Streptococcus

Streptococcus AUTORES DOCENTES MICROBIOLOGIA

CLAUDIA CLAVIJO ROMERO MARCELA GOMEZ GARZON ADRIANA JIMENEZ ROJAS DIANA ORTIZ JIMENEZ

Practica #7 Familia Streptococcaceae: Streptococcus y Enterococcus OBJETIVOS DE LA PRACTICA

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Al finalizar la práctica No. 7, El estudiante estará en capacidad de comprender correctamente las características del género Streptococcus y Enterococcus

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Al finalizar la práctica Nº7, el estudiante estará en capacidad de interpretar apropiadamente las pruebas utilizadas en el laboratorio para identificar y diferenciar los dos géneros.

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Al finalizar la práctica Nº 7, el estudiante estará en capacidad de diferenciar en forma correcta en el laboratorio las especies de importancia medica del genero Streptococcus.

INTRODUCCIÓN

Todos los microorganismos agrupados en estos géneros son cocos gram positivos, catalasa negativos, que generalmente forman cadenas durante su crecimiento. La prueba de catalasa permite la diferenciación de la familia Streptococcaceae de la Micrococcaceae. Las células aisladas son esféricas u ovoides y se dividen en un plano perpendicular al eje de la cadena, de modo que, cuando se presentan en forma de diplococos, pueden tener aspecto de bacilo. Los estreptococos pertenecen a la familia Streptococcaceae, junto con los géneros Pediococcus, Leuconostoc, Lactococcus, Gemella y Aerococcus, que rara vez se aíslan en la clínica.

Los estreptococos son anaerobios facultativos, aunque hay cepas que crecen mejor en condiciones reducidas de oxígeno y que reciben el nombre de microaerofílicos. Los estreptococos son microorganismos ampliamente distribuidos en la naturaleza. Algunos de ellos son flora normal del hombre, otros se asocian a infecciones, bien por acción directa o por fenómenos de hipersensibilidad.

Se trata de un grupo muy heterogéneo de microorganismos, cuya clasificación resulta difícil. Para ello, se recurre a una combinación de características como son:

a. Morfología de las colonias b. Patrones de Hemólisis sobre agar sangre (Hemólisis alfa, beta y gamma)

c. Composición antigénica de las sustancias de la pared celular (Clasificación de Lancefield) d. Reacciones Bioquímicas Uno de los esquemas más útiles de clasificación, se basa en el tipo de hemólisis que produce en Agar Sangre. Esta clasificación preliminar es útil no solo para el laboratorio de microbiología sino también en la clínica porque permite predecir el género y la infección asociada.

TIPO DE HEMOLISIS EN AGAR SANGRE

DESCRIPCION

ALFA

Cuando se presenta destrucción parcial de los glóbulos rojos y da lugar a una pigmentación verdosa. Se observa mejor en agar chocolate.

BETA

Lisis completa de los glóbulos rojos, se observa una zona clara o transparente alrededor de la colonia

GAMMA

No produce hemólisis de los glóbulos rojos.

En la década de los 40s Rebecca Lancefield clasificó los estreptococos B hemolíticos de acuerdo a los antígenos de la pared celular, en grupos denominados A, B, C, D, F y G. Está clasificación, es ampliamente mencionada en la literatura médica, debido a que cada grupo tiende a asociarse con tipos específicos de enfermedad.

CLASIFICACION DE LOS Streptococcus SEGÚN SU TIPO DE HEMOLIIS GRUPO

TIPO HEMÓLISIS

GRUPO A

Beta

GRUPO B

Beta, no hemolisis

GRUPOS C, F, G GRUPO D Enterococcus

Beta Alfa, Beta o No hemolisis

NOMBRE

ENFERMEDADES RELACIONADAS

S. pyogenes

Faringitis, amigdalitis, escarlatina, erisipela, impétigo, celulitis, secuelas no supurativas: fiebre reumática, glómerulonefritis

S. agalactiae

Corioamninitis, sepsis puerperal y neonatal, meningitis neonatal Los grupos ocasionalmente causan enfermedad en humanos (especialmente faringitis).

C, G y F (S. anginosus, S. milleri) Enterococcus faecalis, E.faecium

GRUPO D Streptococcus

Alfa o no hemoliticos

S. bovis

Streptococcus viridans

Alfa o no hemoliticos

Streptococcus Grupo Viridans

S. pneumoniae

Alfa

S. pneumoniae

Patógenos oportunistas asociados a infecciones intrahospitalarias principalmente infección de vía urinaria, infecciones intrabdominales, infecciones de tejidos blandos.

Infecciones del tracto genitourinario, heridas, endocarditis Endocarditis y abscesos dentales, caries.

Neumonía adquirida en la comunidad, meningitis, endocarditis, bacteriemia, empiema y otitis media aguda, sinusitis

Además de las características hemolíticas de los Streptococci es importante observar el pigmento, tamaño, textura, adherencia al agar de las colonias y realizar pruebas adicionales para la identificación definitiva del género y la especie. Estas pruebas son: 1.

Prueba de Bacitracina: Esta es una prueba que se realiza a microorganismos betahemolíticos sospechosos de Streptococcus pyogenes. Se siembran en agar sangre de cordero y se coloca sobre ellos un disco de bacitracina, un antibiótico polipéptido, utilizado únicamente para pruebas in vitro, luego de 18 horas de incubación se observa el halo de inhibición. Un halo mayor de 10 mm interpreta que la bacteria es sensible (prueba positiva) y clasifica como Streptococcus pyogenes ; un halo menor de 10 mm se interpreta como que la bacteria es resistente (prueba negativa) y es sugestivo de Streptococcus  hemolíticos diferentes del Grupo A.

2. Prueba de CAMP: CAMP es la sigla de una prueba desarrollada en 1944 por Chrisbie, A Ekins, Much - Peterson y la cual se ha venido utilizando para diferenciar los estreptococos Beta- hemolíticos. Permite detectar la proteína extracelular difusible del Streptococcus agalactiae que intensifica la hemólisis en agar sangre por parte del Staphylococcus aureus. Una prueba positiva se reconoce por una zona de flecha en el sitio donde se cruzan las estrías de S. agalactiae y S, aureus.

Staphylococcus aureus

Streptococcus Beta-hemolìtico

Streptococcus agalactiae

2. Prueba de Optoquina: Esta prueba utiliza un disco de papel filtro impregnado con optoquina (hidrocloruro de etilhidro cupreína) sobre una placa de agar previamente sembrado con cepas alfahemolíticas. Luego de incubación por 18-24 horas, en atmosfera de CO2, se examina la zona de inhibición. La optoquina lisa los neumococos (prueba positiva), pero los otros Streptococcus alfa hemolíticos son resistentes (prueba negativa).

ACTIVIDADES Prueba de catalasa para TODOS los miembros del género Streptococcus:

NEGATIVO

A. Streptococcus pyogenes:

Gram: cocos grampositivos en cadenas

Beta hemolisis en Agar Sangre y Sensible a la bacitracina (Taxo A)

B. Streptococcus agalactiae: Gram: cocos grampositivos en cadenas

Beta hemolisis en Agar Sangre y Resistente a la bacitracina (Taxo A)

Prueba de CAMP

Streptococcus pyogenes CAPM NEGATIVO

C. Streptococcus pneumoniae:

C. Streptococcus pneumoniae

Streptococcus agalactiae CAMP POSITIVO

C. Streptococcus pneumoniae Gram: Diplococos Grampositivos

Alfa hemolisis en Agar Sangre y Sensible a la optoquina (Taxo P)

D. Streptococcus grupo Viridans :S.mitis, S.sanguis, S.salivarius

Gram: Cocos agrampositivos en cadenas

Alfa hemolisis en Agar Sangre y Resistente a la optoquina (Taxo P)

E. Enterococcus faecalis / Enterococcus faecium:

Gram: Cocos Grampositivos en cadenas

No HemolĂ­tico en Agar Sangre

F. Streptococcus bovis: Gram: Cocos Grampositivos en cadenas

No HemolĂ­tico en Agar Sangre