UNIVERSIDAD TÉCNICA DE BABAHOYO FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
MICROBIOTA NORMAL
Lic. Elisa Boucourt Rodríguez, MSc
SUMARIO •Microbiota normal del cuerpo humano. •Muestras útiles. •Principales requerimientos para una adecuada obtención de
la muestra microbiológica. •Toma de muestras. •Medios de cultivo más empleados en el diagnóstico
microbiológico. •Procesos utilizados para la esterilización, antisepsia y desinfección.
•Principios de la bioseguridad. •Quimioterapia antimicrobiana en la era de la resistencia.
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
En condiciones normales el feto humano estรก libre de microorganismos y es inmediatamente en el momento
del nacimiento que se expone a ellos.
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
A través del paso por el canal del parto, el neonato se expone a la microbiota de la vagina de la madre y a partir de ahí comienza la colonización microbiana.
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO Continua después del nacimiento, con la exposición a los
microorganismos del medio ambiente y del personal del hospital y otros individuos que se relacionan con el recién nacido.
Lo primero que colonizan los microorganismos es la piel del lactante, seguida de la bucofaringe, el aparato digestivo y
otras mucosas.
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
Esta exposición a los diferentes microorganismos lo conduce a unos de estos tres resultados:
➢la colonización transitoria (durante un breve periodo de tiempo, como horas o días) ➢la colonización persistente (que está siempre presente)
➢la
interacción
enfermedad)
patógena
(pudiendo
provocar
una
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO El niño, después de un corto tiempo, desarrolla su propia microbiota normal, la que va a experimentar cambios, en
función de los cambios del propio individuo. Ejemplos: edad, tipo de alimentación, medio ambiente donde se encuentre, entre otros. La
microbiota
principalmente,
normal
por
del
hombre
BACTERIAS.
está
Algunos
constituida,
hongos
y
protozoarios pueden encontrarse formando parte de la misma, pero en un número mucho menor.
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
Colonización:
Especies
bacterianas
que
habitan
en
diversas
localizaciones del cuerpo humano, sin causar daño, en una
relación
simbiótica
y
beneficiosas para el hombre.
pueden
hasta
resultar
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO Enfermedad:
Cuando alguna de estas especies residentes de un determinado lugar, invade otros sitios, normalmente estériles y provoca daños (proceso anatomopatológico)
en el hospedero humano.
Estas especies de microorganismos ya comienzan a ser
considerados PATÓGENOS OPORTUNISTAS
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
PATÓGENOS ESTRICTOS: microorganismos que se asocian siempre a enfermedad en el ser humano. Ej: Mycobacterium tuberculosis (tuberculosis),
Neisseria gonorrhoeae (gonorrea)
PATÓGENOS OPORTUNISTAS: microorganismos que forman
parte de la microbiota normal del paciente que en condiciones normales no producen enfermedad, pero si la provocan cuando son introducidos en localizaciones no protegidas (Ej: torrente
sanguíneo o los tejidos). (Ej: Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans).
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
PIEL Normal • Staphylococcus coagulasanegativo • Staphylococcus aureus • Corinebacterias • Propionibacterias • Clostridium perfringens • Estreptococos • Hongos: • Candida • Malassezia
Patógena • Oportunistas
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APARATO RESPIRATORIO
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
Nariz • Corynebacterium • Staphylococcus epidermidis • Staphylococcus aureus • Streptococcus sp.
Boca y faringe • Estreptococcus viridans • Staphylococcus aerobios y anaerobios • Neisseria • Moraxella catarralis • Difteroides • Lactobacillus • Hongos: Candida
Tejido amigdalino Actinomyces
Dientes • Espiroquetas anaerobias • Prevotella melaninogenia • Fusobacterium • Rothia • Capnocytophaga • Vibriones anaerobios • Lactobacillus • Protozoarios (en encías en adultos)
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
Microorganismos patógenos • Streptococcus pyogenes • Streptococcus pneumoniae • Staphylococcus aureus • Neisseria menengitides • Haemophilus influenzae • Moraxella catarrehalis • Enterobacteriaceae
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO Laringe–Tráquea–Bronquios-Pulmones Zonas
estériles,
aunque
pueden
tener
colonización
transitoria por secreciones de las vías respiratorias superiores. Bacterias virulentas
• Streptococcus pneumoniae • Staphylococcus aureus • Klebsiella (familia Enterobacteriaceae)
Hongos dimórficos
• Histoplasma • Coccidioides • Blastomyces spp
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OÍDO
Normal
• Staphylococcus coagulasa-negativo
Patógeno
• Staphylococcus pneumoniae • Pseudomonas aeruginosa • la familia Enterobacteriaceae
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
OJOS
Normal
Patógena
• Estafilococos coagulasa negativos • Haemophilus spp • Neisseria spp • Streptococcus viridans
• S. pneumoniae • S. aureus • H. influenzae • N. gonorrhoeae • Chlamydia trachomatis • P. aeruginosa • Bacillus cereus
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APARATO DIGESTIVO
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
ESÓFAGO
Normal • Levaduras • Bacterias orofaringeas
Patógeno • Candida spp • Virus: • Virus herpes simple • Citomegalovirus
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
ESTÓMAGO
Normal
Patógeno
• Género Lactobacillus • Género Streptococcus • Helicobacter pylori
• Helicobacter pylori
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
INTESTINO DELGADO
Normal
Patógeno
• Peptostreptococcus • Porphyromonas • Prevotella • Lactobacillus • Enterococos
• Salmonella • Campylobacter spp.
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
INTESTINO GRUESO Normal • Anaerobios • Bacteroides fragilis • Fusobacterium • Lactobacillus • Bifidobacterium • C. perfringes • Cocos Gram positivos (Peptoestreptococcus) • Aerobios facultativos • Bacterias Coliformes Gram negativas • Enterococos • Proteus • Pseudomonas • Lactobacillus • Candida
Patógeno
• • • • • •
Bacteroides fragilis Enterococcus, Pseudomonas Shigella E. Coli enterohemorrágico Entamoeba histolytica Hongos: C. difficile
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APARATO GENITOURINARIO
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
URETRA
Normal
Patógena
• Lactobacillus • Streptococcus • Staphylococcus coagulasanegativos
• Enterococcus • Candida • N. gonorrhoeae • C. trachomatis
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VAGINA Lactobacillus aerobios
pH รกcido
pH neutro Microbiota mixta de cocos y bacilos
Lactobacillus aerobios y anaerobios pH acido
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VAGINA ADULTA Normal • Lactobacillus • Staphylococcus • Streptococcus • Enterococcus • Gardnerella • Mycoplasma • Ureaplasma
Patógena • N. gonorrhoeae • Mobiluncus • Gardnerella • Trichomonas vaginalis • C. albicans • Candida glabrata • Virus: • herpes simple • papilomavirus
MICROBIOTA NORMAL DEL CUERPO HUMANO
CUELLO UTERINO
Normal • Estéril
Patógeno • N. gonorrhoeae • C. trachomatis • Actinomyces
MUESTRAS ÚTILES MUESTRA. Porción o volumen de: líquidos corporales, excreciones,
exudados, etc., que obtenemos del paciente o portador (ejemplo: sangre, orina, heces, etc.) donde presuntivamente se encuentran microorganismos patógenos.
Además se obtienen del paciente también muestras de los productos patológicos, como el esputo y el pus, que son producidos por algunos microorganismos en su interacción
con los tejidos.
MUESTRAS ร TILES
MUESTRA REPRESENTATIVA: Muestra que es tomada del sitio de la infecciรณn en
cantidad suficiente.
MUESTRAS ÚTILES
TIPOS DE MUESTRAS Piel: lesión abierta, abceso subcutáneo, lesiones grasientas o purulentas, fístulas.
Uñas, pelos
Exudados: faríngeos, nasal, nasofaríngeos, óticos, conjuntival,
Uretral, vaginal, endocervical.
Productos purulentos: pus, esputos.
MUESTRAS ÚTILES ¿Qué aspectos se deben tener en cuenta? Existen factores y procederes en la obtención de las
muestras que afectan en su conjunto la calidad de los resultados. 1-Demora en realizar la siembra de la muestra
2-Inadecuados métodos de conservación 3-Insuficiente o excesiva cantidad de muestras a utilizar para el cultivo 4-Mala calidad de su obtención 5-No tomar precauciones con las medidas de asepsia.
MUESTRAS ร TILES
1-Demora en realizar la siembra Todas las muestras deben ser sembradas lo antes posible en los medios de cultivo que favorezcan el desarrollo de las especies patรณgenas procediendo a su inmediata y
adecuada incubaciรณn.
MUESTRAS ÚTILES EJEMPLOS: ➢Neisseria
meningitidis
(meningococos)
que
frecuentemente se aísla en la muestra de L.C.R es muy sensible a los cambios de temperatura, por lo que el frío y la temperatura ambiente provocan su lisis. ➢ Muestra de orina (urocultivo) sucede todo lo contrario; los componentes que comúnmente están presentes en la orina, favorecen el desarrollo y multiplicación de los agentes patógenos.
MUESTRAS ÚTILES
2-Métodos de conservación a) Refrigeración a 4 0C: el frío enlentece el proceso de multiplicación. b) Incubación a 37 0C: mantener a los microorganismos en una temperatura similar a la corporal.
d) Medios de transporte: Cuando la muestra no puede ser sembrada de inmediato, por haberse tomado en lugares
distantes, se deben enviar a la mayor brevedad posible.
MUESTRAS ÚTILES
3-Cantidad de muestras a tomar Cantidades menores o mayores son objetables, ya que afectan la calidad de los resultados.
EJEMPLOS: Hemocultivo: la cantidad de sangre total a sembrar debe
ser de un 10 % en relación con el volumen de medio de cultivo a utilizar .
Esputo: para investigar B.A.A.R (bacilos ácido alcohol resistentes) se necesitan no menos de 2 ml, por las características mucoides de este producto, los bacilos no están distribuidos homogénios en la muestra.
MUESTRAS ÚTILES
4-Calidad de la muestra Para que la muestra sea de buena calidad ha de tenerse en cuenta en algunas ocasiones el momento idóneo y en general delimitar con precisión el área anatómica para su
obtención.
MUESTRAS ÚTILES
Momento idóneo El momento más adecuado, va a depender del cuadro clínico del paciente y del tiempo de evolución de la enfermedad. EJEMPLOS: Esputo: debe ser recogido por el paciente, en ayunas, al
levantarse, que es el momento de mayor cantidad de expectoración. Sangre para hemocultivo o gota gruesa: se recomienda
esperar el momento del pico febril, cuando se encuentra en sangre la mayor cantidad de microorganismos.
MUESTRAS ÚTILES
Delimitación del área anatómica Una vez determinado en que órgano o tejido se va a realizar la toma de muestra, se debe delimitar el área exacta para su obtención. Ejemplo:
toma de muestra de lesiones purulentas debe realizarse en la región subyacente y no del pus que se encuentra en el
orificio
de
salida,
donde
microorganismos están ya muertos.
la
mayoría
de
los
MUESTRAS ÚTILES
5-Precauciones de asepsia Son las acciones encaminadas a evitar que la muestra se
contamine durante su obtención, con especies microbianas ajenas al proceso infeccioso. Ejemplo:
para obtener muestras de sangre para hemocultivo, L.C.R, lesiones en la piel, etc. Se debe remover previamente los microorganismos de la microbiota normal del sitio donde se va a realizar la punción, hisopado o raspado, con alcohol etílico al 70 % con yodo, para evitar que estos contaminen la muestra.
MUESTRAS ÚTILES
INSTRUCCIONES AL PACIENTE
El paciente que tiene indicado uno o varios exámenes microbiológicos debe ser instruido por su médico de asistencia, enfermera o por el personal del laboratorio a los
efectos de que recojan la muestra con la calidad requerida. Las instrucciones son de dos tipos: generales y específicas.
MUESTRAS ÚTILES Instrucciones generales 1. Suspender cualquier tratamiento con antibióticos 48
horas antes de la toma de la muestra, 2. Suspender cualquier tratamiento local con medicamentos antimicrobianos (productos tópicos: pomadas, lociones
etc.), colirios, gotas nasales, óvulos, gargarismos etc. Al menos 12 horas antes de la toma de la muestra.
Instrucciones específicas Variarán en dependencia del tipo de muestra de que se trate.
MEDIOS DE CULTIVOS
MEDIOS DE CULTIVO Los medios de cultivo son compuestos o preparaciones alimenticias
elaboradas
en
los
laboratorios
de
microbiologĂa con los nutrientes requeridos para cada gĂŠnero
en
condiciones
desarrollo.
particular,
que
ambientales
conjuntamente
adecuadas
con
las
propician
su
MEDIOS DE CULTIVOS
CLASIFICACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVO Se clasifican:
1. Atendiendo a su composiciรณn: Medios simples: Se utilizan en su forma natural. Ejemplo: la leche, las carnes, la papa, jugos vegetales, entre otros.
MEDIOS DE CULTIVOS Medios sintéticos: están compuestos por un conjunto de nutrientes definidos cuyas proporciones son constantes, lo
que permite reproducir el mismo medio de cualquier otro lote con exactitud. Cada uno de estos medios responde a las
necesidades
específicas
de
grupos
microbianos
determinados. Este tipo de medio se comercializa en forma deshidratada. Ejemplo: Agar Saboreaud, Agar SS, Kligler.
MEDIOS DE CULTIVOS
Medios vivos. Los medios vivos están constituidos por animales o capas de tejidos que son utilizados para el cultivo de virus y rickettsias. Estos medios no tienen utilidad práctica para el cultivo de las bacterias y los
hongos. Ejemplos: hámster (curieles jóvenes), ratones blancos lactantes,
huevos fértiles de gallina de 7 a 10 días, cultivo de tejidos, etc.
MEDIOS DE CULTIVOS 2. Atendiendo a los objetivos de su empleo.
Medios de enriquecimiento Son medios generalmente lĂquidos, que se utilizan con el propĂłsito de favorecer el desarrollo de una especie
determinada. Estos medios satisfacen los requerimientos nutricionales
del germen objeto de estudio, al mismo tiempo que no favorecen las necesidades esenciales del resto.
MEDIOS DE CULTIVOS
Medios de aislamiento
Por lo regular resultan específicos para un solo tipo de germen al no poder desarrollarse en ellos ninguna de las demás especies, por las características del medio.
MEDIOS DE CULTIVOS
Medios diferenciales Se utiliza para diferenciar la especie desarrollada por las
reacciones
bioquímicas
metabólica,
que
es
que
genera
determinado
por
su
actividad
cambios
y
reacciones evidentes que de manera específica produce
cada especie en el medio de cultivo, que permite su identidad. Ejemplo: el medio Kligler, que es utilizado en la
investigación de las enterobacterias.
MEDIOS DE CULTIVOS CONSISTENCIA DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
Atendiendo a su consistencia los medios se clasifican en: líquidos, semisólidos y sólidos.
La consistencia del medio de cultivo se logra con la adicción a la fórmula, de un compuesto denominado AGAR.
MEDIOS DE CULTIVOS Líquidos: Los medios líquidos no contienen agar, siendo trabajados en forma de caldo. Ejemplo: Caldo Selenito,
agua peptonada alcalina, caldo lactosado, etc. Semisólidos : Estos medios contienen un % de agar menor que el empleado para los medios sólidos, lo que facilita una mayor migración de sustancias y la movilidad
de los gérmenes. Ejemplo: medio de "Cary - Blair" y agar semisólido para motilidad.
MEDIOS DE CULTIVOS
Sólidos: contienen en su composición alrededor de 1,5 % de agar. La solidez proporcionada por el agar impide a los microorganismos su migración en el cultivo por lo que se
multiplican en un mismo sitio dando lugar a un cúmulo de millones de descendientes que forman sobre el cultivo estructuras
macroscópicas
denominadas
colonias
de
diferentes formas, aspectos y tamaños. Ejemplo: Agar Saboreaud Dextrosa, Agar Violeta Rojo Bilis, Agar Sangre, etc.
Procesos utilizados para la esterilización, antisepsia y desinfección
La esterilización y desinfección son los métodos esenciales empleados en los laboratorios de microbiología, para
destruir, inhibir o separar a los microorganismos presentes en los diferentes objetos, compuestos orgánicos, medio ambiente, etc., donde se requiere su eliminación.
Procesos utilizados para la esterilización, antisepsia y desinfección
La mayoría de los métodos y agentes empleados, ocasionan específicamente la desnaturalización de las proteínas celulares. Destruyen
las
diversas
estructuras
o
inhiben
su
funcionamiento, lo cual a mediano plazo resulta letal para el microorganismo.
Procesos utilizados para la esterilización, antisepsia y desinfección
Agentes antimicrobianos son aquellos utilizados para destruir o impedir el crecimiento de los microorganismos.
Por su estado pueden ser: líquidos, sólidos o gases
Por su naturaleza: físicos y químicos.
Procesos utilizados para la esterilización, antisepsia y desinfección
La eficacia de estos agentes está condicionada por varios factores como son: la naturaleza y concentración del mismo, así como la concentración y características
de la población microbiana presente, la temperatura, la duración
del
contacto
microorganismos,
la
entre
naturaleza
el
agente del
y
material
los a
descontaminar, particularmente la presencia de material orgánico, y el pH.
Procesos utilizados para la esterilización, antisepsia y desinfección
Los agentes antimicrobianos actúan sobre la estructura de la célula bacteriana y sobre sus procesos metabólicos. Sus modos posibles de acción son:
•desnaturalización de la proteína •rompimiento de la membrana o de la pared celular •remoción de grupos sulfhidrilo libres
•interferencia
con
microorganismos •acción sobre el ADN.
reacciones
enzimáticas
de
los
Procesos utilizados para la esterilización, antisepsia y desinfección Términos empleados relacionados con la
esterilización y la desinfección Sepsis: infección pútrida (putrefacto, corrompido, etc.)
Séptico: que produce la sepsis. Asepsia: método encaminado a prevenir la infección mediante la destrucción o evitación de los agentes infectivos. Específicamente mediante el empleo de
métodos físicos.
Procesos utilizados para la esterilización, antisepsia y desinfección
Antisepsia:
conjunto
de
procedimientos
prácticos
destinados a destruir o alejar los gérmenes patógenos, en especial por medio de agentes químicos. Aséptico: libre de toda materia séptica o infecciosa. Bactericida: agentes destructor de bacterias. Bacteriostático: agente que inhibe las funciones de las bacterias.
TRABAJO AUTÓNOMO
INVESTIGAR SOBRE: COCOS GRAM POSITIVOS estafilococos y estreptococos Características generales. Manifestaciones clínicas