CONTROL BACTERIANO I Y II AUTORES DOCENTES MICROBIOLOGIA
CLAUDIA CLAVIJO ROMERO MARCELA GOMEZ GARZON ADRIANA JIMENEZ ROJAS DIANA ORTIZ JIMENEZ
CONTROL BACTERIANO I Y II OBJETIVO Al finalizar la sesión Nª 3-4, el estudiante estará en capacidad de sustentar en forma apropiada los principios de la Esterilización y desinfección. Al finalizar la sesión Nª 3-4, el estudiante estará en capacidad de probar apropiadamente los diferentes métodos físicos y químicos para esterilización y desinfección a bacterias vivas Al finalizar la sesión Nª 3-4, el estudiante estará en capacidad de valorar convenientemente las aplicaciones de los métodos de desinfección y esterilización en el entorno hospitalario. METODOS DE ESTERILIZACION 1. Métodos Físicos Calor Seco: Incluye los siguientes métodos: Flameado: es un procedimiento simple y eficaz, consiste en la exposición de un objeto a efecto de la llama hasta la incandescencia. Las asas de cultivo se esterilizan de esta forma. Incineración: es el mejor sistema para esterilizar todos aquellos productos en los que no importe su destrucción. Método empleado para la destrucción de material biológico. Horno: proporciona una fuente de calor seco. El tiempo de esterilización dependerá de la temperatura. Ej.: a 180º 20 minutos; a 100-140º 60 minutos. Se utiliza para esterilizar material de vidrio debidamente envuelto en papel, metal. etc. Calor Húmedo: La esterilización con calor húmedo (vapor de agua) es mucho más rápida y eficaz que el calor seco debido a que las moléculas de agua desnaturalizan las proteínas de forma irreversible mediante ruptura de las uniones H entre los grupos peptídicos a temperaturas relativamente bajas. Autoclave: Es el aparato más empleado para generar calor húmedo. Tiene el mismo principio de una olla de presión casera. Consiste en una cámara en la que el aire puede ser sustituido por vapor de agua sometida a presión. Se opera generalmente a 121ºC y 15 lb de presión durante 20 minutos. Por su bajo costo, se utiliza frecuentemente en los hospitales y laboratorios para esterilizar todo material resistente al calor como objetos metálicos y de vidrio, incluso el plástico grueso puede esterilizarse en autoclave (ej.: biberones). Radiaciones: La luz UV es absorbida a una longitud de onda de 240 a 280 nm por ácidos nucleicos causando daños genéticos alterando las bases. Fue un método muy usado pero debido al efecto potencial deletéreo sobre el DNA humano ha caído en desuso. Se emplea aún en la preparación de
vacunas, cabinas de seguridad biológica, lugares de trabajo como mesas de laboratorios, eliminación del bacilo de la tuberculosis en cuartos de hospitales. Radiaciones ionizantes: actúan lesionando ácidos nucleicos. Se la utiliza sobre todo en procesos industriales para esterilizar dispositivos quirúrgicos, guantes, jeringas. 2. Métodos Químicos. Óxido de etileno: Es un gas inflamable y potencialmente explosivo, muy penetrante que inactiva microorganismos mediante la alquilación de proteínas, ADN y ARN. El material se expone a esterilizar a un 5-10% de óxido de etileno en dióxido de carbono a 50-60º en condiciones de humedad controlada durante 4 a 6 horas. Es necesario someterlo después a un período de aireación de 24 horas debido a su carácter mutagénico. Es un agente efectivo en la esterilización de material termolábil como prótesis, catéteres de plástico. Se emplea actualmente en los Hospitales. Plasma de peróxido de Hidrógeno: Este método transforma mediante radiofrecuencia el peróxido de hidrógeno en plasma, generando a baja temperatura radicales reactivos de oxígeno que destruyen los microorganismos. Al final del proceso se forma agua y oxígeno. Este método permite esterilizar objetos termolábiles en corto tiempo (20 minutos) y sin generación de residuos tóxicos. Es el mejor método de esterilización, su problema es el costo. Se emplea en nuestros hospitales. METODOS DE DESINFECCIÓN Formaldehido o metanol: Es un aldehído que en su estado natural es un gas fácilmente soluble en agua. Actúa produciendo alquilación de grupos amino y sulfihidrilo de las proteínas y de los anillos de nitrógeno de las bases nitrogenadas. Se emplea al 10% en agua y es popularmente conocido como “formol”. Fue ampliamente en los hospitales y en la industria pero, debido a su potencial cancerígeno fue abolido en la mayoría de procesos. Actualmente se emplea en los laboratorios de patología para la fijación de los tejidos extraídos en una biopsia o resección quirúrgica y en la conservación de cadáveres empleados para la disección anatómica. Glutaraldehído: Se emplea a una concentración de 2%. En esta solución se introducen los objetos que se quieren desinfectar durante un tiempo aproximado de 20 minutos. Después los objetos deben ser lavaos con abundante agua porque este químico es irritante para la piel y mucosas. Se emplea en los hospitales para la desinfección de endoscopios, conos de otoscopia. Su uso cada vez es más revaluado por su toxicidad. Hipoclorito de sodio: Como su nombre lo indica contiene cloro en estado oxidado 1+. El cual es el responsable del poder oxidativo desinfectante de este químico. El hipoclorito de uso casero viene a una concentración de 5%. En los hospitales se hacen diluciones en agua a partir de la concentración de 5% para obtener soluciones que van desde los 5000 ppm empleadas para inactivar fluidos biológicos que se derraman hasta 200 ppm empleada para trapear áreas administrativas. En general se dejan actuar durante cinco minutos y después se retiran. Se puede emplear para desinfectar el mobiliario del cuarto de los pacientes, pero esta práctica está siendo abandonada debido al poder corrosivo de este químico. Amonio cuaternario: Actúan uniéndose a fosfolípidos de membrana alterando su permeabilidad. Su actividad está determinada por la longitud de su cadena química y las presentaciones comerciales se clasifican de primera a cuarta generación. Se emplean ampliamente en procesos de desinfección hospitalaria y debido a que permiten hacer la limpieza-desinfección en un solo paso, no hay que retirarlos, no son corrosivos y han reemplazando al hipoclorito.
Peróxido de Hidrogeno: Su uso más conocido es como antiséptico (agua oxigenada) pero también puede ser usado como desinfectante. Destruye microorganismos mediante la producción de radicales libres de hidroxilo. Su uso como desinfectante es limitado por ejemplo para lentes de contacto o transductores de ecografía. Acido Paracético: Es un desinfectante recientemente desarrollado. Tiene la ventaja de que sus residuos (ácido acético, peróxido de hidrógeno, oxígeno) no son tóxicos y se mantiene estable ante la presencia de materia orgánica y es esporicida. No se conoce bien su mecanismo de acción, aunque se supone que actúa mediante un mecanismo oxidativo. Alcohol: Alcoholes como el etílico o el isopropílico producen la de naturalización de las proteínas. Es más empleado como antiséptico aunque también tiene algunas aplicaciones como desinfectante por ejemplo en la desinfección de campanas de fonendoscopios, brazaletes de tensiómetros, teclados de computador, transductores ecográficos. ANTISEPTICOS Yodopovidona: El yodo como antisépticos es usado desde hace 150 años. Su acción microbicida radica en su unión con aminoácidos sulfurados, nucleótidos y ácidos grasos. La povidona yodada es el yodóforo (transportador de yodo) más empleado. Se usa en concentración al 10% en solución acuosa y jabonosa en la antisepsia quirúrgica de la piel y en lavado quirúrgico de las manos. Para que actúe debe dejarse en contacto con la piel, durante 2-3 minutos, al cabo de los cuales se debe retirar porque puede producir reacciones de hipersensibilidad localizadas. Clorhexidina: Se emplea desde 1954. Es una biguanidina catiónica que se une a la carga negativa de la pared celular bacteriana alterando su permeabilidad osmótica. Se emplea en concentraciones de 0.5%-4% diluida en agua, agua jabonosa o alcohol. Se emplea para el lavado de manos previo a un procedimiento quirúrgico, para la antisepsia de la piel antes de la inserción de un catéter venoso central, en la antisepsia quirúrgica de la piel, en enjuagues bucales. Las soluciones jabonosas deben retirarse, mientras que las soluciones acuosas pueden dejarse, favoreciendo el efecto residual del antiséptico. Puede desencadenar reacciones de hipersensibildad. Alcohol: Su principal uso en los hospitales es la antisepsia de la piel antes de una venopunción o inyección intramuscular. Peróxido de Hidrógeno: Se puede emplear como antiséptico en heridas recién infringidas. Es poco empleado en el medio hospitalario.
ACTIVIDADES Probar la efectividad de algunos esterilizantes, desinfectantes y antisépticos.
1) Esterilización por calor húmedo - Autoclave
ANTES DEL AUTOCLAVE
DESPUES DEL AUTOCLAVE
2) Esterilizaciรณn con Luz UV
3) Desinfecciรณn por ebulliciรณn
2 minntos
10 minutos
Escherichia coli
Bacillus cereus
4) Desinfección con hipoclorito de sodio
ANTES
DESPUES
5) Desinfección con Glutaraldehído
ANTES
DESPUES
Bacillus cereus
Escherichia coli
6) Antisepsia de manos con yodopovidona o alcohol gel.
ANTES
DESPUES
YODOPOVIDONA
ANTES
DESPUES
ALCOHOL GEL
7) Desinfecciรณn con amonio cuaternario
ANTES
DESPUES