UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA DOCENTE:Bioq. Farm. Carlos García MSc. ESTUDIANTE:Stefanny Ximena Ochoa Verzosa CURSO:Quinto Año PARALELO: “A” GRUPO N°:7 FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA:Lunes, 13/Julio/2015 FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA:Lunes, 20/Julio/2015
CALIFICACIÓN:
PRÁCTICA N° 7 TÍTULO DE LA PRÁCTICA:
INTOXICACIÓN POR MERURIO TÓXICO:
Administrar 10 mL (mililitros) de Mercurio
ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN:Pescado VÍA DE ADMINISTRACIÓN:Intraperitoneal T. DE MUERTE:14 minutos SINTOMAS:
Vómito Entumecimientos Dificultad respiratoria Cegera Somnolencia
TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 8:00 am Hora de muerte: 8:14 am Hora de disección: 8:24 am Hora del baño maría: 8:35 am Finalización del baño maría: 9:05 am Final de la práctica: 10:30 am
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA: 1. Observar la reacción que presenta el animal de experimentación ante la Intoxicación por Mercurio 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el toxico y adquirir la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de identificación. MATERIALES:
Mandil Mascarilla desechable Guantes desechables Gorro desechable Pipeta 10 mL Tubos de ensayo Pinza para tubos de ensayo Fósforos Bisturí Varilla de vidrio Jeringa de 10 mL Agitador de vidrio Recipiente de aluminio Vaso de precipitación 250 mL Vaso de precipitación 600mL Mechero de Alcohol Probeta de 50 Ml Gradillas Equipo de destilación Zapatones desechables Espátula Tabla de disección Equipo de disección
SUSTANCIAS:
Agua destilada Yoduro de potasio Difeniltiocarbazona Tetrametildiaminadifenil metano Nitrato de Mercurio Ácido Clorhídrico Amoniaco Ácido Sulfúrico
MUESTRAS:
Muestra de medios biológicos
EQUIPOS:
Balanza analítica Cocineta
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
PROCEDIMIENTO: 1. Inmediatamente al ingreso de los estudiantes al Laboratorio de Toxicología se debe equipar adecuadamente con mandil largo para Laboratorio limpio y sin manchas, gorro desechable, mascarillas desechables, guantes desechables y zapatones. Todo esto se realiza siguiendo las normas del Laboratorio para evitar posibles contaminaciones y contribuir con el orden. 2. Desinfectar el área de trabajo para realizar la práctica de Toxicología, siempre se debe tener limpio el mesón de trabajo y tener listo a disposición los respectivos materiales que se utilizaran en la práctica correspondiente en el Laboratorio de Toxicología. 3. Se procede a la administración del tóxico en este caso es el Mercurio la dosis es diez mililitros al animal en experimentación que es el pescado. 4. Se prepara la solución tóxica de Mercurio como Nitrato de Mercurio, la vía de administración es intraperitoneal y una vez transcurrido el tóxico al animal en experimentación, se observan los síntomas inmediatamente. 5. A dosis de diez mililitros causa la muerte del animal, se procede a realizar una incisión con ayuda de un bisturí estéril. Con un bisturí se disecciona todo el dorso del animal evitando perforar las vísceras luego se recogen las vísceras en un vaso de precipitación. 6. Observamos los cambios que presentan sus órganos y con la ayuda de una jeringuilla se recoge el líquido que hay en su cavidad abdominal y agregamos las 50 perlas de vidrio más2g más Nitrato de Mercuriocon 25ml de HCl concentrado, llevamos a baño maría por 30 minutos con agitación regular. 7. Una vez finalizado el baño maría dejar enfriar, filtrar y con el filtrado realizar las reacciones de identificación. 8. Al finalizar la práctica, se procede al levantamiento de todos los medios biológicos y materiales de Laboratorio. 9. Se desinfecta nuevamente el área de trabajo, se desechan los materiales y que queden en su lugar y en orden luego desinfectarse las manos. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS: Destruida la materia orgánica se realizan las reacciones de reconocimiento, después de haber filtrado la mezcla. Estas reacciones son: 1. Con el Cloruro Estañoso: al agregar una pequeña cantidad del reactivo a una porción de la muestra, en caso positivo se debe producir un precipitado blanco de cloruro mercurioso o calomel o un precipitado negro de Hg metálico. 2HgCl2
+ SnCl2
----------------------
Hg2Cl2 + SnCl2
Hg2Cl2 + SnCl4
----------------------- 2Hg
+ SnCl4
2. Con el Yoduro de Potasio: al reaccionar una muestra que contenga Hg, frente al Ki, se produce un precipitado rojo, anaranjado o amarillo (de acuerdo a la concentración del toxico) de yoduro mercúrico. HgCl2 + 2IKHgI2 + 2KCl 3. Con la DifenilTioCarbazona: es una reacción muy sencilla para reconocer el Hg; (el reactivo se prepara con 0.012 gr de ditizona disuelta en 1000 ml de Cl4C) se mide un poco demuestra y se añaden algunas gotas de reactivo con el cual debe producir un color anaranjado en caso (+), si es necesario se puede calentar ligeramente la mezcla. 4. Con la DifenilCarbazida: en medio alcohólico, la difenilcarbazida produce con el Hg un color violeta o rojo violeta. 5. Con elSulfuro de Hidrogeno: produce un precipitado negro mercúrico. HgCl2 + H2SSHg + 2HCl - - - - - - - NEGRO METÁLICO 6. Con Amoniaco: si al añadir la solución de NH3 sobre el precipitado este se ennegrece, es señal suficiente para la existencia del mercurio. Hg2Cl2 + 2NH3HgO+ Hg(NH2)Cl + NH4+ + Cl- ------------------ NEGRO “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
GRÁFICOS: 1. Animal de experimentación un pescado el Bragre
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4. Colocar las sales de mercurio y agitar
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2. Obseravr los síntomas del pescado despues que se puso el Hg
3. Preparar el reactivo con HCl y 2 gramos de Sal de Mercurio.
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5. Extraer y triturar las víceras, colocar 50 perlas de vidrio
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7. Una vez finalizado el baño maria dejar enfriar y filtrar.
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6. Llevar a baño maria por 30 minutos con agitación regular
8. Obtener el filtrado para realizar las reacciones correspondientes
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“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS CON LA SOLUCIÓN PROBLEMA: 1. REACCIÓN CON EL CLORURO ESTANNOSO: REACCIÓN POSITIVA Al agregar una pequeña cantidad del reactivo a una porción de la muestra, en caso positivo se debe producir un precipitado blanco de cloruro mercurioso o calomel o un precipitado negro de Hg metálico. REACCIÓN DE PRECIPITACIÓN: HgCl Hg2Cl2 + SnCl4 2 2 + SnCl2 Hg2Cl2 + SnCl2 2Hg + SnCl4
RESULTADO: Negativo
DESPÚES RESULTADO: Negativo
REACCIÓN ANTES
2. REACCIÓN CON YODURO DE POTASIO: REACCIÓN POSITIVA Al reaccionar una muestra que contenga Hg, frente al Ki, se produce un precipitado rojo, anaranjado o amarillo (de acuerdo a la concentración del toxico) de yoduro mercúrico. REACCIÓN DE COLORACIÓN:
HgCl2 + 2IKHgI2 + 2KCl RESULTADO: Positivo Característico
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES Resultado Positivo Característico
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
3. REACCIÓN CON ÁCIDO SULFÚRICO: REACCIÓN POSITIVA Se produce un precipitado negro mercúrico. REACCIÓN DE COLORACIÓN:
HgCl2 + H2SSHg + 2HCl - - - - - - - NEGRO METÁLICO RESULTADO: Negativo
DESPÚES Resultado Positivo Característico
ANTES Reacción de coloración:
4. REACCIÓN CON LA DIFENIL CARBAZIDA: REACCIÓN POSITIVA Con la DifenilCarbazida: en medio alcohólico, la difenilcarbazida produce con el Hg un color violeta o rojo violeta. REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Sol. Mercurio + DifenilCarbazida - - - - - - Color violeta RESULTADO: Negativo
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES Resultado: Negativo
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
5. REACCIÓN CON TETRAMETIL DIAMINA DIFENIL METANO: REACCIÓN POSITIVA Es una reacción muy sencilla para reconocer el Hg; (el reactivo se prepara con 0.012 gr de ditizona disuelta en 1000 ml de Cl4C) se mide un poco demuestra y se añaden algunas gotas de reactivo con el cual debe producir un color anaranjado en caso (+), si es necesario se puede calentar ligeramente la mezcla. REACCIÓN DE COLORACIÓN: Sol. Mercurio + Reactivo de coloración --------------- Coloración anaranjada
RESULTADO: Positivo Característico
DESPÚES Resultado Positivo Característico
ANTES Reacción de coloración:
6. REACCIÓN CON AMONIACO: REACCIÓN POSITIVA Si al añadir la solución de NH3 sobre el precipitado este se ennegrece, es señal suficiente para la existencia del mercurio. REACCIÓN DE COLORACIÓN: Hg2Cl2 + 2NH3HgO+ Hg(NH2)Cl + NH4+ + Cl- ------------------ NEGRO
RESULTADO: Negativo
ANTES Reacción de coloración:
DESPÚES Resultado: Negativo
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
OBSERVACIONES:
A la solución madre de medios biológicos se le adiciona dos gramos de Nitrato de Mercurio más Ácido Clorhídrico solo para identificar mercurio.
RECOMENDACIONES:
Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar accidentes. Toda sustancia a manipular en la práctica se las debe de realizar bajo la campana extractora de gases. Culminada la práctica se debe dejar el área de trabajo desinfectada, para evitar contaminación con las sustancias químicas utilizadas.
CONCLUSIONES:
En esta práctica se pudo observar la intoxicación con mercurio se mide en ppm que son partes por millón, con 10 ml de este tóxico ocasionó la muerte del animal con un tiempo de diez minutos, debido a su toxicidad que tiene este compuesto produciendo así diferentes manifestaciones.
CUESTIONARIO: DEFINICIÓN DEL MERUCURIO El envenenamiento por mercurio (también conocido como hidrargiria, hidrargirismo o mercurialismo) es una enfermedad causada por la exposición al mercurio o sus compuestos. El Mercurio (símbolo químico Hg) es un metal pesado. CUALES SON LOS SÍNTOMAS POR INTOXICACIÓN POR MERCURIO Los síntomas suelen incluir discapacidad sensorial (visión, audición, habla), sensación alterada y la falta de coordinación. El tipo y el grado de síntomas que presenten dependen de la toxina individual, la dosis, y el método y duración de la exposición. EN QUE FORMAS APARECE LA INTOXICACIÓN POR MERCURIO La intoxicación por mercurio aparece en varias formas que dependen del estado de oxidación en que se presenta y entra en el organismo. Un primer estado de oxidación es el cero (Hg0) o mercurio metálico, que existe como vapor o como metal líquido.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
GLOSARIO Mercurialismo:El mercurialismo o hidrargirismo es el conjunto de los trastornos patológicos debidos a una intoxicación aguda o crónica producida por el mercurio. Metal pesado:Un metal pesado es un miembro de un grupo de elementos no muy bien definido que exhibe propiedades metálicas. Se incluyen principalmente metales de transición, algunos semimetales, lantánidos, y actínidos. Muchas definiciones diferentes han propuesto basarse en la densidad, otras en el número atómico o peso atómico, y algunas en sus propiedades químicas o de toxicidad.
ANEXOS:
BIBLIOGRAFÍA Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial CientíficoMédico. Madrid. España AUTORIA BQF. Carlos García González FIRMA DE RESPONSABILIDAD:
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“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“