MEĐULABORATORIJSKO ISPITIVANJE HRANE NEAKREDITIRANIH I AKREDITIRNIH LABORATORIJA – PRAKTIČNI PRIMJER IZ REGIJE
Vesna Popijač, Jasmina Ranilović Podravka d.d., Kontrola kvalitete Ante Starčevića 32, Koprivnica, Hrvatska E mail: vesna.popijac@podravka.hr, jasmina.ranilovic@podravka.hr Sažetak: Laboratoriji kao važna karika u lancu opskrbe hranom, vjerodostojnost rezultata ispitivanja, kontinuirano moraju dokazivati sudjelovanjem u međulaboratorijskim ispitivanjima. U sklopu aktivnosti Analitičke sekcije udruge ''Kondin'', 2011. godine je dana mogućnost laboratorijima proizvođača hrane (neakreditiranim laboratorijima) i akreditiranim/ovlaštenim laboratorijima da provjere svoja rutinska određivanja sadržaja masti, bjelančevina, vlage, pepela, ukupnog inverta, prirodnog inverta i saharoze na keksu, kroz međulaboratorijsko ispitivanje. Organizator ispitivanja je bio Centralni fizikalno kemijski laboratorij, Podravke d.d. koji je preuzeo pripremu uzoraka, postavljanje upitnika o metodama ispitivanja i obradu rezultata ispitivanja. Ispitivanju se odazvalo 11 akreditiranih i 13 neakreditiranih laboratorija iz Hrvatske, Slovenije, Bosne iHercegovine i Srbije, a rezultati su ocjenjeni na temelju z‐vrijednosti. Prihvatljivim rezultatima ispitivanja smatra se ako je │z│ ≤ 2, dok se upozoravajućim ili neprihvatljivim rezultatima ispitivanja smatra ako je 2<│z│≤ 3ili │z│ >3, što zahtijeva podizanje korektivne radnje radi uspostave nadzora nad rezultatima ispitivanja. Postignuti rezultati ovog međulaboratorijskog ispitivanja laboratorija iz Hrvatske i regije, dokazali su visoku razinu pouzdanosti rezultata ispitivanja (u 1. uzorku 100% rezultata│z│ ≤ 2, u 2. uzorku 97,8% rezultata│z│ ≤ 2), poštivanje principa dobre laboratorijske prakse i zahtjeva norme EN ISO/IEC 17025, čime se dodatno povećava razina povjerenja među subjektima u poslovanju s hranom i prema potrošačima. Laboratoriji kao važna karika u lancu opskrbe hranom, vjerodostojnost rezultata ispitivanja, kontinuirano moraju dokazivati sudjelovanjem u međulaboratorijskim ispitivanjima. U sklopu aktivnosti Analitičke sekcije udruge ''Kondin'', 2011. godine je dana mogućnost laboratorijima proizvođača hrane (neakreditiranim laboratorijima) i akreditiranim/ovlaštenim laboratorijima da provjere svoja rutinska određivanja sadržaja masti, bjelančevina, vlage, pepela, ukupnog inverta, prirodnog inverta i saharoze na keksu, kroz međulaboratorijsko ispitivanje.
KOMPETENTNOST LABORATORIJA 2012
39
Organizator ispitivanja je bio Centralni fizikalno‐kemijski laboratorij, Podravke d.d. koji je preuzeo pripremu uzoraka, postavljanje upitnika o metodama ispitivanja i obradu rezultata ispitivanja. Ispitivanju se odazvalo 11 akreditiranih i 13 neakreditiranih laboratorija iz Hrvatske, Slovenije, Bosne i Hercegovine i Srbije, a rezultati su ocjenjeni na temelju z‐vrijednosti. Prihvatljivim rezultatima ispitivanja smatra se ako je │z│ ≤ 2, dok se upozoravajućim ili neprihvatljivim rezultatima ispitivanja smatra ako je 2<│z│≤ 3 ili │z│ > 3, što zahtijeva podizanje korektivne radnje radi uspostave nadzora nad rezultatima ispitivanja. Postignuti rezultati ovog međulaboratorijskog ispitivanja laboratorija iz Hrvatske i regije, dokazali su visoku razinu pouzdanosti rezultata ispitivanja (u 1. uzorku 100% rezultata│z│ ≤ 2, u 2. uzorku 97,8% rezultata│z│ ≤ 2), poštivanje principa dobre laboratorijske prakse i zahtjeva norme EN ISO/IEC 17025, čime se dodatno povećava razina povjerenja među subjektima u poslovanju s hranom i prema potrošačima.
Ključne riječi: kompetentnost, laboratoriji proizvođača, međulaboratorijsko ispitivanje, z‐vrijednost, dobra laboratorijska praksa I.
UVOD
Subjekti u poslovanju s hranom i hranom za životinje (SPH), prema odredbama članka 19. Zakona o hrani, u svim fazama proizvodnje, prerade i distribucije, koje su pod njihovom kontrolom, moraju osigurati da hrana ili hrana za životinje udovoljava propisima o hrani koji su od važnosti za njihovo poslovanje i moraju dokazati da je udovoljeno propisanim zahtjevima (1).S time u vezi, važnu kariku u cijelom prehrambenom lancu čine laboratoriji SPH, koji kontinuiranim sudjelovanjem u međulaboratorijskim usporedbama (MLU) dokazuju vjerodostojnost rezultata ispitivanja sebi, kupcima, inspekcijama i auditorima, ali ne znači da moraju biti akreditirani prema normi HRN EN ISO/IEC 17025. Akreditirani laboratoriji vjerodostojnost rezultata moraju dokazati i akreditacijskim tijelima. Rezultati MLU ispitivanja, mogu upozoriti na probleme u radu laboratorija ili na probleme vezane uz samu metodu ispitivanja.Dobra laboratorijska praksa (DLP) je sustav kvalitete koji se odnosi na organizacijske procese i uvjete u kojima se planiraju, izvode, nadgledaju, evidentiraju, pohranjuju podaci o ispitivanjima i o njima izvještava (2). Prema zahtjevima norme HRN EN ISO/IEC 17025, laboratorij mora imati postupke za kontrolu kvalitete koji služe za nadzor nad valjanošću rezultata ispitivanja (3). Unutarnja ocjena kvalitete podrazumijeva ponavljanje ispitivanja uporabom istih ili različitih metoda, ponavljanje ispitivanja na istom materijalu, uporabu certificiranih referentnih materijala ili sekundarnih referentnih materijala, korelaciju rezultata za različite karakteristike materijala teocjenu i statističko praćenje postignutih rezultata uporabom kontrolnih karti. Vanjska procjena kvalitete predstavlja najbolji način dokazivanja tehničke osposobljenosti laboratorija uključivanjem u sheme ispitivanja sposobnosti ili druge programe MLU. Uspjeh MLU ovisi o organizaciji koja uključuje program ispitivanja, izbor materijala za ispitivanje, određivanje broja uzoraka, upute i način provedbe, izbor laboratorija sudionika, distribuciju uzoraka te prikupljanje i obradu rezultata ispitivanja (4). Analitička sekcija KONDIN‐a (Udruženje za razvoj i unapređenje konditorske industrije Republike Hrvatske)2011. god., u okviru svojih aktivnosti, potaknula je dobrovoljno međulaboratorijsko ispitivanje za laboratorije proizvođača hrane, s ciljem da laboratoriji učesnici provjere svoja rutinska određivanja sadržaja vlage, pepela, masti, 40
bjelančevina, ukupnog inverta, prirodnog inverta i saharoze, uspoređujući ih s rezultatima akreditiranih laboratorija. Operativnu organizaciju i obradu rezultata ispitivanja, kao koordinator ispitivanja, vodio je Podravkin Centralni fizikalno‐kemijski laboratorij. II. MATERIJALI I METODE Organizacija MLU Analitička sekcija KONDIN‐a, potencijalnim laboratorijima učesnicima proslijedila je pismo namjere u kojem je definiran protokol: broj uzoraka, parametri ispitivanja, koordinator ispitivanja,rokovi dostave uzoraka i rezultata ispitivanja.Poziv za sudjelovanje u MLU,upućen je na 25 adresa, a odazvala su se 24 laboratorija (96%) iz Hrvatske i regije.Svaki laboratorij učesnik na početku je označen brojem,radi objektivnosti postupka. Nakon završenog ispitivanja i obrade rezultata, laboratorijima sudionicima elektronskom poštom dostavljen je izvještaj o ispitivanju. Materijali Uzorci za MLU pripremljeni su u Podravki d.d., aza svaki uzorak (1 i 2) samljeveno je po 12 kg keksa.Nakon mljevenja i homogenizacije, pripremljeni su pojedinačniuzorci mase 300 g, zapakirani su u dvostruke polietilenske vrećice i čvrsto zatvoreni (zavareni) kako bi se sačuvala izvorna svojstva uzoraka. Svakom laboratoriju učesniku, koji je prethodno potvrdio sudjelovanje u MLU, poslani su uzorci keksa s oznakama uzorak 1 i uzorak 2. Uzorci se međusobno razlikuju po recepturi (udjelu pojedinih sastojaka),uzorak keksa br. 1 ciljano je pripremljen za MLU dok je uzorak keksa br. 2 proizveden po standardnoj recepturi. U lipnju 2011. godine, uzorci keksa poslani su običnom poštom laboratorijima učesnicima, a elektronskim putem (e‐mail)im je dostavljena dokumentacija u koju su upisivali rezultate ispitivanja i podatke o metodama ispitivanja. Metode statističke obrade rezultata Statistička obrada rezultata rađena je u Excel programu. Srednja vrijednost dobivenih rezultata ispitivanja laboratorija učesnika u MLUuzeta je kao prava (ciljana) vrijednost.Rezultati postignuti sudjelovanjem u MLUocjenjeni su na temelju z‐vrijednosti koja je izračunata prema slijedećoj jednadžbi (5): z= (x‐X)/σ gdje je: x ‐ rezultat pojedinog laboratorija X ‐ dodijeljena (ciljana) vrijednost σ ‐ standardno odstupanje rezultata
KOMPETENTNOST LABORATORIJA 2012
41
Cilj svakog laboratorija je dobivanje prihvatljivih rezultata ispitivanja (│z│ ≤ 2) budući da oni dokazuju vjerodostojnost rezultata te ukazuju da u procesu ne postoje sustavne pogreške. Upozoravajući ili neprihvatljivi rezultati ispitivanja (2<│z│≤ 3 ili │z│> 3)zahtijevaju podizanje korektivne radnje s ciljem uspostave nadzora nad rezultatima ispitivanja. III. REZULTATI U međulaboratorijskom usporedbenom ispitivanju sudjelovala su 24 laboratorija, od kojih 11 akreditiranih (45,8%) i 13 neakreditiranih laboratorija (54,2%) iz Bosne i Hercegovine, Hrvatske, Slovenije i Srbije(podaci nisu prikazani).U tablici 1. navedeni su ključni podaci o metodama za određivanje pepela, vlage, masti, bjelančevina, ukupnog inverta, prirodnog inverta i saharoze u uzorcima keksa. U određivanju sadržaja vlage sudjelovali su svi laboratoriji učesnici, s akreditiranom metodom 25% laboratorija. U uzorku keksa br. 1 svi laboratoriji ostvarili su zadovoljavajuće rezultate (Slika 3) dok je u uzorku keksa br. 2 samo jedan laboratorij dobio upitne rezultate (Slika 4). Tablica 1. Podaci o metodama Određivanje sadržaja pepela Ukupno laboratorija
Korištena akreditirana metoda
Broj laboratorija
Da
4,10,13,20
4
Ne
1,2,3,6,7,8,9,11,12,14,15,16,18,19,21,22,24
17
Temperatura spaljivanja
≥500 ‐ <550º C
4
1
≥550 ‐ <600º C
1,2,3,6,7,10,12,13,15,16,18,19,22
13
≥600 ‐ <650º C
11,9
2
≥650 ‐ <950º C
8,14,20,21,24
5
42
Određivanje sadržaja vlage Korištena akreditirana metoda
Broj laboratorija
Ukupno laboratorija
Da
4,10,13,15,20,23
6
Ne
1,2,3,5,6,7,8,9,11,12,14,16,17,18,19,21,22,24
18
Temperatura sušenja
103º C
4,10
2
105º C
2,3,6,7,8,9,12,14,15,16,17,18,19,20,21,22,24
17
130º C
1,5,13,23
4
Vrijeme sušenja
10 min
2
1
90 min
1,6,8,10,13,16
6
120 min
5,23
2
180 min
22
1
240 min
7,9,12,14,15,17,19,20,21,24
10
do konstantne mase
3,4,18
3
Određivanje sadržaja masti Ukupno laboratorija
Korištena akreditirana metoda
Broj laboratorija
Da
4,10,13,15,20
5
Ne
1,2,3,5,6,7,8,9,11,12,14,16,17,18,19,21,22,23,24
19
Hidroliza
Kisela
1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,18,19,20,21,22,24
22
Nije korištena hidroliza
17,23
2
Ekstrakcijska metoda
Soxlet
1,2,3,5,6,7,8,10,11,12,15,16,17,20
14
Soxtec
9,18
2
Weibull‐Stoldt
4,13,14,19,24
5
Buchi
21,22
2
Automatski Soxterm
23
1
Ekstrakcijsko otapalo
Petroleter
1,2,3,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,16,17,18,19,20,21,22,23,2 4
22
Dietileter
4,15
2
Vrijeme ekstrakcije
≥ 1 < 2 ≥ 2
5,9,19,21,24
5
1,2,3,4,6,7,8,10,11,12,13,14,15,16,17,18,20,22,23
19
KOMPETENTNOST LABORATORIJA 2012
43
Određivanje sadržaja bjelančevina Ukupno laboratorija
Korištena akreditirana metoda
Broj laboratorija
Da
1,4,10,13,15,20,23
7
Ne
2,3,8,9,12,14,16,18,19,21,22,24
12
Digestiona kiselina
Sumporovodična kiselina
1,3,4,8,9,12,13,14,15,16,18,19,20,21,22,23,24
17
Ne koristi se kiselina
2
1
Katalizator
Bakar
13,15
2
Selen
4
1
Kjeldahl tablets
1,8,9,10,14,16,18,19,20,21,22,23,24
13
Metoda određivanja
Kjeldahl
3,8,10,12,13,23
6
Kjeldahl‐TECATOR
1,9,18,24,
4
Kjeldahl‐BUCHI
4,16,19,20,21,22
6
Ostalo (Dumas; Kjeldahl ‐ Gerhardt)
2,14,15,
3
Određivanje sadržaja ukupnog, prirodnog inverta i saharoze Ukupno laboratorija
Korištena akreditirana metoda
Broj laboratorija
Da
10,13,15
3
Ne
1,2,3,4,7,8,9,11,12,14,17,18,19,20,21,24
16
Reference
Odvaga uzoraka
≥ 2 <5g
7,13,19
3
≥ 5g <10g
1,2,3,8,9,11,12,14,17
9
≥ 10g
4,10,18,20,21,24
6
Uklanjanje balastnih tvari
Da
1,3,7,8,9,10,11,12,13,14,15,17,18,19,20,21,24
17
Ne
2,4
2
44
Tablica 2. Prikaz ciljanih vrijednosti ispitivanih karakteristika (%) u uzorcima keksa i rezultati z‐vrijednosti zadovoljavajućih rezultata (│z│≤ 2), izraženih kao prosjek svih laboratorija učesnika CILJANA VRIJEDNOST ZA KARAKTERISTIKU (%)
% REZULTATA ISPITIVANJA │Z│ ≤ 2
KARAKTERISTIKA UZORAK BR 1
UZORAK BR 2
UZORAK BR 1
UZORAK BR 2
PEPEO
2,37
0,76
100,0
100,0
VLAGA
7,17
3,93
100,0
95,8
MAST
7,12
12,26
100,0
100,0
BJELANČEVINE
11,11
8,41
100,0
100,0
UKUPNI INVERT
6,31
19,46
100,0
94,4
PRIRODNI INVERT
0,94
5,28
100,0
94,4
SAHAROZA
5,13
13,57
100,0
100,0
U tablici 2. navedene su ciljane vrijednosti za pojedine karakteristike ispitivanja u uzorcima keksa koje su dobivene na temelju srednje vrijednosti svih rezultata ispitivanja. Svi laboratoriji su u uzroku keksa br 1, ostvarili zadovoljavajuće rezultate ispitivanja (│Z│ ≤ 2), dok je u uzorku keksa br. 2 samo jedan laboratorij (br. 12) ostvario upitne rezultate kod određivanja vlage, ukupnog i prirodnog inverta (slika br.4 i 10) . Grafički prikaz z‐vrijednosti po broju laboratorija i karakteristici određivanja (sadržaja pepela, vlage, masti, bjelančevina, ukupnog, prirodnog inverta i saharoze), u uzorku keksa br. 1 i 2, nalazi se na slikama br. 1 do br. 10.
KOMPETENTNOST LABORATORIJA 2012
45
2,0 2,0
1,5 1,5
1,0 1,0
0,5
0,0 1
2
3
4
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
18
19
20
21
22
24
z‐vrijednost
z‐vrijednost
0,5
z‐vrijednost
0,0 1
2
3
4
6
7
8
9
10 11 12 13
14 15 16 18 19 20 21 22 24
z‐vrijednost
‐0,5
‐0,5
‐1,0 ‐1,0
‐1,5 ‐1,5
‐2,0 ‐2,0
Broj laboratorija
Broj laboratorija
Slika 2. z‐vrijednost za određivanje sadržaja pepela u uzorku keksa br.2 Slika 1. z‐vrijednost za određivanje sadržaja pepela u uzorku keksa br.1
2,0 1,5
2,0
1,0
1,5 z‐vrijednost
0,5
1,0
z‐vrijednost
0,5
0,0 1
2
3
4
5
6
7
8
9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 z‐vrijednost
‐0,5 ‐1,0
0,0 1
2
3
4
5
6
7
8
9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
z‐vrijednost
‐1,5
‐0,5
‐2,0 ‐1,0
‐2,5
Broj laboratorija
‐1,5
‐2,0
Broj laboratorija
Slika 4. z‐vrijednost za određivanje sadržaja vlage u uzorku keksa br.2
Slika 3. z‐vrijednost za određivanje sadržaja vlage u uzorku keksa br.1
2,0
1,5
2,0
1,0
1,5 z‐vrijednost
0,5
1,0
z‐vrijednost
0,5
0,0 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
z‐vrijednost
‐0,5
0,0 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 24
‐1,0
z‐vrijednost
‐0,5
‐1,5
‐1,0
‐2,0
‐1,5
‐2,0
Broj laboratorija
Slika 5. z‐vrijednost za određivanje sadržaja masti u uzorku keksa br.1
46
Broj laboratorija
Slika 6. z‐vrijednost za određivanje sadržaja masti u uzorku keksa br.2
2,0
2,0
1,5
1,5
1,0
1,0
0,5
0,5
0,0 1
2
3
4
8
9
10
12
13
14
15
16
18
19
20
21
22
23
24
z‐vrijednost
z‐vrijednost
z‐vrijednost
‐0,5
0,0 1
3
4
7
8
9
10
11
12
13
‐1,0
‐1,5
‐1,5
14
15
17
18
19
20
21
24
z‐vrijednost UI z‐vrijednost PI
‐0,5
‐1,0
‐2,0
2
z‐vrijednost SAH
‐2,0
Broj laboratorija
‐2,5
Slika 7. z‐vrijednost za određivanje bjelančevina u uzorku keksa br.1
sadržaja
Broj laboratorija
Slika 10. z‐vrijednost za određivanje sadržaja ukupnog, prirodnog inverta i saharoze u uzorku keksa br.2
2,0 1,5 1,0
z‐vrijednost
0,5 z‐vrijednost UI 0,0 1
2
3
4
7
8
9
10
11
12
13
14
15
17
18
19
20
21
z‐vrijednost PI
24
z‐vrijednost SAH
‐0,5 ‐1,0 ‐1,5 ‐2,0
Broj laboratorija
Slika 9. z‐vrijednost za određivanje sadržaja ukupnog, prirodnog inverta i saharoze u uzorku keksa br.1 2,0
1,5
1,0
z‐vrijednost
0,5
0,0 1
2
3
4
8
9
10
12
13
14
15
16
18
19
20
21
22
23
24
z‐vrijednost
‐0,5
‐1,0
‐1,5
‐2,0
Broj laboratorija
Slika 8. z‐vrijednost za određivanje bjelančevina u uzorku keksa br.2
sadržaja
KOMPETENTNOST LABORATORIJA 2012
47
IV. ZAKLJUČAK Postignuti rezultati ovog međulaboratorijskog ispitivanja laboratorija iz Hrvatske i regije, dokazali su visoku razinu pouzdanosti rezultata ispitivanja (u uzorku 1100% rezultata│z│ ≤ 2, u uzorku 297,8% rezultata│z│ ≤ 2), poštivanje principa dobre laboratorijske prakse i zahtjeva norme EN ISO/IEC 17025, čime se dodatno povećava razina povjerenja u laboratorije. Pozitivna iskustva u organizaciji MLU u okviru analitičke sekcije KONDINA, mogu biti poticaj i članovima Sekcije za hranu koja djeluje u okviru Kluba analitičkih laboratorija, udruge CROLAB, u organiziranju ovakvih ispitivanja. Laboratorijima učesnicima bez obzira da li su akreditirani ili ne, pružena je prilika da se međusobno povežu i dokažu svoju ulogu pouzdanog partnera SPH, inspekcijama, auditorima te osobitopotrošačima, što je važna prilika i za stručno opravdanu medijsku komunikaciju. ZAHVALA Zahvaljujemo svim laboratorijima učesnicima i njihovim analitičarima na sudjelovanju u ovom međulaboratorijskom usporedbenom ispitivanju, a Analitičkoj sekciji KONDIN‐a na suglasnosti za publiciranje rezultata. LITERATURA [1] Zakon o hrani (2007) Narodne novine, broj 47 (NN47(07), izmjene i dopune broj 155 (NN 155/2008) [2] Pravilnik o dobroj laboratorijskoj praksi (2008), Narodne novine, broj 38 (NN 38/08) [3] HRN EN ISO/IEC 17025:2007., Opći zahtjevi za osposobljenost ispitnih i umjernih laboratorija [4] HRN EN ISO/IEC 17043:2010., Ocjenjivanje sukladnosti ‐ Opći zahtjevi za ispitivanje sposobnosti [5] ISO 13528:2005.Statistical methods for use in proficiency testing by interlaboratory comparision
‐ 48 ‐