UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD ESCUELA DE BIOQUIMUCA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGIA
NOMBRE: Chávez Ibañez Maria DOCENTE: Bioq. Farm. García Carlos Msc. CARRERA: Bioquímica y Farmacia FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: Martes, 21 de junio del 2016 FECHA DE ENTREGA: Martes, 28 de Junio del 2016 CURSO: Quinto PARALELO: ¨A¨ GRUPO: 2
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PRÁCTICA BF.5.09-03
TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR METANOL Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR Metanol Animal de Experimentación: Rata wistar Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. Volumen administrado: 10mL de Alcohol Metílico. TIEMPOS: o o o o o o
Inicio de la práctica: 8:45am Hora de administración del toxico al cobayo: 8:54 am Deceso del animal: 9: 35 am Inicio de la destilación: 10:12 am Finalización de la destilación: 9:48 am Final de la práctica: 10:30 am
SINTOMAS o o o
Ceguera Nistagmos Convulsiones
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Determinar la presencia del toxico en el animal de experimentación con exámenes químicos colorimétricos. 2. Monitorear al animal de experimentación para estudiar los principales efectos que este sufre luego de la intoxicación.
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¨Todo es veneno, nada de veneno todo depende de la dosis¨
MATERIALES:
SUSTANCIAS:
o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o
o o o o o o o o o o o o o
Soporte de hierro Pinza de nuez Vaso de precipitación 250ml Matraz Erlenmeyer 250ml Equipo de decisión Bisturí Mangueras Balón de destilación Agitador Mechero de alcohol Tabla de disección Panema Cronometro Jeringa de 10ml Probeta de 50ml Refrigerante Cinta de embalaje Aro de hierro Fosforo Piola Pipetas Pinza para tubos Funda plástica Perlas de vidrio Tubos de ensayos Mandil Mascarilla Guantes de látex
Agua destilada Cloruro de fenilhidracina 4 % Nitroprusiato de sodio 2,5 % Hidróxido de sodio (NaOH) 0.1N Leche Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4) Cloruro férrico ( Cl3Fe ) Ácido clorhídrico (HCl) Hidróxido de potasio 12 % (KOH) K3Fe(CN)6 Formol Aceite mineral Ácido tartárico Etanol
PROCEDIMIENTO 1. Preparar el mesón de trabajo y con ello materiales y sustancias, además de implementos de bioseguridad. 2. Administrar 10ml de Metanol por vía intraperitoneal 3. Monitorear síntomas que se presentan y en qué tiempo hasta la muerte del cobayo. 4. Atamos el cobayo a una tabla de disección. 5. Procedemos rasurarle toda la parte abdominal donde se hará el corte. 6. Con la ayuda del bisturí procedemos la disección del cobayo, y observamos los cambios (coloración, dureza, etc.) que presentan sus órganos.
7. Procedemos a colocar los fluidos y las vísceras afectadas por el toxico (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitación). 8. A las vísceras ya picadas le añadimos 25ml de solución de ácido tartárico. 9. Esto lo llevamos a un balón. 10. Procedemos a destilar. 11. El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor lo recibimos en solución de Hidróxido de Sodio 0.1N. 12. Al destilado lo convertimos de matanol a metanal con una lámina de cobre, que se la calienta hasta rojo vivo se la introduce en el destilado las veces necesarias hasta que produzca una eliminación de partículas de color gris. 13. Una vez realizado el paso anterior, se practican las diferentes reacciones colorimétricas cualitativas. REACCIONES: 1. Reacción de Schiff.- 1ml de muestra añadimos 1ml de permanganato de potasio al 1%, mezclamos y adicionamos 3 gotas de ácido sulfúrico, dejar reposar por 3 minutos, agregar unas gotas de solución saturada de ácido oxálico(hasta que decolore la muestra), agregarle nuevamente 3 gotas de ácido sulfúrico puro, añadir 1ml de Fushina bisulfatada(Reactivo de Schiff). Produce un color violeta intenso si es positivo. 2. Reaccion de Rimini.- 5ml del destilado agregar 10 gotas de cloruro de JromotrópicoJa al 4% + 1ml de solución de hidróxido de sodio. Produce una coloración azul intensa si es positivo. 3. Con lla fenil hidracina.- Acidificar 1 medio fuertemente con ácido clorhídrico y agregamos 1 ml de muestra, a esto le agregamos un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 3 gotas de solución de Jromotrópico de potasio al 5%, posterior a esto añadir unas gotas de hidróxido de potasio al 12%. Produce una coloración de rojo grosella en caso de ser positivo. 4. Con el ácido Cromotrópico.- 1 ml de muestra + ácido Jromotrópico+ 3 gotas de ácido sulfúrico, llevarlo a la llama. Produce una coloración roja después de calentarla a la llama si es positivo. 5. Reacción de Hehner.-1 gota del destilado+4 ml de leche+ 3 gotas de ácido sulfúrico concentrado con cloruro férrico). Produce coloración violeta o un azul violeta si es positivo.
GRAFICOS:
1. Preparamos los 10ml que vamos a inyectar
4. se separa las vísceras afectadas y fluidos
2. Inyectamos al cobayo vía intraperitoneal
5. se añaden 25ml de solución de ácido tartarico
3. se realiza la disección al cobayo
6. se transvasa a un balón para posterior destilación.
7. Se añaden las 50 perlas de vidrio
8. Se monta el equipo de destilación y se destila.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO: 1) REACCIÓN DE SHIFF: Reacción
Positivo característico
violeta
2) Reacción de Rímini: Reacción
negativo
marrón
3) REACCIÓN CON LA FENILHIDRACINA: Reacción
positivo característico
Coloración rojo grosella
4) REACCIÓN DE MARQUIS: Reacción
positivo no característico
Coloración violeta
5) CON EL ÁCIDO CROMOTRÓPICO: CIANURO DE SODIO + ÁCIDO SULFÚRICO.
Reacción
positivo no característico
rojo
6) REACCIÓN DE HEHNER: Reacción
positivo no característico
violeta o rojo violeta
OBSERVACIONES: Hemos observado que al administrar me tanol( 10ml) por vía intraperitoneal al animal de experimentación, se presentaron las siguientes manifestaciones: Ceguera, convulsiones nistagmos, vómitos. CONCLUSIONES: Mediante esta práctica observamos cuales son las manifestaciones que se presentan ante la administración del metanol en la rata de wistar, que órganos afecta el toxico, los cuales fueron: hinchazón del estómago, vesícula inflamada y mediante las reacciones de reconocimientos se identificó la presencia del toxico. RECOMENDACIONES:
Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar posteriormente accidente alguno Al momento de administrar la dosis realizarlo en la vía correcta, para evitar de esta manera provocar embolias. Preparar correctamente los reactivos a la concentración requerida en la práctica y así mismo utilizar pipetas o bulbos para cada reactivo. Culminada la práctica se debe dejar el área desinfectada, para evitar contaminación con las sustancias químicas utilizadas.
CUESTIONARIO: 1. QUE ES EL METANOL? El compuesto químico metanol, también conocido como alcohol metílico o alcohol de madera, es el alcohol más sencillo. A temperatura ambiente se presenta como un líquido ligero (de baja densidad), incoloro, inflamable y tóxico que se emplea como anticongelante, disolvente y combustible. Su fórmula química es CH3OH (CH4O).
2. QUE ES EL ACIDO FORMICO?
Es un ácido orgánico de un solo átomo de carbono, y por lo tanto el más simple de los ácidos orgánicos. Su fórmula es H-COOH (CH2O2), 3.
CUALES SON LOS PRINCIPALES USOS DEL METANOL? Síntesis química. Solvente Industrial. Deshumidificante. Anticongelante. Industria del plástico. Pinturas. Curtido de pieles.
GLOSARIO: CIANOSIS: Cianosis es la coloración azulada de la piel, mucosas y lechos ungueales,1 usualmente debida a la presencia de concentraciones iguales o mayores a 5 g/dL de hemoglobina sin oxígeno en los vasos sanguíneos cerca de la superficie de la piel,2 o de pigmentos hemoglobínicos anómalos (metahemoglobina o sulfohemoglobina) en los hematíes o glóbulos rojos. Debido a que la cianosis depende de la cantidad y no de un porcentaje de hemoglobina desoxigenada, es mucho más fácil hallarla en estados con aumento en el volumen de glóbulos rojos (policitemia) que en aquellos casos con disminución en la masa eritrocitaria (anemia). Puede ser difícil de detectar en los pacientes con piel muy pigmentada. ADULTERACION: Alteración de la calidad o pureza de algo por la adición de una sustancia extraña, en este caso adulterar un alcohol, es agregar sustancias extrañas como el metanol para recibir un beneficio. ACIDOSIS METABOLICA: La acidosis metabólica es uno de los trastornos del equilibrio ácido-base, caracterizado por un incremento en la acidez del plasma sanguíneo y es, por lo general, una manifestación de trastornos metabólicos en el organismo. El identificar la enfermedad desencadenante es la clave para la corrección del trastorno.
WEBGRAFÍA
CARACTERISTICAS DEL METANOL ECUARED. (En línea). [Fecha de consulta: sábado 21 de junio del 2014]. Disponible en: http://www.ecured.cu/index.php/Metanol INTOXICACIONES POR METANOL. (En línea). [Fecha de consulta: sábado 21 de junio del 2014]. Disponible en: http://www.drmoscoso.com/metanol.html TODO SOBRE EL METANAL. (En línea). [Fecha de consulta: sábado 21 de junio del 2014]. Disponible en: http://pt.wikipedia.org/wiki/Metanal
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