4/2012 Ветеринария сельскохозяйственных животных
Поздравляем с Днем работников сельского хозяйства и перерабатывающей промышленности!
4/2012
11/2011 Ветеринария сельскохозяйственных животных-2012-04-обложки.indd 1
20.02.2012 15:47:47
ПРАЙС-ЛИСТ НА РАЗМЕЩЕНИЕ РЕКЛАМЫ В ИЗДАНИЯХ ИД «ПАНОРАМА»
НАШИ ЖУРНАЛЫ – ВАШ УСПЕХ! Самый крупный в России Издательский дом «Панорама», обладая солидным интеллектуальным и информационным ресурсом, выпускает около сотни ежемесячных деловых, информационно-аналитических, научно-практических и познавательных журналов по экономике, финансам, юриспруденции, промышленному производству, строительству, здравоохранению, сельскому хозяйству, торговле и транспорту. Наши издания гарантированно поддерживают профессиональный интерес многотысячной читательской аудитории — принимающих решения лидеров и специалистов компаний и фирм, руководителей государственных, научных организаций, деловых ассоциаций и иностранных представительств. Интерес к журналам Издательского дома «Панорама» из года в год растет. И это естественно, ведь авторы публикаций — авторитетные эксперты, «командиры» самых передовых предприятий и главы крупнейших ассоциаций, ученые и специалисты ведущих отраслевых научных центров, Российской академии наук и крупных учебных заведений России и мира. Среди главных редакторов журналов, председателей и членов редсоветов и редколлегий — 168 академиков, членов-корреспондентов академий наук, профессоров и 200 практиков — опытных хозяйственников и практиков различных отраслей экономики, сферы научной и общественной деятельности. Свидетельством высокого авторитета и признания изданий ИД «Панорама» является то, что каждый десятый журнал включен в Перечень рецензируемых изданий и журналов Высшей аттестационной комиссии Российской Федерации, в которых публикуют основные результаты диссертаций на соискание ученой степени доктора и кандидата наук.
Формат 1/1 полосы
ОСНОВНОЙ БЛОК Размеры, мм (ширина х высота) 205 х 285 – обрезной 215 х 295 – дообрезной
БУДЕМ РАДЫ ВИДЕТЬ ВАС В ЧИСЛЕ НАШИХ РЕКЛАМОДАТЕЛЕЙ! ПРАЙС-ЛИСТ СМОТРИТЕ, ПОЖАЛУЙСТА, В КОНЦЕ ЖУРНАЛА.
Стоимость, ч/б
62 000
31 000
1/2 полосы
102 х 285 / 205 х 142
38 000
19 000
1/3 полосы
68 х 285 / 205 х 95
31 000
15 000
1/4 полосы
102 х 142 / 205 х 71
25 000
12 000
Статья 1/1 полосы
3500 знаков + фото
32 000
25 000
Формат Первая обложка Вторая обложка Третья обложка Четвертая обложка Представительская полоса
Многие рекламодатели уже оценили наши издания как хорошую информационную площадку. Наши преимущества — огромная аудитория, получающая журналы по подписке, гибкий подход к рекламным планам, оптимальные варианты взаимодействия с целевой аудиторией.
Стоимость, цвет
Первый разворот
ПРЕСТИЖ-БЛОК Размеры, мм (ширина х высота) Размер предоставляется отделом допечатной подготовки изданий 205 х 285 – обрезной 215 х 295 – дообрезной 205 х 285 – обрезной 215 х 295 – дообрезной 205 х 285 – обрезной 215 х 295 – дообрезной 205 х 285 – обрезной 215 х 295 – дообрезной 410 х 285 – обрезной 420 х 295 – дообрезной
Стоимость 120 000 105 000 98 000 107 000 98 000 129 000
СКИДКИ Подписчикам ИД «ПАНОРАМА»
10 %
При размещении в 3 номерах
5%
При размещении в 4–7 номерах
10 %
При размещении в 8 номерах
15 %
При совершении предоплаты за 4–8 номера
10 % Все цены указаны в рублях (включая НДС)
Телефон (495) 664-2794 E-mail: promo@panor.ru, reklama.panor@mail.ru www.панор.рф, www.идпанорама.pф, www.panor.ru На правах рекламы
Телефон (495) 664-2794 E-mail: promo@panor.ru, reklama.panor@mail.ru www.панор.рф, www.идпанорама.pф, www.panor.ru На правах рекламы
Ветеринария сельскохозяйственных животных-2012-04-обложки.indd 2
20.02.2012 15:47:50
ЖУРНАЛ «ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ» № 4/2012 Åæåìåñÿ÷íûé íàó÷íî-ïðàêòè÷åñêèé æóðíàë çàðåãèñòðèðîâàí Ôåäåðàëüíîé ñëóæáîé ïî íàäçîðó çà ñîáëþäåíèåì çàêîíîäàòåëüñòâà â ñôåðå ìàññîâûõ êîììóíèêàöèé è îõðàíå êóëüòóðíîãî íàñëåäèÿ. Ñâèäåòåëüñòâî î ðåãèñòðàöèè ÏÈ ¹ ÔÑ1-01650 îò 01.11.2004
СОД Е РЖ А Н И Е ПРОБЛЕМЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ ОТРАСЛИ Д. Скородумов, Ю. Ярикова, Е. Павлова, Р. Корнелаева, О. Иванова, Т. Королёва, Д. Павлова Роль бактериальных биопленок в инфекционной патологии животных и пищевых производствах ..............4
ISSN 2074-6830 Ãëàâíûé ðåäàêòîð Ã.Ï. Äþëüãåð, ä-ð âåò. íàóê Ïðåäñåäàòåëü ðåäêîëëåãèè Ä.È. Ñêîðîäóìîâ, ïðîôåññîð Ðåäêîëëåãèÿ æóðíàëà: Ñ.Í. Ïðåîáðàæåíñêèé, ïðîôåññîð Ñ.À. Áåðåçêèíà, ïðîôåññîð Í.Ì. Êîñòîìàõèí, ïðîôåññîð Ë.Â. Òîïîðîâà, ïðîôåññîð Ã.Ï. Äþëüãåð, ä-ð âåò. íàóê Ó÷ðåäèòåëü: Íåêîììåð÷åñêîå ïàðòíåðñòâî Èçäàòåëüñêèé Äîì «ÏÐÎÑÂÅÙÅÍÈÅ», 117042, ã. Ìîñêâà, óë. Þæíîáóòîâñêàÿ, ä. 45 Òåë. ðåäàêöèè: 8 (495) 922-60-71 Àäðåñ ðåäàêöèè: Ìîñêâà, Áóìàæíûé ïðîåçä, 14, ñòð. 2 Äëÿ ïèñåì: 125040, Ìîñêâà, à/ÿ 1 Àäðåñ ýëåêòðîííîé ïî÷òû ðåäàêöèè: article2005@mail.ru Òåë. îòäåëà ïîäïèñêè: 8 (495) 749-42-73, 749-21-64, 664-27-61 Æóðíàë ðàñïðîñòðàíÿåòñÿ ÷åðåç êàòàëîãè: ÎÀÎ «Àãåíòñòâî «Ðîñïå÷àòü», «Ïðåññà Ðîññèè» (èíäåêñ – 84834) è «Ïî÷òà Ðîññèè» (èíäåêñ – 12396), à òàêæå ïóòåì ïðÿìîé ðåäàêöèîííîé ïîäïèñêè ©ÈÄ «Ïàíîðàìà», ÇÀÎ «Ñåëüõîçèçäàò» http://veterinar.panor.ru Ïîäïèñàíî â ïå÷àòü: 13.03.2012 Ôîðìàò 60 õ 88 / 8. Áóìàãà îôñåòíàÿ. Ïå÷. ë. 10 Ðåäàêöèÿ æóðíàëà «Âåòåðèíàðèÿ ñåëüñêîõîçÿéñòâåííûõ æèâîòíûõ» âûðàæàåò íàäåæäó, ÷òî ÷èòàòåëè, ðóêîâîäèòåëè õîçÿéñòâ, ñïåöèàëèñòû ïðîäîëæàò èëè îôîðìÿò âíîâü ïîäïèñêó íà íàø æóðíàë, à òàêæå óñòàíîâÿò âçàèìîâûãîäíîå äåëîâîå ñîòðóäíè÷åñòâî ñ îðãàíèçàöèÿìè è ôèðìàìè, ëþáåçíî ïðåäîñòàâèâøèìè ñâîè ìàòåðèàëû äëÿ ïóáëèêàöèè â äàííîì íîìåðå æóðíàëà. Ìíåíèå ðåäàêöèè íå âñåãäà ñîâïàäàåò ñ ìíåíèåì àâòîðîâ ñòàòåé.
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ Важность минеральных веществ в кормлении сельскохозяйственных животных ...........................................8
Т. Шепелева, Г. Петухова Современный метод диагностики и лечения заболеваний у животных с нарушением обмена веществ ............................................. 11
Э. Яникова, И. Джамалудинова, Н. Мамаев, М. Анаев Профилактика субклинических сбоев процессов метаболизма у молодняка овец при отгонно-пастбищной системе отрасли ......................15
А. Курдеко, Ю. Ковалёнок, А. Мацинович Микроэлементозы продуктивных животных в Республике Беларусь, разработка мероприятий по их лечению и профилактике.............................................19
О. Василенко Содержание микроэлементов в объектах внешней среды и организме животных, принадлежащих хозяйствам степной зоны Южного Урала ..................................................25
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ Е. Павлова, Д. Скородумов, Р. Корнелаева C. difficile ассоциированная диарея (CDAD) и псевдомембранозный колит у животных .......................27
В. Муравьёв, В. Родионова Роль микоплазм в патологии крупного рогатого скота ...35
ИНВАЗИОННЫЕ БОЛЕЗНИ А. Миронова, М. Попов, Т. Молокова, Д. Рекутин Контаминация пастбищ яйцами и личинками дикроцелий в условиях Ростовской области ...................39
НЕЗАРАЗНЫЕ БОЛЕЗНИ С. Костенко, Г. Комлацкий, В. Буряк Адсорбенты – важный фактор в борьбе с микотоксикозом в свиноводстве .......................................42
АКУШЕРСТВО И ГИНЕКОЛОГИЯ Г. Дюльгер, П. Дюльгер Преимплантационная диагностика пола эмбрионов крупного рогатого скота: определение пола зародышей методом ПЦР- и FISH-анализов ................................................................49
БОЛЕЗНИ МОЛОДНЯКА Л. Ширинова Морфофункциональные особенности молодняка ............54
ФАРМАКОЛОГИЯ И ТОКСИКОЛОГИЯ Н. Пышманцева, Н. Ковехова Применение пробиотиков с первых часов жизни цыплят...............................................................................61
ВЕТСАНЭКСПЕРТИЗА, ЗООГИГИЕНА, ВЕТЕРИНАРНАЯ САНИТАРИЯ Е. Павлова, Р. Корнелаева, П. Степаненко, В. Ястреб Изменение микрофлоры охлажденной рыбы и суши в процессе хранения ..................................................64
КОРМА И КОРМОВЫЕ ДОБАВКИ В. Дедковский, А. Курепин, Т. Козинец Переваримость питательных веществ и использование азота коровами в сухостойный период при различном уровне кормления ......................................67 О редакционном портфеле журнала ......................................70
CONTENTS
PROBLEMS AND BRANCH PROSPECTS D. Skorodumov, Yu. Yarikova, E. Pavlova, R. Kornelaeva, O. Ivanova, T. Koroleva, D. Pavlova The role of bacterial biofilms in infectious pathology of animals and food production .......................................4
EXPANDED THEME – MICROELEMENTOSIS OF ANIMALS Importance of mineral substances in feeding of agricultural animals ................8
T. Shepeleva, G. Petukhova Modern method of diagnostics and treatment of diseases at animals with metabolism defect ...............................11
E. Yanikova, I. Dzhamaludinova, N. Mamaev, M. Anaev Preventive maintenance of subclinical failures of processes of metabolism at young sheep at the range pasture system of branch ............................................15
A. Kurdeko, U. Kovalyonok, A. Macinovich Microelementosis of productive animal in Republic Belarus, development action upon their treatment and preventive maintenance ......................19
T. Shepeleva, G. Petukhov The content of microelements in objects of environment and organism of the animals belonging to farms of the steppe zone of the South Ural ....... 25
INFECTIOUS DISEASES E. Pavlova, D. Skorodumov, R. Kornelaeva C.difficile associated diarrhea (CDAD) and pseudomembranous colitis in animals .... 27
V. Murav’yev, V. Rodionova Role of mycoplasmas in cattle pathology........................................ 35
INVASION DISEASES A. Mironova, M. Popov, T. Molokova, D. Rekutin Contamination of pastures by eggs and by the larvas of dicrocelises in the conditions of the Rostov region .... 39
NONCONTAGIOUS DISEASES S. Kostenko, G. Komlatskiy, V. Buryak Adsorbents – the important factor in abatement with mycotoxicosis in pig breeding .............................................. 42
OBSTETRICS AND GYNECOLOGY G. Dyulger, P. Dyulger Preimplantation diagnostics of sex of the embryos of cattle .................. 49
DISEASES OF YOUNG ANIMALS L. Shirinova Morphofunctional characteristics of young animals ........................................... 54
PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY N. Pyshmantseva, N. Kovekhova Use of probiotics from the first hours of life of chickens ................................61
ZOOHYGIENE, VETERINARY SANITARY AND INSPECTION E. Pavlova, R. Kornelaeva, P. Stepanenko, V. Yastreb Change of microflora of the cooled fish and sushi in the process of storage ................................64
FEED AND FEED ADDITIVES A. Tairova Use of chitosan for the correction of the level of heavy metals in products of slaughter of cattle.............. 67
ПРОБЛЕМЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ ОТРАСЛИ
УДК 636:612.579
РОЛЬ БАКТЕРИАЛЬНЫХ БИОПЛЕНОК В ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ ЖИВОТНЫХ И ПИЩЕВЫХ ПРОИЗВОДСТВАХ Д. Скородумов, Ю. Ярикова, Е. Павлова, Р. Корнелаева, О. Иванова, Т. Королёва, Д. Павлова, e-mail: article2005@mail.ru Аннотация. Биопленка – совокупность микроорганизмов на плотной поверхности биотического или абиотического происхождения. Ключевые слова: моновидовые и мультивидовые биопленки, муциновая слизь, экзополисахариды, лектины, лиганды, адгезины.
THE ROLE OF BACTERIAL BIOFILMS IN INFECTIOUS PATHOLOGY OF ANIMALS AND FOOD PRODUCTION D. Skorodumov, Yu. Yarikova, E. Pavlova, R. Kornelaeva, O. Ivanova, T. Koroleva, D. Pavlova Summary. Biofilm – a set of microorganisms on dense surfaces biotic or abiotic origin. Keywords: monospecific and multispecific biofilms, mucus mucin, exopolysaccharides, lectins, ligands of adhesins. Со времен классических работ Роберта Коха утвердилось представление, что свойства возбудителей инфекционных болезней вполне соответствуют характеристикам чистой культуры микроорганизма, выделенной и поддерживаемой на питательных средах. В настоящее время приходит осознание, что лабораторные культуры бактерий значительно отличаются от присутствующих в естественной среде обитания. Соответственно, стали различать планктонный и биопленочный фенотип микроорганизмов. Под планктонным фенотипом понимают свободно живущие клетки микроорганизмов. Биопленкой называют тонкий слой микроорганизмов,
4
который адгезирован на какой-либо поверхности. Более развернутая трактовка понятия «биопленка» следующая: «Биопленка – совокупность микроорганизмов на плотной поверхности биотического или абиотического происхождения, в сочетании с экстрацеллюлярным биополимером, находящаяся в контакте с жидкостью и характеризующаяся экспрессией у микроорганизмов генов, не проявляющихся у планктонных клеток». Считается, что коллективная структура в виде биопленки образуется в ситуации, когда бактерии находятся в состоянии стресса, то есть это реакция микроорганизмов на воздействие разного рода неблагоприятных факторов.
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ПРОБЛЕМЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ ОТРАСЛИ
На ранних этапах изучения биопленки характеризовали как однородную плоскую структуру с относительно постоянной толщиной. Применение методов сканирующей электронной микроскопии, эпифлуоресцентной микроскопии, электродных технологий и других методов позволило существенно расширить представления о строении и функционировании биопленок. Структура биопленки в значительной мере определяется конкретными условиями – гидродинамикой, концентрацией питательных веществ, рН, парциальным давлением кислорода, осмолярностью и т. д. Установлено, что биопленки пронизаны каналами, по которым движется жидкость, содержащая питательные вещества и уносящая продукты метаболизма [8, 9]. Биопленки миогут быть моновидовыми, но чаще представляют собой полимикробные сообщества, которые иногда определяют термином «микробные города». Опыты in vitro показали, что принципиальных структурных отличий между моновидовыми и мультивидовыми биопленками нет. Наиболее известным вариантом многовидовых микробных ассоциаций является пленка, образующаяся в ротовой полости на поверхности зубной эмали (зубной налет). Существует гипотетическая модель биопленки пристеночного слоя кишечника, где в муциновой слизи на очень близком расстоянии друг от друга расположены микробные клетки, что обеспечивает их контакт как с химусом, так и с соседними клетками. Выявлены биопленки в виде слоя или конгломератов на поверхности клеток эпителия. Данные кишечные микробные сообщества проявляют поразительную устойчивость, несмотря на меняющийся химический состав и физические характеристики химуса. Имеются сведения, что микробные ассоциации могут присутствовать на пищевых частицах в просвете кишечника. Доказано, что планктонные и биопленочные клетки одного вида имеют различные метаболические профили [2, 5, 3]. Несмотря на видовые особенности микроорганизмов, образование всех бактериаль-
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
ных биопленок имеет общие закономерности. В частности, первичным этапом в формировании биопленки является адгезия клеток к какой-либо поверхности. В случае биогенной структуры адгезия бактерий происходит за счет лектинов, лигандов или адгезинов, на абиогенных – путем непосредственного взимодействия клеток микроорганизмов с поверхностью. Процесс адгезии принято дифференцировать на две стадии – первичную, обратимую адгезию и вторичную с прочным связыванием бактериальной клетки с поверхностью. На следующей стадии происходит созревание биопленки, сопровождающееся образованием матрикса, увеличением толщины и плотности бипленки. Матрикс состоит из выделяемых во внешнюю среду экзополисахаридов, белков, нуклеиновых кислот и ряда иных веществ, экзополисахариды высокогидратированы. В сформировавшейся биопленке деление клеток замедляется, но они сохранают жизнеспособность. В последующем клетки наиболее глубоких слоев биопленки начинают погибать по тем же причинам, что и бактериальные культуры на питательных средах в лабораторных условиях. В биопленке в конечном итоге устанавливается динамичное равновесие между гибелью и ростом клеток. Часть клеток отделяется от биопленки, т.е. продуцируются планктонные клетки, которые ищут условия для формирования очередной биопленки, и весь цикл вновь повторяется [4, 5]. Все перечисленные стадии развития биопленки координируются путем выработки клетками так называемых сигнальных молекул, которые в свою очередь являются результатом экспрессии соответствующих генов, не активных у клеток планктонного фенотипа. Природа «сигнальных молекул» во многих случаях пока не определена. Накопленные данные свидетельствуют, что рост микроорганизмов в виде сообществ (биопленка) экологически более целесообразен, поскольку достигается эффект метаболической кооперации между бактериями различных ви-
5
ПРОБЛЕМЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ ОТРАСЛИ
дов в мультивидовых биопленках, клетки микроорганизмов оказываются более защищенными от воздействия различных факторов (ПВА, антибиотики, антитела, бактериофаги и т.д.). Борьба с биопленками является сложной задачей. Внешние биопленки (на раневых поверхностях, зубной налет) можно удалить механически, гораздо сложнее обстоит ситуация с внутренними биопленками. Именно биопленки бактерий приводят к развитию хронических инфекционных болезней, при которых возбудитель не убивает хозяина, но хозяин не может от него освободиться. Исследованы различные методы борьбы с биопленками. Разрабатываются методы воздействия на матрикс биопленок в целях его разрушения (электрическое поле, ультразвук, ферменты и т.д.). Особенно значима резистентность бактерий в составе биопленок к антибиотикам и дезинфектантам. Общепринятые концентрации антибиотиков, эффективные по отношению к планктонным клеткам, в ряде случаев не обеспечивают желаемый эффект по отношению к тем же видам бактерий в составе биопленок. Механизмы повышенной устойчивости бактерий в составе биопленок к антибиотикам и другим биоцидам до конца не ясны. Тем не менее установлено, что матрикс действует как диффузионный барьер для достаточно крупных молекул биоцидов либо не пропускает гидрофильные антибиотики. В целом биопленочный матрикс не обеспечивает полной защиты бактериальных клеток от биоцидов, но замедляет процесс гибели клеток, и в итоге тем или иным способом, например при помощи ферментов, достигается эффект инактивации антибиотика, или его вымывание из биопленки через поры. Как уже говорилось, в зрелых биопленках рост бактерий замедляется, а пониженная метаболическая активность микроорганизмов также снижает эффективность антибиотика. Сформировалось представление, что антибиотик, убивая большинство клеток биопленки, обеспечивает оставшимся жизнеспособным клеткам бесконкурентные условия и помогает им
6
выживать. Такие пережившие атаку биоцида клетки получили наименование «микроорганизмы-персистенты», именно они могут быть причиной рецидивов болезни [1, 6–8]. Моновидовые биопленки чаще формируются на различного рода медицинских имплантах (катетеры, сердечные клапаны, суставные протезы и т.д). К инфекционным болезням биопленочной этиологии относят пародонтит, инфекции среднего уха, мочевыводящих путей, муковисцидоз. Биопленки могут способствовать развитию атеросклероза, поскольку есть данные, что атеросклеротические бляшки представляют собой функционирующие биопленки, которые образуются на стенках измененных сосудов. Биопленки рассматривают как причину хронических синуситов, эндокардитов, ушных инфекций. Биопленки участвуют в образовании камней в почках, которые часто состоят из бактерий, их экзопродуктов и минерального материала. Установлено, что до 90 % лептоспир способны формировать биопленки. Доказана роль биопленок в развитии остеомиелита, пародонтоза, маститов, актинобациллезной плевропнемонии свиней, бронхопневмопатий полиэтиологической природы, пиодермий, пастереллеза, эшерихиозов и т.д. Описаны биопленки на поверностях листьев растений, плодов, причем они могут интегрировать некоторые патогенные микрорганизмы. Большое внимание уделяется формированию биопленок в условиях пищевых производств, особенно в мясо- и молокоперерабатывающих предприятиях. По мнению ученых и специалистов пищевой индустрии, биопленки – резервуар микробной контаминации. Биопленки формируются на продуктах или контактирующих поверхностях, контаминация приносит серьезный экономический ущерб. Кроме того, патогенные бактерии, интегрированные в биопленки, представляют опасность для здоровья (L. monocytogenes, E. coli, Salmonella). В производственных условиях биопленки образуются на различных поверхностях, включая сталь, резину, стекло, полипропилен, то есть они могут образовываться на половых
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ПРОБЛЕМЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ ОТРАСЛИ
покрытиях, в сточных трубах, тканях (полотне) конвейеров, резиновых прокладах, теплообменниках, охладителях. В жидкостной индустрии, такой как молочная, индустрия соков, бактериальные пленки развиваются в случае контаминации продуктов. При этом могут возникнуть следующие серьезные проблемы: механические заторы, биозагрязнение, задержка теплопереноса, биокоррозия, биодеградация полимерных систем. Внедрение новых мембранных технологий типа ультрафильтрации или обратный осмос также сопровождается образованием биопленок. Например, применение данных технологий в молочной промышленности приводит к следующим проблемам: значительному снижению скорости потока, уменьшению проницаемости мембран, повреждению поверхности мембран. Присутствие биопленок в пищевых производствах может быть источником контаминации микроорганизмами, портящими продукцию, или патогенными бактериями путем прямого контакта или через непрямых передатчиков, таких как персонал, насекомые, воздух и очистные системы. В дополнение, перекрестная контаминация может возникать при контакте пищи с контаминированными биопленками поверхностями или через аэрозоли или конденсаты с контаминированных поверхностей. Контаминация биопленками пищи случается, если они отделяются от субстрата и попадают в продукт и ингредиент. Значение такой контаминации зависит от категории риска пищевого продукта. В группу с высокой степенью
риска включаются сырые и с минимальной обработкой продукты, например животноводческие продукты типа молока, сыры; сырое мясо и птица; рыба и т.д. [1, 8, 10]. Биопленки в этих случаях обычно мультивидовые. Таким образом, перед ветеринарными специалистами имеется широкий спектр задач, касающихся новых методических подходов к профилактике, диагностике и лечению инфекционных болезней, ассоциирующихся с бактериями в виде биопленки, а также по снижению бактериальной контаминации продукции в пищевых производствах. ЛИТЕРАТУРА 1. Annual report on zoonoses in Denmark 2003. Danish Ministry of Food, Agriculture and Fisheries [cited 2006 Jan 2]. 2. Ann Rev Microbiol. 1987; 41: 435–464. 3. Ansary A. and Radu S. FEMS Microbiol Lett. 1992.vol.2.p.l25–128. 4. Costerton J. Indus. Microbiol. 1995; 15: 137–140. 5. Gilbert P. Das J, Foley I. Science. 2007;11: 160–167. 6. Lewis R. Antimicrobial agents and chemotherapy/ 2001; 45, N.4: 999–1007. 7. San Martin B, Cruze J, Morales M. A. et al. Arch. Med. Vet. 2003; 92: 179–185. 8. Singh R, Stine O. S, Smith D. L. Appl. Environ. Microbiol. 2003; 69: 3412–3420. 9. Widmer A. F., Frei R., Rajacic Z. et al. J. Infect. Dis. 1998; 42: 974–1007. 10. Wipenny J. FEMS Microbial Rev. 2000; 24: 661–671.
Ветинфо НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ НА МЯСО ПОЯВИТСЯ НЕ РАНЬШЕ 2013 ГОДА Правительство планирует разработать национальный стандарт на мясо крупного рогатого скота. По данным «Маркера», на подготовку соответствующего законопроекта Министерству сельского хозяйства выделено 18 месяцев, передает «ЯСИА». По замыслу законодателей, национальный стандарт должен защитить российских потребителей от некачественной говядины из Аргентины, Канады и США, которая может поступить на отечественный рынок под видом высококачественного мяса.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
7
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
УДК 636:087.72
ВАЖНОСТЬ МИНЕРАЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ В КОРМЛЕНИИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ* Стойкое увеличение производства продуктов животноводства возможно на базе организации полноценного кормления животных. Среди факторов кормления важное место занимают минеральные вещества, недостаток или излишек которых наносит значительный ущерб животноводству, сдерживает рост поголовья, снижает производительность и плодовитость, вызывает заболевания у животных и ухудшает качество продукции. Макро- и микроэлементы должны поступать в организм животных в оптимальных количествах и соотношениях и в строгом соответствии с потребностями продуктивных животных. Но только определенная часть макро- и микроэлементов может всасываться и превращаться в организме в метаболически активную форму. В связи с этим было введено понятие биологической доступности (БД). Большинство исследователей под биологической доступностью понимают эффективность усвоения и использования минеральных веществ у животных из разных источников или при разном физиологическом состоянии организма. Балансирование рационов с учетом БД разрешает более полно удовлетворять потребности организма в макро- и микроэлементах, более рационально использовать корма и добавки и объективно оценивать новые кормовые средства и способы подготовки кормов к скармливанию. Рассмотрим, насколько эффективно усваиваются в организме животных те или другие макроэлементы. К ним относят фосфор, кальций,
магний, натрий, калий, хлор, серу. В семенах от 30 до 85 % фосфора находится в форме фитата (фитиновой кислоты). Фитатный фосфор может быть усвоен только после растворения и его гидролиза фитазой до неорганического фосфора. Всасывание фитатного фосфора у жвачных происходит так же, как и неорганического, а у свиней и птицы – ограничено и зависит от многих факторов (уровня Са и витамина D в рационе, возраста животных и др.) Так, количество фитатного фосфора в кукурузе, ячмене и пшенице почти одинаковое, а БД этого элемента в пшенице и ячмене значительно выше благодаря фитазе этих кормов. Доказано, что у поросят, которые получали рацион с включением 89 % пшеницы, эффективность использования фосфора была в 1,7 раз выше, чем на кукурузном рационе. В экспериментах, проведенных с кормами разного происхождения, установлено, что для молодняка свиней 3, 6-месячного возраста фосфор в наиболее доступной форме находится в сухом обезжиренном молоке. Хорошим источником фосфора является также мясокостная и рыбная мука, паприн, прутин, эприн. Фосфор из пшеницы, гороха, пшеничных отрубей, овса, подсолнечного шрота и ячменя усваивается значительно лучше, чем из кукурузы и соевого шрота. В рационах сельскохозяйственных животных, особенно свиней и птицы, содержится недостаточное количество кальция. Его дефицит заполняют, как правило, за счет мела, известняков, костной муки, фосфатов и других добавок. Неплохим источником кальция для живот-
* Статья впервые опубликована в нашем журнале в №8/2011.
8
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
ных является сапропель, применение которого оказывает содействие повышению прочности костей. В результате проведенных опытов выяснилось, что БД кальция из сена люцернового или известняка у жвачных была значительно ниже, чем из костной муки, хлорида монокальций фосфата, а свиньи и птица усваивали его из всех подкормок, приблизительно, одинаково. У телят молочного периода усвояемость кальция составляла 90–95 %, у молодняка массой 100–120 кг – 55 %, при массе свыше 300 кг – 45 %, а у взрослых животных – ниже 40 %. Что касается магния, в рационе сельскохозяйственных животных по обыкновению содержится достаточное количество этого элемента. Однако отдельные виды и половозрастные группы (молодняк, беременные, высокопроизводительные и особенно жвачные) могут испытывать недостаток магния. Чаще всего это наблюдается в экстремальных условиях: переходный период содержания, изменение рационов, стрессы, холод, дождливое лето, отъем и др. Основным источником магния для животных являются растительные корма, в которых он связан с белком, анионами органических веществ, а также входит в состав хлорофилла и фитина. Повысить всасывание магния у коров можно путем кормления их значительным количеством легкоусваиваемых углеводов. Выявлено, что первотелки более эффективно усваивают кальций, фосфор и магний, чем нетель и телки. У первотелок в начале лактации усвояемость и ретенция этих элементов из зимних рационов значительно выше, чем у коров с 3–7 отелами. В середине лактации эффективность использования кальция, фосфора и магния из летних рационов существенно выше у коров, чем у первотелок. Усвояемость магния у молочных коров в зимне-стойловый период в среднем составляет около 30 %. БД магния из травы, по обыкновению, ниже, чем из сена. В бобовых этот элемент находится в более усваиваемой форме, чем в злаковых. Для высокопроизводительных коров в переходной период содержания (май – июнь) к рациону следует
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
прибавлять 50–60 г магнезии в день при достаточном уровне магния в корме (2,1–2,3 г/кг), а в период с июня по сентябрь – по 25–30 г. При этом жирность молока повышается на 0,1– 0,15 %. Специалисты рекомендуют обогащать магнием рационы свиней и птицы, несмотря на то, что в кормах для этих животных содержится достаточное количество этого элемента. Как источник магния применяют сульфат, оксид, фосфат, карбонат. Эффективными источниками магния для молодняка свиней являются также его соли с молочной, лимонной и уксусной кислотами. Усвояемость магния у свиней из отдельных кормов и соединений представляет: из кукурузы – 55,7 %, овса – 82,7 %, ячменя – 54,5 %, соевой муки – 60,3 %, карбоната – 64,9 %, фосфата – 54 %. В обмене веществ животных тесно взаимозависимы натрий, калий и хлор. Они принимают участие в процессах пищеварения, дыхания, нервно-мышечной возбудимости, регулируют кислотно-щелочное равновесие, водный обмен и многое другое. Животные с растительными кормами обычно потребляют калия в 4 раза больше нормы. Тем не менее, в некоторых cлучаях возможно проявление недостаточности этого элемента, например, при использовании высококонцентрированных рационов или грубых кормов, при поносах, стрессе (перевозка, высокая окружающая температура). Потребность коров в калии особенно возрастает в условиях знойной погоды (35 °С) с 0,8 % до 1,6 %, при этом для сохранности баланса электролитов уровень натрия в рационе следует одновременно увеличивать до 0,7 % (при норме 0,4 %). Молодняк животных и птицы испытывает значительно большую потребность в калии, чем взрослые особи. Поэтому в рационы с высоким содержанием зерна рекомендуют вводить протеиновые добавки, богатые калием. Достаточное количество калия содержится в сене, силосе и пастбищной траве. Довольно часто в рационах животных встречается дефицит натрия, поэтому необходим постоянный контроль за его уровнем
9
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
в рационе. При дефиците натрия применяют разные добавки этого элемента, главным образом, хлорид натрия (поваренная соль). Соль полностью удовлетворяет потребность животных и в хлоре, и вдобавок является вкусовой добавкой. Однако недостаточность хлора в обычных условиях маловероятная, так как потребность в нем животных значительно меньшая, чем в натрии. Как показали исследования, БД хлора для птицы, свиней и жвачных из хлоридов натрия, калия, аммония и кальция была высокой. Не менее заметную роль в кормлении животных играет сера. Потребность в сере удовлетворяется, главным образом, за счет аминокислот, которые содержат серу. Усвояемость животными серы из натуральных кормов находится в пределах 25–70 % и зависит от их источника, качества протеина, структуры рациона и наличия в нем небелковых соединений азота. В опытах на высокопроизводительных коровах установлено, что усвоение серы в среднем составляет 58 %. При силосном типе откорма у бычков усвояемость этого элемента составляет 62 %, при сенажном откорме на зеленых кормах – 72–74 %. Значительное место в кормлении животных занимают микроэлементы. К ним принадлежат железо, медь, цинк, марганец, кобальт, йод, селен. Что касается железа, то у взрослых особей недостаточность этого элемента встречается редко в связи с его высоким содержимым в растительных кормах и хорошей усвояемости. Недостаток железа часто встречается у беременных и животных в период лактации, а также у молодняка, особенно у подсосных поросят. Поросята в первые дни жизни способны усваивать значительное количество железа. Однако пока еще не найдено дешевых, безвредных и высокоэффективных источников данного элемента для перорального применения. Установлено лишь, что подкормка свиноматок сульфатом железа в дозе 2 г/кг в расчете на железо за неделю до опороса и на протяжении трех недель подсосного периода повышает обеспе-
10
ченность организма этим элементом, увеличивает содержание железа и меди в молоке в 1,4– 1,8 раза. Обогащение комбикорма свиноматок железом оказывает содействие профилактике анемии поросят, повышает интенсивность их роста и экономически более выгодно, чем внутримышечное введение поросятам ферроглюкина. Установлено, что у птицы и свиней железо хорошо усваивается из сульфатов, хлорида, глюконата, а плохо всасывается из карбонатов, пирофосфатов и практически недоступно всем видам животных из оксидов. Железо хорошо усваивается свиньями из пшеницы и продуктов ее переработки. Следует указать, что железо из кормов животного происхождения усваивается лучше, чем из кормов растительного происхождения. Такой микроэлемент, как кобальт, поступает в организм с кормами и добавками, частично в виде витамина В12. Усваивание кобальта животными незначительное, так как потребность в нем небольшая. Важную роль в кормлении животных сыграет такое минеральное вещество, как йод. Йод поступает в организм через воду, воздух, корма и минеральные добавки. Стабильными и легкоусваиваемыми источниками йода являются йодированные жиры, белки, морские водоросли, рыбная мука. Что же касается селена, то его усвояемость животными довольно большая. БД селена из молока, кормов растительного происхождения, органических соединений, селената довольно высокая. Подытоживая все вышесказанное, важно указать, что для профилактики минеральной недостаточности у животных в критические периоды жизни, такие как беременность, период лактации, вторичная недостаточность, или при особых условиях содержания (отгонное пастбище), рекомендовано давать животным различные соединения кобальта, селена, йода с разными аминокислотами, белками, органическими и жирными кислотами и полисахаридами. http://practik.spb.ru
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
УДК 636:087.72
СОВРЕМЕННЫЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ЖИВОТНЫХ С НАРУШЕНИЕМ ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ* Т. Шепелева, Г. Петухова, УГАВМ, г. Троицк Сохранение репродуктивного здоровья животных зависит от способности адаптироваться и сохранять свой гомеостаз в неадекватных условиях внешней среды, а также от обеспеченности животных недостающими в кормах и воде минеральными веществами и витаминами. Проблема макро- и микроэлементозов является не только острой медико-социальной проблемой, но и проблемой ветеринарной медицины. Значимость комплексного гипомикроэлементоза – важнейшего экологического фактора – подтверждается еще и тем, что он действует постоянно и повсеместно. Дефицит макро-, микроэлементов и витаминов не только способствует росту заболеваемости, но, что не менее важно, резко снижает генетический потенциал, способность животных к воспроизводству, быстрой адаптации и рождению крепкого здорового молодняка. Основными причинами болезней, связанных с нарушением обмена веществ, является дефицит в организме животных углеводов, белков, кальция, магния, кобальта, марганца, цинка, селена, йода, каротина, витаминов А, Д, Е, группы В. В сложившихся условиях у животных отмечаются отклонения со стороны костной ткани, отставание в росте и развитии, извращение аппетита, болезненность костяка, рассасывание последних ребер, наличие рахитических «че-
ток», утолщение суставов, искривление конечностей, патология печени (гепатозы), увеличение щитовидной железы. У всех животных отмечается нарушение процесса кератинизации, что проявляется нарушением эластичности кожи, аллопециями, ломкостью волос, депигментацией кожи. Еще в древние времена отец медицины Гиппократ говорил, что лекарство должно быть пищей, а пища – лекарством. В последнее время осуществляется синтез множества лекарственных препаратов, в том числе и биологически активных добавок (БАД), обладающих способностью воздействовать на все уровни организма – от клеточных структур до регуляции функций целостного организма. Недостатком препаратов, включающих в себя комплекс макро- и микроэлементов, является отсутствие строгого районирования, так как наличие того или иного элемента в данной зоне может находиться в запредельных для животных и человека дозах. Кроме этого, часто не учитывается антагонизм и синергизм между отдельными компонентами, входящими в состав препарата. На основании проведенных исследований на кафедре терапии УГАВМ показателей белкового, углеводного и жирового обмена, макрои микроэлементного состава крови животных
* Статья впервые опубликована в нашем журнале в №8/2011.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
11
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
установлено, что количество АсАТ (аспартатаминотрансферазы) в 15 раз превышает норму, а АлАТ (аланинаминотрансферазы) в 3 раза. Данные изменения указывают на серьезные нарушения функционального состояния печени. Увеличение АсАТ вызвано наличием более глубоких структурных поражений клеток печени, в том числе митохондрий. Исследования глюкозы указывают на наличие гипо- и гипергликемии, что позволяет говорить о снижении гликогенсинтезирующей функции печени и нарушении углеводного обмена. Обеднение печени гликогеном вызывает усиленный приток в печень жира из жировых депо и усиление жировой инфильтрации, что подтверждается повышенным содержанием холестерина в сыворотке крови животных. Гипопротеинемия связана с недостаточным поступлением белка с кормом или плохим его усвоением вследствие нарушения функции желудочно-кишечного тракта. Гиперпротеинемия – результат повышенного количества белка в кормовом рационе и нарушения синтетической функции печени и кальций-, магний-, фосфорного отношения. Количество кальция снижено на 33 %, магния – на 50 %, хлоридов – на 25–30 %, последнее приводит к нарушению синтеза соляной кислоты и нарушению процессов пищеварения. Микроэлементный состав нарушен, на фоне повышенного содержания железа и никеля в крови животных отмечено снижение меди и цинка в 3 раза, кобальта в 2 раза и марганца в 5 раз. Почечный порог по отношению к минеральным веществам нарушен: выведение из организма с мочой кальция превышает содержание его в крови в 2–3 раза, магния – 5–7 раз. Кальций. Роль в организме: является важной составной частью организма, обеспечивает опорную функцию костей, которые одновременно выполняют функцию «депо» кальция. Участвует в формировании костной ткани и минерализации зубов, регуляции процессов в нервной системе, поддержании стабильности
12
сердечной деятельности, в процессах свертывания крови. Основные проявления дефицита кальция: общая слабость, боли, судороги в мышцах, в костях, нарушение походки, развитие остеопороза, остеоартроза, остеомаляции, деформация позвонков, переломы костей, нарушения иммунитета, аллергозы, спазмы гортани, желудочнокишечного тракта, матки, нарушения трофики сердечной мышцы, повышенная возбудимость нервной системы. Магний. Роль в организме: важный внутриклеточный элемент, обеспечивающий «энергией» жизненно важные процессы в организме животных. Магний участвует в обмене белков, жиров и углеводов, регуляции нервно-мышечной проводимости и тонуса гладкой мускулатуры сосудов, снижает артериальное давление, обладает антиаритмическим действием, снижает возбудимость в нервных клетках, восстанавливает силы после физических нагрузок. Основные проявления дефицита магния: утомляемость, потеря аппетита, запоры. Заболевания сердечно-сосудистой системы, магнийзависимые аритмии, стенокардия, гипертоническая болезнь, риск тромбозов и инфарктов, истощение функции надпочечников, мышечная слабость, судороги мышц, начальная стадия развития сахарного диабета, мочекаменной и желчнокаменной болезни, повышенный риск опухолевых заболеваний. Железо. Роль в организме: перенос кислорода тканям и участие в процессах окисления, выделение энергии для протекания ферментативных процессов, обеспечение иммунных функций. Основные проявления дефицита железа: развитие железодефицитных анемий, слабость, непереносимость холода, учащенное сердцебиение при незначительной физической нагрузке, угнетение клеточного и гуморального иммунитета, увеличение риска развития опухолевых заболеваний.
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
Цинк. Роль в организме: участвует в регуляции деления клеток и воспроизведении потомства, усиливает рост волос и копытного рога, участвует в белковом, углеводном и минеральном обмене, выработке инсулина и полового гормона дигидрокортикостерона, поддерживает кожу в нормальном состоянии, повышает иммунитет. Основные проявления дефицита цинка: увеличение роста развития опухолевых процессов, ускоренное старение, аллергические заболевания, снижение иммунитета, снижение уровня инсулина, риск развития сахарного диабета, расстройство обоняния, экземы, дерматиты, трофические язвы, плохое заживление ран, тусклый цвет и выпадение волос. Медь. Роль в организме: жизненно важный микроэлемент, который входит в состав многих гормонов и ферментов, участвует в процессах обмена веществ и тканевом дыхании, в формировании соединительной ткани и в кроветворении, пигментации кожи и волос, выработке гормона щитовидной железы – тироксина, имеет противовоспалительное свойство. Основные проявления дефицита меди: анемии, увеличение риска развития ишемической болезни сердца, ухудшение деятельности сердечно-сосудистой системы, нарушение минерализации костной ткани, остеопороз, переломы костей, увеличение щитовидной железы (гипотириоз, дефицит тироксина), нарушение пигментации волос, угнетение иммунной системы, ускоренное старение организма, нарушения полового цикла, бесплодие, ожирение. Марганец. Роль в организме: обеспечивает нормальное функционирование мышечной ткани, участвует в обмене гормонов щитовидной железы (тироксин), усиливает утилизацию жиров, снижает уровень липидов, противодействует жировой дегенерации печени, участвует в обеспечении полноценной репродуктивной функции, необходим для нормального роста и развития организма.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
Основные проявления дефицита марганца: нарушение сократительной функции мышц, склонность к спазмам и судорогам, боли в мышцах, двигательные расстройства, дегенеративные изменения суставов, склонность к растяжениям и вывихам, нарушения пигментации кожи, нарастание избыточного веса, ожирение, бесплодие, дисфункция яичников, расстройство иммунитета, аллергические реакции. Кобальт. Роль в организме: входит в состав витамина В12, увеличивает образование эритроцитов и гемоглобина, участвует в ферментативных процессах и образовании гормонов щитовидной железы, способствует выделению воды почками, участвует в процессах блокирования и утилизации токсичных элементов. Основные проявления дефицита кобальта: общая слабость, вегетососудистые нарушения, аритмии, анемии, медленное выздоровление после заболеваний. Селен. Роль в организме: защищает организм от вредных веществ и токсинов, стимулирует процессы обмена веществ, усиливает иммунную защиту организма. Основные проявления дефицита селена: дерматиты, экземы, слабый рост, выпадение волос, снижение иммунитета, нарушение функции печени, недостаточность репродуктивной системы, бесплодие, болезни печени, поджелудочной и щитовидной железы, нарушение деятельности сердечно-сосудистой системы, воспалительные заболевания. Хром. Роль в организме: жизненно важный микроэлемент, который является постоянной составной частью клеток всех органов и тканей. Хром регулирует синтез жиров и обмен углеводов, поддерживает нормальный уровень глюкозы и активность инсулина в крови, участвует в регуляции работы сердечной мышцы и функционировании кровеносных сосудов, способствует выведению из организма токсинов, солей тяжелых металлов, радионуклидов.
13
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
Основные проявления дефицита хрома: невралгии, снижение чувствительности конечностей, повышение уровня холестерина в крови, увеличение риска развития атеросклероза, увеличение риска развития сахарного диабета и ишемической болезни сердца, нарушение репродуктивной функции. Йод. Роль в организме: регулирует скорость биохимических реакций, энергии, температуры тела, участвует в регуляции белкового, жирового, минерального и водно-электролитного обмена, принимает участие в росте, развитии организма, входит в состав гормонов щитовидной железы. Основные проявления дефицита йода: увеличение выработки гормонов щитовидной железы, формирование зоба, развитие йододефицитных заболеваний, гипотириоз, отеки конечностей, туловища, повышенное содержание холестерина, брадикардия, запоры. Сотрудниками кафедры терапии разработан современный метод системной диагностики и коррекции обменных процессов, не имеющий аналогов в России и за рубежом, индивидуальный подход к кормлению, повышению продуктивности и поддержания здоровья животных. На основании результатов исследования белкового, углеводного, жирового обмена, ма-
кро- и микроэлементного состава крови и химического исследования мочи (белок, глюкоза, кетоновые тела, рН, кальций, магний фосфор, медь, цинк, кобальт, свинец, кадмий, никель) можно разработать комплекс лечебно-профилактических мероприятий и конкретный состав макро-, микроэлементов и витаминов. Это позволит: 1. Нормализовать в организме животных показатели белкового, углеводного, жирового и минерального обмена. 2. Получить качественное потомство. 3. Профилактировать и лечить заболевания, связанные с минеральной недостаточностью (рахит, артроз, артрит, остеопороз, остеодистрофия, травмы и переломы опорнодвигательнго аппарата), укрепить опорно-двигательный аппарат. 4. Улучшить состояние кожи, шерстного покрова, лечит экземы, дерматиты, аллопеции, депигментации. 5. Лечить и профилактировать заболевания печени (гепатозы), желудочно-кишечного тракта (дисбактериозы), почек (мочекаменная болезнь, нефриты, нефрозы). 6. В экологически неблагополучных регионах снизить токсическое влияние на организм животных избыточного поступления никеля, кадмия, свинца, хрома, мышьяка и железа.
Ветинфо ИМПОРТ СВИНИНЫ В РФ СОКРАЩАЕТСЯ Доля импортной продукции на российском рынке свинины составила 25 %. Эксперты отмечают сокращение импорта свинины в Россию. В 2010 г. доля импорта этого продукта составила 25 %, в то время как в 2008 г. она составляла 32,1 %. В 2011 г. сокращение доли импорта прогнозируется до 22 %. Полностью избавиться от импорта свинины Россия намерена к 2020 г. При этом потребление россиянами свинины с каждым годом растет, отмечает Foodmarkets.ru. В 2010 г. потребление свинины на душу населения составило около 22 кг/чел. Свинину покупают более 90 % россиян. Среди причин отказа от свинины выделяются: вегетарианство, состояние здоровья и религиозные убеждения. Агентство «АгроФакт»
14
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
УДК 619:591.132+636.3.033
ПРОФИЛАКТИКА СУБКЛИНИЧЕСКИХ СБОЕВ ПРОЦЕССОВ МЕТАБОЛИЗМА У МОЛОДНЯКА ОВЕЦ ПРИ ОТГОННО-ПАСТБИЩНОЙ СИСТЕМЕ ОТРАСЛИ* Э. Яникова, младший научный сотрудник лаборатории по изучению болезней незаразной патологии Прикаспийского зонального НИВИ E-mail: Elya_09@mail.ru И. Джамалудинова, д-р биол. наук, профессор, главный научный сотрудник лаборатории по изучению болезней незаразной патологии Прикаспийского зонального НИВИ Н. Мамаев, д-р вет. наук, профессор, научный консультант Прикаспийского зонального НИВИ М. Анаев, канд. вет. наук, ведущий научный сотрудник лаборатории по изучению болезней незаразной патологии Прикаспийского зонального НИВИ Аннотация. Представлены результаты применения биологически активных пробиотиков на профилактику процессов метаболизма в организме молодняка овец. Ключевые слова: молодые овцематки, биохимические показатели, пробиотики.
PREVENTIVE MAINTENANCE OF SUBCLINICAL FAILURES OF PROCESSES OF METABOLISM AT YOUNG SHEEP AT THE RANGE PASTURE SYSTEM OF BRANCH E. Yanikova, I. Dzhamaludinova, N. Mamaev, M. Anaev Summаry. Here are presented the results of application biologically active addition on preventive maintenance of processes of a metabolism in an organism of young sheep. Keywords: young sheep, biochemical parameters, probiotic. * Статья впервые опубликована в нашем журнале в №8/2011.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
15
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
В последнее время исследования ученых направлены на изучение физиолого-биохимических механизмов регуляции процессов метаболизма, позволяющих с наибольшей эффективностью использовать биологический потенциал организма животных. В то же время широкое распространение имеют заболевания, связанные с нарушением обмена веществ и эколого-адаптационной системы [1, 2, 3]. Важное значение придают субклинической (скрытой) недостаточности биоэлементов, когда дефицит их в организме протекает без видимых клинических признаков, и только при биохимических исследованиях выявляют нарушение их баланса в организме. Молодняк плохо растет и развивается, происходит снижение молочной, мясной и шерстной продуктивности, нарушается функция воспроизводства, рождается физиологически незрелый, маложизнеспособный приплод. Поэтому изучение физиолого-биохимического статуса у молодняка овец (молодых овцематок) в разные периоды их физиологического состояния и разработка научно обоснованных мероприятий по профилактике болезней метаболизма с учетом технологии отрасли являются особенно актуальными. В связи с этим важное значение приобретает в условиях Северо-Кавказского региона разработка эффективных способов профилактики патологии обмена веществ, повышение общей неспецифической резистентности молодняка овец с применением высокоэффективных пробиотиков, позволяющих наиболее эффективно использовать потенциал организма животных. Цель работы – определить эффективность биологически активных пробиотиков для профилактики патологических сбоев обменных процессов в организме молодняка овец при отгонно-пастбищном овцеводстве. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Работа выполнена на молодняке овец (молодых овцематок) дагестанской горной породы с учетом их физиологического состояния (до осе-
16
менения, суягность, лактация) в СХК агрофирмы «Шамгода» Гунибского района и в лаборатории патологии обмена веществ ГНУ Прикаспийского зонального НИВИ. Содержание овец – отгонно-пастбищное. Зимние пастбища расположены в Кизилюртовской равнинной зоне, летние – в горной зоне Гунибского района. Данное хозяйство благополучно по заразным заболеваниям. В опыте находились 20 голов молодняка овец, подобранных по принципу аналогов, из которых сформированы две подопытные группы по 10 голов в каждой (контроль/опыт – группы переходящие). Биохимические исследования проведены с использованием современных методов и аппаратуры, в том числе атомной абсорбции, пламенной спектрофотометрии, фотометрии, рефрактометрии и др. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Установлено, что молодняк овец дагестанской горной породы за счет кормов в разные периоды года недостаточно обеспечен многими питательными и биологически активными веществами, в том числе протеином, дефицит которого в осенне-зимнем рационе составлял до 20,5 %, в травах горных летних выпасов – до 7,6 %, сахара – от 9 до 26 % соответственно. Рационы ярок до осеменения, суягных и лактирующих овцематок в разные периоды года не сбалансированы по многим макро- и микроэлементам, в том числе на зимних пастбищах в равнинной зоне выявлен дефицит кальция до 74,5 %, фосфора – 62, натрия – 71, кобальта – 88, меди – 65, марганца – 32, цинка – 14, железа – 8 % при оптимальном уровне калия. В травах горных летних выпасов недостаток кальция составлял 50,4 %, натрия – 68, фосфора – 69, марганца – 42,4, цинка – 35 %, что привело к сбою в общем биохимическом и антиоксидантном статусе организма молодняка и возникновению болезней обмена веществ. В целях профилактики субклинических нарушений процессов метаболизма у молодняка
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
овец разных физиологических состояний, получения здорового приплода разработаны методы оптимизации обменных процессов с применением биологически активных пробиотиков охмопрем-оп и лаксупрем-оп. Опыты проведены в течение 190 дней, из них 10 дней установочных и 180 – учетных (по 60 дней каждого физиологического периода). Биологически активные препараты включали в рацион опытным животным в смеси с комбикормом. Ярки получали основной рацион и пробиотик охмопрем-оп в дозе 12 г на одно животное в сутки; суягные и лактирующие матки – лаксупрем-оп в дозе 17 г. Контрольные животные получали основной рацион. Отмечено положительное действие пробиотиков на общий физиолого-биохимический статус и систему антиоксидантной защиты организма молодняка овец в разные периоды физиологического состояния. Уровень гемоглобина в крови ярок (до осеменения) в опытной группе оказался выше на 5,4 %, сахара – 1,3 %, общего белка – 9,2 %, по сравнению с контролем. Аналогичные результаты получены в опытных группах суягных и лактирующих овцематок, в том числе количество гемоглобина у суягных повысилось на 5 %, лактирующих – 6 %, сахара – 3,1 % и 6,5 %, общего белка – 7 % и 17,1 %. Это свидетельствует об оптимизации процессов метаболизма в организме опытных овцематок в период суягности и лактации, что является весьма важным для нормального эмбрионального развития плода и получения здорового приплода. Нормализовался фосфорно-кальциевый, калие-натриевый обмен у опытных ярочек до осеменения. В то же время концентрация кальция в крови контрольной группы была выше, чем в опытной, на 6,6 %, что свидетельствует о начале остеодистрофических процессов в их организме. Уровень натрия в крови контрольных животных был ниже, чем в опыте, на 14,6 %, магния – 3,6 %. Концентрация фосфора в крови находилась ниже, чем в опытной группе и физиологической нормы, на 29,3 %. Положительные изменения отмечены в обмене макроэлементов
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
у овец подопытных групп в период суягности и лактации. Уровень кальция в крови суягных маток обеих групп находился в пределах физиологической нормы, у лактирующих контрольных животных продолжал оставаться повышенным (на 11,1 %). Количество калия в крови опытного молодняка было оптимальным, а в контроле, особенно у лактирующих, превышало физиологическую норму на 20 %. Следует отметить, что в организме контрольного молодняка овец в условиях отгонно-пастбищного ведения отрасли на протяжении всего физиологического цикла (до осеменения, суягность, лактация) выявлены патологические сбои калие-натриевого, фосфорно-кальциевого и магниевого метаболизма. Концентрация натрия у опытных суягных и лактирующих маток оказалась выше, чем у контрольных, на 13,4 %, магния – 13,1 %, фосфора – у суягных – 51 %, у лактирующих – 18,32 %. Выявлено положительное влияние пробиотиков на уровень микроэлементов в крови молодняка опытных групп. Концентрация меди у опытных ярок, суягных и лактирующих овцематок достигла физиологической нормы, в то же время этот показатель в контрольных группах был ниже на 46,2 %, 48,5 % и 16 % соответственно. В контрольной группе количество меди в крови ярок доходило до 3,66+0,36мкмоль/л, у суягных – 4,13+0,18мкмоль/л, что может служить основанием для возникновения в последующем энзоотической атаксии ягнят. Исследования выявили низкий уровень цинка в крови контрольных групп ярок и молодых овцематок (суягных и лактирующих) на 42,9 %, 50,7 % и 34,5 %, чем опытных, соответственно. Количество марганца в крови у ярок обеих групп оказалось низким, суягных контрольных животных продолжало оставаться ниже нормы, а у опытных – достигло физиологической нормы. У лактирующих контрольных маток этот показатель был ниже, чем у опытных, на 30 %. Анализ полученных результатов свидетельствует, что под влиянием разработанных пробиотиков произошло повышение биологической
17
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
ценности молока, что так необходимо новорожденному приплоду в первые месяцы жизни. При этом наблюдалось повышение лактозы в молоке опытных маток на 20,0 %, общего белка – 13,1 %, по сравнению с контролем. Молоко опытных маток значительно обогатилось и минеральными веществами. Количество кальция в нем повысилось на 23,5 %, магния – 32,0 %, фосфора – 12,7 %, натрия – 26 %, калия – 19 %, никеля – 43,3 %. Уровень меди увеличился на 34,1 %, цинка – на 31,47 %, произошло повышение кобальта и лития при одновременном снижении свинца на 45,5 %, по сравнению с контролем. Разработанный научно обоснованный способ групповой профилактики процессов метаболизма в организме молодняка овец положительно повлиял не только на общий биохимический, антиоксидантный статус, но и на физиологическую зрелость приплода и продуктивность. В опытной группе 3 овцематки принесли двойни и от 10 маток получено 13 ягнят, контрольной – 10. Масса тела полученного приплода в опыте варьировала от 3,3 до 4,1 кг, в среднем составила 3,450 кг; в контрольной – 2–2,1 до 2,500, в среднем – 2,510 кг. В опытной группе отмечен сдвиг пола в пользу ярочек, где получено на 4 ярочки больше, чем в контрольной. Полученный приплод отличался лучшей физиологической зрелостью.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ Исследования выявили высокую эффективность биологически активных пробиотиков на профилактику болезней обмена веществ, получение физиологически зрелого приплода, повышение биологической ценности овечьего молока. Отмечен сдвиг пола в пользу ярочек. ЛИТЕРАТУРА 1. Кондратьев Ю. Н., Аброськина Л. С., Шушлебин В. И., Тимохин Г. Н. Дефицит микроэлементов в кормах Центрально-Черноземной зоны как фактор возникновения незаразных болезней животных и птицы // Биологически активные вещества в профилактике и лечении незаразных болезней животных: сборник научных трудов. – Воронеж, 1988. – С. 24–28. 2. Самохин В. Т. Биологически активные вещества, их значение в профилактике и лечении болезней животных незаразных этиологий // Биологически активные вещества в профилактике и лечении незаразных болезней животных: сборник научных трудов. – Воронеж, 1988. – С. 3–6. 3. Шахов А. Г. и др. Эколого-адаптационная стратегия защиты животных и продуктивности животных в современных условиях / Воронеж: Воронежский государственный университет, 2011. – С. 207.
Ветинфо А ВЫ ЗНАЕТЕ… что пчелы – «индикаторы» при определении степени загрязнения окружающей среды. Так считают сотрудники Института микробиологии Болгарии. В отличие от службы контроля пчелы ежедневно могут брать пробы воздуха, воды и пыли, оседающей на цветы растений в радиусе 3 км, вместе с принесенной в улей пыльцой и нектаром. Человеку остается лишь самое легкое дело – сделать пробам химический анализ.
18
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
УДК 619:616.391
МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ПРОДУКТИВНЫХ ЖИВОТНЫХ В РЕСПУБЛИКЕ БЕЛАРУСЬ, РАЗРАБОТКА МЕРОПРИЯТИЙ ПО ИХ ЛЕЧЕНИЮ И ПРОФИЛАКТИКЕ* А. Курдеко, д-р вет. наук, Ю. Ковалёнок, А. Мацинович, канд. вет. наук, Республика Беларусь, УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» е-mail: selhozizdat@mail.ru Аннотация. Исследования посвящены изучению современного состояния проблемы микроэлементозов продуктивных животных в условиях Республики Беларусь, разработке способов борьбы с ними на основе эффективных методов диагностики, лечения и профилактики данных заболеваний. Установлено, что широта распространения микро-элементозов крупного рогатого скота и свиней в современных условиях промышленного животноводства Республики Беларусь составляет 60–75 %. Основой успешной борьбы с микроэлементозами может явиться широкое внедрение в производство созданных в Республике Беларусь биометаллов. Ключевые слова: микроэлементозы, диагностика, лечение и профилактика, полигипомикроэлементоз, биосубстраты, биометаллы.
MICROELEMENTOSIS OF PRODUCTIVE ANIMAL IN REPUBLIC BELARUS, DEVELOPMENT ACTION UPON THEIR TREATMENT AND PREVENTIVE MAINTENANCE A. Kurdeko, U. Kovalyonok, A. Macinovich Summary. The researches have been dedicated to studying of microelementosis problem in Belarus conditions, working out the struggle measures on a basis of efficacious diagnostics, treatment and prevention methods. It has been found out that the width of cattle and swine microelementosis distribution in the Republic of Belarus is 60–75 %. Resolving the problem can be widespread application into manufacturing of biometals produced in Belarus. Keywords: microelementosis, diagnostics, treatment and preventive maintenance, polyhypomicroelementosis, biosubstrata, biometals. * Статья впервые опубликована в нашем журнале в №8/2011.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
19
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
Государственной программой возрождения и развития села на 2005−2010 гг. определена основная задача для сельского хозяйства Республики Беларусь – производство важнейших продуктов питания для обеспечения потребности населения и поставок на экспорт. При этом главной товарной отраслью сельского хозяйства страны является животноводство. Удельный вес его продукции в общей сумме выручки составляет 80 %, а доходы от реализации молока и мяса крупного рогатого скота – 50 %. На сегодняшний день остановлено снижение производства животноводческой продукции, сохранены животноводческие комплексы и наметилась четкая тенденция роста продуктивности животных. Достигнуты значительные успехи зоотехнической науки – генетический потенциал коров черно-пестрой породы по молочной продуктивности составляет 8,0−8,5 тыс. кг молока от коровы за лактацию, среднесуточный прирост молодняка на откорме – 1200−1300 г, мясных гибридов свиней – 800−850 г. Однако реальное использование данного генетического потенциала составляет 45–55 %. Главной причиной неполного использования потенциала продуктивности животных является недостаточное обеспечение их полноценными кормами. Остается нерешенной одна из краеугольных проблем животноводства – несбалансированность рационов по протеину, сахару и минеральным веществам. При этом, помимо антропогенных источников данной проблемы, существуют и природные. Связано это с тем, что территория Республики Беларусь является биогеохимической провинцией по ряду макро- и микроэлементов. Как следствие, отмечается дисбаланс рационов по минеральному компоненту и массовые болезни животных, протекающие с нарушением обмена веществ, в общем, и с нарушением минерального обмена, в частности. Из-за болезней обмена веществ хозяйства республики ежегодно несут большие прямые потери в виде падежа животных. Кроме этого, у скота с нарушенным
20
обменом веществ невысокая эффективность использования кормов, низкая продуктивность, нарушена воспроизводительная способность, имеются проблемы с получением качественной продукции. Значимо и то, что увеличиваются затраты на обслуживание животных. Немаловажным фактором, препятствующим организации эффективной профилактики и раннего распознавания данных заболеваний, является недостаточное использование лабораторных методов диагностики и их низкая эффективность. Во всех руководствах по микроэлементологии указывается, что микроэлементозы являются хроническими заболеваниями, имеющими субклинический период развития, когда развиваются разнообразные патохимические и патофизиологические нарушения. На стадии явных клинических симптомов эти нарушения являются необратимыми и обусловливают такие последствия, как бесплодие и низкую продуктивность животного. Из вышеизложенного следует, что актуальной задачей для ветеринарной науки и практики является глубокое изучение состояния обмена веществ у животных, распространенности и причин происхождения болезней минерального обмена с целью разработки эффективных мер их диагностики и коррекции. Целью наших исследований явилось изучение современного состояния проблемы микроэлементозов продуктивных животных в условиях Республики Беларусь и разработка способов борьбы с ними на основе эффективных методов диагностики, лечения и профилактики данных заболеваний. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Объектом исследования служили: крупный рогатый скот и свиньи разных половозрастных и физиологических групп в условиях биогеохимических провинций Республики Беларусь; корма для животных; симптомы и лабораторные показатели проявления микроэлемен-
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
тозов, препараты микроэлементов, применяемые для борьбы с микроэлементозами. Предметом исследования явились содержание микроэлементов в кормах и биологическом материале от животных из Белорусских биогеохимических провинций, а также корреляция данных показателей с клиническим проявлением микроэлементозов и другими лабораторными изменениями у больных животных. Определение микроэлементов: цинка, кобальта, меди, марганца, кадмия и свинца проводили в цельной крови на атомно-абсорбционном спектрометре МГА 915 (Россия). Селен и железо определяли в сыворотке крови: селен – флуориметрически с 2,3-диаминонафталином, а железо – с ференом без депротеинизации на автоматическом биохимическом анализаторе Cormey Lumen с наборами производства Cormey (Польша). Гематологические исследования осуществляли на автоматическом биохимическом анализаторе Medonic CA – 620 (Швеция); биохимические − на автоматических биохимических анализаторах Cormey Lumen и EuroLiser (Австрия) с использованием диагностических наборов производства Cormey (Польша) и Randox (Великобритания). Лабораторные исследования крови и кормов выполнены в центральной научно-исследовательской лаборатории УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» (аттестат № BY/11202.1.0.087). РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Исследования проведены в 121 животноводческом хозяйстве Республики Беларусь в период с 2002 по 2007 гг. В результате проведенных исследований во всех 6 административных регионах Республики установлено, что проводимые в животноводческих хозяйствах мероприятия по профилактике минеральных нарушений имеют достаточно низкий эффект. Установлено, что микроэлементозами охвачено 76,9 % поголовья крупного рогатого скота и 60,5 % свиней.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
Более выраженную недостаточность микроэлементов наблюдали у животных зоны Полесья и торфяников. В большинстве хозяйств этой зоны у 80–100 % обследованных животных выявляли субклинический полигипомикроэлементоз. К регионам с повышенным риском возникновения полигипомикроэлементоза среди крупного рогатого скота следует отнести Витебский район и прилегающие, характеризующиеся залежами доломита; Солигорский район с интенсивной добычей калийных руд и южные районы Гомельской области, загрязненные выбросами при аварии на ЧАЭС. В регионах Республики, характеризующихся возвышенным рельефом, интенсивность проявления микроэлементной недостаточности у крупного рогатого скота составляла 50–70 % от обследованных животных. Нозологический профиль микроэлементозов в скотоводческих хозяйствах Республики в целом положительно коррелирует с содержанием микроэлементов в кормах. Так, гипокобальтоз выявлен у 70,6 % животных; недостаточность йода – у 71,6; недостаточность селена – у 52,9; гипокупроз – у 44,9; паракератоз – у 30,1; недостаточность марганца – у 8,9; недостаточность железа – у 4,9 %. Нозологический профиль микроэлементозов в свиноводческих хозяйствах в большей мере связан с дефицитом цинка и селена. В 90,2 % случаев микроэлементозов (75,8 % − от всех обследованных животных) – различные их виды протекали сочетанно. Наиболее весомые сочетания установленных недостаточностей это – Со+I (82,3 % от обследованных) животных; Со+I+Se (36,7 % – патология, более характерная для молодняка до 6-месячного возраста); Cu+Zn – сочетанная недостаточность, более характерная для животных, получающих однотипное кормление местными травяными кормами, особенно силосованными. В опытах установлено, что в возникновении и тяжести течения полигипомикроэлементозов в условиях Республики Беларусь определенное значение имеют особенности принятой
21
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
технологии выращивания животных: продуктивность, породность, тип кормления и др. Исследования показали, что основные рационы для крупного рогатого скота содержат кобальта менее 0,150 мг/кг сухого вещества в 88,9 % проб; йода – менее 0,080 мг/кг сухого вещества в 85,7 % проб; селена – менее 0,100 мг/кг сухого вещества в 85,7 % проб; меди – менее 3 мг/кг сухого вещества в 15,7 % проб; цинка – менее 3 мг/кг сухого вещества в 15,7 % проб; марганца – более 60 мг/кг сухого вещества в 19,5 % проб; железа – более 150 мг/кг сухого вещества в 100 % проб; кадмия – более 0,3 мг/кг сухого вещества в 6,3 % проб; свинца – более 1,5 мг/кг сухого вещества в 14,5 % проб; меди – более 20 мг/кг сухого вещества в 10,5 % проб. Опыты, проведенные в 62 скотоводческих хозяйствах Республики Беларусь в период с 2002 по 2006 гг., показали, что в основе суждения о микроэлементной обеспеченности кормов лежит процесс определения концентрации того или иного элемента по справочным таблицам, или экстраполируются данные более ранних исследований. Нами были сопоставлены расчеты содержания микроэлементов, основанные на данном принципе и проведенных лабораторных исследованиях. В результате в 57 % случаев получены значительные (более чем на 25 %) различия. При этом избыток микроэлементов не обнаруживается в таком случае вообще. Точная диагностика полимикроэлементозов возможна только на основании определения микроэлементов в биосубстратах животных. С их помощью выявляется объективный (патогномоничный) симптом, который зачастую является единственным, указывающий обмен какого микроэлемента нарушен. Проблемой организации лабораторных исследований в Республике Беларусь при микроэлементозах является то, что используемые методы достаточно трудоемки из-за необходимости предварительной многочасовой пробоподготовки, недостаточно чувствительны и селективны. Данные методы преимущественно фотометрические, требующие «сухой» минерализации и
22
использования значительных количеств тканей. Стандартизированных методик количественного определения таких элементов, как Cd, Pb, Сr и Ni, не предложено вообще. Наиболее перспективными в настоящее время в медицине и ветеринарии считаются методы пламенной (атомно-эмиссионной) и атомно-абсорбционной спектрофотометрии (ААС), отличающиеся высокой чувствительностью и возможностью определения очень низких концентраций микроэлементов в биосубстратах. Эти методы в настоящее время наиболее широко применяются при исследовании кормов, премиксов и различных минеральных добавок и менее – при анализе биологических субстратов в ветеринарии. В последнее время все более широкое распространение в научных исследованиях получают и считаются весьма эффективными методы определения элементов в органах, биосредах человека и животных с помощью атомной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (АЭС-ИСП) и масс-спектроскопии (ИСП-МС), нейтронного активационного анализа, которые позволяют в одной пробе одновременно определить 20 элементов и более. Неспецифическими симптомами различных микроэлементозов, согласно наших данных [1], являются изменения в состоянии свободнорадикального окисления в организме и нарастающий эндотоксикоз. Это − звено патогенеза, которое мы выявляли при всех наблюдаемых нами микроэлементозах у крупного рогатого скота в условиях Республики Беларусь. Вне зависимости от вида микроэлементоза и длительности развития патологического процесса происходит накопление как первичных, так и вторичных продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ). Появление коррелятивно связанного с накоплением продуктов ПОЛ роста концентрации средних молекулярных веществ (СМВ) является признаком, свидетельствующим о глубоких патохимических нарушениях и переходе заболевания в стадию, сопровождающуюся органическими нарушениями.
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
Изменения в биохимическом статусе у больных микроэлементозами животных многочисленны и не могут быть прямыми диагностическими критериями. Они могут быть использованы как критерии оценки тяжести заболевания и выбора симптоматических средств лечения. В связи с вышеизложенным совершенно очевидно, что для восполнения тех или иных дефицитных микроэлементов в организме животных соответствующий элемент необходимо вносить извне. На сегодняшний день все микроэлементсодержащие препараты принято подразделять по химической структуре на органические, неорганические и хелатные. Органические соединения микроэлементов тяжелых металлов с лечебно-профилактической целью применяются в животноводстве очень редко. Всасываемость их из желудочнокишечного тракта невелика. В большинстве случаев эти соединения не растворимы в воде и не проникают через кишечную стенку. Традиционно недостаток микроэлементов в рационе принято компенсировать введением их в неорганической форме (сульфаты, хлориды, оксиды, карбонаты). Известно [2], что неорганические формы биогенных элементов являются достаточно «агрессивными» и несовместимыми, в ряде случаев, между собой. Микроэлементы в виде неорганических солей плохо усваиваются жвачными из-за рубцовой микрофлоры, которая переводит большее их количество в нерастворимую и неусвояемую форму. Одна из самых больших проблем в доступности солей микроэлементов – их взаимодействие друг с другом и компонентами рациона в кишечнике. Поскольку они используют один механизм поступления в организм, между ними на местах всасывания начинается конкуренция. Кроме того, избыток одного элемента (например, меди) ведет к недостаточному всасыванию другого (например, цинка). Микроэлементы могут взаимодействовать с макроэлементами и их соединениями (например, сера, фитиновая кислота, кальций), обра-
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
зуя нерастворимые комплексы, не усвояемые в кишечнике. В природных кормах биогенные микроэлементы связаны с белками, аминокислотами, то есть находятся в составе органических соединений, определяющих судьбу метаболизма их в живом организме. В структуре органических соединений активность микроэлементов в организме животных значительно возрастает по сравнению с ионным состоянием. В настоящее время отмечен особый интерес к лечению животных и профилактике многих гипомикроэлементозов с помощью микроэлементных препаратов, в которых жизненно необходимые микроэлементы содержатся в виде комплекса с биолигандами, веществами, сходными с природными носителями микроэлементов [2]. Преследуя цель создания ветеринарных препаратов, в которых жизненно необходимые элементы содержатся в виде комплекса с веществами, подобными природным носителям микроэлементов, совместный коллектив ученых УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» с НИУ «Институт прикладных физических проблем им. А. Н. Севченко» Белорусского государственного университета разработал 4 новых ветеринарных препарата. Данные лекарства представляют собой хелатные соединения таких микроэлементов, как железо, кобальт, медь и цинк с этилендиаминтетрацетатом (ЭДТА), получившие коммерческие названия, соответственно – ФЕРАВЕТ, КОБАЛЬВЕТ, КУПРОВЕТ и ЦИНКОВЕТ. Полученные препараты подвергнуты испытаниям, предъявляемым Ветбиофармсоветом и Белорусским государственным ветеринарным центром по контролю, испытаниям и стандартизации ветеринарных препаратов и кормовых добавок Республики Беларусь. Опыты по изучению острой и подострой токсичности проводили методом скользящих доз. Подбирали по 3 животных в возрасте 50−55 дней средней массой около 10 кг для каждого
23
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
испытываемого препарата, которые задавали внутрь. Через 7 дней повторяли обработку тем же способом, увеличивая дозу в 2 раза, пока не наступили клинические признаки отравления. Исходные дозы для обработок животных подбирали на основании ЛД50 препарата для белых мышей. Максимальную дозу, которая не вызывала отравления, считали пороговой. Результаты проведенных экспериментальных исследований и статистической обработки полученных результатов показали, что пороговые дозы препаратов следующие (из расчета чистого элемента): Купровет – 13,85 мг/кг, Феравет – 112, Цинковет – 151, Кобальвет – 73,14 мг/кг, что по классификации химических веществ ГОСТ 12.1.007 позволяет отнести их к четвертому классу опасности (малоопасные). ВЫВОДЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ ПОСЛЕДУЮЩИХ ИССЛЕДОВАНИЙ Таким образом, микроэлементозы крупного рогатого скота и свиней широко распространены в современных условиях промышленного животноводства Республики Беларусь.
Важная роль в широком распространении данных заболеваний принадлежит недостаткам в организации ранней диагностики. Повышение эффективности диагностических мероприятий наиболее целесообразно проводить за счет внедрения комплексной схемы, сочетающей определение микроэлементов в кормах и крови животных, с дополнительными тестами, такими как определение продуктов ПОЛ. Основой успешной борьбы с микроэлементозами может явиться развитие производства созданных в Республике Беларусь биометаллов. ЛИТЕРАТУРА 1. Абрамов С. С. Изменение оксидантнопрооксидантной системы в организме телят, больных диспепсией, и в процессе их комплексного лечения/ С. С. Абрамов, Ю. К. Ковалёнок, Л. Н. Кирпичёнок // НТИ и рынок. – 1998. – № 6. – С. 38–40. 2. Бушов А. В. Эффективность хелатокомплексных препаратов меди и калия йодида при железодефицитной анемии поросят / А. В. Бушов, О. А. Липатова, О. Ф. Денисова // Ветеринария. – 2004. – № 11. – С. 46−50.
Ветинфо В КРУПНЕЙШЕМ СВИНОВОДЧЕСКОМ РЕГИОНЕ РОССИИ НАШЛИ СИБИРСКУЮ ЯЗВУ Белгородская межобластная ветеринарная лаборатория при исследовании материала от вынужденно забитой свиньи из личного подворья в селе Глотово получила положительный результат на сибирскую язву, сообщил Россельхознадзор. В связи с этим на населенный пункт наложены карантинные ограничения, проводятся мероприятия против сибирской язвы. Неотложные меры по предотвращению распространения инфекции принимаются и в области в целом. В угрожаемой двухкилометровой зоне в настоящее время находится 292 головы свиней. По состоянию падежа животных не зарегистрировано. В карантинной зоне ведется непрерывный мониторинг обстановки, проводится комплекс плановых противоэпизоотических мероприятий. В Белгородской области сосредоточена треть всего промышленного свиноводства России. Сибирская язва является острым инфекционным заболеванием животных и человека. Споры возбудителя могут сохраняться в почве длительное время и выдерживать кипячение до одного часа. Для человека основным источником инфекции являются больные животные, их шкуры или шерсть. http://www.vetobzor.ru
24
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
УДК 638:987.72;637.046
СОДЕРЖАНИЕ МИКРОЭЛЕМЕНТОВ В ОБЪЕКТАХ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ И ОРГАНИЗМЕ ЖИВОТНЫХ, ПРИНАДЛЕЖАЩИХ ХОЗЯЙСТВАМ СТЕПНОЙ ЗОНЫ ЮЖНОГО УРАЛА* О. Василенко, канд. вет. наук
Уделено внимание характеристике загрязненности внешней среды хозяйства тяжелыми металлами и влиянию аномального содержания микроэлементов на общее клиническое состояние, гематологические и биохимические показатели крови животных, пищевую ценность молока. В зоне Южного Урала, в связи со сложным геологическим строением земной коры, проблема микроэлементозов имеет особенно большое значение. Поступление микроэлементов животным из почвообразующих пород через почвы, воды, растения составляет биогеохимическую пищевую цепь. Проведено много исследований, показавших, что потребность в микроэлементах одного и того же вида животных очень сильно колеблется по зонам. Это дает основание считать, что в процессе эволюции организм животных, обитающих в той или иной биогеохимической провинции, приспосабливался к дефициту или избытку микроэлементов в почвах, водоисточниках, растениях – у них отмечалось только понижение продуктивности. У другой части животных, кроме того, возникали своеобразные эндемические заболевания, которые получили название микроэлементозы.
Установление связей между химическими элементами среды и организмами в условиях различных биогеохимических провинций является основой для разработки зональных проблем гигиены питания человека и животных, так как состав пищи, содержание химических элементов в продуктах питания определяется наличием их в растительных и животных организмах, от которых получаются эти продукты в виде мяса, молока, яиц, рыбы, хлеба и т. д. В связи с этим мы должны изучать состав продуктов питания и соответствие их санитарным требованиям. Для установления фона содержания микроэлементов в объектах внешней среды и организме животных исследовали почву, корма, воду, а также кровь от телят, и кровь, и молоко от коров, принадлежащих хозяйствам степной зоны Южного Урала. Установлено, что содержание микроэлементов в почве и кормах, относительно нор-
* Статья впервые опубликована в нашем журнале в №8/2011.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
25
ТЕМА НОМЕРА: МИКРОЭЛЕМЕНТОЗЫ ЖИВОТНЫХ
мы, недостаточное: меди, в среднем, в пробе кормов составило – 1,5 мг/кг, при норме 10–12 мг/кг; в почве – 12 мг/кг, при среднем содержании 20 мг/кг; цинка в кормах – 5,5 мг/кг, при норме 60–80 мг/кг; в почве соответственно 51 и 50 мг/кг; железа в кормах – в 2–2,5 раза, в почве – более чем в 5 раз превышает среднее содержание; марганца в кормах – в 10 раз, а в почве – в 1,5 раза ниже средних показателей; количество свинца, никеля, кадмия, стронция, кобальта в кормах не превышает МДУ (Максимально допустимый уровень), в почве – выше среднего содержания, но не превышают ПДК (Предельно допустимая концентрация). В воде отмечено низкое содержание меди, цинка, свинца, железа и кобальта, однако концентрация марганца в 7 раз выше ПДК. При исследовании крови телят 1,5–2- и 6-тимесячного возраста установлено, что концентрация меди, цинка в 2–3 раза, железа в 30 раз ниже нормативных показателей. У лактирующих коров, кроме этого, отмечена тесная взаимосвязь между уровнем микроэлементов в организме и содержанием их в молоке. Проведенные исследования позволили установить, что у большинства обследованных молочных коров содержание меди и цинка в крови находится в пределах оптимальных величин, концентрация железа в 2 раза ниже, а марганца и кобальта – в 2 и более раз превышает их, одновременно отмечено наличие свинца, никеля и стронция, что в норме не наблюдается.
Содержание меди, цинка, никеля, кобальта в молоке коров не превышает ПДК, количество железа превышает ПДК в 3,3 раза, марганца – в 2 раза, а также наблюдается наличие свинца и кадмия. Приведенные данные показывают, что у сельскохозяйственных животных степной зоны Южного Урала, получающих недостаточное количество элементов для полноценного функционирования организма, происходят серьезные нарушения обмена веществ. Клинически эти изменения не всегда выражены и выявить их обычными исследованиями трудно. Поэтому для диагностики и лечения таких заболеваний необходимы специальные методы исследования и фармакологическая коррекция. ЛИТЕРАТУРА 1. Грибовский Г. П. Научное обоснование комплекса мероприятий по снижению аномального содержания микроэлементов в организме животных и санитарное качество продуктов животноводства в биогеохимических провинциях Южного Урала: диссерт. на соиск. уч. степени докт. вет. наук. – М., 1996. – С. 46. 2. Рабинович М. И. и др. Экологические проблемы животноводства и качества продукции: материалы международной конференции (1 – 2 окт., 1986 г. Троицк) / УГИВМ. – 1996.: Загрязненность экологических систем токсикантами и актуальные вопросы современной фармакологии и токсикологии. Подготовка кадров. – С. 28–29.
Ветинфо ТОЧЕЧНЫЕ РАЗРЫВЫ ХРОМОСОМ У СОБАК СВЯЗАНЫ С РАКОМ Исследователи Университета штата Северная Каролина обнаружили доказательства того, что эволюционные «точечные разрывы» на собачьих хромосомах также связаны с раком собак. Обозначение этих «хрупких» частей у собак также имеет большое значение для обнаружения и лечения рака у человека.
26
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
УДК 619:616.98:578.852.13
C. DIFFICILE АССОЦИИРОВАННАЯ ДИАРЕЯ (CDAD) И ПСЕВДОМЕМБРАНОЗНЫЙ КОЛИТ У ЖИВОТНЫХ* Е. Павлова, Д. Скородумов, Р. Корнелаева, e-mail: selhozizdat@mail.ru Аннотация. Особое значение при пищевых отравлениях и острых клостридиальных кишечных инфекциях имеет Clostridium difficile. Случаи заболевания CDAD зарегистрированы во многих странах мира и у различных видов животных. C. difficile часто обнаруживают в окружающей среде, может быть изолирована из почвы, кишечного тракта человека и многих видов животных. Ключевые слова: клостридии, диарея, псевдомембранозный колит, штаммы, эндотоксин, патогенные, антибиотикотерапия, цитотоксин, бактериологический метод.
C.DIFFICILE ASSOCIATED DIARRHOEIA (CDAD) AND PSEUDOMEMBRANOUS COLITIS AT ANIMALS E. Pavlova, D. Skorodumov, R. Kornelaeva Summary. Special value at food poisonings and sharp Clostridia enteric infections has Clostridium difficile. Cases of disease CDAD are registered in many countries of the world and at various kinds of animals. C. difficile often finds out in environment, can be isolated from soil, an intestinal path of the person and many kinds of animals. Keywords: Clostridia, a diarrhoeia, pseu-domembranous colitis, strains, endotoxin, pathogenic, antibiotic therapy, Cytotoxin, bacteriological method. Более 30 видов клостридий относят к патогенным для животных и человека, из них 8 видов обуславливают развитие самостоятельных нозологических форм. При пищевых клостридиозах и острых клостридиальных кишечных инфекциях особое значение имеют: Clostridium perfringens, вызывающий пищевую токсикоинфекцию и некротический энтерит, и Clostridium
difficile – возбудитель диарей и псевдомембранозного колита. Многочисленные исследования показывают, что случаи заболевания CDAD зарегистрированы во многих странах мира у различных видов животных и человека и в большинстве случаев связаны с применением антибиотиков. Clostridium difficile часто обнаруживаются в
* Статья впервые опубликована в нашем журнале в №3/2010.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
27
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
окружающей среде и могут быть изолированы из почвы, могут быть обнаружены в кишечном тракте человека и многих видов животных, включая домашних, сельскохозяйственных животных и животных дикой природы [7, 9, 12]. A. Saif и J. S. Brazier в 1996 г. изучили распространение C. difficile в Великобритании в пробах воды, почвы, на поверхности овощей и фруктов. Из 2580 исследованных проб было выделено 184 (7,1 %) штамма, из них патогенными оказались 76 %. Высокая частота выделения отмечалась из проб воды 4 рек (87,5 %). Положительными были 87,5 % проб воды рек, 50 % проб воды из плавательных бассейнов, 44 % проб морской воды, 46 % проб озерной воды, при этом 90 % выделенных штаммов вырабатывали энтеротоксин C. difficile. 21 % образцов почвы были положительными, однако среди них всего в 40,9 % штаммов выделяли энтеротоксин. Большинство штаммов из проб, отобранных на территории больниц и вокруг ветклиник, были патогенными (94,7 %). Из смывов с овощей и фруктов C. difficile выделялась в 2,3 % проб, из них 71,4 % штаммов были патогенные. C. difficile достаточно часто выделяют из фекалий домашних животных, включая лошадей, свиней, собак, кроликов, кошек и страусов (Frazier и др., 1993; Perkins и др., 1995; Songer и др., 2000; Jones, 2000; Barbut & Petit, 2001; Weese и др., 2001; Марки и др., 2002). В фекалиях собак и кошек C. difficile выявляют у 6–40 % животных, у лошадей 2–29 % (Perrin и др., 1993; Weese и др., 2001). D. Hunter в 1981 г. впервые выделил C. difficile от коз после лечения стрептомицином. В 1983 г. J. L. Orchard и др. обнаружли C. difficile и ее токсины в фекалиях белого медведя после лечения канамицином и тетрациклином. На восьмой день появилась кровавая диарея с жидкими фекалиями. После отмены антибиотикотерапии диарея прекратилась. У собак случаи хронической диареи описали в 1986 г. А. Р. Berry и P. N. Levett, а острой антибиотико-ассоциированной диареи – A. Kroth в 1989 г. При исследовании собак с диарейными
28
расстройствами с помощью ПЦР A. L. Struble выявил C. difficile у 16,6 % собак. В 1987 г. R. L. Jones высказал предположение, что одной из возможных причин диареи у жеребят является C. difficile. При исследовании 47 жеребят, не получавших антибиотики, ученые изолировали 27 штаммов C. difficile (65 %), оказывавших цитотоксическое действие на культуру клеток. При этом в пробах от 18 жеребят и 62 взрослых лошадей без диарейных расстройств микроорганизм не был обнаружен. Заболевание протекало в двух формах – в форме легкой водянистой диареи и в форме геморрагического некротического энтероколита, заканчивавшегося смертью животного в течение 24 часов. Вспышку CDAD у взрослых лошадей в 1995 г. описал B. R. Madewell. При исследовании проб фекалий у 9 из 10 лошадей с острой формой диареи в реакции латекс-агглютинации и ПЦР были выявлены токсигенные штаммы C. difficile. CDAD у лошадей иногда регистрируется в ассоциации с другими возбудителями (C. perfringens, Salmonella spp). Как правило, у взрослых лошадей болезнь протекает в более легкой форме (водянистая диарея), чем у жеребят (некрогеморрагический энтероколит). А. Ю. Финогенов с соавторами [5], в 2004 г. исследовали бактериологические пробы фекалий от животных с клиническими признаками диареи: от собак –151 проба, от лошадей – 106 проб, от кошек – 63 пробы. Наибольшее число штаммов C. difficile было выделено от собак – 6 штаммов (4,0 %). Всех собак ранее лечили с применением антибиотиков. В развитых странах C. difficile является причиной 15–25 % диарей у взрослых людей, связанных с госпитальной инфекцией после антибиотикотерапии. В настоящее время условно выделяют 2 основные клинические формы инфекции Clostridium difficile: – C. difficile ассоциированная диарея, заболеванию присвоена самостоятельная нозологическая единица – CDAD;
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
– клостридиозный псевдомембранозный колит – ПМК. Классы антибиотиков, прием которых наиболее часто связан с развитием диареи, ассоциированной с Clostridium difficile: клиндамицин, цефалоспорины и пенициллины [11]. СВОЙСТВА ВОЗБУДИТЕЛЯ Clostridium difficile был впервые выделен в 1935 г. Холлом и О`Тулом, которые и предложили название difficile из-за сложности его выделения. C. difficile – грамположительная спорообразующая облигатно анаэробная бактерия, имеющая вид тонких палочек (0,4–0,6 х x 6–8 мкм), характерных также и для C. tetani, C. botulinum, С. histolyticum. Бактерии подвижны за счет жгутиков. Факторами патогенности являются экзотоксины, вызывающие цитопатогенный и энтеротоксический эффекты. Споры C. difficile устойчивы к воздействию физических и химических факторов, благодаря чему возбудитель способен длительное время выживать во внешней среде. Некоторые штаммы образуют тонкую капсулу, другие – структуры, подобные фимбриям. С. difficile ферментирует глюкозу, ксилозу, манит, мелезитозу, салицин с образованием кислоты и газа, не сбраживает лактозу, мальто-
зу, раффинозу, гидролизует эскулин и желатин с газообразованием, не обладает липазной, лецитиназной, индолообразующей, уреазной и нитратредуцирующей активностью. C. difficile пептонизируют молоко медленно или не пептонизируют совсем. Большинство патогенных клостридий обладает сульфидредуциующими свойствами при росте на среде Вильсона-Блэра, на которой они образуют колонии черного цвета с почернением среды вокруг них. C. difficile могут не вызывать почернение. Бактерии видов C. difficile не вызывают гемолиза на кровяном сахарном агаре, хотя большинство видов патогенных клостридий образуют зоны гемолиза (колонии С. perfringens нередко окружены двумя зонами гемолиза, образующимися под действием гетерогенных гемолизинов). Токсигенные штаммы Clostridium difficile обладают способностью продуцировать крупномолекулярные белковые экзотоксины, среди которых идентифицированы обусловливающие кровоизлияния, повреждающие кишечную стенку летальный энтеротоксин (токсин А) и цитотоксин (токсин В) [7, 11, 16]. Два главных токсина, А и В, разрушают 63 % аминокислотных последовательностей и воздействуют на GTP-связывающие протеины (они принадлежат к большому семейству протеинов, связывающих нуклеотид гуанина, которые соединены со многими мебранными рецепторами и участвуют в развитии ряда болезней). Токсин В примерно в 1000 раз более цитоксич-
Бактерии С. difficile при световой и электронной микроскопии
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
29
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
ный, чем токсин А [8]. Токсин А также является энтеротоксином, в связи с чем он ослабляет тесную связь эпителиальных клеток, выстилающих толстую кишку, что способствует проникновению токсина В внутрь эпителиальных клеток. Некоторые штаммы продуцируют также двойной токсин, но его роль в развитии заболеваний точно неизвестна [9]. Установлено, что токсин А, стимулируя гуанилатциклазу, повышает секрецию жидкости в просвет кишечника и способствует развитию диареи. В патогенезе болезни играют роль оба токсина, однако в начальный период заболевания большая роль принадлежит токсину А. Оба токсина разрушают клеточные мембраны, микрофилярии и синтез протеина, но при отсутствии токсина А токсин В не действует на неповрежденную слизистую оболочку. Также к факторам патогенности можно отнести белок, угнетающий перестальтику кишечника, и токсический фактор, обладающий АДФрибозилтрансферазной активностью. Способность к токсинообразованию зависит от генов tcdA, кодирующих синтез токсина А, и tcd B кодирующего синтез токсина В, находящиеся в локусе патогенности PaLoc. Более 10 процентов генома клостридиум диффициле состоит из мобильных элементов. Это позволяет бактерии активно «обмениваться» генетическим материалом с близкими к ней по составу бактериями, приобретая при этом новые свойства, позволяющие противостоять воздействию антибиотиков. В то же время установлено, что половина генов клостридиум диффициле не встречается у ее «соседей» других представителей рода клостридий – возбудителей ботулизма, газовой гангрены и столбняка. При этом они не обладают и той способностью к мобильности элементов, которой отличается клостридиум диффициле. Бактерия способна, превращаясь в споры и получая мощную защитную оболочку, предохраняться от большинства существующих дезинфекционных средств. Clostridium difficile вырабатывает также ряд ферментов: гиалуро-
30
нидазу, коллагеназу, протеазы, хондроитин4-сульфатазу и др. (9) и адгезин Cwp66, кодируемый соответствующим геном, который играет основную роль при начале инфекции. Споры Clostridium difficile проявляют высокую устойчивость к факторам внешней среды и стандартным дезсредствам, а вегетативные формы резистентны к большинству антибиотиков (природные и полусинтетические пенициллины, ингибитор – защищенные пенициллины, цефалоспорины, линкозамиды и др.) [5, 7, 11, 14]. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА Бактериологический метод применяется для выделения микроорганизма и оценки его токсигенности in vitro. В лаборатории наиболее надежным способом подтверждения диагноза является обнаружение токсина в фекалиях больных. Материалом для исследования служат образцы свежего кала в количестве 10–20 г. C. difficile – один из наиболее чувствительных к кислороду из клинических анаэробов, и должны быть приняты меры предосторожности в целях обеспечения надлежащей анаэробной транспортировки образцов в пластиковых одноразовых контейнерах в анаэробных условиях и использования абсолютно анаэробных условий для культивирования. Допускается хранение образцов кала до 2 сут. в холодильнике. Для выделения C. difficile используется питательная среда CCFA на основе яичного желтка и содержащая в качестве селективных компонентов циклосерин и цефокситин, подавляющие рост других микроорганизмов, а также фруктозу. Данная среда является одновременно селективной и дифференциально-диагностической и позволяет определить C. difficile в исследуемом материале при условии, что количество микробных клеток не менее 6 млрд в 1 г фекалий. Как и для большинства клостридий, рост C. difficile на агаре сопровождается образованием характерного запаха, описываемого как запах лошадиного помета. Жидкие фекалии вносятся непосредственно в CCFA.
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
Таблица 1 Состав
Содержание, г / л
Пептон
40,0
Натрия гидрофосфат
5,0
Калия дигидрофосфат
1,0
Магния сульфат
0,1
Калия хлорид
2,0
Фруктоза
6,0
Агар
15,0
рН 7,4 + 0,2
После 24–48 часов анаэробной инкубации образуются бело-желтые колонии диаметром 2–4 мм, плоские, округлой или неправильной формы с ризоидными краями, матовые, не образующие зону гемолиза. Для выделения C. difficile применяется также питательная среда Clostridium difficile agar base (клостридиум диффициле агар) (табл. 1). Для получения селективных свойств вносят дополнительные компоненты: D-цик-лосерин
125 мг/фл. (250 мг/л среды), Цефоксин 4 мг/фл. (8 мг/л среды) и дефибринированную лошадиную кровь –7 %. С успехом используют для культивирования C. difficile среду CDMN – агар с моксалактамом и норфлоксацином. Обнаружено, что эта среда является значительно более продуктивной, чем CCFA. Включение в ее состав гидрохлорида цистеина ускоряет рост C. difficile. Бохимические свойТаблица 2
Состав
Содержание
Цистеина гидрохлорид
250,0 мг / фл. (500,0 / л среды)
Норфлоксацин
6,0 мг / фл. (12,0 / л среды)
Моксалактам
16,0 мг / фл. (32,0 / л среды)
Дефибринированная лошадиная кровь
7%
Колонии C. difficile на клостридиум диффициле агаре с кровью и на CCFA
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
31
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
ства клостридий определяют посевом на дифференциальные среды и в коммерческих тестсистемах типа API 20. Для оценки токсигенности выделенной культуры отбирают около 5 колоний, которые выращивают на сердечно-мозговом бульоне при 37 °С в течение 24 ч и исследуют на цитотоксический эффект. Цитопатогенный тест – исследование на культуре тканей (tissue culture assay) для обнаружения токсина В считается «золотым стандартом» для лабораторной диагностики, однако этот метод является длительным (28– 48 ч) и трудоемким. Рекомендуется использовать сочетание бактериологического исследования и нейтрализации токсина на культуре фибробластвов. Для постановки используют микропланшеты с культурой клеток определенной линии, специфический антитоксин, буфер и другие реактивы. После центрифугирования фекалий надосадочную жидкость смешивают с буфером, добавляют к культуре клеток и инкубируют. Параллельно ее инкубируют в культуре клеток с добавлением антитоксина. При положительном результате цитотоксический эффект регистрируется по изменению формы клеток в лунках без антитоксина, которое отсутствует в лунках с антитоксином. В настоящее время широко используется обнаружение C. difficile токсинов с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). ИФА позволяет за 2–4 ч определить токсин А или токсины A и Б одновременно. Хотя эти тесты имеют хорошую чувствительность и специфичность у людей, они не так хороши для животных. ИФА в одиночку не имеет большой диагностической пользы потому, что он обнаруживает также и не токсигенные и непатогенные штаммы. ИФА, определяющая глутаматдегидрогеназу, дает более быстрый ориентировочный ответ уже через 15–20 мин. В реакции латекс-агглютинации определяется глутаматдегидрогеназа, что позволяет получить ответ через 30 мин., но из-за низкой чувствительности и специфичности она ис-
32
пользуется только для экспресс-диагностики. Фермент глутамат дегидрогеназы (GDH), который часто называют общим антигеном, продуцируют все штаммы C. difficile, в том числе токсигенные и не токсигенные штаммы. Это оказалось хорошим маркером для присутствия C. difficile и является основой для методов быстрого обнаружения. Молекулярный тест (ПЦР) для обнаружения генов, кодирующих токсины C. difficile, в настоящее время оценивается как более быстрый и чувствительный тест. Для определения токсигенных штаммов применяется метод амплификации специфических участков генома возбудителя, кодирующих токсины. Эти тесты дают ответ через 2–4 ч. ПРОФИЛАКТИКА Основой профилактических мер является рациональная антибиотикотерапия и ранняя диагностика. Рекомендуется весь комплекс мер для предупреждения инфекций с фекально-оральным механизмом передачи. Профилактика предусматривает изолированное содержание больных лошадей, запрет на использование одних и тех же пастбищ. Навоз от лошадей с CDI не должен присутствовать на пастбищах, поскольку споры могут выживать длительные периоды времени. Неясна эффективность компостирования в отношении спор, поскольку они очень термостойки. Собак на территории лечебных учреждений не должны кормить пациенты. Пробиотики вероятно эффективны для предотвращения повторного развития диареи, ассоциированной с Clostridium difficile, но доказательства их эффективности для первичной профилактики сомнительны [18]. Отмечалось успешное применение вакцин у животных против токсина Clostridium difficile. Во Франции и Великобритании ведутся научные разработки вакцины против Clostridium difficile. При создании вакцины используется метод создания бактериальных анатоксинов, так же как при создании АКДС-вакцины.
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
Тестирование новых лечебных и профилактических препаратов проводится на хомячках, у которых проявляется весь спектр симптомов, включая диарею («мокрый хвост») и патологические изменения толстой кишки (ПМК) после заражения C. difficile. ЛЕЧЕНИЕ ЖИВОТНЫХ Лечение можно разделить на: – терапию животных с диареей, ассоци-ированной с Clostridium difficile; – меры по предотвращению заражения других животных. Лечение диареи, ассоциированной с Clostridium difficile, включает: – поддерживающую терапию (адекватное жидкостное и электролитное замещение); – по возможности отмену текущей антибиотикотерапии; – антибиотикотерапию для эрадикации Clostridium difficile. Прежде всего необходимо прекратить антибиотикотерапию, с которой связано развитие псевдомембранозного колита, а также восстановить потери жидкости и электролитов. Если в фекалиях выявляется позитивная культура, но отсутствует токсин, лечение следует начинать лишь при стойком подозрении на диарею, ассоциированную с Clostridium difficile, и наличии системных проявлений у животного. Это объясняется возможностью случайной находки Clostridium difficile в фекалиях, а этиология диареи может быть совершенно другая. На начальном этапе необходимо применять высокие дозы ванкомицина. Возможно применение метронидазола (10–15 мг / кг) для лечения собак и кошек. Возможно внутривенное введение метронидазола (15 мг / кг), если животное не может принимать лекарства орально. Не выявлена устойчивость к метронидазолу при C. difficile инфекций кошек и собак. В некоторых случаях лошадей лечат без дополнительных антибиотиков. Однако в более тяжелых случаях требуются большие объемы
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
жидкости внутривенно, анти-воспалительные препараты и даже переливание плазмы. Состояние некоторых лошадей с CDI ухудшается настолько быстро, что они могут умереть в течение 24 часов после первых признаков болезни. САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ПРОДУКТОВ УБОЯ ЖИВОТНЫХ, ИНФИЦИРОВАННЫХ C. DIFFICILE Предполагают, что домашние животные могут быть потенциальным источником возбудителя инфекции для людей (Borriello и др., 1983), но исследований относительно возможности межвидовой передачи этого микроорганизма пока недостаточно. В этой связи представляет интерес данные о наличии спор C. difficile в пробах говядины, телятины, индейки, свинины, свиной колбасы, сосисках. Около 30 % мяса в Аризоне (24 из 81 образца) и 18 % прошедших проверку в Онтарио (11 из 60) содержали C. difficile. Показано, что C. difficile обсеменяет корма животных – молочных телят и поросят. А некоторые штаммы, выделенные от этих животных и найденные в пробах мяса, были практически идентичны тем, что являлись возбудителями CDI у людей. С другой стороны, споры C. difficile широко распространены в почве и воде, поэтому всегда имеются и в мясе. Споры могут выживать при приготовлении пищи, хотя нагревание при температуре 80 °С в течение 10 минут их убивает. ЛИТЕРАТУРА 1. Power R. E., Fitzpatrick J. M. Medical Treatment of BPH: An Update on Results EAU Update Series 2 (2004). Р. 6–14. 2. Starr John. Clostridium difficile associated diarrhoea: diagnosis and treamterent British Medical Journal, Vol. 331, 3 SEPTEMBER. 2005. 3. Warny M., Pepin J., Fang A., e. a. Toxin production by an emerging strain of Clostridium difficile associated with outbreaks of severe diseases in North America and Europe. Lancet 2005; 366:1079–84.
33
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
4. Grassia T. «Insight into a virulent strain of C. difficile». Infectious Diseases News. 2005 Dec. P. 40–41. 5. Финогенов А. Ю. Институт экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского, Национальная АН Беларуси, г. Минск, по материалам XII Международного московского ветеринарного конгресса (2004) «Особенности CDI у животных». 6. Лобзин Ю. В., Захаренко С. М., Иванов Г. А. Современные представления об инфекции С. difficile. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 13, том 4, – 2002. – С. 200–237. 7. John Starr Clostridium difficile as-sociated diarrhoea: diagnosis and treamterent British Medical Journal, Vol. 331, 3 SEP-TEMBER 2005. Grassia T. Insight into a virulent strain of C. difficile. Infectious Diseases News 2005 Dec. P. 40–41. 8. Goorhuis A., Bakker D., Corver J., Debast S. B., Harmanus C., Notermans D. W., Bergwerff A. A., Dekker F. W., Kuijper E. J. Emergence of Clostridium difficile infection due to a new hypervirulent strain, polymerase chain reaction ribotype 078. Clin Infect Dis. 2008; 47 (9): 1162–70. 9. Warny M., Pepin J., Fang A., e. a. Toxin production by an emerging strain of Clostridium difficile associated with outbreaks of severe diseases in North America and Europe. Lancet 2005; 366:1079–84. Grassia T. Insight into a virulent strain of C. difficile. Infectious Diseases News. 2005 Dec. Р. 40–41. 10. Ryan K. J., Ray CG (editors) (2004). Sherris Medical Microbiology (4th ed. ed.). McGraw Hill. Р. 322–4. ISBN 0-8385-8529-9. 11. Halsey J (2008) «Current and future treatment modalities for Clostridium difficile-associated disease». Am J Health Syst Pharm 65 (8): 705–15. 12. Barth H, Aktories K, Popoff M, Stiles B (2004). «Binary bacterial toxins: biochemistry, biology, and applications of common Clostridium and Bacillus proteins». Microbiol Mol Biol Rev 68 (3): 373–402, table of contents. 13. Hall I, O’Toole E (1935) «Intestinal flora in newborn infants with a description of a new
34
pathogenic anaerobe, Bacillus difficilis». Am J Dis Child 49: 390. 14. Larson H, Price A, Honour P, Borriello S. (1978) «Clostridium difficile and the aetiology of pseudomembranous colitis». Lancet 1 (8073): 1063–6. 15. Dial S., Delaney J., Barkun A., Suissa S. (2005). «Use of gastric acid-suppressive agents and the risk of community-acquired Clostridium difficile -associated disease». JAMA 294 (23): 2989–95. 16. Loo V, Poirier L, Miller M, et al (2005). A predominantly clonal multi-institutional outbreak of Clostridium difficile-associated diarrhea with high morbidity and mortality». N Engl J Med 353 (23): 2442–9. 17. McDonald L (2005).»Clostridium difficile: responding to a new threat from an old enemy» (PDF). Infect Control Hosp Epidemiol 26 (8): 672–5. 18. Katz D. A., Lynch M. E., Littenberg B. (1996) Am. J. Med. 100 (5): 487–95. 19. Murray P. R., Baron E. J., Pfaller E. A., Tenover F., Yolken R. H. (editors) (2003). Manual of Clinical Microbiology (8th ed ed.). Washington DC: ASM Press. 20. Vaishnavi C., Bhasin D., Kochhar R., Singh K. (2000 «Clostridium difficile toxin and faecal lactoferrin assays in adult patients». Microbes Infect 2 (15): 1827–30. 21. Kirkpatrick I. D., Greenberg H. M. (2001) «Evaluating the CT diagnosis of Clostridium difficile colitis: should CT guide therapy?» AJR. American journal of roentgenology 176 (3): 635–9. 22. Nelson R (2007) «Antibiotic treatment for Clostridium difficile-associated diarrhea in adults». Cochrane Database Syst Rev (3): CD004610. 23. Teasley D. G., Gerding D. N., Olson M. M., et al (1983) «Prospective randomised trial of metronidazole versus vancomycin for Clostridiumdifficile -associated diarrhoea and colitis». Lancet 2 (8358): 1043–6. 24. Morris J. G., Shay D. K., Hebden J. N., et al. (1995). Ann Intern Med. Р. 123–250. 25. Rao G. G., Ojo F., Kolokithas D. «Vancomycin-resistant gram-positive cocci: risk factors for faecal carriage». J Hosp Infect 35: 63–9.
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
УДК 619:616.9
РОЛЬ МИКОПЛАЗМ В ПАТОЛОГИИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА* В. Муравьёв, В. Родионова, МГАВМ ИБ им. К. И. Скрябина е-mail: selhozizdat@mail.ru Аннотация. Доказана роль M. mycoides subsp. mycoides не только как возбудителя контагиозной перипневмонии крупного рогатого скота, но и этиологического фактора при возникновении таких заболеваний, как бронхопневмонии телят, маститов, абортов, артритов, воспалительных процессов гениталий и кишечника КРС. Ключевые слова: M. mycoides subsp. mycoides, контагиозная перипневмония крупного рогатого скота.
ROLE OF MYCOPLASMAS IN CATTLE PATHOLOGY V. Murav’yev, V. Rodionova Summary. The role of mycoplasmas not only as the agent of contagious peripneumonia of cattle, but also etiological factor with the appearance of such illnesses as bronchopneumonia of calves, mastitis, abortions, arthritis, inflammatory processes of genitals and cattle intestines is proven. Keywords: mycoplasma, contagious peripneumonia of cattle, mastitis, abortion, arthritis. Микоплазмы широко распространены в природе, их находят в почве и сточных водах, они выделены из каменного угля и горячих источников. Микоплазмы могут входить в состав постоянной микрофлоры слизистых оболочек верхних дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта и мочеполовых путей и могут представлять собой оппортунистические микроорганизмы, вызывая инфекцию только при наличии иммунодефицита. Описаны микоплазмы, существующие в различных симбиотиче-
ских взаимоотношениях с бактериями, низшими грибами, растениями, высшими животными и человеком. Формы симбиоза разнообразны. Иногда это комменсализм, в большинстве случаев – типичный паразитизм. Многие виды микоплазм патогенны. Они являются возбудителями заболеваний растений, животных и человека. Патогенность микоплазм может быть обусловлена токсигенными функциями, адсорбционной способностью, характером взаимоотно-
* Статья впервые опубликована в нашем журнале в №8/2011.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
35
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
шений с клетками хозяина и ферментативной активностью. Нередко при микоплазмозе наблюдается наслаивание вторичной бактериальной инфекции. Микоплазмы хорошо защищены от антител и антимикробных препаратов особенностями патогенеза заболевания, что способствует переходу процесса в хроническую форму. Белковый антиген микоплазм может включаться в плазмалемму клетки хозяина, что приводит к нарушению механизма иммунной защиты и значительно усложняет лечение. Отсутствие ригидной клеточной стенки влечет за собой ряд морфологических особенностей, присущих этим микроорганизмам. Прежде всего для них характерен ярко выраженный полиморфизм. В культуре одного вида можно обнаружить крупные шаровидные тела, мелкие зерна, клетки эллипсовидной, дискообразной, палочковидной и нитевидной формы. Последние могут ветвиться, образуя структуры, подобные мицелиальным. Размеры мелких структурных единиц, называемых «элементарными тельцами», находятся на границе или за пределами разрешающей способности светового микроскопа, составляя, приблизительно, 0,1–0,2 мкм. Клетки микоплазм окружены трехслойной цитоплазматической мембраной толщиной 75А, защищающей цитоплазму с ядерной субстанцией, гранулами и вакуолями. Мембрана состоит из полярных липидов и протеинов. В отличие от бактериальных клеток, в состав микоплазм входит стерол, составляющий до 20 % общего мембранного липида. Основным компонентом паразитических видов является свободный и этерифицированный холестерин, обеспечивающий энергию и структурную организацию клетки. Микоплазмы не образуют спор, жгутиков, некоторые виды обладают скользящей подвижностью. Микоплазмы грамотрицательны, хорошо окрашиваются по Романовскому – Гимзе. Клетки в окраске по методу Романовского – Гимзы преимущественно имеют кокковидную, ово-
36
идную, перстневидную формы размером 0,3– 0,5 мкм, розово-фиолетового оттенка, но встречаются и фиолетовые шары, палочки, диски и гомогенные массы, располагающиеся поодиночно, парами, цепочками или скоплениями по 5 и более вместе. Микоплазмы, в зависимости от локализации процесса, у КРС дифференцируются на микоплазмы, вызывающие контагиозную перипневмонию – M. mycoides subsp. mycoides, бронхопневмонию телят – M. bovirhinis, маститы, воспаление гениталий – M. bovis, бронхо-пневмонии, артриты – M. dispar, маститы – М. alcalescens, коньюктивиты – M. bovoculi. Микоплазмы, в силу своих структурных особенностей, слабо адаптируются на питательных средах. Одни штаммы вызывают помутнение среды, другие образуют легкую пленку. Одни штаммы растут в верхнем слое питательной среды, другие – в придонной части. На полужидких средах с ростовыми добавками микоплазмы растут по уколу или образуют взвешенные крошковатые колонии. На плотных питательных средах микоплазмы формируют характерные колонии, напоминающие яичницу-глазунью. Микоплазмы размножаются в бесклеточных питательных средах, содержащих полноценный белок, холестерин, нуклеиновые кислоты, углеводы, витамины и минеральные соли.
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
Занимаясь бактериологическими исследованиями патматериала от больных и павших сельскохозяйственных животных хозяйств (Московской, Тверской, Смоленской, Белгородской областей), мы столкнулись со вспышками респираторных заболеваний, возникающих вне зависимости от сезона года, вызывавших большой процент падежа и прирезки животных. В ряде случаев инфекция начиналась с поголовья вновь завезенного импортного скота. Клинические проявления болезни были следующие: угнетение, отказ от корма, жажда, повышение температуры тела до 41–42°, кашель, дыхание затрудненное, прерывистое, одышка, истечение из носовой полости. Животные стояли, вытянув шею, широко расставив передние конечности. Наблюдались отеки подгрудка. Иногда течение инфекции проявлялось маститами у коров, эндометритами, абортами, поражением суставов и отставанием в росте полуторамесячных телят. Патологоанатомические изменения ярче всего проявлялись в легких: крупозная пневмония с чередующимися стадиями гепатизации, легкое на разрезе имело мраморный рисунок, часть долек легкого была ярко-красного цвета, другая часть уплотнена и имела окраску темно-красную, серо-красную, серую. Стенки бронхов утолщены. В паренхиме легких обнаруживались секвестры разной величины. В плевральной полости – скопление экссудата с хлопьями фибрина. Медиастинальные и бронхиальные лимфоузлы увеличены и отечны, при разрезе иногда стекает серая мутная жидкость. Для бактериологического исследования использовали следующий материал: носовую и влагалищную слизь, взятую тампонами, синовиальную жидкость из пораженных суставов, пробы молока и молозива при маститах. От павших животных отбирали кусочки пораженных легких (на границе со здоровой тканью), региональные лимфатические узлы, кусочки печени, селезенки, почек, плевральную и пе-
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
рикардиальную жидкости, участок тонкого кишечника с содержимым, а также материал от абортированных плодов и участки плодных оболочек. Исследовали патматериал также от больных телят с бронхопневмонией и фекалии от телят с кишечными инфекциями. Материал на исследование доставляли в термосе со льдом. Весь патматериал подвергался бактериологическому исследованию, параллельно часть материала (кусочки легких, сердечной мышцы, селезенки, перикардиальная, плевральная, синовиальная жидкости, ткани абортплодов, пробы влагалищной слизи, фекалий от больных и павших телят, пробы молока, молозива, а с 2002–2003 гг. – также пробы спермы быков производителей) отправлялась в «Центр молекулярной диагностики» ФГУ ВГНКИ. При бактериальном исследовании патматериала на наличие микоплазм нами использовались среды Эдварда или Мартена. Перед использованием среды в нее добавляли 10 % лошадиной сыворотки, 1 % глюкозы и пенициллин 1000 ед/мл (рН 7,6). Посев производили в жидкие и плотные среды. Для выявления других патогенных микроорганизмов параллельно делали посевы на МПБ, кровяной агар, Эндо, среду Китта – Тароцци. Из плевральной, суставной жидкости и тканевого гомогената делали 10-кратные разведения и высевали на среды по 0,1 мл, также делали посевы с органов методом «отпечатков». Инкубировали посевы при 37о, ежедневно их просматривая в течение 10 дней. При появлении в жидкой среде легкого помутнения делали пересев на плотную среду, в течение 5–7 суток просматривая посевы под малым увеличением микроскопа. Колонии микоплазм врастали в агар, имели более темный центр со светлой периферией («яичница-глазунья»), размером 0,5–1 мм. В мазках из нативного материала и культур, окрашенных по Романовскому-Гимзе, возбудитель выглядел в виде округлых, дисковидных, кольцевидных образований.
37
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
Из патматериала от павших животных и проб молока, влагалищной слизи, спермы, суставной, плевральной и перикардиальной жидкостей выделяли культуры синегнойной палочки, патогенной кишечной палочки, гемолитических стрептококков. Перечисленные бактерии могли быть в монокультуре или ассоциациях. В 10 % случаев патогенные бактерии не обнаруживались. Культуры микоплазм нами были обнаружены в 15 % случаев, в т. ч. во всех случаях, когда в патматериале другие патогенные бактерии не выделялись. Из патматериала: абортированных плодов, органов новорожденных телят, синовиальной, плевральной, перикардиальной жидкостей, влагалищной слизи, проб молока, фекалий, а также из кусочков легких, селезенки, сердечной мышцы в Центре молекулярной диагностики ФГУ ВГНКИ методом ПЦР в
80 % случаев была выявлена M. mycoides subsp. mycoides. ВЫВОДЫ 1. Исходя из вышеприведенных данных, можно сделать вывод, что M. mycoides subsp. mycoides выявляется не только при контагиозной перипневмонии крупного рогатого скота, но и при бронхопневмонии телят, артритах, воспалении гениталий, маститах, абортах, заболеваниях кишечного тракта крупного рогатого скота. 2. Трудности выделения микоплазм на питательных средах и их идентификации приводят к невыявлению возбудителя болезни и вследствие этого отсутствию лечения. 3. Проведенные исследования свидетельствуют о широкой циркуляции патогенных микоплазм среди поголовья крупного рогатого скота.
Ветинфо В 17 ЯРОСЛАВСКИХ СЕЛАХ ОБЪЯВЛЕН КАРАНТИН ПО БЕШЕНСТВУ Новый всплеск бешенства (к счастью, пока только среди животных) зарегистрирован в этом году в Ярославской области. Сразу в 17 селах объявлен карантин по бешенству. В число этих населенных пунктов входит и старинное село Глебовское Переславль-Залесского района. Все дело в том, что местный житель на охоте подстрелил лису с шикарным «воротником», который хотел подарить жене. Но что-то уж больно подозрительным показалось охотнику животное. И верно: анализ ветеринарной лаборатории установил, что лиса страдала бешенством. Тут уж охотнику было, конечно, не до подарков. А в Глебовском после этого случая объявили карантин по бешенству, и в 50 крестьянских хозяйствах провели вакцинацию 200 домашних животных. Кстати, несколько лет назад именно в Переславль-Залесском районе произошел трагический случай, связанный с бешенством. 53-летнего милиционера покусали на улице собаки, но страж порядка не обратил на это внимания: дескать, заживет. А собачки, увы, оказались бешеными, чего милиционер, конечно, не знал. И только когда у него внезапно поднялась температура и его состояние резко ухудшилось, он вызвал «скорую помощь». Врачи тут же приехали, но было уже слишком поздно. Пятнадцать последних лет Ярославская область входит в число крайне неблагополучных по бешенству регионов России, о чем сообщали «Крестьянские ведомости». Ежегодно в десятках сел и городов области (в том числе и в Ярославле) объявляется карантин по бешенству. А происходит это неизменно после того, как дикие животные – преимущественно лисы – покусали то собак, то кошек, и даже… коров. Михаил Овчаров, Ярославская область. «Крестьянские ведомости»
38
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ИНВАЗИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
УДК 619:616.995.1
КОНТАМИНАЦИЯ ПАСТБИЩ ЯЙЦАМИ И ЛИЧИНКАМИ ДИКРОЦЕЛИЙ В УСЛОВИЯХ РОСТОВСКОЙ ОБЛАСТИ* А. Миронова, М. Попов, ГНУ СКЗНИВИ, Т. Молокова, Д. Рекутин, г. Новочеркасск е-mail: article2005@mail.ru Аннотация. Результаты исследований свидетельствуют, что трематодозы зарегистрированы в тридцати одном районе Ростовской области, а это более 70 % занимаемой площади под пастбищами с очагом инвазии. Ключевые слова: контаминация, дикроцелии, моллюски, муравьи, церкарии, метацеркарии.
CONTAMINATION OF PASTURES BY EGGS AND BY THE LARVAS OF DICROCELIAS IN THE CONDITIONS OF THE ROSTOV REGION A. Mironova, M. Popov, T. Molokova, D. Rekutin Summary. The main goal of the present research is to investigate the presence of trematodes invasion of mammals in Rostov region. Our findings show that this king of invasion is registered in 31 districts of Rostov region. It is more that 70 % of pasture areas with nidus of invasion. Keywords: contamination, dicrocelias, mollusks, ants, cercaries, metacercaries. Широкое распространение паразитарных болезней среди людей и животных, прежде всего, зависит от загрязнения среды обитания, возникающего в результате нерегламентированного использования необеззараженных сточных вод, навоза и стоков, что способствует контаминации инвазионным материалом гельминтозов и кишечных протозойных болезней почвы и водоемов.
Дикроцелиоз, как гельминтоз, является экологической, экономической и продовольственной проблемой. Дикроцелиозная инвазия распространена почти повсеместно, что обусловлено особенностями в экологии промежуточных (наземных моллюсков) и дополнительных (муравьев) хозяев. Дикроцелиозом в Ростовской области заражено значительное поголовье крупного рогатого скота и овец [1].
* Статья впервые опубликована в нашем журнале в №8/2011.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
39
ИНВАЗИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
ЦЕЛЬ РАБОТЫ Изучить контаминацию пастбищ инвазионными элементами дикроцелий с целью определения гельминтологической ситуации по дикроцелиозу жвачных животных в хозяйствах области различных форм собственности. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ На выпасных участках проводили отбор проб фекалий, пастбищной травы, сбор наземных моллюсков и муравьев. Сбор моллюсков проводили весной, летом и осенью в пасмурные дни утром и во второй половине дня с использованием маршрутного и площадного метода. Пробы фекалий исследовали различными овоскопическими методами для обнаружения яиц дикроцелий и других гельминтов. Пастбищную траву для выявления церкариев дикроцелий собирали в биотопах промежуточных и дополнительных хозяев трематоды. Выделенные моллюсками слизистые комочки с церкариями можно заметить невооруженным глазом или с помощью лупы на различных частях растений. Слизистые комочки, снятые с отобранных проб растений с помощью иглы и скальпеля, помещали на предметное стекло в каплю физиологического раствора и изучали под МБС. Собранных моллюсков исследовали компрессорным методом под МБС. При микроскопии обнаруживали личинок трематоды на различных стадиях развития – спороцисты, редии, церкарии. Оцепеневших муравьев, инвазированных метацеркариями дикроцелиев, находили недалеко от муравейников на растениях в утренние часы. Собирали их и, отсекая брюшко скальпелем, расщепляли его иглами в капле воды и изучали под МБС. В брюшке муравьев находили до 80 метацеркариев. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Проведенные нами исследования показали, что внешняя среда (навоз, пастбищная трава, моллюски и насекомые) контаминирована
40
яйцами, личинками гельминтов сельскохозяйственных и диких животных, которые являются переносчиками заболеваний животных и человека. Яйца и личиночные формы гельминтов, находящиеся во внешней среде, в большинстве случаев очень устойчивы к низким и высоким температурам, высыханию и не теряют своей инвазионности, обеспечивая, тем самым, экологическую и социальную опасность. Проведенный анализ результатов исследований свидетельствует, что трематоды зарегистрированы в тридцати одном районе Ростовской области, что составляет более 70 % занимаемой под пастбищами площади: в отдельных хозяйствах экстенсивность инвазии достигает 80–100 %, интенсивность инвазии – до 5704 экземпляров у крупного рогатого скота и до 6168 экземпляров у овец. Гельминт – сложная многофакторная система, в которую включается окончательный хозяин, промежуточные хозяева с их окружающей средой. Если выпадает один компонент системы, развитие инвазии не происходит. Окружающая среда становится источником заражения человека и животных тогда, когда в ней складываются благоприятные условия для развития гельминтов [2]. Для возникновения дикроцелиозной инвазии жвачных животных необходимо наличие на пастбищах определенных видов моллюсков и муравьев. В то же время, даже при обильном обсеменении пастбищ яйцами дикроцелий, они не станут источником заражения животных, если отсутствуют необходимые виды моллюсков и насекомых в данном биотопе. Промежуточными хозяевами в возникновении дикроцелиоза жвачных в Ростовской области служат моллюски семейства: Helicidae. Bradybaenide. Самыми распространенными и восприимчивыми к заражению личинками дикроцелий являются представители семейства Helicidae: Monacha fruticola. М. carthusiana. Euomphalia ravergieri. Fruticocampylaea narzaneunsis [1]. Обследование на пастбищных участках муравейников выявило, что самыми распро-
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ИНВАЗИОННЫЕ БОЛЕЗНИ
страненными и восприимчивыми к заражению были следующие представители семейства Formicidae: Formica pratensis. F. cinerea. Proformica epinotalis. Cataglyphis aenescens. Зарегистрировано от 0,01 до 0,71 муравейников на 1 м2 биотопа, плотность популяции моллюсков варьирует от 2 до 49 экз. на 1 м2. Зараженность моллюсков личиночными формами дикроцелиев составила от 9,1 до 73,0 % [1]. Знание состояния популяции дикроцелий у овец и крупного рогатого скота, которое определяют путем проведения гельминто-овоскопии проб фекалий от животных, печени при убое или падеже, из навозных куч, травы: гельминтологической оценки пастбищ на наличие и степень инвазированности моллюсков и муравьев личинками дикроцелий – дает возможность прогнозировать заболеваемость животных дикроцелиозом. Наши исследования показали, что контаминация зависит от характера выпасных участков и от водоемов. Непроточные водоемы (дождевые лужи, канавы, мелкие пруды), а также сырые, влажные, затененные, покрытые хорошим травостоем пастбища являются наиболее опасными для заражения животных гельминтами. Следовательно, на пастбищах накапливается большой потенциал инвазионного начала гельминтов, который обеспечивает стабильные условия для заражения скота гельминтозами. О степени контаминации пастбищ можно судить по степени инвазированности животных дикроцелиями, разделив территорию области на три зоны: низкая, средняя и высокая. Пастбища северных районов области контаминированы гельминтами в высокой степени, более 10 %. От 5 до 10 % контаминация составила в центральной части и до 5 % – в юго-восточных степных районах области Степень контаминации окружающей среды яйцами и другими элементами инвазионного начала гельминтов непостоянна и изменяется в зависимости от факторов, действующих на гельминтологическую ситуацию в каждом регионе, районе, хозяйстве. К таким экологическим факторам относятся: температура воздуха, влаж-
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
ность, осадки, почва, рельеф, растительность, плотность поголовья животных, ограниченность выпасных угодий, численность и степень зараженности моллюсков и муравьев церкариями и метацеркариями дикроцелий. а также видовой состав моллюсков и муравьев, обитающих на территории области, способных инвазироваться личинками дикроцелий. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Контаминация пастбищ инвазионным началом паразитов остается важной частью экологической проблемы. Промежуточные хозяева дикроцелий (наземные моллюски) и дополнительные хозяева (муравьи) имеют широкое распространение во всех природно-климатических зонах Ростовской области, интенсивно заражены партенитами дикроцелий, обеспечивая высокую численность популяции возбудителя и постоянное заражение животных дикроцелиозом. Проблемы экологии ставят перед специалистами такой вопрос, как разработка мер борьбы с гельминтозами путем регулирования численности промежуточных хозяев, в частности, моллюсков (использование моллюскоцидов) Это позволит профилактировать такие паразитарные болезни животных, как фасциолез и дикроцелиоз, тем самым способствуя в значительной мере сохранению поголовья скота, повышению его продуктивности и обеспечению населения продуктами питания, а промышленные предприятия – сырьем. ЛИТЕРАТУРА 1. Заикин М. С., Молокова Т.В. Биологические предпосылки дикроцелиоза на территории хозяйств Матвеево-Курганского района Ростовской области: сборник научных трудов по материалам Международной научно-практической конференции // Инновационные пути развития животноводства. – Ставрополь: Сервисшкола, 2009. – 380 с. 2. Котельников Г.А. Гельминтологические исследования животных и окружающей среды. – М: Колос, 1984. – С. 146–147, 165–167.
41
НЕЗАРАЗНЫЕ БОЛЕЗНИ
УДК 619:616.1/4
АДСОРБЕНТЫ – ВАЖНЫЙ ФАКТОР В БОРЬБЕ С МИКОТОКСИКОЗОМ В СВИНОВОДСТВЕ* С. Костенко, канд. с.-х. наук, доцент Кубанского государственного аграрного университета, Г. Комлацкий, канд. экон. наук, доцент Донского государственного аграрного университета, В. Буряк, аспирант Кубанского государственного аграрного университета е-mail: selhozizdat@mail.ru Аннотация. Введение адсорбента в количестве от 1 до 2 % сухого вещества рациона предупреждает токсическое действие микотоксинов в кормах и оказывает стимулирующее действие на рост и развитие поросят за счет обогащения рационов целым комплексом минеральных веществ. Ключевые слова: качественные корма, влажность корма, рацион, токсические вещества, микотоксины, адсорбция, продуктивность.
ADSORBENTS – THE IMPORTANT FACTOR IN ABATEMENT WITH MYCOTOXICOSIS IN PIG BREEDING S. Kostenko, G. Komlatsky, V. Buriak Summary. Introduction adsorbing substance in quantity from 1 to 2 % of solid of a diet warns toxic action mycotoxin in forages and stimulating an effect has on growth and development of pigs at the expense of enrichment of diets by the whole complex of mineral substances. Keywords: qualitative forages, humidity of a forage, a diet, toxic substances, mycotoxin, adsorption, efficiency. Современные технологии промышленного ведения отрасли свиноводства основаны на широком использовании в рационах свиней зерна и продуктов его переработки. При этом, чем выше продуктивность животных (интенсивность роста, многоплодие, молочность и
др.), тем они более чувствительны к наличию микотоксинов в кормах. Таким образом, наличие микотоксинов в кормах отрицательно влияет на оплодотворение свиноматок, их молочность и сохранность поросят. Зерно поражается грибами как в период вегетации расте-
* Статья впервые опубликована в нашем журнале в №8/2011.
42
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
НЕЗАРАЗНЫЕ БОЛЕЗНИ
ний (головня, спорынья и др.), так и в процессе хранения. Развиваясь на зерне, полевые грибы могут продуцировать микотоксины, Т-2-токсин, зеараленон и др. В первой фазе хранения зерна преобладают полевые грибы, находящиеся на зерне (иногда и поражающие его) в период вегетации растений. При дальнейшем хранении (вторая фаза) полевые грибы, развивающиеся при 20–25 °С, вытесняются складскими «плесенями хранения». К ним относятся аспергиллы, пенициллы и др. Оптимальная температура для их развития – 30–35 °С. В дальнейшем (III–IV фаза) развиваются терморезисгентные и термофильные грибы: мукоровые, аспергиллы, актиномицеты (35–40 °С). Длительность фаз зависит как от температуры, так и от влажности зерна. Большинство «плесеней хранения» относится к мезофилам (нижний предел относительной влажности воздуха 60–90 %) и ксерофилам (70–79 %). Влажность же зерна, которую необходимо поддерживать при хранении, для разного вида зерна различна. Распределение влаги в хранящемся зерне происходит неравномерно. Битые, мелкие, щуплые зерна, как и оболочка зерна, пыль, семена сорных трав, связывают и удерживают больше влаги, чем здоровое зерно. Перемещение влаги внутри партии зерна происходит за счет перепада температур, развития насекомых-вредителей.
Рис. Плесени в кормах
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
Складские грибы, развиваясь на зерне, продуцируют афлатоксин, охратоксин, рубатоксин, стеригматоцистин и др. (аспергиллы, пенициллы, мукоровые). В самих зерновых хозяйствах в местах повышенной влажности усиленно развиваются грибы и другие микроорганизмы, которые в своем развитии повышают температуру зерна, в результате чего возникает его самосогревание, что уменьшает сроки хранения кормов. Самосогревание может быть и в партиях свежеубранного зерна из-за различной влажности зерна основной культуры и примесей. Сезонные перепады температур и зараженность вредителями вызывают самосогревание и уменьшение хранения на 2–4 месяца. Этому способствует и хранение зерна без перемещения и активного вентилирования. Нужно отметить, что найти зерновые корма, не зараженные различными грибами, очень трудно. Однако интенсивность развития поражения кормов можно уменьшить, используя вентиляцию, различные консерванты, а также уменьшая влажность самих кормов (ниже 11–12 %) и температуру их хранения (меньше 15–18 °С). Чем выше эти показатели, тем интенсивнее развивается пораженность зерновых кормов микотоксинами. Отсутствие вентиляции, влажность в хранилищах выше 60 %, травмирование зерна механически способствуют быстрому развитию грибов различного происхождения и, как следствие этого, усиливается накопление микотоксинов различного происхождения. Распространенные виды плесневых грибов и продуцируемых ими микотоксинов указаны в табл. 1. Вероятность проявления токсического действия микотоксинов на крупных свинокомплексах выше в связи с очень большой потребностью в зерне (10–50 тыс. тонн) и заготовкой его из достаточно расширенного ареала происхождения. При завозе кормов из различных районов и регионов страны происходит невольное смешивание компонентов, имеющих
43
НЕЗАРАЗНЫЕ БОЛЕЗНИ
Таблица 1 Распространенные виды плесневых грибов Складские плесневые грибы Aspergillius flavus Афлатоксин В1, мг/кг корма A. fumigatus A. nigulans A. niger Penicillium spр. Охратоксин А, мкг/кг корма Полевые плесневые грибы Fusarium spр. Т-2-токсин Зеараленон ДОН, м Mucor spр. Дрожжеподобные грибы
различную природу происхождения грибов. Смесь микотоксинов разных составляющих рациона (пшеница, ячмень, кукуруза и др.) приводит к проявлению синергизма между токсинами и усилению тяжести действия на организм. При этом отрицательные последствия и тяжесть действия микотоксинов усиливается из-за их непроизвольной комбинационной совокупности. Многие потребители зерна часто не подозревают об усилении действия микотоксинов после смешивания зерна различных партий. Поэтому в фермерских хозяйствах или свинокомплексах на 5–10 тыс. голов, использующих собственные зерновые ресурсы с надлежащим хранением, степень отрицательного действия микотоксинов значительно ниже. Концентрация плесневых грибов иногда превышает предельно допустимые нормы; до трети всех микроскопических грибов являются токсигенными, то есть способными образо-
44
вывать токсические вещества. Загрязненные микотоксинами корма вызывают у животных заболевания с разной степенью остроты – микотоксикозы. В настоящее время известно более 400 микотоксинов, но реальную опасность для животных представляют афлатоксины, охратоксины и др. Массовое заражение кормов микотоксинами вызвало необходимость внесения изменений в действующий ГОСТ на комбикорма-концентраты для свиней по наиболее опасному микотоксину – зеараленону: теперь допускается его присутствие в комбикормах для свиноматок и поросят до 4 месяцев в количестве до 0,035 мг/кг (по нормам ЕС этот показатель равен 0,100 мг/кг). В России наиболее распространены микотоксины, образуемые грибами рода Fusarium. Именно эти токсины особенно опасны для свиней. При длительном использовании таких кормов возможно угнетение и гибель животных. Предельно допустимые показатели наличия в кормах токсинов, при которых наступает угнетение и токсикоз животных, указаны в табл. 2. Микотоксикозы вызывают повышенный отход животных, снижение их продуктивности, угнетение иммунитета и качества продукции, ухудшение воспроизводительных качеств свиноматок. Так, заражение кормов дезоксиниваленолом повышает смертность поросят с 2,5 до 10,2 %, а одновременное заражение охратоксином и зеараленоном снижает срднесуточный прирост на 54 г. Афлатоксин обусловливает анорексию, задержку роста, разрушение витаминов, разрушает печень, вызывает желтуху, асцит, кишечные кровотечения, гастриты, падеж. Афлатоксин взаимодействует с жирорастворимыми витаминами. Он уменьшает запасы витамина А в печени и увеличивает потребность в витамине D3 на 6,6 МЕ/кг корма. В присутствии афлатоксина дефицит этих витаминов усиливается. Поэтому при афлатоксикозе увеличивается потребность в витаминах, а также в некоторых аминокислотах и белке.
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
НЕЗАРАЗНЫЕ БОЛЕЗНИ
блем, отека легких, опухолей, рассасывания эмбрионов, выкидышей. Охратоксин провоцирует нефроз, почечную недостаточность, полиурию, жажду. Незначительное количество микотоксинов считается безвредным, но при ежедневном употреблении происходит их накопление. Следует не забывать о том, что микотоксины создают реальную угрозу здоровью человека, так как могут быть перенесены в кровь и далее в мясо. Поэтому контроль кормов на микотоксины при откорме свиней должен быть особенно тщательный. Пороговые значения токсичности зависят от возраста и фазы продуктивности животных. Три основных механизма токсичности микотоксинов включают стимуляцию переокисления жиров, апоптоз и ингибирование синтеза ДНК, РНК и протеина. В связи с этим иммунотоксичность рассматривается как наиболее распространенное последствие микотоксикозов. Микотоксины являются одними из основных иммунноподавляющих веществ в кормах для животных и птицы Лучшим методом для предотвращения действия микотоксинов является минимизация их продукции, то есть уборка зерна зрелого и с низкой влажностью и хранение в холодном и сухом
Зеараленон продуцируется грибками семейства Fusarium, в частности – Fusarium graminearumu, Fusarium culmomm. Этот микотоксин хорошо известен своим влиянием на эндокринную систему. Зеараленон – микотоксин номер один в отношении своего негативного воздействия на фертильность, а свиньи – животные, наиболее страдающие от него. Критические признаки у свиноматок включают покраснение сосков, опухоли и покраснение вульвы; у новорожденных же поросят могут наблюдаться вывернутые ноги, что свидетельствует о передаче заражения от свиноматок через плацентарную ткань и/или молоко. Трихотецены – токсин Т-2 представляет трихотецены типа А, семейство микотоксинов, продуцируемых грибками Fusanum, а именно F. graminearum, F. culmonim и F. sporotrichoides. Известно, что данный трихотецен нарушает процесс синтеза белков. Его биологический способ действия может объяснить то, как этот фузариотоксин вызывает нарушения фертильности у свиней. Т-2 вызывает существенное снижение уровня оплодотворяемости, бесплодие (повторное возвращение в половую охоту), уменьшение численности потомства и снижение массы поросят. Фумонизм является причиной ухудшения прироста, респираторных про-
Таблица 2 Микотоксины и их лимиты для свиней Угнетение, мг/кг
Токсикоз, мг/кг
Зеараленон (F2)
0,35
0,5
Ремонт, откорм
0,25
0,4
Племенной
0,15
0,25
DON
0,4
1,0
DAS
0,5
1,2
Т2
0,25
0,6
Fumonisin
5,0
10
Aflatoxin
0,02
—
Ochrotoxin
0,2
—
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
45
НЕЗАРАЗНЫЕ БОЛЕЗНИ
месте, что трудно достижимо в районах с теплым и влажным климатом (как на Юге России). Широко используется обработка зерна химическими веществами перед закладкой на хранение. Для этого зерно обрабатывают во время прохождения его по транспортерам путем распыления растворов перекиси водорода, пропионовой кислоты или изобутирата аммония и других кислот. Эти вещества блокируют рост грибов и, как следствие, образование продуктов их жизнедеятельности – микоксинов. Известны также биологические методы, основанные на обработке зерна перед хранением микопрофом или другими биологическими препаратами. Эти методы включают процедуры ферментации микроорганизмами. Один из примеров – это превращение афлатоксина В1 (особенно бактерией Flavobacterium auranticum) до безвредных продуктов деградации. На практике эти методы не получили широкого распространения. Химически некоторые микотоксины могут быть разрушены моноэтиламином кальция гидроксида. В частности, обработка аммонием применяется для детоксификации контаминированных афлатоксином кормов в некоторых
46
штатах США, а также в Сенегале, Франции и Великобритании. На наш взгляд, перспективным и целесообразным является связывание микотоксинов непосредственно в желудочно-кишечном тракте животных посредством использования адсорбентов микотоксинов, которые связывают вредные вещества, образуя с ними комплексы, выводимые впоследствии из организма. При этом эффективная доза включения в корм адсорбентов находится в зависимости от их емкости адсорбентов и степени контаминации данного корма. Следует отметить, что система кормления также оказывает влияние на образование микотоксинов. Так, более высокие требования к гигиене линий кормораздачи с целью предупреждения образования токсинов предъявляются при жидкой системе кормления. Связывание микотоксинов может проходить двумя путями. Первый основан на физической адсорбции, второй – на химической адсорбции. Физические методы сфокусированы на удалении микотоксинов различными адсорбентами, добавляемыми в контаминированные микотоксинами корма, с надеждой, что они эффективны в желудочно-кишечном тракте скорее с профилактическим, чем лечебным способом действия. В настоящее время, тем не менее, использование микотоксин связывающих адсорбентов – наиболее часто используемый способ защиты животных от повреждающего влияния деконтаминированных кормов. Нами проведены исследования по выращиванию свиней без использования химических веществ, а основываясь на природных компонентах. Для этого предлагается использовать бентонитовые глины, природные залежи которых имеются в Ростовской области, Кабардино-Балкарии, Осетии, Краснодарском крае и т. д. Этот природный материал обладает удивительной способностью разбухать при гидратации в 14– 16 раз. До 70 % бентонит состоит из минерала группы монтмориллонита. В этом природном
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
НЕЗАРАЗНЫЕ БОЛЕЗНИ
алюмосиликате за счет нестехиометрических замещений катионов кристаллической решетки появляется отрицательный заряд, компенсирующий обменные катионы, расположенные в межслоевом пространстве. Этим обусловлена высокая адсорбционная способность бентонита. Изучение этого свойства бентонитов в отношении условно-патогенной микрофлоры свидетельствует о том, что количество выросших колоний снижается в 13–18 раз. Нами были проведены исследования адсорбционной способности бентонитов в отношении наиболее распространенных сочетаний микотоксинов, в результате чего установлено, что более выраженные адсорбционные свойства отмечаются при повышении количества филлосиликатов с 1 до 2 % от массы корма. Одновременно сорбционная способность возрастает при повышении рН-среды. Установлено поглощение свыше 50 % токсина, до 60 % фумонизина и ряда других токсинов. При этом концентрация токсина снижается до 30 мкг/кг, охратоксина – до 16 мкг/кг, фумонизина – до 0,4 мкг/кг. При отсутствии процесса резорбции
бентонит через желудочно-кишечный тракт полностью выводится с фекальными массами, при этом не сорбируя и не выводя из организма витамины. С целью минимизации влияния микотоксинов на свиней и уменьшения их совокупного действия на накопление в кормах в процессе хранения были приняты следующие правила: 1. Зерновые корма (ячмень, пшеница, овес, кукуруза и соя), которые используются на свиноводческом комплексе на 220 свиноматок УПК «Пятачок», были только собственного производства. 2. Помещения (зернохранилища) хорошо проветривались с температурой окружающего воздуха и влажностью зерна 11–13 %. Введение бентонита в количестве от 1 до 2 % сухого вещества рациона оказывает стимулирующее действие на рост и развитие поросят как в подсосный, так и в послеотъемный периоды. При этом наблюдается снижение затрат кормов до 10–12 %. Установлено положительное влияние бентонита на показатели белкового обмена и стабилизацию его фракционного состава. Выявлена высокая эффекТаблица 3
Продуктивные качества Рацион Показатели без бентонита
с бентонитом
Оплодотворяемость, %
92,0
96,0
Многоплодие, гол.
13,3
14,8
Количество поросят к отъему, гол.
12,1
13,7
Сохранность поросят, %
90,9
92,6
– в подсосный период
209
228
– за период доращивания
407
450
– на откорме
900
948
Возраст достижения массы 100 кг, дней
165
160
Затраты корма на 1 кг прироста, кг
3,0
2,7
Среднесуточный прирост, г:
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
47
НЕЗАРАЗНЫЕ БОЛЕЗНИ
тивность применения природных бентонитов для коррекции минерального обмена. Наряду с этим повышается естественная резистентность, предупреждается каннибализм среди животных. Пятилетний опыт использования природных адсорбентов на учебно-опытном комплексе «Пятачок» Кубанского госагроуниверситета позволил получить убедительные результаты положительного влияния адсорбентов на качество кормов, продуктивность и рентабельность отрасли (табл. 3). Из табл. 3 видно, что добавление в рацион бентонита способствовало повышению продуктивности свиней: уровеня оплодотворяемости – до 96,0 %, многоплодия – до 14,8 гол., а количества поросят к отъему – до 13,7 гол. Средняя продуктивность свиноматок составила 26,5 поросенка в год при отъеме в 30 дней. Среднесуточные приросты поросят-сосунов к отъему в 30 дней повысились с 209 г до 228 г, поросят на доращивании – с 407 до 450 г, молодняка на откорме – с 900 до 948 г. В результате чего возраст достижения массы 100 кг снизился со 165 до 160 дней; затраты корма на 1 кг прироста – с 3,0 до 2,7 кг. В опытах использовались животные: двухпородные свиноматки (ландрас х йоркшир) и трехпородный
молодняк на доращивании и откорме (ландрас х йоркшир х дюрок) ВЫВОДЫ Экономическая эффективность использования природных адсорбентов составила от 8 до 11 рублей на 1 рубль затрат. При этом достигнуто повышение продуктивности на 12–15 %, увеличение сохранности на 15–20 %, улучшение конверсии корма на 5–12 %. Детоксикация микотоксинов и предупреждение хронических микотоксикозов обеспечивает получение экологически безопасной продукции высокого качества. Многолетние научно-хозяйственные опыты, в сравнении с аналогичными фермами и комплексами, имеющими меньшие показатели жизнестойкости и продуктивности животных без использования бентонитов, позволяют нам с уверенностью говорить о положительном его влиянии на свиней. ЛИТЕРАТУРА 1. Родригес И. Влияние микотоксинов на продуктивность свиней // И. Родригес. Комбикорма. – 2010. – № 2. – С. 88. 2. A. Huwig, S. Freimund, O. Kappeli, H. Dutler // Toxicology Letters. 122 (2001). – 179–188.
Ветинфо США ПЛАНИРУЮТ УВЕЛИЧИТЬ ПОСТАВКИ ГОВЯДИНЫ И СВИНИНЫ В ТАМОЖЕННЫЙ СОЮЗ США планируют увеличить поставки говядины и свинины в Россию и Таможенный союз (ТС), обеспечив полное соответствие продукции нормам, предусмотренным законодательством ТС, сообщает «Независимая газета». На переговорах в Москве Американская федерация по экспорту мяса представила систему проверки экспорта (Export verification program). Представители Россельхознадзора позитивно оценили создание такой системы, отметив при этом, что на данном этапе своего использования она все же допускает некоторые сбои, а также выразили готовность провести ее аудит во второй половине текущего года, отмечается в сообщении. Переговоры были посвящены изменениям в области контрольно-надзорной деятельности при импортно-экспортных операциях в связи с образованием Таможенного союза. Агентство «АгроФакт»
48
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
АКУШЕРСТВО И ГИНЕКОЛОГИЯ
УДК 619:618.2-07
ПРЕИМПЛАНТАЦИОННАЯ ДИАГНОСТИКА ПОЛА ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА: ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОЛА ЗАРОДЫШЕЙ МЕТОДОМ ПЦР- И FISH-АНАЛИЗОВ Г. Дюльгер, П. Дюльгер, РГАУ-МСХА им. К. А. Тимирязева e-mail: article2005@mail.ru Аннотация. Ультрасонография используется для диагностики фолликулярной и лютеиновой кист молочных коров и контроля применения гормонов Surfagon (синтетический аналог ГнРГ) и Magestrofan (клопростенол), предназначенных для животных в России. Ключевые слова: фолликулоподобные структуры, анафродизия, половая цикличность, трансректальная пальпация, фолликулярные кисты, лютеиновые кисты.
PREIMPLANTATION DIAGNOSTICS OF SEX OF THE EMBRYOS OF CATTLE: DETERMINATION OF SEX OF EMBRYOS BY THE METHOD PTSR – FISH- ANALYSES G. Dyulger, P. Dyulger Summary. Ultrasonography is used for the diagnosis of follicular and luteal cysts dairy cows and the control of hormones Surfagon (synthetic analogue of GnRH) and Magestrofan (cloprostenol), intended for animals in Russia. Keywords: follikulopodobnye structure anafrodiziya, sexual cycle, transrectal palpation, follicular cysts, lutein cysts. Полимеразная цепная реакция – это амплификация (многомиллионное увеличение числа копий) определенного участка ДНК в условиях in vitro с помощью ферментативного синтеза (Saiki R. et al., 1988). Синонимы: ПЦР или
PCR (от англ. PCR – polymerase chain reaction). Техника ПЦР была открыта в 1983 г. Кэрри Мюллисом. За ее открытие K. Mullis был удостоен Нобелевской премии по химии за 1993 г. Определение пола основано на амплификации и
* Статья впервые опубликована в нашем журнале в №5/2010.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
49
АКУШЕРСТВО И ГИНЕКОЛОГИЯ
идентификации фрагмента ДНК Y-хромосомы. Процедура исследования достаточно сложна, трудоемка и включает в себя следующие процессы: биопсию эмбриона; получение вытяжки ДНК; коамплификацию сегмента ДНК, специфичного только для Y-хромосомы и фрагмента ДНК контрольной аутосомальной хромосомы; сепарацию и идентификацию полученных ПЦРпродуктов на электрофорезе в агарозном геле с бромидом этидия. Преимплантационную диагностику пола бычьих эмбрионов проводят на стадии морулы или бластоцисты. Для ПЦР-анализа достаточно получить 2–10 бластомеров. Биопсия эмбрионов осуществляется под контролем инверсионного или стереомикроскопа с помощью одного или двух микроманипуляторов. Один микроманипулятор необходим для фиксации эмбриона при помощи пипетки-присоски, второй – для микросекции бластомеров или их аспирации при помощи микроинструментов (микроскальпеля с микропипеткой для экстракции бластомеров или микрошприца с микроиглой). Фиксировать эмбрионы можно также при помощи полоски скотча или же специальной среды, не содержащей белков. Аспирация менее травматична, но технически более сложна и трудоемка, чем микросекция. К тому же при аспирации легче утратить клеточный материал для анализа. При наличии достаточного опыта методом микросекции за один час можно провести биопсию примерно 15 эмбрионов (P. Bredbaska, 2001). В отличие от дисекции биопсия зародышей на стадии морулы и бластоцисты существенно не влияет на параметры их выживаемости в культуре клеток in vitro. Показатель выживаемости для интактных, биопсированных и разделенных на половинки эмбрионов при их культивировании в условиях in vitro в течение 24 часов составляет соответственно 92,3 %, 86,3 % и 77,5 % (Itagaki Y. et al., 1993). Приживляемость биопсированных эмбрионов при нехирургическом способе их пересад-
50
ки достигает 53–71 % (Shea B. F., 1999; Bredbaska P, 2001; Hasler J. F., et al., 2002). При комбинации биопсии с замораживанием и оттаиванием эмбрионов она в среднем составляет 49,8 % (Hasler J. F., et al., 2002) с колебаниями от 37 до 66 % (Shea B. F., 1999). Для экстракции ДНК биопсированные бластомеры инкубируют в специальной среде, обладающей цитолитической активностью (например, содержащей протеинкиназу К). Полученные экстракты ДНК переносят в реакционные пробирки. ПЦР проводят в амплификаторе – приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1 °С. Реакция амплификации ДНК in vitro основана на способности молекул нуклеотидтрифосфатов в присутствии ДНК-полимеразы при соответствующих условиях (рН, ионная сила раствора, температура) образовывать на матрице (одноцепочечной ДНК) комплементарную цепь. Избирательное копирование требуемых участков ДНК (Y-хромосомы и контрольной аутосомальной хромосомы) обеспечивается двумя парами праймеров. Каждый из пары праймеров комплементарен одной из цепей двухцепочной матрицы и ограничивает начало и конец амплифицируемого участка. После гибридизации матрицы с праймером последний служит затравкой для ДНК полимеразы при синтезе комплементарной цепи матрицы. При определенной температуре (более 90 °С) идет расхождение двойной цепи ДНКплавление. Снижение температуры приводит к обратному процессу – соединению комплементарных цепей – отжигу. При избытке праймеров в растворе вероятность отжига на ДНК-матрице праймера гораздо выше, чем присоединение цепи. И поскольку праймер меньше матрицы, начинается активное достраивание (синтез) комплементарной цепи. Скорость достройки достигает нескольких сотен (иногда более тысячи) нуклеотидов в секунду. Таким образом, в конце цикла имеется удвоенный набор ДНК (точнее
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
АКУШЕРСТВО И ГИНЕКОЛОГИЯ
не всей ДНК, а участков, ограниченных праймерами). Снова повышается температура – плавление – отжиг-синтез – в растворе уже 4 копии исходной матрицы. Количество копий (амплификатов) растет в геометрической прогрессии, и после 30–40 циклов в растворе находится от 10 млн до 10 млрд копий исходной копии. Причем, поскольку каждому амплифицируемому участку ДНК имеется пара праймеров, амплификаты будут строго определенного размера. Такое количество ДНК можно визуально обнаружить, используя стандартный УФ-трансиллюминатор, при электрофорезе на агарозном геле с бромидом этидия. Результаты ПЦР учитывают следующим образом. При гомогенном (женском) ядерном поле биопсированных бластомеров амплифицируется только фрагмент контрольной аутосомальной хромосомы, при гетерогенном (мужском) ядерном поле бластомеров – получают два специфических амплификата: сегмент ДНК Y-хромосомы и фрагмент контрольной аутосомальной хромосомы. Результат ПЦР может быть также ошибочным или отрицательным. Неправильные результаты исследования методом ПЦР могут быть вызваны контаминацией пробы экзогенной ДНК или нарушением в аллель-специфической амплификации, отсутствие ПЦР-продукта – неудачной биопсией или потерей биопсированных бластомеров в ходе исследования. Экзогенные ДНК и, в частности, ДНК сперматозоидов могут попадать в пробу при биопсии дробящегося эмбриона. Контаминации можно избежать, используя микрохирургическое оплодотворение с помощью инъекции в цитоплазму ооцита единичного сперматозоида. Продолжительность ПЦР-анализа составляет всего 1,5–2 часа (Bredbaska P., 1998; Shea BF. et al., 1999). Успешность определения пола эмбрионов с помощью ПЦР зависит от техники биопсии и количества взятого для анализа клеточного материала, способа экстракции ДНК и методики исследования. Информативность метода (эффективность распознания пола эмбрио-
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
нов от числа исследованных образцов) достигает 90–95 % (Kameyama K. et al., 1996; Bredbaska P., 2001), а точность определения пола – 92–100 % (Utsumi K. et al., 1992; Itagaki Y. et al., 1993; Kameyama K. et al., 1996 Shea B. F., 1999). При использовании для ПЦР-анализа цельных эмбрионов и полуэмбрионов эффективность и точность определения пола достигает 100 % (Utsumi K. et al., 1992; Itagaki Y. et al., 1993). Для коммерческого определения пола бычьих эмбрионов на основе ПЦР и электрофореза разработаны тест-системы, например, с использованием двух пар праймеров для амплификации участка ДНК Y-хромосомы, состоящего из 165 пар оснований и фрагмента ДНК аутосомальной хромосомы размером 210 пар оснований (Alta Genetics Inc., Calgary, AB). Результаты ПЦР при определении пола эмбриона можно учитывать и без применения электрофореза. Например, тест-система на основе ПЦР Ampli-Y TM позволяет учитывать результаты анализа непосредственно в реакционной пробирке при помощи ДНКспецифического красителя бромида этидия. Для регистрации реакции применяется стандартный УФ-трансиллюминатор. При положительном результате – амплификации сегмента Y-хромосомы – в реакционной пробирке отмечают эффект розового свечения, при отрицательном – флюоресценция отсутствует. Недостаток тест-системы: анализ проводится без контрольной аутосомальной хромосомы. Тем не менее на большом материале показано, что точность определения пола при использовании данной тест-системы высокая и составляет 95 % (Hasler J. F. et al., 2002). Эмбрионы с гетерогенным (мужским) ядерном полом диагностируются точнее, чем зародыши с гомогенным (женским) ядерным полом: 98,7 % против 94,4 % (Hasler J. F. et al., 2002). На сегодняшний день ПЦР является ос – новным методом селекции эмбрионов крупного рогатого скота по полу. Определение пола эмбриона методом флуоресцентной гибридизации in situ
51
АКУШЕРСТВО И ГИНЕКОЛОГИЯ
или FISH-анализа (от англ. Fluorescent in situ hybridization). Данный метод молекулярной биологии позволяет идентифицировать половые и числовые хромосомы непосредственно в ядре клетки (in situ), например бластомера, амниона или в клетках крови, костного мозга и т. д. Принцип метода основан на специфической гибридизации определенных участков половых и числовых хромосом (чаще это хромосомоспецифические альфоидные повторы, расположенные в районе центромеры) с флуоресцентно мечеными зондами. Исследование проводится в следующем порядке: биопсия бластомера, лабораторное проведение гибридизации in situ и микроскопическая идентификация хромосом в отдельных ядрах эмбрионов. Для определения ядерного пола эмбриона, как правило, достаточно провести одноцветный FISH-анализ с применением ДНК-зонда для Y-хромосомы. Возможность использования одноцветного FISH-анализа для определения пола бычьих эмбрионов впервые была показана в начале 90-х годов прошлого столетия (Kovar D. J et al., 1993). Биопсию осуществляют на эмбрионах в интервале 8–16 и более клеток. Для исследования достаточно двух и более ядер бластомеров. Для их аспирации под микроскопом с помощью микроманипулятора проводят пункцию прозрачной оболочки зародыша при помощи микроиглы или микропипетки. Вскрытие прозрачной оболочки можно осуществить при помощи микроскальпеля, лазерного луча или химически – с помощью кислого раствора Тироде (рН = 2,2…2,5). Бластомеры, содержащие четкие видимые ядра, осторожно аспирируют в просвет микроиглы или микропипетки и помещают на предметное стекло, фиксируют и далее выполняют процесс гибридизации ДНК-хромосом и / или гоносом (половых хромосом), содержащихся в ядре, с флуоресцентно мечеными хромосомоспецифичными зондами или только с одним зондом для Y-хромосомы. Готовый
52
препарат анализируют на люминесцентном микроскопе. Результаты FISH-анализа не зависят от стадии клеточного цикла. Гоносомы и, в частности, Y-хромосома идентифицируются как в интер-, так и в метафазных ядрах бластомеров. Специальные исследования, выполненные на бычьих эмбрионах, показали, что при применении только одного зонда к Y-хромосоме эффект свечения наблюдается практически во всех ядрах клеток (97,6 %) зародышей с гетерогенным (мужским) полом и крайне редко регистрируется в отдельных ядрах клеток (1,9 % с колебаниями от 0 до 7 %) зародышей с гомогенным (женским) полом (Kobayshi J. et al., 2004). Точность заключения о поле бычьих эмбрионов по данным FISH-анализа с применением ДНК-зонда только для Y-хромосомы (по наличию / отсутствию эффекта свечения в ядрах биопсированных бластомеров) составляет 96,0 %. Эмбрионы с гетерогенным (мужским) ядерном полом диагностируются точнее, чем зародыши с гомогенным (женским) ядерным полом: 98,2 % против 93,2 % (Lee et al., 2004). Основные недостатки метода: а) необходимо проводить биопсию эмбрионов; б) возможна потеря ядер при заборе и приготовлении препаратов бластомеров. В гуманной медицине в основном практикуется мультиплексный FISH-анализ, например, с применением набора проб на 13, 18, 21, Х- и Y-хромосомы. Мультиплексный (пятицветный) FISH-анализ бластомеров позволяет не только определить пол зародыша человека, но и провести раннюю преимплантационную диагностику анеуплоидии, при которой наблюдается отсутствие или избыток одной или нескольких хромосом нормального набора (полиплоидия, миксоплодия, моносомия, нолисомия) и тем самым в рамках программы ЭКО и ТЭ профилактировать рождение детей с хромосомной патологией. С помощью преимплантационной генетической диагностики можно избежать хромосомные заболевания, сцепленные с полом (гемофилия А и В, миопатии Дюшена, синдром
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
АКУШЕРСТВО И ГИНЕКОЛОГИЯ
Мартина-Бела и др.), трисомии по 21-й хромосоме (болезнь Дауна), 13-й хромосоме (синдром Патау), 18-й хромосоме (синдром Эдвардса), моносомии (синдром Шершевского-Тернера) и др. При мультиплексном FISH-анализе каждая хромосома имеет свой, отличный от других, цвет свечения. Эффект такого свечения достигается тем, что специфические зонды, гибридизируясь только с определенными хромосомами, помечены разными флуоресцентными красителями. Каждый краситель имеет свою длину волны, которая регистрируется с помощью люминесцентного микроскопа. Применяя два разных красителя, можно одновременно визуализировать X- и Y- хромосомы. Флуоресцентные препараты достаточно быстро «выгорают» в процессе работы с ними. Графические изображения при помощи специальной видеокамеры, присоединенной к микроскопу, можно передавать на компьютер для их дальнейшей обработки, что позволяет в течение неограниченного периода времен наблюдать за изображениями свечения на экране монитора. При помощи компьютерных программ можно усилить и зафиксировать изображение сигнала, который трудноразличим для глаза. По чувствительности и специфичности FISH-анализ соответствует, а по оперативности получения результата и частоте применения в ветеринарной акушерской практике уступает ПЦР-анализу. Вместе с тем FISH-анализ не чувствителен к контаминации экзогенным ДНК, а мультиплексный FISH-анализ позволяет диагностировать не только пол зародыша, но различные варианты хромосомной патологии (анеуплоидии). ЛИТЕРАТУРА 1. Bredbaska P. Progress on methods of gene detection in preimplantation emb-ryos // Theriogenology. 2001. Vol. 55. P. 23–34. 2. Hasler J. F., Cardey E., Stokes J. E., Bredbaska P. Non-electrophoretic PCR-sexing of bovine embryos in a commercial environment // Theriogenology. 2002. Vol. 58. P. 1457–1469.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
3. Itagaki Y., Sato S., Shitanaka Y., Kudo T., Yamaguchi Y., Sutou S. Sexing of bovine embryos with male-specific repetetives DNA by polymerase chain reaction: sexing of bovine embryos and the production of calves with predicted sex // J. Reprod. Devel. 1993. Vol. 39. P. 65–72. 4. Kameyama K., Numabe T., Sekizawa F., Takada N., Kuryuu M., Satoh H., Hida H., Hamada T., Kifune A., Arai T. Direct transfer of bovine frozen-thawed embryos sexed with a rapid Y-chromosome detection assay // Theriogenology. 1996. Vol. 45. P. 227. 5. Kobayshi J., Nagayama H., Uchida H., Oikawa T., Numabe T., Takada N., Sasada H., Sato E. Selection of sexed bovine embryos using rapid fluorescence in situ hybridization // Vet. Rec. 2004. Vol. 154. P. 789–791. 6. Kovar D. J., Rickords L. F. Rapid of a bovine Y-chromosome specific repeat sequence using fluorescence in situ hybridization (FISH) // Theriogenology. 1993. P. 234. 7. Lee J. Y., Park J. H., Lee S.-H., Park C. S., Jin D. I. Sexing using single blastomere derived from IVF bovine embryos by fluorescence in situ hybridization (FISH) // Theriogenology. 2004. Vol. 62. P. 1452–1458. 8. Saiki R. K., Gelfand D. H., Stoffel S., Scharf S. J., Higuchi R., Horn GT., Mullis K. B., Erlich H. A. Primer-directed enzymatic amplification of DNA with thermostable DNA polymerase // Science. 1988. Vol. 239. P. 487–491. 9. Shea B. F. Determining the sex of bovine embryos using polymerase chain reaction results: a six-year retrospective study // Theriogenology. 1999. Vol. 51. P. 841–854. 10. Utsumi K., Kawamoto T., Kim J. H., Takeda H., Iritani A. Sexing of bovine embryos by polymerase chain reac-tion using Y-specific DNA as primer // Proc. 12th Intern. Congr. on Anim. Reprod. 1992. P. 757–759. 11. White K. L. Embryo and gamete sex selection / Babiuk L. A., Phillips J. P. (eds) Animal Biotechnology. Pergamon Press, Oxford, 1989. P. 179–202.
53
БОЛЕЗНИ МОЛОДНЯКА
УДК 619:616-053.31
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ МОЛОДНЯКА Л. Ширинова, канд. вет. наук e-mail: article2005@mail.ru Аннотация. Даны основные морфофункциональные особенности молодняка сельскохозяйственных животных, определены основные периоды постнатального развития. Ключевые слова: терморегуляция, сердечно-сосудистая система, иммуноглобулины, кроветворение, иммунный ответ, колостральный иммунитет.
MORPHOPHYSIOLOGICAL SPECIAL FEATURES OF YOUNG ANIMALS L. Shirinova Summary. The basic morphofunctional special features of young agricultural animals are given, the fundamental periods of post-natal development are determined. Keywords: thermostatic control, car-diovascular system, immunoglobulins, he-matogenesis, immune response, colostric immunity. Проблема ранней и правильной постановки диагноза болезни у молодняка, а также осуществление эффективных мер лечения и профилактики во многом определяются особенностями растущего организма, которые широко колеблются в зависимости от возраста животного. Организм молодого животного имеет свои морфофункциональные особенности, которые изменяются в различные периоды развития. Выделяют периоды новорожденности, молочного питания и полового созревания. Первые два периода жизни – периоды усиленного роста органов и тканей, становления функций. Наиболее лабильны функ-
ции молодняка в период новорожденности, когда организм приспосабливается к условиям самостоятельного существования. Он характеризуется значительными перестройками и совершенствованием процесса терморегуляции, нервной системы, кровообращения и дыхания, пищеварения, кроветворения и обмена веществ. Морфологическая особенность животных в этот период – наличие культи пупочного канатика, которая подсыхает у нормально развитых поросят на 5–7-й день жизни, у телят через 8–10 дней, у жеребят к 10–12-му дню. У ослабленного молодняка этот процесс затягивается на более длительные сроки.
* Статья впервые опубликована в нашем журнале в №7/2010.
54
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
БОЛЕЗНИ МОЛОДНЯКА
Особенности нервной системы и ее функций. Головной мозг новорожденных животных отличается морфологической, биохимической и функциональной незрелостью. Молодняк сельскохозяйственных животных относится к зрелорождающимся животным, которые способны в первые минуты жизни встать, передвигаться и проявлять рефлекс сосания. Уже в первые часы ярко выражен сосательный рефлекс, что проявляется в пищевых искательных движениях. Поросята, ягнята, жеребята сосут через каждые 0,5–2 ч. Теленок в первый день сосет в среднем 5 раз, а в следующие три дня – 6–8 раз. Продолжительность одного кормления бывает от 2 до 25 мин. За сутки теленок высасывает молозива 6–8 кг. Частота сосательных движений у него может быть до 120 в минуту, порция глотка – до 5 мл. В первые дни жизни проявляются двигательный, защитный (мигательный) рефлексы. По мере роста и развития повышается чувствительность к болевым реакциям. На 3–4-й день жизни начинает образовываться условный рефлекс на определенное время кормления, что выражается в возбуждении и беспокойстве, увеличении содержания лейкоцитов в крови перед началом срока кормления и т.д. В период новорожденности активно функционируют надпочечники, поджелудочная железа, но инкреторная функция гонад низкая и только с возрастом повышается. В целом в молодом возрасте преобладают гормоны анаболического действия. Двигательный рефлекс проявляется у телят в двигательной активности, которая составляет от 200–500 движений за первые часы жизни и 400–500 движений в первые сутки. Поза стояния реализуется у физиологически зрелых телят от 10–20 до 70–80 мин после рождения. ТЕРМОРЕГУЛЯЦИЯ Способность поддерживать постоянную температуру тела сопровождается повышенным потреблением кислорода, образованием большей теплопродукции. Из-за раздражения
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
рецепторов кожи и легких этому способствует включение центральных механизмов терморегуляции, повышение тонуса скелетных мышц и активности дыхательной мускулатуры. Мышечный тонус еще более усиливается, если корова облизывает новорожденного. Облизывание или обтирание тела новорожденного вызывает освобождение его от покрывающих околоплодных вод, дает возможность быстрее обсохнуть и тем самым сэкономить расход тепла. После рождения с первых минут жизни интенсивнее образование тепла у телят, менее выражено у новорожденных поросят и ягнят. У новорожденных животных способность к терморегуляции слабая, поэтому в первые часы и дни жизни температура тела у них неустойчива. В первые часы после рождения ректальная температура у телят составляет 37,6–38,4 °С. В однодневном возрасте она возрастает до 38,7–38,9 °С, а затем поднимается до 39,2– 39,5 °С, у поросят – 38,2 °С и поднимается в 5-дневном возрасте до 38,8 °С, у ягнят при рождении – 40 °С и остается в этих пределах до месячного возраста. Установление совершенства в терморегуляции у ягнят происходит со 2–3-го по 16-й день, а у поросят – к 20-дневному возрасту. У поросят при рождении отсутствует подкожный слой жира, не развита терморегуляция, поэтому они очень чувствительны к колебаниям температуры. Снижение температуры окружающей среды может вызвать у них гипотермию. При рождении возникают первые внеутробные дыхательные движения, чему способствует образующееся значительное отрицательное давление в плевральной полости, что благоприятствует расправлению легких. При этом раскрывается огромное количество капилляров легких, и кровь из правого желудочка попадает в малый круг кровообращения. А затем кровь по легочным венам заносится в левое предсердие, где образуется высокое давление и происходит закрытие евстахиевым клапаном овального отверстия между предсердиями. В связи с перестройкой кровообра-
55
БОЛЕЗНИ МОЛОДНЯКА
щения стенки пупочных сосудов спадаются, аранцев проток и пупочные артерии облитерируются. Сердечно-сосудистая система. У новорожденных соотношение бъемов правого и левого желудочков сердца составляет 2:3 или 1:1, у взрослых животных – 1:3. У плода между предсердиями имеется овальное отверстие, поэтому в артериальную систему поступает бедная кислородом кровь. Между дугой аорты и легочной артерией у них – боталов проток. После рождения (в течение 14 дней) овальное отверстие закрывается, а боталов проток превращается в связку. Сердце у новорожденных животных занимает более вертикальное положение. Симпатическая настроенность вегетативной нервной системы и высокая возбудимость центральной обусловливают высокую частоту пульса, которая у молодых животных подвержена большим колебаниям: частота сердечных сокращений у телят в период новорожденности составляет 134, ягнят – 210, поросят – 248. В возрасте 30 дней частота пульса снижаются у телят до 80, ягнят до 142, поросят до 105. Иногда у молодых животных могут наблюдаться функциональные аритмии, которые с возрастом возрастают. Чем моложе животное, тем легче и чаще возникает у него аритмия. Артериальное кровяное давление у новорожденных несколько ниже, чем у взрослых животных. По данным А. М. Смирнова и В. С. Кондратьева, у телят максимальное артериальное давление равно 132 мм рт. ст., минимальное – 35. Венозное давление – 76 мм водного столба. При заболеваниях, сопровождающихся застойными явлениями в большом круге кровообращения, макс. АКД до 118–120 мм, а венозное повышается до 97 мм. Скорость кровотока у новорожденных телят – 18–19 сек, при нарушении гемодинамики она замедляется до 23–24 сек. Органы дыхания. У новорожденного молодняка бронхи более узкие, в легких мало коллагеновых эластических волокон, а диаметр альвеол меньше, чем у взрослых животных. С этим
56
связано наличие поверхностного дыхания и при недостатке активных движений сохранение ателектаза в отдельных участках легких, в период новорожденности осуществляются преимущественно механизмы симпатической регуляции сердца и проявляется это более частыми его сокращениями. При рождении плацентарное дыхание заменяется легочным, преобладает брюшной тип дыхания. Оно неравномерное и частое. Частота дыхательных движений у телят в период новорожденности составляет 47, ягнят – 70–90, поросят – 86. В возрасте 30 дней частота пульса и дыхания снижается у телят до 41, ягнят до 45, поросят до 41. У поросят и ягнят легкие до 14-дневного возраста имеют участки врожденного ателектаза, поэтому слабо функционируют. В слизистой оболочке дыхательных путей недостаточно развиты лимфатические защитные барьеры. Органы пищеварения. При рождении у молодняка не полностью развита зубная система: у поросят 4 клыка и 4 латеральных резца, у телят 4–6 резцов и 12 коренных зубов, ягнята и козлята рождаются без резцов, между 5–7-м днями у них появляются зацепы. Акт сосания сопровождается выделением слюны. В первые дни после рождения активнее секретируют подчелюстные и подъязычные железы. С возрастом включаются в секрецию и околоушные железы. Смешивание молока со слюной является важным фактором в профилактике болезни, т.к. способствует образованию в желудке мелких рыхлых сгустков казеина, доступных для дальнейшего переваривания. У новорожденных жвачных этому также способствует проявление рефлекса пищеводного желоба, когда, минуя нефункционирующие, в отличие от взрослых, преджелудки, принимаемое молозиво поступает в сычуг. Преджелудки начинают функционировать по мере приучения телят и ягнят к подкормке грубыми и сочными кормами, тогда появляется и акт жвачки, что у телят происходит в возрасте 12–14 дней и позже.
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
БОЛЕЗНИ МОЛОДНЯКА
Пищеварительная система при рождении телят характеризуется такими примерными величинами: объем рубца – 730 мл, сычуга – 1250 мл, длина тонкого кишечника – 15,9 м, толстого кишечника – 2 м. У новорожденных поросят емкость желудка в среднем равна 25 мл, длина тонкого кишечника – 3,8 м, а емкость – 100 мл, длина толстого кишечника – 0,8 м. В первые 10–15 дней жизни у телят значительно увеличивается емкость рубца и особенно сычуга. Так, у 15-дневных телят объем рубца достигает 1,3 л, а сычуга – 4 л, длина тонкого кишечника возрастает до 20,6 м, толстого кишечника – до 2,7 м. У поросят 10-дневного возраста объем желудка составляет уже 73 мл, длина тонкого кишечника – 5,5 м, а объем – до 200 мл, длина толстого кишечника – до 1,2 м, а емкость – 90 мл. Преджелудки у новорожденных телят и ягнят не участвуют в пищеварении. Первая жвачка у телят может возникнуть с недельного возраста, но жвачные периоды в большинстве случаев очень слабые. Более полноценная жвачка появляется с двух-трехнедельного возраста. Это совпадает с развитием руминации, но первые руминаторные движения бывают вялыми и редкими. У телят в месячном возрасте наблюдают 1–3 сокращения в 2 мин, а в 2–4-месячном возрасте – 2–4 сокращения (как у взрослых животных). У ягнят в месячном возрасте соответственно 1–2 сокращения, в 2–3 месяца – 1–3, в 6 мес. – 3–5 сокращений в 2 мин. В период молочного кормления у молодняка более выражен кишечный тип пищеварения. В сычуге молочных телят, ягнят, в отличие от взрослых жвачных, содержится сравнительно много фермента реннина (химозина), способствующего свертыванию казеиногена молока и образованию мелких рыхлых сгустков для дальнейшего расщепления. Свободная соляная кислота в первые 2 ч жизни телят и до 14–20-дневного возраста у поросят в желудке не обнаруживается, что облегчает в первые часы после рождения усвоение иммуноглобулинов из материнского молозива, которые эва-
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
куируются затем в кишечник, где поглощаются эпителиальными клетками слизистой оболочки тонкого кишечника путем пиноцитоза и поступают в лимфу, а затем в кровь. Эта особенность у новорожденных телят наиболее ярко выражена в первые 12–24 ч, и к 36–48 часам после рождения прекращается. Поэтому крайне важно новорожденных напоить молозивом в первые часы после рождения. В первые дни жизни у молодняка более выражена клеточная защитная реакция по сравнению с гуморальной. У новорожденных животных, питающихся молозивом и молоком, создается определенный микробный «пейзаж» кишечника, нарушения его часто обусловливают появление заболеваний. Печень новорожденных богаче гликогеном, чем у взрослых животных, но в ней мало витамина А. Количество его увеличивается при поступлении с молозивом. Аранцев проток между печеночной и передней полой венами зарастает к 10-му дню, однако у телят, рожденных от коров, содержащихся в условиях гиподинамии, – только к 30 дню (И. Хрусталева). У поросят при рождении недоразвиты печень, селезенка, почки, лимфатические узлы. Селезенка к 2-недельному возрасту еще не выполняет всех своих функций, в т.ч. и кроветворной. КРОВЬ Клеточный состав крови молодых животных сильно колеблется в зависимости от условий эмбрионального и постэмбрионального развития, возраста, сезона года, породы. Количество эритроцитов и гемоглобина в крови наиболее высокое при рождении, затем содержание их постепенно снижается и достигает минимальных величин в 4–15-дневном возрасте. У новорожденных сохраняется фетальный гемоглобин, белковая молекула которого может быстро связывать и отдавать кислород. У поросят в период с 1-го по 10-й день фетальный гемоглобин составляет 5–10% общего ге-
57
БОЛЕЗНИ МОЛОДНЯКА
моглобина. Исчезает он из крови к месячному возрасту. Кроветворение у молодняка происходит очень интенсивно: в периферической крови встречаются эритробласты, ретикулоциты (полихроматофилия), наблюдаются анизоцитоз, пойкилоцитоз. Картина белой крови характеризуется лейкоцитозом, нейтрофилией и сдвигом ядра влево. К 2-недельному возрасту количество лейкоцитов уменьшается, нейтрофилия сменяется лимфоцитозом у телят, поросят и ягнят, а у ждеребят это происходит к месячному возрасту (В. Любанова и др.). ОБМЕН ВЕЩЕСТВ Переход новорожденных в условия окружающей среды с более низкой температурой по сравнению с утробой матери вызывает существенные изменения биоэнергетики. Уровень основного обмена у телят составляет 3,6 ккал/ч/кг, у поросят – 4,0–6,0 ккал/ч/кг, ягнят – 1,92 ккал/ч/кг. С момента рождения энергетический обмен у молодняка повышается, что связано с регулированием механизмов терморегуляции. У новорожденного молодняка расходуется в основном одинаковое количество энергии на 1 кг прироста массы – около 4800 ккал корма, при величинах в 1 кг прироста – 30 г азота и 1720 ккал. В первые дни жизни у животных наблюдается метаболическая фаза, характеризующаяся отрицательным балансом азота. Анаболическая фаза устанавливается у молодняка в конце первой и начале второй недель жизни. Ново-
рожденные испытывают большую потребность в энергетических веществах. Уровень сахара в крови у телят выше, чем у взрослых животных, с возрастом он снижается: в 1-ю неделю он составляет 101–113 мг%, к 10-му дню – 91, в 6 мес. – 57–91 мг%. В крови новорожденных поросят содержится сахара 138, к 5-му дню жизни – 118, к месячному возрасту повышается до 136 мг%. Уровень белка в крови молодняка ниже, чем у взрослых животных. У телят при рождении он составляет 5,2 г%, поросят – 4,4, ягнят – 5,14, у 3-дневных жеребят –6,8 г%, к шестимесячному возрасту он становится соответственно: 5,3– 8,0; 5,2–6,3; 5,14–6,95; 6,6–6,9. Кальция в сыворотке крови при рождении у телят содержится 12,2 мг%, в 4 месяца – 10,1–11,6; неорганического фосфора – 6,2–6,5 и 5,9–6,5 мг%. У поросят до 4-х месяцев эти величины составляют: кальция –12,9–14,0; ягнят – соответственно 12,0–13,0 и 6,9–7,4: жеребят – 10,4–12,3 и 4,3–5,8 мг%. Каротин содержится только в сыворотке крови телят и жеребят. ТЕЛО И ОРГАНЫ ДВИЖЕНИЯ У новорожденных телят тело угловатое, в виде конуса, основанием которого является круп. Голова относительно большая, тяжелая и округлая. Шея короткая, грудная клетка и поясница узкие. Грудная клетка и брюшная стенка имеют практически равнозначную толщину и глубину. Конечности удлиненные, и туловище поэтому Таблица 1
Концентрация иммуноглобулинов в молоке коров после отела Концентрация иммуноглобулинов, 100 г/мл Иммуноглобулины
58
сразу после отела
через сутки
через 48 ч
обычное молоко
А
0,5
0,46
0,09
0,005
G
7,5
2,3
0,47
0,04
М
0,49
0,08
0,03
0,004
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
БОЛЕЗНИ МОЛОДНЯКА
Таблица 2 Изменения содержания иммуноглобулинов в сыворотке крови телят в зависимости от первой выпойки молозива Иммуноглобулины
Время исследований в часах
Время 1-й выпойки
1
24
36
Менее 3 ч
107 ± 22
500 ± 50
406 ± 38
Более 3 ч
75 ± 23
357 ± 52
292 ± 40
Менее 3 ч
1007 ± 177
5881 ± 364
6108 ± 383
Более 3 ч
655 ± 168
3176 ± 306
3828 ± 385
Менее 3 ч
110 ± 22
539 ± 41
575 ± 41
Более 3 ч
99 ± 23
361 ± 46
368 ± 56
А
G
М
кажется короче. Эпифизы костей по периметру суставов значительно больше диафизов, и суставы кажутся утолщенными, а задние конечности – саблевидными. Весь скелет новорожденных телят отличается наличием большого количества хряща, примитивностью структур и слабой минерализацией. Масса тела при рождении животного колеблется в зависимости от породы в пределах: у теленка 20–45 кг, или 7–9% массы тела матери, поросенка – 1,0–1,5 кг, или 0,5–1,0% массы тела свиноматки, ягненка – 2,0–4,3 кг, или 6–8% массы овцематки, жеребенка – 26–50 кг, или 8–12% массы тела матери. Длина тела у новорожденного теленка составляет 70–95 см, поросенка – 20–25 см, ягненка – 30–50 см, жеребенка – 75– 145 см. Недостаток двигательной активности в раннем постнатальном онтогенезе приводит к снижению прочностных свойств, организм не дополучает необходимого количества механической энергии для обеспечения нормального кровообращения и проведения нервных импульсов. ИММУННАЯ СИСТЕМА И ИММУНИТЕТ Костный мозг – орган гемоцитопоэза и центральный орган лимфоидной системы. У новорожденных животных он заполняет все кости
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
скелета, жировые клетки появляются в первые месяцы жизни. При этом формируется желтый костный мозг, а красный остается в губчатом веществе грудины, ребер и позвонков. Тимус хорошо развит у новорожденных животных. Масса тимуса у теленка при рождении – 160 г, общая длина – 55 см. Тимус растет до полового созревания и в 9 мес. Его масса – 425–480 г и длина – 70–78 см. В тимусе новорожденных преобладает лимфоидная ткань – 89,3 %. Селезенка у телят сформирована, ее абсолютная масса – 75 г, длина – 19 см, до 4 месяцев она растет быстрее тимуса. У поросят масса селезенки – 2 г, к двум месяцам она равна 20 г. Парные небные миндалины хорошо выражены, их масса – 0,9 г. В дальнейшем они быстро растут. Лимфатические узлы при рождении у телят маленькие, и в них нет лимфоидных узелков, они начинают формироваться только после рождения и к 9 мес. составляют 50–80%. Количество зрелой лимфоидной ткани у телят при высокой двигательной активности значительно выше, чем у животных при гиподинамии. Неспецифические факторы защиты у новорожденных (комплемент, лизоцим, пропер-
59
БОЛЕЗНИ МОЛОДНЯКА
дин, интерферон) синтезируются слабее, чем у взрослых животных. Собственная иммунная система представлена фагоцитозом и клеточными реакциями Т-лимфоцитов. Иммунная система несовершенна, и способность на антигенную стимуляцию развивается к месячному возрасту. Гуморальные факторы резистентности в первые дни после рождения у молодняка целиком зависят от поступления иммуноглобулинов извне с молозивом матери, и тем самым создается колостральный иммунитет, а выработка собственных антител начинается после 10-дневного возраста у телят и после 12–15-дневного у поросят. В сыворотке крови новорожденных поросят иммуноглобулинов содержится 7 ± 0,7%, на 2–3-й день после приема молозива JgG – 35 ± 1,7, JgA – 11 ± 1,0 и JgM – 3±0,2%, т.е. JgG – 140 ± 12 мкг/мл, JgM – 80 ± 7 мкг/мл. Иммуноглобулины молозива в организме молодняка распадаются, и колостральный иммунитет снижается. Период полураспада у телят и поросят: JgA – 1–6 дней, JgM – 3–5 дней. Телята в 2,5–3 мес. жизни достигают частичной, а в 8 мес. – полной иммунологической зрелости. У молодняка выделены три периода иммунного дефицита: первый – у новорож-
денных до приема молозива; второй – в 5– 14-дневном возрасте у телят и 14–21-дневном возрасте у поросят, когда расходованы антитела, полученные с молоком матери; третий совпадает со временем отъема от матери у ягнят и поросят, и перехода на растительные корма у телят. Защита органов и тканей осуществляется средствами местного иммунитета. У новорожденного молодняка бронхи более узкие, в легких мало коллагеновых эластических волокон, а диаметр альвеол меньше, чем у взрослых животных. С этим связано наличие поверхностного дыхания и при недостатке активных движений сохранение ателектаза в отдельных участках легких, в период новорожденности осуществляются преимущественно механизмы симпатической регуляции сердца, и проявляется это более частыми его сокращениями. У новорожденного молодняка уже имеются рефлексы общего и местного характера почти со всех рецепторов, а часть рефлексов образуется после рождения. В зависимости от степени отклонений условий окружающей среды от необходимых параметров возникает стрессовая реакция и, как следствие, имеет место либо адаптация организма, либо возникновение различной патологии.
Ветинфо FDA ВВОДИТ ЗАПРЕТ НА ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЦЕФАЛОСПОРИНОВ В ЖИВОТНОВОДСТВЕ В попытке защитить важный класс антибиотиков для лечения людей и снижения развития лекарственной устойчивости, Управление по контролю качества продуктов и лекарств США (FDA) запретило использовать некоторые виды цефалоспоринов в продовольственном животноводстве. Федеральное агентство объявило, что запрет вступает в силу с 5 апреля. Запрет призван прекратить использование «экстренного применения» или несанкционированного применения цефалоспоринов, по словам FDA, у «так называемых основных видов продовольственных животных», таких как крупный рогатый скот, свиньи, куры и индейки. Использование антибиотиков у продовольственных животных, будь то для лечения, профилактики заболеваний или ускорения роста, приводит к развитию и распространению резистентных бактерий.
60
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ФАРМАКОЛОГИЯ И ТОКСИКОЛОГИЯ
УДК 636.52/58.052
ПРИМЕНЕНИЕ ПРОБИОТИКОВ С ПЕРВЫХ ЧАСОВ ЖИЗНИ ЦЫПЛЯТ Н. Пышманцева, Н. Ковехова, Северо-Кавказский научно-исследовательский институт животноводства, e-mail: article2005@mail.ru Аннотация. Использование пробиотиков Пролам и Бацелл при выращивании ремонтного молодняка кур-несушек обеспечило организм птицы биологически активными веществами, вытесняющими патогенные и условно патогенные бактерии из кишечника птицы и восстанавливающими его микроэкологическое равновесие. Ключевые слова: пробиотик, биологически активные вещества, микроэкологическое равновесие, антибактериальная активность.
APPLICATION OF PROBIOTICS FROM THE FIRST HOURS OF LIFE OF CHICKENS N. Pyshmantseva, N. Kovekhova Summary. The using of probiotics Prolam and Bacell at rearing of repairing young laying hens provided the organism of bird by the biologically active materials, which displace pathogenic and conditionally pathogenic bacteria from the bowels of bird and restoring its micro-ecological equilibrium. Keywords: probiotic, biologically active materials, micro-ecological equilibrium, antibacterial activity. Получение высоких экономических показателей и полное использование генетического потенциала птицы возможно лишь при оптимальном уровне кормления, четком соблюдении ветеринарно-санитарных мероприятий и научно обоснованных программ применения лекарственных средств. В последние годы пробиотики становятся неотъемлемым компонентом рационов для сельскохозяйственной птицы. Содержащиеся в них жизнеспособные клетки микроорганизмов выделяют ферменты и биологически активные вещества, вытесняющие патогенные и условно
патогенные бактерии из кишечника птицы и восстанавливающие его микроэкологическое равновесие. Нормализация микрофлоры кишечника молодняка имеет первостепенное значение для его жизнедеятельности, обеспечивая полноценное переваривание пищи, синтез витаминов, незаменимых аминокислот и веществ с антибактериальной активностью, удаление токсических веществ, повышение иммунной реактивности организма, профилактику дисбактериозов, диареи и инфекционных заболеваний. В промышленных технологических схемах отсутствует этап передачи материнского иммуни-
* Статья впервые опубликована в нашем журнале в №11/2011.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
61
ФАРМАКОЛОГИЯ И ТОКСИКОЛОГИЯ
тета через микроорганизмы. Поэтому у цыплят низкая сопротивляемость, высокий падеж и выбраковка, в том числе из-за незаразных заболеваний желудочно-кишечного тракта, а также велик риск возникновения инфекций. Всего этого можно избежать, если подселить им в ЖКТ полезные микроорганизмы с первых часов жизни в условиях инкубатория. На птицефабрике ООО «Алекса» Ейского района Краснодарского края проведен научно-производственный опыт по использованию пробиотических препаратов Бацелл и Пролам при выращивании цыплят яичного кросса Shaver. Для этого были отобраны 6 групп аналогов суточных цыплят по живой массе по 100 голов в каждой. Условия содержания, кормления и поения для цыплят всех групп были одинаковые, за исключением ввода пробиотических препаратов (табл. 1). В двух опытных группах пробиотик Пролам начали применять еще в инкубатории. Результаты выращивания ремонтных курочек
представлены в табл. 2. В результате выращивания курочек установлено, что живая масса цыплят, при скармливании им в составе рациона только Бацелла, увеличилась на 9 %, Бацелла совместно с Проламом – на 10 %, а при применении Пролама с первых часов жизни молодняка и последующим совместном использовании рекомендуемых препаратов – на 12 % с пропорциональным снижением затрат кормов на 1 кг прироста живой массы. По результатам взвешивания ремонтных курочек в возрасте 91 день была рассчитана однородность поголовья. Установлено, что однородность стада ремонтных курочек контрольной группы составила 88 %, во второй и третьей группах – 90 %, в четвертой, пятой и шестой группах – 89 %, что свидетельствует о хорошей выравненности поголовья. По результатам контрольного убоя ремонтных курочек в 91-дневном возрасте установлено, что убойный выход у цыплят опытных групп, Таблица 1
Схема исследований Условия кормления на выращивании
Группа
Кол-во голов
Инкубаторий
1 (контроль)
100
2
100
Обработка Пролам (спрей) и кормление Пролам + пшено**
ОР + Бацелл* + Пролам 7/7 дней (с недельным интервалом) до 28-дневного возраста
3
100
Обработка Пролам (спрей) и кормление Пролам + пшено**
ОР + Бацелл* + Пролам 7/7 дней до 91-дневного возраста
4
100
ОР + Бацелл* + Пролам 7/7 дней до 28-дневного возраста
5
100
ОР + Бацелл* + Пролам 7/7 дней до 91-дневного возраста
6
100
ОР + Бацелл*
Основной рацион (ОР)
* – пробиотик Бацелл скармливали ежедневно в течение всего опыта. ** – Пролам + пшено – скармливали пшено, замоченное в Проламе уже отсортированным цыплятам в ящиках перед отправкой на корпус.
62
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ФАРМАКОЛОГИЯ И ТОКСИКОЛОГИЯ
Таблица 2 Результаты выращивания Группа Показатели 1
2
3
4
5
6
37
37
37
37
37
37
1099,4± 17,7
1220,8± 12,5***
1229,6± 15,3***
1208,9± 13,1***
1214,7± 13,5***
1194,9± 14,0***
Среднесуточный прирост живой массы, г за период 91 день
11,7
13,0
13,1
12,9
12,9
12,7
Затраты корма на 1 кг прироста живой массы, кг
3,72
3,33
3,31
3,37
3,35
3,41
Сохранность поголовья, %
96
100
100
98
100
98
Живая масса в суточном возрасте, г Живая масса в 91 день, г
* – Р<0,05; ** – Р<0,01; *** – Р<0,001. при использовании пробиотиков, увеличивается на 3–6 %. На развитие мышц и их отношение к массе потрошеной тушки применение пробиотиков не оказало влияния, однако произошло снижение массы внутреннего жира в тушках опытных цыплят до 50 %, что является положительным моментом, так как при увеличении живой массы уменьшение отложения абдоминального жира у курочек свидетельствует о лучшем обмене веществ организма и, как следствие, о подготовленности молодок к яйцекладке. По отношению к массе потрошеных тушек, при скармливании пробиотиков отмечена тенденция по снижению массы сердца в опытных группах, значительно снизилась масса печени, кишечника и селезенки, что можно объяснить более интенсивным протеканием обменных процессов у птицы опытных групп. Установлено, что опытные курочки развивались лучше, чем их контрольные сверстницы. Масса яйцевода у птицы опытных групп была на 25–75 % выше, чем у контрольных. В комбикорм опытных групп весь продуктивный период продолжали вводить пробиотическую добавку Бацелл из расчета 2 кг на 1 тонну корма.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
Наблюдения за птицей контрольной и опытных групп в продуктивный период с 17 по 28 недели позволили отметить, что птицей 2-й и 3-й групп первое яйцо было снесено на 4 дня раньше, чем в контроле, 4-й и 6-й – на 3 дня, 5-й группы – на 2 дня. Процент яйцекладки в 28 недель превышал контрольные данные в опытных группах: № 2 – на 3,9 %, № 3 – на 3 %, № 4 – на 1,7 %, № 5 – на 1,8 % и № 6 – на 0,5 %. Затраты корма на десяток яиц в опытных группах снизились соответственно на 4 %, 3,6 %, 2,8 %, 3,6 %, 2,8 %. Сохранность поголовья кур-несушек в 28 недель составила: в контроле – 97 %, в опытных группах № 2 – 99 %, № 3 – 99 %, № 4–99 %, № 5 – 98 %, № 6 – 98 %. В результате производственной апробации раннего применения пробиотиков при выращивании ремонтного молодняка кур-несушек на птицефабрике «Краснодарская» установлено, что на 1 выращенную голову при использовании пробиотиков Пролам и Бацелл получено 5,06 рублей дополнительной прибыли. В пересчете на все поголовье, получено 199 тыс. руб. дополнительной прибыли с учетом стоимости пробиотиков.
63
ВЕТСАНЭКСПЕРТИЗА, ЗООГИГИЕНА, ВЕТЕРИНАРНАЯ САНИТАРИЯ
УДК 619:614.31:637.56
ИЗМЕНЕНИЕ МИКРОФЛОРЫ ОХЛАЖДЕННОЙ РЫБЫ И СУШИ В ПРОЦЕССЕ ХРАНЕНИЯ Е. Павлова, Р. Корнелаева, П. Степаненко, ГОУ ВПО «Московский государственный университет прикладной биотехнологии», В. Ястреб, ГНУ ВНИИ гельминтологии им. К. И. Скрябина e-mail: selhozizdat@mail.ru Аннотация. Проведено микробиологическое и паразитологическое исследование рыбы для оценки ее гигиенического качества и присутствия патогенных микроорганизмов и паразитов в рыбе. Измерено общеее число аэробных бактерий, бактерий – возбудителей порчи, а также различных патогенных микроорганизмов и паразитов. Ключевые слова: возбудители пищевых отравлений, галофильные вибрионы, токсигенные стафилококки, психрофильные микроорганизмы, листерии, клостридии.
CHANGE OF MICROFLORA OF THE COOLED FISH AND SUSHI IN THE PROCESS OF STORAGE E. Pavlova, R. Kornelaeva, P. Stepanenko, V. Yastreb Summary. The microbiological and parasitological study of fish for estimation of its hygienic quality and presence of pathogenic microorganisms and parasites in fish is carried out. Total number of aerobic bacteria, bacteria of activators of damage, and also various pathogenic microorganisms and parasites is measured. Keywords: agents of food poisonings, halophilic vibrions, toxigenic staphylococcus, psychrophilic microorganisms, Listeria, Clostridium. Для продажи в живом виде пригодна здоровая рыба, способная хорошо переносить перевозку, изменения температурного режима, недостаток кислорода. В магазин рыбу доставляют в автоцистернах и перегружают в аквариумы. Вода для перевозки живой рыбы не должна содержать хлор. При недостаточном содержании кислорода в воде, рыба становится вялой и погибает. Срок хранения живой рыбы в аквариуме при температуре выше 15 °С не более 12–24 ч.
64
Уснувшую рыбу реализуют немедленно, так как на ее поверхности появляется много слизи, рыба быстро портится и становится не пригодной в пищу. Охлаждение рыбы удлиняет срок ее хранения. Температура в толще мышц при охлаждении понижается до –1 °С, поэтому процесс порчи рыбы замедляется. Упаковывают охлажденную рыбу в ящики, сухотарные бочки. Рыба укладывается рядами и пересыпается мелкодробленым льдом (не
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
ВЕТСАНЭКСПЕРТИЗА, ЗООГИГИЕНА, ВЕТЕРИНАРНАЯ САНИТАРИЯ
менее 50 % от массы рыбы). Хранят охлажденную рыбу в холодильниках при температуре от –1 ° до –5 °С и относительной влажности воздуха 95–98 % в течение 7–9 суток – мелкую рыбу; потрошеную и крупную – до 10–12 суток (включая срок транспортирования, лосось поступает, главным образом, из Норвегии). Суши – блюдо традиционной японской кухни, приготовленное из риса и различных морепродуктов, а также других ингредиентов. Как любое блюдо, приготовляемое из сырых или подвергающихся незначительной термообработке продуктов, суши являются скоропортящимися. Поэтому срок хранения приготовленных суши не превышает 24 часов, наилучшим же вариантом является употребление суши сразу после приготовления. Рыба может быть источником и носителем патогенной и условнопатогенной микрофлоры и при неправильном хранении вызывать пищевые отравления. При употреблении рыбы, частыми возбудителями пищевых отравлений являются вибрионы (V. раrahaemolyticus, V. cholerae, V. fluvialis, V. furnissii, V. vulnificus), сальмонеллы (S. typhimurium и S. typhi), стафилококки, листерии, клостридии, бациллы. Галофилезы – пищевые отравления, вызываемые галофильными вибрионами (парагемолитические и алгиколитические), связаны с употреблением сырой рыбы или моллюсков. Количество галофильных вибрионов достигает 105–108 КОЕ/г рыбы, холерные вибрионы могут оставаться жизнеспособными в сырой рыбе от 2 до 9 суток (в соленой рыбе – 1–6 суток). Сальмонеллезы, связанные с употреблением рыбы, крабов, устриц, ракообразных, протекают в тяжелой форме. Заражение рыбы происходит у берега – в местах сброса сточных вод. Сальмонеллы способны выживать в рыбе более 100 дней. Пищевые отравления, вызываемые листериями, отличаются высокой летальностью (до 62 %). Листерии развиваются даже при низких температурах (+4 °С), выживают при замораживании и в растворах с концентрацией соли до 25 %.
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
Токсигенные стафилококки также вызывают пищевые отравления рыбой. Обсеменение стафилококками происходит во время ее вылова, переработки и хранения при температуре выше 10 °С. Рыба может вызывать и опасные паразитарные заболевания: описторхоз, клонорхоз, дифиллоботриоз, метагонимоз, анизакидоз и др. Микробиологическое и паразитологическое исследование рыбы направлено на оценку гигиенического качества рыбы и присутствие патогенных микроорганизмов и паразитов в рыбе. Оно заключается в измерении от общего числа аэробных бактерий, бактерий возбудителей порчи, а также различных патогенных микроорганизмов и паразитов. Целью нашей работы явилось: – проследить динамику изменения микрофлоры лосося и трески охлажденной (три образца) при холодильном хранении (0–2 °С) в течение 10 дней на 1, 3 и 10-й дни хранения; – лосося (три образца) и тунца (три образца), входящих в состав суши при холодильном хранении (температуре от 2 до 6 °С) в течение гарантируемого срока годности (24 часа) на 1, 4, 7, 12, 18, 24 час хранения; – выявить микроорганизмы, вызывающие гнилостную порчу рыбы; – выявить наличие паразитов. Микробиологическое исследование рыбы проводили согласно ГОСТ 21237–75 и СанПиН 2.3.2.1078–01. Оценку свежести рыбы проводили по органолептическим показателям (состояние чешуи, кожи, рта, глаз, жабр, плавников, анального отверстия, мышц, брюшной полости, внутренних органов), бактериоскопическим методом (микроскопия мазков – отпечатков из поверхностных и глубинных слоев мышц). Микробиологический статус рыбы оценивали по количеству мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ) и по наличию следующих видов микроорганизмов: бактерий группы кишечных палочек (БГКП); бактерий родов Proteus, Salmonella, Staphylococcus, Bacillus, Listeria, Pseudomonas, Achromobacter; сульфитреду-
65
ВЕТСАНЭКСПЕРТИЗА, ЗООГИГИЕНА, ВЕТЕРИНАРНАЯ САНИТАРИЯ
цирующих клостридий; парагемолитических вибрионов; энтерококков, плесневых грибов; дрожжей и др. Органолептические показатели всех образцов лососи в начале исследования указывали на их свежесть. Поверхность рыбы чистая, без повреждений. Окраска естественная, жабры от темно-красного до розового цвета. Консистенция мяса – плотная. У всех рыб – слабый кисловатый запах в жабрах. При микроскопии мазков-отпечатков не обнаружено распада мышечной ткани, в 25 полях зрения в мазках-отпечатках – единичные кокки. Начальная общая микробная обсемененность, в среднем по трем пробам, составила для проб охлажденного лосося – 7·103 log КОЕ\г, трески – 9·103 log КОЕ\г, лосося в составе суши – 6·10² log КОЕ\г, тунца – 5,7·10² log КОЕ\г. Количество психрофильных микроорганизмов составило соответственно: 85, 80,54 и 60 log КОЕ\г. На поверхности рыбы были обнаружены энтеробактерии, спорообразующие аэробные микроорганизмы, микрококки, дрожжи, из психрофильных микроорганизмов преобладали бактерии из родов Pseudomonas. Исследуемые образцы соответствовали требованиям СанПин 2.3.21078–01. На конец срока хранения (соответственно 10 суток и 24 часа) органолептические показатели не изменились, общая микробная обсемененность составила: для проб охлажденного лосося – 9,9·10 4 log КОЕ\г и трески – 8,6·10 4 log КОЕ\г, для проб лосося в суши – 6,2·10 4 log КОЕ\г, тунца – 6,8·10 4 log КОЕ\г. Количество психрофильных микроорганизмов составило соотвественно 28, 23, 16,2 и 17,5 % от их общего количества. В образцах рыбы лосося и тунца при холодильном хранении были выделены энтеробактерии (Budvicia aquatica и Edwardsiella tarda), являющиеся возбудителями порчи рыбы. Определение проводилось с использованием двух тест-систем: микробиотест-системы для биохимической идентификации энтеробактерий (МТС-М-12Е) и энтеро-рапид 24 тест
66
для идентификации микроорганизмов семейства энтеробактерий. Также были выделены Ps. putrifaciens, Ps. fluorescens, сапрофитные стафилококки, аэробные спорообразующие бациллы и плесневые грибы рода Mucor. Таким образом, микробиологические показатели образцов охлажденной рыбы лосося, а также лосося и тунца, входящих в исследуемые суши, соответствовали требованиям СанПиНа в течение всего срока годности. Выделенные в результате исследования образцов рыбы лосося и тунца коагулазоотрицательные стафилококки, бактерии рода Pseudomonas, микроорганизмы семейства энтеробактерий (Budvicia aquatica и Edwardsiella tarda) являются возбудителями порчи рыбы. При паразитологическом исследовании рыбы в двух пробах трески из трех в мышечной ткани обнаружены живые личинки нематод рода Anisakis, интенсивность инвазии составила 5 и 6 экземпляров. Выделенные личинки находились в живом состоянии, таким образом представляли опасность для человека. По этим показателям два образца трески не соответствовали требованиям СанПиН 3.2.1333–03. ЛИТЕРАТУРА 1. Бауэр О. Н. и др. Ихтиопатология. – М.: Пищевая промышленность, 1997. – 430 с. 2. Борисочкина Л. И. Гигиенические аспекты производства рыбной продукции. – М.: ЦНИИТЭИРХ, 1997. – 256 с. 3. Ванятинский В. Ф., Мирзоева Л. М., Поддубная А. В. Болезни рыб. – М.: Пищевая промышленность, 1999. – 232 с. 4. Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов. Санитарно-эпидемические правила и нормативы. СанПиН 2.3.2. 1078–01. – М.: ФГУП «ИнтерСЭН», 2002. – 168 с. 5. Инструкция о порядке санитарно-микробиологического контроля производства пищевой продукции из рыбы и морских беспозвоночных. – Л.: Гипрорыбфлот, 2001. – 94 с.
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
КОРМА И КОРМОВЫЕ ДОБАВКИ
УДК 636.2.084
ПЕРЕВАРИМОСТЬ ПИТАТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ АЗОТА КОРОВАМИ В СУХОСТОЙНЫЙ ПЕРИОД ПРИ РАЗЛИЧНОМ УРОВНЕ КОРМЛЕНИЯ В. Дедковский, А. Курепин, Т. Козинец, РУП «Научно-практический центр Национальной академии наук Беларуси по животноводству», e-mail: selhozizdat@mail.ru Аннотация. Оптимальная норма концентрации обменной энергии и сырого протеина в сухом веществе рациона для стельных сухостойных коров при зимнем кормлении установлена у коров второй опытной группы, которые получали рацион с содержанием обменной энергии 10 МДж и сырого протеина 13 %, что позволило повысить переваримость питательных веществ на 1,0–2,5 % и лучшему усвоению сырого протеина по сравнению с контрольной группой. Ключевые слова: сухостойный период, энергетическое и протеиновое питание, обменная энергия, переваримость питательных веществ.
DIGESTIBILITY OF NUTRIENTS AND THE USE OF NITROGEN BY COWS IN THE DRY PERIOD AT DIFFERENT LEVEL OF FEEDING
V. Dedkovskiy, A. Kurepin, T. Kozinets Summary. Researches helped to determine the perfect norm of metabolic energy and crude protein concentration in dry matter of ration for pregnant dry cows at winter feeding, which obtained ration with the content of metabolic energy 10 MJ and crude protein of 13 % that allowed to increase of nutrients digestibility at 1–2,5 % and better crude protein digestion compared to the control group. Keywords: dry period, energy and protein feeding, metabolic energy, digestibility of nutrients. В странах с развитым животноводством все большее внимание уделяется совершенствованию систем нормированного кормления животных [1, 2]. При этом определяющее значение имеет научное обоснование
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
энергетического и протеинового питания в организме животного. Существующие нормы ВАСХНИЛ (1985) основаны на постоянном возмещении затрат питательных веществ на продукцию, не учитывают физиологических
67
КОРМА И КОРМОВЫЕ ДОБАВКИ
особенностей организма коров, заключающихся в резервировании и расходовании питательных веществ (протеин, жир и т. д.), т. е. в изменении живой массы в отдельные периоды продуктивной деятельности, что сдерживает реализацию их продуктивного потенциала [3]. Кормление коров в сухостойный период необходимо организовывать в 2 фазы: I фаза (за два месяца до отела) и II фаза сухостойного периода (за 3 недели до отела). Таким образом, исследования по изучению различных уровней концентрации обменной энергии и сырого протеина в сухом веществе рациона на использование питательных веществ коровами по фазам сухостойного периода являются актуальными. Методика проведения исследований. В ходе научно-хозяйственных и физиологических опытов изучены: 1. Химический состав кормов – по схеме полного зоотехнического анализа с дополнительным определением микро- и макроэлементов и витаминов. Анализ кормов, их остатков кала и мочи по общепринятым методикам: золу – сухим озолением в муфельной печи; первоначальную, гигроскопическую и общую влагу; общий азот – по методу Къельдаля; клетчатку – по методу Геннеберга – Штомана; сырой жир – по Сокслету; каль-
ций – комплексометрическим методом в модификации Арсеньева А. Ф.; фосфор – по Фиске-Суббороу – в соответствии с ГОСТами 26226–95; 13496.3–92; 13496.4–93; 13496.2–91; 13496.15–97; 26570–95; 26657–97, сухое и органическое вещество, БЭВ, каротин (Е. Н. Мальчевская, Г. С. Миленькая., 1981). 2. Поедаемость кормов – путем проведения контрольного кормления 1 раз в 10 дней. Условия содержания, фронт кормления и поения, параметры микроклимата во всех группах были одинаковые. Животные контрольной группы за 60 дней до растела потребляли обменной энергии 11 МДж в сухом веществе рациона и 17 % сырого протеина, во второй опытной группе – 10 МДж и 13 %, и в третьей опытной группе соответственно – 9 МДж и 12 %. За три недели до растела рацион всех групп несколько изменился. В контрольной группе составил 11 МДж обменной энергии и 17 % сырого протеина, во второй группе – 10,5 МДж обменной энергии и 15,0 % сырого протеина, и в третьей – 10 МДж обменной энергии и 14 % сырого протеина в одном килограмме сухого вещества. Данные по переваримости питательных веществ (табл. 1) служат одним из важнейших показателей ценности кормовых средств. Переваримость питательных веществ во Таблица 1
Коэффициенты переваримости питательных веществ, % Коэффициенты переваримости, % Показатели I контрольная
II опытная
III опытная
Сухое вещество
64,3 ± 0,7
65,8 ± 0,3
65,1 ± 0,4
Органическое вещество
66,4 ± 0,3
67,1 ± 0,4
66,2 ± 0,1
Сырой протеин
62,3 ± 0,7
63,7 ± 0,4
62,8 ± 0,2
Сырой жир
50,2 ± 0,6
51,4 ± 0,1
51,6 ± 0,7
Сырая клетчатка
56,7 ± 8,5
57,2 ± 0,4
56,4 ± 0,5
БЭВ
73,6 ± 1,8
73,8 ± 0,8
72,2 ± 0,7
68
ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ • 4 • 2012
КОРМА И КОРМОВЫЕ ДОБАВКИ
Таблица 2 Баланс и использование азота Группы Показатели контрольная (1 опытная)
2 опытная
3 опытная
Поступило с кормом, г
396
316
305
Выделено в кале, г
166
136
171
Переварено, г
230
180
134
Выделено с мочой, г
201
150
108
Отложилось в теле, г
29
30
26
7,3±1,1
9,4 ± 1,6
8,5 ± 2,7
Использовано от принятого, % – на прирост массы тела
всех группах была довольно высокая. Однако животные второй опытной группы переваривали несколько лучше питательные вещества, по сравнению с животными первой контрольной группы, на 1,0–2,5 %. При уменьшении в структуре рациона доли обменной энергии и протеина до 9 МДж и 12 % сырого протеина в сухом веществе рациона переваримость питательных веществ несколько снижалась, но достоверной разницы выявлено не было. Обмен азота является важнейшим показателем, характеризующим жизненные процессы, происходящие в организме животных. От его использования зависит интенсивность роста и другие показатели продуктивности животных. Результаты исследований по обмену азота в среднем по группе показаны в табл. 2. По данным физиологического опыта установлено, что баланс азота во всех опытных группах был положительным, однако следует отметить, что самым высоким он был у животных опытной группы и составил 30 г, в III опытной группе баланс составил 26 г и в контрольной группе он был самым минимальным и равнялся 29 г. Анализируя показатели по использованию азота на прирост массы тела от принятого, также прослеживается
4 • 2012 • ВЕТЕРИНАРИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
различная закономерность. Так, животные I контрольной группы использовали азот от принятого по отношению к II и III опытным группам на 2,1 и 1,2 п.п. меньше. ВЫВОДЫ Оптимальная норма концентрации обменной энергии и сырого протеина в сухом веществе рациона для стельных сухостойных коров при зимнем кормлении установлена у коров второй опытной группы, которые получали рацион с содержанием обменной энергии 10 МДж и сырого протеина 13 %, что позволило повысить переваримость питательных веществ на 1,0–2,5 % и лучшему усвоению сырого протеина по сравнению с контрольной группой на 2,1 п.п. ЛИТЕРАТУРА 1. Chudy Y. A. Energgieumsatz: Einflussfaktoren / Y. A. Chudy // Modellierung und energetisch Futterbewertung. Lohmann information. – 2001. – № 1. – S. 13–22. 2. Cornell N. The Carbohydrate and Protein System for Evaluating Cattle Diets / N. Cornell // Wssh. – 1990. – № 34. – P. 121. 3. Рекомендации по дифференцированному кормлению молочного скота / И. И. Горячев [и др.]. – Минск, 1996. – 10 с.
69
Представляем вашему вниманию темы материалов, которые будут опубликованы во втором полугодии 2012 года ЛАБОРАТОРНАЯ ПРАКТИКА Лабораторная диагностика заболеваний животных и птицы Обзор рынка современной диагностической аппаратуры
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ Диагностика и лечение заболеваний животных и птицы, вызываемых бактериями, вирусами, грибами и другими инфекционными агентами Организационно-хозяйственные и ветеринарносанитарные мероприятия по профилактике инфекционных болезней Эпизоотическое состояние на российских сельскохозяйственных предприятиях и в мире Профилактика вирусных и бактериальных инфекций
ИНВАЗИОННЫЕ БОЛЕЗНИ Диагностика, профилактика и лечение болезней животных и птицы, вызываемых гельминтами, простейшими, членистоногими и прочими паразитами Возрастание роли инвазий в клинике внутренних болезней сельскохозяйственных животных. Роль иммунного ответа организма в заражении и клинике инвазий Трудности лабораторной диагностики инвазионных болезней Роль и место классических микроскопических и современных иммунологических методов. Современные методики консервации материала. Проблема интерпретации лабораторных результатов для ветеринарных врачей
НЕЗАРАЗНЫЕ БОЛЕЗНИ
Методы диагностики наиболее распространенных незаразных болезней сельскохозяйственных животных Рекомендации по применению новых лекарственных препаратов отечественного и зарубежного производства Характеристика и использование кормовых средств, используемых в целях профилактики и лечения болезней сельскохозяйственных животных
АКУШЕРСТВО И ГИНЕКОЛОГИЯ
Анатомические особенности и функция половых органов самцов и самок сельскохозяйственных животных
Методы получения и оценки спермы, физиология и биотехника осеменения и трансплантации эмбрионов Физиология и патология беременности, родов и послеродового периода Заболевания новорожденных, молочной железы самок Основы оперативного акушерства, андрологической и акушерско-гинекологической диспансеризации репродуктивного здоровья животных Сохранение Борьба с бесплодием
БОЛЕЗНИ МОЛОДНЯКА Анатомо-физиологические особенности молодых животных. Классификация болезней молодняка Дородовые (антенатальные) болезни: гипотрофия плода (врожденная гипотрофия) Болезни родового периода (перинатальные): гипоксия плода, гипоиммуноглобулинемия новорожденных телят, гипогликемия новорожденных поросят Болезни раннего послеродового периода (неонатальные) Болезни старшего возраста (постнатальные) Болезни обмена веществ
ФАРМАКОЛОГИЯ И ТОКСИКОЛОГИЯ
Применение лекарственных веществ при различных патологиях у животных Современные ветеринарные и фармакологические препараты КОРМА И КОРМОВЫЕ ДОБАВКИ Влияние кормов и кормовых добавок на здоровье и репродуктивную способность животных Влияние кормов и кормовых добавок на здоровье и репродуктивную способность птиц
ВЕТЕРИНАРНАЯ САНИТАРИЯ, ВЕТСАНЭКСПЕРТИЗА И ЭКОЛОГИЯ Ветеринарно-санитарные требования к перевозке и первичной переработке животных Методики предубойного исследования и послеубойной ветсанэкспертизы туш и внутренних органов Ветеринарно-санитарная оценка продуктов убоя при инфекционных, инвазионных и незаразных заболеваниях Основы переработки и гигиены других продуктов животного происхождения Вопросы экспертизы молока, яиц, рыбы, мяса морских животных, растительных пищевых продуктов и меда Правила контроля пищевых продуктов растительного и животного происхождения на продовольственных рынках
ВЕТИНФО, ВЕТАПТЕКА Научные и практические исследования по лечению животных при различных заболеваниях Химическая структура, механизм действия, широта терапевтического эффекта современных лекарственных препаратов: схемы и способы их применения
НОРМАТИВНЫЕ ДОКУМЕНТЫ КНИЖНАЯ ПОЛКА
Профессиональные праздники и памятные даты 1 мая Праздник труда (День труда). В этот день в 1886 г. социалистические организации США и Канады устроили демонстрации, вызвавшие столкновения с полицией и жертвы. В память об этом конгресс II Интернационала объявил 1 мая Днем солидарности рабочих мира. В СССР праздник именовался Днем солидарности трудящихся, а в Российской Федерации — Праздником весны и труда.
3 мая Всемирный день свободной печати. Провозглашен Генеральной Ассамблеей ООН 20 декабря 1993 г. по инициативе ЮНЕСКО. Тематика праздника связана со свободным доступом к информации, безопасностью и расширением прав журналистов.
День Солнца. Дата зародилась в 1994 г. с подачи Европейского отделения Международного общества солнечной энергии (МОСЭ). День посвящен как небесному светилу, так и экологии в целом.
5 мая День водолаза. 5 мая 1882 г. указом императора Александра III в Кронштадте была основана первая в мире водолазная школа. В 2002 г. указом Президента РФ В. Путина этот день официально объявлен Днем водолаза.
День шифровальщика. 5 мая 1921 г. постановлением Совета народных комиссаров РСФСР была создана служба для защиты информации с помощью шифровальных (криптографических) средств. С тех пор дату отмечают специалисты, использующие системы секретной связи.
8 мая Международный день Красного Креста и Красного Полумесяца. Дата отмечается в день рождения швейцарского гуманиста Анри Дюнана. В 1863 г. по его инициативе была созвана конференция, положившая начало международному обществу Красного Креста. Название организации было видоизменено в 1986 г. Задачи МККК — помощь раненым, больным и военнопленным.
9 мая День Победы. 9 мая в 0:43 по московскому времени представители немецкого командования подписали Акт о безоговорочной капитуляции фашистской Германии. Исторический документ доставил в Москву самолет «Ли-2» экипажа А. И. Семенкова. День Победы Советского Союза в Великой Отечественной войне — один из самых почитаемых праздников во многих странах.
12 мая Всемирный день медицинской сестры. Дата отмечается с 1965 г. под эгидой Международного совета медсестер (ICN). 12 мая — день рождения Флоренс Найтингейл, основательницы службы сестер милосердия и общественного деятеля Великобритании.
13 мая День Черноморского флота. В этот день в 1783 г. в Ахтиарскую бухту Черного моря вошли 11 кораблей Азовской флотилии под командованием адмирала Федота Клокачева. Вскоре на берегах бухты началось строительство города Севастополя. В календаре современной России праздник узаконен в 1996 г.
14 мая День фрилансера. В этот день в 2005 г. была
Международный день борьбы за права инвалидов. В этот день в 1992 г. люди с ограниченными возможностями из 17 стран провели первые общеевропейские акции в борьбе за равные права. В России сегодня проживают около 13 млн граждан, нуждающихся в особом внимании.
7 мая День радио. Согласно отечественной версии, 7 мая 1895 г. русский физик Александр Попов сконструировал первый радиоприемник и осуществил сеанс связи. Впервые дата отмечалась в СССР в 1925 г., а спустя 20 лет согласно постановлению Совнаркома приобрела праздничный статус. День создания Вооруженных Сил РФ. 7 мая 1992 г. Президентом РФ было подписано распоряжение о создании Министерства обороны и Вооруженных Сил Российской Федерации.
образована одна из первых российских бирж фрилансеров — работников, самостоятельно выбирающих себе заказчиков. День помогает объединиться тем, кто зарабатывает в Интернете.
15 мая Международный день семьи. Дата учреждена Генеральной Ассамблеей ООН в 1993 г. Цель проводимых мероприятий — защитить права семьи как основного элемента общества и хранительницы человеческих ценностей.
17 мая Всемирный день информационного сообщества. Профессиональный праздник программистов и IT-специалистов учрежден на Генеральной Ассамблее ООН в 2006 г. Корни бывшего Международного дня электросвязи уходят к 17 мая 1865 г., когда в Париже был основан Международный телеграфный союз.
Поздравим друзей и нужных людей! 18 мая
25 мая
День Балтийского флота. В этот день в 1703 г. флотилия с солдатами Преображенского и Семеновского полков под командованием Петра I одержала первую победу, захватив в устье Невы два шведских военных судна. Сегодня в состав старейшего флота России входят более 100 боевых кораблей.
День филолога. Праздник отмечается в России и ряде стран. Это день выпускников филологических факультетов, преподавателей профильных вузов, библиотекарей, учителей русского языка и литературы и всех любителей словесности.
26 мая День российского предпринимательства.
Международный день музеев. Праздник появился в 1977 г., когда на заседании Международного совета музеев (ICOM) было принято предложение российской организации об учреждении этой даты. Цель праздника — пропаганда научной и образовательно-воспитательной работы музеев мира.
20 мая
27 мая
Праздник учрежден Международным комитетом мер и весов в октябре 1999 г. — в ознаменование подписания в 1875 г. знаменитой «Метрической конвенции». Одним из ее разработчиков был выдающийся русский ученый Д. И. Менделеев.
Всемирный
Новый профессиональный праздник введен в 2007 г. указом Президента РФ В. Путина. Основополагающий Закон «О предприятиях и предпринимательской деятельности» появился в 1991 г. Он закрепил право граждан вести предпринимательскую деятельность как индивидуально, так и с привлечением наемных работников.
день
метролога.
Всероссийский день библиотек. В этот день в 1795 г. была основана первая в России общедоступная Императорская публичная библиотека. Спустя ровно два века указ Президента РФ Б. Ельцина придал празднику отечественного библиотекаря официальный статус.
21 мая День Тихоокеанского флота. 21 мая 1731 г. «для защиты земель, морских торговых путей и промыслов» Сенатом России был учрежден Охотский военный порт. Он стал первой военно-морской единицей страны на Дальнем Востоке. Сегодня Тихоокеанский флот — оплот безопасности страны во всем Азиатско-Тихоокеанском регионе. День военного переводчика. В этот день в 1929 г. заместитель председателя РВС СССР Иосиф Уншлихт подписал приказ «Об установлении звания для начсостава РККА «военный переводчик». Документ узаконил профессию, существовавшую в русской армии на протяжении столетий.
24 мая День славянской письменности и культуры. В 1863 г. Российский Святейший Синод определил день празднования тысячелетия Моравской миссии святых Кирилла и Мефодия — 11 мая (24 по новому стилю). В IX веке византиец Константин (Кирилл) создал основы нашей письменности. В богоугодном деле образования славянских народов ему помогал старший брат Мефодий.
День химика. Профессиональный праздник работников химической промышленности отмечается в последнее воскресенье мая. При этом в 1966 г. в МГУ зародилась традиция отмечать каждый День химика под знаком химических элементов Периодической системы.
28 мая День пограничника. 28 мая 1918 г. Декретом Совнаркома была учреждена Пограничная охрана РСФСР. Правопреемником этой структуры стала Федеральная пограничная служба России, созданная Указом Президента РФ в 1993 г. Праздник защитников границ Отечества в этот день отмечают и в ряде республик бывшего СССР.
29 мая День военного автомобилиста. 29 мая 1910 г. в Санкт-Петербурге была образована первая учебная автомобильная рота, явившаяся прообразом автомобильной службы Вооруженных Сил. Праздник военных автомобилистов учрежден приказом министра обороны РФ в 2000 г.
31 мая
День кадровика. В этот день в 1835 г. в царской
День российской адвокатуры. 31 мая
России вышло постановление «Об отношении между хозяевами фабричных заведений и рабочими людьми, поступающими на оные по найму». Дата отмечается с 2005 г. по инициативе Всероссийского кадрового конгресса.
2002 г. Президент РФ В. Путин подписал Федеральный закон «Об адвокатской деятельности и адвокатуре в Российской Федерации». Профессиональный праздник учрежден 8 апреля 2005 г. на втором Всероссийском съезде адвокатов.
ИНФОРМАЦИЯ О ПОДПИСКЕ НА ЖУРНАЛЫ ИД «ПАНОРАМА» Издательский Дом «ПАНОРАМА» – крупнейшее в России издательство деловых журналов. Одиннадцать издательств, входящих в ИД «ПАНОРАМА», выпускают 90 журналов (включая приложения). Свидетельством высокого авторитета и признания изданий ИД «Панорама» является то, что 27 журналов включены в Перечень ведущих рецензируемых журналов и изданий, утвержденный ВАК, в которых публикуются основные научные результаты диссертаций на соискание ученой степени доктора и кандидата наук. Среди главных редакторов наших журналов, председателей и членов редсоветов и редколлегий – около 300 академиков, членов-корреспондентов академий наук, профессоров и столько же широко известных своими профессиональными достижениями хозяйственных руководителей и специалистов-практиков.
Индексы по каталогу «Роспечать» «Почта и «Пресса России» России»
НАИМЕНОВАНИЕ
АФИНА
Стоимость подписки по каталогам без учета стоимости доставки
Стоимость подписки через редакцию с учетом стоимости доставки
www.бухучет.рф, www.afina-press.ru 36776 20285 80753 82767 82773 82723 32907
Автономные учреждения: 99481 экономика – налогообложение – бухгалтерский учет Бухгалтерский учет 61866 и налогообложение в бюджетных организациях в здравоохранении 99654 Бухучет Входит в Перечень изданий ВАК
4830
4590
Индексы по каталогу «Роспечать» «Почта и «Пресса России» России»
Стоимость подписки через редакцию с учетом стоимости доставки
46021
11825 Весь мир – наш дом!
1 890
1794
84832
12450 Гостиничное дело
8538
8112
1413
1341
2514
2388
20236
Дипломатическая служба 61874 Входит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие Лизинг 16585 Входит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие
4614
4386
4614
4386
82723
в сельском хозяйстве 16609 Бухучет Входит в Перечень изданий ВАК Бухучет 16615 в строительных организациях Входит в Перечень изданий ВАК Лизинг 16585 Входит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие
4614
4386
84826
экономика 12383 Международная Входит в Перечень изданий ВАК
3672
3486
4614
4386
84866
12322 Общепит: бизнес и искусство
3534
3360
2514
2388
79272
99651 Современная торговля
8538
8112
12559 Налоги и налоговое планирование
19 932
18 936
84867
12323 Современный ресторан
6378
6060
82737
регулирование. 16599 Таможенное Таможенный контроль Товаровед 12320 продовольственных товаров Входит в Перечень изданий ВАК
13 116
12 462
4110
3906
ВНЕШТОРГИЗДАТ
www.внешторгиздат.рф, www.vnestorg.ru 82738
НАИМЕНОВАНИЕ
Стоимость подписки по каталогам без учета стоимости доставки
регулирование. 16600 Валютное Валютный контроль
13 116
12 462
85181
ИНФОРМАЦИЯ О ПОДПИСКЕ НА ЖУРНАЛЫ ИД «ПАНОРАМА» Индексы по каталогу
НАИМЕНОВАНИЕ
«Роспечать» «Почта и «Пресса России» России»
МЕДИЗДАТ
Стоимость подписки по каталогам без учета стоимости доставки
Стоимость подписки через редакцию с учетом стоимости доставки
Индексы по каталогу
47492 46543
в здравоохранении 99654 Бухучет Входит в Перечень изданий ВАК Вестник неврологии, и нейрохирургии 79525 психиатрии Входит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие Врач скорой помощи 24216 Входит в Перечень изданий ВАК
Стоимость подписки через редакцию с учетом стоимости доставки
ПОЛИТЭКОНОМИЗДАТ
www.медиздат.рф, www.medizdat.com 80753
НАИМЕНОВАНИЕ
«Роспечать» «Почта и «Пресса России» России»
Стоимость подписки по каталогам без учета стоимости доставки
www.политэкономиздат.рф, www.politeconom.ru
4614
4386
20285
Бухгалтерский учет 61866 и налогообложение в бюджетных организациях
4614
4386
2040
1938
84787
12310 Глава местной администрации
3534
3360
4212
4002
84790
12307 ЗАГС
3276
3114
80755
99650 Главврач
4542
4314
84791
4110
3906
82723
Лизинг 16585 Входит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие
Землеустройство, кадастр 12306 и мониторинг земель Входит в Перечень изданий ВАК
2514
2388
84789
12308 Служба занятости
3390
3222
46105
44028 Медсестра
3534
3360
20283
Социальная политика социальное партнерство 61864 иВходит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие
2349
2232
1944
1848
23140 82789 46312
15022 16631 24209
Охрана труда и техника безопасности в учреждениях здравоохранения Выходит 3 раза в полугодие Санитарный врач Входит в Перечень изданий ВАК Справочник врача общей практики Входит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие Терапевт Входит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие Физиотерапевт Входит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие Хирург Входит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие
46106
12366
84881
12524
84811
12371
36273
99369 Экономист лечебного учреждения
ПРОМИЗДАТ
www.промиздат.рф, www.promizdat.com 4212
4002 84822
1800
1710 82714
12537 Водоочистка Входит в Перечень изданий ВАК Генеральный директор. 16576 Управление промышленным предприятием инженер. Управление 16577 Главный промышленным производством
3786
3594
9300
8838
5520
5244
1983
1884
82715
2055
1953
82716
механик 16578 Главный Входит в Перечень изданий ВАК
4686
4452
2055
1953
82717
энергетик 16579 Главный Входит в Перечень изданий ВАК
4686
4452
3894
3702
84815
по маркетингу 12530 Директор и сбыту
8982
8532
36390
12424 Инновационный менеджмент
8418
7998
84818
и автоматика: 12533 КИП обслуживание и ремонт Лизинг 16585 Входит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие Нормирование и оплата труда 16582 в промышленности Входит в Перечень изданий ВАК Оперативное управление в электроэнергетике. 12774 Подготовка персонала и поддержание его квалификации Выходит 3 раза в полугодие Охрана труда 16583 и техника безопасности на промышленных предприятиях
4614
4386
2514
2388
4542
4314
2094
1989
4110
3906
82718
16580 Управление качеством
4146
3936
84817
Электрооборудование: обслуживание 12532 эксплуатация, и ремонт Входит в Перечень изданий ВАК
4614
4386
84816
12531 Электроцех
3960
3762
НАУКА и КУЛЬТУРА
www.наука-и-культура.рф, www.n-cult.ru 20285 46310
Бухгалтерский учет 61866 и налогообложение в бюджетных организациях культурологии 24192 Вопросы Входит в Перечень изданий ВАК
4614
4386
2490
2364
82723
20238
61868 Дом культуры
3276
3114
84794
12303 Музей
3534
3360
46313
24217 Ректор вуза
5622
5340
47392
галерея – ХХI век 45144 Русская Выходит 3 раза в полугодие
1371
1302
46311
24218 Ученый совет
4980
4734
71294
79901 Хороший секретарь
2232
2118
46030
Гимназия. Лицей: 11830 Школа. наши новые горизонты
2334
2220
46103
вуза 12298 Юрист Входит в Перечень изданий ВАК
3786
3594
82720
18256
82721
ИНФОРМАЦИЯ О ПОДПИСКЕ НА ЖУРНАЛЫ ИД «ПАНОРАМА» Индексы по каталогу
«Роспечать» «Почта и «Пресса России» России»
НАИМЕНОВАНИЕ
СЕЛЬХОЗИЗДАТ
Стоимость подписки по каталогам без учета стоимости доставки
Стоимость подписки через редакцию с учетом стоимости доставки
www.сельхозиздат.рф, www.selhozizdat.ru
Индексы по каталогу
«Роспечать» «Почта и «Пресса России» России»
НАИМЕНОВАНИЕ
Лизинг 16585 Входит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие и оплата труда 16624 Нормирование на автомобильном транспорте Охрана труда и техника безопасности 16623 на автотранспортных предприятиях и в транспортных цехах машины и механизмы 12479 Самоходные Выходит 3 раза в полугодие
82723
82767
в сельском хозяйстве 16609 Бухучет Входит в Перечень изданий ВАК
4614
4386
84834
сельскохозяйственных 12396 Ветеринария животных
3786
3594
82763
16605 Главный агроном
3354
3186
82764
зоотехник 16606 Главный Входит в Перечень изданий ВАК Землеустройство, кадастр 12306 и мониторинг земель Входит в Перечень изданий ВАК Кормление сельскохозяйственных 61870 животных и кормопроизводство Входит в Перечень изданий ВАК Лизинг 16585 Входит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие Нормирование и оплата труда 16608 в сельском хозяйстве Охрана труда 16607 и техника безопасности в сельском хозяйстве и рыбное хозяйство 22307 Рыбоводство Выходит 3 раза в полугодие
3354
3186
4110
3906
3312
3144
82720
2514
2388
82766
Нормирование и оплата труда 16582 в промышленности Входит в Перечень изданий ВАК и оплата труда 16608 Нормирование в сельском хозяйстве
3816
3624
82772
3894
3702
84791 37065 82723 82766 82765 37194
техника: 12394 Сельскохозяйственная обслуживание и ремонт
84836
1728
1641
3390
3222
СТРОЙИЗДАТ
82723 82772
труда и техника 16612 Охрана безопасности в строительстве
3816
36986
и изыскательские 99635 Проектные работы в строительстве
4290
4074
41763
44174 Прораб
3960
3762
84782
работа 12378 Сметно-договорная в строительстве Строительство: 16611 новые технологии – новое оборудование 16613 Юрисконсульт в строительстве
82770
82769 82771 Т Т Р
Д А
А Н
С И З
82776 79438
36393
4734
2271
2157
4686
4452
82782
и оплата труда 16624 Нормирование на автомобильном транспорте
4614
4386
82765
труда и техника 16607 Охрана безопасности в сельском хозяйстве
3894
3702
82770
труда и техника 16612 Охрана безопасности в строительстве Охрана труда и техника в учреждениях 16612 безопасности здравоохранения Выходит 3 раза в полугодие Охрана труда и техника на автотранспортных 16623 безопасности предприятиях и в транспортных цехах Охрана труда 16583 и техника безопасности на промышленных предприятиях
3816
3624
1944
1848
3894
3702
4110
3906
84789
12308 Служба занятости
3390
3222
20283
Социальная политика социальное партнерство 61864 иВходит в Перечень изданий ВАК Выходит 3 раза в полугодие
2349
2232
82781
82721
äàòåëüñòâî èç
80757
4980
3702
и оплата труда 16614 Нормирование в строительстве
5244
4314
3894
3624
3906
4542
4386
3816
4452
www.трансиздат.рф, www.transizdat.com
4614
4314
84791 5520
2388
4542
46308 4110
2514
ЧЕЛОВЕК и ТРУД
ÞÐ
4686
Стоимость подписки через редакцию с учетом стоимости доставки
www.человек-и-труд.рф, www.peopleandwork.ru
3624
ТРАНСИЗДАТ
эксплуатация, 16618 Автотранспорт: обслуживание, ремонт Грузовое и пассажирское 99652 автохозяйство Входит в Перечень изданий ВАК
82781
82770
www.стройпресса.рф, www.stroyizdat.com Бухучет в строительных 16615 организациях 4614 4386 Входит в Перечень изданий ВАК Лизинг 16585 Входит в Перечень изданий ВАК 2514 2388 Выходит 3 раза в полугодие и оплата труда 16614 Нормирование 4686 4452 в строительстве
82773
82782
Стоимость подписки по каталогам без учета стоимости доставки
ÈÇÄÀÒ
ЮРИЗДАТ
www.юриздат.рф, www.jurizdat.su
24191 Вопросы трудового права Землеустройство, кадастр 12306 и мониторинг земель Входит в Перечень изданий ВАК Кадровик 99656 Входит в Перечень изданий ВАК
3606
3426
4110
3906
5388
5118
36394
99295 Участковый
786
744
82771
16613 Юрисконсульт в строительстве
5520
5244
46103
вуза 12298 Юрист Входит в Перечень изданий ВАК
3786
3594
ПОДРОБНАЯ ИНФОРМАЦИЯ О ПОДПИСКЕ: телефоны: (495) 211-5418, 749-2164, 749-4273, факс: (499) 346-2073, (495) 664-2761. E-mail: podpiska@panor.ru www.panor.ru
2012 ПОДПИСКА
МЫ ИЗДАЕМ ЖУРНАЛЫ БОЛЕЕ 20 ЛЕТ. НАС ЧИТАЮТ МИЛЛИОНЫ! ОФОРМИТЕ ГОДОВУЮ ПОДПИСКУ И ЕЖЕМЕСЯЧНО ПОЛУЧАЙТЕ СВЕЖИЙ НОМЕР ЖУРНАЛА!
ДОРОГИЕ ДРУЗЬЯ! МЫ ПРЕДЛАГАЕМ ВАМ РАЗЛИЧНЫЕ ВАРИАНТЫ ОФОРМЛЕНИЯ ПОДПИСКИ НА ЖУРНАЛЫ ИЗДАТЕЛЬСКОГО ДОМА «ПАНОРАМА»
2
ПОДПИСКА НА САЙТЕ
ПОДПИСКА НА САЙТЕ www.panor.ru На все вопросы, связанные с подпиской, вам с удовольствием ответят по телефонам (495) 211-5418, 749-2164, 749-4273.
3 1
ПОДПИСКА НА ПОЧТЕ
ин . Бос ик А н ж о Худ
ОФОРМЛЯЕТСЯ В ЛЮБОМ ПОЧТОВОМ ОТДЕЛЕНИИ РОССИИ
Для этого нужно правильно и внимательно заполнить бланк абонемента (бланк прилагается). Бланки абонементов находятся также в любом почтовом отделении России или на сайте ИД «Панорама» – www.panor.ru. Подписные индексы и цены наших изданий для заполнения абонемента на подписку есть в каталогах: «Газеты и журналы» Агентства «Роспечать», «Почта России» и «Пресса России». Образец платежного поручения
ПОДПИСКА В РЕДАКЦИИ
Подписаться на журнал можно непосредственно в Издательстве с любого номера и на любой срок, доставка – за счет Издательства. Для оформления подписки необходимо получить счет на оплату, прислав заявку по электронному адресу podpiska@panor.ru или по факсу: (499) 346-2073, (495) 664-2761, а также позвонив по телефонам: (495) 211-5418, 749-2164, 749-4273. Внимательно ознакомьтесь с образцом заполнения платежного поручения и заполните все необходимые данные (в платежном поручении, в графе «Назначение платежа», обязательно укажите: «За подписку на журнал» (название журнала), период подписки, а также точный почтовый адрес (с индексом), по которому мы должны отправить журнал). Оплата должна быть произведена до 15-го числа предподписного месяца.
4
ПОДПИСКА ЧЕРЕЗ АЛЬТЕРНАТИВНЫЕ АГЕНТСТВА
Подписаться на журналы Издательского Дома «ПАНОРАМА» можно также с помощью альтернативных подписных агентств, о координатах которых вам сообщат по телефонам: (495) 211-5418, 749-2164, 749-4273.
XXXXXXX
Поступ. в банк плат.
Списано со сч. плат.
ПЛАТЕЖНОЕ ПОРУЧЕНИЕ № Сумма прописью ИНН
электронно Вид платежа
Дата
Три тысячи пятьсот девяносто четыре рубля 00 копеек КПП
Сумма 3594-00 Сч. №
Плательщик БИК Сч. № БИК 044525225 Сч. № 30101810400000000225
Банк плательщика ОАО «Сбербанк России», г. Москва Банк получателя ИНН 7729601370 КПП 772901001 ООО «Издательский дом «Панорама» Московский банк Сбербанка России ОАО, г. Москва Получатель
Сч. №
40702810538180000321
Вид оп. 01 Наз. пл. Код
Срок плат. Очер. плат. 6 Рез. поле
Подписи
Отметки банка
ȠȓȞȡ ș Ȏ ȑ ȣ ȏȡ șȎȠȓ Ș Ȝȝ ȘȠȜȞ
DzȖȞȓ
Банк получателя: ОАО «Сбербанк России», г. Москва БИК 044525225, к/сч. № 30101810400000000225
н оси А. Б
Назначение платежа
Счет № 1 на под ЖК2012 писку
ник ож Худ
Оплата за подписку на журнал Ветеринария сельскохозяйственных животных (6 экз.) на 6 месяцев, в том числе НДС (10%)______________ Адрес доставки: индекс_________, город__________________________, ул._______________________________________, дом_____, корп._____, офис_____ телефон_________________
РЕКВИЗИТЫ ДЛЯ ОПЛАТЫ ПОДПИСКИ Получатель: ООО «Издательский дом «Панорама» Московский банк Сбербанка России ОАО, г. Москва ИНН 7729601370 / КПП 772901001, р/cч. № 40702810538180000321
М.П.
На правах рекламы
II
Ветеринария сельскохозяйственных животных
полугодие
2012
Выгодное предложение! Подписка на 2-е полугодие 2012 года по льготной цене – 3594 руб. (подписка по каталогам – 3786 руб.)* Оплатив этот счет, вы сэкономите на подписке около 10% ваших средств. Почтовый адрес: 125040, Москва, а/я 1 По всем вопросам, связанным с подпиской, обращайтесь по тел.: (495) 211-5418, 749-2164, 749-4273, тел./факс: (499) 346-2073, (495) 664-2761 или по e-mail: podpiska@panor.ru ПОЛУЧАТЕЛЬ:
ООО «Издательский дом «Панорама» ИНН 7729601370 КПП 772901001 р/cч. № 40702810538180000321 Московский банк Сбербанка России ОАО, г. Москва БАНК ПОЛУЧАТЕЛЯ: БИК 044525225
к/сч. № 30101810400000000225
ОАО «Сбербанк России», г. Москва
СЧЕТ № 2ЖК2012 от «____»_____________ 201__ Покупатель: Расчетный счет №: Адрес, тел.: №№ п/п
1
Предмет счета (наименование издания) Ветеринария сельскохозяйственных животных (подписка на 2-е полугодие 2012 года)
Единица измерения
Периодичность Цена Кол-во выхода за 1 экз. в полугодии
экз.
6
6
599
Сумма с учетом НДС (10%), руб 3594
2 3 ИТОГО: В ТОМ ЧИСЛЕ НДС (10%) ВСЕГО К ОПЛАТЕ:
Генеральный директор
К.А. Москаленко
Главный бухгалтер
Л.В. Москаленко М.П. ВНИМАНИЮ БУХГАЛТЕРИИ!
* ОПЛАТА ДОСТАВКИ ЖУРНАЛОВ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ ИЗДАТЕЛЬСТВОМ. ДОСТАВКА ИЗДАНИЙ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ ПО ПОЧТЕ ЗАКАЗНЫМИ БАНДЕРОЛЯМИ ЗА СЧЕТ РЕДАКЦИИ. В СЛУЧАЕ ВОЗВРАТА ЖУРНАЛОВ ОТПРАВИТЕЛЮ, ПОЛУЧАТЕЛЬ ОПЛАЧИВАЕТ СТОИМОСТЬ ПОЧТОВОЙ УСЛУГИ ПО ВОЗВРАТУ И ДОСЫЛУ ИЗДАНИЙ ПО ИСТЕЧЕНИИ 15 ДНЕЙ. СТОИМОСТЬ ПОДПИСКИ ПО КАТАЛОГАМ УКАЗАНА БЕЗ УЧЕТА СТОИМОСТИ ДОСТАВКИ. В ГРАФЕ «НАЗНАЧЕНИЕ ПЛАТЕЖА» ОБЯЗАТЕЛЬНО УКАЗЫВАТЬ ТОЧНЫЙ АДРЕС ДОСТАВКИ ЛИТЕРАТУРЫ (С ИНДЕКСОМ) И ПЕРЕЧЕНЬ ЗАКАЗЫВАЕМЫХ ЖУРНАЛОВ. ДАННЫЙ СЧЕТ ЯВЛЯЕТСЯ ОСНОВАНИЕМ ДЛЯ ОПЛАТЫ ПОДПИСКИ НА ИЗДАНИЯ ЧЕРЕЗ РЕДАКЦИЮ И ЗАПОЛНЯЕТСЯ ПОДПИСЧИКОМ. СЧЕТ НЕ ОТПРАВЛЯТЬ В АДРЕС ИЗДАТЕЛЬСТВА. ОПЛАТА ДАННОГО СЧЕТА-ОФЕРТЫ (СТ. 432 ГК РФ) СВИДЕТЕЛЬСТВУЕТ О ЗАКЛЮЧЕНИИ СДЕЛКИ КУПЛИ-ПРОДАЖИ В ПИСЬМЕННОЙ ФОРМЕ (П. 3 СТ. 434 И П. 3 СТ. 438 ГК РФ).
ОБРАЗЕЦ ЗАПОЛНЕНИЯ ПЛАТЕЖНОГО ПОРУЧЕНИЯ
Списано со сч. плат.
Поступ. в банк плат.
ПЛАТЕЖНОЕ ПОРУЧЕНИЕ № Дата
Вид платежа
Сумма прописью
ИНН
КПП
Сумма
Сч.№ Плательщик
БИК Сч.№ Банк Плательщика
ОАО «Сбербанк России», г. Москва
БИК Сч.№
044525225 30101810400000000225
ИНН 7729601370 КПП 772901001 ООО «Издательский дом «Панорама» Московский банк Сбербанка России ОАО, г. Москва
Сч.№
40702810538180000321
Получатель
Банк Получателя
Вид оп.
Срок плат.
Наз.пл.
Очер. плат.
Код
Рез. поле
Оплата за подписку на журнал Ветеринария сельскохозяйственных животных (___ экз.) на 6 месяцев, в том числе НДС (10%). ФИО получателя______________________________________________ Адрес доставки: индекс_____________, город____________________________________________________, ул.________________________________________________________, дом_______, корп._____, офис_______ телефон_________________, e-mail:________________________________ Назначение платежа Подписи
Отметки банка
М.П.
!
При оплате данного счета в платежном поручении в графе «Назначение платежа» обязательно укажите: X Название издания и номер данного счета Y Точный адрес доставки (с индексом) Z ФИО получателя [ Телефон (с кодом города)
По всем вопросам, связанным с подпиской, обращайтесь по тел.: (495) 211-5418, 749-2164, 749-4273 тел./факс: (499) 346-2073, (495) 664-2761 или по e-mail: podpiska@panor.ru
Кому
Куда
ф. СП-1
(почтовый индекс)
(индекс издания)
84834
2
4
5
на 20
место
литер
6
7
8
9
10
11
на
газету журнал
(наименование издания)
3
4
5
на 20
(фамилия, инициалы)
2
(адрес)
6
7
8
12 год по месяцам: 9
10
11
12
(индекс издания)
84834
подписки __________руб. ___коп. Количество Стоимость переадресовки __________ руб. ___коп. комплектов
1
12
ДОСТАВОЧНАЯ КАРТОЧКА
(адрес)
12 год по месяцам:
Количество комплектов:
(фамилия, инициалы)
(почтовый индекс)
3
(наименование издания)
Ветеринария сельскохозяйственных животных
ПВ
Кому
Куда
1
газету журнал
Ветеринария сельскохозяйственных животных
АБОНЕМЕНТ на
Стоимость подписки на журнал указана в каталогах Агентства «Роспечать» и «Пресса России»
Кому
Куда
ф. СП-1
(почтовый индекс)
2
4
5
на 20
место
7
8
12396
на
газету журнал
(адрес)
9
10
11
3
4
5
на 20
(фамилия, инициалы)
2
(адрес)
6
7
8
12 год по месяцам: 9
10
11
12
12396
(индекс издания)
подписки __________руб. ___коп. Количество Стоимость переадресовки __________ руб. ___коп. комплектов
1
12
(индекс издания)
ДОСТАВОЧНАЯ КАРТОЧКА
(наименование издания)
литер
6
12 год по месяцам:
(фамилия, инициалы)
(почтовый индекс)
3
Количество комплектов:
газету журнал
Ветеринария сельскохозяйственных животных
ПВ
Кому
Куда
1
(наименование издания)
на
Ветеринария сельскохозяйственных животных
АБОНЕМЕНТ
Стоимость подписки на журнал указана в каталоге «Почта России»
ПРОВЕРЬТЕ ПРАВИЛЬНОСТЬ ОФОРМЛЕНИЯ АБОНЕМЕНТА! На абонементе должен быть проставлен оттиск кассовой машины. При оформлении подписки (переадресовки) без кассовой машины на абонементе проставляется оттиск календарного штемпеля отделения связи. В этом случае абонемент выдается подписчику с квитанцией об оплате стоимости подписки (переадресовки).
Для оформления подписки на газету или журнал, а также для переадресования издания бланк абонемента с доставочной карточкой заполняется подписчиком чернилами, разборчиво, без сокращений, в соответствии с условиями, изложенными в подписных каталогах. Заполнение месячных клеток при переадресовании издания, а также клетки «ПВ-МЕСТО» производится работниками предприятий связи и подписных агентств.
ПРОВЕРЬТЕ ПРАВИЛЬНОСТЬ ОФОРМЛЕНИЯ АБОНЕМЕНТА!
На абонементе должен быть проставлен оттиск кассовой машины. При оформлении подписки (переадресовки) без кассовой машины на абонементе проставляется оттиск календарного штемпеля отделения связи. В этом случае абонемент выдается подписчику с квитанцией об оплате стоимости подписки (переадресовки).
Для оформления подписки на газету или журнал, а также для переадресования издания бланк абонемента с доставочной карточкой заполняется подписчиком чернилами, разборчиво, без сокращений, в соответствии с условиями, изложенными в подписных каталогах.
Заполнение месячных клеток при переадресовании издания, а также клетки «ПВ-МЕСТО» производится работниками предприятий связи и подписных агентств.
ПРАЙС-ЛИСТ НА РАЗМЕЩЕНИЕ РЕКЛАМЫ В ИЗДАНИЯХ ИД «ПАНОРАМА»
НАШИ ЖУРНАЛЫ – ВАШ УСПЕХ! Самый крупный в России Издательский дом «Панорама», обладая солидным интеллектуальным и информационным ресурсом, выпускает около сотни ежемесячных деловых, информационно-аналитических, научно-практических и познавательных журналов по экономике, финансам, юриспруденции, промышленному производству, строительству, здравоохранению, сельскому хозяйству, торговле и транспорту. Наши издания гарантированно поддерживают профессиональный интерес многотысячной читательской аудитории — принимающих решения лидеров и специалистов компаний и фирм, руководителей государственных, научных организаций, деловых ассоциаций и иностранных представительств. Интерес к журналам Издательского дома «Панорама» из года в год растет. И это естественно, ведь авторы публикаций — авторитетные эксперты, «командиры» самых передовых предприятий и главы крупнейших ассоциаций, ученые и специалисты ведущих отраслевых научных центров, Российской академии наук и крупных учебных заведений России и мира. Среди главных редакторов журналов, председателей и членов редсоветов и редколлегий — 168 академиков, членов-корреспондентов академий наук, профессоров и 200 практиков — опытных хозяйственников и практиков различных отраслей экономики, сферы научной и общественной деятельности. Свидетельством высокого авторитета и признания изданий ИД «Панорама» является то, что каждый десятый журнал включен в Перечень рецензируемых изданий и журналов Высшей аттестационной комиссии Российской Федерации, в которых публикуют основные результаты диссертаций на соискание ученой степени доктора и кандидата наук.
Формат 1/1 полосы
ОСНОВНОЙ БЛОК Размеры, мм (ширина х высота) 205 х 285 – обрезной 215 х 295 – дообрезной
БУДЕМ РАДЫ ВИДЕТЬ ВАС В ЧИСЛЕ НАШИХ РЕКЛАМОДАТЕЛЕЙ! ПРАЙС-ЛИСТ СМОТРИТЕ, ПОЖАЛУЙСТА, В КОНЦЕ ЖУРНАЛА.
Стоимость, ч/б
62 000
31 000
1/2 полосы
102 х 285 / 205 х 142
38 000
19 000
1/3 полосы
68 х 285 / 205 х 95
31 000
15 000
1/4 полосы
102 х 142 / 205 х 71
25 000
12 000
Статья 1/1 полосы
3500 знаков + фото
32 000
25 000
Формат Первая обложка Вторая обложка Третья обложка Четвертая обложка Представительская полоса
Многие рекламодатели уже оценили наши издания как хорошую информационную площадку. Наши преимущества — огромная аудитория, получающая журналы по подписке, гибкий подход к рекламным планам, оптимальные варианты взаимодействия с целевой аудиторией.
Стоимость, цвет
Первый разворот
ПРЕСТИЖ-БЛОК Размеры, мм (ширина х высота) Размер предоставляется отделом допечатной подготовки изданий 205 х 285 – обрезной 215 х 295 – дообрезной 205 х 285 – обрезной 215 х 295 – дообрезной 205 х 285 – обрезной 215 х 295 – дообрезной 205 х 285 – обрезной 215 х 295 – дообрезной 410 х 285 – обрезной 420 х 295 – дообрезной
Стоимость 120 000 105 000 98 000 107 000 98 000 129 000
СКИДКИ Подписчикам ИД «ПАНОРАМА»
10 %
При размещении в 3 номерах
5%
При размещении в 4–7 номерах
10 %
При размещении в 8 номерах
15 %
При совершении предоплаты за 4–8 номера
10 % Все цены указаны в рублях (включая НДС)
Телефон (495) 664-2794 E-mail: promo@panor.ru, reklama.panor@mail.ru www.панор.рф, www.идпанорама.pф, www.panor.ru На правах рекламы
Телефон (495) 664-2794 E-mail: promo@panor.ru, reklama.panor@mail.ru www.панор.рф, www.идпанорама.pф, www.panor.ru На правах рекламы
Ветеринария сельскохозяйственных животных-2012-04-обложки.indd 2
20.02.2012 15:47:50
4/2012 Ветеринария сельскохозяйственных животных
Поздравляем с Днем работников сельского хозяйства и перерабатывающей промышленности!
4/2012
11/2011 Ветеринария сельскохозяйственных животных-2012-04-обложки.indd 1
20.02.2012 15:47:47