UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969 PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE TOXICOLOGIA PRACTICA N°4
Nombres: Karen Andrea Quiridumbay Quezada Paralelo: “A”
Curso: 5º Año Fecha: Martes, 05 de Julio del 2016. Docente: Dr. Carlos García Mg. Sc. Grupo: N°6
10
TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR ETANOL
Animal de Experimentación: Rata wistar Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. Volumen administrado: 10mL de Alcohol Etílico. OBJETIVOS: -
Observar los síntomas de intoxicación que presenta el animal de experimentación (rata wistar) después de la aplicación de cianuro hasta su deceso.
-
Determinar la presencia de cianuro en el destilado de las vísceras del animal de experimentación (rata wistar) a través de las reacciones de reconocimiento la presencia de dicho tóxico.
SÍNTOMAS: FUNDAMENTO TEORICO: El etanol puede afectar al sistema nervioso central provocando estados de euforia. Al mismo tiempo baja los reflejos. Con concentraciones más altas ralentiza los movimientos, impide la coordinación correcta de los miembros etc. Finalmente conduce al coma y puede provocar la muerte. Para investigar el alcohol en medios biológicos, se somete la muestra a una destilación con arrastre de vapor con las consideraciones ya establecidas anteriormente. Una vez obtenido el destilado, una pequeña porción es separada y se la agrega a una solución de cromato de potasio; se adiciona a la mezcla ácido sulfúrico puro en condiciones que se formen 2 capas; en caso de existir alcohol
TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS. Paracelso
1
se debe producir una coloración azul verdosa en el punto de unión de las 2 capas; en caso de existir alcohol se debe producir una coloración azul verdosa en el punto de unión de las dos capas. INSTRUCCIONES: 1. Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. 2. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. 3. Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. 4. Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario. MATERIALES:
MATERIALES EQUIPOS - VIDRIO - Aparato de - Vasos de destilación precipitación - Balanza - Pipetas - Baño maría - Erlenmeyer - Campana - Tubos de ensayos - Perlas de vidrio - Agitador - Embudo - OTROS - Guantes - Mascarillas - Gorro - Mandil - Aguja hipodérmica 10 ml - Cronometro - Estuche de disección - Panema - Agitador - Fosforos - Pinzas - Cocineta - Espátula - Gradilla
SUSTANCIAS - Cloruro de - fenilhidracina - -Nitroprusiato - sódico - -Hidróxido de sodio - -HCl - -Cloruro de fenil - hidracina - -Ferricianuro de - potasio Ácido - sulfúrico - -Leche - -Cloruro férrico - -Sulfato ferroso - -Ácido sulfúrico - -Ácido clorhídrico
MUESTRA Destilado de vísceras del animal de experimentación.
ACTIVIDADES A REALIZAR: 1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse 2. Preparar una solución de formaldehido al 4%. 3. Agarrar al animal de experimentación (rata wistar) por sus patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 8mL de solución de formaldehido.
TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS. Paracelso
2
4. Colocar al animal de experimentación (rata wistar) en la panema y observar los efectos de la intoxicación. 5. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el al animal de experimentación (rata wistar) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. } 6. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 mL ácido tartárico al 4% y perlas de vidrio. 7. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N. 8. Con aproximadamente 15 mL del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: 1. Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo. 2. Reacción de Rimini: A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.
3. Con la Fenilhidracina: En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella. 4. Reacción de Marquis: Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta.
5. Con el Ácido Cromotrópico: Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente. 6. Reacción de Hehner: Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.
TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS. Paracelso
3
GRÁFICOS:
1. Escogemos el animal de experimentación.
3. Observamos los síntomas que presenta la Rata wistar hasta su
2. Aplicamos el toxico. +
muerte.
4. Con ayuda de un bisturí sacamos las vísceras.
5. Trituramos vísceras llevarlas destilación.
las para a
6. Después de la destilación obtenemos la solución madre que la que haremos reacciones de identificación.
TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS. Paracelso
4
RESULTADOS OBTENIDOS: 1. Reacción de Schiff: positivo
3. Con la Fenilhidracina: positivo
5. Con el Ácido Cromotrópico: positivo
2. Reacción de Rimini: positivo
4. Reacción de Marquis: positivo
6. Reacción de Hehner: positivo
TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS. Paracelso
5
CONCLUSIONES: Estos tipos de compuestos desnaturalizantes son altamente tóxicos por lo que, este tipo de etanol, no debe de ingerirse. De la importancia que tiene este compuesto radica en la estudio de esta práctica, ya que a través de reacciones de identificación en una solución madre de la destilación de las vísceras de animal de experimentación que fue sometido a intoxicación por etanol pudimos observar y confirmar como cada una de las reacciones se presentaba como positivo para la presencia de dicha sustancia toxica en el organismo de experimentación.
RECOMENDACIONES: -
-
Evitar toda fuente de ignición o calor. Separar de materiales incompatibles El manejo de este producto debe hacerse en un lugar bien ventilado, utilizando bata, lentes de seguridad y, si el uso es prolongado, guantes. No deben usarse lentes de contacto al utilizar este producto. Restringir el acceso a personas innecesarias y sin la debida protección. Ubicarse a favor del viento. Usar equipo de protección persona.
CUESTIONARIO 1. ¿QUÉ ES ETANOL? El etanol es un líquido incoloro, volátil, con un olor característico y sabor picante. También se conoce como alcohol etílico. Sus vapores son mas pesados que el aire. Se obtiene, principalmente, al tratar etileno con ácido sulfúrico concentrado y posterior hidrólisis. Algunas alternativas de síntesis son: hidratación directa de etileno en presencia de ácido fosfórico a temperaturas y presiones altas y por el método FischerTropsch, el cual consiste en la hidrogenación catalítica de monóxido de carbono, también a temperaturas y presiones altas. De manera natural, se obtiene a través de fermentación, por medio de levaduras a partir de frutas, caña de azúcar, maiz, cebada, sorgo, papas y arroz entre otros, generando las variadas bebidas alcohólicas que existen en el mundo. 2. PROPIEDADES FÍSICAS DEL ETANOL Apariencia: Líquido incoloro volátil de olor característico y agradable. Gravedad Específica (Agua=1): 0.7893 / 20°C Punto de Ebullición (ºC): 78 - 79 Densidad Relativa del Vapor (Aire=1): 1.60 Punto de Fusión (ºC): -114 Viscosidad (cp): N.R. pH: N.A. Presión de Vapor (mm Hg): 44.0 / 20°C Solubilidad: Soluble en agua, alcohol metílico, éter, cloroformo, acetona y benceno.
TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS. Paracelso
6
3. RIESGOS PARA LA SALUD Inhalación: Los efectos no son serios siempre que se use de manera razonable. Una inhalación prolongada de concentraciones altas (mayores de 5000 ppm) produce irritación de ojos y tracto respiratorio superior, náuseas, vómito, dolor de cabeza, excitación o depresión, adormecimiento y otros efectos narcóticos, coma o incluso, la muerte. Contacto con ojos: Se presenta irritación solo en concentraciones mayores a 5000 a 10000 ppm. Contacto con la piel: El líquido puede afectar la piel, produciendo dermatitis caracterizada por resequedad y agrietamiento. Ingestión: Dosis grandes provocan envenenamiento alcohólico, mientras que su ingestión constante, alcoholismo. Carcinogenicidad: No hay evidencia de que el etanol tenga este efecto por el mismo, sin embargo, algunos estudios han mostrado una gran incidencia de cáncer en laringe después de exposiciones a alcohol sintético, con sulfato de dietilo como agente responsable. Mutagenicidad: No se ha encontrado este efecto en estudios con Salmonella, pero se han encontrado algunos cambios mutagénicos transitorios en ratas macho tratados con grandes dosis de este producto. Riesgos reproductivos: Existen evidencias de toxicidad al feto y teratogenicidad en experimentos con animales de laboratorio tratados con dosis grandes durante la gestación. El etanol induce el aborto. 4. USOS DEL ETANOL El etanol se utiliza industrialmente para la obtención de acetaldehido, vinagre, butadieno, cloruro de etilo y nitrocelulosa, entre otros. Es muy utilizado como disolvente en síntesis de fármacos, plásticos, lacas, perfumes, cosméticos, etc. También se utiliza en mezclas anticongelantes, como combustible, como antiséptico en cirugía, como materia prima en síntesis y en la preservación de especímenes fisiológicos y patológicos. El llamado alcohol desnaturalizado consiste en etanol al que se le agregan sustancias como metanol, isopropanol o, incluso, piridinas y benceno. Estos compuestos desnaturalizantes son altamente tóxicos por lo que, este tipo de etanol, no debe de ingerirse.
GLOSARIO Inducción enzimática. Aumento en la velocidad de síntesis de una enzima como respuesta a la acción de un agente que se denomina inductor. Mesotelioma. Tumor maligno del mesotelio de la pleura, pericardio o peritoneo que puede ser causado por exposición a fibras de asbesto u otras. Nivel máximo permisible (MPL, en inglés). Valor establecido normalmente como combinación de concentración y tiempo, para agentes químicos y toxico ambientales, por encima del cual la exposición es perjudicial para el hombre. TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS. Paracelso
7
Psicofármaco. Sustancia que modifica la actividad psíquica por diversos mecanismos, fundamentalmente por acción sobre el sistema nervioso central. BIBLIOGRAFÍA:
Molina, J. C., López, M. F., Pepino, J., & Abate, P. Modificación funcional de la reactividad pre y postnatal hacia el alcohol. Saldaña-Balmori, Y., & Delgadillo-Gutiérrez, H. (2003). Acción de algunos antiinflamatorios no esteroideos sobre la lipoperoxidación hepática inducida por etanol. Revista Cubana de Investigaciones Biomédicas, 22(1), 0-0. Rodríguez, M. P. La intoxicacion etilica aguda. Una urgencia a la orden del dia.
FIRMA:
____________________________ Karen Andrea Quiridumbay Quezada 0706254760
TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS. Paracelso
8