Neem barbeiro

Produtos Naturais e o Controle do Barbeiro Rhodnius prolixus, vetor da Doen莽a de Chagas Alphonse Kelecom Departamento de Biologia Geral Universidade Federal Fluminense - Niter贸i, RJ

Colaboradores: Marise Maleck de Oliveira Cabral El贸i de Souza Garcia Patr铆cia Azambuja

O parasita, Trypanosoma cruzi, no tubo digestivo do barbeiro, Rhodnius prolixus

Estรกgios de muda de ninfas de Rhodnius prolixus

A-E : ninfas de 1ยบ - 5ยบ estรกgio

Mamadeira para alimentação do barbeiro membrana de látex saída de água

sangue humano

entrada de água a ~37ºC

Rhonius prolixus, alimentado

Testes com ninfas de Rhodnius prolixus Ninfas de 4º estágio lotes de 25-30 animais mantidos em jejum por um período de 25-30 dias alimentados uma única vez ad libidum pesados antes e depois do repasto mantidos a 28ºC durante 3-4 semanas lote controle: sangue com EtOH-salina (1:4) testes: sangue contendo 1-500 µg/ml da amostra testada

O objetivo original COOCH3 O

OH

O

O HO O

O CH3COO CH3COO

OH

H

O H

O

Azadirachtina A : toxicidade, fagoinibição, deformação das pupas, atraso no desenvolvimento do inseto (DE50 25µg/ml) anti-muda (DE50 40 ng/ml)

Produtos Naturais de Melia(ceae) Cumarinas

Flanon贸ides

Antraquinonas OH

MeO

O

OCH3

OH CH3

HO

O

HO

O

H

O OGal

escopoletina

O

OH

O

nimbaflavona Diterpenos

Ester贸ides

H

OH

O

H

O

nimosona

H HO

O

H

H

azedarachol

OH

OH O

H

HO O

Limon贸ides

OH

OH HO

meliantriol

Estudo fitoquímico de Melia azedarach (Meliaceae) Extração de sementes de M. azedarach com MeOH (rdt.: 12%) extrato apresenta atividades fagoinibidora e anti-ecdise purificação guiada por bioensaio partição MeOH(5% aquoso) versus n-hexano – fração hexânica : inativa

evapora-se o MeOH e a fase aquosa é extraída com EtOAc – fase EtOAc contém toda a atividade

filtração em gel de sílica e ensaio biológico

Efeito de uma fração do extrato de Melia azedarach, contendo azadirachtina A, sobre a ecdise de larvas de 4º estágio de Rhodnius prolixus

COOCH3 O

OH

O

O HO O

O CH3COO CH3COO

OH

H

O H

O

azadirachtina A

• controle - 10 µg/ml - ∆ 25 µg/ml

Isolamento de cinamodiol triterpeno inédito da série do eufano particularidades: • posição da lactona (21-16) • hidroxila em C-12 • hidroxila β em C-3 Atividade biológica em Rhodnius prolixus : • provoca ligeiro atraso da muda • inibe a ecdise em 27% na conc. de 10 µg/ml

O OH O H H HO

H

cinamodiol

Isolamento de quatro lignanas OH

OH

1

O

OMe

H MeO

2

H

O H

MeO

OMe H

O

O HO

HO

OH

OH OH O H

MeO HO

HOOC

OMe

O

H

H

MeO O

3

HO

OMe H

O

COOH

4

1 pinoresinol , 2 bis-epi-pinoresinol , 3 hemicetal , 4 diรกcido

Atividades biológicas de pinoresinol em Rhodnius prolixus 1.

140

25 OH

% m ortality

H

15

MeO

120

OMe

m g ingested blood

20

O H O

HO

10 5

100 80 60 40 20 0

0 control

1

10

concentration

Toxicidade tratamento contínuo

100

control

1ug/ml

10ug/ml 100ug/ml

concentration

Fagorrepelência via repasto sangüíneo

120

120

100

100

80

80 % ecdysis

% ecdysis

Atividades biológicas de pinoresinol em Rhodnius prolixus 2.

60 40

60 40

20

20

0 12

14

16

18

21

0 12

days after treatment

14

16

18

21

24

days after feeding

Anti-ecdise Tratamento contínuo Legenda: ◊ controle ; pinoresinol :

Repasto sangüíneo 1 , ∆ 10 , × 50 , ∗ 100 & • 500µg/ml

Atividades de lignanas em insetos OMe O H MeO

O O

OMe H

H O

O

MeO

eudesmina: • fagorrepelente H

MeO

O

O H

O

O

sesamina: • inibe o crescimento e • mimetiza o hormônio juvenil

O HO

matairesinol:

H

OMe OH

inseticida exerce ação sinergística

Ação de lignanas e neolignanas em Rhodnius prolixus OH H

O

O O

H

MeO

OCH3

O

O

O

O

O

OMe OMe

burchelina

podofilotoxina

em 10 µg/ml • não é fagorrepelente • atrasa a muda em 6 dias • inibe a ecdise em 50% • altamente tóxica • inibe a diurese em ~90%

•não é fagorrepelente • atrasa ligeiramente a muda • não inibe a ecdise • não é tóxica • inibe a diurese em até 80%

An谩lise em CG-EM da hemolinfa de Rhodnius prolixus tratado com 100 碌g/ml de burchelina

OCH3 O

O

O

O

1a : cromatograma (CG) da hemolinfa coletada 30 min ap贸s o repasto 1b : cromatograma (GC) da hemolinfa coletada 1 hora ap贸s o repasto

Identificação dos produtos de degradação da burchelina (1) na hemolinfa de Rhodnius prolixus OCH3

OCH3 O

O

O

1

O

O

O

O

OH

O

OH

O

6

3

NH2 OCH3

OCH3 O

O

O

O

O

O 8b

OCH3 O

O 7b

O

O 8a

OCH3 O

HO 7a

2

OCH3

4 OCH3

O

O 7c

5

Mecanismo provável da degradação da burchelina H

b

H a

O

O

O

O

a

O

b

c O

H

-H2

8b

OCH3

OCH3

OCH3

b

O

O

b

H

-C3H4

O

O

OH

O

1

6

a,c OCH3 O O

O

OCH3

O

8a

OCH3 O O

O HO

H

O

HO

7a

O O

OH

O

3

a degradação ocorre principalmente a nível do anel furânico

Preparação de derivados do álcool piperonílico O H O

OH

O O

O

OAc

O 16

14

O

OH 15

O

O

O

OCH3 O

O

O 17

18

CNPq, DAAD, FAPERJ

Agradeço pela sua atenção