Teme za seminarske radove 1.
HPLC u analitici hrane
2.
Gasna hromatografija u analitici hrane
3.
Imunohemijske metode u analitici hrane
4.
HACCP sistem u osiguranju kvaliteta hrane
5.
Esencijalne masne kiseline u prehrani i uticaj na zdravlje
6.
Gojaznost i posljedice na zdravlje
7.
Redukcione dijete – tipovi, efikasnost i sigurnost
8.
Glikemijski indeks i glikemijsko opterećenje
9.
Alergeni iz hrane
MASTI (LIPIDI)
Lipidos (grč.) = mastan
Masti (lipidi) su heterogena grupa jedinjenja različite strukture, nerastvorljivih u vodi, a rastvorljivih u organskim rastvaračima.
Ulja (tečna na sobnoj temperaturi) i masti (čvrste na sobnoj temperaturi).
Uloge masti 1. Energetska (rezervna energija – 39 kJ/g) 2. Izvori esencijalnih masnih kiselina (neophodnih za sintezu eikozanoida) i nosioci liposolubilnih vitamina (A, D, E i K) i provitamina (karoteni) 3. Gradivna (ćelijske membrane i protoplazma – složeni lipidi) 4. Prenos ćelijskih signala 5. Utiču na fizičke i organoleptičke osobine hrane (emulgatori)
Izvor
Sadržaj masti (%)
Maslac, margarin, loj
80 - 99
Koštuničavo voće
20 – 50
Biljke uljarice (suncokret, maslina, soja)
15 – 50
Meso
11 – 45
Ribe
1 – 25
Jaja
12
Mlijeko
3.5 – 4
Žitarice
2–4
Voće, povrće
0.1 – 1
Vidljive i skrivene masti
Određivanje sadržaja masti 1.
Ekstrakcija masti sa neodređenom količinom rastvarača (Soxhlet ekstrakcija)
Princip: Mast se iz uzorka ekstrahuje organskim rastvaračem (eter, petroleter, hloroform), koji se ukloni destilacijom, a dobiveni ekstrakt se suši i mjeri. Postupak: sušenje homogeniziranog uzorka (105 oC, 1-2 sata) sušenje tikvice, vaganje (m1)
ekstrakcija (3-6 sati) sušenje tikvice sa ekstrahovanom masti, vaganje (m2) sadržaj masti (%) =
( m2 − m1 ) ⋅100 m uz
2. Ekstrakcija masti sa određenom količinom rastvarača (metoda po Grossfeldu) Princip: ekstrakcija kuhanjem 5-10 minuta sa poznatim volumenom organskog rastvarača (trihloretilen) u tikvici koja je spojena sa hladilom. Postupak: kuhanje (mućkanje) uzorka 5-10 minuta sa 100 mL rastvarača hlađenje, razdvajanje slojeva u lijevku za odvajanje filtriranje donjeg sloja otparavanje rastvarača iz alikvota filtrata (25 mL) sušenje masti Sadržaj masti (%) =
100 100 ⋅ (m 2 − m1 ) ⋅ m uz 25 − (m 2 − m1 ) ρ
3. Određivanje masti po Weibull-Stoldtu Princip: Uzorak se prethodno razara kuhanjem sa rastvorom hloridne kiseline, pri čemu dolazi do hidrolize proteina i škroba. Nakon toga izdvojena mast se profiltrira i ekstrahuje u Soxhlet-ovom aparatu. Postupak: zagrijavanje uzorka sa HCl u osušenoj čaši razrjeđivanje vodom, filtriranje sušenje filter-papira ekstrakcija masti sa filter papira po Soxhletu
4. Acidobutirometrijska metoda određivanja masti po Gerberu Princip: Određeni volumen (11 mL) mlijeka se u butirometru razara dodatkom konc. H2SO4 te se sadržaj izdvojene masti direktno očita na skali butirometra. Postupak: razaranje uzorka kiselinom centrifugiranje (odvajanje slojeva) temperiranje očitavanje sadržaja masti
Klasifikacija lipida po Bloaru: Prosti lipidi (C, H, O)
Složeni lipidi (C, H, O + N, S, P)
Supstance lipidnog karaktera
Triacilgliceroli
Glicerofosfolipidi
Masne kiseline
Voskovi
Sfingolipidi
Mono i diacilgliceroli
Glikolipidi
Alkoholi
Lipoproteini
Esteri vitamina A, D, oksikarotenoida
Masne kiseline
R-COOH (4-30 C atoma)
Obično alifatske, ravnolančane, sa parnim brojem C atoma zasićene
nezasićene
COOH
COOH
Zasićene masne kiseline (CnH2n+1COOH) Oznaka
Trivijalno ime
Sistematsko ime
Formula
4:0
Buterna
Butanska
C3H7COOH
6:0
Kapronska
Heksanska
C5H11COOH
8:0
Kaprilna
Oktanska
C7H15COOH
10:0
Kaprinska
Dekanska
C9H19COOH
12:0
Laurinska
Dodekanska
C11H23COOH
14:0
Miristinska
Tetradekanska
C13H27COOH
16:0
Palmitinska
Heksadekanska
C15H31COOH
18:0
Stearinska
Oktadekanska
C17H35COOH
20:0
Arahinska
Eikozanska
C19H39COOH
22:0
Behenska
Dokozanska
C21H43COOH
24:0
Lignocerinska
Tetrakozanska
C23H47COOH
Mononezasićene masne kiseline (MUFA) - oleinski niz (CnH2n-1COOH) Oznaka
Trivijalno ime
Sistematsko ime
Formula
12:1 (n-7)
Lauroleinska
5-dodecenska
CH3(CH2)5CH=CH(CH2)3COOH
14:1 (n-9)
Miristoleinska
5-tetradecenska
CH3(CH2)7CH=CH(CH2)3COOH
16:1 (n-7)
Palmitoleinska 9-heksadecenska
CH3(CH2)5CH=CH(CH2)7COOH
18:1 (n-12) Petrozelinska
6-oktadecenska
CH3(CH2)10CH=CH(CH2)4COOH
18:1 (n-9)
Oleinska
9-oktadecenska
CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH
18:1 (n-7)
Vakcenska
11-oktadecenska
CH3(CH2)5CH=CH(CH2)9COOH
20:1 (n-11) Gadoleinska
9-eikozenska
CH3(CH2)9CH=CH(CH2)7COOH
22:1 (n-11) Cetoleinska
11-dokozenska
CH3(CH2)9CH=CH(CH2)9COOH
22:1 (n-9)
13-dokozenska
CH3(CH2)7CH=CH(CH2)11COOH
Eruka
Nomenklatura H H H H H H H H
H H H H H H H O
H-C--C--C--C--C--C--C--C--C=C--C--C--C--C--C--C--C--C-OH
H H H H H H H H H H H H H H H H H
omega kraj
delta kraj jedna dvostruka veza
Δ-9 oktadecenska kiselina ω-9 (ili n-9) oktadecenska kiselina
Polinezasićene masne kiseline (PUFA)
linolni niz (CnH2n-3COOH)
18:2 n-6, linolna kiselina (9,12 – oktadekadienska kiselina) CH3-(CH2)4-CH=CH-CH2-CH=CH-(CH2)7-COOH
linolenski niz (CnH2n-5COOH)
18:3 α-linolenska kiselina (9,12,15 – oktadekatrienska kiselina) 15
12
9
1
CH3-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-(CH2)7-COOH n-3 18:3- hiragonska kiselina (6,10,14-heksadekatrienska) 14
10
6
1
CH3-CH=CH-(CH2)2-CH=CH-(CH2)2-CH=CH-(CH2)4-COOH n-3
tetraenski niz (CnH2n-7COOH)
20:4 n-6, arahidonska kiselina (5,8,11,14- eikozatetraenska kiselina) CH3-(CH2)4-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-(CH2)3-COOH
pentaenski niz (CnH2n-9COOH)
22:5 eikozapentaenska kiselina (7,10,13,16,19 – dokozapentaenska kiselina) COOH
heksaenski niz (CnH2n-11COOH)
24:6 nizinska kiselina (4,8,12,15,18,21 – tetrakozaheksaenska kiselina) COOH
Esencijalne masne kiseline
“vitamin F” (George & Mildred Burr, 1929)
Linolna kiselina (C 18:2, n-6)
α-linolenska kiselina (C 18:3, n-3)
Arahidonska kiselina (C 20:4, n-6)
Eikozapentaenska (C 20:5, n-3)
Dokozaheksaenska (C 22:6, n-3)
PROBAVA I APSORPCIJA MASTI
METABOLIZAM MASTI
Miller M et al. Circulation 2011;123:2292-2333
Sumarni prikaz ß-oksidacije masnih kiselina :
CH3-(CH2)n-CO-S-CoA + FAD + NAD + CoA-SH CH3-(CH2)n-2-CO-S-CoA + FADH2 + NADH + H+ + CH3-CO-S-CoA
Lynenova spirala
stearil-CoA C18
acetil-CoA
4H palmitil-CoA C16
CoA-SH
4H
acetil-CoA miristil-CoA C14 CoA-SH
4H
acetil-CoA lauril-CoA C12 CoA-SH acetil-CoA
4H kapril-CoA C10
CoA-SH acetil-CoA
4H kaprilil-CoA C8
CoA-SH acetil-CoA CoA-SH acetil-CoA
4H kaproil-CoA C6 4H butiril-CoA C4
CoA-SH
4H
acetil-CoA CoA-SH
acetil-CoA C2
8 FAD 8 FADH2 8 NAD+ 8 NADH2
Energetski bilans ß-oksidacije masnih kiselina
1. Svaki zavoj Lynenove spirale (2 C atoma) ß-oksidacijom masne kiseline daje redukcione ekvivalente: FADH2
2 ATP
NADH + H+ ukupno
3 ATP 5 ATP
2. Oksidacijom izdvojenog acetil-koenzima A u Krebsovom ciklusu formira se još 12 ATP
Primjer: Ukupan energetski bilans oksidacije stearinske kiseline (18:0, M=284.4): 8(2C) x 5 ATP =
40 ATP
9 acetil CoA x 12 ATP = 108 ATP 148 ATP 148 ATP - 1 ATP (za aktivaciju masne kiseline) = 147 ATP 1 ATP ~ 30.5 KJ => 147 ATP ~ 4483.5 KJ/mol odnosno 4483 KJ/mol : 284 g/mol = 15.8 KJ/g
(masti 39 KJ/g!)
15.8 / 39 ≈ 40% (energija deponovana kao ATP) + 60% (energija oslobođena u vidu tiplote)
Preporuke za unos masti
WHO, 2003 Ukupne masti: 15-30% DEP
EFSA, 2010 Ukupne masti: 20-30% DEP
SFA < 10% DEP; TFA < 1% DEP SFA i trans-FA PUFA 6-10% DEP
LA: AI 4% DEP
n-6 PUFA 5-8% DEP
ALA: AI 0.5% DEP
n-3 PUFA 1-2% DEP
EPA + DHA: AI 250 mg/dan
Holesterol < 300 mg/dan
UTICAJ TERMIČKE OBRADE NA MASTI (1)
Oksidacija, polimerizacija
degradacioni produkti: slobodne MK, hidro-peroksidi, polimerizirani TG
promjene: porast viskoznosti ulja, tamnjenje, razvijanje ranciditeta (ranketljivosti)
toksičnost
cis-trans izomerija
viša tačka topljenja
smanjenje biološke vrijednosti esencijalnih masnih kiselina
toksičnost
UGLJIKOHIDRATI
Bruto hemijska formula većine UH: CnH2nOn ili Cn(H2O)n
Ugljikohidrati drugačije bruto formule: dezoksi šećeri, amino šećeri, tio šećeri
spojevi iste bruto formule koji nisu ugljikohidrati: formaldehid, sirćetna i mliječna kiselina i njihovi anhidridi i dr.
Hemijski: aldehidni ili ketonski derivati polihidroksilnih alkohola i njihovi kondenzacioni proizvodi UGLJIKOHIDRATI PROSTI
SLOŽENI
MONOSAHARIDI
DISAHARIDI OLIGOSAHARIDI POLISAHARIDI
Prikazivanje konfiguracije Fisher-ovim projekcionim formulama:
O C
O C
H
H
C
OH
HO
C
H
C
H
O C
H
O H
C C
O
HO
C
H
H
H
C
OH
HO
C
H
H
HO
C
H
HO
C
H
OH
HO
C
H
H
C
OH
H
C
OH
C * OH
H
H
C * OH
H
*C
OH
CH2OH D-glukoza
C * OH CH2OH
CH2OH
D-galaktoza
D-manoza
CH2OH D-fruktoza D-fruktoza
CikliÄ?na struktura monosaharida CH2CH CH O CH CH-
CH2 O ili
CH
CH CH CH
CHCH O CH CH-
H
O
C H-C-OH H0-C-H H-C-OH H-C-OH CH2OH D-glukoza
+H2O
OH C-OH H-C-OH H0-C-H H-C-OH H-C-OH CH2OH
CH
ili
CH
CH CH
Struktura furana
Struktura pirana
H
O
H
-H20
OH
C H-C-OH H0-C-H O H-C-OH H-C CH2OH poluacetalni oblik
Pri ciklizaciji nastaje nov hiralni centar na prvom C atomu kod aldoza ili na drugom C atomu kod ketoza.
α-oblik - OH grupa je:
•
sa desne strane (Fisher-ove formule)
•
ispod ravni prstena (Hawort-ove formule)
β-oblik - OH grupa je: •
sa leve strane (Fisher-ove formule)
•
iznad ravni prstena (Hawort-ove formule)
α-i β- oblici su anomeri (optički izomeri), a ne enantiomeri
CH2OH HC C HO C H
CH2OH
OH HC
HC C
C OH
HO C
OH
H
α - D- α-D-glukopiranoza gl ukopi r anoz a
CH2OH HC C HO C H
O OH HC CH OH
β-D-glukopiranoza β - Dgl ukopi r anoz a
OH O HC C OH
a ll ii č~n n ii aldehidni al dehi d ni obl i k a ccii k kaciklični oblik
Va탑niji disaharidi
Struktura škroba Škrob
Amiloza
Amilopektin
CH2OH
O H
CH2OH
O H
H
OH
OH
O
OH ner edukuj u} i kr aj
H
OH
O
OH
CH2OH
O H
OH
OH
neredukujući kraj
O OH
OH
O H
O
O
O OH
OH
OH
CH2OH
OH r edukuj u} i kr aj
redukujući kraj
H
OH
CH2
O H
H
CH2OH O H
OH
H
OH
O
OH
O OH
O H
O OH
O OH
O
O O
O H
H
O H
α 1-4 glikozidne veze u molekulu amiloze
α 1-6 granjanje u molekuli amilopektina
O O
O
O
O
O
O
O O
O
O
O O
O O
CH2OH
CH2OH
CH2OH
O
O O
ravnolančani dio α 1-4 glikozidna veza grananje α 1-6 glikozidna veza
Struktura celuloze CH2OH
CH2OH
O
OH
O
H
OH
O
H
OH
O
H OH
CH2OH
H
CH2OH
O
O OH
H
OH
O
OH
H
OH
OH celuloza
H OH
Uloge ugljikohidrata
Energetska (17 kJ/g; 8 kJ/g za fermentaciju u debelom crijevu)
Motilitet crijeva, mikroflora kolona
Kontrola glikemije i metabolizma inzulina
Glikozilacija proteina
Metabolizam masti
Dehidroksilacija žučnih kiselina
Fermentacija (proizvodnja vodika/metana, SCFA, kontrola funkcije epitelnih stanica kolona)
Komponente nukleinskih kiselina i vitamina (riboflavin)
Održavaju normalno funkcionisanje nerava i mišića
Preporuke za unos UH WHO, 2003 Ukupni UH: 55-75% DEP
EFSA, 2010 Ukupni UH: 45-65% DEP
Šećeri < 10% DEP Vlakna >25 g/dan
Vlakna AI 25 g/dan Izbjegavati namirnice (posebno napitke) sa dodatim šećerima.
• Minimalno 50 – 100 g/dan UH (prevenira ketozu). • 130 g/dan UH podmiruje potrebe mozga za glukozom.
Određivanje UH Metode zasnovane na redukcionim osobinama šećera:
1.
Neselektivne redukcione metode, i
Selektivne redukcione metode,
1.
Polarimetrijske metode,
2.
Spektrofotometrijske metode,
3.
Hromatografske metode,
4.
Biohemijske metode:
1.
Mikrobiološke metode, i
Enzimatske metode.
Gravimetrijske
1.
a) Metoda po Fehlingu CuSO 4 + 2 NaOH → Cu(OH) 2 + Na 2SO 4
Cu (OH) 2 +
COOK
COOK
CHOH
CHO
CHOH COONa
→
CHO
Cu + H 2 O
COONa
Postupak EKSTRAKCIJA TOPLOM VODOM (OSNOVNI FILTRAT) BISTRENJE I OBEZBOJAVANJE (FILTRAT A)
ZAGRIJAVANJE S KONC. HCl
ZAGRIJAVANJE S FEHLINGOVIM REAGENSIMA FILTRIRANJE Cu2O (GUČ FILTER) ODREĐIVANJE Cu ILI Cu2O (GRAVIMETRIJSKI ILI PERMANGANOMETRIJSKI)
Određivanje Cu2O permanganometrijski
m Cu (mg) = V ⋅ 6,357 ⋅ F
V – volumen kalijum-permanganata utrošenog za titraciju F – faktor za korekciju koncentracije kalijum-permanganat 1 ml 0,02 mol/l kalijum-permanganata ekvivalentan je sa 6,357 mg Cu (7,157 mg Cu 2O).
Primjer: U svrhu određivanja šećera 10 g homogeniziranog uzorka marmelade je razblaženo s 50 mL tople vode i zagrijavao na vodenom kupatilu 15 minuta. Smjesa je zatim kvantitativno prenesena u normalni sud od 100 mL i nakon hlađenja dopunjena vodom do markice. Sadržaj je profiltriran, te je 20 mL filtrata preneseno u novi normali sud od 100 mL, dodato 1.5 ml rastvora olovo-acetata i 2 ml rastvora natrij-sulfata. Normalni sud je dopunjen vodom do marke i sadržaj profiltriran. Za dalje određivanje je uzeto 25 ml ovog filtrata koji je zagrijavan sa 25 ml Fehling I, 25 ml Fehling II reagensa i 25 ml destilovane vode tako da ključa tačno 2 minuta. Sadržaj je zatim profiltriran preko guč lijevka, a dobiveni talog Cu 2O je nakon temeljitog ispiranja s 300 mL vruće vode rastvoren u 50 ml feriamonij sulfata. Za titraciju ovog rastvora je utrošeno 9.2 ml 0.02 mol/l rastvora KMnO4. Iz Fehlenberg-ovih tablica očitati količinu šećera (rubrika «invertni šećer») koja odgovara ovoj količini bakra i izračunati sadržaj šećera (u procentima) u analiziranom proizvodu.
Izračunavanje količine uzorka u konačnom alikvotu u kojem je određen Cu2O
10 g
100 mL 20 mL
100 mL
10 g 20mL ⋅ ⋅ 25mL = 0.5 g 100mL 100mL
25 mL
Izračunavanje količine Cu iz utroška KMnO4
a)
1 mL 0.02 mol/L KMnO4 ---- 6.357 mg Cu 9.2 mL 0.02 mol/L KMnO4 ---- X X = 58.48 mg Cu
Izračunavanje količine Cu iz utroška KMnO4
n (Cu2O) = 1/2 n (FeSO4) = 5/2 n (KMnO4) n (Cu) = 2 n (Cu2O) = 5 n (KMnO4) n (Cu) = 5 (9.2 mL x 0.02 mol/L) = 5 x 0.184 mmol = 0.92 mmol m (Cu) = n x Ar = 0.92 mmol x 63.57 mg/mmol = 58.48 mg
Izračunavanje količine šećera
očitavanje količine šećera koja odgovara nađenoj količini Cu 58.48 mg Cu --- 98 mg šećera Sadržaj šećera u proizvodu = 0,098 g/0.5 g x 100 = 19%
Određivanje glukoze pomoću alkalnog rastvora joda (selektivna redukciona metoda)
Glukoza (%) =
( V1 − V2 ) ⋅ c ⋅ 0,09 ⋅100 m uz
V1 – volumen (ml) rastvora Na2S2O3 utrošenog za titraciju slijepe probe, V2 - volumen (ml) rastvora Na2S2O3 utrošenog za titraciju probe, c – koncentracija upotrebljenog rastvora Na2S2O3 , muz – masa (g) uzorka koja se nalazi u 20 ml filtrata, i 1 ml 1 mol/L mol/L Na2S2O3 odgovara 0.09 g glukoze (ili galaktoze)
2. Polarimetrijske metode
zasnivaju se na optičkoj aktivnosti šećera (obrtanje ravni polarizirane svjetlosti)
specifična rotacija (rotacija izražena u stepenima koju izazove 1 g supstance u 1 mL rastvora u cijevi dužine 1 dm) – [α ] [α ] = αl⋅100 ⋅c t
D
t
D
c=
α ⋅100 l⋅
[α ]
t D
3. Fotometrijske metode
Somogyi-Nelson metoda Redukujući šećeri redukuju Cu2+, nastali Cu2O se rastvara u kiselini, a oslobo|eni Cu+ joni redukuju molibdat u molibdensko plavo, čiji se intenzitet obojenja mjeri na 560 nm.
Scott-Melvin metoda Bojena reakcija (plava boja) antrona i hidroksimetil-furfurola nastalog dejstvom kiseline na heksoze mjeri se na 650 nm.
Klein-Weissman metoda Metoda sa hromotropnom i sumpornom kiselinom. Pentoze ne reaguju. Maksimum apsorpcije 570 nm.
4. Hromatografske metode
TLC, GLC ili HPLC
u zavisnosti od matriksa, često potrebno prethodno ekstrahovanje niskomolekularnih UH (obično u 80% etanolu)
HPLC sa amperometrijskim detektorom metoda izbora za određivanje više monosaharida u smjesi
Oligo i polisaharidi obično na isti način, nakon prethodne enzimske razgradnje.
5. Biohemijske metode
Enzimatske metode se zasnivaju na dejstvu specifičnih, visoko pročišćenih enzima
Specifične i precizne, relativno manje cijene koštanja
Metode izbora za određivanje jednog određenog UH (npr. glukoze nastale razgradnjom škroba)
enzimatsko-gravimetrijske i enzimatsko-hemijske metode se koriste za određivanje vlakana
6. Gravimetrijske metode Određivanje celuloze (“sirovih vlakana”)
zasniva se na otpornosti celuloze i njenih pratiova (hemiceluloza, lignin) na dejstvo jakih kislina. Nakon obrade uzorka kiselinama sirova vlakna zaostaju na filteru i određuju se gravimetrijski nakon sušenja.
Probava ugljikohidrata
Apsorpcija ugljikohidrata
GLUT5
apikalno
bazolateralno
Distribucija ugljikohidrata
Preko portalnog venskog krvotoka apsorbovani monosaharidi prelaze u jetru
U jetri se najveći dio galaktoze i fruktoze pretvara u glukozu. - dio glukoze se oslobađa u cirkulaciju - dio se konvertuje u glikogen i skladišti - dio se pretvara u druge supstance potrebne organizmu - dio se oksiduje uz osobađanje energije
Glukoza iz krvi ulazi u ćelije gdje daje energiju, a delom se konvertuje u glikogen u mišićnom tkivu
Energetski efekat metabolizma ugljikohidrata
Najveći dio glukoze se koristi za obezbeđivanje energije kroz trostepeni proces: glikoliza, ciklus limunske kiseline i respiratorni lanac.
U kalorimetru 1 mol glukoze sagorijevanjem do CO2 i H2O oslobodi 2870 kJ kao toplotu.
U tkivima dio energije se akumulira u obliku visiokoenergetskih fosfatnih veza. Po molekulu glukoze oksidisane do CO2 i H2O stvori se 38 ~P veza.
38 x 36.8 kJ = 1398 kJ/mol glukoze
48,7% ukupne energije pri sagorijevanju glukoze je akumulirano u ~P vezama
Efekat termičke obrade hrane na UH
Utiče na hemijske, fizičke i biološke osobine UH
Proizvodi pirolize: organske kiseline, ketoni, aldehidi, alkoholi, derivati furana...
Optimalan termički tretman djeluje povoljno na namirnice bogate škrobom → povećana probavljivost i sladak ukus usljed dekstrinacije
Neenzimsko tamnjenje (Maillardova reakcija) – zagrijavanje šećera u prisustvu amina (proteina→ smanjena bioiskoristivost proteina)
Karamelizacija (zagrijavanje šećera bez prisustva amina)
PROTEINI
Proteos (grč.) – prvi
Biljni organizmi: sinteza iz vode i ugljičnog dioksida, nitrata, fosfata, sulfata i dr. spojeva
Životinje: sinteza iz aminokiselina hrane
Sadrže prosječno 16% azota
Uloge proteina:
gradivna (primarna funkcija) kontraktilna (miogen) katalitička (enzimi) regulatorna (hormoni) transportna (hemoglobin, transferin, ceruloplazmin) imunološka (antitela) održavanje koloidno-osmotskog pritiska puferski kapacitet koagulacija krvi energetska (17.2 kJ/g)
Elementarni sasatav:
C, O, H, N, S, (P)
Hemijska definicija:
Proteini su makromolekulska jedinjenja izgrađena od polipeptidnih lanaca koji se sastoje iz α-L-aminokiselina povezanih peptidnom vezom.
R
CH NH2
COOH
Određvanje proteina 1. Određivanje ukupnih proteina - metoda po Kjeldahlu Koncentrovana sumporna kiselina vrši razaranje materijala pri čemu se ugljenik oksidiše do ugljen-dioksida, vodonik do vode, a azot se redukuje do amonijaka koji se destiliše vodenom parom i hvata u određenu zapreminu kiseline poznatog titra, nakon čega se višak kiseline se retitrira bazom U zavisnosti od sadržaja azota u proteinima pojedinih namirnica (FAO tablice) sadržaj proteina se izračunava množenjem dobijenog sadržaja azota faktorom iz tablice (npr. 5.7 za proteine pšenice, 6.25 za proteine drugih žitarica)
razaranje materijala 2NH3 + H2SO4→ (NH4)2SO4
a)
b)
destilacija dodatak NaOH (NH4)2SO4 + 2NaOH → 2NH3 + Na2SO4 + 2 H2O
destilacija oslobođenog amonijaka u kiselinu poznatog titra retitracija viška kiseline bazom izračunavanje količine amonijaka, odnosno azota izračunavanje količine proteina
2.
Određivanje čistih proteina -Metoda po Stutzer-Barnstein-u Neproteinske materije koje sadrže nitrogen odstrane se vodom, u kojoj su rastorljive, a u vodi rastvorljivi proteini istalože kao bakarni spojevi dodatkom bakar(II)-sulfata i zajedno sa u vodi netopivim proteinima odrede po Kjeldahl-u. -Metoda po Kellner-u Neproteinske materije se ekstrahuju vrućom vodom. Koekstrahirani u vodi rastvorni proteini se istalože bakar(II)sulfatom. U filtratu se odredi sadržaj nitrogena koji ne potiče od proteina, metodom po Kjeldahl-u. Razlika između sadržaja ukupnog nitrogena i neproteinskog nitrogena služi za izračunavanje čistih proteina.
3. Određivanje proteina mlijeka formol titracijom
Dodatkom formaldehida blokiraju se amino grupe proteina, a karboksilne grupe mogu se titrirati bazom NH2 R
CH
N(CH2OH)2
O +
H
C
COOH
R
CH
H
COOH
4. Određivanje pojedinih frakcija proteina - taloženje na izoelektričnom pH (kazein pri pH 4.6)
- ekstrakcija određenim rastvaračima (po Osborn-u) • ekstahovani proteini mogu da se odrede po Kjeldahl-u ili metodama za određivanje proteina u rastvoru (po Lowry-u, BCA, Biuret metodom, UV spektroskopijom i dr.) - elektroforezom i gel filtracijom
SLOŽENI PROTEINI PROSTI RASTVORNI
NERASTVORNI
Albumini
Globulini
Histoni
Prolamini
Protamini
Glutelini Albuminoidi
Složeni proteini
fosfoproteidi (kazein iz mlijeka, vitelin, vitelenin i fosfitin iz žumanjca i dr.)
glikoproteidi (ovomukoid, proteini plazme)
lipoproteidi (mozak, kičmena moždina)
hromoproteidi (hemoglobin, mioglobin)
nukleoproteidi (soli baznih proteina, protamina i histona sa nukleinskim kiselinama)
Individualni faktori koji utiču na potrebe u proteinima: 1. Veličina tijela 2. Dob 3. Spol 4. Nutricioni status 5. Graviditet i laktacija 6. Klimatski faktori 7. Fizička aktivnost 8. Dijetarne komponente ishrane 9. Emocionalna stabilnost 10. Patološka stanja
Potrebe u proteinima
Fiziološka potreba: minimalni nivo koji nadoknađuje obligatorni gubitak nitrogena. Dnevna potreba 0.75 g/kg TT Siguran nivo unosa 0.83 g/kg TT na dan za odrasle osobe (10-15% DEP) Voditi računa o probavljivosti proteina!
Preporučen dnevni unos (RDA) proteina za različite dobne grupe i fiziološka stanja stanja Starost (godine)/fiziološko stanje
RDA (g/dan)
0.0-0.5
telesna masa (kg) x 2.2
0.5-1
telesna masa (kg) x 2.0
1-3
23
4-6
30
7-10
34
11-14, muškarci
45
15-51+, muškarci (70kg)
56
11-18, žene
46
19-51+, žene (55 kg)
44
graviditet
+30
laktacija
+20
:
CH3 1 . alif at i ~ne m onoam ino-m onok arbos k e k is el ine: NH2 cistin HOOC CH CH COOH 2 CH2 CH CH di(α aminoβ tiopropionska kiselina) HOOC CH COOH 3 CH3 CH CH2iliCOOH glikokol glicin, Gly iz oleucin, S S NH2 CH2 COOH alerijanska kiselina CH Ile CH COOH CH3 α - aminosir}NHetna kiselina 2 α - aminoNH2 CH3 β - metil- β - etilpropionska kiselina CH CH2 CH COOH NH2 NH2 C2H5 4 . aminok is eline s a s umporom: NHCH CH2 CH COOH metionin, Met 2 α - amino- γ - metiltiobuterna kiselina H2NOC CH2 CH COOH CH3 CHalanin, cistein, S CH3 NH2 3 CH COOH Ala Cys CHCH serin, S er 3 2CH COOH apronska kiselina CH CH CH COOH CH CH COOH α aminoβ tiopropionska kiselina CH2 CH COOH α - aminopropionska NH2 kiselina α - amino- β2- hidroksipropionska kiselina SH NH NH2 CH3 CH3 2 NH2 5 NH . a2 r o m a t i ~ n e a m i n o k i s e l i n e OH NH2
ESENCIJALNE AMINOKISELINE (1)
HOOC CH2 CH2 CH COOH fenilalanin, P he ei n e sCH a 3s u mvalin, p o rcistin o m Val : CH3 HOOC CHCHCH COOH 3 2 CH2 CHkiselina treonin, Thr α - amino- β - fenilpropionska metil- β - etilpropionska kiselina NH di(α aminoβ tiopropionska kiselina) CH CHβ2- hidroksibuterna CH COOH aminoiz ovalerijanska CH CH COOH CHα -CH 2 2 CH COOH αkiselina - aminokiselina S S NH2 CH CH COOH C2H5 CH3 CH3 2 NH NH NH 2 2 opropionska kiselina 2 SH NH2 tiroz in, Tyr H2NOC CH2 CH2 CH COOH CH CH2 CH COOH metionin, leucin, Leu Met CH3 CH2 αCH COOH β - CH 3 - aminop- hidroksifenilpropionska idroksipropionska kiselina α - aminoγNH - metiltiobuterna a aminoiz okapronska kiselinakiselina 2 CH S CH2CH3CH NH COOH CHα -CH kiselina 2 CH COOH 2 OH NH HOOC CH CH CH CH COOH 2 2 2 CH3 C2H5 NH2 NH2 - tiopropionska kiselina) S S NH 2 5 . aromat i~ne aminok is eline 6 . het eroc ik li~ne aminok is eline iz oleucin, Ile CH3 CH CH COOH CH3 CH idroksibuterna kiselina 2 CH β COOH fenilalanin, P he COOH α - amino- metilβ - etilpropionska kiselina 2 CH triptofan, Trp CH CH2CHCH COOH CH2 CH2 CH2 CH2 CH COOH OH NH CH CH CH COOH t 2 α - amino2 OH NH2 β - fenilpropionska kiselina α - amino- β -Cindolilpropionska NH 2H5 etiltiobuterna kiselina NH2 2 NH2 NH2 S CH3 NH kiselina 2
Leucin
Izoleucin
CH2 CH COOH CH3
Valin
S erCOOH CH serin, CH CH CH2CHCH CH COOH e a m i n o k i s 3eαl i-naminotiroz e in, Tyr COOH kiselina 2 prolin, P ro NH CH2 CH2 CHβ2- hidroksipropionska CH COOH OH NH α - aminoβ - p- hidroksifenilpropionska 2 OH kiselina NH2NH pirolidin- 2- karbonska 2 P he C NH kiselina NH2 CH2 CH COOH nilpropionska kiselina NH2 NH2 treonin, Thr CH3 OHCH CH COOH 6 . hetβ e -r hidroksibuterna o c i k l i ~ n e a m i n o kkiselina i s e l i n e hidroksiprolin, Hpr α - aminoCH2 CH COOH OH NH2 4- hidroksipirolidin- 2karbonska kiselina elina triptofan, NH Trp CH2 CH COOH CH CH COOH 2 HN N 2 hidroksifenilpropionska α - amino- β - indolilpropionska NH2 NH2 kiselina
Lizin
Metionin
Fenilalnin
CH CH COOH OH
NH2
NH2
Treonin CH2
CH COOH NH2
OH CH2 CH COOH NH2
NH
Triptofan NH
COOH
HO NH
COOH
ProsjeÄ?ne potrebe u aminokiselinama za odrasle osobe (WHO/FAO/UNU, 2007) Aminokiselina
Dnevna potreba (mg/kg)
Histidin
10
Izoleucin
20
Leucin
39
Lizin
30
Metionin + cistein metionin cistein
15 10.4 4.1
Fenilalanin + tirozin
25
Treonin
15
Triptofan
4
Valin
26
Ukupno
184
HRANJIVA VRIJEDNOST PROTEINA (1) a) Na osnovu uticaja na tjelesnu masu
potpuni (kazein)
djelimično nepotpuni (glijadin)
nepotpuni (zein)
PER – Indeks efikasnosti proteina (Protein Eficiency Ratio)
porast tjelesne mase (g) PER = masa unesenog proteina (g)
HRANJIVA VRIJEDNOST PROTEINA (2) b) Na osnovu uticaja na bilans azota
uravnoteženi bilans (unos=izlučivanju)
negativan bilans (izlučivanje>unos)
pozitivan bilans (unos>izlučivanja)
BV – biološka vrijednost (udio iskorištenog proteinskog azota)
proteinski N zadržan u organizmu (mol) BV = azot apsorbovanog proteina (mol)
HRANJIVA VRIJEDNOST PROTEINA (3) Utvrđivanje biološke vrijednosti proteina:
Biološke metode (animalni modeli)
Mikrobiološke metode (Tetrhymena pyriformis, Clostridium perfringens, Steptococcus faecalis)
Hemijske metode (analiza aminokiselinskog sastava)
Utvrđivanje aminokiselinskog sastava (%) u hidrolizatu proteina
Utvrđivanje odnosa (%) svake esencijalne AK u proteinu i iste AK u ukupnim proteinima jajeta
Identifikacija limitirajuće AK (AK sa najmanjim odnosom iz prethodnog korak, CS)
Izračunavanje procenta deficita limitirajuće AK (100-CS)
HRANJIVA VRIJEDNOST PROTEINA (4)
Izračunavanje biološke vrijednosti proteina prema formulama Block-a i Mitchel-a: BV = 102 − 0,634(100 − CS) PER = 3,77 − 0.0321(100 − CS)
HRANJIVA VRIJEDNOST PROTEINA (5) Procentualni udio esencijalnih AK u ukupnim proteinima namirnica Esencijalna AK
Jaje
Sirevi
Grašak
Soja
Soja (CS)
Izoleucin
8,7
10,4
6,8
8,5
97,7
Leucin
6,2
5,3
4,3
5,0
80,6
Lizin
6,9
8,7
7,5
7,0
101,4
Metionin
5,7
3,4
2,0
2,8
49,1
Fenilalanin
9,7
10,7
7,3
8,8
90,7
Treonin
5,0
4,0
4,0
4,2
84,0
Triptofan
4,2
5,4
2,7
3,4
81,0
Valin
6,8
7,7
4,7
5,2
76,5
2,8 ⋅100 = 49% 5,7 BV = 102 − 0,634(100 − 49) = 69,67 PER = 3,77 - 0,0321(100 - 49) = 2,13
CS =
HRANJIVA VRIJEDNOST PROTEINA (6) Nedostaci hemijske procjene hranjive vrijednosti proteina:
Razlike u probavljivosti proteina
Kompeticija kod apsorpcije AK
Ne razlikuje D- i L-minokiseline
Efekat antinutrijenata
Dobra korelacija s biološkim testovima za proteine sa BV>40
PODJELA PROTEINA NA OSNOVU BIOLOŠKE VRIJEDNOSTI 1. potpuni proteini (BV > 75; PER > 2,4) - omogućavaju normalan rast i regeneraciju organizma - proteini mesa (osim proteina vezivnog tkiva), mlijeka, jaja 2. delimično nepotpuni proteini (BV = 55-75; PER = 1,4-2,4) - omogućavaju samo održavanje telesne mase - većina biljnih proteina (proteini žitarica su deficitarni u lizinu, a proteini leguminoza u metioninu) 3. nepotpuni proteini (BV < 55; PER < 1,4) - ne osiguravaju niti održavanje telesne mase - proteini vezivnog tkiva (kolagen, elastin). - zein (veoma deficitaran u lizinu)
POBOLJŠANJE BIOLOŠKE VRIJEDNOSTI PROTEINA
komplementacija kombinovanjem proteina
dodavanje deficitarnih AK u dijetetske proizvode
genetske modifikacije – hibridi sa većim sadržajem deficitarnih AK
PROBAVA PROTEINA Dio GIT-a
Enzim
Prekursor
Aktivator
pH Veze koje raskida
Produkti
탑eludac
pepsin
pepsinogen
HCl
1-2 endogene (Ar, dikarb.)
proteoze peptoni
탑eludac
renin
Ca++
4
parakazein
tanko crijevo
tripsin
tanko crijevo
tripsinogen
kazein
enterokinaza 7,9 endogene (bazne)
polipeptidi dipeptidi
himotripsin himotripsinogen
tripsin
8
endogene (neutralne)
polipeptidi dipeptidi
tanko crijevo
elastaza
proelastaza
tripsin
8
endogene (Gly, Ala, Ser)
polipeptidi dipeptidi
tanko crijevo
karboksipeptidaza
prokarboksipeptidaza
tripsin
8
egzogene (Nterminlni kraj)
AK peptidi
tanko crijevo
aminopeptidaze
8
egzogene (Nterminlni kraj)
AK peptidi
tanko crijevo
dipeptidaze
8
dipeptidi
AK
PROBAVLJIVOST PROTEINA (1) Probavljivost: udio N iz hrane koji se apsorbuje nakon digestije.
Probavljivost =
Ni − ( N f − Ne ) Ni
⋅100
Ni - uneseni azot Nf - fekalni azot Ne - endogeni fekalni azot (na dijeti bez proteina, oko 14mg/kg za odrasle, 20 mg/kg za djecu)
PROBAVLJIVOST PROTEINA (2) Faktori koji utiču na probavljivost proteina:
porijeklo (biljni proteini imaju manju probavljivost zbog manje probavljivih ćelijskih memebrana)
konformacija molekule (ograničava enzimsku hidrolizu)
prisustvo antinutrijenata (inhibitori tripsina i himotripsina, lektini, tanini, fitati)
interakcija s drugim sastojcima hrane (vlakna, polisaharidi)
termička obrada (Millard-ova reakcija, stvaranje lizinoalanina, racemizacija i dr.)
Probavljivost proteina iz različitih izvora Izvor proteina
Probavljivost proteina (%)
Bjelance jajeta
97
Cijelo jaje, govedina, perad, riba, mlijeko
95
Pšenično bijelo brašno
95
Soja protein izolat
94
Polirani pirinač
88
Sojino brašno
86
Integralna pšenica
86
Kukuruzni proizvodi
86
Integralni pirinač
84
Grah
69
Zastupljenost u obroku (%)
Probavljivost = (0,88 x 40) + (0,69 x 35) + (0,86 x 15) + (0,95 x 10) = 82%
10
40 15
35
APSORPCIJA AMINOKISELINA
Prosta difuzija (D-aminokiseline) i aktivni transport (L-aminokiseline)
Kompetitivni mehanizam
Apsorpcija u portalni krvotok (sinteza proteina u jetri)
Iznimna apsorpcija nekih polipeptida (nutritivni alergeni)
METABOLIZAM PROTEINA
~ 20 aminokiselina izgrađuju biljne i animalne proteine
esencijalne aminokiseline – unos hranom
neesencijalne aminokiseline – endogena sinteza iz drugih aminokiselina, Ac-Co A ili piruvata (transaminacije, dezaminacije, defosforilacije)
PROMET PROTEINA
NH3 Proteini iz hrane
ka
a liz o ta b
m
AK pool (jetra)
Proteini tijela
i ja c a in m dea an ab oli za m
Sinteza proteina Proteini plazme
Îą-keto kis.
urea
urin
purini
urati
glikogene
UH
ketogene
masti
FUNKCIONALNE ULOGE PROTEINA U NAMIRNICAMA
Hidrodinamska svojstva:
viskoznost proizvoda (supe, umaci i sl.)
želiranje (kolači, mesni proizvodi)
tekstura (mesni proizvodi, peciva)
Površinska aktivnost
kvašenje
disperzibilnost
rastvorljivost
pjenjenje
emulgatorska svojstva
vezivanje masti
nosioci aroma
UTICAJ TERMIČKE OBRADE NA PROTEINE (1)
Denaturacija i koagulacija proteina
konformacijske promjene (lakši pristup enzimima i bolja iskoristivost)
inaktivacija proteinskih enzima (npr. botulinum toksin, enterotoksin iz S. aureus)
ekstenzivna denaturacija smanjuje solubilnost proteina (uticaj na neka fizičko-hemijska svojstva)
inaktivacija oksidativnih i hidrolitičkih enzima iz namirnica (očuvanje poželjnih senzornih svojstava, bolja održivost)
Racemizacija aminokiselina zagrijavanjem u alkalnoj sredini
smanjena iskoristivost i BV
potencijalno (neuro)toksične D-aminokiseline
Piroliza AK i formiranje imidazo kinolina (mutageni!)
UTICAJ TERMIČKE OBRADE NA PROTEINE (2)
Formiranje unakrsnih peptidnih veza
između ε-amino grupe lizina i amidne karboksilne grupe glutaminske i asparaginske kiseline (prirodno prisutne u keratinu, elastinu, kolagenu)
između cisteina ili fosfoserina i lizina (lizinoalanin, LAL)
Cistein Serin
baza
CH2 C
+L-lizin
-H2S -H2O dehidroalaninski ostatak
C-H (CH2)4 NH CH2 *C-H LAL
UTICAJ TERMIČKE OBRADE NA PROTEINE (3)
Karbonil-amin reakcije (Maillard-ov reakcija) H-C-OH H-C-OH HO-C-H O H-C-OH H-C H2C-OH aldoza
R-NH2
H-C-NHR H-C-OH HO-C-H O H-C-OH H-C H2C-OH
Amadorijevo
CH2-NHR H-C=O HO-C-H H-C-OH H-C-OH H2C-OH
premestanje
aldozamin CH2-NHR H-C-OH HO-C-H H-C-OH O H-C-OH H2C 1-amino-1-dezoksi-2-ketoza
INTERAKCIJE PROTEINA SA DRUGIM SASTOJCIMA HRANE
Interakcija sa mastima
Oksidativnom razgradnjom nezasićenih masnih kiselina i holesterola nastaju proizvodi koji mogu da reaguju sa amino grupama proteina, naročito lizina, čime se smanjuje njihova iskoristivost.
Interakcija sa nitritima uobičajeni aditivi u mesnim proizvodima u kiseloj sredini i uz zagrijavanje sa aminima (posebno sekundarnim) nitriti grade N-nitrozamine (potentni kancerogeni)
Interakcije sa sulfitima uobičajeni aditivi u mesnim proizvodima daju S-sulfonat derivate ne utiče na biološku vrijednost, ali utiče na fizičko-hemijska svojstva proteina
Principi racionalne prehrane ď Ž
Prvi princip racionalne prehrane
ď Ž
Drugi princip racionalne prehrane Vitamini Esencijalne masne kiseline
Minerali Esencijalni nutrijenti
Esencijalne aminokiseline
Voda
ď Ž
TreÄ&#x2021;i princip racionalne prehrane Masti
Proteini
Biljne
Biljni
Animalne
Animalni
Vitamini
Vitamin B
Na
Ca
Minerali
UH
K
P
ď Ž
Ä&#x152;etvrti princip racionalne prehrane
Kvantitativno planiranje prehrane 1. Utvrđivanje stanja uhranjenosti 2. Izračunavanje energetskih potreba 3. Izračunavanje potreba u hranjivim i zaštitnim
materijama 4. Odabir namirnica i količina 5. Raspodjela odabranih namirnica po obrocima (izrada jelovnika)
1. Utvrđivanje stanja uhranjenosti Upoređivanje sa idealnom tjelesnom težinom
a)
Prema tablicama
Visina s cipelama (cm)
Tjelesna težina (kg) za muškarce Nježna građa
Srednja građa
Krupna građa
157,4
52,6-56,7
56,2-60,3
59,4-64,4
160,0
53,9-58,0
57,6-61,6
60,3-65,3
162,5
55,3-59,8
58,9-63,5
62,1-67,5
165,1
57,1-61,6
60,7-65,3
63,9-69,4
167,6
58,5-63,0
62,1-66,6
65,7-71,2
170,1
60,3-64,8
63,9-68,4
67,5-73,4
172,7
61,6-66,6
65,7-70,7
69,4-75,2
175,2
63,5-68,4
67,5-72,5
71,2-77,1
177,8
65,3-70,3
69,4-74,3
73,0-79,3
180,3
67,1-72,1
71,2-76,2
74,8-81,6
182,8
68,9-74,3
73,0-78,4
76,6-83,9
185,4
71,2-76,6
75,2-80,7
78,9-86,1
187,9
73,9-79,3
77,5-83,4
81,1-88,9
190,5
76,2-81,6
79,8-85,4
83,4-91,6
Idealna tjelesna težina za žene Visina s cipelama (cm)
Tjelesna težina (kg) Nježna građa
Srednja građa
Krupna građa
149,8
47,1-50,3
49,8-53,5
53,0-57,6
152,4
47,6-51,2
50,8-54,4
53,9-58,5
154,9
48,5-52,1
51,7-55,3
54,8-59,4
157,4
49,8-55,3
53,0-56,6
56,2-61,2
160,0
51,2-54,8
54,4-58,0
57,6-62,5
162,5
52,6-56,6
56,2-59,8
59,4-63,9
165,1
53,9-58,0
57,6-61,2
60,3-65,7
167,6
55,7-59,8
58,9-63,5
62,5-68,0
170,1
57,1-61,6
60,7-65,3
64,4-69,8
172,7
58,5-63,0
62,1-66,6
65,7-71,6
175,8
60,3-64,8
63,9-68,4
67,5-73,4
177,8
61,6-66,6
65,7-70,3
68,9-75,2
180,3
63,0-68,0
67,1-71,6
70,3-76,6
Upoređivanje sa idealnom tjelesnom težinom
b)
Prema De Molle-ovim formulama Muškarci
Žene
T − 150 D − 20 ITM m = (T − 100) − + 4 4
T − 150 D − 20 ITM f = (T − 100) − + 2 . 5 4
T – visina osobe (cm), D – dob osobe (godine).
Na osnovu indeksa tjelesne mase (BMI) M kg BMI = 2 2 T m
normalna uhranjenost: BMI 18.5-25
2. Izračunavanje energetske potrebe
Dnevno potrebna količina energije (DEP) iz hrane jednaka dnevnoj potrošnji energije Izražava se u kcal ili kJ 1 kcal (Cal) = 4.184 kJ 1 kJ = 0.239 kcal DEP = BM + SDDH + EFA
BM 60-75%
PA 15-30%
SDDH ~10%
Bazalni metabolizam
Energija koja se troši na održavanje funkcija organizma u potpunom psiho-fizičkom mirovanju, najmanje 12 sati nakon jela, u temperiranim uslovima bez vanjskih stimulusa
Čini 60-75% dnevne energetske potrebe
Ovisi o veličini tijela, spolu, dobi, fiziološkom stanju, funkciji štitne žlijezde
Faktori koji utiču na bazalni metabolizam (1)
Dob: BM se smanjuje starenjem (2% do 3% po dekadi nakon 30.godine).
Spol: Generalno brži BM u muškaraca.
Veličina tijela: Veći odrasli organizamima više metabolički aktivnih tkiva (veći BM)
Struktura tijela: Mišići troše više energije nego mast, čak i u mirovanju.
Genetski faktor: BM je djelimično genetski determinisan.
Rast: Dojenčad i djeca imaju veći BM zbog energije potrebne za rast i održavanje tjelesne temperature.
Faktori koji utiču na bazalni metabolizam (2)
Hormonalna i neurološka kontrola: Hormonalni disbalans utiče na brzinu BM.
Temperatura okoline: Ekstremne temperature povećavaju BM.
Infekcija i bolest: povećan BM zbog potrebe za izgradnjom novih tkiva ili postizanja imunog odgovora.
Ekstremna dijeta, gladovanje, post: Premali energetski unos signalizira tijelu da konzervira energiju.
Trening: Veća mišićna masa (veći BM).
Stimulansi: Povećana potrošnja energije u mirovanju.
Utvrđivanje bazalnog metabolizma
Procjena: Mjerenjem u kliničkim uslovima Računskim putem Dob (godine)
Muškarci (kcal/dan)
Žene (kcal/dan)
0-3
60.9 x TT - 54
61.0 x TT - 51
3-10
22.7 x TT + 495
22.5 x TT + 499
10-18
17.5 x TT + 651
12.2 x TT + 746
18-30
15.3 x TT + 679
14.7 x TT + 496
30-60
11.6 x TT + 879
8.7 x TT + 829
>60
13.5 x TT + 487
10.5 x TT + 596
SDDH i fizička aktivnost SDDH
Količina energije utrošene na probavu, apsorpciju i asimilaciju obroka (prosječno 10% energetske vrijednosti obroka)
Ugljikohidrati 5-10%
Masti 0-5%
Proteini 20-30%
Alkohol 15-20%
Fizička aktivnost
Sedentarni način života – manje od 50% energije BM za EFA
Velika fizička aktivnost (atletičari) – EFA do dva puta veća
Nivo fizičke aktivnosti (PAL)* za odrasle Profesionalna fizička aktivnost Neprofesionalna fizička aktivnost
lagana M F
umjerena M F
teška M F
Neaktivan/a Umjereno aktivan/a Veoma aktivan/a
1.4 1.5 1.6
1.6 1.7 1.8
1.7 1.8 1.9
1.4 1.5 1.6
* Preporučeni PAL uključuje i SDDH
DEP = BM x PAL
1.5 1.6 1.7
1.5 1.6 1.7
E m = 152 ⋅ ITM 0,73 ili E m = 0,95(815 + 36,6 ⋅ ITM) kcal E f = 123.4 ⋅ ITM 0,73 ili E f = 0,95(580 + 31,1 ⋅ ITM) kcal
Em – dnevna potreba za energijom za muškarce,
Ef – dnevna potreba za energijom za žene,
ITM – idealna tjelesna masa osobe.
Preporučeni energetski unos u redukcionoj dijeti
Teorijski, redukcija energetskog unosa za 3500 kcal dovodi do smanjenja tjelesne težine za 450-500 g. Ciljana tjelesna težina:
idealna tjelesna težina tjelesna težina izračunata prema poželjnom BMI (23 kg/m2) empirijski
Preporuke za dnevni unos energije Muškarci Dob 0-3 mj. 4-6 mj. 7-9 mj. 10-12 mj. 1-3 god. 4-6 god. 7-10 god. 11-14 god. 15-18 god. 19-50 god. 51-59 god. 60-64 god. 65-74 god. ≥ 75 god. Trudnoća Laktacija
WHO Kcal MJ 545 690 825 920 1230 1715 1970 2220 2755 2550 2550 2380 2330 2100
2.28 2.89 3.44 3.85 5.15 7.16 8.24 9.27 11.51 10.60 10.60 9.93 9.71 8.77
Žene EU
Donja granica 2.3 3.0 3.5 3.9 5.3 7.2 8.2 9.4 11.6 11.3 8.5 8.5 7.5
WHO Gornja granica
12.0 12.0 9.2 9.2 8.5
EU
Kcal
MJ
515 645 765 865 1165 1545 1740 1850 2110 1940 1900 1900 1900 1810 +200 +500
2.16 2.69 3.20 3.61 4.86 6.46 7.28 7.92 8.83 8.10 8.00 7.99 7.96 7.61 +0.8 +2.1
Donja granica 2.1 2.8 3.3 3.7 5.0 6.6 7.4 8.0 8.8 8.4 8.4 7.0 7.0 6.7 +1.5-1.7
Gornja granica
9.0 9.0 7.7 7.7 7.6
Efekti energetskog disbalansa (1) Premali unos energije može rezultirati pothranjenošću.
Izvor energije je depo glikogena i masti.
Aminokiseline oslobođene razgradnjom tjelesnih proteina prevode se u glukozu.
Glikogen iz jetre se utroši za 2-3 dana
Nepotpunom razgradnjom masti formiraju se ketonska tijela.
Rezerve masti i oko 1/3 bezmasne mase tijela utroši se za oko 60 dana, što ima letalan ishod.
Efekti energetskog disbalansa (2) Preveliki unos energije može rezultirati gojaznošću.
Višak energije se deponuje kao mast, bez obzira na izvor.
Ograničen kapacitet deponovanja glukoze u vidu glikogena.
Višak proteina se ne može deponovati.
Neograničen kapacitet deponovanja masti.
~ 35 milijarde masnih stanica, čiji se broj može povećavati.
Određivanje energetske vrijednosti hrane a) Određivanje u kalorimetrijskoj bombi
E=
(T2 − T1 ) ⋅V ⋅ 4.1868 muz
E – energetska vrijednost (KJ/g) T1 – temperatura vode prije sagorijevanja T2 – temperatura vode poslije sagorijevanja V – volumen vode (L) muz – masa uzorka (g)
b) RaÄ?unski iz sastava namirice/obroka
Energetska vrijednost nutrijenata
1 g masti
9 kcal (39 kJ)
1 g ugljikohidrata
4 kcal (17 kJ)
1 g proteina
4 kcal (17 kJ)
1 g alkohola
7 kcal (29 kJ)
U kalorimetrijskoj bombi (sirova energetska vrijednost)
1g UH Masti Prot.
kJ 17,1 38,9 23,8
kcal 4,1 9,3 5,7
U organizmu (Ä?ista energetska vrijednost)
1g UH Masti Prot.
kJ 17,1 38,9 17,1
U ljudskom organizmu oksidacija proteina nije potpuna, nastaje uglavnom urea
kcal 4,1 9,3 4,1
3. Izračunavanje potreba u nutrijentima Proteini • Dnevna potreba 0.75 g/kg TT • Siguran nivo unosa 0.83 g/kg TT na dan za odrasle osobe (10-15% DEP) • Faktor probavljivosti proteina: • 100% za proteine jajeta, mlijeka, ribe i mesa • Integralne žitarice smanjuje probavljivost za oko 10% • Miješana prehrana – probavljivost ~ 90% Dnevna potreba = 0.83 g/kg x TT x 100/90
Masti – 25-30% DEP Ugljikohidrati – preostala energija do 100% DEP
RDA za vitamine i minerale u EU Vitamin
RDA
UL
Mineral
RDA
UL
Vitamin A (µg)
800
3000 Kalijum (mg)
2000
Vitamin D (µg)
5
50
Hlorid (mg)
800
Vitamin E (mg)
12
260
Kalcijum (mg)
800
Vitamin K (µg)
75
Fosfor (mg)
700
Vitamin C (mg)
80
Magnezijum (mg)
375
Tiamin (mg)
1,1
Željezo (mg)
14
Riboflavin (mg)
1,4
Cink (mg)
10
22
Niacin (mg)
16
35
Bakar (mg)
1
4
Vitamin B6 (mg)
1,4
25
Mangan (mg)
2
Folna kiselina (µg)
200
800
Fluorid (mg)
3,5
7
Vitamin B12 (µg)
2,5
Selen (µg)
55
250
Biotin (µg)
50
Hrom (µg)
40
Pantotenska kiselina (mg)
6
Molibden (µg)
50
500
Jod (µg)
150
500
4. Odabir namirnica i formiranje jelovnika • Cilj: odabrati namirnice koje će dati odgovarajući unos energije i nutrijenata, te zadovoljiti navike i želje konzumenta • Primjena Tablica prosječnog sastava namirnica • Kurier I. Standardne Euro tablice kemijskog sastava namirnica. Zagreb, 1996. • Jokić N, Dimić M, Pavlica M. Tablice hemijskog sastava prehrambenih proizvoda. Beograd, 1999: • http://www.ars.usda.gov/nutrientdata • http://www.foodcomp.dk/
• Podaci sa deklaracija prehrambenih proizvoda • Primjena nutricionističkih softvera
Vje탑ba
1. Zadatak Sastav: 45 g ugljikohidrata 39 g masti 27 g proteina Ukupno:
Ugljikohidrati Masti Proteini Izbalansiran obrok
= ? kcal = ? kcal = ? kcal ? kcal
= ? %E = ? %E = ? %E ?
Primjer: fast-food hamburger 45 g ugljikohidrata x 4 kcal = 180 kcal 39 g masti x 9 kcal = 351 kcal 27 g proteina x 4 kcal = 108 kcal Ukupno:
639 kcal
energija iz ugljikohidrata =
45 x 4 kcal/g x 100 = 0.281 x 100 = 28% 639
energija iz masti
=
39 x 9 kcal/g x 100 = 0.548 x 100 = 55% 639
energija iz proteina
27 x 4 kcal/g = x 100 = 0.168 x 100 = 17% 639
2. Zadatak: Ena ima 35 godina, visoka je 168 cm i teška 60 kg. Radi kao službenica u banci. Ima dvoje djece. Obavlja redovne kućanske poslove i 2 puta sedmično odlazi na fitnes (45 min). 1.
Dnevna energetska potreba ?
2.
Dnevna potreba u proteinima ?
3.
Dnevna potreba u mastima ?
4.
Dnevna potreba u ugljikohidratima ?
5.
Formirati dnevni jelovnik za Enu !
2. Zadatak: Ena ima 35 godina, visoka je 168 cm i teška 60 kg. Radi kao službenica u banci. Ima dvoje djece. Obavlja redovne kućanske poslove i 2 puta sedmično odlazi na fitnes (45 min). Izračunati dnevnu energetsku potrebu, potrebu u proteinima, mastima i ugljikohidratima za Enu. Procjena stanja uhranjenosti BMI = TT/TM2 = 60/(1.68)2 = 21.2 kg/m2 1. Izračunavanje dnevne energetske potrebe DEP = BM x PAL DEP = (8.7 x TT + 829) x 1.5 DEP = 1351 x 1.5 = 2027 kcal/dan
www.nutrisurvey.de
2. Izračunavanje potreba u proteinima Dnevna potreba = 0.83 g/kg x TT x 100/90 Dnevna potreba = 0.83 g/kg x 60 kg x 1.11 = 55.3 g (221 kcal)
3. Izračunavanje potreba u mastima Dnevna potrebaave = (DEP x 0.25)/9 = = (2027 kcal/dan x 0.25)/9 kcal/g = 56.3 g/dan (507 kcal)
4. Izračunavanje potreba u ugljikohidratima UH = (DEP – proteini - masti)/4 = = (2027kcal –221kcal– 507kcal)/4 kcal/g = 1299 kcal/4 kcal/g = 325 g/dan
UH/DEP = 1299/2027 x 100 = 64%
Obrok
Udio u dnevnom jelovniku (%E)
Doručak
25%
Užina
15%
Ručak
30%
Užina
10%
Večera
20%
5. Formiranje dnevnog jelovnika
Primjeri pitanja za provjere znanja Kolokviji
1.
Određivanje proteina po Kjeldahlu svodi se na a)
titracijsko određivanje
b)
gravimetrijsko određivanje
c)
spektrofotometrijsko određivanje
d)
svi odgovori su tačni
e)
ni jedan odgovor nije tačan
2.
Izračunati sirovu energetsku vrijednost namirnice određenog sastava
3.
Izračunati sadžaj kuhinjske soli u namirnici iz datog utroška AgNO 3 poznatog titra.
Primjeri pitanja za provjere znanja Praktični ispit (esejski)
1.
Metode određivanja masti/proteina/ugljikohidrata u namirnicama
2.
Organoleptička pretraga namirnica
3.
Uzorkovanje i postupanje s uzorkom u službenoj kontroli namirnica
Parcijalni ispiti (esejski)
1.
Energetska vrijednost namirnica
2.
Ugljikohidrati u prehrani ljudi – značaj i karakteristike
3.
Probava – metabolizam osnovnih hranjivih materija