólico izquierdo y el índice de volumen o el
por su mal funcionamiento han estado a un lado en el
acortamiento fraccional (fractional shortening, %FS),
diagnóstico y tratamiento de las enfermedades
como índices de rendimiento miocárdico (Chetboul,
cardiacas (Sánchez De Zambrano y Rojas-Sulbarán,
2008). Por tanto, la ecocardiografía, permite la
2014).
evaluación de la estructura y la función valvular, así como también permite establecer presiones de llenado y en muchas ocasiones, la función ventricular (sistólica y diastólica) y el grado de remodelación de las cámaras (Benavides
et
al.,
2014).
En
consecuencia,
el
ecocardiograma nos brinda información acerca de las dimensiones y de la geometría ventricular, de la gravedad de la disfunción sistólica, de la presencia de disfunción global o segmentaria, del estado anatómico y funcional
de
las
valvas,
de
los
parámetros
hemodinámicos y de la presencia de asincronía
En las miocardiopatías, las alteraciones de la función diastólica preceden a las de la función sistólica. En pacientes con función sistólica deprimida, la disnea y la capacidad funcional están más relacionadas con la disfunción diastólica que con la sistólica (Migliore et al., 2003). La diástole comienza tan pronto como ha finalizado la sístole y las presiones ventriculares disminuyen de nuevo a sus valores diastólicos bajos, el aumento moderado de presión que se ha generado en las
aurículas
durante
la
sístole
ventricular
inmediatamente abre las valvas atrioventriculares (AV) y
ventricular.
permite que la sangre fluya rápidamente hacia los
La evaluación de la función ventricular es una indicación
ventrículos. Este proceso comprende tres fases: llenado
común en ecocardiografía. La medición de la fracción de
ventricular rápido, llenado lento y sístole auricular
expulsión como medida de función ventricular se basa
(Sánchez De Zambrano y Rojas-Sulbarán, 2014).
en el trazado del endocardio ventricular y el cálculo de volúmenes
ventriculares
a
través
de
hipótesis
geométricas (Sánchez De Zambrano y Rojas-Sulbarán, 2014).
El llenado ventricular rápido se produce durante el primer tercio de la diástole (protodiástole). En esta fase la presión atrial es máxima por haberse acumulado el retorno venoso durante las fases anteriores, y la presión
El ecocardiograma bidimensional permite detectar la
ventricular es mínima por la relajación total de la
dilatación del atrio izquierdo y la función sistólica
cámara, se crea un gradiente de presión y hay un paso
ventricular, contribuyendo a establecer la causa y la
rápido de sangre que abre las válvulas AV. Durante el
cronicidad de la disfunción (Sánchez De Zambrano y
tercio medio de la diástole (mesodiástole), el gradiente
Rojas-Sulbarán, 2014).
de presión entre el atrio y ventrículo se ha reducido y la
Función diastólica
sangre pasa lentamente a los ventrículos iniciándose la fase de llenado lento o diástasis. En este momento
La función diastólica representa una de las partes
penetra una pequeña cantidad de sangre. Al finalizar,
fundamentales del ciclo cardiaco. Esta compone 2/3 del
durante el último tercio de la diástole (telediástole) las
77
aurículas se contraen y proporcionan un impulso
eleve la presión hidrostática de los capilares, generando
adicional para enviar sangre a los ventrículos, aquí las
edemas. Dentro de las evaluaciones más frecuentes para
presiones en las aurículas son superiores a la de los
determinar la función diastólica, se incluyen: flujos
ventrículos por encontrarse relajados y las valvas AV
trasmitral, flujo venoso pulmonar, tiempo de relajación
permanecen abiertas, lo que permite el paso de sangre
isovolumétrica, la relación que hay entre la velocidad
de los atrios a los ventrículos. La contracción de la
diastólica temprana trasmitral y la velocidad diastólica
aurícula produce un aumento de la presión en esta
pulmonar (Hori et al., 2008).
cavidad y por tanto aumenta el flujo de sangre para terminar el llenado del ventrículo (Sánchez De Zambrano
Doppler Tisular (DTI)
y Rojas-Sulbarán, 2014). Cuando el miocardio no se
El DTI es una técnica no invasiva que permite evaluar la
relaja o sufre alguna alteración en este proceso de
relajación ventricular, y que podría ser de utilidad en la
relajación o diástole, se produce un ciclo anormal de
detección de anormalidades diastólicas, especialmente
bombeo, esto se conoce como Disfunción Diastólica (DD)
en los pacientes que no presentan patrón de lleno
(Sánchez De Zambrano y Rojas-Sulbarán, 2014).
ventricular izquierdo restrictivo (Migliore et al., 2003).
Estudios sugieren que entre 30 y 50% de los pacientes
Falconi (2007) plantea que entre las ventajas del DTI se
con insuficiencia cardíaca presentan como causa
encuentran la excelente resolución temporal y el hecho
primaria una disfunción diastólica y a largo plazo
de que es menos dependiente (si bien no totalmente) de
muestran una mortalidad similar a la insuficiencia
las condiciones de carga que el Doppler pulsado
cardiaca sistólica (Sánchez De Zambrano y Rojas-
transmitral.
Sulbarán, 2014). En muchos casos, la función sistólica es
Doppler no ha sido incorporada en las sugerencias de
normal, como sucede en los pacientes con hipertensión
tratamiento de la ICC, el conocimiento de la
arterial, cardiomiopatía hipertrófica (Sanderson, 2007) y
hemodinamia
en caninos con degeneración valvular mixomatosa (Zile
recomendaciones generales. A pesar de la publicación
et al., 2004; Teshima et al., 2005). La disfunción
de los consensos, revisiones y numerosos estudios
diastólica está determinada por propiedades elásticas
clínicos, la evaluación de rutina de la función diastólica
pasivas del ventrículo izquierdo y por procesos de
no es aún una realidad clínica (Rodríguez y Gómez,
relajación activa. Las propiedades elásticas pasivas
2002). A pesar de estas limitaciones, existe una fuerte
generalmente son causadas por un incremento de la
base teórica para la utilización de la ecografía doppler en
masa miocárdica y la alteración en la red de colágeno
la evaluación de la función diastólica. Las metodologías
extramiocárdico (Zile y Brutsaert, 2002). La afección de
son cambiantes, y estudios están en curso para validar
los procesos de relajación activa hace que el ventrículo
estos nuevos índices (Rodríguez y Gómez, 2002).
Aunque la evaluación con Ecografía-
que
ella
aporta
permite
algunas
sea rígido, menos distensible, y, como consecuencia, el tiempo de llenado se disminuye y la presión diastólica se eleva, aumentando de esta manera la presión venosa central, y haciendo que el tono venoso incrementado
Wang et al. (2005) demostraron que parámetros del DTI superaban a los de ecocardiografía convencional al momento de predecir resultados adversos en pacientes cardiópatas. La física básica del DTI es similar a la del
78
Doppler convencional, salvo que el DTI se basa en la
Iglesias et al. (2000) a su vez también plantean que los
capacidad de los equipos ecográficos para eliminar la
índices derivados del DTI del anillo mitral están menos
información doppler procedente del flujo sanguíneo, el
influidos por la precarga ventricular, especialmente la
cual es de una alta velocidad y conservar la que procede
velocidad diastólica precoz del anillo mitral lateral o Ea.
de la pared del miocardio de baja velocidad (Chetboul, 2008).
Las velocidades pueden ser presentadas en
forma de doppler pulsado, ubicando la muestra en la pared ventricular que uno desea investigar y se obtiene una imagen de manera espectral, donde las señales se inscriben como ondas similares a las de los flujos sanguíneos. Esta tecnología es fácilmente incorporada en los equipos convencionales de ultrasonido y otorga información on-line en un examen ecocardiográfico regular haciéndola promisoria para la evaluación cardiológica rutinaria (García, 2003). El DTI mide las velocidades del anillo mitral durante la diástole. Para esto desde la ventana apical el cursor es posicionado sobre el borde lateral o septal del anillo mitral. En individuos sanos el movimiento del anillo durante la diástole aparece como imagen en espejo de la curva de velocidad del flujo mitral. En una situación normal la velocidad diastólica precoz del anillo (E’) es mayor que la velocidad diastólica tardía (A’). En presencia de una anormalidad en la relajación, E’ y A’ van en paralelo con
Hay estudios realizados en humanos que han evaluado la exactitud predictiva de un número de índices de DTI por la presencia de elevación de la presión atrial incluyendo la velocidad E’ absoluta, la relación E’/A’, y la relación del E mitral y E’.
El ratio E/E’ es fácilmente
obtenible y puede permitir valorar las presiones de llenado en la mayoría de los pacientes. Sin embargo, es menos exacta en la presencia de función sistólica preservada (Rodríguez y Gómez, 2002).
En medicina
humana, la velocidad E’ del anillo mitral se piensa que correlaciona con la velocidad de relajación y no es afectada por la precarga. De esta manera, si la velocidad E mitral es alta (relación E/A normal o elevada), la velocidad del anillo mitral temprana (E’) es baja y la relación de la E mitral a la E’ anular es mayor que 10 a 15 cm/seg, esto significa una relajación enlentecida y presión auricular elevada. Cuanto más alta la relación, mayor la especificidad del índice (Rodríguez y Gómez., 2002).
llenado diastólico precoz (E) y contracción auricular (A) ,
La estimación de las presiones de llenado delventrículo
con disminución de la E’ y la relación E’/A’ (Rodríguez y
izquierdo en humanos utilizando DTI del anillo mitral son
Gómez, 2002).
parámetros importantes para considerar el plan
Hay estudios que han sostenido que la velocidad del anillo no es afectada por la precarga a diferencia de la curva de velocidad de E transmitral, la velocidad E’ del anillo mitral no se eleva por aumentos de la presión. De esta manera, con la relajación deteriorada, la velocidad E’ deberá permanecer disminuida, aún en presencia de una compliance reducida en el ventrículo izquierdo y una elevada presión atrial (Rodríguez y Gómez, 2002).
terapéutico adecuado. Una relación E/E' ≤8 predice una presión diastólica final (PDFVI) <15 mm Hg y una relación E/E' >15 predice una PDFVI >15 mm Hg. En distintos estudios, se ha visto que este índice tiene altos valores para estimar y diagnosticar sobrecarga de volumen (Rodríguez y Gómez, 2002). En un estudio realizado en pacientes humanos por García et al. (2010) en el que se evaluó la función
79
diastólica mediante DTI utilizando los siguientes
Ecógrafo Color Doppler Portátil SONOSCAPE SS-S6V. y el
indicadores: pico de la velocidad del movimiento
programa estadístico Statgraphic, versión 3.0, 2003.
sistólico, pico de la velocidad inicial del movimiento
El tamaño muestral se determinó mediante la siguiente
diastólico (E'), pico de la velocidad del movimiento
formula
sistólico atrial (A') y ratio E'/A'. Reveló que la correlación
n = 2 σ ² (zβ + z1-α ) ²
negativa entre E' y A' refleja la dependencia interna
6
entre estos parámetros y apoya su análisis conjunto, no individual.
= 2 (0,19) ² (1.96 + 0.845) ² =
d²
(0,3) ²
Donde:
En consideración los antecedentes pronósticos y predictivos de los flujos del anillo mitral, su relación con los flujos transmitrálicos y los escasos estudios de flujos del anillo mitral septal y lateral realizados en cardiópatas caninos, se ha pensado en presentar una propuesta que determine los flujos individuales del anillo mitral septal y lateral en pacientes caninos ISACHC clase IIIA y su posible correlación entre ellos, teniendo presente que los enfermos con hallazgos sugestivos de presiones de llenado elevadas tendrán peor evolución (Falconi, 2007).
σ = Error Estándar del grupo control Zβ = Seguridad (95%) d = Es la diferencia de las medias del grupo experimental y el grupo control. Z(1-α) = Es el nivel de Probabilidad β (para 0.20 = 0.84)
Resultado del tamaño muestral: 6 pacientes cardiópatas ISACHC
clase
IIIA
estabilizados
bajo
control
farmacológico. El criterio de inclusión correspondió a pacientes caninos sin distinción de sexo ni edad, diagnosticados como
El objetivo de este trabajo fue evaluar las velocidades del
pacientes
cardiópatas
ISACHC
clase
IIIA
con
anillo mitral lateral y septal en caninos cardiópatas
degeneración mixomatosa de la válvula mitral y cuyo
severos ISACHC clase IIIA estabilizados bajo control
propietario firmó el Protocolo de Consentimiento
farmacológico en el Hospital Clínico Veterinario de
Informado.
Universidad San Sebastián, Campus Las Tres Pascualas,
Los caninos que se emplearon en el estudio, son
Concepción (HCV-USS).
pacientes cardiópatas que se encuentran bajo un mismo tratamiento ambulatorio en el HCV-USS. Estos animales
Material y Método
se ajustan a la clasificación ISACHC los cuales fueron
El presente estudio se realizó en las dependencias de
diagnosticados previamente mediante examen general,
Imagenología de Animales Menores del Hospital Clínico
inspección directa, anamnesis y diversos métodos
Veterinario de la Universidad San Sebastián, Campus Las
complementarios
Tres Pascualas, Concepción, Región del Biobío, Chile
patológica como: hemograma completo, perfil hepato-
(HCV-USS). Se trabajó con caninos cardiópatas crónicos
renal,
ISACHC
ecocardiograma en modo M, 2B y Doppler continuo,
clase
IIIA
estabilizados
bajo
control
farmacológico. Como material fungible fue utilizado un
para
determinar
electrocardiograma,
su
radiografía
condición
torácica
y
pulsado y tisular.
80
Aquellos pacientes que al momento del examen clínico y
(Microlab 200 vital cientific, Suecia, Dierel, n° serie 1-
a la realización de las muestras hematológicas
0917).
presentaron signos de enfermedad infecto-contagiosa,
En el electrocardiograma los signos presentes en los
neoplásica y/o degenerativa no relacionada con la
pacientes ISACHC clase IIIA con insuficiencia mitral son:
cardiopatía del presente ensayo, fueron excluidos del
Onda P mitral, complejos QRS de amplitud y duración
estudio.
aumentados. Además, podrán presentar a arritmias:
Para diagnosticar a estos pacientes e ingresarlos al
fibrilación auricular, taquiarritmias ventriculares y
proceso de reclutamiento se les realizó un examen
alteraciones en la conducción intraventricular En
clínico completo que incluye anamnesis reciente,
ocasiones bloqueos de conducción AV de tercer grado.
inspección directa y medición de parámetros fisiológicos
En la radiografía torácica, los signos en la vista latero-
tales como, frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria,
lateral derecha son: aumento generalizado de la silueta
auscultación pulmonar, medición de temperatura rectal
cardiaca, índice Buchanan elevado para la especie y
y
que
ocupando más de 3.5 EIC, elevación de la silueta traqueal
determinaran su condición patológica: hemograma
hacia dorsal y patrón intersticial o alveolar en los lóbulos
completo, perfil hepato-renal, electrocardiograma,
diafragmáticos. En la vista dorso-ventral se observa
radiografía torácica y ecocardiograma modo M, 2B y
asimetría de los cuartos torácicos con predominio de los
Doppler continuo, pulsado y tisular.
cuartos cardiacos en detrimento de los cuartos
Las muestras sanguíneas obtenidas a través de punción
pulmonares, distracción abaxial de los bronquios
venosa, que se utilizaron para realizar el hemograma
principales, patrón intersticial y alveolar en los lóbulos
completo y el perfil hepato-renal, se dispensaron en dos
pulmonares y, signos de efusión pleural.
tubos comerciales al vacío, conteniendo el primero EDTA
En lo que se refiere al ecocardiograma, los signos están
y el segundo nada.
relacionados con una sobrecarga de volumen. En modo
El tubo comercial con EDTA, fue utilizado para realizar el
B y M, podremos observar el engrosamiento y mayor
hemograma
La
ecogenicidad de la válvula mitral. En las primeras etapas,
determinación del hematocrito y la hemoglobina fue
o sea prolapso mitral, observaremos el desplazamiento
mediante la técnica microhematocrito y reacción
de la válvula hacia la aurícula más allá de la línea del
colorimétrica,
de
anillo mitral. También podemos ver la integridad de las
leucocitos y eritrocitos se efectuó mediante conteo en
cuerdas tendinosas y si existe ruptura de ellas al
cámara de Neubauer. Las características morfológicas se
movimiento libre de la valva sin contención. Debido a la
revisaron a través de un frotis sanguíneo teñido con Diff-
regurgitación mitral, se producirá un agrandamiento
Quick®, donde se analizó la morfología de los glóbulos
atrial, y la pérdida de la relación 1:1 entre Aorta y
blancos, rojos y plaquetas.
Aurícula Izquierda, claramente visible en estadios
El tubo comercial sin EDTA, fue utilizado para efectuar el
avanzados de la enfermedad. Fracción de acortamiento
perfil
y fracción de eyección disminuida y, en presencia de una
distintos
exámenes
completo
complementarios,
con
método
respectivamente.
hepato-renal
en
equipos
El
manual.
recuento
semiautomáticos
insuficiencia cardiaca generalizada, podremos observar
81
un agrandamiento cameral, y adelgazamiento de pared
lateral, como datos control, y las velocidades que se
y septum.
registraran en el anillo mitral septal, como datos
Los pacientes que fueron seleccionados para el estudio
experimentales. Dichos registros se anotaron en una
fueron tratados con agentes que reducen la precarga,
tabla Excel, expresándose en valores promedios y error
como diuréticos y vasodilatadores, agentes que facilitan
estándar (SEM), los cuales fueron contrastados al
la actividad cardiaca, como inótropos positivos,
realizar el análisis estadístico respectivo.
vasodilatadores arteriales y fármacos antiarrítmicos que
Debido a que el número de muestras experimental es
actúan reduciendo la resistencia vascular sistémica y
inferior a 50, se utilizó el test de bondad de ajuste a la
recuperando el ritmo sinusal. Cabe destacar que a los
normal de Shapiro-Wilk. Cuando una variable no siguió
pacientes reclutados para el estudio no se les suprimió
una
en ningún momento su medicación debido a la gravedad
transformación logarítmica.
de la patología de estos.
Los datos, posteriormente, fueron analizados mediante
Los pacientes caninos pertenecientes al grupo en
la determinación de la correlación entre el pico de
estudio, fueron rasurados en ambos hemitórax, en la
velocidad diastólica precoz y tardía del anillo mitrálico
región intercostal 3ª a 6ª entre la unión costo-condral y
lateral y septal en pacientes cardiópatas ISACHC IIIA,
el esternón, sin sedación ni control farmacológico, por lo
mediante un modelo de regresión lineal donde:
que fue necesaria una sujeción manual. Así preparados,
Y= a+bx
los animales fueron posicionados en decubito supino,
a= es el punto en que la recta intercepta el eje vertical
con leve inclinación lateral izquierda, sobre una frazada
b= es la pendiente de la recta
distribución
normal,
se
procedió
a
su
para tal efecto y se le aplicó gel acústico donde al contacto con el transductor se realizó un examen
En la correlación del pico de la velocidad diastólica
ecocardiográfico con DTI, mientras el paciente respire
precoz de anillo mitrálico lateral (Ea) y la velocidad
tranquilo. Desde la ventana paraesternal izquierda apical
diastólica precoz de anillo mitrálico septal (Es) se utilizó
se obtiene una imagen de eje largo de cuatro cámaras en
como variable explicativa X velocidad diastólica precoz
donde el volumen de muestra de 5 mm se colocó en el
de anillo mitrálico lateral (Ea) y, como variable
anillo mitral lateral y septal en donde se determinaron
dependiente Y, la velocidad diastólica precoz de anillo
las siguientes medidas del DTI: velocidad sistólica (Sa)
mitrálico septal (Es).
velocidad diastólica precoz (Ea) y velocidad diastólica
En la correlación entre el pico de la velocidad diastólica
tardía (Aa). El tamaño de la aurícula izquierda se midió
tardía de anillo mitrálico lateral (Aa) y la velocidad
desde el plano apical de cuatro cámaras en la telesístole
diastólica tardía de anillo mitrálico septal (As) se utilizó
mediante planimetría.
como variable explicativa X será la velocidad diastólica tardía de anillo mitrálico lateral (Aa) y, como variable
Análisis estadístico
dependiente Y, la velocidad diastólica tardía de anillo
Los datos obtenidos del estudio se registraron en base a
mitrálico septal (As).
las velocidades observadas por DTI en el anillo mitral
82
Mediante el modelo de los mínimos cuadrados, se
Discusión
determinó la recta que mejor explicó el comportamiento del pico de la velocidad diastólica precoz (Ea) y tardía del anillo mitrálico lateral (Aa) La relación lineal entre las variables se determinó mediante el R2 y bondad de ajuste del modelo. Para tales efectos se utilizó el software SPSS V.21.0. En todos los análisis se consideró un intervalo de confianza de 95% y α <0,05. Y se consideró significativo cuando p < α.
La medición medianteDTI de las velocidades del anillo mitral,
se
ha
propuesto
como
una
técnica
complementaria dentro de la ecocardiografía para evaluar la disfunción diastólica, ya que los índices derivados de este como la velocidad diastólica precoz y tardía se consideran menos influidas por la precarga (Iglesias et al., 2000, Kibar et al., 2009). Dentro de la literatura revisada son escasos los estudios sobre DTI del anillo mitral en pacientes caninos con
Resultados
MMVD, no obstante, hay algunos estudios que determinan las velocidades del anillo mitral en pacientes
Los valores de promedio, desviación estándar y ratio de
caninos sanos, con regurgitación mitral y distintos
las velocidades obtenidas por Doppler tisular en el anillo
patrones de llenado como los de Kibar et al. (2009)
mitral lateral y el anillo mitral septa se presentam en las
Teshima et al. (2005) y Baron et al. (2016).
tablas I y II, respectivamente. Al correlacionar las velocidades diastólicas precoz y En la Figura 1 se observa que la relación entre Saw
tardía entre el anillo mitral lateral y septal no hemos
(velocidad del flujo sistólico mural) y Sas (velocidad del
encontrado estudios previos al respecto en caninos. En
flujo sistólico septal) del anillo mitral en caninos
nuestros
cardiópatas ISACHC clase IIIA no fue significativa
significativa con un R2 de 0,7015 en la velocidad
(p=0,1011) y con un coeficiente de correlación de
diastólica precoz entre el anillo mitral lateral y septal. La
0,5295.
medición de la velocidad diastólica precoz se considera
En la figura 2 se observa que la relación entre Eaw
un excelente indicador de la función diastólica para
(velocidad diastólica precoz del anillo mitral lateral) y Eas
determinar patrones de llenado ya que como plantean
(velocidad diastólica precoz del anillo mitral septal) en
Iglesias et al. (2000) la velocidad diastólica precoz del
cardiópatas caninos ISACHC clase IIIA fue significativa
anillo mitral lateral o Ea presenta una relajación
(p=0,0374) y presentó un nivel de determinación de
diastólica neta sin mayores influencias de factores
0,7015.
externos lo que nos aporta información valiosa para el
En la figura 3 se observa que la relación entre Aaw
diagnóstico y predicción de la disfunción diastólica. Es
(velocidad diastolica tardia del anillo mitral lateral) y Aas
por ello, que en nuestro trabajo se planteó determinar
(velocidad diastólica tardía del anillo mitral septal) no
esta
fue significativa (p=0,3694) y con un coeficiente de
interventricular y relacionar estas mismas velocidades
correlación de0,2034.
con las encontradas en la pared del VI.
hallazgos
misma
encontramos
velocidad
diastólica
una
en
correlación
el
septo
83
Al comparar las mediciones obtenidas por Kibar et al.
deterioro de la función diastólica con el avance de la ICC,
(2009) del anillo mitral septal encontramos que tanto la
asociado a un incremento en la mortalidad.
velocidad diastólica precoz como la tardía nos entregan números menores a los obtenidos por nuestro estudio, y el grupo de estudio que más se acerca a los datos obtenidos son los del grupo con un patrón pseudonormal con una Ea: 7.46 ± 2.17 cm/s y Aa : 10.35 ± 3.60 en contraste con los datos obtenidos en nuestro estudio de Ea: 26,2 ± 14,11 y Aa: 29,25 ± 24,43, esto se puede deber a que los pacientes en el estudio de Kibar et al. (2009) si bien tenían un patrón de llenado pseudo-
Al comparar los resultados obtenidos por Seguel (2016) mediante DTI en el anillo mitral lateral encontramos valores superiores a los datos obtenidos en su estudio, lo cual se debería a que los pacientes utilizados eran caninos con MMVD, pero clasificados en ISACHC IIA, por lo que la gravedad y signos de éstos es menor. Sin embargo, el patrón de llenado diastólico determinado en ambos trabajos fue pseudo-normal.
normal, no sabemos la patología subyacente de éstos. En
Baron et al. (2016) midieron mediante DTI las
el presente estudio todos los pacientes tenían MMVD
velocidades de Ea y Aa tanto de la pared libre como del
clasificados en nivel ISACHC clase IIIA al tener una
septo, en donde se encontró un aumento en Ea tanto
patología relacionada directamente con el anillo mitral y
septal como de la pared libre en perros con
teniendo en cuenta que
la característica de la
degeneración valvular mixomatosa y signos clínicos de
degeneración valvular es la presencia de nodulaciones,
insuficiencia cardiaca congestiva, en comparación con
vegetaciones y bordes irregulares que proyectan un
pacientes caninos sanos y con MMVD sin dilatación
reflujo retrogrado hacia la aurícula ipsilateral durante la
cardiaca. Ello guardaría una directa relación con los
sístole, que en conjunto con el retorno venoso
resultados obtenidos en este estudio donde se
aumentarían la presión intraauricular y el área de la
observaron altas velocidades dada la falla cardiaca
misma. Se ha demostrado que el aumento de la presión
avanzada.
intraauricular izquierda está en relación directa con patrones de llenado diastólico más severos (Iglesias et al., 2000).
A la hora de correlacionar la velocidad diastólica tardía (Aa) del septo y de la pared libre, no se encontró una correlación positiva ni significativa. El coeficiente de
Los ratios obtenidos de Ea/Aa septal exhibieron
determinación entre Aa tanto septal como mitral puede
resultados similares a los encontrados por Kibar et al.
estar explicada porque el movimiento del anillo mitral
(2005) en el grupo canino con un patrón de llenado
está influido por la capacidad de acortamiento y
restrictivo cuyo ratio Ea/Aa fue 1.38 ± 0.24 en contraste
relajación del miocardio adyacente (Iglesias et al., 2000),
con el ratio obtenido por nuestro grupo de estudio cuyo
además de los factores hemodinámicos que participan
valor Ea/Aa : 1.25 ± 0,56 resultados que guardan directa
en esta variable como la función sistólica de la aurícula
relación con la sinología presentada en nuestros
izquierda y la presión Telediastolica VI (PTDVI) exhiben
pacientes, los cuales, si bien, se encuentran bajo control
una dinámica inversa, es así como, un incremento de la
farmacológico presentan MMVD la cual cursa con una
PTDVI provoca un descenso de la Aa y un incremento de
alteración en la relajación ventricular junto con un
la contractibilidad de la AI provocaría un aumento de Aa.
84
Nagueh et al. 2009, en un estudio aplicado en pacientes
canine chronic valvular heart disease. J Vet
humanos plantea que para predecir las presiones de
Intern
llenado del VI es preferible utilizar la velocidad Ea
10.1111/j.1939-1676.2009.0392.x
Med,
23(6),
1142-1150.
Doi:
promedio obtenida en el anillo mitral septal y lateral. Dado que la Ea septal suele ser menor que la Ea lateral, lo que se correlaciona con nuestros resultados, debiéndose este comportamiento a que la medición el anillo mitral septal se mueve en una dirección más paralela al haz de ultrasonido y se ve menos afectada por el movimiento de traslación del corazón, en la vista
Baron T.M., Poser, H., Menciotti, G., Battaia, S., Contiero, B., Cipone, M., y … Guglielmini, C. (2016). Utility of Tissue Doppler Imaging in the Echocardiographic Evaluation of Left and Right Ventricular Function in Dogs with Myxomatous Mitral Valve Disease with or without Pulmonary Hypertension. Journal Of Veterinay Intenal
apical del órgano (Sohn et al., 1997).
Medicine / American College Of Veterinary
Las limitaciones que muestra el presente estudio están
Internal Medicine, 30(3), 697-705.
en relación a que el examen ecocardiográfico es operador-dependiente, es decir, depende en forma importante de la experiencia en este tipo de examen. Una limitación no menor es el “n” muestral que por su tamaño puede aumentar su desviación estándar al momento de registrar el promedio de los datos. Un
Benavides, C., Chaves, C., Astaiza, J., Moncayo, A., y Vargas, P. (2014). Enfermedad valvular degenerativa canina: Reporte de caso. Revista de Medicina Veterinaria, 28, 91-102. Doi: 10.19052/mv.3184
factor influyente en el presente trabajo fue el hecho de
Bonagura, J., y Miller, D. (1998). Doppler
no utilizar una medición directa de la precarga, la cual de
Echocardiography I. Vet. Clinics of North
acuerdo
America, 28(6), 1325-1359.
a
Iglesias
et
al.
(2000)
no
afecta
considerablemente los parámetros medidos mediante DTI especialmente la velocidad diastólica precoz (Ea). En
Boon, J., Wingfield, W.E., y Miller, C.W. (1983).
contraste a esta postura Thidholm et al. (2009) plantea
Echocardiographic indices in the normal
que los parámetros medidos mediante DTI se ven
dog. Veterinary Radiology y ultrasound, 24(5),
afectados por condiciones de carga ventricular y el tono
214-221.
simpático en mayor medida de lo que estos autores
8261.1983.tb00718.x
esperaban.
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88
Tablas e ilustraciones Tabla I. Promedio, desviación estándar y ratio de las velocidades obtenidas por Doppler tisular en el anillo mitral lateral. Desviación Parámetros
Unidad
Promedio
Estándar
Sa w
cm/seg
25,11
14,40
Ea w
cm/seg
36,80
10,73
Aa w
cm/seg
22,20
6,73
E/Eaw
3,52
1,54
Eaw/Aaw
1,15
0,56
Saw: velocidad sistólica del anillo mitral lateral; Eaw: velocidad diastólica precoz del anillo mitral lateral; Aaw: velocidad diastólica tardía del anillo mitral lateral.
Tabla II. Promedio, desviación estándar y ratio de las velocidades obtenidas por Doppler tisular en el anillo mitral septal. Desviación Parámetros
Unidad
Promedio
Estándar
Sa s
cm/seg
26,15
17,08
Ea s
cm/seg
26,22
14,11
Aa s
cm/seg
29,25
24,47
E/Eas
3,52
1,41
Eas/Aas
1,25
0,56
89
Velocidad de Flujo septal Sistólico (cm/seg)
100 75 50 25 0 -25 0
10
20
30
40
50
60
Velocidad de Flujo Mural Sistólico (cm/seg) Figura 1. Relación entre las velocidades del flujo septal sistólico y flujo mural sistólico
Velocidad diastolica precoz en septo (cm/seg)
150
100
50
0
-50 15
30
45
Velocidad diastolica precoz en pared libre (cm/seg) Figura 2. Relación entre las velocidades diastólicas precoz (Ea) del anillo mitral lateral y septal
90
Velocidad diastolica tardia en septo (cm/seg)
100
50
0
-50 0
15
30
45
Velocidad diastolica tardía en pared libre (cm/seg)
Figura 3. Relación entre las velocidades diastólicas tardías del anillo mitral lateral y septal
91
Rev. med. vet. Investing. 1(1):92-101, 2018 Artículo de revición
Análisis de registros de ataques a fauna silvestre chilena por carnívoros domésticos perro (Canis lupus familiaris) y gato (Felis silvestris catus) entre los años 2000 y 2016.
ROMMI BARRERA Escuela de Medicina Veterinaria. Universidad Mayor, Santiago, Chile.
rommi.barrera@mayor.cl Resumen Los ataques por parte de los carnívoros domésticos, perro (Canis lupus familiaris) y gato (Felis silvestris catus), hacia la fauna silvestre son una de las principales preocupaciones que existen hoy en día en relación a la conservación de biodiversidad. En el presente estudio se analizaron los registros de ataques de estos carnívoros domésticos hacia la fauna silvestre chilena entre los años 2000 a 2016 a partir de registros del Servicio Agrícola y Ganadero y la Corporación Nacional Forestal, donde el 85,11% de dichos ataques corresponden a perros y el 14,89% a gatos. Según los registros, la región más afectada por ataque de perros es la II Región de Antofagasta, mientras que por parte de los gatos es la V Región de Valparaíso. Las especies silvestres más afectadas en cuanto a número de ataques fueron las aves playeras pertenecientes a los órdenes Suliformes y Procellariiformes, mientras que las especies silvestres con registros de ataques sostenidos durante 5 o más años corresponden a los mamíferos artiodáctilos. Palabras claves: Ataque – Perro – Gato – Depredación – Biodiversidad Abstract The attacks by domestic carnivores, dog (Canis lupus familiaris) and cat (Felis silvestris catus) over wildlife are one of the main concerns that exist today relating to wildlife of conservation. In this study we analyzed the records of attacks of these domestic carnivores on Chilean wildlife from 2000 to 2016 from records of the Servicio Agrícola y Ganadero and the Corporación Nacional Forestal, where the 85.11% said attacks correspond to dogs and 14.89% to cats. According to the records, the region most affected by the attacks of dogs was the II Region of Antofagasta, while by cats it was the V Region of Valparaíso. The wild species that were affected the most in terms of the number of attacks were shorebirds belonging to Suliformes and Procellariiformes orders, while the wild species with records of sustained attacks during 5 or more years correspond to artiodactyl mammals. Keywords: Attacks – Dog – Cat – Depredation – Biodiversity.
Introducción
Dentro del hotspot chileno, el 67% de los anfibios, el 66% de los reptiles, el 20% de los mamíferos y el 5% de las
Los hotspot o “puntos calientes” de biodiversidad corresponden a regiones donde se concentra una alta proporción de vertebrados endémicos, y en donde el hábitat original ha sido fuertemente impactado por las
aves corresponden a fauna endémica chilena (Arroyo et al., 2006). En 1984 se dicta la Ley 18.362, que crearía el Sistema Nacional de Áreas Silvestres Protegidas del Estado (SNASPE), el cual es administrado actualmente
acciones del hombre (Myers et al.Myers et al., 2000).
92
por La
Corporación
Forestal (CONAF),
extinción de micromamíferos, reptiles y aves en las islas
dependiente del Ministerio de Agricultura, y está
oceánicas alrededor del mundo (Nogales y Medina,
compuesto por 3 categorías de manejo: Parques
2009; Wierzbowska et al., 2012; Lost et al. 2013).
Nacionales,
Reservas
Nacional
Nacionales
y
Monumentos
Naturales. Aproximadamente el 20% del territorio nacional continental e insular está protegido mediante una de estas unidades (Sierralta et al., 2011).
Al año 2007, se estima que en Chile la relación hombre/perro era 6,2/1 (Ibarra et al., 2003; AcostaJamett et al., 2010), donde el 21,9% corresponden a perros vagabundos (Ibarra et al., 2006); es decir a perros
El perro (Canis lupus familiaris) y el gato (Felis silvestris
independientes,
catus), ambos pertenecientes al Orden Carnivora, son
necesitar de los desperdicios humanos para su sustento,
dos de los animales domesticados más comunes que
incluyendo tanto a los perros sin dueño como a los con
viven en asociación con el ser humano (Hughes y
dueño, conocidos también como perros callejeros
Macdonald, 2013). El perro doméstico, dada su estrecha
(WHO-WSPA, 1990; ICAM, 2007).
asociación con el humano, cumpliendo múltiples funciones como compañía, guardián, lazarillo, cazador, deporte, recreación entre otras (Ibarra et al., 2003), es actualmente el carnívoro de mayor distribución mundial, y uno de los más comunes en paisajes rurales, donde interactúa con la fauna silvestre como depredador, competidor y vector de enfermedades (Vanak y Gompper, 2009; Lessa et al., 2016). Debido a su alta adaptabilidad y a la disponibilidad de materiales de origen antrópico como alimento, el perro doméstico
sin
restricción,
aunque
pueden
Los ataques o depredaciones se consideran desde heridas o lesiones hasta la muerte de los animales (Zanini et al., 2008). Si bien es cierto que investigaciones recientes indican que es un problema importante en diversos lugares del mundo, aún sigue siendo un proceso poco comprendido (Young et al, 2011). La falta de leyes sobre la mantención, crianza y venta de mascotas, campañas de esterilización masivas y la tenencia responsable son parte de los puntos básicos para una solución integral al problema (Soto, 2015).
puede trascender a perro vagabundo y con el pasar del tiempo al no depender del ser humano, vuelve a su estado
silvestre
pasando
a
perro
asilvestrado,
determinando la ocurrencia y abundancia de perros en áreas silvestres (Farías et al., 2010; OIE, 2010; Weston et al., 2014), siendo una amenaza para las poblaciones de especies nativas, como rapaces, ungulados, cánidos y felinos (Aliaga-Rossel et al., 2012). Por otra parte, el gato doméstico cumple funciones como animal de compañía, recreación y cazador (Ibarra et al., 2003). A pesar de una larga coexistencia, estos animales mantienen la capacidad de subsistir sin la ayuda de sus dueños, siendo indicados directamente como responsables de la
Lo hipotetizado en este estudio es que en los ataques de carnívoros domésticos, perro (Canis lupus familiaris) y gato (Felis silvestris catus) tienen un gran alcance tanto geográficamente como en especies, sobre la fauna silvestre chilena, para lo cual se definió como objetivo general evaluar el alcance de los ataques por parte de estos carnívoros domésticos sobre fauna silvestre chilena, y como objetivos específicos identificar las áreas geográficas más afectadas por ataques de estos carnívoros domésticos en Chile e identificar cuáles son las especies silvestres más afectadas por ataques de estos carnívoros domésticos en Chile.
93
Material y Método
las regiones de II-Antofagasta, III-Atacama, V-Valparaíso, VII-Maule, VIII-Biobío, IX-Araucanía, X-Los Lagos y XI-
Se trabajó con el mapa geográfico de Chile anterior al año 2007 (Océano, 2000), ya que no es posible
Aysén. Las Figuras 1 y 2 muestran el detalle de los ataques por ambos carnívoros en las regiones del país.
identificar los ataques después de la creación de nuevas regiones de Tarapacá con Arica y Parinacota, y de la
En la Región de I-Tarapacá, VI-O’Higgins, XII-Magallanes y XIII-Metropolitana no se registraron ataques de perros
región de Los Lagos con la región de Los Ríos.
y/o gatos a la fauna silvestre. Se estudiaron los registros de ataque hacia fauna silvestre dentro del territorio nacional registrados por SAG y CONAF. Estos fueron obtenidos mediante la Ley de Transparencia N°20.285 (Ley N° 20.285, 2008).
En total se registraron 466 ataques, 373 de los cuales afectaron a aves (80,04%) y 93 a mamíferos (19.96%), los cuales se detallan en la Tabla 1 y 2 respectivamente. Dentro de los registros de las especies que fueron
Análisis estadístico
atacadas durante 5 años o más se encuentran el guanaco
Se analizaron los ataques de perros y gatos hacia la fauna
(Lama guanicoe) y el pudú (Pudu puda), ambas especies
silvestre por regiones geográficas y las especies
atacadas por perros, registrándose ataques desde el
afectadas por los ataques en un periodo de 16 años. Se
2007 al 2015 para el guanaco y desde el 2008 al 2016
graficaron los datos indicando la cantidad total de
para el pudú
ataques de perros y gatos por región geográfica de Chile, se tabularon con el número total de ataques por especie de fauna, gráficos de tendencia en las especies que
Del total de ataques registrados por parte de carnívoros domésticos, el 85,11% de estos corresponden a perros y el 14,89% a gatos.
presentaron ataques en 5 años o más, el porcentaje de ataques registrados de aves y mamíferos, y el porcentaje de ataques por perros y gatos. Se utilizó Microsoft Excel 2010.
Discusión Existen registros de ataque a fauna silvestre tanto fuera como dentro del Sistema Nacional de Áreas Silvestres Protegidas por el Estado, a pesar de la labor de CONAF
Resultados
para disminuir al mínimo la presencia de perros y otras Se han registrado ataques por parte de perros y gatos en 9
regiones:
Antofagasta,
Atacama,
Coquimbo,
Valparaíso, Maule, Biobío, La Araucanía, Los Lagos y Aysén.
mascotas al interior de las Áreas Silvestres Protegidas (ASP), detalladas en la “Normativa para el manejo de perros y otras mascotas en las áreas silvestres protegidas administradas por CONAF” (CONAF, 2015). Es difícil
SAG ha registrado ataques entre los años 2008 y 2016 en
identificar si hay una disminución de los registros de
las regiones de III-Atacama, IV-Coquimbo, VII-Maule y X-
ataques por parte de estos carnívoros domésticos ya que
Los Lagos. Por otra parte CONAF registró dentro del
CONAF solo tiene datos desde el 2007 hasta el 2012
Sistema Nacional de Áreas Silvestres Protegidas del
(Díaz, 2012), los cuales fueron entregados para este
Estado (SNASPE) entre los años 2007 y 2012, ataques en
estudio.
94
La mayor cantidad de ataques de perros se registra en la
formación de jaurías por parte de estos perros para cazar
región de Antofagasta ya que de los 304 ataques
(Cruz-Reyes, 2009).
registrados en dicha región, 300 fueron a guanay (Leucocarbo bougainvillii), esto se puede deber a que tras el cierre de las playas para los visitantes a partir del 2010 en el Monumento Natural La Portada hubo un
Autores como Rauzon et al. (2008) y Robinson y Copson (2013) han demostrado que la erradicación de gatos en islas oceánicas trae como consecuencia un aumento de la avifauna nativa.
aumento en la diversidad y abundancia de avifauna (Sepúlveda, 2016), pero la presencia de localidades rurales y el establecimiento de rutas cercanas al área protegida son factores que facilitan el ingreso de perros (Cepeda-Mercado et al., 2014). Por otra parte, la mayor cantidad de ataques de gatos se registran en la región de Valparaíso ya que los 65 ataques registrados fueron a fardelas, cuyas especies no fueron señaladas por las autoridades. Dentro de la familia Procellariidae, a la que pertenecen estas aves, la fardela blanca (Ardenna
Resulta probable que especies de menor tamaño, tales como micromamíferos, pequeñas aves, reptiles y anfibios se vean afectados, pero resulta difícil su cuantificación por lo que futuras investigaciones deberían considerar estudios de dieta en deposiciones de gatos y perros en áreas silvestres (Fitzgerald et al., 1991; Campos et al., 2007; Matias y Catry, 2008; Harper, 2010; Luna-Mendoza et al, 2011; García-Aguilar y GalloReynoso, 2012).
creatopus) está categorizada como vulnerable por la
Las regiones geográficas más afectadas son la II Región
UICN y en peligro de extinción por el RCE, esta especie
de Antofagasta y la V Región de Valparaíso. Entre las
presenta todos sus sitios de nidificación en la Reserva
especies más afectadas por cantidad se encuentran las
Nacional Isla Mocha y la Reserva Nacional Archipiélago
aves playeras guanay y fardelas, pero en aquellas
de Juan Fernández, ubicadas en la VIII Región de Biobío
afectadas por 5 años o más corresponden al guanaco y
y V Región de Valparaíso respectivamente (BirdLife
al pudú.
International, 2017; Reyes-Cabrera et al., 2017). Agradecimientos El aumento de las poblaciones humanas y localidades en las cercanías a los parques nacionales, además del abandono de perros son los problemas fundamentales para el aumento de las poblaciones de perros independientes, capaces de cazar ungulados como el guanaco y el pudú (Silva-Rodríguez y Sieving, 2012; Vera, 2014). Tal como se observa en la tabla 2, llama la atención que especies depredadoras tope como el puma se vean afectadas por ataques de perros. El éxito de estos ataques podría explicarse principalmente por la
Agradezco a los médicos veterinarios Jorge Leichtle, Carolina Robles y Claudio Galleguillos por sus colaboraciones a la presente investigación realizada. Al SAG y la CONAF por los registros entregados. Esteban Troncoso por su apoyo en la revisión de este documento. Referencias bibliográficas Acosta-Jamett G., Cleaveland S., Cunningham A. A. y Bronsvoort B. M. (2010). Demography of domestic dogs in rural and urban areas of the Coquimbo region of Chile and implications for disease
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Cantidad de ataques de perros registrados
Tablas e ilustraciones
350
304
300 250 200 150 100 25
50 0
3
28
25 0
1
3
2
9
0
0
0
0
0
Regiones de Chile
Cantidad de ataques de gatos registrados
Figura 1. NĂşmero total de ataques de perros registrados por regiones de Chile.
70
65
60 50 40 30 20 10 0
0
1
1
0
0
1
0
2
0
0
Regiones de Chile
Figura 2. NĂşmero total de ataques de gatos registrados por regiones de Chile.
99
Tabla I. Total de especies de aves atacadas según los registros de SAG y CONAF Especie atacada Bandurria (Theristicus melanopis)
SAG
CONAF
1
Total 1
Chuncho (Glaucidium nanum)
1
1
Fardelas*
65
65
Guanay (Leucocarbo bougainvillii)
300
300
Loro choroy (Enicognathus leptorhynchus)
2
2
Loro tricahue (Cyanoliseus patagonus)
1
1
Lechuza (Tyto alba)
1
1
Pequén (Athene cunicularia)
1
1
Pingüino de Humboldt (Spheniscus humboldti) Total
6
1
1
367
373
*No se entrega detalle de la especie afectada.
100
Tabla II. Total de especies de mamíferos atacadas según los registros de SAG y CONAF Especie atacada
SAG
CONAF
Total
Coipo (Myocastor coypus)
1
1
2
Guanaco (Lama guanicoe)
5
16
21
Huemul (Hippocamelus bisulcus)
9
9
Lobo marino común (Otaria flavescens)
18
18
Quique (Galictis cuja)
3
3
5
27
Puma (Puma concolor)
1
1
Vicuña (Vicugna vicugna)
3
3
Pudú (Pudu puda)
22
Vizcacha (Lagidium viscacia)
1
Zorro chilla (Lycalopex griseus)
1
Zorro chilote (Lycalopex fulvipes)
1 1
2
1
1
Zorro culpeo (Lycalopex culpaeus)
1
4
5
Total
31
62
93
101
Rev. med. vet. Investing. 1(1):102-108, 2018 Reporte de caso
Adaptación de osteotecnia para el montaje de un ejemplar de Delfín de Risso Grampus griseus (Cuvier, 1812). LUIS RIQUELME1, ROBERTO ABARZÚA1 y JORGE LEICHTLE1 1
Facultad de Medicina Veterinaria. Universidad San Sebastián, Concepción, Chile.
Luis Riquelme: luis.riquelme@uss.cl
Resumen Un ejemplar de Delfín de Risso o falso calderón (Grampus griseus) que falleció en las costas de Llico, región del Biobío, Chile fue donado a la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad San Sebastián. El ejemplar fue sometido a una adaptación del proceso de osteotecnia, permitiendo contar con un ejemplar anatómico en un corto periodo de tiempo en comparación a los procedimientos normalmente utilizados. Hasta donde tienen conocimiento los autores, se trata del único ejemplar de esta especie conservado en Chile.
Palabras clave: Técnica anatómica, cetáceo, odontoceti
Abstract Aspecimen of Risso's dolphin or false calderón (Grampus griseus) that died in the coasts of Llico, region of Biobío, Chile, was donated to the Faculty of Veterinary Medicine of San Sebastián University. The specimen was subjected to an adaptation of the osteotecnia process, allowing to have an anatomical specimen in a short period of time in comparison to the procedures normally used. As far as the authors are aware, it is the only specimen of this species preserved in Chile. Keywords: Anatomical technique, cetacean, odontoceti
Introducción El Delfín de Risso o falso calderón (Grampus griseus) corresponde a un cetáceo odontoceto de la familia delphinidae. Se caracteriza por poseer una cabeza
peso de hasta 400 kg. Es una especie gregaria, con poblaciones que fluctúan entre los 25 a 300 ejemplares
(Canto
y
Yañez-Valenzuela,
2000;
Carwardine et al., 2005; Baird, 2009).
roma y abombada. Presenta dentadura en la rama
Para Chile, está registrada su presencia entre las
mandibular y algunos pocos ejemplares presentan
regiones de Valparaíso y Magallanes y Antártica
dientes maxilares. Cuenta con una coloración gris, con
chilena, en aguas tanto tropicales como templadas
gran cantidad de manchas y ocasionalmente cicatrices.
(Canto y Yañez-Valenzuela, 2000). En el país a partir
Su longitud total puede alcanzar los 3.8 metros, con un
del año 2008 se encuentra protegido por la Ley 20293,
102
al igual que otros cetáceos. Si bien no es una especie
identificado como USS-0055, pasando a formar parte
poco abundante, resulta fundamental el poder
de la colección de zoología de vertebrados de la
conservar la mayor cantidad de información posible
Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad
obtenida a través de ejemplares fallecidos, incluyendo
San Sebastián.
su anatomía. El día 18 de diciembre comenzaron los trabajos para la La
osteotecnia
de
preservación de los restos óseos del en el laboratorio
procedimientos naturales, químicos y/o físicos, a
de anatomía de la Facultad de Medicina Veterinaria de
través de los cuales se puede tratar un espécimen con
la Universidad San Sebastián. Para esto se utilizó el
el fin de obtener un hueso, segmento o esqueletos
protocolo de osteotecnia modificado en dicho
limpios,
laboratorio:
sin
corresponde
presencia
de
al
conjunto
residuos
orgánicos,
facilitando la observación de formaciones anatómicas para su uso en docencia e investigación (RodriguezPalomo y Ramírez, 2009; Villaroel y Troncoso, 2017).
Fase I: Limpieza de huesos: Esta fase se realiza en 4 etapas consecutivas:
Al trabajar con animales de gran tamaño, como cetáceos, la osteotecnia puede resultar compleja al requerir de muchos materiales y horas hombre (Yañez
Primera etapa: 1.
y Sanino, 2000; Rittmaster et al., 2015).
Desarticulación:
La
desarticulación
del
esqueleto se realiza de manera parcial, con el fin de disminuir el volumen de la muestra. Se
El objetivo de este trabajo es describir la adaptación
desarticulan el cráneo, las extremidades y la
de la técnica utilizada en la Facultad de Medicina
columna en 4 porciones (cervical-torácica,
Veterinaria de la Universidad San Sebastián para la
lumbar, sacra y coccígea). Las aletas
preservación en un corto periodo de tiempo de un
pectorales fueron mantenidas de forma
espécimen anatómico de G. griseus.
íntegra en formalina. 2.
cuchillo es retirada la mayor cantidad posible
Material y Método El día 14 de diciembre de 2017 se produjo el
Primer descarnado de huesos: Mediante
de musculatura. Segunda etapa:
varamiento de 25 ejemplares de G. griseus en las costas de Llico, región del Biobío, Chile. Los pescadores
1.
(KOH) a una concentración de 0.5%: Se realiza
del lugar ayudaron a los ejemplares a regresar al mar, sin embargo, un ejemplar falleció en el lugar (Figura 1). El Servicio Nacional de Pesca (SERNAPESCA) derivó al ejemplar fallecido a la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad San Sebastián, en la ciudad de Concepción. Este correspondió a una
Primera inmersión en hidróxido de potasio
en un tanque metálico durante una semana. Tercera etapa: 1.
Segundo descarnado de huesos: Mediante bisturí y pinzas se eliminan los restos de tejido que aún se encuentren adheridos (Figura 2).
hembra adulta de aproximadamente de 350 kg de peso y 3.24 metros longitud total. El ejemplar fue
103
2.
Segunda Inmersión en hidróxido de potasio a
Entre las ventajas de la osteotecnia aquí descrita
una concentración de 0.5%: Esta se realiza en
destaca la rápida preparación del ejemplar en
agua caliente durante una hora.
comparación con la técnica tradicional, que puede
Cuarta etapa:
llevar 9 o más meses tan sólo en la limpieza de huesos (Post, 2004; Rittmaster et al, 2015). Otra ventaja es
1.
Primera inmersión en agua oxigenada (H2O2) de 30%: Se realiza durante 5 horas.
2.
Secado al sol.
3.
Segunda inmersión en agua oxigenada de 30%: Solo para aquellos huesos que aún se mantengan amarillentos.
que al no desarticular completamente el esqueleto, el montaje resulta menos engorroso y no es necesario, por ejemplo, reemplazar los discos intervertebrales ya que estos no son eliminados (Figura 5). Tal como indica Villaroel y Troncoso (2017), gran parte del éxito en la preparación de ejemplares está dada por la experiencia del ejecutor, ya que un tiempo excesivo en
Fase II: Articulado y montaje:
solución pueden provocar descalcificación excesiva y daño de las piezas. Resulta fundamental revisar
Una vez secados los huesos (Figuras 3 y 4), se procede al articulado del esqueleto mediante el uso de alambre
periódicamente el estado de las piezas inmersas durante la primera fase.
galvanizado de 2 mm trenzado, además de hilo nylon de 0.6 mm a través de perforaciones realizadas
Entre las desventajas de esta técnica, está el disponer
mediante broca de 1 mm (Figura 5).
de todo el tejido orgánico eliminado durante el primer descarnado de huesos, ya que esto es realizado de
Para su montaje y con el fin de contar con una representación lo más fidedigna posible, se realizó una revisión bibliográfica (Rommel y Lowenstine, 2001; Post, 2004; Post, 2005). Se confeccionó una estructura metálica con ruedas para poder desplazar el montaje cuando resulte necesario (Figura 6).
forma manual, principalmente. En este caso, los restos que no correspondían a huesos fueron almacenados en bolsas dentro de una cámara refrigerada hasta su traslado final a un vertedero autorizado para dicho fin. Hasta donde tienen conocimiento los autores, se trata del único ejemplar de esta especie conservado en Chile y actualmente se encuentra disponible para la comunidad universitaria, investigadores y público interesado.
Resultados y Discusión La técnica aquí descrita permitió contar con un esqueleto espécimen anatómico de G. griseus limpio, articulado y montado en sólo 32 días.
Agradecimientos A SERNAPESCA por la donación de este valioso
La Fase I (limpieza del esqueleto) se completó luego de
ejemplar. A Diego Jara S., Médico Veterinario y
28 días desde el inicio del proceso. Una vez limpio y
Taxidermista, por sus valiosos comentarios. A los
seco, el esqueleto contó con un peso de 17.2 kg.
estudiantes de Medicina Veterinaria de la USS que ayudaron al momento de recepcionar los restos.
104
Referencias bibliográficas
Yáñez J. y Sanino G. P. (2000). La ballena del Museo Nacional de Historia Natural. Boletín del Museo
Baird R. W. (2009). Risso’s Dolphin Grampus griseus. En W. Perrin, F., Würsing y J. Thewissen (ed.),
Nacional de Historia Natural, Chile, 45(1), 109-115.
Encyclopedia of Marine Mammals (2a ed., pp 975976), Burlington: Academic Press. Canto J. y Yáñez-Valenzuela J. (2000). Orden Cetacea. En A. Muñóz-Pedreros y J. Yañez-Valenzuela (Eds), Mamíferos de Chile (1ª ed., 127-153), Valdivia: CEA Ediciones. Carwardine M., Hoyt E., Fordyce R. E. y Gill P. (2005). Delphine y Wale: Verstehen - Erkennen Beobachten. Gondrom. Berlín: Gondrom. Post L. (2004). The sperm whale. Engineering manual or building a big whale skeleton. Homer: Bone Bulding Book. Post L. (2005). The Whale Building Book. A Step-byStep Guide to Preparing and Assembling Mediumsized Whale Skeletons. Homer: Bone Bulding Book. Rittmaster K. A., Clark K. L. y Thayler V. G. (Marzo, 2015).
Stranding
response
and
skeletal
rearticulation of a Risso´s dolphin (Grampus griseus). Trabajo presentado en Southeast and Mid-Atlantic
Marine
Mammal
Symposium.
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único
de
Canis
lupus
familiaris.
International Journal of Morphology, 35(1), 351356.
105
Tablas e ilustraciones
Figura 1. Fotografía tomada por SENAPESCA del ejemplar de G. griseus fallecido en Llico.
Figura 2. Segundo proceso de descarnado, luego de la inmersión en hidróxido de potasio durante una semana.
106
Figura 3. Ejemplar luego de terminada la primera fase.
Figura 4. Detalle de la región coccígea de la columna previo al montaje final. Notese como el hidróxido de potasio permite la limpieza de los huesos sin desarticular las vértebras, manteniendo en este caso los discos intervertebrales.
107
Figura 5. Comienzo de la segunda fase. Detalle al articulado de vĂŠrtebras y costillas mediante el uso de alambre galvanizado e hilo nylon.
Figura 6. Montaje en estructura metĂĄlica provista de ruedas.
108
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●
Reporte de caso: Este tipo de artículo debe incluir al menos 10 artículos en las
La
Revista
de
Medicina
Veterinaria
e
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Investigación (Rev. med. vet. investig.) publica
palabras tanto en español como en
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El
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Artículo científico: Este tipo de artículo
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palabras tanto en español como en
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mayores, que deberán ser nuevamente revisadas
inglés.
por los mismos examinadores. III-Evaluado con
Comunicación breve: Este tipo de
correcciones
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en las referencias. No debe exceder las
semanas para enviar las correcciones del
2500 palabras tanto en español como en
manuscrito o argumentando la no aceptación de
portugués y 2000 en inglés.
los mismos.
menores.
IV-
Aceptado
sin
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puede
sugerir
hasta
tres
revisores y se deben señalar los conflictos de
De la forma Los trabajos deben ser escritos en formato tamaño carta, letra Calibri 12, espacio 1,5 líneas, con márgenes laterales de 2.5 cm. El trabajo debe ser organizado de acuerdo a lo siguiente: Título, Resumen y Palabras Clave en español (El resumen en inglés o portugués será traducido al español),
interés.
Introducción, Materiales y Métodos, Resultados, En aquellos artículos que correspondan a
Discusión,
resultados obtenidos en memoria de título, el
Bibliográficas. Los Resultados y Discusión pueden
alumno memorista se considerará como primer
ser combinados.
autor. A fin de promover la publicación por parte de los estudiantes, estos tendrán la primera opción de ir como autores principales en el caso
●
autor o autores, señalando el autor
mayor interés en la publicación, y mediante un
correspondiente con su mail, filiación.
poder simple, autorizara al profesor guía a ser el artículo,
quedando
Aquellos trabajos que se hayan realizado
el
con fondos de concurso público o
estudiante como autor secundario. En el caso que
privado, deben señalar el patrocinio al
el profesor quiera publicar un artículo en base a una serie de tesis de las que fue profesor guía, este
pie de la página. ●
podrá ir como autor principal siempre que los
constar de al menos 3 Palabras clave. Los
simple, quedando estos como autores secundarios
trabajos en inglés o portugués con
de dicho artículo
traducción para el español. ●
en inglés con las palabras clave en el
un artículo, este será excluido temporalmente del
mismo idioma. No debe exceder 250
comité editorial y/o comité científico que revisara
conflictos de interés.
Resumen en inglés (Abstract): En todos los trabajos se debe incluir un resumen
Medicina Veterinaria San Sebastián desee enviar
dicho artículo en particular, con el fin de evitar
Resumen: En el idioma que corresponda, no excediendo 300 palabras. Deberá
estudiantes lo autoricen mediante un poder
En caso de que un docente de la Facultad de
Título: En el idioma que corresponda. Los
traducción para el español. El nombre del
secundario. En el caso que el estudiante no tenga
del
Referencias
trabajos en inglés o portugués con
artículo, quedando el profesor guía como autor
principal
y
Cada trabajo deberá presentar
de que quieran publicar su tesis en formato
autor
Agradecimientos
palabras. ●
Texto: Introducción, Material y Método, Resultados y Discusión.
110
●
Tablas e ilustraciones: Tablas numeradas
nombre de la revista se escribe completo y en
con números romanos e ilustraciones con
itálica. Aquellas publicaciones que cuenten con
números arábicos, deberán estar en
número Doi debe ser incluido. Ejemplo:
hojas separadas del texto. ●
Imágenes: Deben estar en formato JPJ. Pueden ser enviadas en color o en blanco y negro. Para la reproducción de las ilustraciones, se aceptarán solamente buenos diseños a trazo. Las abreviaturas utilizadas en las figuras deben ser
●
Henríquez, A.; Landaeta-Aqueveque, C. A. y Larenas, J. 2012. Cinética del algor mortis: Primeros pasos para estimar data de muerte en animales. Archivos de Medicina Veterinaria
45(1):77-81.
doi:
10.4067/S0301-732X2013000100013
definidas en la leyenda y deben coincidir
Los libros o publicaciones no periódicas seguirán
exactamente con las utilizadas en el
el siguiente formato: Autor, año. Título. Editor y/o
texto.
editorial. Ciudad de edición. Ejemplo:
Agradecimientos. Bonacic, C.; Leichtle, J. y Ohrens, O. 2015. El puma del altiplano de Tarapacá. Fauna Australis.
Referencias bibliográficas
Santiago de Chile. Deben incluirse artículos de revistas científicas publicados recientemente (10 años o menos), a menos que su importancia justifique el uso de artículos de años anteriores. Solo pueden citarse artículos
ya
publicados
(No
se
permiten
referencias de artículos simplemente enviados). Las referencias deben ser estar en orden alfabético. Para las publicaciones periódicas el formato a seguir será: en primer lugar el apellido del primer autor, coma, seguido por las iniciales de su nombre seguidas por un punto y sin espacios entre las iniciales; luego el apellido del siguiente autor seguido por las iniciales de los nombres; los autores se separan con puntos y comas y el último con “y”. Luego del último autor punto, año de publicación, punto, título del artículo, punto, nombre completo de la revista en itálica, volumen, dos puntos y páginas separadas por un guion. El
Si es capítulo de libro debe ir: Autor. Año. Título del capítulo: páginas del capítulo. «En:» Editor/es seguido de (ed/s.), Título del libro. Editorial, Ciudad de edición. Ejemplo: Novoa, F; Leichtle, J.; Ossa, G y Bonacic, C. 2016. Fauna nativa en el valle central de la Región de O´Higgins: 46-87. En: Muñoz, A.; Arellano, E. y Bonacic, C (ed.), Manual de conservación de biodiversidad en predios agrícolas de Chile central. Fauna Australis. Santiago de Chile. Si es un recurso publicado en internet, y suficientemente reconocido como material válido de consulta debe ir: Autor, año. Título. Versión (fecha de la versión si la tuviere). «Disponible en: » (dirección http://). Último acceso: (fecha de la última visita a la página o al recurso). Ejemplo:
111
Frost, D.R. 2014. Amphibian Species of the World: an
Online
Reference.
Version
Disponible
6.0. en:
http://research.amnh.org/herpetology/am phibia/index.html.
Último
acceso:
12
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riego", "6, 9 y 12 eventos de riego" o "8 kg" ". Para separar los números en intervalos de uno o más
comprenden
datos
numéricos
o
alfanuméricos. Deben ser elaboradas utilizando un editor de texto que permita construir tablas y no utilizar tabulaciones ni espaciados para separar columnas. No incluya líneas verticales. En el texto deben citarse con la primera letra en mayúscula. Ej.: Las especies se distribuyen diferencialmente en sectores bajos o altos (Tabla I). Figuras: Comprenden los dibujos, mapas, gráficas o fotos. Como originales se aceptarán imágenes digitalizadas con un mínimo de 300 ppp y en formato JPG. La numeración de las figuras debe corresponder a sus leyendas. Se permite el envío de imágenes en color. En el texto deben citarse
años, use un guion (por ejemplo, período de 2002 a 2005). Abreviaciones y símbolos: Si bien ahorran espacio y tiempo, su uso excesivo puede hacer que el texto sea más difícil de entender. Algunas abreviaturas no
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ser
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son
ampliamente utilizadas y conocidas, como las unidades SI o los elementos químicos. Todas las abreviaturas deben escribirse en su totalidad en su primera mención del Resumen, texto, tablas y figuras. Hora: Use el sistema horario de 24 horas con dos dígitos para ambas horas y minutos (por ejemplo, 14:30 h en lugar de 2:30 p. M.).
con la primera letra en mayúscula y abreviado. Ej: Sólo en un sitio no fue registrada ninguna especie (Fig. 1).
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Lista de comprobación de envíos Como parte del proceso de envío, los/as autores/as se comprometen a cumplir con todos los criterios que se nombran a continuación. Además, los/as autores/as aceptan que los envíos que no cumplan con estas indicaciones pueden ser devueltos y/o rechazados por el Comité Editorial de la revista. 1.
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4.
Todos los autores manifiestan tácita o explícitamente si hubo o no, conflicto de intereses.
5.
Se ha cumplimentado el listado de verificación antes del envío del material.
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Volumen 1 –Número 1- 2018
Contenido Editorial ......................................................................................................................................................................... 5 Artículos originales Determinación de agregaciones espacio-temporales de murciélagos y casos de virus rábico mediante el método de Knox en las comunas de Concepción, Chiguayante y San Pedro de la Paz en el período 2014-2016. Catalina Sáez y Claudio Báez-Beltrán. ............................................................................................................................ 7 Determinación de la presencia de huevos de helmintos en lodos provenientes de una planta de tratamiento de aguas servidas de la comuna de Coronel, región del Biobío. Carla Rodríguez-Gajardo, Claudio Báez-Beltrán y Juan Gonzalo Monroy ................................................................... 26 Estimación de la prevalencia de Giardia spp. mediante análisis coproparasitológico seriado en perros clínicamente sanos de la ciudad de Lota (Chile), periodo enero -marzo 2017. Dariel Monsalves, Claudio Báez-Beltrán y Juan Gonzalo Monroy ............................................................................... 45 Determinación del fierro sérico en perros no anémicos con y sin policromasia en el Hospital Clínico Veterinario de la Universidad San Sebastián sede Concepción. Constanza Hervera-Riffo, Antonio Bizama y Juan Gonzalo Monroy ............................................................................ 60 Estudio comparativo de doppler tisular en anillo mitral lateral y septal en caninos cardiópatas severos ISACHC Clase IIIA estabilizados bajo control farmacológico.. Francisca I. Martinez-Santos y Edson F. Montero ........................................................................................................ 74 Artículos de revisión Análisis de registros de ataques a fauna silvestre chilena por carnívoros domésticos perro (Canis lupus familiaris) y gato (Felis silvestris catus) entre los años 2000 y 2016.. Rommi Barrera ............................................................................................................................................................. 92 Reporte de casos Adaptación de osteotecnia para el montaje de un ejemplar de Delfín de Risso Grampus griseus (Cuvier, 1812). Luis Riquelme, Roberto Abarzúa y Jorge Leichtle ...................................................................................................... 102 Instrucciones para los autores. ................................................................................................................................. 109 Lista de comprobación de envíos .............................................................................................................................. 113
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