Лікарське рослинництво: від досвіду минулого до новітніх технологій: матеріали четвертої Міжнародної науково–практичної інтернет–конференції. – Полтава, 14-15 травня 2015 р.
УДК: 547.913 Музычкина Р.А., д.х.н., профессор, Корулькин Д.Ю., д.х.н., профессор Казахский национальный университет им. аль-Фараби, Алматы, Казахстан ТЕХНОЛОГИЯ ИЗВЛЕЧЕНИЯ И ФИТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЭФИРНЫХ МАСЕЛ КАЗАХСТАНСКИХ РАСТЕНИЙ РОДА POLYGONUM L. Ключевые слова: Polygonum L., биологически активные вещества, фитохимический состав, эфирные масла. Одним из перспективных средств для решения проблемы комплексного лечения воспалительного процесса могут быть биологически активные вещества растительного происхождения. Использование различных растений с лекарственной целью известно еще с глубокой древности. В настоящее время, несмотря на интенсивный рост синтетической химии лекарственных препаратов, дальнейшее изучение природных фармакологически активных веществ сохраняет актуальность. Об этом свидетельствуют тот факт, что около 40% всех лекарственных препаратов, применяемых в современной медицине, получено из растительного сырья. Наряду с другими биологически активными группами соединений, довольно прочно вошли в медицинскую практику эфирные масла, обладающие широким спектром фармакологических эффектов [1,2]. Основными преимуществами лекарственных растений и препаратов растительного происхождения являются мягкость и широта их терапевтического воздействия на организм, отсутствие побочного действия и осложнений даже при длительном их применении, хорошая переносимость больными. Кроме того, лекарственные растения часто являются единственным и (или) экономически предпочтительным источником получения многих групп природных БАВ и препаратов. В этой связи особого внимания заслуживают растения рода Polygonum L., 44 вида из которых произрастают в Казахстане (8 эндемов) и только 4 вида являются фармакопейными. Другие виды широко используются народной медициной, 12 видов имеют достаточные для промышленного освоения дикорастущие запасы, но до сих пор не введены в официнальную медицину. Общим для растений рода Polygonum L. является кровоостанавливающее (витамин К), противовоспалительное (флавоноиды), вяжущее действие (дубильные вещества, галловая и эллаговая кислоты), обволакивающее и тонизирующее (полисахариды) действие [1,2]. Целью данного исследования явилось изучение фитохимического состава основных структурных типов БАВ казахстанских видов горцев и компонентного состава эфирных масел растений Polygonum, имеющих промышленные запасы на территории республики. Растительное сырье (Polygonum amphibium L., Polygonum minus Huds. Fl. Angl., Polygonum alpinum All., Polygonum persicaria L.) было собрано в предгорьях Заилийского Алатау (Республика Казахстан) в фазу цветения в июле 2014 г. Образцы заготовленного сырья высушивались, измельчались до размера частиц 2-5 мм и использовались для экстракции индивидуальными и смешанными экстрагентами. Навески помещались в колбы с обратным холодильником, заливались экстрагентами экстрагентами различной полярности в соотношении 1:5 и настаивались в течение суток при комнатной температуре. Отбирались аликвоты извлечений и определялось содержание экстрактивных веществ по методике ГФ XI изд. Затем все колбы с сырьем нагревались в течение часа на кипящей водяной бане. 235
Лікарське рослинництво: від досвіду минулого до новітніх технологій: матеріали четвертої Міжнародної науково–практичної інтернет–конференції. – Полтава, 14-15 травня 2015 р.
Качественный состав извлечений и фракций определялся качественными реакциями, а также методом хроматографии на бумаге с использованием специфических реакций на основные группы природных соединений. Количественное определение обнаруженных групп природных соединений проводили по методикам ГФ XI и других научных изданий [3,4]. Полученные результаты представлены в таблице 1: Таблица 1 Фитохимический состав основных групп БАВ казахстанских видов горцев Вещества Polygonum Polygonum Polygonum minus Polygonum alpinum All. amphibium L. Huds. Fl. Angl. persicaria L. Углеводы, % 8.23 7.02 9.23 8.67 Кумарины, % 4.25 2.89 4.93 3.44 Фенолы, % 0.49 0.31 0.48 0.17 Фенолокислоты, % 5.12 4.49 4.75 3.41 Антрахиноны, % 8.57 9.11 8.81 7.57 Флавоноиды, % 9.59 5.57 6.91 9.75 Аминокислоты, % 1.14 1.04 0.84 1.48 Эфирные масла, % 0.98 1.09 1.14 0.92 Для изучаемых видов также была разработана методика извлечения и анализа эфирных масел. Эфирное масло получали методом гидродистилляции воздушно-сухой надземной части растений Polygonum L. на аппарате Клевенджера в течение 3-х часов [4]. Выход составил 0.9%. Качественный состав образцов эфирных масел анализировали методом хроматомасс-спектрометрии на приборе Agilent 6890N с масс-спектрометрическим детектором Agilent 5973N. Использовалась капиллярная кварцевая колонка DB-XLB FSC (30 м × 0.25 мм) с газом-носителем гелием. Скорость подачи 1 мл/мин. Газохроматографическую колонку выдерживали при температуре 40˚C в течение 10 мин; с программированием температуры до 240˚C, со скоростью изменения температуры 2˚C/мин, и затем выдерживали в изотермическом режиме в течение 10 мин. Режим ввода пробы - без деления потока. Объем пробы - 1 мкл. Температура испарителя - 250 ˚C. Масс-спектры записывались в диапазоне m/z 10-425. Процентный состав эфирного масла вычисляли по площадям пиков без использования корректирующих коэффициентов. Качественный анализ основан на сравнении времен удерживания и полных масс-спектров с соответствующими данными компонент эталонных масел и чистых соединений, если они имелись, и с данными библиотек массспектров Wiley 7th edition и NIST 02. Основными компонентами эфирного масла (в %) являются для: Polygonum amphibium L. - γ-терпинен, борнеол, пиперитол, 1,8-цинеол, α-пинен, линалоол, терпинолен и сабинен; Polygonum minus Huds. Fl. Angl. – линалоол, терпинолен, камфен, борнеол, 1,8-цинеол, α-пинен, 4-терпинеол и 1-октен-3-ол; Polygonum alpinum All. – камфен, сабинен, 1-октен-3-ол, 4-карен, п- и о-цимол, γ-терпинен, борнеол, αтерпинеол; Polygonum persicaria L. - α-пинен, сабинен, α-терпинен, 4-карен, 1,8-цинеол, борнеол, 4-терпинеол. Сравнительный состав исследованных образцов эфирных масел представлен в таблице 2.
236
Лікарське рослинництво: від досвіду минулого до новітніх технологій: матеріали четвертої Міжнародної науково–практичної інтернет–конференції. – Полтава, 14-15 травня 2015 р.
Таблица 2 Сравнительный состав эфирных масел казахстанских видов горцев Polygonum Polygonum Polygonum minus Polygonum alpinum All. amphibium L. Huds. Fl. Angl. persicaria L. α-туйен + + + + α-пинен + + + + камфен + + + β-пинен + + + сабинен + + + + 1-октен-3-ол + + + β-мирцен + + + 3-октанон + + 3-октанол + + + + + α-терпинен 2-карен + + + + карен + + + терпинолен + + + п-цимол + + о-цимол + + + дипентен + D-лимонен + + + + 1,8-цинеол + + + γ-терпинен + + + + цис-β-терпинеол + + + терпинолен + + + линалоол + + + + 1-терпинеол + + + борнеол + + + + + + + α-терпинеол 4-терпинеол + + + + пиперитол + + + гераниол + + + + борнилацетат + + + Таким образом, в результате была разработана методика извлечения и анализа компонентов эфиромасличной фракции. Методом хромато-масс-спектрометрии впервые охарактеризован химический состав эфирных масел 4-х эндемичных казахстанских видов растений Polygonum L. Библиография. 1. Мypавьева Д.А., Cамылина И.А., Якoвлев Г.П. Фаpмакогнозия. - М.: Мeдицина, 2002. - 656 с. 2. Петков В. Современная фитотерапия.- София: Медицина и физкультура.- 1998, 542с. 3. Музычкина Р.А., Корулькин Д.Ю., Абилов Ж.А. Биологически активные вещества растений. Выделение, разделение, анализ. - Алматы: Атамура, 2006. - 438 с. 4. Музычкина Р.А., Корулькин Д.Ю. Методология исследования растительных метаболитов. - Алматы: MV-Print, 2012. – 324 с. 237