@ @
@ @ @ @
@ @
رئيس ھيئة التحرير أ.د .فؤاد قاسم محمد
سكرتير التحرير د .نبيل أحمد الحصري
أعضاء ھيئة التحرير
أ.د .محمد نجيب الشاھري أ.د .سامح ھدايت أرسالن أ.د .فدوى خالد توفيق د .طالل حميد حسين د .طارق سالم قبع
المجلد ،٢٥العدد ٢٠١١ ،٢
@ @ @ @
اللجنة المشرفة على طبع وإخراج المجلة العراقية للعلوم البيطرية أ.د .منير سالم البدراني د .ظافر محمد عزيز د .محمد أسامة عبد المجيد
األشراف على مكتب سكرتارية التحرير د .ھبة محمد جاسم د .زينة طارق أن البحوث المنشورة في المجلة العراقية للعلوم البيطرية متاحة ضمن شبكة المعلومات الدولية في http:/www.vetmedmosul.org/ijvs http://www.iraqivetscience.org
المجلة العراقية للعلوم البيطرية )ISSN 1607-3894 (Print), ISSN 2071-1255 (Online
تعليمات النشر للمؤلفين أھداف المجلــة أن المجل ة العراقي ة للعل وم البيطري ة مجل ة وطني ة علمي ة محكم ة ت صدر ع ن كلي ة الط ب البيط ري، جامعة الموصل ،الموصل ،العراق .تنشر المجلة باللغة العربية واالنكليزية البحوث العلمي ة األص يلة والمتمي زة والمق االت الق صيرة والمالحظ ات البحثي ة وتق ارير الح االت المرض ية والمراجع ات ف ي مختلف ميادين العلوم البيطرية. نظــرة عامـة يشترط في البحث المقدم للنشر أن ال يكون قد نشر أو تحت االختبار للنشر في أية مجلة أخرى .تق يم البحوث من ذوي االختصاص قبل قبولھا للنشر ،وتصبح ملكا" للمجلة العراقية للعل وم البيطري ة عن د ن شرھا .وت صدر المجل ة م رتين ف ي ال سنة ،وت درج بحوثھ ا ف ي Veterinary Bulletinو Index Veterinariusالصادرتان عن CABI Publishingفي المملكة المتحدة وكذلك في Directory of Open Access Journals, EBSCO’s Library Products, HINARI (WHO), SCOPUS
إرسال البحوث للنشر معين لغرض المراسلة وح ائز عل ى موافق ة الم ؤلفين الم شاركين ترسل البحوث من قبل مؤلف واحد َ في البحث ،ويتحمل مسؤولية البحث خالل اإلرسال والتقي يم والت صحيح .ي تم إرس ال ث الث ن سخ م ن البح ث م ن ض منھا الن سخة األص لية إل ى :س كرتارية تحري ر المجل ة العراقي ة للعل وم البيطري ة ،كلي ة الطب البيطري ،جامع ة الموص ل ،الموص ل ،الع راق .ف ضال" ع ن ذل ك يق دم الباح ث ن سخة البح ث على قرص مكتنز .CDونفضل إرسال البحوث عن طريق البريد االلكتروني إلى iraqijvetsci@ yahoo.comأو ع ن طري ق الموق ع عل ى ش بكة المعلوم ات الدولي ة http://www.iraqivetscience.org
أعداد ورقة البحث يطب ع البح ث بالحاس بة االلكتروني ة ح سب برن امج مايكروس وفت ورد Microsoft wordوت ستعمل حجم ١٤للحروف العربية من نوع Arabic transparentوبم سافات منف ردة بم ا ف ي ذل ك عن اوين األشكال والجداول والمصادر .وتستعمل ورق ة بحج م A4للطب ع وتك ون أبع اد م ساحة الطب ع ١٥س م )العرض( ٢٤ xسم ) الطول( وترقم ال صفحات كلھ ا بم ا ف ي ذل ك ص فحة العن وان .ويمك ن مراجع ة المتطلب ات العام ة إلع داد ورق ة البح ث والت ي ن شرھا المجل س ال دولي لناش ري المج الت الطبي ة ف ي الموقع http://www.icmje.orgويتم تنظيم وتقسيم البحث بفاص ل م سافة س طر واح د ب ين العن اوين الفرعية كما يأتي: صفحة العـنـوان تحتوي ال صفحة األول ى عل ى عن وان البح ث ف ي الوس ط تتبعھ ا بفاص ل س طر واح د أس ماء الب احثين وعناوينھم لغرض المراسلة بما في ذلك عنوان البريد االلكتروني للباحث الرئيسي.
الخالصـــة تحتوي الصفحة الثانية عل ى خالص ة البح ث بح دود ٢٠٠ – ١٥٠كلم ة ف ي فق رة واح دة وتب ين أھ م النتائج .وتأتي الخالصة االنكليزية بعد الخالصة العربية للبحوث المكتوبة باللغ ة العربي ة ،وت درج ٣ – ٥كلمات مفتاحية بعد الخالصة االنكليزية. المقدمــة تشرح بشكل مختصر الخلفية العلمية للموضوع مدار البحث وتدرج فيھا المعلومات الحديثة مع ذك ر الغرض من الدراســة. المواد وطرائق العمل تقدم معلومات وافية بحيث يمكن لباحث أخر من تكرار العمل نف سه ،وي تم دع م الطرائ ق الم ستخدمة بمصادر كافية .وتتبع البحوث الجارية عل ى الحيوان ات تعليم ات التعام ل م ع الحيوان ات والعناي ة بھ ا والت ي ت شرف عليھ ا مؤس سة الباح ث .وت ستعمل وح دات القي اس المت ري والع المي ف ي ك ل أق سام البح ث .وي ذكر البرن امج اإلح صائي والطريق ة اإلح صائية الم ستعملة ف ي تحلي ل البيان ات وتع رف الرموز والمختصرات والعالمات اإلحصائية. النتائــج ي تم ع رض النت ائج وأھميتھ ا بوض وح .ويج ب أن تق دم اإلش كال والج داول معلوم ات وافي ة ب دون الرجوع إلى متن البحث مع عدم إعادة المعلومات حرفيا" في متن البحث والت ي وردت ف ي الج داول كما يجب ع دم إعادتھ ا برس وم بياني ة أو توض يحات أخ رى ال داع ي لھ ا .وت رقم الج داول واإلش كال حسب تسلسل ورودھا في متن البحث. المناقشــة تتعامل المناقشة مع مراجعة النتائج بتأن وإمعان مع ذكر المغزى منھا ودعمھ ا بم صادر حديث ة ذات العالقة .ويجب عدم إعادة ذكر النتائج في المناق شة ،وتخت تم المناق شة باالس تنتاجات ب شكل مخت صر. وفي حالة المقاالت القصيرة يمكن دمج النتائج والمناقشة في قسم واحد. الشكر والتقدير ت ذكر ف ي ھ ذا الج زء م ن البح ث الجھ ات ال ساندة للبح ث وتل ك الت ي ق دمت الم ساعدات المالي ة والم ستلزمات ال ضرورية واألش خاص ال ذين س اھموا ف ي البح ث ولك نھم غي ر م ؤھلين لمتطلب ات إدراجھم كباحثين في البحث . المصــادر يتم مراجعة تعليمات النشر باللغة االنكليزية لكيفية كتابة مختل ف أن واع الم صادر .وت تم اإلش ارة إل ى المصادر في متن البحث باألرقام وحسب تسلسل ورودھا وترتب في نھاية البح ث بالتسل سل .وت ذكر ملخصات عن اوين المج الت العلمي ة كم ا وردت ف ي قائم ة المج الت الت ي ت درجھا .MEDLINEوال تذكر البحوث غير المنشورة أو المعلومات الت ي ت م الح صول عليھ ا ع ن طري ق االت صال الشخ صي في قائمة المصادر وإنما تذكر في متن البحث.
أمثلة على كتابة المصادر باللغة العربية بحث في مجلة داؤد ،محسن سعدون ،س ليمان ،إيم ان غ انم ،محم د ،ب شار عب د ال رحمن .دراس ة تشخي صية ألكي اس ب يض االيميري ا ف ي ال سائل الم راري للمع ز الم ذبوح ف ي مج زرة الموص ل .المجل ة العراقي ة للعل وم البيطرية.٦٨ – ٢١:٦٣، ٢٠٠٧ . كتــاب حمدان ،محمد زياد .البحث العلمي كنظام .عمان ،األردن :دار التربية الحديثة ٣٠٤ .١٩٨٩ ،ص. رسالة ماجستير أو أطروحة دكتوراه اليوسف ،محمد جاسم محمد .استخدام طريقة كھرومترية لقياس نشاط خميرة الكولين اس تراز ف ي دم وأنسجة األبقار والتثبيط بالمركبات الفسفورية العضوية والكارباميتي ة )رس الة ماج ستير( .الموص ل: جامعة الموصل ٨٩ .٢٠٠٥ ،ص. كلفة النشــر تقبل البحوث للنشر بعد دفع أجور النشر البالغة خمسون ألف دينار من قبل الباحثين ال ذين وردت أس ماؤھم ف ي البح ث وت دفع لح ساب المجل ة العراقي ة للعل وم البيطري ة ،كلي ة الط ب البيط ري ،جامع ة الموص ل، الموصل ،العراق. أن البحوث المنشورة في المجلة العراقية للعلوم البيطرية متاحة ضمن شبكة المعلومات الدولية في http:/www.vetmedmosul.org/ijvs http://www.iraqivetscience.org
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد ٢٠١١ ،٢ المحتويات البحوث تأثير المستخلص الزيتي إلكليل الجبل في بعض الصفات التناسلية ومعايير النطف في ذكور الجرذان البالغة ھديل محمد حميد
الصفحة ٦٩
تأثير إضافة العكبر في األعالف على صحة وإنتاجية فروج اللحم منتھى غازي حسن و تقى احمد عبدﷲ
٧٧
تشخيص بعض المسببات المرضية لالصابات التنفسية في فروج اللحم في الحمدانية صفوان يوسف البارودي ،باسلة ابراھيم الطائي ،نبال سامي ميخائيل و مزاحم ياسين العطار
٨٣
إستخدام كسبة الحبة السوداء كبديل للبروتين النباتي في عالئق العجول المحلية النامية عدنان خضر ناصر ،نورالدين محمود عبدﷲ و نادر يوسف عبو
٨٧
تواجد أكياس بيوض طفيليي كربتوسبوريديوم و أكياس جيارديا في مياه اآلبار في محافظة نينوى رواء غانم محمد
٩٣
تطور عظم الفك في أجنة األغنام المحلية نزيھة سلطان احمد و سفانة خضر محمود
٩٩
التغيرات في بعض المعايير الكيموحيوية المصاحبة لالصابة بداء البروسيلوسز في الضأن سامح ھدايت ارسالن ،مدركة محمود حسن ،ھديل عاصم محمد ،نبيل احمد الحصري و قيس طالب العبيدي
١٠٧
نسبة حدوث المقوسات الكوندية في الحمير المحلية في الموصل خضر جاسم حسين
١١١
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٧٦-٦٩) ٢٠١١ ،٢
تأثير المستخلص الزيتي إلكليل الجبل في بعض الصفات التناسلية ومعايير النطف في ذكور الجرذان البالغة ھديل محمد حميد فرع الفسلجة ،كلية الطب البيطري ،جامعة الموصل ،الموصل ،العراق )اإلستالم ٢٧حزيران ٢٠١٠؛ القبول ٢٨آذار (٢٠١١ الخالصة تناول البحث الحالي تأثير إعطاء المستخلص الزيتي إلكليل الجبل بالجرع ١٠٠٠ ,٥٠٠ ,٢٥٠ملغم/كغم من وزن الج سم ع ن طري ق الفم يوميا لمدة ٦أسابيع في خصائص نطف الب ربخ والغ دد الجن سية الالحق ة وم ستوى الت ستوستيرون ف ي م صل ال دم ف ي ذك ور الج رذان البالغة بعمر ٣-٢,٥أشھر .أحدث إعطاء المستخلص انخفاضا معنويا في مع دل وزن الخ صى وم ستوى الت ستوستيرون للمج اميع المعامل ة بالمستخلص بالجرع الثالثة مقارنة بالسيطرة .فضالً عن انخفاض معنوي في تركيز نطف رأس البربخ ووزن ج سم وذي ل الب ربخ ومع دل وزن الحويصالت المنوي ة وغ دة البروس تات ف ي الحيوان ات المعامل ة بالم ستخلص بجرعت ي ٥٠٠و ١٠٠٠ملغ م/كغ م مقارن ة بال سيطرة، رافقه انخفاض معنوي في النسبة المئوية للنطف الحية وارتفاع معنوي في النسبة المئوية للنطف الميتة والمشوھة بجرعت ي ١٠٠٠ ,٥٠٠ ملغم/كغم مقارنة بالسيطرة .وقد استنتج من البحث بان إعطاء مستخلص إكليل الجبل له تأثيرات سلبية في خصائص نطف ذكور الج رذان البالغة.
Effect of oily Rosmarinus Officinalis extract on some reproductive and sperm parameters in adult male rats H. M. Hameed Department of Physiology, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mousl, Iraq Abstract The present investigation was conducted to examine the effect of oral administration of oily Rosmarinus Officinalis extract on spermatogenesis, accessory sex glands and serum testosterone level in adult male rats aged 2.5-3 months. The extract was administered orally daily at 250, 500 and 1000 mg/kg body weight for 6 weeks. The results showed that the extract at the three doses significantly reduced testis weight and testosterone level. Furthermore a significant reduction in sperm count, weight of body, tail of epididymis, seminal vesicles and prostate gland in rats treated with extract at 500 and 1000 mg/kg compared with control, associated with a significant reduction in the percentage of live sperms and significant increase in the percentage of dead sperms and morphologically abnormal sperms compared with control. It was concluded that Rosmarinus Officinalis extract administration to adult male rats caused adverse effects on some reproductive and semen parameters. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
كمنكھ ات غذائي ة ) ,(2,1ي ستخدم كم ضاد للت شنج ف ي المغ ص الكل وي وع سر الطم ث وتخفي ف االض طرابات التنف سية وتحفي ز نمو الشعر ) .(3مستخلص إكليل الجبل يرخي الع ضالت المل ساء للقصبة الھوائية واألمعاء ول ه فعالي ة م ضادة لتولي د األورام anti- ,(4) tumorogenic activitiesوھ و مطھ ر ومف رغ لل صفراء,
المقدمة إكليل الجب ل ,حشي شه الع رب أو ح صى ألب ان ) Rosmarinus (Officinalisنب ات ع شبي عط ري معم ر دائ م الخ ضرة يتب ع الف صيلة ال شفوية ينم و ف ي من اطق متع ددة م ن الع الم ,ي ستخدم
٦٩
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٧٦-٦٩) ٢٠١١ ،٢
االستخالص االرجاعي وسخن الخليط بدرجة ح رارة تت راوح م ا ب ين )ْ٩٠-٨٠م( واس تمر االس تخالص والت سخين لح ين اس تالم المذيب وبعد ذلك تم تقطير المذيب من الم ستخلص بدرج ة )-٧٨ ْ ٨٠م( لح ين توق ف تقطي ر الكح ول بع دھا أخ ذت الم واد الزيتي ة المتبقية ونقلت إلى جھاز التقطير البخاري واستمر التقطي ر لح ين الح صول عل ى الم اء النق ي .وت م ال تخلص م ن الم اء باس تخدام محل ول بيروك سيد ال صوديوم NaOHبتركي ز %٠,٠٥بع دھا فصل الزيت الخام م ن الم اء بواس طة قم ع الف صل وغ سل بالم اء وتم إرجاعه إلى التقطير مرة أخ رى بع د وض عه ف ي حم ام م ائي ثم جفف بواسطة كلوري د الكال سيوم الالم ائي CaCl2وف ي النھاي ة تم الحصول على زيت إكليل الجبل ) (17وحف ظ ف ي قنين ة معقم ة بمع زل ع ن الھ واء لحمايت ه م ن الح رارة والرطوب ة ,وم ن خ الل الفرق بين وزن الدورق قبل االستخالص وبعده تم الحصول على وزن الزي ت وم ن ث م ح سبت ن سبة الزي ت الم ستخلص ح سب القانون التالي-: النسبة المئوية للدھن = وزن الدھن/وزن العينة ×(18) ١٠٠ وكانت نسبة الزيت المستخلص %٢٢ ت م اس تخدام ٢٤حي وان ق سمت ب صورة ع شوائية إل ى أرب ع مجاميع ,كل مجموعة شملت على ٦حيوانات ،المجموعة األولى )ال سيطرة( أعطي ت م اء مقط ر بجرع ة مق دارھا ٠,٥م ل. المجموعة الثانية أعطيت المستخلص بجرعة مقدارھا ٢٥٠ملغ م /كغ م م ن وزن الج سم .المجموع ة الثالث ة أعطي ت الم ستخلص بجرع ة مق دارھا ٥٠٠ملغ م /كغ م م ن وزن الج سم .المجموع ة الرابع ة أعطي ت الم ستخلص بجرع ة مق دارھا ١٠٠٠ملغ م /كغ م من وزن الجسم. وق د ت م إعط اء الم ستخلص للحيوان ات ع ن طري ق التغذي ة األنبوبي ة gavage tubeيومي ا لم دة ٦أس ابيع وق دم العل ف والم اء للحيوانات بصورة حرة .ad libitum وزنت حيوانات التجربة بشكل ف ردي أس بوعيا لك ل المج اميع و تم حساب مقدار الزيادة الوزنية من خالل طرح القراءة السابقة من القراءة الالحقة للوزن لكل أسبوع من مدة التجربة. عند انتھاء فترة المعاملة تم تخدير الحيوانات كل حيوان عل ى حده باال يثر ت م عم ل فتح ة ف ي ك يس ال صفن وادخ ل م ن خاللھ ا المقص وتم القطع إلى نھاية عظم القص على ط ول ال بطن خ الل القن اة األريب ة بع د ذل ك ت م ف صل الخ صية اليمن ى وف صل عنھ ا الب ربخ وقط ع إل ى )رأس ,ج سم ,ذي ل( ك ال عل ى ح ده ووزن ك ل ج زء لوح ده وأجري ت نف س العملي ة عل ى الخ صية الي سرى ث م استخرجت الحويصلة المنوية اليمن ى والي سرى وغ دة البروس تات وتم وزن كل منھا. اس تخدمت طريق ة ) (19لع د النط ف ف ي رأس الب ربخ حي ث فصل رأس البربخ األيمن وقطع إلى قطع صغيرة في طبق بت ري وأض يف إلي ه ٩,٨م ل م ن محل ول دارئ الفورم الين المتع ادل %١٠ثم أضيف ٠,١مل من ص بغة االيوس ين % ٥ف ي الوق ت ذاته نظفت شريحة ع د كري ات ال دم الحم راء ووض عت ال شريحة على مسرح المجھر ثم ثبت عليھا غطاء cover slideعل ى س طح
مدر للبول منب ه من شط stimulatorش اف للج روح ل ه اس تعماالت بيطرية لمكافحة الطفيليات الخارجي ة والروم اتيزم ) (5واألج زاء المستعملة من النب ات ھ ي النبت ة المزھ رة واألوراق ) .(5يحت وي إكلي ل الجب ل عل ى زي ت طي ار ال ذي ي شمل البورني ول boroneol والكامفين اوالك افور campheneوال سينيول ,cineolكم ا يحت وي عل ى فالفوني دات flavonoidوحم وض العف ص gall oak acid Rosmarinusوثن ائي وحم ض الروزماريني ك acid التربينات diterpeninوروزميرسين ,rosmircineأكث ر المكون ات المھم ة ف ي إكلي ل الجب ل ح امض الك افئين caffeic acidوم شتقاته م ثال ح امض الروزماريني ك (6) Rosmarinus acidولھ ذه المركب ات فعالي ة م ضادة لألك سدة ,(8,7) anti-oxidantوفعالي ة كاسحة للجذور الحرة ) .(9يم تص ح امض الروزماريني ك ب شكل جي د ف ي القن اة المعدي ة المعوي ة والجل د ) (10يقل ل م ن إنت اج leukotrien B2في خاليا الدم متع ددة الن واة polymorphonucler leucocytesلإلن سان ) ,(11يمتل ك ح امض الروزماريني ك فعالي ة م ضادة لأللتھ اب ) .(12وھنال ك دراس ات عدي دة س جلت إن ھ ذا الحامض له فعالية مضادة لاللتھاب وذلك م ن خ الل تثب يط فعالي ة جھ از الم تمم (13) complement systemوفعالي ة إن زيم السايكلواوكسيجنيز) ,(14المواد الطبي ة الفعال ة عب ارة ع ن زي وت طي ارة م ع الت ربنتين terpeninوم واد قاب ضة وم واد من شطة لألع صاب موج ودة ف ي األوراق ) .(15يعتق د ب ان إكلي ل الجب ل ومكونات ه وخاص ة ح امض الروزماريني ك يمتل ك فعالي ة دوائي ة لعالج اومن ع ح دوث ذات الرئ ة الق صيبي ,اض طرابات المغ ص, القرح ة الھ ضمية ,peptic ulcerاألم راض االلتھابي ة ,ذيفان ات الكب د,ت صلب ال شرايين ,إم راض القل ب ,عتام ة عدس ة الع ين cataractsوال سرطان ) ,(16وب الرغم م ن الفوائ د الطبي ة واالس تعماالت الكثي رة إلكلي ل الجب ل إال إن اس تخدام ھ ذا النب ات لفترات زمنية طويلة يكون تأثيره ساما ,لذا كان ھدف ھذا البح ث ھ و دراس ة ت أثير م ستخلص إكلي ل الجب ل ف ي خ صائص النط ف ومستوى ھرمون التستوستيرون في ذكور الجرذان البالغة. المواد وطرائق العمل أجريت ھذه الدراسة في بيت الحيوانات التجريبية التابع لكلي ة الطب البيطري – جامعة الموصل .شملت ھذه الدراسة ٢٤جرذا ذك را اب يض ب الغ م ن ن وع Albinoتراوح ت أعمارھ ا م ا ب ين ) (٣-٢,٥أش ھر وبمتوس ط وزن ) ,(١٣,٨٠± ٢٥٠وض عت الحيوانات في أقفاص بالستيكية ذات أغطية حديدية خاصة لتربية الجرذان أبعادھا ) (٣٠×٤٠×٢٠سم. اسـتخدم في الدراسـة نبات إكـليل الجـبل الذي ت م ش ـراءه م ن األس واق المحلي ة ف ي مدين ة الموص ل وت م تنظي ف النب ات م ن ال شوائب واألج سام الغريب ة وغربلت ه م ن ث م طحن ه بواس طة الطاحونة الكھربائية اخذ م سحوق إكلي ل الجب ل الج اف ونق ل إل ى جھاز االستخالص السوك سليت soxhletوت م وض ع كمي ة مناس بة م ن كح ول االيث انول ف ي دورق دائ ري ورك ب علي ه جھ از ٧٠
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٧٦-٦٩) ٢٠١١ ،٢
جامع ة الموص ل اعتم ادا عل ى طريق ة االدم صاص المن اعي الم رتبط ب اإلنزيم )Enzyme linked immunossorbant (ELISA assayباس تخدام ع دة التق دير المجھ زة م ن ش ركة Bio Check ،Inc.إذ تم قياس االمتصاص ال ضوئي للمعق د الن اتج م ن التفاع ل بواس طة جھ از ق ارئ االلي زا ) ELISA reader Stat Fax .(3200,USA استخدم نظام البرنامج اإلحصائي SPSSلتحليل نتائج الدراسة حي ث اس تخدم اختب ار Analysis of varianceف ي التحلي ل اإلحصائي للصفات )الفرق في وزن الجسم ,العدد الكل ي للنط ف, الن سبة المئوي ة للنط ف الحي ة والميت ة والم شوھة ,وزن ك ل م ن الخ صى ,ورأس وج سم وذي ل الب ربخ( وتركي ز ھرم ون التستوستيرون .كما استخرج المعدل والخطأ القياسي وتم استخدام اختبار دنكن Duncan's multiple rang testلقياس معنوية الفروق بين المتوسطات وذلك للمتوسطات الت ي ظھ ر بينھ ا ف رق معن وي ).(24
الشريحة سحبت قطرة من محلول رأس البربخ المحضر بواس طة ماصة على الشريحة قريبا م ن حاف ة ات صال غط اء ال شريحة م ع شريحة ع د كري ات ال دم الحم راء ث م ترك ت بع دھا لم دة ٥دق ائق وذلك الستقرار النطف عل ى المربع ات بع دھا أجري ت عملي ة ع د النطف لخمس مربعات في الشريحة ,أرب ع مربع ات منھ ا طرفي ة والخامس وسطي بمعنى تم عد النطف في ٨٠مربع صغير )الن كل مربع وسطي يحتوي ١٦مربع صغير (٨٠=٥×١٦وح سب بع دھا الع دد الكل ي للنط ف ف ي رأس الب ربخ ف ي المليليت ر الواح د ) (20وكما يلي-: -١عدد النطف في ٨٠مربع صغير يقسم العدد الناتج للنطف من خم س مربع ات عل ى ٨٠لمعرف ة ع دد النط ف ف ي المرب ع الواحد الصغير. -٢حج م المحل ول ف ي المرب ع ال صغير الواح د ٢٥/١ × ١٦/١ × ١٠/١ملم ٤٠٠٠/١ = ٣ملم ٣فق د ض رب الن اتج ×٤٠٠٠ لحساب عدد النطف في ملم ٣الواحد. -٣ضرب عدد النطف في مل م ٣الواح د ف ي ١٠٠٠لمعرف ة ع دد نطف المليليتر الواحد من المحلول.
النتائج يوضح الجدول ) (١عدم وجود فرق معنوي في معدل الزيادة الوزني ة األس بوعية للمج اميع المعامل ة بم ستخلص إكلي ل الجب ل بجرع ه الثالث ة مقارن ة م ع مجموع ة ال سيطرة خ الل أس ابيع التجربة. يوضح الجدول ) (٢إن ھناك انخفاض معن وي ) (P<0.05ف ي مع دل وزن الخ صى للمج اميع المعامل ة بالم ستخلص بجرع ه الثالثة ١٠٠٠ ،٥٠٠ ،٢٥٠ملغم/كغم من وزن الجسم مقارنة مع السيطرة ,كذلك لوحظ انخفاض معنوي ) (P<0.05في معدل وزن رأس وج سم وذي ل الب ربخ ومع دل وزن الحوي صالت المنوي ة للمجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٥٠٠ملغم/كغم من وزن الج سم مقارن ة م ع ال سيطرة والمجم وعتين المعامل ة بالم ستخلص بجرعت ي ١٠٠٠ ،٢٥٠ملغ م/كغ م م ن وزن الج سم م ع وج ود انخف اض معن وي ) (P<0.05ف ي مع دل وزن غ دة البروس تات للمجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٥٠٠ملغم/كغم من وزن الج سم مقارن ة م ع ال سيطرة والمجموع ة المعامل ة بالم ستخلص بجرع ة ٢٥٠ملغ م/كغ م م ن وزن الج سم ,إض افة إل ى وج ود انخف اض معن وي ) (P<0.05ف ي مع دل وزن رأس الب ربخ وغ دة البروس تات للمجموع ة المعامل ة بالم ستخلص بجرع ة ١٠٠٠ ملغ م/كغ م م ن وزن الج سم مقارن ة م ع ال سيطرة والمجموع ة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٢٥٠ملغم/كغم من وزن الجسم. ب ين الج دول ) (٣إن ھن اك انخف اض معن وي ) (P<0.05ف ي النسبة المئوية للنطف الحية للمجم وعتين المع املتين بالم ستخلص بجرعت ي ١٠٠٠ ،٥٠٠ملغ م/كغ م م ن وزن الج سم مقارن ة بال سيطرة والمجموع ة المعامل ة بالم ستخلص بجرع ة٢٥٠ ملغ م/كغ م م ن وزن الج سم ,إض افة إل ى وج ود ارتف اع معن وي ) (P<0.05ف ي الن سبة المئوي ة للنط ف الميت ة للمجموع ة المعامل ة بالم ستخلص بجرع ة ١٠٠٠ملغ م/كغ م م ن وزن الج سم مقارن ة
الع دد الكل ي للنط ف = مجم وع ع دد النط ف ف ي خم س مربع ات ×٨٠/ ١٠٠٠× ٤٠٠٠ بعد فصل البربخ عن الخصية اخذ ذيل البربخ وقطع إلى قطع ص غيرة ف ي طب ق بت ري وأض يف إلي ه ٢م ل م ن محل ول المل ح الف سلجي بدرج ة ح رارة ٣٧م˚ ث م اخ ذ من ه قط رة وض عت عل ى ش ريحة زجاجي ة وأض يف إليھ ا قط رة م ن ص بغة االيوس ين – نكروس ين المح ضرة أني ا ,خلط ت القطرت ان مع ا بواس طة زاوي ة ش ريحة ثاني ة ولم دة ن صف دقيق ة بع دھا اخ ذ بط رف ال شريحة الثانية جزء من المزيج وس حب بزاوي ة ح ادة وبرف ق ث م وض عت ال شريحة الزجاجي ة الم ستخدمة ف ي حاض نة بدرج ة ٣٧م˚ وذل ك ل ضمان جفافھ ا ,وبع د تم ام جف اف الم سحة ت م فح صھا باس تخدام العدس ة الزيتي ة × (21) ١٠٠ح سب م ن خاللھ ا الن سبة المئوي ة للنط ف الحي ة )الت ي ل م تأخ ذ ال صبغة( والن سبة المئوي ة للنط ف الميت ة )الت ي أخ ذت ال صبغة( والن سبة المئوي ة للت شوھات النطفي ة من ١٠٠نطفة من كل شريحة ).(22 جمعت عينات الدم دون إح داث إجھ اد كبي ر للحيوان ات الحي ة عند األسبوع السادس من التجربة .استخدمت أنابيب شعرية ألخ ذ نم اذج ال دم م ن الظفي رة الوريدي ة العيني ة Opthalmic Venous ،(23) plexusإذ س مح لل دم باالن سياب إل ى أنبوب ة اختب ار جاف ة ونظيف ة ،س مح لل دم ب التخثر ث م ت م ف صل م صل ال دم باس تخدام طريق ة النب ذ بجھ از الط رد المرك زي ) Shanghaii Surgical (instruments Factoryب سرعة ٣٠٠٠دورة/دقيق ة ولم دة ١٥ دقيق ة ث م ف صل الم صل وحف ظ بدرج ة ) (٢٠-م˚ لغ رض قي اس تركيز ھرمون التستوستيرون في مصل الدم. ت م قي اس م ستوى ھرم ون الت ستوستيرون ف ي م صل دم الج رذان ف ي مختب ر األبح اث المرك زي /كلي ة الط ب البيط ري، ٧١
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٧٦-٦٩) ٢٠١١ ،٢
٢٥٠ملغ م/كغ م م ن وزن الج سم كم ا أظھ رت المج اميع الثالث ة المعامل ة بالم ستخلص ارتفاع ا معنوي ا ف ي الن سبة المئوي ة للنط ف الم شوھة مقارن ة م ع مجموع ة ال سيطرة,ك ذلك يالح ظ وج ود انخف اض معن وي ) (P<0.05ف ي الع دد الكل ي للنط ف للمج اميع الثالثة المعاملة بالمستخلص مقارنة مع مجموعة السيطرة.
بال سيطرة والمجم وعتين المع املتين بالم ستخلص بجرع ة ,٢٥٠ ٥٠٠ملغ م/كغ م م ن وزن الج سم م ع وج ود ارتف اع معن وي ) (P<0.05ف ي الن سبة المئوي ة للنط ف الم شوھة للمجم وعتين المع املتين بالم ستخلص بجرعت ي ١٠٠٠ ،٥٠٠ملغ م/كغ م م ن وزن الج سم مقارن ة بالمجموع ة المعامل ة بالم ستخلص بجرع ة
الجدول ) (١تأثير المعامل ة بم ستخلص إكلي ل الجب ل ب الجرع ١٠٠٠ ،٥٠٠ ،٢٥٠ملغ م /كغ م م ن وزن الج سم ف ي مع دل الزي ادة الوزني ة األسبوعية )غم( في ذكور الجرذان البالغة. المعامالت مجموعة السيطرة
الوقت )معدل الزيادة الوزنية ±الخطأ القياسي غم( األسبوع األسبوع األسبوع األسبوع األسبوع السادس الخامس الرابع الثالث الثاني ٨,٨٣ ٩,٨٣ ٩,٥٠ ٦,٨٣ ٦,١٦ ١,٢٧ ± ٠,٧٩ ± ١,٧١ ± ١,٧٠ ± ٢,٤٠ ±
األسبوع األول ٩,٣٣ ٠,٨٠± a
المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٢٥٠ملغم/كغم من وزن الجسم المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٥٠٠ ملغم/كغم من وزن الجسم المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ١٠٠٠ملغم/كغم من وزن الجسم
a
١٠,١٦ ٠,٧٩ ± a
٦,١٦ ٨,٠٠ ١,٦٨ ± ١,٦٣ ± a
٩,٨٣ ١,٠٧ ± a
a
٧,٠٠ ٦,٠٠ ١,٥٠ ± ١,١٥ ± a
٩,٠٠ ١,٠٩ ±
a
a
٨,٦٦ ٧,٦٤ ١,٧٢ ± ٢,٨١ ±
a
٨,٣٣ ٢,٣٠ ± a
٩,٨٣ ٠,٧٩ ± a
٧,١٦ ٢,٨٦ ±
a
a
٩,٠٠ ١٠,٥٠ ١,٣٩ ± ١,٥٩ ± a
a
٨,٦٦ ١٠,٠٠ ١,٧٦ ± ١,٠٨ ± a
a
٨,١٦ ١١,٣٣ ١,٩٥ ± ١,١١ ± a
a a a a a عدد الحيوانات = /٦مجموعة ،األحرف المختلفة في العمود الواحد تبين وجود فرق معنوي عند مستوى معنوية P<0.05بين المجاميع.
الج دول ) (٢ت أثير المعامل ة بم ستخلص إكلي ل الجب ل ب الجرع ١٠٠٠ ,٥٠٠ ،٢٥٠ملغ م /كغ م م ن وزن الج سم ف ي مع دل وزن الخ صى ورأس وجسم وذيل البربخ و الحويصالت المنوية و غدة البروستات ملغم ١٠٠/غم من وزن الجسم في ذكور الجرذان البالغة.
المعامالت مجموعة السيطرة المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٢٥٠ملغم/كغم من وزن الجسم المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٥٠٠ ملغم/كغم من وزن الجسم المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ١٠٠٠ملغم/كغم من وزن الجسم
الصفات )معدل الوزن ±الخطأ القياسي ملغم ١٠٠ /غم من وزن الجسم( وزن البربخ وزن وزن وزن الحويصالت البروستات الخصى ذيل جسم رأس المنوية ٤٢٧,٩٧ ٧١,٠٦ ٧١,١٧ ١٧,٨٢ ٧٤,٥٨ ٤١٠,٥٦ ٦٨,٩١± ١٢,٤٥ ± ٦,٠٣ ± ٤,٠٨ ± ٥,٠٤± ٢٥,١٨ ± b
c
b
b
b
b
٣٩٤,٤٤ ٢٠,٨٤±
٧٥,٣٦ ٣,٧٤±
١٧,٨٦ ٢,١٨ ±
٦٤,٨٥ ٢,٠٣ ±
٧٠,٩٠ ٦,٠٠±
٤٣٠,٦٧ ٣١,٠٢±
a
c
b
b
b
b
٣٣٣,٣٦ ٤٦,٩٩±
٥٠,٤٦ ٢,٧٣±
١٣,٤٦ ٢,٥٠ ±
٤٩,٨٤ ٤,٨٠ ±
٦٠,٨٧ ٧,٧٥±
٣٥٧,٢٦ ٤٩,٣٦±
a
a
a
a
a
a
٣٠٢,٤٣ ١٧,٨١±
٦٢,٥٢ ٤,٣٥±
١٧,٢٧ ١,٦٦ ±
٦٧,٤٥ ٣,٦٢ ±
٧٩,٥٩ ٣,٩٩±
٣٦٧,٨٣ ٢٢,٦٦±
a
b
b
b
b
a
عدد الحيوانات /٦مجموعة ،األحرف المختلفة في العمود الواحد تبين وجود فرق معنوي عند مستوى معنوية P<0.05بين المجاميع. ٧٢
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٧٦-٦٩) ٢٠١١ ،٢
الجدول ) (٣تأثير المعاملة بمستخلص إكليل الجبل بالجرع ١٠٠٠ ,٥٠٠ ،٢٥٠ملغم /كغم من وزن الجسم في العدد الكلي للنطف و نسبة النطف الحية والميتة والمشوھة في ذكور الجرذان البالغة.
العدد الكلي للنطف ×١٠ نطفة/مل ٦ ١٠×١,٤٧ ٠,٠٩ ±
المعامالت
٦
مجموعة السيطرة
b
٦
١٠×٠,٧٧ ٠,١٣ ±
المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٢٥٠ملغم/كغم من وزن الجسم
a
١٠×٠,٥٦ ٠,٠٣ ±
المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٥٠٠ ملغم/كغم من وزن الجسم
a
١٠×٠,٨٤ ٠,٠٦±
المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ١٠٠٠ملغم/كغم من وزن الجسم
الصفات )المعدل ±الخطأ القياسي( النطف النطف الميتة % الحية % ٧٨,٦٦ ١,٩٠±
٢١,٣٤ ١,٩٠ ±
النطف المشوھة % ٨,٥٠ ٠,٩٢±
c
a
a
٧٣,٥٠ ٢,٧٤ ±
٢٦,٥٠ ٢,٧٤±
١٢,١٦ ٠,٧٩±
c
a
b
٦٥,٠٠ ١,٨٠ ±
٣٥,٠٠ ١,٨٠±
١٨,٥٠ ١,٢٨±
b
b
c
٥٥,٣٣ ١,٧٠±
٤٤,٦٧ ١,٧٠±
١٩,١٦ ١,٠١±
a
c
c
٦
٦
a
عدد الحيوانات /٦مجموعة ،األحرف المختلفة في العمود الواحد تبين وجود فرق معنوي عند مستوى معنوية P<0.05بين المجاميع. يوضح الجدول ) (٤إن ھناك انخفاض معن وي ) (P<0.05ف ي م ستوى ھرم ون الت ستوستيرون للمج اميع الثالث ة المعامل ة بالم ستخلص مقارن ة م ع مجموع ة ال سيطرة ,وك ان االنخف اض يزداد بزيادة الجرعة المستخدمة.
يوض ح الج دول ) (٥ع دم وج ود اخ تالف معن وي ف ي مع دل وزن القل ب والكب د والرئ ة والطح ال والكلي ة للمج اميع المعامل ة بالم ستخلص ب الجرع ١٠٠٠،٥٠٠،٢٥٠ملغ م/كغ م م ن وزن الجسم مقارنة مع مجموعة السيطرة.
الج دول ) (٤ت أثير المعامل ة بم ستخلص إكلي ل الجب ل ب الجرع ١٠٠٠ ,٥٠٠ ،٢٥٠ملغ م /كغ م م ن وزن الج سم ف ي م ستوى ھرمون التستوستيرون نانوغرام /مل لذكور الجرذان البالغة.
المناقشة
المعامالت مجموعة السيطرة
يالحظ من النتائج المتحصل عليھا إن االنخفاض الحاصل في وزن الخصى وغدة البروستات والحويصالت المنوية ربم ا يع ود إل ى ت أثير الفالفوني دات الموج ودة ف ي إكلي ل الجب ل ف ي م ستوى ھرم ون االن دروجين حي ث ذك ر ) (25إن الفالفوني دات لھ ل فع ل م ضاد لھرم ون االن دروجين عن د حق ن ھ ذه الم ادة ف ي الخل ب بجرعة ١٠ملغم/كغم من الج سم ف ي الك الب لم دة ٣٠ي وم حي ث أدى إل ى التقلي ل م ن إنت اج االن دروجين وك ذلك يعم ل عل ى تثب يط المرحلة األخيرة من عملية تكوين النطف وھذا ب دوره ي ؤدي إل ى ح صول انخف اض ف ي أوزان األع ضاء الداخلي ة )الخ صى( ,أم ا االنخفاض الحاصل في رأس وجسم وذيل البربخ قد يك ون ب سبب تأثير إكلي ل الجب ل المث بط إلن زيم السايكلواوك سيجنيز ١-المتواج د ف ي األج زاء الثالث ة لب ربخ الج رذان حي ث ذك ر ) (26إن ح امض الروزماريني ك الموج ود ف ي إكلي ل الجب ل والنبات ات الم شابھة ل ه يعمل على تقليل إنزيم السايكلواوكسيجنيز ,١-ويلعب ھ ذا اإلن زيم دور مھم ا ف ي ت صنيع البروس تاكالندينات ف ي الخالي ا الظھاري ة المبطن ة لخالي ا الب ربخ الس يما البروس تاكالندين E2ال ذي يعم ل على تنظيم إفـراز السـوائل وااللكتروليتـات فـي تجـويف البربـخ
مستوى ھرمون التستوستيرون )نانوغرام /مل( ± الخطأ القياسي ٠,٣٠±٧,٨٨ d
المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٢٥٠ملغم/كغم من وزن الجسم المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٠,١٩±٥,٦٨ b ٥٠٠ملغم/كغم من وزن الجسم المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٠,١١±٤,٧٥ a ١٠٠٠ملغم/كغم من وزن الجسم عدد الحيوانات /٦مجموعة ،األحرف المختلفة ف ي العم ود الواح د تب ين وج ود ف رق معن وي عن د م ستوى معنوي ة P<0.05ب ين المجاميع. ٠,١٩±٦,٥٦ c
٧٣
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٧٦-٦٩) ٢٠١١ ،٢
الج دول ) (٥ت أثير المعامل ة بم ستخلص إكلي ل الجب ل ب الجرع ١٠٠٠ ,٥٠٠ ،٢٥٠ملغ م /كغ م م ن وزن الج سم ف ي مع دل وزن األح شاء الداخلية ملغم١٠٠ /غم من وزن الجسم في ذكور الجرذان البالغة. المعامالت مجموعة السيطرة
معدل وزن القلب والكبد والرئة والطحال والكلية ±الخطأ القياسي ملغم ١٠٠/غم من وزن الجسم الكلية الطحال الرئة الكبد القلب ٢٧٥,٨١ ٣٣٥,١٩ ٨٢٤,٩٠ ٤٤٧١,٠٤ ٣٧٣,٢٣ ٢٤,٠٨ ± ٣,١٩ ± ١٢,١٩ ± ١٠١,٨٩ ± ٢٣,٧٨ ± a
المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٢٥٠ملغم/كغم من وزن الجسم المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ٥٠٠ ملغم/كغم من وزن الجسم المجموعة المعاملة بالمستخلص بجرعة ١٠٠٠ملغم/كغم من وزن الجسم
a
٤٤٩٤,٣٠ ٣٨٨,٠٦ ١٤١,٣٩ ± ١٩,٠٤ ±
a
a
a
٧٨٩,٠٨ ٢٦,٧٤ ±
٣٣٧,١٦ ١٢,٩٩ ±
٣١٩,٩٠ ٧,٥٢ ±
a
a
a
a
a
٣٤٦,٩٥ ١٩,٤٩ ±
٤٥٦٤,١٥ ٨٥,١٨ ±
٧٥٨,٦١ ١٧,١١ ±
٣٥١,٦٠ ١٤,٥٧ ±
٢٤٨,٣٤ ٣١,٦١ ±
a
a
٤٥٦٧,٠٧ ٣٨٨,٠٠ ١٧٧,٣٤ ± ٢٢,٢٨ ± a
a
a
a
a
٧٨٩,٥٨ ٣١,٤٣ ±
٣٥٩,٨٣ ١٦,٩٤ ±
٣١٦,٦٢ ٢١,١٩±
a
a
a
عدد الحيوانات /٦مجموعة ،األحرف المختلفة في العمود الواحد تبين وجود فرق معنوي عند مستوى معنوية P<0.05بين المجاميع. عند المعاملة بمستخلص إكليل الجبل إلى تأثيره غير المباش ر م ن خالل تثبيط ه لعملي ة ص نع البروس تاكالندينات ف ي الغ دة النخامي ة حي ث ذك ر ) (34إن ح امض الك افئين والمركب ات الفينولي ة الموجودة في النبات يعمل على تثبيط تصنيع البروستاكالندين في خالي ا الف م الظھاري ة ف ي حال ة االلتھاب ات الح ادة ف ي اإلن سان والجرذان وقد ذكر ) (35بان أنواع البروستاكالندينات تعمل على تحفيز إفراز الھرمون المحفز للجري ب والھرم ون الل وتيني داخ ل الج سم .وبم ا إن الھرم ون المحف ز للجري ب يلع ب دورا مھم ا ف ي عملي ة تك وين النط ف) (36ل ذلك ف ان تثب يط عملي ة تك وين النط ف بواس طة م ستخلص إكلي ل الجب ل ربم ا يك ون م ن خ الل خف ض تركي ز الھرم ون الل وتيني والھرم ون المحف ز للجري ب .كم ا ذك ر ) (37إن للفالفونيدات فعالية م ضادة لحرك ة الحي امن وذك ر )(38 إن الفالفونيدات تعمل على التقليل من حرك ة الحي امن ف ي الق رود وقد أش ار ) (39إن إعط اء زي ت إكلي ل الجب ل ف ي عليق ة الغ زالن خالل فصل ال صيف أدى إل ى التقلي ل م ن الكف اءة التناس لية .وم ن ناحي ة أخ رى ربم ا يع ود ارتف اع الن سبة المئوي ة للنط ف الميت ة والمشوھة إلى تأثير مستخلص إكلي ل الجب ل ف ي م ستوى ھرم ون الت ستوستيرون حي ث ذك ر ) (33إن اس تخدام م ستخلص إكلي ل الجبل أدى إل ى التقلي ل م ن م ستوى ھرم ون الت ستوستيرون وھ ذا م ا أظھرت ه نت ائج ھ ذه الدراس ة الحالي ة حي ث أدت المعامل ة بمستخلص إكليل الجبل بجرع ه الثالث ة إل ى ح دوث انخف اض ف ي مستوى ھرمون التستوستيرون في مصل الدم وربما يعود ال سبب إلى تأثير إكليل الجبل المباش ر ف ي خف ض م ستوى الكولي ستيرول حي ث ذك ر ) (40إن ح امض الروزماريني ك يعم ل عل ى تثب يط
والضرورية إلدام ة النط ف ,ل ذا ف ان تثب يط ھ ذا اإلن زيم يقل ل م ن عملية تصنيع البروستاكالندينات في ظھارة البربخ ) ,(27كم ا إن ھ ذا اإلن زيم م سؤول ع ن تحوي ل ح امض االرش يدونيك إل ى البروستاكالندين ) ,(28وھذا مط ابق لم ل ذك ره ك ل م ن )(19,15 حيث ذكروا إن ح امض الروزماريني ك يعم ل عل ى تثب يط ت صنيع السايكلواوك سيجنيز ٢-١-كم ا ذك ر ) (30إن اس تخدام الم ستخلص الكح ولي إلكلي ل الجب ل يعم ل عل ى تثب يط السايكلواوك سيجنيز,٢- وبالتالي حدوث قلة في سوائل البربخ التي تؤدي إلى انخفاض في وزن رأس وجسم وذيل البربخ .أحدثت المعاملة بمستخلص إكليل الجب ل انخف اض معن وي ف ي محت وى رأس الب ربخ م ن النط ف وزيادة معنوية في النسبة المئوية للنطف الميت ة والم شوھة وربم ا تع زى الزي ادة الحاص لة ف ي الن سبة المئوي ة للنط ف الميت ة والمشوھة إلى تأثير إكليل الجبل في محور تحت المھاد والنخامية Hypothalamus-Pituitary axisحي ث ذك ر ) (32,31إن عملي ة تكوين النطف ووظيفة الغدد الجنسية الالحقة تعتم د عل ى ھرم ون االن دروجين,ويعتق د أن إكلي ل الجب ل يعم ل عل ى الغ دة النخامي ة ويخف ض الھرمون ات الرئي سية لعملي ة تك وين النط ف ) (33وان انخف اض م ستوى ھرم ون االن دروجين ي ؤدي إل ى انخف اض ف ي وظيفة وع دد خالي ا لي دك وق د أش ار ) (33إن اس تخدام م ستخلص إكليل الجب ل بجرعت ي ١٠٠ ،٥٠ملغ م/كغ م م ن وزن الج سم ف ي الج رذان لم دة ش ھرين أدى إل ى التقلي ل م ن أع داد خالي ا لي دك ومستوى ھرمون التستوستيرون وھذا يفسر الزي ادة الحاص لة ف ي النسبة المئوية للنطف الميت ة والم شوھة ل دى المعامل ة بم ستخلص إكليل الجبل وربما يعود التأثير التثبيطي في عملية تكوين النط ف
٧٤
(٧٦-٦٩) ٢٠١١ ،٢ العدد،٢٥ المجلد،المجلة العراقية للعلوم البيطرية
15. James A. Duke. The handbook of medicinal herbs. 2nd ed. CRC Press, Washington, D.C. 2002;68. 16. Katrino poulos HE, Pagona G, Afratis A, Stratigakisn N, Roditakis N. Composition and insect attracting activity o f the essential oil of Rosmarinus Officinalis chem. Ecol.2005;31:111-122.
الكوليستيرول وھذا األخير يعتبر من المواد األساس ية ال ضرورية (41) الداخلة في تصنيع التستوستيرون وھذا يتوافق م ع م ا ذك ره كغ م/ ملغ م٥٠٠ حيث أشار إلى إن اس تخدام إكلي ل الجب ل بجرع ة من وزن الجسم كان له تأثير مخفض لم ستوى الكولي ستيرول ف ي نستنتج من ھ ذه الدراس ة ب ان م ستخلص إكلي ل الجب ل.الدم والكبد كغم من وزن الجسم ل ه/ ملغم١٠٠٠ ،٥٠٠ ،٢٥٠ بجرعه الثالثة ت أثيرات س لبية ف ي خ صائص النط ف وم ستوى ھرم ون .التستوستيرون في ذكور الجرذان البالغة
دار ال شؤون الثقافي ة. األع شاب الطبي ة: ش روق محم د ك اظم, س عد ال دين.١٧ .١٩٨٦.العامة كلية الزراعة. تحليل األغذية. صادق حسن، باسل كامل و الحكيم, الداللي.١٨ .٣٥٧؛١٩٨٧. جامعة الموصل,والغابات 19. Shakamato J, Hashimato K. Reproductive toxicity of aryl amide and related compounds in mice. Effect on fertility and sperm morphology. Arch Toxicol.1986;59:201-205. 20. Bearden HJ, Fuguan TW, Willard ST. Applied animal reproduction. 6th ed. Mississippi State University. 2004.
شكر وتقدير
الطبع ة. الخ صوبة والتلق يح االص طناعي. ح سين عب د الك ريم, ال سعدي.٢١ .٢٠٠١ . جامعة الموصل, كلية الطب البيطري,الثانية
.جامعة الموصل لدعم البحث-اشكر كلية الطب البيطري
22. Nookes DE, Parkinson TJ. Arthur's veterinary reproduction and obstetrics. 8th ed. Saunders, England. 2001. 23. Timm K. Orbital venous anatomy of the rat. Lab Animals Sci.1979;2:663-670. دار األوائ ل.Spss التحلي ل اإلح صائي المتق دم باس تخدام. محفوظ، جودت.٢٤
المصادر 1. Gilani AH, Rahman AU. Trends in ethnopharmacology. J Ethnopharmacol.2005;100:43-49. 2. Fitter JT, Thomas MR, Rose RJ. Investigation of Nicotiana tabacum(+)N. suaveolens cybird with carpelliod stamens. J plant physiol.2005;162:225-235. 3. Karim FM, Quraan SA. Herbal uses. In: Medicinal plant of Jordan. Irdib, Jordan: center for Jordanian studies, Yarmouk university. 1986;43-67. 4. Oluwatuy M, Kaatz GW, Gibbons S. Antibacterial and resistance modifying activity of Rosmarinus Officinalis. Phytochemistry. 2004;65:3249-3259.
.٢٠٠١ . األردن. الطبعة األولى،للنشر 25. Bhargava SK. Anti-androgenic effect of flavonoid-rich fraction of Vitex Negundo seeds: a histological and biochemical study in dogs. J Ethnopharmacol.1989;27(30):327-39. 26. Kristen A, Scheckel, Stephanie C, Degner, Donato F, Romagnolo. Rosmarinic acid antagonizes activator protein-1 dependent activation of cyclooxygenease -2 expression in human cancer and non-malignant cell lines. American Society for nutrition J Nutr.2008;138:2098-2105. 27. Wong PY. Fluid transport and sperm maturation in the epididymis. Bio Res.1986;2:233-240. 28. Smith WL, Dewitt DL, Garavito RM. Cyclooxygenease: structural cellular and molecular biology. Annu Rev Biochem.2000;69:145-82. 29. Nan Huang, Cathy Hanck, Man-Yuyu, Ludmila Rizshsky, Mark P, Widrlechner, Joe-Ann Mc coy, Patricia A, Murphy, Philip M, Dixon, Basil J, Nikolau, Diane F, Birt. Rosmarinic acid in Prunella Vulgaris ethanol extract inhibit lipopolysaccharide-induced prostaglandin E2 and nitric oxide in RAW 264.7 mouse macrophages. J Agric Food Chem.2009;57(22):10579-10589. 30. Cheungs S, Tai J. Anti-proliferative and antioxidant properties of Rosmarinus Officinalis. Oncol Rep.2007;17(6):1525-31. 31. Dym M, Raj HG, Lin YC, Chemes HE, Kotite NJ, Nayfesh SN, French FS. FSH required for maintenance of spermatogenesis in adult rats. J Repod Fertile suppl.1979;26:175-181. 32. Desjardins C. Endocrine regulation of reproductive development and function in the male. J Anim Sci.1978;47:56-79. 33. Heidarin M, Ameri F, Ghaffari-Novin M, Vaezi GH, Keramati K, Rajaei F. Antiandrogenic effect of Rosmarinus Officinalis extract on the reproductive tract of male rats. 2008;65(3). 34. Pedro Michaluart, Jaime L, Masferrer, Adelaid M, Carothers, Kotha Suddaramaiah, Bens Zweifel, Carol Koboldt, Juan R, Mestre, Dezider Grumberger, Peter G, Sacks, Tadashi Tanabe, Andrew J. Inhibitory effect of caffeic acid phenethyl ester in the activity and expression of cyclooxygenease in human oral epithelial cell in a rat model of inflammation. American association for cancer research. 1999;59:2347-2352. 35. Hayaishi O. Molecular mechanisms of sleep- wake regulation roles of prostaglandin D2 and E2 in the regulation of anterior pituitary secretion. FASEB J.2000;5:2575-81. 36. Ganong WF. Review of medical physiology 12thed. Lange medical books. McGraw-Hill medical publishing division New York. 2001;410-419. 37. Chattopadhyay D, Dungdung SR, Mandal AB, Majmder GC. Apotant sperm motility-inhibiting activity of bioflavonoids from an ethn
دار, الطبع ة ال سادسة. معج م األع شاب والنبات ات الطبي ة. ح سان, قبي سي.٥ .٨٦؛٢٠٠٤.لبنان- بيروت,الكتب العلمية 6. Herreo MA, Ibanez E, Cifuentes A. Pressurized liquid extractioncapillary electrophoresis-mass spectrometry for the analysis of polar antioxidant in rosemary extract. Chromatogr A.2005;1084:54-62. 7. Ramirez P, Senorans FJ, Ibanez E, Reglero G. Separation of rosemary antioxidant compounds by supercritical fluid chromatography on coated packed capillary columns. Chromatogr A.2004;1057:241-245. 8. Saito Y, Ashigo Y, Yoshida Y, Furuhashi T, Fujita Y, Niki E. Effect of a novel gaseous antioxidative system containing rosemary extract on the oxidation induced by nitrogen dioxide and ultraviolet radiation. Bioscience, Biotechnology and Biochemistry.2004;68(4):781-786. 9. Zhao BL, Xjli, He SJ, Cheng SJ, Xin WJ. Scavenging effect of extract of green tea and natural anti-oxidants on active oxygen radicals. Cell Biophysics.1989;14:174. 10. Al-screiti MR, Abu-Amer KM, Sen P. pharmacology of rosemary (Rosmarinus Officinalis Linn) and its therapeutic potentials. Indian J Exp Biol.1999;37:124-130. 11. Isles RC, Choy NL, Steer M, Nitz JC. Normal values of balance test in women aged 20-80. J Am Geriatr Soc.2004;52:1367-1372. 12. Slamenova D, Kuboshova K, Horvathova E, Rodichova S. Rosemarystimulated reduction of DNA strand breaks and FPG-sensitive sites in mammalian cells treated with H2O2 or visible light-excited methylene blue. Cancer Lett.2002;177:145-53. 13. Sahu A, Rawal N, Pang burn MK. Inhibition of complement by covalent attachment of Rosmarinus acid to activated C3b.Biochem Pharmacol.1999;57:1439-46. 14. 0sakae N, Takano H, Sanbongi C, Yasuda A, Yanagisawa R, Inoue K, Yoshikawa T. Anti-inflammatory and anti-allergic effect of Rosmarinus acid (RA); inhibition of seasonal allergic rhinoconjuctivitis (SAR) and its mechanism. Biofactors.2004;21:12731.
٧٥
(٧٦-٦٩) ٢٠١١ ،٢ العدد،٢٥ المجلد،المجلة العراقية للعلوم البيطرية
medicine of onge, Alstonia macrophyll wall ex A.DC, leaf extract. Contraception. 2005;71(5):372-8. 38. Li MW, Yudin AL, Vandevoort CA, Sabeur K, Primakoff P, Overstreet JW. Inhibition of monkey sperm hyaluronidase activity and hertologous cumulum penetration by flavonoids. Biol Reprod. 1997;56(6):1383-9. 39. Superchi P, Talarico L, Bertti V, Bonomi A. Effect of dietary administration of oil extract from rosemary on reproductive efficiency in boars. Italian J of animal Science.2005;4(2).
40. LiLi, Jingwei Tian, Xuguo Liang. Regression of atherosclerosis by Rosmarinus acid via regulating lipid metabolism and antiinflammatory action. J of Molecular and cellular cardiology. 2008;44(4):719. 41. Sancheti G, Goyla PK. Effect of Rosmarinus Officinalis in modulating 7,12-dimethylbenz(a) anthracene induced skin tumor genesis in mice. Phytother Res.2006;20(11):981-6.
٧٦
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٨٢-٧٧)٢٠١١ ،٢
تأثير إضافة العكبر في األعالف على صحة وإنتاجية فروج اللحم منتھى غازي حسن و تقى احمد عبدﷲ فرع الصحة العامة البيطرية ،كلية الطب البيطري ،جامعة الموصل ،الموصل ،العراق )اإلستالم ١١تشرين األول ٢٠١٠؛ القبول ٢٨آذار (٢٠١١ الخالصة العكبر مادة طبيعية تنتجه شغاالت النحل من براعم األشجار وقلفھا .انصبت فكرة الدراسة على استخدام العكبر في تغذية ف روج اللح م بالتركيزين 200ملغم /كغم و 400ملغم /كغم منذ اليوم األول من عمر األف راخ وط وال م دة التربي ة والبالغ ة ٨أس ابيع .اس تھدفت الدراس ة تقييم كفاءة تأثير العكبر على تحسين األداء اإلنتاجي اعتماداً على المعايير اإلنتاجية ,أوزان األعضاء الداخلي ة ون سبة الت صافي .أوض حت النتائج أن العكبر بتركيز 400ملغم /كغم أدى إلى ارتفاع معنوي في معدل الزيادة الوزنية التي وص لت ف ي األس بوع الث امن )(٢٣٠٦,٢٧ غم .كما ادى اضافة العكبر الى زيادة في استھالك العلف لھذه المجموعة ,خاصة ف ي االس بوع الراب ع .بل غ أق صى مع دل للنموالي ومي ف ي المجموعة المعاملة بالعكبر بالتركيز 400ملغ م /كغ م ) (٥٥,٥٢غ م ف ي األس بوع ال سابع ،اض افة ال ى تح سين معام ل التحوي ل الغ ذائي ف ي األسابيع الثاني والثالث والرابع للمجموعة المعاملة بالعكبر بتركيز 400ملغم /كغم حيث بلغ ) ،(١,٩٥ ،١,٥٩ ،١,٣٥على التوالي ،فضال عن زيادة معدالت األوزان النسبية لكل من الكبد والقلب واألفخاذ ونسبة التصافي التي بلغت ).(%٧٤,٠٣
The effect of propolis feed supplementation on hygiene and performance of broiler chickens M. G. Hassan and T. A. Abdulla Department of Veterinary Public Health, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq Abstract Propolis is a natural substance produced by worker bees from trees and leaf buds. The study aimed to evaluate the effect of two concentrations (200, 400 mg/kg diet) of propolis on some performance traits and hygienic parameters of broiler chickens body weight, feed conversion, feed consumption, during an eight weeks experiment, weights of internal organs, and dressing )percentage also recorded. The results showed that using propolis at 400 mg/kg in the diet lead to significant increase (P<0.05 )in eighth-week body weight (2306.27) g, feed consumption especially in the fourth week, maximum daily growth rate (55.52 gm was obtained from the treatment of 400 mg/kg in the seventh week period. Also propolis lead to improve feed conversion efficiency in the second, third and fourth week of age for the broilers fed diet with 400 mg/kg (1.35, 1.59, 1.95), respectively. Average of proportional weights for each of the liver, heart, thighs, and dressing percentage (74.0%) were improved among birds of this treatment, too. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
مع اللعاب الحاوي على إنزيم االميليز ،والذي يعمل عل ى تحري ر .flavonoids, aglyconsالعكبر م ادة علكي ة لزج ة تجم ع بوس اطة نحل العسل Apis mellificalويختلف لون ه ب اختالف النب ات ال ذي جم ع من ه .يك ون العكب ر ف ي حالت ه الطبيعي ة عل ى ش كل رق ائق معب أ ف ي كب سوالت لي سھل ويب اع عل ى ش كل م سحوق ح ر او ّ اس تھالكه .ي ستخدم العكب رمن قب ل النح ل داخ ل الخلي ة لط الء
المقدمة يع د العكب ر اح د المنتج ات الناش ئة ع ن التنظ يم المب دع لقفي ر النحل ،وھو عبارة عن م زيج م ن ش مع النح ل والم واد الراتنجي ة الت ي يجمعھ ا النح ل م ن الب راعم الورقي ة واللح اء ف ي األش جار الس يما أش جار الح ور والك ستناء ) .(١يق وم النح ل بم زج العكب ر ٧٧
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٨٢-٧٧)٢٠١١ ،٢
دراسة تأثير العكبر ف ي أع الف ف روج اللح م للتع رف عل ى دوره في تحسين كفاءة االداء االنتاجي في الدواجن وصفات الذبيحة.
الج دران الداخلي ة ،س د ال شقوق ،لحماي ة م دخل القفي ر ،وك ذلك لتقليل حجم فتح ة الخلي ة ف ي ال شتاء كوس يلة دفاعي ة حفاظ ا عليھ ا من الجراثيم والحشرات ).(٥-٢ أشار الباحثون الى انه ھناك ما يق ارب أكث ر م ن ٣٠٠مركب ا كيمياوي ا ش ارك ف ي تك وين العكب ر ) .(٧،٦وأھمھ ا الفالفوني دات Flavonoidsوھي مركبات معقدة ذات أواصر ت ساھمية قوي ة م ع ذرات معادن ثقيلة موجودة في الخاليا بدائية النواة والفالفوني دات الت ي ھ ي ص بغات نباتي ة ملون ة ف ضالً إل ى ح امض الفريول ك Ferulic acidوح امض الكافئي ك caffic acidوالل ذان لھم ا ت أثير مث بط للج راثيم ) .(١١-٨اض افة ال ى ذل ك يحت وي العكبرعل ى الليكين ات ) (١٢والفين والت و أس ترات ح امض الكافائي ك والتربين ات إل ى جان ب حب وب اللق اح الت ي تع ّد غني ة بالعناص ر ال ضرورية والفيتامين ات وال سكريات وم واد أخ رى ).(١٤،١٣ على الرغم من إن المكونات الحيوية الفعالة للعكب ر تتن وع ح سب م صدره لك ن المركب ات األساس ية التقريبي ة ل ه ھ ي % ٥٠م واد راتنجي ة وبل سم polyphenolic fractionو % ٣٠ش مع وم ا يقارب من % ١٠-٨أحم اض دھني ة ض رورية ،زي وت طي ارة، % ٥حبوب لقاح و % ٥مواد عضوية وغي ر ع ضوية .أش ارت بع ض البح وث ب أن العكب ر غن ي بال دھون واألحم اض الع ضوية ومركب ات االيث ر وبع ض العناص ر المعدني ة كالحدي د ،النح اس، المنغنيز ،الزنك ومجموعة فيتامينات ).(١٥،١٠،٥) (B, C, E…. اس تخدم العكب ر بوص فه إض افات غذائي ة ف ي أع الف ف روج اللح م ول وحظ ت أثيره عل ى كف اءة األداء اإلنت اجي لف روج اللح م، عل ى وزن الج سم،كفاءة التحوي ل الغذائي،مع دل اس تھالك العل ف ونسبة الھالكات ) .(١٦تمت مقارن ة ت أثير م ستخلص العكب ر م ع مستخلصات نباتية أخ رى مث ل م ستخلص زي ت ب ذر الكت ان عل ى كفاءة انت اج ال دواجن .وج د ) (١٧ان العكب ر عن صراً إيجابي ا ً ف ي تح سين كف اءة األداء اإلنت اجي لل دواجن ،والح ظ ) (١٨ان ھن اك تحسنا في كفاءة األداء اإلنتاجي لألفراخ المعاملة بتراكيز مختلف ة من مستخلص العكبر 0.5, 1, 1.5 g/kgوكذلك 10ملغ م /كغ م م ن المضاد الحيوي flavomycinالفالفوميسين ول م يت أثر وزن الكتل ة الدھني ة ووزن القان صة .أش ارت بح وث أخ رى ال ى ت أثير مستخلص العكبر عند إضافته ال ى أع الف ال دجاج البي اض بعم ر ٥٤-٤٦اس بوع بتراكي ز 50, 100, 150ملغ م تح سن ف ي كف اءة األداء اإلنت اجي لل دجاج البي اض وزي ادة ف ي اس تھالك العل ف وخاصة عند استخدام التراكيز العالية ،مع زيادة ف ي كتل ة الب يض وزي ادة ف ي س مك أغ شية الب يض ) .(١٩كم ا وج د ًّ أن إض افة مستخلص العكبر إلى عالئق الدجاج البياض بن سبة 30 ppmادت الى زيادة انتاج البيض ف ضال ع ن ارتف اع ن سبة التحوي ل الغ ذائي ) .(١ول وحظ ان ھن اك تغي راً ف ي فل ورا أمع اء ال دواجن عن د اس تخدام العكب ر ف ي العل ف وح سب الجرع ة ).(٢٠عن د اس تخدام العكبر في تغذية اف راخ ف روج اللح م المعرض ة للك رب الح راري لوحظ تحسنا في النمو وفي صفات الذبيحة ) .(٢١وك ذلك اض افة الم ستخلص ال ى عالئ ق ف روج اللح م بن سبة ٥٠٠ ppmادت ال ى زي ادة ف ي مع دل ال وزن بن سبة ) .(١) (%٢٠ل ذا ھ دف البح ث
المواد وطرائق العمل ت م الح صول عل ى عين ة العكب ر المجھ ز م ن ش ركة Werner Seipاأللماني ة .اس تخدم ف ي التجرب ة ) (١٥٠فرخ ا ً م ن أف راخ فروج اللحم نوع Rossبعم ر ي وم واح د للفت رة الممت دة م ن نھاي ة
ش باط ٢٠٠٨إل ى نھاي ة ني سان ،٢٠٠٨وزن ت األف راخ فردي ا ً و لقح ت جمي ع األف راخ باللق اح الح ي لم رض النيوكاس ل ،عت رة السوتا Lasotaوالمخلوط م ع لق اح (I.B.) Infectious Bronchitis والمجھزان من شركة Cevaالھنكاري ة كم ا لقح ت األف راخ بلق اح الكمبورو المجھز من نفس ال شركة .ت م احت ساب مكون ات العليق ة وف ق م ا ورد ف ي ) .(٢٢جھ زت أالف راخ ب العلف الب ادئ ال ذي تك ّون م ن الحنط ة المحلي ة وك سبة ف ول ال صويا الم ستوردة .أم ا العل ف الن اھي تك ّون م ن الحنط ة المحلي ة وك سبة ف ول ال صويا الم ستوردة وال شعير اض افة ال ى المكون ات االخ رى الالزم ة ف ي تك وين عالئ ق ف روج اللح م وكم ا موض ح ف ي الج دول )(١ والجدول ).(٢ الج دول ) (١مكون ات العليق ة البادئ ة الم ستخدمة ف ي التجرب ة لتكوين ١٠٠كغم من العلف. المكونات حنطة محلية كسبة فول الصويا % ٤٨ زيت الطعام فوسفات ملح الطعام خليط فيتامينات ومعادن مثيونين خليط انزيمات البروتين الخام الطاقة التمثيلية
النسبة المئوية ٦٥كغم ٢٩,٥كغم ٢كغم ١,٧٥كغم ٠,٢كغم ١,٠٠كغم ٠,١ ٠,٠٥ %٢٥ ٣٠٥١كيلوكالوري /كغم
ق سمت أالف راخ ع شوائيا إل ى ث الث مج اميع بواق ع ثالث ة مكررات لكل مجموعة ) ١٧فرخا لكل مكرر( ،مثل ت المجموع ة األولى السيطرة وأعطيت عليقة بدون العكبروأعطي ت المجموع ة الثاني ة علف ا ب العكبر ٢٠٠ملغ م /كغ م عل ف .والمجموع ة الثالث ة أعطي ت علف ا ب العكبر ٤٠٠ملغ م /كغ م عل ف .ت م ح ساب وزن األف راخ ومع دل اس تھالك العل ف ومع دل النم و واحت ساب كف اءة التحوي ل الغ ذائي أس بوعيا .أم ا أوزان األع ضاء الداخلي ة كالكب د، القلب ،القانصة ،الكتلة الدھنية ،عضلة الصدر وع ضلة الفخ ذ فق د
٧٨
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٨٢-٧٧)٢٠١١ ،٢
ب العكبر ب التركيز ٤٠٠ملغ م /كغ م ارتفاع ا ً معنوي ا ً )(P < 0.05
ت م وزنھ ا عن د عم ر ثماني ة اس ابيع ،ف ضال ع ن ن سبة الت صافي. اس تخدمت تحلي ل التب اين عل ى اس اس الت صميم الع شوائي الكام ل لدراس ة ت أثير العوام ل وت داخالتھا واعتم د اختب ار دنك ن لتحدي د مستوى المعنوية لمعدل الصفات المدروسة ).(٢٣
والتي وصلت أعلى زيادة وزنية تراكمية لھا ف ي األس بوع الث امن ) (٢٣٠٦,٢٧غم ,الجدول ).(٣ يبين الجدول ) (٤زيادة في معدل النم و الي ومي لألف راخ ابت دأ من األسبوع الثالث وطيلة مدة التجربة للمجاميع المعاملة ب العكبر بالتركيزين ٤٠٠ملغم /كغم و ٢٠٠ملغم /كغم حيث تناسبت ھ ذه الزي ادة تناس با ً طردي ا ً م ع زي ادة تركي ز العكب ر .ل وحظ ف ي األسبوعين األول والثاني عدم وجود فروقات معنوي ة لمع دل نم و لألفراخ المعاملة بالعكبر مقارنة مع مجموعة السـيطرة. كم ا وظھ ر وج ود زي ادة معنوي ة ف ي مع دل اس تھالك العل ف اليومي لمجموع ة األف راخ المعامل ة ب العكبر ب التركيز ٢٠٠ملغ م /كغ م ف ي األس بوعين ال سابع والث امن والت ي بلغ ت ) (١٢٩,٣٩و ) (١٣٦,٦٦غ م ,عل ى الت والي وك ذلك للمجموع ة المعامل ة بالتركيز ٤٠٠ملغم /كغ م والت ي بلغ ت ) (١٦٠,١٩و )(١٦١,٦٤ غم ،على الت والي .كم ا ل وحظ ف ي األس بوعين الخ امس وال سادس وج ود زي ادة ف ي مع دل اس تھالك العل ف ف ي المج اميع المعامل ة بالعكبر وبكال التركي زين مقارن ة م ع مجموع ة ال سيطرة علم ا أن ھ ذه الزي ادة ف ي اس تھالك العل ف كان ت معنوي ة فق ط للمجموع ة المعاملة بالعكبر بالتركيز ٤٠٠ملغم /كغم الجدول ).(٥ لوحظ تحسنا ً في معامل التحويل الغذائي ألف راخ ف روج اللح م الت ي ت م تغ ذيتھا عل ى العكب ر وال ذي انعك س بوج ود انخف اض معنوي ) (P<0.05لھذه الصفة في األسابيع الثاني ،الثال ث ،الراب ع والسابع ,على التوالي ,للمجموع ة المعامل ة ب العكبر بتركي ز ٢٠٠ ملغم /كغم والذي بلغ )،(٢,٨٦ ،١,٩٩ ،١,٧٣ ،١,٤على الت والي وك ذلك ف ي األس ابيع الث اني والثال ث والراب ع للمجموع ة المعامل ة ب العكبر بتركي ز ٤٠٠ملغ م /كغ م حي ث بل غ )،١,٥٩ ،١,٣٥ ،(١,٩٥عل ى الت والي ،عن د مقارنتھ ا م ع مجموع ة ال سيطرة الجدول ) .(٦في حين لم يكن ھذا االنخفاض ف ي معام ل التحوي ل الغ ذائي معنوي ا ً للمجموع ة المعامل ة ب العكبر بتركي ز ٤٠٠ملغ م /كغم في األسابيع السادس ،السابع والثامن من التجربة.
الج دول ) (٢مكون ات العليق ة الناھي ة الم ستخدمة ف ي التجرب ة لتكوين ١٠٠كغم علف. المكونات الحنطة المحلية شعير كسبة فول الصويا %٤٨ زيت فوسفات ملح الطعام خليط فيتامينات ومعادن DLميثيونين خليط انزيمات البروتين الخام الطاقة التمثيلية
النسبة المئوية ٦٠كغم ١٠كغم ٢٢كغم ٤,٧٥٠كغم ١,٧٥٠كغم ٠,٣٠٠كغم ١كغم ٠,١٠٠كغم ٠,١٠٠كغم %٢٢ ٣١٩٩كيلوكالوري/كغم
النتائج أظھ رت النت ائج وج ود ارتف اع معن وي ف ي مع دل الزي ادة الوزني ة ف ي األس ابيع الراب ع ،الخ امس ،ال سادس ،ال سابع والث امن عن د م ستوى احتمالي ة ) (P < 0.05للمجموع ة المعامل ة ب العكبر ب التركيز ٢٠٠ملغ م /كغ م والت ي بلغ ت ) (٧٥٧,١٣غ م ف ي األس بوع الراب ع وبلغ ت ف ي األس بوع الث امن ) (٢٠٠٧,٩٧غ م مقارن ة م ع مجموع ة ال سيطرة .أظھ رت المجموع ة المعامل ة
الجدول ) (٣تأثير العكبر في معدل وزن الجسم الحي خالل أسابيع التجربة ألفراخ فروج اللحم. المجموعة السيطرة المعاملة بالعكبر ٢٠٠ملغم /كغم
األسبوع االول
األسبوع الثاني
األسبوع الثالث
األسبوع الرابع
األسبوع الخامس
األسبوع السادس
األسبوع السابع
األسبوع الثامن
126.97 ±10.41 a 133.31 ±9.41 a 135.94 ±8.43 a
256.61 ±10.26 a 267.64 ±12.41 a 281.61 ±14.62 b
444.94 ±13.62 a 463.33 ±15.21 a 492.94 ±13.45 b
715.60 ±18.61 a 757.13 ±20.41 b 823.3 ±19.45 c
1000.6 ±17.45 a 1080.48 ±28.2 b 1188.63 ±24.51 c
1278.29 ±31.45 a 1393.28 ±25.62 b 1544.95 ±41.34 c
1551.59 ±34.62 a 1709. 6 ±40.62 b 1931.61 ±38.61 c
1 802.26 ±41.11 a 2007.97 ±48.63 b 2306.27 ±52.41 c
المعاملة بالعكبر ٤٠٠ملغم /كغم القيم تمثل المعدل ±الخطأ القياسي. متوسطات المعامالت التي عليھا أحرف مختلفة ضمن االسبوع الواحد تختلف معنويا عند ).(P < 0.05 ٧٩
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٨٢-٧٧)٢٠١١ ،٢
الجدول ) (٤تأثير العكبرفي معدل النمو اليومي غم/طير/يوم ألفراخ فروج اللحم خالل اسابيع التجربة. المجموعة السيطرة المعاملة بالعكبر ٢٠٠ملغم /كغم
األسبوع االول
األسبوع الثاني
األسبوع الثالث
األسبوع الرابع
األسبوع الخامس
األسبوع السادس
األسبوع السابع
األسبوع الثامن
12.14 ±2.62 a 13.04 ±2.16 a 13.42 ±3.40 a
18.52 ±3.96 a 19.19 ±4.11 a 20.81 ±3.96 a
26.90 ±8.48 a 27.95 ±10.03 a 30.19 ±9.45 b
38.66 ±11.41 a 41.97 ±10.31 b 47.19 ±945 c
40.71 ±11.43 a 46.19 ±9.64 b 52.19 ±11.41 c
39.58 ±9.41 a 44.71 ±10.43 b 50.90 ±8.62 c
43.71 ±8.62 a 45.24 ±6.48 a 55.23 ±8.69 b
35.81 ±8.33 a 42.57 ±5.93 b 53.52 ±6.62 c
المعاملة بالعكبر ٤٠٠ملغم /كغم القيم تمثل المعدل ±الخطأ القياسي. متوسطات المعامالت التي عليھا أحرف مختلفة ضمن االسبوع الواحد تختلف معنويا عند ).(P < 0.05
الجدول ) (٥تأثير العكبرفي معدل استھالك العلف اليومي غم/طير/يوم ألفراخ فروج اللحم خالل اسابيع التجربة. المجموعة السيطرة المعاملة بالعكبر ٢٠٠ملغم /كغم
األسبوع االول
األسبوع الثاني
األسبوع الثالث
األسبوع الرابع
األسبوع الخامس
األسبوع السادس
األسبوع السابع
15.54 ±2.16 a 14.61 ±1.71 a 14.76 ±1.38 a
29.45 ±1.92 a 26.87 ±2.08 a 28.09 ±2.35 a
45.47 ±2.31 a ±48.36 ±2. 61 a 48.00 ±3.09 a
88.9b3 ±3.61 a 83.53 ±4.74 a 92.03 ±5.14 b
115.22 ±3.91 a 119.64 ±3.52 a 134.13 ±5.36 b
116.23 ±4.06 a 121.512 ±5.81 a 143.04 ±6.06 b
117.52 ± 6.46 a 129.39 ±5.31 b 160.19 ±6.91 c
المعاملة بالعكبر ٤٠٠ملغم /كغم القيم تمثل المعدل ±الخطأ القياسي. متوسطات المعامالت التي عليھا أحرف مختلفة ضمن االسبوع الواحد تختلف معنويا عند ).(P < 0.05
األسبوع الثامن 52.113 ±6.11 a 136.66 ±7.11 b 161.64 ±7.11 c
الجدول) (٦تأثير العكبرفي معامل التحويل الغذائي ألفراخ فروج اللحم خالل اسابيع التجربة. المجموعة
األسبوع االول
األسبوع الثاني
األسبوع الثالث
األسبوع الرابع
األسبوع الخامس
األسبوع السادس
األسبوع السابع
األسبوع الثامن
3.17±0.14 3.01 ± 0.05 2.93 ± 0.15 2.38 ± 0.12 2.30 ± 0.11 1.90± 0.01 1.59±.04 1.28± 0.04 السيطرة a a a a a a a a المعاملة بالعكبر 3.21 ±0.14 2.86 ± 0.08 2.80 ±0.06 2.59 ±0.03 1.99 ± 0.05 1.73 ± 0.01 1.4 ± 0.05 1.12± 0.05 a b a a b b b a ٢٠٠ملغم /كغم المعاملة بالعكبر 3.02±0.12 2.90±0.04 2.81±0.05 2.57±0.04 1.95±0.01 1.59±0.05 1.35 ± 0.05 1.10 ±0.01 a b a a a a b b ٤٠٠ملغم /كغم
القيم تمثل المعدل ±الخطأ القياسي. متوسطات المعامالت التي عليھا أحرف مختلفة ضمن االسبوع الواحد تختلف معنويا عند ).(P < 0.05
٨٠
average 2.32 a 2.21 a 2.02 a
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٨٢-٧٧)٢٠١١ ،٢
الجدول ) (٧تأثير العكبرفي النسب المئوية ألوزان األحشاء والصدر واألفخاذ والتصافي. المجموعة السيطرة
%األفخاذ
%الصدر
18.37 ± 0.4 19.52 ± 0.16 a a 17.58 ± 1.2 20.18±6.4 a a
%نسبة التصافي
%الكتلة الدھنية
66.00 ± 0.7 a 65.87 ± 0.6 a
1.07 ± 0.2 a 0.92 ± 0.2 a
%الكبد
%القلب
0.57 ± 6.1E-02 2.20 ± 6.8 E-02 a a 0.55 ± 5E-02 1.93 ± 0.1 a a
%القانصة 2.21 ± 0.2 a 1.85 ± 0.2 a
المعاملة بالعكبر ٢٠٠ملغم /كغم المعاملة بالعكبر 2.26 ± 0.1 0.81 ± 8.9E-02 2.87 ± 0.2 0.98 ± 9.0E-02 74.03 ± 1.4 18.71 ± 0.7 22.85±4.1 b a a a b b b ٤٠٠ملغم /كغم القيم تمثل المعدل ±الخطأ القياسي ،متوسطات المعامالت التي عليھا أحرف مختلفة تختلف معنويا عند ).(P < 0.05
المعامل ة ب العكبر وخاص ًة األف راخ الت ي تناول ت العكب ر بتركي ز ٤٠٠ملغم /كغم وھذا اتفق مع ما الحظه ) (٢٤الذي أعزي سبب ذلك إلى وج ود الفالفوني دات الداخل ة ف ي تركي ب مكون ات العكب ر والت ي تلع ب دورا ف ي تح سين ال صفات اإلنتاجي ة لھ ذه األف راخ. اتفقت ھذه النتائج ايضا مع ما توصل اليه كال م ن ) (١٦و )(١٨ حي ث اش اروا إل ى تح سن معام ل التحوي ل الغ ذائي ألف راخ ف روج اللحم المغذاة على العكب ر بتركي ز ٢٥٠ملغ م /كغ م .يمك ن تف سير ھ ذه االختالف ات إل ى اخ تالف ن وع العكب ر الم ستخدم ف ي ھ ذه البحوث ومنشأه الجغراف ي ) .(٢٥نتج ت ع ن إض افة العكب ر إل ى أعالف فروج اللحم زيادة معنوية ف ي ك ل م ن وزن الكب د والقل ب واألفخ اذ ف ي ح ين ل م تختل ف أوزان ك ل م ن القان صة والكتل ة الدھني ة وال صدر واتفق ت ھ ذه النت ائج ف ي ع دم تغي ر أوزان ھ ذه األع ضاء م ع ) (١٨وم ن الم رجح أن تع زى زي ادة أوزان الكب د والقل ب واألفخ اذ إل ى ال دور ال ذي تلعب ه الفالفوني دات ف ضالً ع ن ال دور ال ذي يق وم ب ه مرك ب ) (CAPEوال ذي يعم ل عل ى تح سين العمل الفسيولوجي في جسم الطائر .اما مايخص الزيادة في ن سبة الت صافي فربم ا تع زى إل ى زي ادة وزن الط ائر وزي ادة اس تھالك العلف .اتفقت ھذه النتائج مع ما ال حظه ) (٢١عند إعطاء العكبر بتراكيز مختلفة ف ي أع الف ال دواجن ف ي ح ين كان ت ھ ذه النت ائج غي ر متفق ة م ع ) (١٨حي ث ل م تت أثر ن سبة الت صافي للطي ور المعاملة بالعكبر بتراكيز مختلفة .وتعزى ھذه االختالفات إلى قل ة ال دھون ح ول القان صة ف ضالً ع ن الم دة الزمني ة الت ي ت م تغذي ة األفراخ فيھا على العكبر.
يب ين الج دول ) (٧وج ود زي ادة معنوي ة ف ي الن سبة المئوي ة لوزن األفخاذ والكبد والقل ب ون سبة الت صافي للمجموع ة المعامل ة ب العكبر بتركي ز ٤٠٠ملغ م /كغ م مقارن ة م ع مجموع ة ال سيطرة والمجموع ة المعامل ة ب العكبر ب التركيز ٢٠٠ملغ م /كغ م ,حي ث بلغ ت ف ي مجموع ة المعامل ة ٤٠٠ملغ م /كغ م )(%٢٢,٨٥ لألفخ اذ و) (%٧٤,٠٣لن سبة الت صافي و ) (%٢,٨٧لن سبة وزن الكب د و ) (%٠,٨١لن سبة وزن القل ب ,ف ي ح ين ل م تك ن ھن اك فروقات معنوية في النسبة المئوي ة ل وزن ال صدر والكتل ة الدھني ة والقان صة للمج اميع المعامل ة ب العكبر بتركيزي ه مقارن ة م ع مجموعة السيطرة. المناقشة تب ين م ن نت ائج الدراس ة وج ود زي ادة وزني ة معنوي ة ف ي مع دالت وزن أف راخ ف روج اللح م الت ي ت م تغ ذيتھا عل ى العكب ر ب التركيزين ٢٠٠ملغ م /كغ م و ٤٠٠ملغ م /كغ م ،عل ى الت والي. تناسبت ھ ذه الزي ادة طردي ا ً م ع زي ادة تركي ز العكب ر .اتفق ت ھ ذه النتائج مع ما توصل إليه ) (١الذي سجل وجود زي ادة وزني ة ف ي معدالت وزن أفراخ ف روج اللح م المعامل ة ب العكبر بتركي ز ٥٠٠ ملغم /كغم والتي بلغ ت .%٢٠كم ا كان ت ھن اك زي ادة ف ي مع دل اس تھالك العل ف لمج اميع أف راخ ف روج اللح م المعامل ة ب العكبر حيث كانت ھذه الزيادة معنوية ) (P < 0.05وخاصة عن د اس تخدام العكبر بتركيز ٤٠٠ملغم /كغم وھذا اتفق مع ما أشار إلي ه )(١٦ من أن العكبر يعمل على زيادة استھالك العلف ال ذي أع زى ذل ك إل ى زي ادة االي ض واالمت صاص وزي ادة كف اءة ال دورة الدموي ة وتحسن النظام اإلنزيمي واستساغة األفراخ للعكبر بوصفه مزيجا ً من العسل والم واد ال شمعية والف انلين وأي د ذل ك ) .(١٩أن تح سن مع دل النموالمتح صل علي ه ف ي ھ ذه التجرب ة ھ و انعك اس إل ى تح سن ص حة ال دجاج الم ستھلك للعكب ر وذل ك الحتوائ ه عل ى الفالفوني دات الت ي لھ ا ص فات م ضادة للج راثيم والفطري ات والفيروسات وكذلك تحسن عمل الكب د وإزال ة ال سموم م ن الج سم وك ذلك فعلھ ا الم ضاد لاللتھ اب وكم ا اش ار الي ه ) .(١أش ارت النت ائج إل ى وج ود تح سن ف ي كف اءة التحوي ل الغ ذائي لألف راخ
الشكر والتقدير تم دعم البحث من قبل كلية الطب البيطري -جامعة الموصل. المصادر 1. Ghisalberti EL. Propolis: a review. Bee World.1979;60:59-84. 2. Papova M, Silici S, Kaftanoglu O, Bankova V. Antibacterial activity of Turkish propolis and its qualitative and quantitative chemical composition. Phytomedicine.2005;12:221-228.
٨١
(٨٢-٧٧)٢٠١١ ،٢ العدد،٢٥ المجلد،المجلة العراقية للعلوم البيطرية
16. Shalmany KS, Shivazad M. The effect of diet propolis supplementation on Ross broiler chicks performance. International Journal of Poultry Sciences.2006;5(1):84-88. 17. Biavatti MW, Bellaver MH, Volpato L, Bellaver C. Preliminary studies of alternative feed additives for broilers: Alternanthera brasiliana extract, propolis extract and linseed oil. Rev. Bras. Cienc. Avic.2003;5:147-151. 18. Denli M, Cankaya S, Silici S, Okan F, Uluocak AN. Effect of dietary addition of Turkish propolis on the growth performance, carcass characteristics and serum variables of quail (Coturnix coturnix japonica). Asian-Australasian journal of animal sciences.2005;10112367.18(6):848. 19. Galal A, Abd El-Motaal AM, Ahmed AMH, Zaki TG. Productive performance and immune response of laying hens as affected by dietary propolis supplementation. International Journal of Poultry Science.2008;7(3):272-278. 20. Rahmani HR, Tabatabaei A, Edriss MA. Microbial population of broiler's Ileum is affected by oil extracted propolis (OEP). Proceeding of the 15th European Symposium on Poultry Nutrition. Balatonfured. Hungary.2005;341-343. 21. Tatli Seven P, Seven I, Yilmaz M, Şimşek ÜG. The effects of Turkish propolis on growth and carcass characteristics in broilers under heat stress. Anim Feed Sci. Technol.2008;146:137-148.
3. Abd El Hady F, Hegazi A. Egyptian propolis: 2. chemical composition, antiviral and antimicrobial activities of east Nile delta propolis. Z Naturforsch.2002;56(3-42):386-394. 4. Havsteen B. The biochemistry and medicinal significance of e flavonoids. Pharmacol. and Therapeu.2002;96:67-202. 5. Burdock GA. Review of the biological properties and toxicity of bee propolis (propolis). Food Chem Toxicol.1998;36:347-363. 6. Castaldo S, Capasso F. Propolis, an old remedy used in modern medicine. Fitoterapia.2002;73 Suppl 1:51-56. 7. Pereira AS, Seixas SF, Mathias Silva F, Aquino Neto F. Propolis: 100 anos de pesquisa e suas perspectivas futuras. Química Nova.2002; 25:321-326. 8. Astudillo S, Avila LR, Morrison FR, Gutierrez M, Bastida J, Codina C, Schmeda-Hirschmann G. Biologically active compounds from Chilean propolis. Bol. Soc. Chil. Quím.2000;45:577-581. 9. Marcucci MC, Ferreres F, Garcia-Viguera C, Bankova VS, DeCastro SL, Dantas AP. Phenolic compounds from Brazilian propolis with pharmacological activities. J Ethnopharmacol.2001;74(2):105-112. 10. Langner E, Schilcher H. Propolis - Qualitat und Wirkungen von Propolis bzw. Propolis zubereitungen, Dtsch Apoth Ztg.1999;37:5163. 11. Krell R. Value added products from beekeeping FAO Agricultural Services Bulletin. 1996; 124. Available from: http://www.fao. org/docrep/w0076e/w0076e00.htm Accessed April,2007.web.pdf. 12. Valcic S, Montenegro G, Mujica AM, Avila G, Franzblau S, Singh MP, Maiese WM, Timmermann BN. Phytochemical, morphological, and biological investigations of propolis from central Chile Z. Naturforsch.1999;54:406-416. 13. Muñoz O, Peña RC, Ureta E, Montenegro G, Caldwell C, Timmermann BN. Phenolic compounds of propolis from central Chilean matorral. Z. Naturforsch.2001;56:273-274. 14. Bjorkner BE. Industrial airborne dermatoses. Dermatology Clinics. 1994;12:501-9. 15. Bankova V, DeCastro S, Marcucci M. Propolis: recent advances in chemistry and.plant origin review article. Apidologie.2000;31:3-15.
. س مير عب د االح د مت ي، الھ ام عب دﷲ البي اتي،علي ك اظم، الخواج ة.٢٢ وزارة الزراعة.التركيب الكيمياوي والقيمة الغذائية لمواد العلف العراقي مديري ة الث روة الحيواني ة العام ة –ق سم التغذي ة.واالص الح الزراع ي .١٩٧٨ 23. Bruning JL, Kintz BL. Computation handbook of statistics, scott Foresman and CO Glen View I // inios.1977;18. 24. Buhatel T, Vesa S, Dimitrin A, Moldovan I. Contribution to knowledge of the stimulative effect of propolis on piglet and pullets. Buletinul Institului Agronomic Cluj Napoca Zootehnie Medicina Veterinara.1983;37:45-48. 25. Kujumgiev A, Bankova V, Ignatova A, Popov S. Antibacterial activity of propolis, some of its components and their analogs Pharmazie. 1993;48:785-786.
٨٢
(٨٦-٨٣) ٢٠١١ ،٢ العدد،٢٥ المجلد،المجلة العراقية للعلوم البيطرية
تشخيص بعض المسببات المرضية لالصابات التنفسية في فروج اللحم في الحمدانية نبال سامي ميخائيل و مزاحم ياسين العطار،* باسلة ابراھيم الطائي،صفوان يوسف البارودي العراق، الموصل، *المستشفى البيطري في محافظة نينوى، جامعة الموصل، كلية الطب البيطري،فرع االحياء المجھرية (٢٠١٠ كانون األول٩ ؛ القبول٢٠١٠ أيلول٧ )اإلستالم الخالصة -٥٠٠٠ تم دراسة المسببات المرضية لالصابات التنفسية في فروج اللحم في خمسة حقول للدواجن في منطقة الحمدانية تضم كل منھا يوم تبدو عليھا عالمات تنفسية مرضية ونسبة ھالكات عالية وقد تم تشخيص االصابات٤٠-٢٠ فرخة وبأعمار تراوحت بين٧٠٠٠ اعتمادا على الفحص المصلي بأستخدام عدة اختبار االليزا المتخصصة لكل من مرض انفلونزا الطيور ونيوكاسل والتھاب القصبات وقد وجدت االصابة بمرض انفلونزا الطيور في جميع الحقول بنسب متقاربة كانت على التوالي،الخمجي فضال عن العزل الجرثومي ،%٨ بينما سجلت االصابة بمرض نيوكاسل في ثالثة حقول فقط ذات االعمار الكبيرة وبنسبة%١٠ ،%١٣ ،%١٨ ،%١٥ ،%١٤ اما، على التوالي فيما لم تسجل أي اصابة بمرض التھاب القصبات الخمجي في جميع الحقول المفحوصة٥-٣ للحقول رقم%٢٠ ،%١٢ ورقم٣ في كل من الحقول رقم%٢٠ بالنسبة للعزل الجرثومي فقد سجلت االصابة بجراثيم االشيريكيا القولونية في ثالثة حقول وبنسبة Streptococcus بينما عزلت ثالثة انواع من الجراثيم الموجبة لصبغة كرام وھي٤ في الحقل الحقل رقم%١٠ بينما كانت بنسبة٥ من ذلك يتضح ان المسبب%٢٠ - %٥ ونبسب متقاربة بينfecalis, Streptococcus zooepidemicus , Staphylococcus aureus الرئيسي لالصابات التنفسية ھو فايروس انفلونزا الطيور والذي يسبب تثبيط للجھاز المناعي للطيور مما يؤدي الى امكانية االصابة .باالمراض االخرى مثل نيوكاسل واصابات جرثومية اخرى
Diagnosis of some pathological causes of respiratory infections in broilers in Al-Hamdaniya S. Y. AL-Barrodi, B. I. AL-Taii*, N. S. Mekhael and M. Y. Al-Attar Department of Microbiology, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, * Veterinary Hospital in Ninevah Governorate, Mosul, Iraq Abstract Pathological causes of respiratory infections in five broilers flocks in Al-Hamdanyia region were studied. Each flock consisted of 5000-7000 birds at 20-40 days of old which suffered from respiratory infection signs with high mortality ratio. Specific ELISA kit for avian influenza virus (AIV), Newcastle disease virus (NDV), and infectious bronchitis disease virus (IBV), were used as sera diagnostic tests as well as bacteriological isolation. Results shows (AIV) infections at all flocks with nearly similar percentages which were 14%, 15%, 18%, 13%, 10% respectively, (NDV) were recorded at three flocks of older ages with 8%, 12%, 20% at the flocks number 3-5 respectively but no any infection of (IBV) infection was recorded. Bacteriological isolation shows E.coli infections in three flocks with 20% at each of the flocks number 3 and 5 but it was 10% in the flock number 4, also three Gram positive bacteria were isolated, Streptococcus fecalis, Streptococcus zooepidemicus, and Staphylococcus aureus at nearly similar percentages ranged from 5% - 20%. In conclusion the real cause of respiratory infection in this study was (AIV) which causes bird immune suppression leading to other disease infections like (NDV), and other bacterial infections. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
٨٣
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٨٦-٨٣) ٢٠١١ ،٢
الفحص العياني تم فحص جميع االفراخ الحية المريضة وسجلت العالمات المرضية ثم اجريت الصفة التشريحية لمئة نموذج حي لكل حقل ليصبح عدد العينات المفحوصة ) (٥٠٠خمسمائة عينة.
المقدمة تعتبر االصابات التنفسية من العقبات المھمة فى تربية فروج اللحم لما تسببه من خسائر اقتصادية كبيرة متمثلة فى نسبة الھالكات وتدني نسبة التحويل الغذائي وتعتبر الفايروسات والبكتريا من اھم المسببات المرضية لالصابات التنفسية )(١ خصوصا فايروس االنفلونزا ونيوكاسل والتھاب القصبات الخمجي ) (٢وجراثيم (٤،٣) E.coliحيث يعتبر الجھاز التنفسي من احد االجھزة التى تتعرض لالصابة بھذه المسببات المرضية ).(٥ كما تتميز االصابات التنفسية بتشابه اعراضھا المرضية بالرغم من اختالف المسبب لذلك كان البد من استخدام وسائل تشخيصية ذات حساسية عا لية لتحديد المسبب الحقيقي لھذه االصابات وقد استخدمت اختبارات االليزا ) (٦والتألق المناعي ) (٧وتقنية ) (٨) Polymerase chain reaction (PCRلدراسة تلك المسببات المرضية ومنھا فايروس H9N2الذى عزل الول مرة فى العراق من قبل ) (٩وقد شخص ھذا الفايروس بواسطة اختبار تثبيط التالزن وفحص تثبيت المتمم ودرست اھميته فى الثورات المرضية فى العراق خالل االعوام ٢٠٠٤و ٢٠٠٥ فى فروج اللحم والدجاج البياض من قبل ) (١٠ودرس تاثير االصابة بالنمط H9N2كعامل مثبط للمناعة ومھيء لتفشي امراض اخرى ) (١١فقد درس تاثير االصابة بفايروس H9N2 فى فروج اللحم وتاثيره على االستجابة المناعية للقاح مرض النيوكاسل ) (١٢كما عزل وشخص ھذا الفايروس وعالقته مع مرض النيوكاسل والعوامل المرضية االخرى من قبل ) (١٣وان تحديد عمر االصابه يكون ضروري لوضع خطط السيطرة على االمراض الفايروسية باستخدام برامج تلقيحية مناسبة واختيار مضادات حيوية فعالة للسيطرة على االمراض الجرثومية ونظرا لتكرار حدوث االندالعات المرضية في منطقة الحمدانية مركزتربية فروج اللحم في محافظة نينوى وما تسببه ھذه االصابات من خسائر اقتصادية فادحة بالرغم من اتباع البرامج التلقيحية المكثفة تم اجراء ھذه الدراسة لتشخيص بعض المسببات المرضية الفايروسية والجرثومية من حقول تربية فروج اللحم والتي تعانى من تلك االصابات التنفسية المتكررة.
نماذج الدم تم جمع نماذج الدم بمعدل عشرون نموذج لكل حقل وبأعمار ٤٠ , ٣٥ , ٣٠ , ٢٥ , ٢٠يوم من الحقول رقم ٥-١ على التوالي وفصل المصل بألمنبذة المبردة بسرعة ١٥٠٠دورة /دقيقة لمدة ١٥دقيقة وحفظت االمصال فى ٢٠-م oلحين االستخدام ).(١٤ نماذج االعضاء تم اخذ عشرون نموذج لكل حقل من الرئتين لغرض العزل الجرثومي من نفس االفراخ التي استخدمت لجمع االمصال وتم تنميتھا على وسط اكار الدم ثم تنقية العزالت واجراء االختبارات الكيموحيوية وتشخيصھا حسب ماذكره ).(١٥ االختبارات المصلية تم اجراء اختبار االليزا للكشف عن االضداد المضادة لفايروس مرض نيوكاسل وانفلونزا الطيور والتھاب القصبات الخمجي بموجب عده تشخيصية خاصة لكل مرض تم الحصول عليھا من المركز االردني للمواد البايولوجية واجري االختبار حسب تعليمات الشركة المنتجة حسب الطريقة التي ذكرھا ).(١٧,١٦ النتائج الفحص العياني لوحظت عالمات الخمول وصعوبة الحركة والتنفس وتورم الرأس وكانت نسبة الھالكات الكلية في جميع القطعان تتراوح بين .%٨٠-٧٥ الصفة التشريحية لوحظ احتقان القصبات الھوائية وتثخن االكياس الھوائية واحتقان الرئتين وتضخم الكبد والطحال في النماذج المفحوصة من الحقول رقم ٥-٣فقط.
المواد وطرائق العمل النماذج تم جمع نماذج الدم والطيور المريضة من خمسة حقول لتربية فروج اللحم فى منطقة الحمدانية تضم كل منھا -٥٠٠٠ ٧٠٠٠فرخة وباعمار تراوحت من ٤٠-٢٠يوم كانت تعاني من عالمات تنفسية مرضية ونسبة ھالكات عالية للفترة من ايلول ولغاية كانون االول .٢٠٠٩
الفحص المصلي اظھرت نتائج اختبار االليزا لنماذج االمصال المفحوصة وجود االضداد المتخصصة لمرض انفلونزا الطيور بنسبة %١٠ ،%١٣ ،%١٨ ،%١٥ ،%١٤في الحقول رقم ٥-١ على التوالي ووجود االضداد المتخصصة لمرض نيوكاسل بنسبة %٢٠ ،%١٢ ،%٨في الحقول رقم ٥-٣على التوالي بينما لم يتم الكشف عن اية اضداد لمرض التھاب القصبات ٨٤
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٨٦-٨٣) ٢٠١١ ،٢
الخمجى فى جميع الحقول الخمسة جدول ) .(١وكان معدل قياس االضداد المناعية متفاوتا بين الحقول وحسب اختالف االعمار بينما كان ذلك المعدل مرتفعا بالنسبة لمرض نيوكاسل وفي االعمار الكبيرة جدول ).(٢
االكثر وضوحا في جميع الحقول قيد الدراسة بالرغم من اختالف اعمار الدجاج المصاب وكانت االصابة منفردة بھذا المرض في االعمار المبكرة )عمر ٢٥ , ٢٠يوم( بينما كانت اعلى نسبة اصابة بعمر ٣٠يوم وھذا يتفق مع ).(١٧
جدول ) :(١نسبة االصابة باالمراض الفايروسية باستخدام اختبار االليزا.
جدول ) :(٣نسبة عزل الجراثيم من النماذج المرضية لجميع الحقول.
رقم الحقل ١ ٢ ٣ ٤ ٥
عمر االفراخ بااليام ٢٠ ٢٥ ٣٠ ٣٥ ٤٠
نسبة االصابة الموجبة AIV
ND
IB
%١٤ %١٥ %١٨ %١٣ %١٠
--------%٨ % ١٢ % ٢٠
---------------------
رقم الحقل ١ ٢ ٣ ٤ ٥
جدول ) :(٢نتائج اختبار االليزا لقياس معدل االضداد المناعية لفايروس انفلونزا الطيور ونيوكاسل والتھاب القصبات الخمجي. العمر رقم الحقل بااليام ١ ٢ ٣ ٤ ٥
٢٠ ٢٥ ٣٠ ٣٥ ٤٠
معدل قياس االضداد المناعية *EU AIV
ND
IB
١٦٢ ٥٢ ١٩٠ ٦٥ ٣٧
------١٤١ ١٩١ ٢٠٩
----------------
نسبه العزل الجرثومى E.coli
Streptococcu s fecalis
Streptococcus zooepidemicus
Staph. aureus
%٠ %٠ % ٢٠ % ١٠ % ٢٠
%٥ %٥ %٥ %٥ %٥
%٠ %٠ %٠ % ١٠ % ٢٠
%٠ %٥ %٥ %٥ %٥
بينما انخفضت نسبة االصابة فى االعمار ٤٠, ٣٥يوم وقد يعزى السبب فى ذلك الى تحفيز الجھاز المناعي لمعادلة الفايروس المرضي المسبب لالصابة وھذا يختلف مع ماذكره ) (١٨من ان نسبة االصابة بفايروس انفلونزا الطيور تزداد مع تقدم عمراالفراخ. وقد لوحظ ظھور اصابة مشتركة لفايروس انفلونزا الطيور مع مرض نيوكاسل بعمر ٣٠و ٣٥و ٤٠يوم مما يشير الى ان االصابة بفايروس االنفلونزا قد احدث تثبيطا مناعيا مما سمح بحدوث االصابة بفايروس النيوكاسل بالرغم من كثرة التلقيح ضد مرض نيوكاسل مما يشير الى التأثير السلبي الذى يسببه فايروس انفلونزا الطيور على االستجابة المناعية للقاح مرض نيوكاسل وھذا يتفق مع ماذكره ).(١٩,١١ وقد اظھرت الدراسة الجرثومية عزل جراثيم E.coliوھى سالبة لصبغة كرام وكذلك جراثيم Streptococcus.fecalis, St.zooepidemicus, Staphylococcus aureusوھي جراثيم موجبة لصبغة كرام مرضية تنشط عند حدوث انخفاض في الجھاز المناعي للدواجن وھذا يالحظ كذلك من ارتفاع نسبة االصابة بجراثيم E.coliفى اعمار ٣٥و ٤٠يوم وھذا يتفق مع ماذكره ).(٥ كما تم عزل جراثيم موجبة الكرام Streptococcus fecalis من جميع الحقول باعمارھا المختلفة وھى غير محللة للدم وھذا يتفق مع ) (١٩بينما تم عزل جراثيم عالية الضراوة محللة للدم من نوع βمن الحقول رقم ٤و ٥ذات العمر الكبير وخصوصا من الحاالت التى كانت تعانى من تضخم الطحال والكبد والتھاب شغاف القلب والجنب pericarditis and peritonitisوھذا يتفق مع ماذكره ) (٢٠من ذلك يتبين ان للجراثيم اھمية مرضية في زيادة تفاقم االصابة التنفسية وخصوصا جراثيم موجبة الكرام لذلك ينصح باستخدام مضادات حيوية خاصة لتلك الجراثيم وعدم
معدل عدد الھالكات اليومى ٧٠ ١٠٠ ٢٠٠ ١٥٠ ١٥٠
EU: Elisa unit*, 1. Less than 10 EU: Negative for antibodies, 2. 10-30 EU: indication of vaccination., 3. 30-75 EU: Moderately positive, 4. >75 EU : Strongly positive.
االفحص الجرثومي تم عزل جراثيم E. coliمن عينات الحقول رقم ٥,٤,٣بنسبة % ٢٠ ,% ١٠ , % ٢٠لكل حقل على التوالى كما تم عزل جراثيم Streptococcus zooepidemicus ,Streptococcus fecalis Staphylococcus aureus ,من جميع الحقول وبنسب متقاربة تراوحت بين %٢٠ -%٥جدول ).(٣ المناقشة نظرا لتكرار حدوث اصابات تنفسية فى حقول الدواجن في منطقة الحمدانية بالرغم من استخدام البرامج التلقيحية المكثفة والعالج بالمضادات الحيوية المختلفة وبشكل مستمر تم اجراء ھذه الدراسة لتحديد المسبب االكثر اھمية في احداث تلك االصابات وقد تبين ان االصابة بمرض انفلونزا الطيور كانت ٨٥
(٨٦-٨٣) ٢٠١١ ،٢ العدد،٢٥ المجلد،المجلة العراقية للعلوم البيطرية
. نافع صبيح، منى تركي، الموسوي، حارث محمد ابراھيم، الحيالي.١٠ استخدام طريقة االستشراب المناعي لتحديد فايروس انفلونزا الطيور .٢, ٢٠٠٧ ، مجلة علوم الدواجنH9N2
اغفال اھميتھا كما ھو الحال فى حقول الدواجن حيث ان التركيز .يكون على جراثيم سالبة الكرام في اغلب االحيان وقد استخدم اختبار االليزا للكشف عن االصابات الفايروسية آنفة الذكر وھذا االختبار يعد من االختبارات الحساسة والسھلة .(٢٣-٢١) االستخدام وھذا يتفق مع ماذكره
11. Khamas EJ. Avian influenza (H9N2) outbreak in Iraq. Iraqi Vet Med J. 2008;32:1.
دراسة االخماد المناعي الناتج عن االصابة.عائدة برع, عالوي.١٢ المجلة الطبية البيطرية. في فروج اللحمH9N2 بفايروس انفلونزا الطيور .٢ ,٣٢, ٢٠٠٨ ،العراقية
المصادر
13. AL-Nakshabandi AAR. Pathological study in the high mortality outbreaks of broiler chickens in Erbil area: Role of Newcastle disease virus and avian influenza H9N2 virus. [dissertation]. College Vet Med. Univ. Duhok. Iraq.2009.159p. 14. Rovozzo GC, burke CN. Manual of basic virology techniques, Prentice-Hali, Inc, Englewood cliffs, New Jersey.1973:82-85. 15. Quinn PJ, Markey BK, Carter ME, Donnelly WJ, Leonard FC. Veterinary microbiology and microbial disease 1st ed. London: Blackwell Publishing. USA.2002.536p. 16. Tortora GJ, Funke BR, Case CL. Practical application of immunology (Enzyme-Linked immunosorbant assay) In: Microbiology. 8th ed. USA.2004.522-524p. 17. Capua L, Alexander DJ. Avian Influenza and Newcastle disease, Springer-verla Italia.2009:5- 151p. 18. Naeem K, Naurin N, Rashid S, Bano S. Seroprevalence of avian influenza virus and its relationship with increased mortality and decreased egg production. Avian pathology.2003;32(3):285-289. 19. Ramadan Ash. Study of the immune response for avian influenza serotype H9N2 and Newcastle disease vaccines in broiler [master's thesis]. College Vet Med. Univ Mosul. Iraq.2010.66p. 20. Saif YM, Barnes HJ, Glisson JR, Fadly AM, Dougald LR, Swayne DE. Diseases of poultry. 11th ed. Iowa state press, Blackwell publishing Co.2003.1231p. 21. Madore HP, Reichman RC, Dolin P. Serum antibody response in naturally occurring influenza A virus infection determined by EnzymeLinked Immunosorbant assay. Haemagglutination inhibition and complement fixation. J Clin Micro.1983;18:1345-1350. 22. Swayne DE, Suarez DL, king DJ. Avian Influenza (A1) and velogenic Newcastle disease (VND) update. In proceeding of 35th national meeting on poultry health and proceeding Delmarva poultry industry.George Town. Delaware 2000.37-45. 23. AL-Attar M, Danial FA, AL-Baroodi SY. Detection of antibodies against Avian Influenza Virus in wild pigeons and starlings. JAVA.2008; 7(4):448-449.
1. Jordan F, Pattison M, Alexander D, Faragher T. Diseases of poultry. 5th ed. WB. Saunders Com.USA.2005.571p.
عزل فايروس التھاب. مزاحم ياسين، فواز فاضل والعطار، الحصيرجي.٢ المجلة العراقية للعلوم،القصبات الخمجى من فروج اللحم .٦١-٥٣ :٢١ ،٢٠٠٧.البيطرية 3. Kown HJ, Cho SH, Kim MC, Ahn YJ, Kim SJ. Molecular epizootiology of recurrent low pathogenic avian influenza by H9N2 subtype virus in Korea. Avian Patho.2006;35:309-315. 4. Lee CW, Song CS, Lee YJ, Mo IP, Garcia M, Snarez DL, Kim SJ.Sequenceanalysis of the hemagglutinin gene of H9N2 Korean avian influenza viruses and assessment of the pathogenic potential of isolate MS 96. Avian Dis.2000;44:527-535. 5. Hofstad MS, Calnek BW, Helmbold CF, Reid WM, Yoder HW. Diseases of poultry. 7th ed. Iowa state University press.1978.949p.
التحرى عن االجسام المضادة لفايروس انفلونزا. مزاحم ياسين, العطار.٦ المجلة العراقية للعلوم- العراق-الطيور فى الدجاج في محافظة نينوى .٤٤-٣٩ :٢١, ٢٠٠٧ البيطرية 7. SKeeles JK, Morressey RL, Nagy A, Helm F, Bunn TO, Langford MJ, Long RE. Apple RO. The use of fluorescent antibody (FA)techniques For rapid diagnosis of Avian Influenza (H5N2)associated with the Pennsylvania outbreak of 1983-1984. In proceedings of the 35th North Central Avian Disease Conference, 1984.
دراسة وبائية وتشخيصية لمرض انفلونزا. امين احمد صبار، حسن.٨ .٢٠٠٧ ، جامعة بغداد: بغداد.( )رسالة ماجستير.الطيور في العراق . ص١١٢ 9. AL-Nasrawy HA, AL-Bana AS, AL-Khayat RM Study on avian influenza virus infection in poultry. AL-Qadisiya J Vet Med Sci.2005;4(6):14.
٨٦
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٩٢-٨٧) ٢٠١١ ،٢
إستخدام كسبة الحبة السوداء كبديل للبروتين النباتي في عالئق العجول المحلية النامية ١
عدنان خضر ناصر ،١نورالدين محمود عبدﷲ ٢و نادر يوسف عبو
١الھيئة العامة للبحوث الزراعية ،قسم البحوث الزراعية في نينوى، ٢فرع الصحة العامة البيطرية ،كلية الطب البيطري ،جامعة الموصل ،الموصل ،العراق )اإلستالم ٢٩حزيران ٢٠٠٩؛ القبول ٩كانون األول (٢٠١٠ الخالصة ً شھرا ،وذلك لمعرفة تأثير إجريت الدراسة على خمسة عشر عجالً محليا ً ناميا ً اوزانھا بين ٢٠٠ – ١٥٠كغم واعمارھا من ١٢-١٠ استبدال البروتين الذي مصدره كسبة فول الصويا في عليقتھا المركزة ببروتين مصدره كسبة الحبة السوداء وبنسبة ٦٠و .%١٠٠ قسمت العجول الى ثالثة مجاميع متساوية العدد ومتقاربة في معدالت اوزانھا الحية .تم تكوين ثالث انواع من العالئق المركزة متقاربة في محتواھا من البروتين الخام ) (%١٥والطاقة الممثلة ) ٢,٧ميكاكالوري /كغم( حيث قدمت بمقدار %٢,٥مخلوطة مع تبن الحنطة %١من الوزن الحي ولمدة ١٠٥يوم .في نھاية التجربة أخذت نماذج للدم من جميع العجول لغرض معرفة تركيز البروتين الكلي، االلبومين ،الكلوبيولين ،الترايكليسيرادات والكوليستيرول ،وأجريت بعد ذلك تجربة ھضم على ثالثة عجول من كل مجموعة ،وتم دراسة الناحية االقتصادية للمعامالت الثالثة .أظھرت النتائج تحسن في الكميات المتناولة من العلف المركز والعلف الخشن من قبل مجاميع العجول المتناولة للعالئق المحتوية على كسبة الحبة السوداء مقارنة مع العجول المتناولة للعليقة القياسية وبنسبة ١٣و ،%١٤على التوالي .لم تظھر النتائج اإلحصائية وجود فروقات معنوية في معدل الزيادة الوزنية الكلية ومعدالت قياسات الدم بين المجاميع الثالثة للعجول .كانت كفاءة التحويل الغذائي افضل للعجول المتناولة للعليقة القياسية بنسبة %١٢عن بقية المجاميع .كانت كلفة انتاج كغم واحد زيادة وزنية متقاربة بين المجاميع الثالثة .كما أظھرت النتائج تحسن معنوي في معامالت ھضم كل من االلياف الخام ،مستخلص االيثر و TDNلمجاميع العجول المتناولة لكسبة الحبة السوداء مقارنة مع العجول المتناولة للعليقة القياسية .نستنتج أنه يمكن تعويض البروتين النباتي الذي مصدره كسبة فول الصويا ببروتين كسبة الحبة السوداء وبنسبة % ١٠٠في العالئق المركزة المقدمة للعجول المحلية النامية دون تاثيرعلى الزيادة الوزنية وكما يحسن بعض معامالت ھضم المركبات الغذائية للعالئق.
Using Nigella sativa meal as a substitute source for vegetable protein in rations of native growing calves A. K. Nasser1, N. M. Abdullah2 and N. Y. Abou1 1
State of Board of Agriculture Research, Department of Agriculture Research, Neneva, Department of Public Health, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq
2
Abstract The present study was carried out on 15 growing local bull calves of about 150-200 kg, live body weight and 10-12 months old to investigate the effect of substituting soyabean meal as concentrate feed mixture protein by Nigella sativa meal (NSM) at 0 , 60 and 100%. Animals were divided into 3 groups of 5 calves each, according to their live body weight for performing feeding trials. All groups of animals were fed iso-nitrogen (15% CP) and iso-caloric (2.7 Mcal/kg. ME) diets. Experimental rations were offered at 2.5% of live body weight with 1% of wheat straw. At the end of the feeding trial, which lasted for 105 days, blood samples were collected from all calves to estimate the total protein, albumin, globulin, triglyceride and cholesterol. Digestibility trial was carried out on three animals of each group to investigate the nutritional value of rations. Economical study was also carried out on experimental animals. Results indicated that there was an improvement in feed intake by 13 and 14% for groups fed a ration containing NSM compared with the group fed the control one. No significant differences were between groups of calves in total body weight gain and blood parameters. The feed conversion ratio improved by 12% for the
٨٧
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٩٢-٨٧) ٢٠١١ ،٢
group of calves fed control ration as compared with other groups. The same cost of producing 1 kg live body weight gain was found. Substituting soybean meal protein at 60 and 100% by NSM protein significantly improved crude fiber, ether extract, EE, and the values of digestion coefficient. It was concluded that NSM could be substituted instead of soyabean meal for growing local calves with out adverse effects on their performance. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
الحبة السوداء الى دريس مخلفات اسواق الخضر والفاكھة المقدمة لالغنام يقلل من كلفة التغذية ويكون مصدر علف اقتصادي بديل في فصل الصيف ،اشار ) (٨الى امكانية استخدام كسبة الحبة السوداء لتحل محل %٥٠من بروتين العلف المركز في عالئق الحمالن النامية حيث انھا تحسن النمو اليومي بمقدار %١١مقارنة مع العليقة القياسية ) ٢١١,٧مقابل ١٩٠,٥ غم/راس/يوم( ،بينما اوضح ) (٩بان احالل %٤٠من بروتين كسبة فول الصويا ببروتين مصدره كسبة الحبة السوداء في عالئق الكباش الرحماني ادى الى تحسن في معامالت الھضم والقيمة الغذائية بصورة طاقة مھضومة وجميع المركبات الغذائية المھضومة ،TDN ،ومعامل نشا وبروتين مھضوم .ھذا وقد ذكر ) (١٠بأن إحالل %١٠٠بروتين كسبة بذور القطن ببروتين مصدره كسبة الحبة السوداء في عالئق عجول الفريزيان الخليطه والتي اوزانھا كانت بحدود ٢١٨كغم واعمارھا بحدود ١٠اشھر وتغذيتھا عليھا لمدة ١٢٠يوم ادى الى تحسين معامالت ھضم جميع المركبات الغذائية ،TDN ،والبروتين المھضوم وحسن العائد االقتصادي بمعدل %١١,٧من الكلفة الكلية ،و الحظ ) (١١بان اضافة كسبة الحبة السوداء بدال عن %٦٠من بروتين كسبة فول الصويا في عالئق العجول النامية حسن النمو وخفض من كلفة العليقة. أجريت ھذه الدراسة لغرض استبدال ٦٠و %١٠٠بروتين كسبة فول الصويا المضاف في عالئق العجول المحلية الشرابية النامية ببروتين مصدره كسبة الحبة السوداء ودراسة تأثير ذلك على صفاتھا االنتاجية ومعامالت ھضم المركبات الغذائية لتلك العالئق.
المقدمة ان عمل عالئق مركزة ذات قيمة غذائية عالية واقتصادية ھو ھدف رئيسي يسعى اليه جميع مربوا الحيوانات المزرعية حيث انھا تؤدي الى انتاج حيواني صحي ومربح .أشارت الدراسات االقتصادية العامة لمشاريع اإلنتاج الحيواني بان تكلفة التغذية فقط تشكل %٦٠من اجمالي تكلفة المشروع ) .(١ھذا وتعتمد نوعية العليقة المركزة المقدمة للحيوان على أمور عديدة منھا نوع الحيوان وعمره ووزنه والحالة االنتاجية ) .(٢واھم العناصر الغذائية التي يجب ان توفرھا العليقة وبالقدر الكافي ھو البروتين الخام والطاقة لما لھما من تاثير مباشر على نمو الحيوان وانتاجه وحالته الصحية ) .(٣تعتبر كسبة فول الصويا من المصادر المھمة للبروتين النباتي ذو القيمة الغذائية العالية في عالئق الحيوانات وقد تضاف بنسبة تصل الى %٢٥منھا )،(١ وعموما ً فأن ھذه الكسبة ال تنتج في العراق بل يعتمد على استيرادھا من الخارج عليه فقد اصبحت اثمانھا مرتفعة مما ادى الى ارتفاع كلفة العليقة التي تدخل ھذه الكسبة ضمن مكوناتھا، لذلك كانت ھناك دراسات من قبل العديد من الباحيثين الستخدام مصادر بروتينية بديلة متوفرة وباقل كلفة لتحل محل كسبة فول الصويا .أن كسبة الحبة السوداء متوفرة بكميات ال باس بھا كناتج عرضي لدى بعض المعامل االھلية في القطر التي تستخلص الزيت من بذور ھذه الحبة بطريقة العصر لالستخدامات الطبية والعالجية والتي يطلق عليھا،Nigella sativa Meal (NSM) ، اثبت التحليل الكيماوي لھا احتوائھا على نسبة جيدة من البروتين الخام تتراوح بين %٣٤-٣٠وكذلك نسبة عالية من الدھون ) (%٢٦ -١٦منھا وتحتوي على العناصر المعدنية المھمة كالكاليسيوم والبوتاسيوم والفسفور ) .(٥، ٤تم إجراء دراسات عديدة من قبل الباحثين في القطر وخارجه لمعرفة تاثير استخدام كسبة الحبة السوداء في عالئق الحيوانات المزرعية وبنسب مختلفة على عموم صفاتھا االنتاجية وصالحيتھا كمصدر بروتيني بديل عن كسبة فول الصويا ،فقد استخدمھا ) (٦حيث اضافھا بنسبة ٧و %١٤في عالئق النعاج الحوامل والحظ تحسن معنوي في خصوبة ونمو النعاج واوزان مواليدھا ونشاطھا حتى الفطام .كما ذكر ) (٥امكانية استخدامھا بنسبة %٥في عالئق االبقار المحلية دون أي تاثير سلبي على كمية الحليب المنتج ومكوناته وأنھا تحسن من معامالت ھضم المركبات الغذائية لھذه العالئق .وكما استخدمت كسبة الحبة السوداء في عالئق الحمالن والعجول النامية من قبل الباحثين في اقطار عربية اخرى مجاورة ،فقد الحظ ) (٧بان اضافة كسبة
المواد وطرائق العمل تم أختيار خمسة عشر عجآل شرابيا ً بحالة صحية جيدة من الحقل التابع لقسم البحوث الزراعية التطبيقية في الھيئة العامة للزراعة/نينوى اوزانھا تراوحت بين ٢٠٠ – ١٥٠كغم واعمارھا بين ١٢ – ١٠شھراً .قسمت الى ثالثة مجامبع متساوية العدد تضم كل منھا ٥عجول وبمعدل وزن حي بحدود ١٨٠كغم ،وضعت في حظائر نصفھا مظلل والنصف االخر مفتوح كمسرح لحركة العجول فيه واحتوت الحظائر على معلف كبير وجابية للماء .تم تجھيز مخاليط العالئق المركزة الثالثة المستخدمة في ھذه الدراسة من المواد العلفية المتوفرة في االسواق المحلية والتي تراكيبھا الكيماوية ) .(١٢جھزت العليقة المركزة االولى ) (R1والتي اعتبرت عليقة السيطرة ) control ٨٨
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٩٢-٨٧) ٢٠١١ ،٢
جدول ) :(١مخاليط العالئق المركزة الثالثة وتركيبھا الكيماوي المحسوب.
(rationالقياسية من خلط كل من حبوب الشعير وحبوب الذرة الصفراء ونخالة الحنطة وكسبة فول الصويا وحجر الكلس وملح الطعام ومخلوط امالح معدنية وفيتامينات )الجدول ،(١بحيث احتوت على نسبة من البروتين الخام بحدود %١٥وكمية من الطاقة الممثلة بحدود ٢,٥ميكاكالوري لتغطي احتياجات العجول النامية ) .(١٣تكونت العالئق الثانية ) (R2والثالثة ) (R3من خلط نفس المواد العلفية اال انه تم استبدال ٦٠و %١٠٠من بروتين كسبة فول الصويا فيھا ببروتين مصدره كسبة الحبة السوداء حيث أضيفت ھذه الكسبة بنسبة ٧و %١١الى ھذه العالئق، على التوالي .تم تعديل نسب المواد العلفية االخرى الداخلة فيھا بحيث اصبحت العالئق الثالثة المركزة متقاربة في محتواھا من البروتين الخام والطاقة الممثلة Iso-nitrogenous and Iso-caloric )الجدول .(١حسبت كلفة الكيلوغرام الواحد من العالئق المركزة الثالثة بمعرفة اسعار المواد الغذائية الداخلة فيھا من االسواق المحلية وكانت ٣٧٩ ،٤٢٦و ٣٦٨دينار عراقي ،على التوالي وأن كلفة الكيلوغرام الواحد من تبن الحنطة ھو ٣٠٠دينار. ابتدات فترة التجربة الفعلية في ٢٠٠٨/١١/١وذلك بتقديم العالئق المركزة الثالثة الى مجاميع العجول ،على التوالي بمقدار يمثل %٢,٥من اوزانھا الحية على وجبتين يوميا ً في الصباح الساعة ٨وفي المساء الساعة ٥وقدم معھا تبن الحنطة كعلف خشن بمقدار يمثل %١من الوزن الحي ،تم توفير الماء النظيف ومكعبات االمالح المعدنية امام العجول باستمرار ،وكان العلف المتبقي يوزن صباح اليوم التالي وقبل تقديم الوجبة الصباحية وذلك لحساب الكميات المتناولة من االعالف لكل مجموعة من العجول .تم وزن جميع العجول في بداية التجربة ثم كل خمسة عشر يوما ً حيث على اساسھا كانت تعدل كمية العليقة المركزة والعلف الخشن المقدمة لكل مجموعة وھكذا حتى نھاية التجربة التي استمرت لمدة ١٠٥يوم .في اخر يوم من التجربة وقبل تقديم العليقة وزنت جميع العجول صباحا ً واخذت منھا عينات من الدم بحدود عشرة مل من الوريد الوداجي في الرقبة وارسلت الى المختبر مباشرة الجراء قياسات تقدير البروتين الكلي وااللبومين والكلوبيولين والترايكليسيرادات والكوليستيرول وحسب الطرق المعتمدة ) .(١٤ثم وضعت العجول في حظـائر انفراديـة منفصلة لدراسة معامالت ھضم المركبات الغذائية للعالئق ،حيث أدخلت العجول في فترة تغذية تمھيدية لسبعة ايام قدمت لھا االعالف المركزة فقط خالل فترة التجربة الرئيسية وبمقدار يمثل %٢من وزنھا الحي وذلك لتغطية إحتياجاتھا من االدامة فقط ) (١٣بعدھا بدات فترة جمع عينات الروث لمدة خمسة ايام وذلك بربط اكياس جلدية في مؤخرة الحيوان ) ،(١اخذت عينات الروث وعينات من االعالف المركزة الثالثة الجراء التحليل الكيماوي عليھا ولتقدير نسب كل من المادة الجافة والبروتين الخام والدھن الخام وااللياف الخام والرماد حسب الطرق المعتمدة ) ،(١٥وحسبت نسبة الكاربوھيدرات الذائبة بطريقة الفرق ).(١
مكونات العالئق المركزة التجريبية الثالثة المادة العلفية% العليقة العليقة العليقة االولى الثانية الثالثة )(R3) (R2) (R1 ٤٥ ٤٥ ٤٥ حبوب الشعير ٩ ٨ ١٠ الذرة الصفراء ٣٢ ٣٥ ٣٥ نخالة الحنطة ٢ ٧ كسبة فول الصويا ١١ ٧ كسبة الحبة السوداء ١,٥ ١,٥ ١,٥ حجر الكلس ١,٠ ١,٠ ١,٠ ملح الطعام ٠,٥ ٠,٥ امالح معدنية وفيتامينات ٠,٥ التركيب الكيماوي للعالئق التجريبية المركزة فقط )*(DM% كسبة العليقة العليقة العليقة المركب الغذائي% الحبة االولى الثانية الثالثة ) (R3) (R2) (R1السوداء ٩٥,٧ ٨٩,٣ ٨٨,١ ٨٨,٧ المادة الجافة ٩٤,٦ ٩٢,٦ ٩٢,٥ ٩٢,٥ المادة العضوية ٣٤,٠ ١٥,٢ ١٥,٣ ١٥,٦ البروتين الخام ٩,٤ ٨,٢ ٨,٣ ٨,٠ االلياف الخام ٢٦,٢ ٥,٤ ٤,٥ ٢,٩ مستخلص االيثر N.F.E. ٢٥,٠ ٦٣,٨ ٦٤,٤ ٦٦,٠ ٥,٤ ٧,٤ ٧,٥ ٧,٥ الرماد ** ٢,٩ ٢,٨٤ ٢,٧٩ ٢,٧٥ الطاقة الممثلة ميكاكالوري/كغم * محسوبة اعتماداً على ) ،(١٢عدا كسبة الحبة السوداء تم تقديرھا مختبريا ً حسب ) ** .(١٥محسوبة على اساس تمثل %٦٠من الطاقة الكلية حسب ).(١ أستخدم نظام التصميم العشوائي الكامل ) ،(CRDواجري تحليل النتائج احصائيا ً إعتماداً على النموذج الرياضي التالي: Yij = µ + ti + eij
حيث أن: = Yijقيمة المشاھدة ) (jالتابعة للمعاملة ) (iلكل صفة مدروسة. = µالمتوسط العام لجميع مشاھدات التجربة الخاصة بالمعاملة ) = Ti .(iالتاثير الثابت للمعاملة ) = Eij .(iالخطأ العشوائي الذي يفترض أن يتوزع توزيعا" طبيعيا" ومستقآل. ٨٩
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٩٢-٨٧) ٢٠١١ ،٢
المادة العضوية و MEفي غذائھا اليومي عن عجول المجموعة االولى )جدول .(٢ أظھرت النتائج االحصائية المتعلقة بمعدالت االوزان النھائية والزيادة الوزنية الكلية والزيادة الوزنية اليومية عدم وجود فروقات معنوية بين مجاميع العجول الثالثة المتناولة للعالئق التجريبية وكانت قيمھا متقاربة )جدول ،(٣وكما ان النتائج أشارت الى أن كفاءة التحويل الغذائي والمحسوبة على أساس المادة الجافة تماما ً كانت أفضل للعجول التي تناولت العليقة القياسية وبمقدار %١٣عن مجموعتي العجول التي تناولت العالئق المحتوية على كسبة الحبة السوداء ولكنھا لم تكن معنوية .إال ان النتائج المتعلقة بكلفة انتاج كيلوغرام واحد من الزيادة الوزنية للعجول كانت متقاربة بين المجاميع الثالثة للعجول ووجدت ٣٢٧٦ ،٣١٨٤و ٣١٦٣دينار عراقي ،على التوالي )جدول .(٣
وباستخدام البرنامج االحصائي المسمى SASلسنة ١٩٩٨ ) .(١٦تم أختبار معنوية الفروقات بين معدالت الصفات المدروسة باستخدام طريقة دنكن المذكورة في ).(١٧ النتائج أشارت النتائج المعروضة في جدول ) (٢والمتعلقة بالكميات المتناولة من االعالف التجريبية من قبل العجول في المجاميع الثالثة بأن العجول في المجموعتين الثانية والثالثة والمتناولة للغذاء المحتوي على NSMقد تناولت خالل فترة التجربة كميات اكبر من العليقة المركزة والعلف الخشن وبمقدار ١٣و %١٤ على التوالي ،عن الكمية التي تناولتھا عجول المجموعة القياسية، مما جعل عجول ھاتين المجموعتين تحصل على كميات اكبر من المادة الجافة ،البروتين الخام ،االلياف الخام ،الدھن الخام،NFE ،
جدول ) :(٢الكميات المتناولة من األعالف والمركبات الغذائية ).(As fed basis الصفة المدروسة
مجاميع العجول الثالثة 0% NSM
7% NSM
11% NSM
٤,٧٣٠ ١,٨٧٠ ٦,٦
٥,٣٠٠ ٢,١٥٠ ٧,٤٥
٥,٢٦٠ ٢,١٤٠ ٧,٤
٥,٩٤ ٠,٧٠١ ١,٠٠٩ ٠,١٣٨ ٤,٠٦٦ ٥,٩١٤ ١٥,٧
٦,٦٨ ٠,٧٧٥ ١,١٥١ ٠,٢٢٦ ٤,٥٠٠ ٦,٦٥٢ ١٧,٨
٦,٧٠ ٠,٧٧٠ ١,١٥٢ ٠,٣٠٥ ٤,٤٥٠ ٦,٦٧٧ ١٧,٩
معدل العلف المركز المتناول ،كغم/عجل/يوم معدل العلف الخشن المتناول ،كغم/عجل/يوم معدل العلف الكلي المتناول ،كغم/عجل/يوم المعدالت المتناولة من المركبات الغذائية المادة الجافة ،كغم/عجل/يوم البروتين الخام ،كغم/عجل/يوم االلياف الخام ،كغم/عجل/يوم مستخلص االيثر ،كغم/عجل/يوم ،N.F.E.كغم/عجل/يوم المادة العضوية ،كغم/عجل/يوم الطاقة الممثلة ميكاكالوري/عجل/يوم
جدول ) :(٣الصفات االنتاجية لمجاميع العجول المتناولة للعالئق التجريبية. مجاميع العجول الثالثة
الصفة المدروسة
االولى 0%NSM
معدل الوزن االبتدائي ،كغم * معدل الوزن النھائي ،كغم معدل الزيادة الوزنية الكلية ،كغم/عجل معدل الزيادة الوزنية اليومية ،كغم/عجل معدل كفاءة التحويل الغذائي ،كغم علف كامل)مركز+خشن(/كغم زيادة وزنية معدل كفاءة التحويل الغذائي ،كغم مادة جافة /كغم زيادة وزنية كلفة انتاج واحد كغم زيادة وزنية I.D. * المعدل العام لخمسة عجول ±االنحراف القياسي ).(SD
٩٠
٩٥ ± ١٨٠ ١١٦ ± ٢٦٥ ٢٥ ± ٨٥ ٢٤ ±٠,٨٠٩ ٨,١٦٠ ٧,٣٥٠ ٣١٨٤
الثانية 7%NSM
٦٤ ± ١٨٠,٤ ٦٦,٥±٢٦٥,٤ ١٩ ± ٨٥ ٠,١٨±٠,٨١٠ ٩,٢٥٠ ٨,٢٥٠ ٣٢٧٦
الثالثة 11%NSM
٦٣ ± ١٨٠ ٥٤,٥±٢٦٥,٤ ١٣ ±٨٥,٦ ٠,١٣±٠,٨١٥ ٩,١٠٠ ٨,٢١٠ ٣١٦٣
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٩٢-٨٧) ٢٠١١ ،٢
المجاميع الثالثة للعجول )جدول .(٤بينما أوضحت النتائج االحصائية المتعلقة بمعدالت قياسات الدم التي اخذت في نھاية التجربة بعدم وجود فروقات معنوية بين مجاميع العجول الثالثة في جميع قياسات الدم واتي تمثلت في البروتين الكلي ،االلبومين، الكلوبيولين ،الترايكليسيرات ،والكوليستيرول )جدول .(٥
كما أشارت النتائج االحصائية المتعلقة بمعامالت ھضم المركبات الغذائية للعالئق المركزة بعدم وجود فروقات معنوية في كل من معامل ھضم المادة الجافة ،المادة العضوية ،البروتين ً مرتفعة ومتقاربة بين مجاميع الخام ،و NFEوكانت قيمھا العجول الثالثة ،إال انه ظھرت فروقات معنوية ) (P<0.05في معامالت ھضم كل من االلياف الخام ،الدھن الخام و TDNبين
جدول ) :(٤معامالت ھضم المركبات الغذائية للعالئق المركزة التجريبية. معامالت الھضم * % المركب الغذائي العليقة الثالثة )(R3 العليقة الثانية )(R2 العليقة القياسية )(R1 ٢,٢ ± ٧٩,٠ ٣,٦ ± ٨٢,٤ ٢,٨ ± ٧٨,١ المادة الجافة ٢,٠ ± ٨١,٥ ٢,٩ ± ٨٤,٦ ٢,٣ ± ٨١,٨ المادة العضوية ٢,٥ ± ٨٠,٣ ٢,٦ ± ٨٤,٦ ٠,٠ ± ٨٤,٦ البروتين الخام ٠,٤ ± ٤٣,٦ب** ٨,٢ ± ٦٣,٠أ ٣,٩ ± ٣٦,٦ب االلياف الخام ٧,٣ ± ٧٩,١أ ** ٠,٩ ± ٩٥,٨أ ١٩,٣ ± ٥٦,٦ب مستخلص االيثر N.F.E. ١,٦ ± ٨٥,١ ٢,٥ ± ٨٦,٢ ١,٠ ± ٨٣,٨ T.D.N. ٢,٣ ± ٨٢,٢أ ** ٢,٥ ± ٨٤,٣أ ١,٣ ± ٧٨,٤ب *المعدل العام لثالثة عجول ±االنحراف القياسي )** .(SDالحروف المختلفة ضمن السطر الواحد تعني اختالفات معنوية ).(P<0.05 جدول ) :(٥تأثير التغذية على بعض قياسات دم العجول الشرابية النامية. الصفة المدروسة*
مجاميع العجول القياسية 0% NSM
الثانية 7% NSM
الثالثة 11% NSM
٠,٥٢ ± ٨,١ معدل البروتين الكلي ،غم ١٠٠/مل ٠,٢ ± ٤,٣ معدل االلبومين ،غم ١٠٠/مل ٠,٨ ± ٤,١ معدل الكلوبيولين ،غم ١٠٠/مل ٧,٦ ± ٦٢,٢ معدل الترايكليسرادات ،غم ١٠٠/مل ١٩,٥ ± ١١٠,١ معدل الكوليستيرول ،غم ١٠٠/مل * المعدل العام لخمسة عجول ±االنحراف القياسي ).(SD
١,١ ± ٩,٢ ٠,٦٦ ± ٥,١٩ ٠,٦ ± ٤,٠ ٦,٢ ± ٥٩,٥ ١٣,٢ ± ١١١,٨
١,١ ± ٨,٦ ٠,٦ ± ٥,٣ ٠,٦ ± ٣,٥ ٣,٣ ± ٥٢,٨ ٢٢,٦± ١١١,٦
االيثر والطاقة الممثلة المحسوبة ،وبذلك يمكن اعتبارھا مصدرا جيدا للبروتين والطاقة وادخالھا في عالئق العجول النامية ،فقد ذكر ) (١١نسبة مقاربة للبروتين الخام في كسبة الحبة السوداء التي استخدمھا في دراسته وھي %٣٧,٤ولكنه ذكر نسبة اقل لمستخلص االيثر ) .(%٩,٢ان اضافتھا بنسبة %١١من العليقة المركزة المقدمة للعجول في ھذه الدراسة عوض عن البروتين الخام الذي مصدره %٧كسبة فول الصويا .أن أضافة كسبة الحبة السوداء في عالئق العجول المحلية النامية ادى الى ارتفاع الكميات المتناولة من العلف المركز والعلف الخشن ،مما يدل على ان طعم كسبة الحبة السوداء كان مقبول ومستساغ من قبل العجول حيث ان اضافة كسبة الحبة السوداء الى عالئق المجترات يرفع من الكميات المتناولة من العلف الخشن ).(٩،١٠ كما انھا ادت الى تحسن معنوي في معامالت ھضم معظم
المناقشة أن إستخدام كسبة الحبة السوداء ضمن مخلوط العليقة المركزة المقدمة للعجول النامية وبنسبة ٧و %١١منھا أدى الى خفض كلفة الكيلوغرام الواحد من ھذه العليقة وبمقدار ١٢و %١٥عن كلفة العليقة المركزة المحتوية على كسبة فول الصويا ،كون سعر ١كغم من كسبة الحبة السوداء ھو ٢٥٠ دينار عراقي وسعر ١كغم من كسبة فول الصويا ھو ١٢٥٠ دينار عراقي ،ھذا وكما أشار إليه ) (٥عندما استخدمت في عالئق االبقار المحلية و) (١٠عندما أعطيت الى عالئق العجول النامية كونھا تخفض من كلفة التغذية وتحسن من العائد االقتصادي بنسبة .%١٢اظھرالتحليل الكيماوي لكسبة الحبة السوداء احتوائھا على نسبة عالية من البروتين الخام ومستخاص ٩١
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٩٢-٨٧) ٢٠١١ ،٢
.٢طه ،أحمد الحاج ،عطا ﷲ سعيد ومحمد رمزي طاقة .تغذية الحيوان،مترجم عن الطبعة السادسة لمؤلفيه )ماينرد ولوسلي( ،جامعة الموصل.١٩٨٤ ، .٣محمد ،حسن بيومي .أنشاء مزرعة تسمين عجول .معھد بحوث اإلنتاج الحيواني ،نشرة رقم ،٩١٧لسنة .٢٠٠٥
العناصر الغذائية في العليقة المركزة ،كما الحظه ) (٦عندما قدمت للنعاج الحوامل قبل وبعد الوالدة وكذلك ) (٥عندما قدمھا البقار الحليب المحلية .أن الزيادة الوزنية الكلية التي حصلت للعجول في المجاميع الثالثة نھاية التجربة كانت متقاربة جدا ُ وھي بحدود ٨٥كغم/عجل ،ونظراً لكون كفاءة التحويل الغذائي للعجول التي تناولت العليقة القياسية كانت افضل من العجول التي تناولت العليقة المحتوية على كسبة الحبة السوداء تقريبا ً ٨,٢مقابل ٩,٢كغم علف/كغم زيادة وزنية فھذا يوضح بان معظم الزيادة الوزنية التي حصلت للعجول في المجموعة الثانية والثالثة والمتناولة لكسبة الحبة السوداء في عليقتھا كانت عبارة عن ترسيب دھن في الجسم وليس بناء عضل حيث ان تكوين األنسجة الدھنية في الجسم يحتاج إلى كمية أعلى من الطاقة يجب توفرھا في الغذاء المتناول حيث انھا قد تناولت كمية من العلف اكثر بمقدار ١,٢كغم /يوم عن المجموعة القياسية ،ويوضح ذلك ايضا ً بالرغم من التحسن في معامالت الھضم لمعظم المركبات الغذائية للعجول المتناولة للعالئق المحتوية على كسبة الحبة السوداء اال ان الزيادة الوزنية للعجول كانت متقاربة للمجاميع الثالثة ،و لوحظ ھذا سابقا ً) .(٣-١أشارت النتائج اإلحصائية لمعدالت قياسات الدم في العجول إلى عدم وجود تأثير سلبي لتناول كسبة الحبة السوداء على صفات الدم وكانت ضمن المعدالت الطبيعية ) (١٤مما يدل على ان تناول كسبة الحبة السوداء من قبل العجول وبنسبة ٧و %١١من عليقتھا ال يؤئر على وظائف الكبد .يستنج من ھذه الدراسة امكانية احالل بروتين كسبة الحبة السوداء %١٠٠بدالً عن بروتين كسبة فول الصويا في العالئق المركزة للعجول المحلية النامية دون تاثير سلبي على صفاتھا االنتاجية وقد يحسن من معامالت ھضم بعض المركبات الغذائية فيھا.
4. Abdel Aal, MSE and SR. Attia. Effect of cumin seed meal (Nigella sativa) as feed ingredient on growing lambs. Egypt J Nut Feeds. 2003;6:49-57.
.٥ناصر ،عدنان خضر ،نورالدين محمود عبدﷲ و نادر يوسف عبو .تأثير اضافة كسبة الحبة السوداء الى عليقة االبقار المحلية في انتاج الحليب ومكوناته ومعامل ھضم المركبات الغذائية فيھا .المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،٢٠٠٩ ،المجلد ) (٢٣العدد ).٥٣-٤٧،(١ .٦شمس الدين ،قصي زكي .إستخدام كسبة حبة السوداء في تغذية النعاج العواسية -١:التاثير في بعض الصفات االنتاجية والتناسلية .مجلة زراعة الرافدين ،٢٠٠٥ ،المجلد ٣٣العدد ).٦١-٥٢،(١ 7. Gaber AA,. El-Ayouty SA, AA, Zaki, FF Abou Ammo and ESI. ElGohary, Productive performance of lambs fed diets contaning Nigella sativa meal. Egypt J Nut Feeds.1998;1:97-107. 8. El-Ayek MY., Influence of substituting concentrate feed mixture by Nigella sativa meal on: 1- Voluntary intake, digestibility, some rumen parameters and microbial protein yield with sheep. Egypt J Nut Feeds. 1999, 2: 279-96. 9. El-Gendy,KM, AA Zaki, Faten F. Abou Ammo and MFA, El-Gamal. Nigella sativa meal as a protein supplement in ruminant ration, Egypt J Nut Feeds.2001,4:1-7. 10. EL-Kady. RI. AM. Kandiel. AH.Etman. Effect of substitution concentrate protein by Nigella sativa meal on growing calves performance. J Agric Sci Mans Univ.2001;26(12):7645-7655. 11. Soha S. Abdel-Magid, RI El-Kady, Sawsn M AGD and IM Awadalla. )Using cheep and local non-conventional protein meal (Nigella sativa as least cost rations formula on performance of crossbreed calves. Int J Agr Biol.2007;9(6):877-880.
.١٢الخواجة ،علي كاظم .الھام عبدﷲ البياتي .سمير عبداالحد متي. التركيب الكيمياوي والقيمة الغذائية لمواد العلف العراقي .وزارة الزراعة واالصالح الزراعي .مديرية الثروة الحيوانية العامة ،قسم التغذية.١٩٧٨ . 13. National Research Council. Nutrient Requirments of beef cattle. Sixth Revised Edition, National Academy Press, Washington. D.C.1984. 14. Coles, EH. Veterinary clinical pathology 2nd ed. Philadelphia, WB Saunders Company.974. 15. A.O.A.C. Official Methods of Official Analysis 16th ed. Association of Official Analytical Chemists. Washington DC.1970. 16. SAS, user guide for personal computers, SAS Institute Inc., Cary, NC. USA.1998.
شكر وتقدير يشكرالباحثون قسم البحوث التطبيقية التابع للھيئة العامة لزراعة نينوى وعمادة كلية الطب البيطري لتسھيل مھمة أنجاز ھذه الدراسة.
.١٧الرواي ،خاشع محمود وعبد العزيز محمد خلف ﷲ .تصميم التجارب الزراعية .مؤسسة دار الكتب للطباعة والنشر ،جامعة الموصل، الموصل.١٩٨٠ ،
المصادر .١طه .احمد الحاج صالح وشاكر محمد علي فرحان .الغذاء والتغذية. الطبعة األولى .مؤسسة دار الكتب للطباعة والنشر .جامعة الموصل، .١٩٨٠
٩٢
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٩٨-٩٣) ٢٠١١ ،٢
تواجد أكياس بيوض طفيليي كربتوسبوريديوم و أكياس جيارديا في مياه اآلبار في محافظة نينوى رواء غانم محمد فرع األحياء المجھرية ،كلية الطب البيطري ،جامعة الموصل ،الموصل ،العراق )اإلستالم ١٢مايس ٢٠١٠؛ القبول ٩كانون األول (٢٠١٠ الخالصة شملت الدراسة فحص ١١٠عينة مياه جمعت من اآلبار الواقعة في مدينة الموصل وبعض النواحي والقرى التابعة لھا خالل الفترة من أيار ٢٠٠٩ولغاية آذار ٢٠١٠للتحري عن وجود أكياس بيض طفيلي Cryptosporidium sppوأكياس طفيلي Giardia spفي مياه اآلبار .أظھرت نتائج الدراسة أن انتشار اكياس بيض طفيلي Cryptosporidium sppبلغت %١٦,٣٦في حين بلغت نسبة انتشار أكياس طفيلي .%١٢,٧٢ Giardia sppوكانت أعلى نسبة تواجد لكال النوعين من االوالي في ناحية برطلة وبعض القرى التابعة لھا إذ بلغت %٢٠لطفيلي Cryptosporidiumو %١٧,١٤لطفيلي Giardiaواقل نسبة تواجد في مدينة الموصل وبلغ %١٠لكال النوعين من االوالي .ومن خالل متابعة نسبة التواجد خالل فترة الدراسة لوحظ أن أعلى نسبة تواجد ألكياس بيض طفيلي Cryptosporidiumكانت في شھر آذار إذ بلغت %٣٨,٤٦في حين وصلت إلى %٠في شھر تشرين الثاني وتموز ،أما بالنسبة لطفيلي Giardiaفقد ارتفعت نسبة تواجده في شھر تشرين األول وبلغت %٢٣,٥٣وانخفضت في شھر تموز لتصل .%٠ھذه الدراسة تشير الى تواجد أكياس بيض طفيلي Cryptosporidiumوأكياس طفيلي Giardiaفي مياه اآلبار في محافظة نينوى.
Existence of Cryptosporidium spp. oocysts and Giardia spp. cysts in well water in Nineveh governorate R. G. Mohammad Department of Microbiology, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq Abstract The study included examination of 110 water samples from well distributed in Mosul city and few towns and villages around it from May 2009 to March 2010 for detection of Cryptosporidium spp oocysts and Giardia spp cysts in well water. The results revealed that the prevalence of Cryptosporidium oocysts was 16.36% while the prevalence of Giardia cysts was 12.72%. The percentages of prevalence with Cryptosporidium and Giardia were in high rate in Bartilla and some villages around it 20% for Cryptosporidium and 17.14% for Giardia, the low rates were in Mosul city 10% for both protozoa. The highest prevalence rate of Cryptosporidium was in March 38.46% and the lowest was in November and July 0%. The highest prevalence rate of Giardia was in October 23.53% and the lowest rate in July 0%. This first study shows the presence of Cryptosporidium oocysts and Giardia cysts in well water (Ground water) in Nineveh governorate. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
Cryptosporidiumو Giardiaمن أھم االوالي التي تنتقل بواسطة المياه إذ وجدت في المياه السطحية والجوفية والينابيع ومياه الفضالت وحتى في المياه المعقمة ) .(٣وتعد من مسببات اإلسھال في اإلنسان والحيوان وتسبب خسائر اقتصادية عالية بين حيوانات المزرعة والتي تعد أيضا ً مصدراً لخمج اإلنسان
المقدمة في الوقت الحالي مازال اإلنسان يعتمد على المياه الجوفية في الشرب وبعض النشاطات فضالً عن استخدامھا في الزراعة وتربية المواشي ) .(٢، ١تعد االوالي الطفيلية التابعة للجنسين ٩٣
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٩٨-٩٣) ٢٠١١ ،٢
باستخدام طريقة التصبيغ بالصبغة الصامدة للحامض المحورة .(١٤) Modified acid fast stainوصبغة كيمزا والتصبيغ بااليودين ) (١٥للكشف عن أكياس بيض طفيلي Cryptosporidiumفي حين تم الكشف عن أكياس طفيلي Giardiaباستخدام طريقة التطويف بالمحلول السكري والتصبيغ بااليودين وباستخدام صبغة كيمزا ) .(١٦،١٧قيست أبعاد )–١٠ (٢٠كيس لكل من أكياس بيض طفيلي Cryptosporidium وأكياس طفيلي Giardiaباستعمال Ocular Micrometerوتم تحليل النتائج إحصائيا ً باستخدام مربع كاي عند مستوى معنوية .(١٨) P<0.05
وتھدد الصحة العامة ) .(٤إن خطورة ھذه االوالي تكمن في مقاومتھا للمعقمات المستخدمة في معالجة مياه الشرب وللظروف البيئية القاسية حيث ألكياس بيض طفيلي Cryptosporidium spp القدرة على البقاء حية لمدة سنة في مياه البحر االصطناعية artificial sea waterبدرجة حرارة ْ ٤م وألكياس طفيلي Giardia sppالقدرة على البقاء في الماء ألكثر من شھرين بدرجة اقل من ْ ٨م ) .(٥،٦أشارت العديد من الدراسات في العالم إلى حدوث اندالعات مرضية بداء االبواغ الخبيئة Cryptosporidiosisوداء الجيارديا Giardiasisبسبب تلوث مياه الشرب ) .(٧،٨إذ سجلت أول حالة اندالع مرضي بداء االبواغ الخبيئة بين السكان في تكساس عام ١٩٨٤بسبب تلوث مياه الشرب في اآلبار االرتوازية التي كانت ملوثة بمياه المجاري ) .(٩كما سجلت اندالعات مرضية للخمج بطفيلي Cryptosporidium sppبين عام ٢٠٠١ – ١٩٨٤بعد عزله من مياه الشرب واألنھار الجوفية ومياه المسابح ) .(١٠وفي العراق وجدت ) (١١طفيلي Cryptosporidium sppفي المياه الراكدة في ثالث مناطق وفي خزانات المستشفى العام في محافظة نينوى. أما فيما يخص طفيلي Giardia sppفقد ظھرت في اآلونة األخيرة العديد من الدراسات التي أكدت وجود أكياس الطفيلي في المياه السطحية والجوفية ) ،(١٢إذ سجل عام ٢٠٠٤أكثر من ١٥٠٠حالة خمج بالطفيلي ناتجة عن تلوث مياه الشرب في بيرجين ) .(١٣ونظراً للدور الذي تلعبه المياه في نقل ھذه االوالي لإلنسان والحيوان والستعمال مياه اآلبار كمياه للشرب في بعض مناطق محافظة نينوى كونھا بعيدة عن شبكة توزيع المياه الرئيسة ولسقي الحيوانات والمزروعات منھا كان ھدف ھذه الدراسة ھو الكشف عن وجود أكياس بيض طفيلي Cryptosporidiumوأكياس طفيلي Giardiaفي مياه ھذه اآلبار ومدى خطورتھا على اإلنسان والحيوان.
النتائج بينت نتائج الدراسة الحالية وجود أكياس بيض طفيلي Cryptosporidium sppفي مياه اآلبار المفحوصة وبنسبة %١٦,٣٦باستخدام تقنية التصبيغ بالصبغة الصامدة للحامض المحورة الجدول ) .(١تراوح المعدل لقياسات ) (٢٠–١٠كيس من أكياس بيض الطفيلي ) (٤,٩ X ٥,١٣مايكرون والمدى ) (٤,١ – ٦,٠) X (٤,٤-٥,٨مايكرون ،جدول ) .(٢وظھرت أكياس بيض الطفيلي بإشكال دائرية وبيضوية وبلون احمر براق داكن ومحاط بھالة بيضاء بتقنية التصبيغ بالصبغة الصامدة للحامض المحورة )شكل (١في حين ظھرت شفافة وبراقة ومحاطة بھالة بيضاء بالتصبيغ بصبغة اليود شكل ) .(٢كما كشفت نتائج فحص عينات مياه اآلبار وجود أكياس طفيلي Giardia sppبنسبة بلغت %١٢,٧٢باستعمال طريقة التطويف بالمحلول السكري والتصبيغ بااليودين والتصبيغ بصبغة كيمزا. إذ تراوح معدل األكياس الطفيلية ) (٩,٨ X ١١,٦مايكرون والمدى ) (٦,٥ – ٩,٨) X (٩,٥ – ١٣,٨مايكرون الجدول ) ،(٢حيث ظھرت أكياس الطفيلي بشكل بيضوي وذات جدار سميك متجانس مع وجود التراكيب المميزة ألكياس طفيلي Giardiaوھي نواتين أو أربع انويه والقلم المحوري Axostyle شكل ) .(٣لوحظ عدم وجود فرق معنوي في نسبة التواجد بين كال النوعين من االوالي وكما موضح بالجدول ) .(١وعند التحري عن وجود أكياس بيض طفيلي Cryptosporidium وأكياس Giardiaفي مياه اآلبار حسب مناطق الدراسة فقد سجلت الدراسة أعلى نسبة لوجود طفيلي Cryptosporidiumو طفيلي Giardiaفي ناحية برطلة وبعض القرى التابعة لھا حيث بلغت %٢٠لطفيلي Cryptosporidiumو %١٧,١٤لطفيلي Giardiaواقل نسبة تواجد لھا في مدنية الموصل إذ بلغت %١٠ لكال النوعين من االوالي الجدول ) .(٤ ،٣وبالنسبة للتوزيع الشھري فقد بينت دراستنا ان ھناك اختالفا ً في نسبة وجود طفيلي Cryptosporidiumخالل أشھر الدراسة وان أعلى نسبة وجود للطفيلي سجلت في شھر آذار إذ بلغت %٣٨,٤٦في حين وصلت إلى %٠في شھر تشرين الثاني وتموز جدول ).(٥ وبالنسبة لطفيلي Giardiaفقد وجد بأعلى نسبة بلغت %٢٣,٥٣
المواد وطرائق العمل تم جمع ١١٠عينة ماء من اآلبار الواقعة في مدينة الموصل وبعض النواحي والقرى التابعة لھا ضمن محافظة نينوى التي تضمنت )ناحية برطله وبعض القرى التابعة لھا ،ناحية بعشيقة وبعض القرى التابعة لھا ،مركز قضاء الحمدانية( خالل الفترة من أيار ٢٠٠٩ولغاية اذار .٢٠١٠اخذت عينة واحدة ) ٢لتر( أسبوعيا ً من كل بئر خالل فترة الدراسة ،أجريت الفحوصات المختبرية الالزمة على عينات المياه في مختبر الطفيليات /كلية الطب البيطري على أن ال تتأخر عن ٢٤ساعة بعد الحفظ بالثالجة ،إذ وضعت كل عينة من الماء في أنابيب اختبار نظيفة ومعقمة ودورت بجھاز الطرد المركزي بسرعة ١٠٠٠دورة / دقيقة لمدة ١٠دقائق ،أھمل بعدھا الراشح واخذ الراسب وأضيف له ١٠سم ٣ماء مقطر وأعيدت عملية الطرد المركزي مرة أخرى بنفس السرعة والوقت بعدھا أخذت قطرة من الراسب بواسطة ماصة باستور ووضعت على شريحة زجاجية وفحصت ٩٤
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٩٨-٩٣) ٢٠١١ ،٢
في شھر تشرين األول في حين وصل إلى %٠في شھر تموز، جدول ).(٤ جدول ) :(١عدد الحاالت الموجبة ونسبة تواجد كل من جنس Cryptosporidium sppوجنس Giardia sppالمشخصة في ١١٠ عينة مياه من اآلبار. األجناس الطفيلية المشخصة Cryptosporidium spp
عدد العينات الموجبة ١٨
النسبة المئوية للتواجد ١٦,٣٦ ١٢,٧٢
Giardia spp ١٤ * اليوجد فرق معنوي بين الجنسين من االوالي عند .P<0.05
شكل ) :(٢كيس بيض طفيلي Cryptosporidium sppفي عينات مياه اآلبار والمصبوغة بصبغة اليود.٤٠٠× .
شكل ) :(١كيس بيض طفيلي Cryptosporidium sppفي عينات مياه اآلبار والمصبوغة بالصبغة الصامدة للحامض المحورة .قوة التكبير ×.١٠٠٠
شكل ) :(٣كيس طفيلي Giardia sppفي عينات مياه االبار والمصبوغة بصبغة كيمزا .قوة التكبير ×.١٠٠٠
جدول ) :(٢قياسات أبعاد أكياس بيض Cryptosporidium sppوأكياس Giardia sppالمشخصة في عينات مياه اآلبار. األجناس الطفيلية المشخصة
المعدل )مايكرون (µ
Cryptosporidium spp Giardia spp
٤,٩ X ٥,١٣ ٧,٨٢ X ١١,٦
المدى )مايكرون (µ )الطولXالعرض( )(٤,١-٦,٠)X(٤,٤-٥,٨ )(٦,٥-٩,٨)X(٩,٥-١٣,٨
الصفات الشكلية كروي إلى بيضوي صغير إلى كبير الحجم شكل بيضوي
جدول ) :(٣أعداد ونسب وجود طفيلي Cryptosporidium sppباختالف مناطق جمع عينات مياه اآلبار. المنطقة مدينة الموصل ناحية برطلة وبعض القرى التابعة لھا ناحية بعشيقة وبعض القرى التابعة لھا مركز قضاء الحمدانية
عدد العينات المفحوصة ١٠ ٣٥ ٣٥ ٣٠ ٩٥
عدد العينات الموجبة ١ ٧ ٦ ٤
نسبة التواجد % ١٠ ٢٠ ١٧,١٤ ١٣,٣٣
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٩٨-٩٣) ٢٠١١ ،٢
جدول ) :(٤أعداد ونسب وجود طفيلي Giardia sppباختالف مناطق جمع عينات مياه اآلبار. المنطقة
عدد العينات المفحوصة ١٠ ٣٥ ٣٥ ٣٠
مدينة الموصل ناحية برطلة وبعض القرى التابعة لھا ناحية بعشيقة وبعض القرى التابعة لھا مركز قضاء الحمدانية
عدد العينات الموجبة ١ ٦ ٤ ٣
نسبة التواجد % ١٠ ١٧,١٤ ١١,٤٢ ١٠
جدول ) :(٥نسبة تواجد طفيلي Cryptosporidium sppو Giardia sppفي مياه االبار خالل أشھر الدراسة. Cryptosporidium spp
الموسم الصيف الخريف الشتاء الربيع
األشھر أيار حزيران تموز أيلول تشرين ١ تشرين ٢ كانون ١ كانون ٢ شباط آذار
عدد العينات المفحوصة ٩ ١٠ ١٠ ١٤ ١٢ ١٤ ٧ ٨ ١٣ ١٣
عدد العينات الموجبة ١ ١ ٠ ٣ ٢ ٠ ١ ١ ٤ ٥
Giardia spp
% ١١,١١ ١٠ ٠ ٢١,٤٣ ٢٥ ٠ ١٤,٢٩ ١٢,٥ ٣٠,٧٧ ٣٨,٤٦
عدد العينات المفحوصة ١٣ ١٠ ١٠ ١٥ ١٧ ٥ ٨ ٧ ١٥ ١٠
عدد العينات الموجبة ١ ١ ٠ ٣ ٤ ١ ١ ١ ١ ١
% ٧,٧ ١٠ ٠ ٢٠ ٢٣,٥٣ ٢٠ ١٢,٥ ١٤,٢٩ ٦,٦٧ ١٠
المشتركة بين اإلنسان والحيوان ويسبب التھاب المعدة واألمعاء في اإلنسان وتصل نسبة الوفيات به إلى %١٦كما يسبب خسائر اقتصادية في حيوانات المزرعة ناتجة عن اعتالل صحة الحيوان وتأخر نموه وحدوث اإلسھال وفقدان سوائل الجسم حيث تصل نسبة الھالكات الناتجة عنه إلى .(٢٤) %٥٠أظھرت الدراسة وجود أكياس طفيلي Giardiaفي عينات مياه اآلبار وبنسبة بلغت %١٢,٧٢وھذا يتفق مع ما ذكره ) (٢٥من أن %١٢من المياه الجوفية في أمريكا ملوثة بطفيلي Giardiaوما ذكره ) (٢٦من إن طفيلي الجيارديا Giardiaمسؤول عن %٤٠,٦من ٣٢٥من االندالعات المرضية المتعلقة بمياه الشرب والخاصة باالوالي الطفيلي في العالم والحظ ) (٢٧عند دراسته وجود عالقة بين الخمج بداء الجيارديا Giardiasisوبين وجود طفيلي Giardia lambliaفي مياه الشرب .أبرزت الدراسة انعدام الفروقات المعنوية بين وجود كل من طفيلي Cryptosporidium spp وطفيلي Giardia sppفي عينات مياه اآلبار المفحوصة عند مستوى معنوية .P<0.05إن ھذا قد يرجع إلى كون ھذين الجنسين من االوالي التي تمتاز بطرح أعداد كبيرة من األكياس ومقاومتھا للظروف البيئية حيث تبقى لفترات طويلة في البراز والماء باإلضافة لما تتميز به من صغر حجمھا ومقاومتھا للمعقمات ) .(١٦وفيما يخص مناطق الدراسة فقد كانت نسبة انتشار أكياس بيض طفيلي Cryptosporidiumوأكياس Giardia متقاربة في جميع مناطق الدراسة إذ وصلت في ناحية برطله
المناقشة أشارت نتائج الدراسة الحالية وجود أكياس طفيلي Cryptosporidium sppوبنسبة بلغت %١٦,٣٦في عينات مياه اآلبار المفحوصة وبالطرائق المختلفة .وتعد ھذه النسبة مقاربة لما وجده ) (١٧في دراسته عن وجود طفيلي Cryptosporidium في مصادر المياه المختلفة والتي شملت خزانات مياه المدارس والمستشفيات وجابيات مياه شرب الحيوان ومياه نھر دجلة ومياه المجاري إذ سجل نسبة كلية بلغت %١٨,٠٣في بعض مناطق محافظة نينوى ,ومشابھة لما وجده ) (١٩في مياه الشرب في كندا ولما توصلت إليه نتائج ) (٢٠من وجود الطفيلي في ٨آبار من مجموع ١٠آبار مفحوصة في البرازيل وأعلى مما وجده ) (٢١في تايوان من وجود أكياس بيض الطفيلي وأكياس Giardiaفي مياه الشرب المستعملة لحيوانات المزرعة .إن تشخيص طفيلي Cryptosporidiumفي دراستنا يدعم ما ذكره ) (٢٢من أن المياه الجوفية قد تكون من مصادر نقل الخمج بطفيلي Cryptosporidiumكما ھو الحال في المياه السطحية ،إذ أن اكبر اندالع مرضي بطفيلي Cryptosporidiumكانت راجعة إلى تلوث مياه الشرب من المياه السطحية والجوفية وأشارت ) (٢٣إلى أن سكان الواليات المتحدة األمريكية وروسيا الذي يستھلكون المياه الجوفية كمصدر للشرب كانت ظھور طفيلي Cryptosporidiumعندھم شائعة ،إذ يعد الطفيلي من االوالي ٩٦
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (٩٨-٩٣) ٢٠١١ ،٢
وبعض القرى التابعة لھا إلى %٢٠لطفيلي Cryptosporidium و %١٧,١٤لطفيلي Giardiaفي حين انخفضت في مدينة
المصادر
الموصل إذ بلغت %١٠لكال النوعين من االوالي .لذا نعتقد ان نسبة التواجد المسجلة في دراستنا قد يرجع إلى وجود حيوانات المزرعة بالقرب من ھذه اآلبار والتي تصاب بھذين النوعين من االوالي باإلضافة لوجود مياه البرك والمستنقعات والمياه الثقيلة والترسبات الطينية قريبة منھا والتي قد ال تراعي كثيراً في المناطق الريفية مقارنة بالمدن كما أن أغطية ھذه اآلبار قد تكون مفتوحة مما يجعلھا عرضة للتلوث أكثر فضالً عن قلة أعداد اآلبار الموجودة في المدينة عند مقارنتھا بالمناطق الريفية نظراً لبعدھا عن شبكة التوزيع الرئيسة للمياه .إن نسبة التواجد بكال النوعين من االوالي المالحظ بدراستنا ھذه قد تكون راجعة إلى التلوث الحاصل من االستغالل السيئ لھذه اآلبار .أظھرت الدراسة أن نسبة وجود طفيلي Cryptosporidiumارتفعت في شھر آذار إذ بلغت %٣٨,٤٦وانخفضت في شھر تشرين الثاني وتموز إذ بلغت .%٠وھذا يتفق مع ما ذكره ) (٢٨في مياه قرية الذھب األبيض ويخالف ما أشار إليه ) (٢٩من عدم وجود تأثير لمواسم السنة على نسب انتشار طفيلي .Cryptosporidiumإن درجة الحرارة والرطوبة النسبية المالئمة في فصل الربيع قد تكون سببا ً في ظھور نسبة تواجد اعلى للطفيلي في أشھر الربيع إذ أوضح ) (٣٠وجود عالقة بين زيادة عدد الحاالت الموجبة لطفيلي Cryptosporidiumو Giardiaوبين العمليات الزراعية ورعي األبقار خصوصا ً العجول وبين توزيع السماد على األرض .أما انخفاض نسبة وجود طفيلي Cryptosporidiumفي شھر تشرين الثاني وتموز فقد يكون راجعا ً إلى انخفاض درجة الحرارة في شھر تشرين الثاني إلى اقل من الصفر درجة مئوية مما يؤدي إلى قطع دورة حياة الطفيلي من خالل تحطم أكياس البيض وان ارتفاع درجات حرارة وعدم سقوط اإلمطار في شھر تموز قد يؤدي إلى تلف أكياس بيض الطفيلي ايضا ً إذ أشار ) (٣١إن معدل فقدان خمجية أكياس بيض الطفيلي أعلى في التربة الجافة مقارنة بالتربة الرطبة .وبالنسبة النتشار أكياس طفيلي Giardiaخالل فترة أشھر الدراسة فقد لوحظ ارتفاع وجود أكياس طفيلي Giardiaفي أشھر الخريف إذ بلغت %٢٣,٥٣في شھر تشرين األول في حين لم يالحظ وجودھا في شھر تموز وھذا يتفق مع ما ذكره ) (٣٠ويخالف ما توصلت إليه نتائج ) .(٣٢إن حيوية أكياس طفيلي Giardiaوفعاليتھا تزداد كلما تقل درجة حرارة المحيط أو الوسط الذي يتواجد فيه قد يكون السبب في ارتفاع نسبة تواجدھا في أشھر الخريف وقلة تواجدھا في أشھر الصيف ).(١٧
.١كنة ،عبد المنعم محمد علي حسين .دراسة نوعية المياه الجوفية والكبريتية في محافظة نينوى .كلية العلوم ،جامعة الموصل،٢٠٠١ ، ص .١ 2. Caccio SM, Giacomo MD, Aulicino FA, Pozio E. Giardia cyst in ;wastewater treatment plants in Itlay. Appl Environ Microbiol. 2003 69(6):3393-3398. 3. Cotruvo JA, Dufour A, Bartram J, Carr R, Cliver DO, Graun GF, Fayer R, Gannon VP. Waterborne zoonoses, Identification, Causes and Control, WHO, IWA Published, London, UK, 2002.96p. .٤كوان ،مي وحيد .دراسة في وبائية اإلصابة باالوالي المعوية Giardiaو Eimeriaو Cryptosporidiumفي العجول في منطقة بغداد ،المجلة الطبية
البيطرية٢٠٠٤ ،؛ .١٣٣ – ١٢٢ :(١)٢٨ 5. Tamburrini A, Pozio E. Long – term survival of Cryptosporidium parvum oocyst in sea water and in experimentally infected mussels (Mytilus galloprovincialis , Mytilus galloprovincialis). Int J Parasitol. 1999;29:711–715. 6. Meyer E, Jarroll EJ. Giardiasis. Am J Epidemiol.1980;111:1-12. 7. Rose JB, Huffman DE, Gennaccaro. Risk and control of waterborne Cryptosporidium. FEMS. Microbiol Rev.26:113-123. 8. Smith HV, Rose JB. Waterborne Cryptosporidium. Parasitol. Today, 1998;14:14- 22. 9. Dantonio RG, Winn RE, Taylor TB, Gustafson TL, Current WL, Rhodes MM, Gary GW, Zajac RA. A waterborne outbreak of Cryptosporidiosis. Ann Inter Med.1985;103:886-888. 10. Dworkin MS, Goldman DP, Wells TG. Cryptosporidiosis in washing state: An outbreak with well water. J Infect Dis.1996;174:270-271.
.١١الجرجري ،سيناء عبد ﷲ .دراسة في وبائية داء االبواغ الخبيئة Cryptosporidiosisفي الموصل ودور المياه في انتشار الطفيلي ،رسالة ماجستير ،كلية التربية للبنات ،جامعة تكريت ،العراق.٢٠٠١ ، 12. Lechevallier MW, Norton WD. Giardia and Cryptosporidium in raw and finisher water. J Amer Water Works Assoc.1995;78:54-68. 13. Robertson LJ, Hermansen L, Gjerde B, Strand E, Alvsvag JO, Langeland N. Application of genotypin, during an extensive outbreak of waterborne giardiasis in Bergen, Norway during autumn and winter. Appl Environ Microbiol.2004;72:2212-2217. 14. Rose JB. Detection of Cryptosporidium from wastewater and freshwater enivroments. Water Sci Technol.1986;18:233-234. 15. Pohlen ZJ, Moon HW, Cheville NF, Bemrick WJ. Cryptosporidium as a probable factor in neonatal diarrhea of calves. J Amer Vet Med Assoc.1987;172:452-457. 16. Soulsby EJ. Helminths, Arthropods and Protozoa of domesticated Animals, 7th edition, Bailliere, Tindal, London. 1982.1233-1236p. .١٧بھنام ،سفيان نعمت .تواجد طفيلي Cryptosporidiumفي مصادر المياه
المختلفة في بعض مناطق محافظة نينوى ،رسالة ماجستير ،كلية الطب البيطري ،جامعة الموصل ،الموصل ،العراق؛ ،٢٠٠٣ص .٣٥ 18. Petrie A, Waston P. Statistics for veterinary and animal science. London, Blackwell Science. 2003. 19. Wallis PM, Erlansen SL, Isaacrenton JL, Olson ME, Robertson WJ, Vankeulen H. Prevalence of Giardia cysts and Cryptosporidium oocysts and characterization of Giardia spp isolated from drinking water in Canada. App Environ Microbiol.1996;62:2789-2797. 20. Gamba RD, Ciapina EM, Espindola RS, Pacheco A, Pellizari VH. Detection of Cryptopsoridium oocysts in ground water for human consumption in Itaquaqvecetuba city. Pavlo Brazil Bra J Microbiol. 2000;13:151-153. 21. Watanabe Y, Kimura K, Yang CH, OOi HK. Detection of Cryptosporidium sp oocyst and Giardia sp cyst in faucet water samples from cattle and goat farms in Taiwan. J Vet Med Sci.2005;67 (12):1285–1287.
شكر وتقدير يتقدم الباحثون بالشكر والتقدير إلى عمادة كلية الطب البيطري وفرع األحياء المجھرية لمساھمتھم الفاعلة في انجاز ھذا البحث. ٩٧
(٩٨-٩٣) ٢٠١١ ،٢ العدد،٢٥ المجلد،المجلة العراقية للعلوم البيطرية
22. Willocks L, Grampin A, Nilne L, Seng C, Susman M, Gair R. Alarge outbreak of Cryptosporidiosis associated with a public water supply from a deep chalk borehole. Commun. Dis Pub Health.1998;239–243. 23. Egorov A, Frost F, Muller T, Naumova E, Tereschenko A, Ford T. Serological evidence of Cryptosporidium infection in Russian city and evaluation of risk factors for infection. Ann Epidemiol.2004;14:129– 136. 24. Naciri M, Lefay MP, Mancassola R, Poirier P, Chermete R. Role of Cryptosporidium parvum as a pathogen in neonatal diarrhea complex in suckling and dairy calves in France. Vet Parasitol.1999;85(4):245257. 25. Hancock CM, Rose JB, Callahan M. Cryptopsoridium and Giardia in US ground water. J Amer Water Works Assoc.1998;90:58–61. 26. Fikrie N, Hailu A. Belete H. Determination and enumeration of Cryptosporidium oocyst and Giardia cyst in legedadi (Addis Ababa) municipal drinking water system. Ethiop. J Health Dev.2008;22(1): 68-70. 27. Taus MR, Gasparovic A, Piaggio O Goldracena C, Giacopuzzi M, Piagio R, Pezan B, Minvielle M. Prevalence of Giardia lamblia detection in water and it is relationship with environmental factors in Gualeguaychu. Argentina Bol. Chil Parasitol.1998;(3-4):88–92.
انتشار أكياس بيض. بان عبد الوھاب، رعد حربي والكيالني، رھيف.٢٨ في مياه قرية الذھب األبيضCryptosporidium طفيلي االبواغ الخبيئة :(١) ٢٦ ؛٢٠٠٢ . المجلة الطبية البيطرية العراقية.في بغداد العراق .٥٥ – ٤٤ 29. Weda SE, Mohamed HO, Schaaf SL. Prevalence of Giardia sp and Cryptosporidium parvum and Cryptosporidium muris (C. andersni) in 109 dairy herds in five countries of southeastern, New York. Vet Parasitol.2001;93(1):1-11. 30. Carmena D, Aguinagalde X, Ziorraga C, Fernandez – Crespo JC, Ocio JA. Presence of Giardia cysts and Cryptosporidium oocysts in drinking water supplies in northen Spain, J App Microbiol.2007;102: 619-629. 31. Kato S, Jenkins MB, Fogarty EA, Bowman DD. Effect of freeze thaw events on viability of Cryptosporidium parvum oocyst in soil. J Parasitol.2002;88(4):718–722. 32. Roberston LJ, Gjerde. Occurrence of Cryptosporidium oocyst and Giardia cyst in raw water in Norway. Scand J Pub Health.2000;29: 200-207.
٩٨
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١٠٦-٩٩) ٢٠١١ ،٢
تطور عظم الفك في أجنة األغنام المحلية نزيھة سلطان احمد و سفانة خضر محمود فرع التشريح ،كلية الطب البيطري ،جامعة الموصل ،الموصل ،العراق )اإلستالم ٧نيسان ٢٠١٠؛ القبول ٩كانون األول (٢٠١٠ الخالصة تھدف الدراسة الى تحديد المواقع الدقيقة لبداية ظھور مراكز التعظم االبتدائية في عظم الفك الجنة االغنام وتحديد وقت الشروع في عملية التعظم .ولبلوغ ھذا الھدف اخذت عينات متسلسلة اسبوعيا من االسبوع السابع الى العشرين من فترة الحياة الجنينية .صبغت عينات الفك بصبغة االليزارين الحمراء واالليشين الزرقاء .ظھرت المراكز االبتدائية في بداية االسبوع السابع كبقعة حمراء كبيرة على جانبي القوس الغلصمي االول )غضروف ميشيل( الذي يتطور بعملية التعظم داخل الغشاء .في حين يتطور الجزء االمامي للفك بعملية التعظم داخل الغضروف .تم تتبع نمو وتطور العظم في االسبوع ) (٢٠ – ٧من عمر الجنين بتعطين الفك اما بواسطة ھيدروكسيد البوتاسيوم او يرقات الذباب وباستخدام الشريط القياسي والورق البياني للقياسات الخطية وزاوية الفك .واظھرت النتائج زيادة معنوية في ھذه القياسات في االسابيع المتتابعة المدروسة.
Development of mandible in indigenous sheep fetuses N. S. Ahmed and S. Kh. Mahmood Department of Anatomy, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq Abstract The aim of this study was to detect the precise sites of the beginning of primary ossification centers of the mandible of sheep fetuses as well as their onset time, to achieve this goal, samples were taken weekly starting from the 7th week up to 20th week of intrauterine life. Sections of the samples were stained by the alizarin red and alcian blue technique. Primary centers )appeared at the beginning of 7th week as big red spot on either sides of mesenchyme of first branchial arch (Meckel’s cartilage that developed by intramembranous ossification. The rostral part of the mandible, however, was developed by endochondral ossification. The successive bone development process (7–20) weeks, were moniterd by macerating the mandibles using either potassium hydroxide or fly larvae. Measuring tape and graph papers were employed for measurements and for localization of mandibular angle. The results revealed significant increase of these measurements during the successive weeks of intrauterine life. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
لقد نالت الدراسات التشريحية على عظم الفك في الحيوان البالغ أو الحديث الوالدة الحظ الوافر من االبحاث ،فقد أجريت دراسات شكلية وقياسية عديدة على عظم الفك في الحيوانات األليفة مثل الغزال ذو الذيل االبيض والغزال األوربي األحمر ومقارنته مع االبقار االليفــة ) (٤-٢والجمل ذو السنام الواحد ) (٥واألغنام المحلية العراقية والماعز االسود المحلـي )،(٦ وشملت األبحاث الحيونات المختبرية كدراسة الغضروف الزاوي للفك في الجرذان ) (٧وتتبع نمو وتطور الغضروف في االرتفاق الفكي للفئران ) (٨ووصف بروزات الفك في الفئران ).(٩
المقدمة يعد عظم الفك من اكبرعظام الوجه ويحمل االسنان السفلى ويتمفصل على كل من جانبيه مع الجزء الحرشفي للعظم الصدغي بواسطة النتوء اللقمي .يتكون عظم الفك من جسم وفرعين ،يحتوي الجسم بجزئيه القاطعي والطاحني على االسناخ التي تحمل القواطع والطواحن ،ويمثل فرع الفك الجزء الخلفي العمودي والمتسع من العظم ويجھز اتصاال لبعض العضالت المضغية ).(١
٩٩
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١٠٦-٩٩) ٢٠١١ ،٢
تم تتبع نمو وتطور العظم في الفكوك الملونة بالصبغة المزدوجة باستخدام المجھر التشريحي لتحديد مواقع مراكز التعظم االبتدائية التي تصطبغ باللون االحمر بينما يصطبغ الغضروف باللون االزرق ،في حين يبقى الميزنكايم شاحبا ً .تم تتبع نمو وتطور العظم في الفك خالل ١٤اسبوعا ً متعاقبا ً من عمر الجنين ) ٢٠ – ٧اسبوع( وذلك باخذ القياسات التالية: .١زاوية الفك :Jaw angleھي الزاوية المحصورة بين الخطوط الممتدة بين النقاط التالية )) ،(١٧صورة :(١النقطة اللقمية :Condylionھي النقطة االكثر ظھرية وخلفية على انحناء النتوء اللقمي لعظم الفك ،النقطة الزاوية :Gonionھي النقطة المنصفة لزاوية الفك ،والنقطة النابية :Canineھي النقطة األكثر وحشية للحافة السنخية للجيب النابي. .٢طول القناة الفكية :المسافة بين الثقبين الفكي والذقني ).(١٠ .٣الطول الكلي للفك ) :(TLيتمثل بالخط االفقي الممتد من الجزء االكثر امامية من الھامش السنخي والى الحافة الخلفية لزاوية الفك ).(١٠ .٤ارتفاع الفرع ) :(RHيتمثل بالخط العمودي الممتد من عنق النتوء اللقمي والى الحافة البطنية لفرع الفك ).(١٠ .٥عرض الفرع ) :(RWيتمثل بالخط االفقي الممتد من الحافة االمامية لفرع الفك في منطقة اتصاله بجسم الفك والى الحافة الخلفية لفرع الفك ).(١٠ .٦ارتفاع الجزء الطاحني للجسم ) :(MPHيتمثل بالخط العمودي الممتد من حافة اخر سنخ طاحني والى الحافة البطنية لجسم الفك ).(١٠
اما الدراسات الـتي تناولت نمو وتطـور عظم الفك في اجنة الحيوانات فقد كانت قليلة جدا ،فقد تناولت الدراسة التي اجريت على اجنة الماعز االسود المحلي ) (١٠تحديد مواقع ومواعيد ظھور مراكز التعظم االبتدائية في عظم الفك ،إضافة الى إجراء قياسات خطية لتتبع نمو العظم في الفك االسفل لھذه االجنة خالل مرحلة عمرية محددة. يتطور عظم الفك من مركزي تعظم رئيسيين في النسيج الضام المغطي لزوج غضاريف مايكل )(Meckel's cartilage بواسطة التعظم داخل الغشاء والتعظم داخل الغضــروف )(١١ وان المعلومات االساسية المتعلقة بالظھور االول لمراكز التعظم قـبل الوالدة ،في ھياكل اجنة الحيوان تستند على العينات المروقة في ھيدروكسيد البوتاسيوم المخفف والمصبوغة بصبغة االليزارين الحمراء ).(١٣،١٢ والھمية عظم الفك من الناحية التشريحية والجنينية الرتباط عضالت المضغ فيه ،وألنه يساھم في شكل وجمالية الفم واالھمية الوظيفية الخاصة للفك في اكالت االعشاب االليفة والنه يحدد الحد االعلى لسرعة استھالك واختيار الطعام )(١٤ وألھمية األغنام في الثروة الحيوانية وقلة الدراسات حول ھذا الموضوع فقد اجريت ھذه الدراسة لتحديد موقع وموعد ظھور مراكز التعظم في عظم الفك في أجنة األغنام المحلية .وكذلك لتتبع نمو وتطور العظم في الفك باجراء قياسات خطية وزاويية متعاقبة لعظم الفك في اجنة االغنام المحلية خالل ١٤اسبوعا متتابعا من عمر الجنين ) ٢٠– ٧اسبوع(. المواد وطرائق العمل استخدمت للدراسة األجنة الطبيعية لألغنام المحلية المجموعة من ارحام نعاج عواسية مذبوحة في مجازر الموصل المحلية ،تم قياس الطول التاجي – المنبتي C- R lengthبالسنتمتر باستخدام شريط قياسي واستخدام ھذا الطول في استخراج العمر التقديري لالجنة اعتمادا على معادلة Richardsonالمتضمنة: العمر التقديري )يوم( = ] x ٢,١الطول التاجي – المنبتي )سم( .(١٥) [ ١٧ + استخدم لھذه الدراسة ) (٤٠جنين أغنام ذكر و) (٤٠جنين أنثى تتراوح أطوالھا ما بيــن ) ٥٣ -٦سم( بينما تتراوح أعمارھا بين ) ١٤٠ -٣٧يوما ً( وتتراوح أوزانـھا مـا بيــن )-٤,٢٧ ٣٤٣٧غرام( وبواقع ) (٦ – ٤عينات لكل عمر مدروس. استخدمت تقنية الملون الثنائي مع العينات الصغيرة باستعمال ملون االليزارين االحمر لتوضيح التكلس والذي يمثل الخطوة االولى للتعظم وملون االليشين االزرق لتوضيح الغضروف .اما العينات االكبر فتم تعطينھا باستعمال ھيدروكسيد البوتاسيوم المخفف وبتراكيز مختلفة ) (١٣واستخدام طريقة التعطين بيرقات الذباب لبعض العينات ).(١٦
ص ورة ) :(١عظ م الف ك لجن ين أغن ام محل ي بعم ر ٢١أس بوع مح ضر بطريق ة التعط ين بھيدروك سيد البوتاس يوم )( KOH يوضح طريقة اخ ذ القياس ات لغ رض الدراس ة ) األس ھم الحم راء وأرقامھ ا ١وت ضم أ :النقط ة اللقمي ة ،ب :النقط ة الزاوي ة ،ج: النقطة النابية ،واألسھم ال سوداء ت ضم :٣الط ول الكل ي للف ك:٤ ، ارتف اع الف رع :٥ ،ع رض الف رع :٦ ،ارتف اع الج زء الط احني للج سم :٧ ،ارتف اع الج زء الق اطعي للج سم :٨ ،ارتف اع الثلم ة( باستخدام الورق البياني.
١٠٠
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١٠٦-٩٩) ٢٠١١ ،٢
السابـــع )بعمر ٤٦يوما( ،وفي الوقت ذاته تظھر بقعة تعظم في فرع الفك تحت النتوء الغرابي يمتد التعظم منھا ليصل منطقة اتصال الفرع بالجسم في نھاية االسبوع السابع )بعمر ٤٩يوما( ماراً بزاوية الفك وفي نھاية االسبوع الثامن نالحظ امتداد التعظم في جميع أنحاء فرع الفك )بعمر ٥٧يوما( ،ويكتمل تعظم جسم الفك بجزئيه القاطعي والطاحني في منتصف االسبوع التاسع )بعمر ٦٠يوما( .يزداد حجم الفك بتقدم عمر الجنين بنمو جزئه العظمي ،ويالحظ ان امتداد التعظم في االتجاھين األمامي والخلفي يكون أسرع من امتداده في االتجاه الظھري البطنــي )صورة .(٦-٤
.٧ارتفاع الجزء القاطعي للجسم ) :(IPHيتمثل بالخط العمودي الممتد من الحيز بين السنخي والى الحافة البطنية لجسم الفك ماراً بالثقب الذقني ).(١٠ .٨ارتفاع الثلمة ) :(NHاقصى مسافة من النقطة االكثر بطنية للثلمة الفكية والى الحافة البطنية لزاوية الفك. خضعت ھذه القياسات للتحليل االحصائي باستخدام تحليل التباين المتبوع باختبار اقل اختالف معنوي وكان مستوى المعنوية .(١٨) P<0.05 النتائج يبدأ الشروع بعملية التعظم لعظام الوجه المفردة والمزدوجة في أجنة األغنام المحلية بعمر مبكر ومتقارب على جانبي الوجه في المنطقة حول الفم وتحديدا في العظام :الفكي السفلي ،الفكي العلوي ،القاطعي ،االنفي ،الوجني والدمعي )صورة .(٢
صورة ) :(٣عظم الف ك لجنين ي أغن ام محلي ة بعم ر ٧و ٨أس ابيع مح ضرين بطريق ة ال صبغة المزدوج ة يوض ح امت داد ال تعظم ف ي جسم وفرع الفك )اللون األحمر( مع تأخر التعظم في مقدم ة الف ك والنتوء اللقمي )اللون األزرق(.
ص ورة ) :(٢عظ م الف ك لجن ين أغن ام محل ي بعم ر ٧أس ابيع مح ضر بطريق ة ال صبغة المزدوج ة يوض ح ب دء ظھ ور ال تعظم )اللون األحمر( في جسم الفك.
تتناسب الزيادة النسبية في قياس زاوية الفك ،طول القناة الفكية ،الطول الكلي للفك ،ارتفاع الفك ،عرض الفك ،ارتفاع الجزئين الطاحني والقاطعي لجسم الفك وارتفاع الثلمة الفكية تناسبا طرديا مع زيادة عمر جنين األغنام المحلية )جدول .(١ أظھرت نتائج تحليل التباين للقياسات المدروسة لعظم الفك خالل األسابيع ) (٢٠-٧من عمر جنين األغنام المحلية وجود فرق معنوي بين معدل قياس زاوية الفك ومعدالت القياسات المدروسة األخرى )جدول ،(٢وعند دراسة الزيادة النسبية لقياس زاوية الفك خالل األسابيع المدروسة لوحظت فروقات معنوية في معدل الزيادة النسبية لزاوية الفك بين بعض األسابيع واألسابيع األخرى) ،شكل .(١
يتكون عظم الفك األسفل من التحام نصفي متماثلين ،يبدأ تعظم كل منھما كعنصر ھيكلي منفرد بظھور بقعة حمراء في جسم العظم على بعد ١,٢ملم من فرع الفك وضمن الميزنكايم التابع لغضروف القوس الغلصمي األول والمسمى بغضروف مايكل Mickel's cartilageبطريقة التعظم داخل الغشاء Intramembranous ossificationوذلك في بداية االسبوع السابع )بعمر ٤٣يوما( من عمر جنين األغنام المحلية ،أما مقدمة الفك االسفل أماميا للثقب الذقني فتتعظم بطريقة التعظم داخـل الغضـــروف ) Intracartilaginous ossificationصورة .(٣ تظھر الحافة البطنية لعظم الفك متعظمة في منتصف األسبوع
١٠١
١٠٢
ارتفاع الجزء القاطعي للجسم 40±10.1 19.9±8.2 35±6.1 **65±10.1 60±12.9
ارتفاع الجزء الطاحني للجسم 10±6.1 40±12.9 20±14.2 30±11.7 **67.5±5
عرض الفرع 65±15.2 64±34.8 30±10.1 16.8±6.6 46.6±6.8
ارتفاع الفرع 35±10.1 44±9.9 37.7±16.5 44±9.4 **110±17.2
الطول الكلي للفك 41.2±7.3 21.7±9.4 33.4±11.1 19.9±7.8 **75.2±6.6
طول القناة الفكية **80±14.2 63.63±14 61±12.2 25.33±7.8 66.9±9.6
زاوية الفك
22±4.9
18.2±4.1
19.9±4.3
10.5±2.3
25.9±3.9
عمر الجنين )باالسبوع(
7
8
9
10
11
جدول :١معدل الزيادة النسبية ) (%لقياسات عظم الفك خالل ١٤اسبوعا متعاقبا ) ٢٠ -٧أسبوع( من عمر اجنة االغنام المحلية. ارتفاع الثلمة **210±29.5 48±15.1 60±24.8 50±16.3 115±10.1
12
13
14
15
16
17
18
19
20
**31.2±5
20±6
10.2±4.4
8.3±1.3
5±1.2
10.2±3.4
19.3±3.9
*1.6±0.8
7.9±0.6
25.8±7.7 45.4±15.8 14.1±4.9 18.8±1.9 12±3 10.1±1.7 17.3±4 *4.7±1.3 17.6±3.3
23±5.3 15.8±5.9 9.9±2.9 21.8±3.3 19.1±0.6 4.4±1.5 11.2±3.1 *2.4±1 18.6±4.6
30±14.4 33.3±14.7 21.6±6.8 26.6±4.9 24.2±5.4 26.6±4.2 *11.5±5.1 29.3±11.9 38.7±8.3
34.4±9.4 **93.3±70.2 23.1±3.1 *16.6±5.3 33±11.5 23.3±6.9 30.8±13.5 25.5±6.8 30.6±4.9
28.3±11.2 *8.3±4.2 20±5 42.1±5.5 37.7±8.4 13.2±2.4 29.9±7.3 10.2±5.1 17.5±6.4
**65.6±28.5 13.3±13.5 44±6.8 23.9±8.9 11.2±3 *6.6±4.5 22.2±17 11.1±9.9 13.3±2.2
23±8.4 23.1±8.1 *4.2±1.7 18.5±4.9 19.9±3.6 22.4±2.5 52.8±6.6 25.4±8.6 19±7
** أعلى معدل لكل قياس خالل االسابيع المدروسة.
* اقل معدل لكل قياس خالل االسابيع المدروسة.
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١٠٦-٩٩) ٢٠١١ ،٢
١٠٣
ارتفاع الجزء القاطعي للجسم )ملم( *0.1 ± 0.01 0.2 ± 0.01 0.3 ± 0.02 0.3 ± 0.03 0.3 ± 0.03 0.5 ± 0.09
ارتفاع الجزء الطاحني للجسم )ملم( *0.2 ± 0.01 0.3 ± 0.02 0.5 ± 0.1 0.5 ± 0.04 0.6 ± 0.1 0.7 ± 0.1
عرض الفرع )ملم( *0.3 ± 0.03 0.3 ± 0.04 0.6 ± 0.5 0.7 ± 0.04 0.8 ± 0.1 0.7 ± 0.1
ارتفاع الفرع )ملم( *0.3 ± 0.02 0.3 ± 0.02 0.6 ± 0.1 0.7 ± 0.1 0.8 ± 0.1 1.1 ± 0.1
الطول الكلي للفك )ملم( *1 ± 0.1 1.3 ± 0.1 2.2 ± 0.2 2.6 ± 0.2 2.8 ± 0.2 3.8 ± 0.2
طول القناة الفكية )ملم( *0.7 ± 0.1 0.8 ± 0.1 1.5 ± 0.1 1.8 ± 0.1 2 ± 0.2 2.7 ± 0.2
زاوية الفك
*59.2 ± 2.7
69.2 ± 2.7
70 ± 2.9
76.2 ± 1.8
73 ± 3.2
75.7 ± 4
عمر الجنين )باالسبوع(
7
8
9
10
11
12
جدول :٢معدل قياسات عظم الفك خالل ١٤اسبوعا متعاقبا ) ٢٠ -٧أسبوع( من عمر اجنة االغنام المحلية. ارتفاع الثلمة )ملم( *0.3 ± 0.04 0.4 ± 0.04 0.6 ± 0.1 0.8 ± 0.1 0.8 ± 0.1 1.2 ± 0.8
13
14
15
16
17
18
19
20
**84 ± 5
76 ± 2.8
77 ± 1.3
78.2 ± 1
76 ± 2.3
81.3 ± 3.1
79 ± 0.6
83.2 ± 1.1
3.5 ± 0.4 3.5 ± 0.1 4 ± 0.1 4.4 ± 0.1 4.7 ± 0.1 5.4 ± 0.2 5.1 ± 0.1 **5.9 ± 0.2
4.5 ± 0.2 4.9 ± 0.1 5.8 ± 0.2 6.2 ± 0.2 6.7 ± 0.1 7.3 ± 0.2 7.3 ± 0.1 **8.4 ± 0.4
1.3 ± 0.1 1.4 ± 0.1 1.5 ± 0.1 1.7 ± 0.1 1.8 ± 0.1 2.2 ± 0.1 2.1 ± 0.2 **2.3 ± 0.2
0.9 ± 0.2 1.1 ± 0.04 1.4 ± 0.1 1.3 ± 0.1 1.4 ± 0.1 1.5 ± 0.2 1.2 ± 0.1 **2 ± 0.1
0.9 ± 0.03 0.9 ± 0.04 1.2 ± 0.1 1.2 ± 0.1 1.3 ± 0.04 1.5 ± 0.1 1.4 ± 0.1 **1.8 ± 0.1
0.6 ± 0.1 0.7 ± 0.1 0.9 ± 0.1 0.9 ± 0.03 1 ± 0.03 **1.1 ± 0.1 1 ± 0.1 1 ± 0.03
1.4 ± 1 1.5 ± 0.02 1.6 ± 0.1 1.8 ± 0.1 1.9 ± 0.1 2 ± 0.1 2 ± 0.1 **2.4 ± 0.1
** أعلى معدل لكل قياس خالل االسابيع المدروسة.
* اقل معدل لكل قياس خالل االسابيع المدروسة.
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١٠٦-٩٩) ٢٠١١ ،٢
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١٠٦-٩٩) ٢٠١١ ،٢
ص ورة ) :(٥مراح ل عمري ة متتابع ة لعظ م الف ك ف ي أجن ة أغن ام محلي ة بعم ر ١٧ ،١٦ ،١٥و ١٨اس بوع مح ضرة بطريق ة التعطين بھيدروكسيد البوتاسيوم توض ح زي ادة حج م الف ك بتط ور العظم فيه.
ص ورة ) :(٤مراح ل عمري ة متتابع ة لعظ م الف ك ف ي أجن ة أغن ام محلي ة بعم ر ١٣ ،١٢ ،١١و ١٤أس بوع مح ضرة بطريق ة التعطين باليرقات توضح زيادة حجم الفك بتطور العظم فيه. وقد بينت نتائج تحليل التباين خالل األسبوع الرابع عشر من عمر جنين األغنام المحلية أن معدل قياس الطول الكلي للفك يختلف معنويا عن معدالت القياسات المدروسة األخرى باستثناء طول القناة الفكية. وقد ظھر أن معدل قياس الطول الكلي للفك وطول القناة الفكية يختلفان معنويا عن معدالت القياسات األخرى خالل األسابيع ) (٢٠-١٥من عمر جنين األغنام المحلية .كذلك فان معدل قياس ارتفاع الفك اختلف معنويا عن معدل قياس ارتفاع الجزء القاطعي والجزء الطاحني من جسم الفك خالل األسبوع التاسع عشر من عمر الجنين ،كما إن معدل قياس ارتفاع الثلمة الفكية يختلف معنويا عن معدل ارتفاع الجزء القاطعي لجسم الفك خالل األسبوع العشرين من عمر جنين األغنام المحلية.
صورة ) :(٦مراحل عمرية متتابعة لعظم الفك في أجنة أغنام محلية بعمر ٢٠ ،١٩و ٢١أسبوع محضرة بطريقة التعطين بھيدروكسيد البوتاسيوم توضح زيادة حجم الفك بتطور العظم فيه.
١٠٤
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١٠٦-٩٩) ٢٠١١ ،٢
لفك اجنة الماعز االسود المحلي والباحث ) (١٩في اجنة االغنام الى االستنتاجات ذاتھا. اظھرت نتائج تحليل التباين للقياسات المدروسة لعظم الفك خالل االسابيع ) ٢٠ -٧اسبوع( من عمر جنين االغنام المحلية وجود فروق معنوية بين معدل قياس زاوية الفك ومعدالت القياسات المدروسة االخرى وكذلك بين معدل قياس الطول الكلي للفك ومعدالت القياست المدروسة باستنثناء طول القناة الفكية خالل االسبوع الرابع عشر من عمر الجنين ،وتتفق نتائج الدراسة مع الدراسات التي استخدمت فيھا نفس القياسات على عظام الفك في االغنام المحلية البالغة واجنة االغنام المحلية )٦ و.(٢٠ اوضحت النتائج وجود فروقات معنوية بين كل من معدل الطول الكلي للفك ومعدل طول القناة الفكية ومعدالت القياسات االخرى خالل االسابيع ) (٢٠ – ١٥اسبوع من عمر جنين االغنام المحلية وذلك الن معدل الزيادة في المحور الطولي للراس يكون اكبر من معدل الزيادة في المحور المستعرض في ھذه الفترة الزمنية ) ،(٢٠كما ظھرت فروقات معنوية في بعض القياسات عن القياسات االخرى خالل اسابيع معينة كارتفاع فرع الفك وجزئي جسمه القاطعي والطاحني وارتفاع الثلمة الفكية، وقد يعود ذلك الى درجة نقاوة النوع من الناحية الوراثية ) ١٩و .(٢٠
شكل ) :(١معدالت الزيادة النسبية لقياس زاوية الفك في اجنة االغنام المحلية :a .تختلف الزيادة النسبية معنويا عما ھي عليه في االسبوع السابع من عمر جنين االغنام عند مستوى احتمالية :b .P<0.05تختلف الزيادة النسبية معنويا عما ھي عليه في االسبوع العاشرمن عمر جنين االغنام عند مستوى احتمالية :c .P<0.05تختلف الزيادة النسبية معنويا عما ھي عليه في االسبوع الثاني عشر من عمر جنين االغنام عند مستوى احتمالية :d .P<0.05تختلف الزيادة النسبية معنويا عما ھي عليه في االسبوع التاسع عشر من عمر جنين االغنام عند مستوى احتمالية .P<0.05
االستنتاجات ظھرت مراكز التعظم االبتدائية في جسم عظم الفك الجنة االغنام المحلية على جانبي الوجه في الميزنكايم التابع للقوس الغلصمي االول في بداية االسبوع السابع ،تظھر الحافة البطنية لعظم الفك متعظمة في منتصف االسبوع السابع ،وفي الوقت ذاته تظھر بقعة تعظم في فرع الفك تحت النتوء الغرابي يمتد التعظم منھا ليصل منطقة اتصال الفرع بالجسم في نھاية االسبوع السابع ماراً بزاوية الفك ويمتد التعظم في جميع أنحاء فرع الفك في نھاية االسبوع الثامن ،ويكتمل تعظم جسم الفك بجزئيه القاطعي والطاحني في منتصف االسبوع التاسع من عمر اجنة االغنام المحلية .تبين وجود فرق معنوي بين معدل قياس زاوية الفك ومعدالت القياسات المدروسة األخرى خالل األسابيـــع )(٢٠-٧ من عمر جنين األغنام المحلية ،ووجود فروقات معنوية في معدل الزيادة النسبية لزاوية الفك بين بعض األسابيع واألسابيع األخرى ،وقد لوحظ أن معدل قياس الطول الكلي للفك يختلف معنويا عن معدالت القياسات المدروسة األخرى خالل األسبوع الرابع عشر من عمر جنين األغنام المحلية باستثناء طول القناة الفكية .أن معدل قياس الطول الكلي للفك وطول القناة الفكية يختلفان معنويا عن معدالت القياسات األخرى خالل األسابيع ) (٢٠-١٥من عمر جنين األغنام المحلية ،وقد اختلف معدل قياس ارتفاع الفك معنويا عن معدل قياس ارتفاع الجزء القاطعي والجزء الطاحني من جسم الفك خالل األسبوع التاسع عشر من
المناقشة تركزت عملية التعظم المبكرة بظھور مراكز تعظم ابتدائية حول منطقة الفم في كل من عظم الفك االسفل ،الفقمي ،القاطعي، األنفي ،الوجني والدمعي وان المساحة الكبيرة لعظم الفك االسفل والفقمي كانت سببا لظھور مراكز تعظمھما قبل باقي عظام الوجه ،وقد أظھرت الدراسة أن مراكز التعظم االولى للفك االسفل الجنة االغنام المحلية لوحظت على جانبي الوجه في الميزنكايم التابع للقوس الغلصمي االول في بداية االسبوع السابع )بعمر ٤٣يوما( ويمثل مركز تعظم الجزء الطاحني من جسم الفك ،بعدھا ينتشر التعظم اماميا وخلفيا وان زيادة المادة العظمية يسبب زيادة طولية في جسم العظم ويظھر مركز تعظم الجزء القاطعي لعظم الفك )مقدمة الفك( اماميا للثقب الذقني ،وھذا يتفق مع ما الحظه كل مـن ) ١٠و ١٩و (٢٠في دراساتھم على التطور المبكر لھياكل اجنة الماعز االسود واالغنام المحلية والعالمية. يزداد حجم الفك بنمو جزئه العظمي اماميا وخلفيا حيث كان النمو في الطول الكلي للفك وفي عرض وارتفاع الفك سريعا، ويكون التناسب طرديا بين زيادة حجم وعمر الجنين والزيادة في جميع القياسات المدروسة كما توصلت الباحثة ) (١٠في دراستھا
١٠٥
(١٠٦-٩٩) ٢٠١١ ،٢ العدد،٢٥ المجلد،المجلة العراقية للعلوم البيطرية
كما وان معدل قياس ارتفاع الثلمة الفكية يختلف،عمر الجنين معنويا عن معدل ارتفاع الجزء القاطعي لجسم الفك خالل .األسبوع العشرين من عمر جنين األغنام المحلية
7. Vilmann H. The mandibular angular cartilage in the rat. Acta anat 1982;113:61–68. 8. Sugito H. 2664 role of Indian hedgehog in mandibular symphyseal cartilage development. Mand Dev Bio. 2005. http://iadr.confex.com/ iadr/2005Balt/techprogram/abstract_58645.htm 9. Balic A. 2665 prxgenes regulate cell proliferation and survival in mandibular arch. Mand Dev Bio. 2005. http://iadr.confex.com/ iadr/2005Balt/techprogram/abstract_63964.htm 10. Ahmed NS. Development of the mandible in the native black goat fetuses. Iraq J Vet Sci.2003;17(1):47–53. 11. Ishizeki K, Saito H, Shinagawa T, Fujiwara N, Nawa T. Histochemical and immunohistochemical analysis of the mechanism of calcification of Meckel's cartilage during mandible developmental in rodents. J Anat.1999;194:265–277. 12. Ahmed NS, Majeed ZZ. The embryonic development of the sternum in sheep and goats. Al-Qadisiya J Vet Med Sci.2008;7(2):50-57. 13. Ahmed NS. Development of forelimb bones in indigenous sheep fetuses. Iraqi J Vet Med Sci.2008;22(2):87-94. 14. Langvatn R, Mysterud A , Nils CS. Relationships in red deer Cervus elaphus mandibles. Acta Theriol.2004;49(4):527–542. 15. Arthur GH, Noakes DE, Pearson HV. Veterinary Reproduction and obstetrics. 6th ed. London: Bailliere Tindall.1989.59p. 16. Majeed ZZ. Maceration of delicate osteological material by fly larvae. J Anim Vet Advan.2009;8(11):2147-2149. 17. Salih KM, Ahmed NS. Morphological and morphometrical study for the mandible bone of the native sheep, 4th Scientific configarance, 2006:517–525p. 18. Steel RGD, Torrie JII. Principles and Procedures of Statistics.2nd ed., McGraw-Hill International Edi, Statistics Series, London.1981:137171p. 19. Wenham G. Aradiographic study of early skeletal development in foetal sheep. J Agric Sci Camb.1981;96:39–44. 20. Mahmood SK. Embryological development of double facial bones in native sheep. [master's thesis]. College Vet Med. Univ Mosul. Iraq. 2007.
شكر وتقدير تتقدم الباحثتان بالشكر والتقدير الجزيلين إلى عمادة كلية الطب البيطري لتوفيرھا مستلزمات البحث من األجھزة والمواد والى كافة التدريسيين والعاملين في فرع،الكيمياوية والدوريات .التشريح لتقديمھم المساعدة في إتمام البحث المصادر ، التشريح البيطري.(١٩٨٠) ابراھيم، عبد القادر جاسم وصالح، الشيخلي.١ .دار المعرفة 2. Ress JW. Morphologic variation in the cranium and mandible of the white tailed deer (odocoileus virginanus). J Morph.1969;128:95–112. 3. Azorit C, Analla M, Munoz-Cobo J. Variation of mandible size in red deer cervus elaphus hispanicus from southern Spain. Acta Theriol. 2003;48(2):221–228. 4. Kobryczuk F, Krasinska M. Shape of the mandible in European bison and domestic cattle hybrids. Acta Theriol.2003;36(1-2):171–177. 5. Sanhu PS, Dhingra LD. Morpholgy of the mandible of adult one humped camel (camelus dromedaries). Indian Vet J.1987;64(10):872– 876. 6. Salih KM. Comparative morphological and morphometrical study for the mandible bone between the native black goat and awassi Iraqi sheep. Scientific research outlook and technology development in the Arab world–Damascus.2006.
١٠٦
(١١٠-١٠٧) ٢٠١١ ،٢ العدد،٢٥ المجلد،المجلة العراقية للعلوم البيطرية
التغيرات في بعض المعايير الكيموحيوية المصاحبة لالصابة بداء البروسيلوسز في الضأن نبيل احمد الحصري* و قيس طالب العبيدي، ھديل عاصم محمد، مدركة محمود حسن،سامح ھدايت ارسالن العراق، الموصل، جامعة الموصل، كلية الطب البيطري، *فرع الفسلجة والكيمياء الحياتية واالدوية،فرع الطب الباطني والوقائي ( ٢٠١٠ مايس١٩ ؛ القبول٢٠٠٩ تشرين الثاني١٧ )االستالم الخالصة استھدفت الدراسة الحالية معرفة نسبة تواجد أضداد داء البروسيللوسز في أمصال الضأن غير الملقحة باالعتماد على االختبارات فضال عن معرفة التغيرات في،المصلية المختلفة والمتمثلة بأختبار وردية البنكال واختبار التالزن األنبوبي وأختبار االليزا غير المباشر رأسا من الضأن١٩٠٦ عينة مصل مثلت٢٢٨ تم فحص،بعض المعايير الكيموحيوية المصاحبة لإلصابة بداء البروسيلوسزفي الضأن اظھرت النتائج أن النسبة، توزعت على عشرة قطعان تم تأمينھا من مناطق مختلفة من مدينة الموصل،غير الملقحة ومن كال الجنسين (%٢٣,٦ و%٨,٧٧) الكلية لتواجد اضداد البروسيللوسز في الضأن بأستخدام أختبار وردية البنكال واختبار االليزا غير المباشر كانت (٦٤٠/١- ٤٠/١) وكانت معايير االضداد للعينات الموجبة الختبار وردية البنكال والختبار االليزا غير المباشر مابين،على التوالي aspartate transaminase وبينت النتائج حدوث ارتفاع معنوي في خميرة االسبارتات ناقلة االمين،باستخدام اختبار التالزن االنبوبي ،lactate dehydrogenase (LDH) وخميرة نازعة ھيدروجين الالكتات،alanin transaminase (ALT) وخميرة االلنين ناقلة األمين،(AST) ،glucose concentration كما لوحظ ارتفاع معنويا في نسبة تركيز الكلوكوز،alkaline phosphatase (ALP) وخميرة الفوسفاتاز القلوي مع،cholesterol والكولسترولtriglycerides وثالثي الكلسريد،direct bilirubin والبيليروبين المباشرtotal bilirubin والبيلروبين الكلي في عينات األمصال الموجبة الختباري االليزا غيرalbumin واأللبومينtotal protein انخفاض معنوي في مستوى البروتين الكلي .المباشر والتالزن األنبوبي في الضأن المصابة طبيعيا بداء البروسيللوسز مقارنة مع األمصال السالبة لتلك االختبارات
Changes in some biochemical parameters accompanied with brucellosis in sheep S. H. Arslan, M. M. Hassan, H.A. Mohammed, N. A. Al-Hussary* and Q. T. Al-Obaidi Department of Internal and Preventive Medicine, *Department of Physiology, Biochemistry and Pharmacology, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq Abstract The aim of the present study was to determine seroprevalence of brucellosis in serum of non vaccinated sheep by using different serological tests, Rose Bengal test, tube agglutination test and indirect ELISA test, in addition to study of changes in some biochemical parameters accompanied with Brucellosis in sheep. Study included examination of 228 blood serum samples in different areas of Mosul city. Results showed that prevalence of Brucellosis by using rose Bengal test and indirect ELISA test was (8.77% and 23.6%) respectively. Titers of seropostive sera of Rose Bengal and indirect ELISA ranged (1/40 1/640) using tube agglutination test. Results also showed significant increased in aspartate transaminase, alanin transaminase, lactate dehydrogenase, alkaline phosphatase, in addition to significant increase in glucose concentration, total bilirubin, direct bilirubin, triglycerides and cholesterol, whereas total protein and albumin values significantly decreased. All these parameters examinated on seropostive sera for indirect ELISA and tube agglutination tests in sheep naturally infected with Brucellosis compared with seronegative sera for same tests. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
١٠٧
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١١٠-١٠٧) ٢٠١١ ،٢
يعد داء البروسيللوسز من االمراض المعدية المنتشرة والمستوطنة في منطقة الشرق االوسط ومنھا العراق وقد تباينت نسبة انتشاره في العراق اعتمادا على نوع االختبارات المستخدمة في التشخيص ) ،(١كما ويعد من االمراض المشتركة بين االنسان والحيوان حيث يصيب انواع عديدة من الحيوانات السيما المجترات ،ويسبب المرض جراثيم تعيش داخل خاليا الجھاز الشبكي البطاني) ،(٢وتختلف فوعة الجرثومة حسب نوع الجرثومة وحجم الجرعة الممرضة ،وبعد دخول الجرثومة عن طريق االغشية المخاطية للقناة التنفسية والقناة التناسلية الذكرية واالنثوية تھاجم من قبل دفاعات الجسم المختلفة وعندما تتغلب الجراثيم على مقاومة الجسم تصل الى مجرى الدم وتجرثمة ) (Bacteremiaويمكن ان تشخص الحالة بعد ٢٠-١٠يوم من بدء االصابة وتبقى لمدة ٣٠يوما او اكثر من ٦٠يوما )،(٣ ومسبب المرض في الضأن بروسيال من نوع B.melitensis و ،(٥،٤) B.ovisويسبب المرض في النعاج االجھاض وحدوث والدات ضعيفة ) (Still-birthويحصل االجھاض خالل الشھرين االخيرين من الحمل والذي يعقبة في بعض االحيان احتباس للمشيمة ) .(٣أن لجرثومة البروسيال القابلية على احداث تغيرات كيموحيوية في الحيوانات المصابة حيث تؤدي الى ارتفاع فعالية بعض الخمائر كخميرة ناقلة امين االسبارتات وناقلة امين االلنين وخميرة نازعة ھيدروجين الالكتات والفوسفاتاز القلوية )(٦ وسبب ذلك يعود الى تورم والتھاب الخاليا الكبدية ونخرھا وتشمعھا والتھاب القناة الصفراوية والبنكرياس في كافة الحيوانات االليفة والتي تؤدي أيضا الى ارتفاع تركيز الكلوكوز ) ،(٧واشار (٨) Stockhamان الجرثومة يمكن ان تسبب التھاب كبيبات الكلية مع التھاب الكبد مما يؤدي الى انخفاض تركيز البروتين الكلي في االبقار كماتؤدي الى زيادة البيليروبين بنوعيه المباشر وغير المباشر ،ويعزا سبب ذلك الى االذى الحاصل في اعداد كبيرة من الخاليا الكبدية اوتدميرھا مما يؤدي الى ركود الصفراء ) ،(٧كما ان قصور الكلية في الحيوانات الصغيرة المصابة بالمرض تؤدي الى ارتفاع اليوريا بأالضافة الى ارتفاع مستوى شحوم الدم بأنواعھا ) .(٩ونظرا الھمية وقلة الدراسات حول معرفة التغيرات في المعايير الكيموحيوية وضعت ھذة الدراسة ،بأالضافة الى معرفة النسبة الكلي لإلصابة بداء البروسيللوسز في الضأن.
م ن الوري د ال وداجي بأس تخدام س رنجات معقم ة ووض عت ف ي أنابي ب زجاجي ة وترك ت لم دة ٢٤س اعة لك ي يتخث ر ال دم ،ث م وضعت األنابيب في جھاز الطرد المركزي ) ٣٠٠٠دورة /دقيق ة لمدة خمس دق ائق( وف صل الم صل ووض ع ف ي أنابي ب بالس تيكية معقم ة وحفظ ت ف ي درج ة ح رارة )–º٢٠م( لح ين اج راء االختبارات المصلية .تم إجراء اختبار وردية البنكال على عينات المصل وحسب تعليمات ال شركة التركي ة المجھ زة )(GÖKHAN وال ذي يحت وي عل ى المست ضدات الخ اص بجرثوم ة B.abortus ) ،(١٠واجراء اختبار االليزا غير المباشر على العينات الموجب ة وال سالبه الختب ار وردي ة البنك ال وح سب تعليم ات ال شركة االمريكي ة المجھ زة ) (VMRD,Inc./ USAوال ذي يحت وي عل ى المست ضدات الخاص ة بجرث ومتي B.melitensisو ،B.abortus واس تعمال المست ضد المجھ ز م ن ال شركة التركي ة المجھ زة ) (GÖKHANوالذي يحتوي على المستضدات الخاص بجرثوم ة B.abortusالج راء اختب ار ال تالزن االنب وبي عل ى العين ات الموجبة الختباري وردية البنكال واالليزا غير المباشرة ).(١٠ أجريت االختبارات الكيموحيوية على امصال الضأن التي اعطت نتائج موجبة مع اختبار االليزا غير المباشروالتالزن االنبوبي ) ٢٠عينة مصل( فضال عن مجموعة العينات السالبة لنفس االختبارين ) ١٥عينات مصل( .شملت االختبارات الكيموحيوية قياس فعالية خميرة ناقلة امين االسبارتات aspartate alanin ) transaminase(ASTوخميرة ناقلة امين االلنين transaminase(ALTوخميرة نازعة ھيدروجين الالكــتات lactate ) ،dehydrogenase (LDHفضال عن قياس تركيز الكلوكوز ،glucose concentrationواالعتماد على الطريقة اللونية لتقدير تركيز ثالثي الكليسيريد triglyceridesوتركيز البيليروبين الكلي total bilirubinوالبيليروبين المباشر،direct bilirubin واستخلصت نتائج معدالت البيليروبين غير المباشر indirect bilirubinوذلك بطرح معدالت البيليروبين المباشر من معدالت البيليروبين الكلي وتقدير تركيز االلبومين ،albuminجميع ھذة المعايير تم قياسھا باالعتماد على محاليل قياس جاھزة )(Kits وحسب تعليمات شركة سيربايو السورية ،وتم قياس البروتين الكلي total proteinوحسب طريقة بايوريت) ،(١١كما تم قياس فعالية خميرة الفسفاتاز القلوية ) alkaline phosphatase (ALPو الكولسترول cholesterolوحسب تعليمات شركة بايومريكس ) (Biomerieuxالفرنسية .تم تحليل النتائج احصائيا بأجراء اختبار .(١٢) t-test
المواد وطرائق العمل
النتائج
أجريت الدراسة على ٢٢٨عينة مصل دم مثلت ١٩٠٦راسا م ن ال ضأن توزع ت عل ى من اطق مختلف ة م ن مدين ة الموص ل شملت )حقل كلية الزراعة والنمرود والرشيدية وتلكي ف وبع شيقة وشھرزاد والجب ان والحمداني ة وبازواي ا وك وكجلي( ،وللفت رة م ن شھر أي ار ٢٠٠٨ولغاي ة أي ار .٢٠٠٩ت م جم ع )٥م ل( م ن ال دم
اظھرت النتائج ومن خالل فحص ٢٢٨عينة مصل دم للضأن أن النسبة الكلية لتواجد اضداد جرثومة البروسيال وبأستخدام اختباري وردية البنكال و االليزا غير المباشر بلغت ) %٨,٧٧و (%٢٣,٦على التوالي،كما تم اجراء اختبار التالزن األنبوبي على العينات الموجبة الختبار وردية البنكال ) ٢٠عينة(
المقدمة
١٠٨
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١١٠-١٠٧) ٢٠١١ ،٢
خميرة االسبارتات ناقلة األمين ،وخميرة االلنين ناقلة االمين، وخميرة نازعة ھيــدروجــين الالكــتات وخميرة الفوسفــاتاز القلــوي ،مقارنة مع مجموعة االمصال السالبة لالختبارات المصلية )الجدول .(٢ وبينت النتائج أيضا االرتفاع المعنوي ) (P<0.05في نسبة تركيز الكلوكوز ،والبيليروبين الكلي ،والبيليروبين المباشر وثالثي الكلسريد تحت مستوى معنويا ) ،(P<0.01والكولسترول تحت مستوى معنويا ) ،(P<0.05مع انخفاض معنوي )(P<0.01 في مستوى البروتين الكلي واأللبومين في العينات الموجبة الختبار االليزا غير المباشر في أمصال الضأن المصابة طبيعيا بداء البروسيللوسز مقارنة مع مجموعة األمصال السالبة لالختبارات المصلية )الجدول .(٣
حيث كان المعيار الحجمي لألجسام المضادة لھذه العينات أكثر من ٦٠وحدة دولية /مل وبمقدار تخفيف ) ٤٠/١الى ،(٦٤٠/١ في حين أظھرت نتائج اختبار التالزن األنبوبي للعينات الموجبة الختبار االليزا غير المباشر ) ٥٤عينة( إن المعيار الحجمي ل ) ٣٤عينة( منھا تراوح مابين ) ١٠/١الى (٢٠/١أو مايعادل ٣٠-١٥وحدة دولية /مل امابقية العينات الموجبة الختبار االليزا غير المباشر ) ٢٠عينة( فقد كان المعيار الحجمي أكثر من ٦٠ وحدة دولية /مل وبمقدار تخفيف ) ٤٠/١الى ،(٦٤٠/١ )الجدول.(١ واظھرت نتائج االختبارات الكيموحيوية على عينات مصل الدم للضأن التي اعطت نتائج موجبة الختبار االليزا غير المباشرو التالزن األنبوبي حدوث ارتفاع معنوي ) (P<0.01في
الجدول ) (١النسب الكلية لتواجد اضداد جرثومة البروسيال ومعاييرھا في الضأن. نوع االختبار وردية البنكال االليزا غير المباشر
عدد العينات المفحوصة ٢٢٨ ٢٢٨
عدد العينات الموجبة ٢٠ ٥٤
النسبة المئوية % ٨,٧٧ ٢٣,٦
٢٠ ١٠/١ ٢٠ ١٤
معايير األضداد ١٦٠ ٨٠ ٤٠ ٤ ٤ ٨ ٤ ٤ ٨
٣٢٠ ٢ ٢
٦٤٠ ٢ ٢
الجدول ) (٢التغيرات في بعض خمائر امصال الضأن المصاحبة لالصابة الطبيعية بداء البروسيللوسز. مجموعة السيطرة الخميرة المعدل ±الخطاء القياسي ١٠,٩٧ ± ١٦٨,١٣ ناقلة امين االسبارتات )وحدة دولية/لتر( ٥,٤٤ ± ٣١,٩٣ ناقلة امين االلنين )وحدة دولية /لتر( ٠,٤٧ ± ٠,٦٤ نازعة ھيدروجين الالكتات )غرام/لتر( ٩,٠٥ ± ٨٩,٤٠ الفسفاتايز القلوية )وحدة دولية /لتر( **االختالف معنوي عن مجموعة السيطرة عند مستوى معنوية ).(P<0.01
الضأن المصابة المعدل ±الخطاء القياسي ** ١٣,٦٣ ± ١٨١,٧١ ** ٧,١٥ ± ٤٤,٩ ** ٠,٨١ ± ١,٨٨ ** ١٧,٨٠ ± ١٤٤,٠٠
الجدول ) (٣التغيرات في بعض المعايير الكيموحيوية في أمصال الضأن المصاحبة لالصابة الطبيعية بداء البروسيللوسز. مجموعة السيطرة نوع االختبار المعدل ±الخطاء القياسي ٠,٧٥ ± ٣,٧٧ تركيز الكلوكوز )مليمول/لتر( ١,٨١ ± ٧,٥٠ البيليروبين الكلي )مايكرومول/لتر( ٠,٢٧ ± ٣,٢٠ البيليروبين المباشر )مايكرومول/لتر( ١,٥٣ ± ٤,٣٠ البيليروبين غير المباشر )مايكرومول/لتر( ٠,٢٠ ± ١,٢٦ ثالثي الكليسريد )مليمول/لتر( ٠,٦٦ ± ٢,٣٤ الكولسترول )مليمول/لتر( ٣,٩١ ± ٨,١٩ البروتين الكلي )غرام١٠٠/مل( ٠,٦٩ ± ٢,٩٤ االلبومين )غرام١٠٠/مل( **االختالف معنوي عن مجموعة السيطرة عند مستوى معنوية ).(P<0.01 *االختالف معنوي عن مجموعة السيطرة عند مستوى معنوية).(P<0.05
١٠٩
الضأن المصابة المعدل ±الخطاء القياسي * ٠,٧٣ ± ٤,٠٣ ** ١,٢٠ ± ٨,٩٠ ** ٠,٩٠ ± ٤,٧٠ ٠,٣٠ ± ٤,٢٠ ** ١,٥٥ ± ٢,٧٥ * ٠,٥٩ ± ٢,٤٦ ** ١,٣١ ± ٧,٩٠ ** ٠,٣٠ ± ١,٩٠
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١١٠-١٠٧) ٢٠١١ ،٢
3.
Radostitis OM, Gay CC, Blood DC, Hinchcliff KW. Veterinary medicine, A text of the diseases of cattle, horses, sheep, pigs, and goats, 10th ed. London: W.B. Saunders Elsevier; 2007. p. 966-998. 4. Gall D, Nielsen K, Vigliocco A, Smith P, Perez B, Rojas K, Robles A. Evaluation of an indirect enzyme-linked immunoassay for presumption serodiagnosis of Brucella ovis in sheep. Small Rum Res. 2003;48:173-179. 5. Gupta VK, Verma DK, Singh SV, Vihan VS. Serological diagnostic potential of recombinant outer membrane protein (omp31) from Brucella melitensis in goats and sheep brucellosis. Small Rum Res. 2007;70:260-266. 6. Sker M, Devecioglue C, Yaramis A, Ozbek S, Zbek MN, Tuzun H. Microangiopathic, hemolytic anemia, thrombocytopenia and acute renal failure associated with acute brucellosis. Inter Ped 2001;16:105-108. 7. Burrows CF. Liver disorders. In: Clinical medicine of the dog and cat. Schaer M, ed. UK: Manson publishing; 2003. p. 69-85. 8. Stockham SL, Scott MA. Fundamentals of veterinary clinical pathology. USA: Iowa State Press; 2002. p. 251-277. 9. Senior DF. Urinary disorders. In: Clinical medicine of the dog and cat. Schaer M, ed. UK: Manson publishing; 2003. p. 54-68. 10. Alton GG, Jones LM, Angus RD, Verger JM. Techniques for the Brucellosis laboratory. Paris: INRA; 1988. p. 63-129. 11. Wootton IDP. Microanalysis in medical biochemistry. 5th ed. Edinburgh: Churchill Livingstone ;1974. p. 156. 12. Steel RG, Torrie JH. Principles and procedures of statistics, 2nd ed., McGraw: Hill Inc; 1985. p. 120.
المناقشة أظھرت النتائج ان النسبة الكلية لالصابة بداء البروسيللوسز في الضأن في الموصل بأستخدام اختباري وردية البنكال و االليزا غير المباشر بلغت %٨,٧٧و %٢٣,٦على التوالي وجاءت ھذه مقاربة لنتائج أخرى ) (١٥-١٣استخدمت نفس االختبارات لتشخيص المرض .واظھرت االختبارات الكيموحيوية في الضأن المصابة بالبروسيلوسز ارتفاع معنوي في خمائراالسبارتات ناقلة االمين ،و االلنين ناقلة االمين ،و نازعة ھيــدروجــين الالكــتات ،والفسفاتاز القلوية ،وارتفاع مستوى الكلوكوز ،ومستوى البيليروبين الكلي والمباشر وجاءت متفقة مع ما سبق ) ،(١٧،١٦ويعزى ذلك الى االذى في الخاليا الكبدية وتشمع الكبد ونخره ،والتھاب القناة الصفراوية والتي تسبب ركود الصفراء في القناة الصفراوية ومن ثم ارتشاح البيليروبين من خالل جدارھا الى الدم وبالتالي ارتفاعه في مصل الدم ) ،(٧،١٨ولوحظ الى ان االرتفاع في تركيز البيليروبين يعود الى اصابة الكبد نتيجة البروسيللوسز ) .(١٩وُ ذكر ان االرتفاع في خميرة الفسفتاز القلوية يعود الى تورم الخاليا الكبدية والتھاب البنكرياس في المجترات باالضافة الى امراض العظام التي تحدث نتيجة اضطراب ايض فيتامين .(٢٠) D واظھرت النتائج ارتفاعا معنويا في مستوى الدھون المتمثلة بثالثي الكليسيرايد في الضأن المصابة واتفقت ھذه النتيجة مع ما سبق ) (١٧حول حصول االرتفاع في ثالثي الكليسيرايد والذي يعود الى وجود الذيفان الداخلي في الدم ،لذا قد يعزى االرتفاع في ھذه الدراسة الى االصابة بجرثومة البروسيال التي تحتوي على الذيفان الداخلي .وبينت النتائج ارتفاع مستوى الكولسترول في الضأن المصابة وجاءت النتيجة متفقة مع ماسبق ) (٨حيث لوحظ ان االرتفاع في تركيز الكوليسترول في المجترات يمكن ان يحدث العتالل الكلية والتھاب كبيبات الكلى والمتالزمة الكالئية .كما لوحظ من الدراسة انخفاض تركيز البروتين الكلي و االلبومين في الضأن المصابة ،وجاءت ھذه النتائج مطابقة مع نتائج أخرى ) (٢١ويعزى االنخفاض الى قلة صنعه في الكبد نتيجة االصابة بداء البروسيال ،كما ان فقدان وتسرب االلبومين خالل النسيج التالف للكلية يؤدي الى انخفاض تركيزه ).(٢٢
.١٣ .١٤ .١٥
.١٦
17. Gur A, Geyik MF, Dikici B, Nas K, Cevik R, Sarac J, Hosoglu S. Complication of Brucellosis in different age groups: A study of 283 cases in south eastern Anatolia of Turkey. Yonsei Med J. 2003;44:33-44.
.١٨الصوفي ،ليث عبد المجيد والسلطان ،عماد ابراھيم .التغييرات المرضية المصاحبة لخمج البروسيال المجھضة في خنازير غينيا الممنعة بلقاح ال ـ Rev1المن تج محلي ا .مجل ة القادس ية لعل وم الط ب البيط ري،٢٠٠٣ . .٢٠-٢:١١ 19. Meyer DJ, Harvey JW. Hepatobiliary and skeletal muscle enzymes and liver function tests. In: Veterinary laboratory medicine interpretation and diagnosis. USA: Saunders; 2004. p. 156-168. 20. Grioriou I, Giannakaki A, Pagoni M, Karmiris TD, Mitsouli C, Nikiforakis E. Extreme hematological abnormalities associated with Brucellosis: Report of two cases. Haematol. 2003;6:93-96. 21. Gursoy S, Baskel M, Ozbakir O, Guven K, Patiroglu T, Yucesoy M. Spontaneous bacterial peritonitis due to brucella. Turk J Gastroenterol. 2003;14:145-147. 22. Newman DJ, Price CP. Renel function and nitrogen metabolites. In: Burtis CA, Ashwood ER, eds. Tietz–Textbook of Clinical Chemistry. Philadelphia: W.B. Saunders Co.; 1999. p. 1204-1270.
الشكر والتقدير تم دعم البحث من قبل كلية الطب البيطري ،جامعة الموصل. المصادر Al-Araji AHY, Nouri KA, Tawfik MR. Neurobrucellosis: report of Iraqi patients. J Fac Med. 1998;40(4):481-297. Ficht TA. Intracellular survival of brucella defining the link with persistence. Vet Microbiol. 2003;92:213-223.
الع زاوي ،زيادس عدﷲ .دراس ة م صلية وجرثومي ة لم رض األجھ اض المعدي )البروسيللوسز( في الضأن و الماعز في محافظة نينوى .رس الة ماجستير ،كلية الطب البيطري ،جامعة الموصل .١٩٩٥ من صور ،ري م س الم .دراس ة وبائي ة وتشخي صية لم رض البروس يال ف ي محافظة نينوى .رسالة ماجستير ،كلية الطب البيطري ،جامع ة الموص ل .٢٠٠٠ الحنك اوي ،عم ر خزع ل س لو .دراس ة مقارن ة لت شخيص م رض البروسيللوسز في الضأن والم اعز ف ي محافظ ة نين وى بأس تخدام اختب ار االليزا مع االختب ارات الم صلية االخ رى .رس الة ماج ستير ،كلي ة الط ب البيطري ،جامعة الموصل .٢٠٠٦ العب دلي ،ادري س ب الل عل ي .االص ابة بالبروس يال ف ي محافظ ة نين وى وبع ض الجوان ب الكيمياوي ة الحيوي ة ،اطروح ة دكت وراة .كلي ة الط ب البيطري ،جامعة الموصل .٢٠٠٥
1. 2.
١١٠
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١١٥-١١١) ٢٠١١ ،٢
نسبة حدوث المقوسات الكوندية في الحمير المحلية في الموصل خضر جاسم حسين فرع الطب الباطني والوقائي ،كلية الطب البيطري ،جامعة الموصل ،الموصل ،العراق )اإلستالم ٣تشرين الثاني ٢٠٠٩؛ القبول ١٩مايس (٢٠١٠ الخالصة استھدفت الدراسة معرفة نسبة حدوث المقوسات الكوندية في الحمير المحلية في الموصل – العراق ،من خالل فحص مصول الحمير المحلية البالغ عددھا ٥٢حيوانا ً ) ٩ذكور و ٤٣أنثى( باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس واختبار تالزن جزيئات الالتكس المحور مع الـ ) (2-MEوكذلك استخدام اختبار االليزا غير المباشر ) .(Indirect IgG ELISAحيث بلغت نسبة تواجد األضداد باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس ،% ٤٦,١٥منھا % ٨,٣٣لالصابات الحادة و % ٩١,٦٧لإلصابات المزمنة عند تفريقھا باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس المحور مع الـ ) .(2-MEبينما كانت النسبة المئوية إلصابة اإلناث (٤٣/٢٢) % ٥١,١٦وللذكور % ٢٢,٢٢ ) (٩/٢باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس ،بينت الدراسة إن معايير األضداد بين .١٢٨٠:١ – ٢٠:١وبلغت نتائج اختبار االليزا غير المباشر .% ٢٢,٧٢
Prevalence of Toxoplasma gondii in native donkeys in Mosul Kh. J. Hussain Deparatment of Internal and Preventive Medicine, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq Abstract The aim of the study was to determine the prevalence of Toxoplasma gondii in native donkeys in Mousl, Iraq. Fifty two sera (9 males and 43 females) were examined by Latex agglutination test, Modified latex agglutination test with 2mercaptoethanol test and Indirect ELISA test (Indirect IgG ELISA). The prevalence of Toxoplasma gondii in native donkeys was 46.15 %. Acute cases 8.33% and chronic cases 91.67 % when differentiated by Modified latex agglutination test with 2mercaptoethanol test. The percentages of female and male infections were 51.16% (22/43) and 22.22% (2/9), respectively by using latex agglutination test, and the titeration of antibodies ranged between 1:20 - 1:1280 and for Indirect IgG ELISA it was 22.72% positive cases. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
اإلجھاض والتشوھات الخلقية وافات في الدماغ ومشاكل في الرؤية للمواليد في االنسان والحيوانات بشكل عام ) .(٣،٤ان االصابة بداء المقوسات الكوندية في الحمير التي تعود الى الفصيلة الخيلية تكون من النوع تحت ألسريري ،Subclinicalان للفحوصات المصلية دوراً ھاما ً في تشخيص األجسام المضادة الخاصة باوالي المقوسات الكوندية المتكونة داخل جسم المضيف تجاه االصابة بھذا الطفيلي ) ،(٦،٥حيث تم تشخيصه باستخدام مختلف االختبارات المصلية مثل اختبار ارتباط اإلنزيم لالمدصاص المناعي Enzyme Linked Immunosorbant Assay Latex ) (٧) (ELISAواختبار تالزن جزيئات الالتكس
المقدمة المقوسات الكوندية من االوالي الطفيلية الواسعة االنتشار عالميا ً والتي تخمج جميع الحيوانات ذوات الدم الحار بما فيھا االنسان ) (١وتعد القطط المضائف النھائية اإلجبارية لھذا الطفيلي والتي بدورھا تطرح أكياس البيض المقاومة للظروف البيئية في برازھا بينما االنسان وحيوانات المزرعة والحيوانات البرية وكذلك الطيور والقوارض تعد المضائف الوسطية للطفيلي ) .(٢تكتسب المضائف االصابة نتيجة لتناول الماء والغذاء الملوثين باكياس البيض ويتسبب الطفيلي بحدوث حاالت ١١١
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١١٥-١١١) ٢٠١١ ،٢
Agglutination Testباستخدام عدة الفحص التجارية المنتجة من قبل الشركة االنكليزية Plasmatic laboratory products LTd وھو فحص نوعي وكمي للكشف عن اضداد المقوسات الموجودة في عينات المصل وحسب ) (١٨وفحص تالزن جزيئات الالتكس المحور مع الـ ) (2-MEللعينات الموجبة في فحص تالزن جزيئات الالتكس وذلك لتحديد نوع االصابة مزمنة كانت أم حادة حيث تم تحضير مركب ثنائي ميركبتوايثانول بمعيارية ) ٠,٢مول( وحسب ماجاء في ) .(١٩وتم اجراء اختبار االليزا غير المباشر ) (IgG I-ELISAباستخدام عدة االختبار المنتجة من قبل الشركة األلمانية Novatec immundiagnostca GMBHتم التحري الكمي والنوعي عن الكلوبيولينات المناعية نوع IgGفي مصول الحيوانات قيد الدراسة وأجريه االختبار حسب تعليمات الشركة المنتجة وحسب ) ،(٢٠تم جلب جميع العينات والكواشف والمحاليل القياسية ووضعت بدرجة حرارة الغرفة وتم تخفيف العينات باستخدام محلول تخفيف العينات بنسبة ١٠٠:١وذلك باضافة ١ميكروليتر من العينة الى ١٠٠مايكروليتر من محلول التخفيف ،ثم اضافة ١٠٠ميكروليتر من المحاليل القياسية االربعة )DوCوBو (Aالتي تحوي التراكيز ) 200,100,50,0وحدة دولية /مل( على التوالي والعينات المخففة الى حفر الطبق بالترتيب وتركت الحفرة A1الضافة كاشف اللون Substrate blankثم حضن الطبق بدرجة حرارة الغرفة لمدة ساعة ،بعد الحضن تم اھمال محتويات الطبق وغسل ثالث مرات باستخدام محلول الغسل الخاص بعدة االختبار حيث حضر محلول الغسل بتركيز ) (١٩+ ١باضافة جزء من محلول الغسل الى ١٩جزء من الماء المقطر،ومن ثم اضافة ١٠٠مايكروليتر من محلول المقترن Anti-IgG conjugateالى جميع حفر الطبق ومن ثم حضن الطبق لمدة نصف ساعة بدرجة حرارة الغرفة وبعد الحضن أھملت محتويات الطبق وغسل ٣مرات باستخدام محلول الغسل بعدھا يتم اضافة ١٠٠مايكروليتر من محلول كاشف اللون TEM substrate solutionالى جميع حفر الطبق ومن ثم حضنه بدرجة حرارة الغرفة في مكان مظلم لمدة ١٥ دقيقة بعدھا تم اضافة ١٠٠مايكروليتر من محلول موقف التفاعل Stop solutionوبعد ذلك تم قياس الكثافة الضوئية لمحتويات الطبق باستخدام المطياف الضوئي عند طول موجي ٤٥٠ نانوميتر حيث يتم تصفير الجھاز باستخدام طبق فارغ وتم قراءة النتيجة خالل ٣٠دقيقة من اضافة محلول موقف التفاعل .تمت قراءة واحتساب النتائج من خالل تسقيط قراءة الكثافة الضوئية للعينات قيد الدراسة على المنحى القياسي الذي تم تحضيره من تركيز المحاليل القياسية األربعة ) (D,C,B,Aالمرفقة مع عدة الفحص وحسب تعليمات الشركة المنتجة لعدة االختبار حيث مثلت العينات التي تملك تراكيز اكثر من ٣٥وحدة دولية/مل نتائج موجبة اما العينات التي تمتلك تراكيز اقل من ٣٠وحدة دولية /مل مثلت النتائج السالبة والعينات التي تمتلك تراكيز بين ٣٥-٣٠عدت كنتائج مبھمة.
) ،(٨) Agglutination Test (LATوأجريت عدة دراسات حول االصابة بالمقوسات الكوندية في الحمير فقد سجل ) (٧في مصر نسبة إصابة بلغت % ٦٥,٦عند فحصه ١٢١نموذج باستخدام اختبار االليزا ،وفي دراسة أخرى استخدم فيھا اختبار التالزن المحور ) Modified Agglutination Test (MATبلغت نسبة االصابة .(٩) %٥٢-٣٦بينما كانت نسبة إصابة الحمير في المناطق المحيطة بمدينة قيصري ) (Kayseriفي تركيا ٤٢,٤٢ %باستخدام اختبار صبغة سابن وفليدمان Sabin Feldman Dye .(١٠) Testبينما الحظ ) (١١في منطقة ھوبي في الصين إن نسبة تواجد أضداد المقوسات الكوندية في الحمير % ٦,٠٦عند استخدامه اختبار التالزن الدموي غير المباشر Indirct ) .Heamoagglutination Test (IHATأما على صعيد الدراسات التي أجريت في مدينة الموصل فقد أجريت عدة دراسات حول إصابة الضان والمعز واألبقار الحية والمجزورة وكذلك الجاموس ) (١٧-١٢ولم تجرى أي دراسات حول إصابة الحمير في الموصل .ولكون داء المقوسات الكوندية من األمراض المشتركة الواسعة االنتشار فقد أجريت الدراسة للكشف عن نسبة حدوث المقوسات الكوندية في الحمير المحلية في مدينة الموصل باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس واختبار تالزن جزيئات الالتكس المحور الـ ) (2- Mercaptoethanolللتميز بين نوع االصابة الحادة و المزمنة فضال عن الكشف عن مستويات األضداد وكذلك استخدام اختبار االليزا الغير المباشر ) Indirct .(IgG ELISA المواد وطرائق العمل تم في ھذه الدراسة التحري عن تواجد أضداد طفيلي المقوسات الكوندية في مصول الحمير المحلية السليمة سريريا ً في الموصل باستخدام االختبارات المصلية التالية اختبار تالزن جزيئات الالتكس واختبار تالزن جزيئات الالتكس المحور مع الـ ) (2-Mercaptoethanolوقياس مستوى االضداد في شرائح زجاجية وكذلك اختبار االليزا غير المباشر للتحري عن تواجد االضداد نوع IgGفي مجموعة مصول متكونة من ٥٢حيوان ) ٩ذكور و ٤٣أنثى( من مناطق مختلفة من الموصل وھي تربى بين قطعان األغنام إلغراض الرعي والعمل تراوحت أعمارھا بين ١٤-٢سنة ،حيث جمعت عينات الدم من الوريد الو داجي بعد تعقيم المنطقة بالكحول األثيلي %٧٠وتم سحب ١٠مل من الدم باستخدام محاقن طبية نبيذة ذات حجم ١٠مل ووضعت في أنابيب زجاجية نظيفة ومعقمة وتركت لمدة ساعة في درجة حرارة الغرفة لكي يتخثر الدم ،وضعت بعدھا في الثالجة بدرجة حرارة ˚ ٤م الى اليوم التالي ثم فصل المصل بوضع النماذج في جھاز الطرد المركزي بسرعة ٣٠٠٠دورة/دقيقة ولمدة ١٠-٥ دقائق ونقل المصل بواسطة ماصة الى أنابيب بالستيكية وحفظت بدرجة حرارة ˚ ٢٠-م لحين إجراء الفحوصات المصلية عليھا Latex حيث تم إجراء فحص تالزن جزيئات الالتكس ١١٢
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١١٥-١١١) ٢٠١١ ،٢
وعند دراسة معايير األضداد المختلفة لداء المقوسات الكوندية باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس تبين ان معايير ھذه األضداد تباينت تباينا ً كبيراً حيث تراوحت بين – ٢٠:١ ،١٢٨٠:١وفقد كانت أعلى األعداد للحاالت الموجبة )في المعايير الواطئة لألضداد( في ٨حاالت كان المعيار ،٢٠:١ وأعقبھا المعيار ٤٠:١سجل في ٥حاالت موجبة ،أما المعايير العالية نسبيا ً فقد توزعت على ٢حاالت للمعيار ٦٤٠:١و حالة واحدة للمعيار ،١٢٨٠:١كما كانت ھنالك معايير متوسطة ألضداد داء المقوسات الكوندية في ٣حاالت للمعيار ١٦٠:١و حالة واحدة للمعيار ،٣٢٠:١وكما موضح في الجدول رقم ).(٣
تم تحليل النتائج إحصائيا باالعتماد على اختبار مربع كآي chi-square (χ2) testباستخدام البرنامج اإلحصائي Spss 11.5 ) (SPSS Inc.باستخدام الحاسبة االلكترونية ).(٢١ النتائج أظھرت نتائج فحص مصول الحمير المحلية البالغ عددھا ٥٢ حيوانا ً ) ٩ذكور و ٤٣أنثى( باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس إن نسبة العينات الموجبة كانت %٤٦,١٥بينما كانت نتائج فحص النماذج باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس المحور مع الـ ) (2-MEوذلك للتحري عن أصناف الكلوبيولينات المناعية الخاصة بطفيلي المقوسات الكوندية لتميز نوع الخمج حاد أم مزمن فقد تبين إن النماذج المصلية الموجبة لالختبار بلغت ٢٢نموذجا أي تحمل كلوبيولينات مناعية من نوع IgG وبنسبة %٩١,٦٧لإلصابات المزمنة ،أما النماذج المصلية السالبة لالختبار بلغت عينتان أي تحمل كلوبيولينات مناعية من IgMوبنسبة %٨,٣٣لإلصابات الحادة الجدول رقم ).(١
الجدول رقم ) (٣أعداد الحاالت المختلفة لمعايير األضداد في مصول الحمير المحلية باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس. معايير االضداد ٢٠:١ ٤٠:١
٨٠:١
الجدول رقم ) (١أنواع األضداد وأعداد الحاالت الموجبة ونسبھا المئوية في الحمير المحلية لداء المقوسات الكوندية باستخدام اختبار جزيئات الالتكس واختبار جزيئات الالتكس المحور مع الـ ).(2-ME عدد عدد عدد النسبة نوع الحاالت الحاالت المئوية الضد الحاالت المفحوصة الموجبة لإلصابة الموجبة IgM ٢ IgG ٤٦,١٥ ٢٢ ٢٤ ٥٢ ٢٤ الكلي
١٦٠:١ ٣٢٠:١ ٦٤٠:١ ١٢٨٠:١
النسبة المئوية لإلصابة ٨,٣٣ ٩١,٦٧ ١٠٠
وكانت نتائج اختبار االليزا غير المباشر (Indirect IgG ) ELISAأن عدد الحاالت الموجبة لالختبار بلغت ٥حاالت
وبنسبة بلغت % ٢٢,٧٢للحاالت الموجبة الختبار تالزن جزيئات الالتكس المحور مع الـ ) (2-MEالتي كانت نسبتھا %٩١,٦٧أي ٢٢حالة تحمل الكلوبيولين المناعي نوع ،IgG الجدول رقم ).(٤
وكانت النسبة المئوية إلصابة اإلناث باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس ) (% ٥١,١٦أي إصابة ٢٢من أصل ٤٣من اإلناث وكانت النسبة المئوية إلصابة الذكور ) (% ٢٢,٢٢أي إصابة ٢من أصل ٩من الذكور ،الجدول رقم ).(٢
الجدول رقم ) (٤العينات الموجبة ونسبھا المئوية الختباري االليزا غير المباشر واختبار تالزن جزيئات الالتكس المحور مع الـ ).(2-ME نوع االختبار
الجدول رقم ) (٢جنس الحيوانات وعدد الحاالت الموجبة ونسبتھا المئوية باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس. جنس الحيوان اإلناث الذكور المجموع
عدد الحاالت المفحوصة ٤٣ ٩ ٥٢
عدد الحاالت الموجبة ٢٢ ٢ ٢٤
أعداد الحاالت ٨ ٥ ٤ ٣ ١ ٢ ١
االليزا غير المباشر تالزن جزيئات الالتكس المحور مع الـ )(2-ME
النسبة المئوية لإلصابة ٥١,١٦ ٢٢,٢٢ ٤٦,١٥
العينات عدد العينات الموجبة ٥ ٢٢ ٢٤
٢٢
النسبة المئوية ٢٢,٧٢ ٩١,٦٧
المناقشة تحدث إصابة الحمير المحلية بطفيلي المقوسات الكوندية Toxoplasma gondiiبطرائق مختلفة منھا الغذاء والماء الملوثين
١١٣
المجلة العراقية للعلوم البيطرية ،المجلد ،٢٥العدد (١١٥-١١١) ٢٠١١ ،٢
) .(٣٢،٣١إما عند مقارنة نسب تواجد أضداد المقوسات الكوندية بين الجنسين )الذكور واإلناث( فلم يالحظ وجود اختالف معنوي إحصائي بينھما وھذه النتيجة مشابھة لما حصل علية ) (٣١حيث لم يذكر اي اختالف بين إصابة الذكور واإلناث في خيول السباق في تركيا .وعند دراسة معايير األضداد المختلفة لداء المقوسات الكوندية تبين ان معايير ھذه األضداد تتذبذب تذبذبا ً كبيراً بين .١٢٨٠:١-٢٠:١وھذا النتائج تنسجم مع نتائج ) (٣٠حيث الحظ تذبذب في مستوى األضداد عند فحصه لمجموعة مصول خيول في شمال أمريكا كانت معدة للجزر. ويمكن أن يعزى ھذا التذبذب الحاصل في معايير األجسام المضادة للطفيلي الى ان طفيلي المقوسات الكوندية يمتلك قابلية على تحفيز المناعة القبلية ) (Preimmunityفي المضائف التي يتطفل عليھا والتي تبقى فيھا ھذه المناعة طول فترة بقاء الطفيلي في الجسم ووصوالً الى حالة من االتزان المناعي تسيطر من خالله على وجود الطفيلي في الجسم وبالتالي تمنع تأثيراته االمراضية ،ولكن حدوث اي ھبوط في الحالة المناعية للجسم وألي سبب كان فان ھذا سوف يؤدي الى تنشيط األكياس النسيجية الكامنة للطفيلي في جسم المضيف ويؤدي الى تمزقھا وتحرر الحوينات التي قد تتفاعل مع األجسام المضادة الموجودة آنفا ً مؤدية الى انخفاض في معايير ھذه األجسام وتؤدي كذلك الى تحفيز جديد للجھاز المناعي مما يؤدي الى انتاج اجسام مضادة اخرى وذلك مما يزيد معايير األجسام المضادة ) .(٣٣وتم التحري عن وجود الكلوبيولينات المناعية نوع IgGفي مصول الحمير المحلية باستخدام اختبار االليزا غير المباشر ) IgG (Indirect ELISAوكانت نسبة تواجدھا %٢٢,٧٢في حين كانت نسبتھا باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس المحور مع الـ ) .%٩١,٦٧ (2-MEنالحظ ان الفروقات في النسبة المئوية باختالف التقنيات المستخدمة إذ كانت نتائج اختبار االليزا غير المباشر اقل مما ھي عليه في اختبار تالزن جزيئات الالتكس مع الـ ) ،(2-MEوكانت نتائج دراستنا التتوافق مع ما ذكرته ) (١٥عند مقارنتھا بين اختباري الالتكس و االليزا غير المباشر في مصول األغنام حيث لم تالحظ فروق واضحة بين االختبارين .وقد تعزى األسباب التي ادت الى وجود الفروقات في النسب المئوية للخمج باستخدام كال االختبارين الى كون اختبار تالزن جزئيات الالتكس المحور مع الـ ) (2-MEھو اختبار نصف كمي ) (Semi-quantitativeلوجود بعض التفاعالت المصلية التصالبية ) (Cross reactionبين مستضدات داء المقوسات الكوندية وأضداد داء الصنوبريات ) (Sarcocystosisالتي تعطي نتائج مصلية موجبة،في حين يكون اختبار االليزا غير المباشر من االختبارات الدقيقة والكفوءة وسھلة االستخدام ) .(٢٢وجاءت نتائج اختبار االليزا غير منسجمة مع النتائج التي حصل عليھا ) (٧في مصر اذا كانت %٦٥,٦وھي أعلى مما حصلنا عليه في دراستنا ،كما اننا نعتقد بان العوامل البيئية والمناخية قد تلعب دورھا في نسبة الخمج مثلما اشار ) (٣٤الى ازدياد نسبة الخمج بداء المقوسات الكوندية
باكياس البيض المطروحة مع براز القطط ) (٢٣,٢٢ولتشخيص اإلصابة بداء المقوسات في الحمير المحلية في مدينة الموصل اعتمدت االختبارات المناعية المصلية للتحري عن االضداد المتكونة جراء الخمج وذلك لصعوبة االعتماد على العالمات السريرية بسبب ندرة حدوث الخمج ألسريري في ھذه الحيوانات ) (٢٥,٢٤وتم استخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس واختبار تالزن جزيئات الالتكس المحور مع الـ ) (2-MEللكشف عن نوع الكلوبيولينات المناعية من نوع IgGو IgMالخاصة بطفيلي المقوسات الكوندية للتميز بين االصابة الحادة والمزمنة لما يمتاز به من سھولة اإلجراء وقلة الجھد والوقت الالزمين إلجرائه ولكلفته المناسبة ) .(٢٧,٢٦أظھرت نتائج الدراسة إن نسبة الحاالت الموجبة باستخدام اختبار تالزن جزيئات الالتكس %٤٦,١٥والحاالت التي تحمل كلوبيولينات مناعية من نوع %٨,٣٣ IgMومن نوع IgGكانت % ٩١,٦٧باالعتماد على اختبار تالزن جزيئات الالتكس المحور مع الـ ) , (2-MEويعزى المستوى العالي للخمج بداء المقوسات الكوندية في الحمير المحلية الى تربيتھا مع قطعان األغنام وحدوث الخمج في األغنام الذي تكون نسبة انتشاره عالية نوعا ً ما حيث أشار كل من الباحثون ) (١٧-١٥،١٢لدراستھم نسبة انتشار الخمج في األغنام في الموصل إلى ارتفاع ھذه النسب حيث كانت %٤٢,٧و %٤٩و %٦٨و %٨٤على التوالي وخالل فترات زمنية مختلفة ،وتزداد نسبة الخمج في األغنام بازدياد وجود القطط في أماكن التربية ،كما إن المشيمة الخمجة والحمالن الميتة قد تكون مصدرا أخر لخمج الطيور والفئران بطفيلي المقوسات الكوندية ويؤدي اصطياد القطط لھذه الفئران والطيور الخمجة الى الطرح العالي ألكياس البيض التي تكون مقاومة للظروف البيئية ).(٢٨ وكانت ھذه النتائج مقاربة لما حصال عليه ) (٩في مصر حيث سجال نسبة إصابة بلغت ٣٦و % ٥٢في الحمير عند استخدامه اختبار التالزن المحور ،MATوكانت النتائج أيضا مقاربة لما حصل عليه ) (١٠في مناطق ما حول مدينة قيصري )(Kayseri في تركيا حيث كانت %٤٢,٤٢باستخدام اختبار اختبار صبغة سابن وفليدمان Sabin Feldman Dye Testوكانت النتائج اقل مما حصل عليه ) (٢٩في خيول االرجنتين حيث سجل %٩٧عند استخدامه اختبار التالزن الدموي غير المباشر .IHATولكن كانت النتائج أعلى مما سجله ) (٣٠في الخيول في شمال أمريكا %٦,٩باستخدام اختبار التالزن المحور ،MATوأعلى مما سجله ) (٣١عند استخدامه اختبار صبغة سابن و فليدمان %٢٨ في الخيول السباق في منطقة أنقرة في تركيا وكذلك أعلى مما سجله ) (١٠في الحمير في منطقة ھوبي في الصين %٦,٠٦ عند استخدامه اختبار التالزن الدموي الغير المباشر .IHATمن خالل كل ما تم استعراضه يتبين ان اختالف نسب الخمج قد يتسبب عن اختالف في التقنيات المستخدمة في التشخيص ويعكس ايضا ً اختالفا ً حقيقيا ً في نسب الخمج نتيجة التباين في الظروف المناخية الناتجة من اختالف البلدان وكذلك عمر الحيوانات ونوع وساللة الحيوان وفي ظروف التربية الصحية ١١٤
(١١٥-١١١) ٢٠١١ ،٢ العدد،٢٥ المجلد،المجلة العراقية للعلوم البيطرية
دراسة مصلية ونسيجية لداء المقوسات. دنيا عبد الرزاق، عبد ﷲ.١٥ ،الكوندية في الحيوانات المجزورة واإلصابة التجريبية في الفئران ، الموصل، جامعة الموصل، كلية الطب البيطري،رسالة ماجستير .٢٠٠٤ العراق التحري عن بعض مصادر. سرى سالم عبد الرزاق داود، أغوان.١٦ Toxoplasma العدوى مع دراسة التأثيرات المناعية والمرضية لطفيلي ، جامعة الموصل، كلية الطب البيطري،أطروحة دكتوراه،gondii .٢٠٠٥ العراق،الموصل أسامة، عبدالجبار، عمر خزعل، الحنكاوي، مآب إبراھيم، ألفروجي.١٧ تواجد أضداد المقوسات الكوندية في إناث الجاموس في محافظة.موفق -١٩:(١)٢٢؛٢٠٠٨ المجلة العراقية للعلوم البيطرية. العراق،نينوى .٢٤
( االختالف في٣٢) في حالة زيادة ھطول االمطار حيث يعزي ذلك إلى التباين في الظروف المناخية والجغرافية وفي عمر .الحيوانات وفي ظروف التربية الصحية من بلد إلى أخر شكر وتقدير جامعة/تم دعم ھذا البحث من قبل كلية الطب البيطري .الموصل المصادر
18. Holliman RE. Investigation of HIV positive patients for toxoplasmosis using latex agglutination test. Serodiag Immunother Infect Dis. 1990;4:249-253. 19. Desmonts G, Remington JS. Direct agglutination test for diagnosis of Toxoplasma infection: methods for increasing sensitivity and specificity. J Clin Microbiol. 1980;11:562–568. 20. Beaman M H , McCabe RE ,Wong SY ,Remington JS.Toxoplasma gondii, Inc: Principles and practice of infectious diseases, Mandell GL, Bennet JE, Dolin R, eds, Churchill Livingstone Publ, 4th ed. 1995:pp2455-2475. 21. Statistical package for the social science advance statistic TM version 11.5 (2002). SPSS Inc, Chicago II. 22. Herwaldt BL. Laboratory–acquired parasitic infections from accidental exposure. Clin Microbiol Rev. 2001;14(4):659-688. 23. Renton JI, Boeie WR, King A, Irwin GS, Ong CS, Fung CP, Shkeir MO, Dubey JP. Detection of Toxoplasma gondii oocysts in drinking water. Appl Environ Micro 1998;64(6):2278-2280. 24. Marianna WMS, Ware DA, Juranek, DD. Serologic aspects of toxoplasmosis. J Am Vet Med Asso. 1990;196(2):277-280. 25. Frenkel JK. Toxoplasmosis. J Vet Med Asso. 1990;196(2):233-249. 26. Mazumder P, Chuang HY, Wentz MW, Wiedbrank DL. Latex agglutination test for detection of antibodies to Toxoplasma gondii. J Clin Microbiol. 1988;6:2444–2446. 27. Wilson M, Ware DA, Juranek DD. Serologic aspects of toxoplasmosis. J Am Vet Med Assoc. 1990;196(2):277–281. 28. Dubey JP, Beattie CP. Toxoplasmosis of animals and Man. Boca Raton, Florida: CRC Press; 1988. 29. Mayer HF, Marder G, Cadozo G, Meza ZD. Prevalence of toxoplasma antibodies in man and animals in Northeast Argentina. Vet Arg. 1987;4:889-893. 30. Dubey JP, Thulliez P, Romand S, Kwok OCH. Prevalence of Toxoplasma gondii in horses slaughtered for food in North America. Vet Parasitol. 1999;86:235-238. 31. Güçlü Z, Karaer Z, Babür C, Kiliç S. Investigation of Toxoplasma gondii antibodies in sport horses bred in Ankara Province. Türk Parazitol Derg. 2007;31(4):264-267. 32. Tassi P. Toxoplasma gondii Infection in horses. A review. Parassitologia. 2007;49(1-2):7-15. 33. Barriga OO. The immunity of parasitic infections. A hand book for physicians, veterinarians and biologists. University Park Press. Baltimore, USA. 1981:pp.72–84. 34. Plant JW, Freeman P, Saunders E. Serological survey of the prevalence of Toxoplasma gondii antibodies in rams in sheep flocks in New South Wales. Aust Vet J. 1982;59:87–89.
1. Rinaldi L, Scala A. Toxoplasmosis in livestock in Italy: an epidemiological update. Parassitologia. 2008;50(1-2):59- 61. 2. Dubey JP. Toxoplasma gondii.Vet Parasitol 2003;86:235-248. 3. Brito AF, Souza LC, Silva AV, Langoni H. Epidemiological and serological aspects in canine toxoplasmosis in animals with nervous symptoms. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2002;97(1):31-35. 4. Figueired J, Silva DA, Cabral D, Mineo. Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in goat indirect hamagglutination, immunoflurescence and immunoenzymatic tests in the region of Unberlandia, Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2001;96(5):687-692. 5. Dubey JP, Venturini MC, Venturini L, McKinney J, Pecoraro M. Prevalance of antibodies to Sarcocystis nurona, Toxoplasma gondii and Neospora caninum in horses from Argentina. Vet Parasitol. 1999;86:59-62. 6. Soulsby EJL. Helminths, arthropods and protozoa of domesticated animals. 7th ed. Bailliere Tindall, London 1982;670–681p. 7. El-Ghaysh A. Seroprevalance of Toxoplasma gondii in Egyptian donkeys using ELISA. Vet Parasitol 1998;80:71-73. 8. Elamin EA, Elias S, Daugschies A, Rommel M. Prevalence of Toxoplasma gondii antibodies in Pastoral Camels (Camelus dromedarius) in the Butana Plains, Mid-Eastern Sudan. Vet Parasitol. 1992;43:171-175. 9. Shaapan RM, Fathia Khalil AM. Evaluation of different Toxoplasma gondii isolates as antigens used in the modified agglutination test for the detection of toxoplasmosis in camels and donkeys. Amer Eurasian J Agric Environ Sci. 2008;3(6):837-841. 10. Inci A, Babur C, Aydin N, Cam Y. The investigation on the seroprevalence of Toxoplasma gondii (Nicolle ve Manceaux 1908) and Listeria monocytogenes in equids around Kayseri. FU Sağ Bil Derg. 2002;16:181-185. 11. Cui P, Fang S, Wu Z, Wu B. Epidemiological investigation of toxoplasmosis in farm animals of Hebei Province. Chinese J Vet Sci Tech. 2004;34(2):11-33.
دراسة مصلية لتشخيص داء. رويد غانم كوركيس ابلحد، السمعاني.١٢ كلية، رسالة ماجستير،المقوسات لالغنام واالنسان في محافظة نينوى .٢٠٠٠ العراق، جامعة الموصل،الطب البيطري دراسة مسحية عن تواجد اضداد مقوسات. احالم فتحي محمود، الطائي.١٣ ، في النعاج المجھضة في محافظة نينوىToxoplasma gondii كوندي .١٦-٩:(١)١٦؛٢٠٠٢ المجلة العراقية للعلوم البيطرية . أحالم فتحي، الطائي، رعد عبدالغني، السنجري، عقيل محمد، شريف.١٤ فيToxoplasma gondii دراسة مسحية عن تواجد اضداد مقوسات كوندي المجلة العراقية.األبقار واألغنام والماعز المجزورة محافظة نينوى .٦٠-٥٣ :١٨؛٢٠٠٤ للعلوم البيطرية
١١٥
Editor-in-Chief Prof. Dr. Fouad K. Mohammad (BVMS, MS, PhD) Editoria Secretary Dr. Nabeel A. Al-Hussary (BVMS, MSc, PhD) Executive Editorial Board Prof. Dr. Mohammed N. Al-Shahery (BVMS, DSc) Prof. Dr. Samih H. Arslan (BVMS, PhD) Prof. Dr. Fadwa K. Tawfeek (BVMS, MSc, PhD) Dr. Talal H. Hussein (BSc, MSc, PhD) Dr. Tariq S. Qubih (BVMS, MSc, PhD)
Vol. 25, No. 2, 2011
Iraqi Journal of Veterinary Sciences is printed and organized by: Prof. Dr. Muneer S. Al-Badrany Dr. D. M. Aziz Dr. M. O. Abdul-Majeed
Staff of the editorial office Dr. Heba Mohammed Jassem Dr. Zeena Tariq
Papers published in the Iraqi Journal of Veterinary Sciences are available online as pdf files at http://www.vetmedmosul.org/ijvs and http://iraqivetscience.org
Iraqi Journal of Veterinary Sciences (Iraqi J. Vet. Sci.) ISSN 1607-3894 (Print), ISSN 2071-1255 (Online)
Instructions to Authors Aims and scope Iraqi J. Vet. Sci. is a national, scientific and refereed journal published by the College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq. It publishes in Arabic or English original and distinguished research papers, short communications, research notes, case reports and reviews in all aspects of veterinary sciences. General Manuscript shall be considered for publication only with the understanding that they are neither under concurrent consideration by any journal nor have been published elsewhere. Manuscripts are subjected to peer review for their scientific merit. Accepted manuscripts will become the property of Iraqi J. Vet. Sci. The journal is published two times a year. It is indexed/abstracted by CABI Publishing, U.K. in Index Veterinarius and Veterinary Bulletin, Directory of Open Access Journals, EBSCOâ&#x20AC;&#x2122;S Library Products, HINARI (WHO) and SCOPUS. Manuscript submission Manuscripts must be submitted by one of the authors designated as the corresponding author who has the full approval of the co-authors for handling the manuscript during submission, peer review and corrections. Submit the original and two copies of each manuscript to: Editorial Secretary, Iraqi J. Vet. Sci., College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq. In addition to the printed form, the final copy of the manuscript should be provided on a CD. We prefer submission of manuscripts by e-mail attachments sent to: iraqijvetsci@yahoo.com or by online submission at http://iraqivetscience.org. Manuscript preparation Manuscript should be computer typed in Microsoft Word using a 12-point Times New Roman font, single-spaced throughout the text, including figure legends, tables and references. Use A4 paper for typing. The typed area should be 15 cm width x 24 cm height. All pages, including the title page, must be numbered. General instructions on how to prepare a manuscript are given in the Uniform Requirements for Manuscripts Submitted to Biomedical Journals issued by the International Committee of Medical Journal Editors (http://www.icmje.org). The manuscript, subdivided by one-line space between headings, should be organized as follows: Title page The first page of the manuscript includes the title (capitalize only the first letter) of the article, followed by one-line space and the names of all authors (no degrees) and their addresses for correspondence, including the e-mail address of the corresponding author. The first letter of each name and main word should be capitalized. The title, author's name and affiliation should be centered on the width of the typing area. Abstract The second page contains the abstract which should be 150-200 words in single paragraph and presents the main findings. For indexing purposes, a list of 3â&#x20AC;&#x201C;5 key words in English and not included in the title should be typed below the abstract. An Arabic abstract is required for papers written in English. It should follow the English abstract.
Introduction Describes briefly the background of the investigation with updated information and states the aim of the study. Materials and Methods Provide sufficient details to enable the experiments to be reproduced. Support the techniques and methods used with references. Investigations on animals must comply with institutional and/or equivalent guides for the care and use of animals. Metric and standard international units should be used in this section and throughout the manuscript. Specify the computer software used for statistical analysis and define statistical terms, abbreviations, and symbols applied. Results Present the results and their significance clearly. Graphs and tables should be self explanatory. Do not repeat in figures or in the text the data presented in tables. Tables and figures should be numbered by Arabic numbers in the order of their mention in the text. Discussion Deals with critical review and interpretations of the results, and supported by relevant updated references. Repetition of data should be avoided. It should end with brief conclusions. In Short Communications, Results and Discussion may be combined. Acknowledgements Include the sponsor, funding agency, provider of major facilities and the names of those who contributed substantially to the work but do not fulfill the requirements for the authorship. References References to literature should be numbered (in brackets) consecutively in the text in the order in which they are first mentioned, and listed at the end of the manuscript. Titles of journals should be abbreviated according to the List of Journals Indexed for MEDLINE (ftp://nlmpubs.nlm.nih.gov/online/journals/ljiweb.pdf). Personal communications or unpublished data should be mentioned in the text, but not included in the list of references. Examples Journal article: Bingham CM, Wilson PR, Davies AS. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and estimation of fetal age in farmed red deer. Vet Rec. 1990;126:102-106. Book: Wanamaker BP, Pettes CL. Applied pharmacology for the veterinary technician. 1st ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1996. 372 p. Chapter in a book: Chabala JC, Miller MW. Chemistry of antiprotozoal agents. In: Campbell WC, Rew RS, editors. Chemotherapy of parasitic diseases. New York: Plenum Press; 1986. p. 25-85.
Dissertation: Zhao C. Development of nanoelectrospray and application to protein research and drug discovery [dissertation]. Buffalo (NY): State University of New York at Buffalo; 2005. 276 p. Master's thesis: Roguskie JM. The role of Pseudomonas aeruginosa 1244 pilin glycan in virulence [master's thesis]. Pittsburgh (PA): Duquesne University; 2005. 111 p. Journal article on the Internet: Polgreen PM, Diekema DJ, Vandeberg J, et al. Risk factors for groin wound infection after femoral artery catheterization: a case-control study. Infect Control Hosp Epidemiol [Internet]. 2006 Jan [cited 2007 Jan 5];27(1):34-7. Available from: http://www.journals.uchicago.edu/ICHE/journal/issues/v27n1/2004069/2004069.web.pdf Internet Webpage: AMA: helping doctors help patients [Internet]. Chicago: American Medical Association; c1995-2007 [cited 2007 Feb 22]. Available from: http://www.ama-assn.org/. Publication cost Manuscripts are only accepted after payment of the publication cost by the author(s) whose name(s) appear in the paper. The current publication cost of a regular research paper is 50000 I.D. payable to the Iraqi J. Vet. Sci., College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul , Iraq. Papers published in the Iraqi Journal of Veterinary Sciences are available online as pdf files at http://www.vetmedmosul.org/ijvs and http://iraqivetscience.org.
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011
Contents Research articles Detection of Cryptosporidium and Giardia doudenalis in equines in Nineveh, Iraq E. T. Butty
Page 43
Effect of nitrate poisoning on some biochemical parameters in rats O. H. Azeez, M. B. Mahmood and J. S. Hassan
47
Vaginal cytology, vaginoscopy and progesterone profile: breeding tools in bitches K. C. S. Reddy, K. G. S. Raju, K. S. Rao and K. B. R. Rao
51
Electron microscopic study of ileum of mice infected experimentally with Salmonella hadar A. A. Yousif and M. M. N. Al-Naqeeb
55
Effect of laser treatment on thyroid gland hormones in female rabbits N. S. Al-Mustawfi1, T. S. Al- Azawi and I. F. R. Mohammed
61
Effect of omentum graft on esophageal anastomosis in dogs A. K. Mahdi
65
Treatment of hyper-granulated limb wounds in horses O. A. Bader and M. J. Eesa
71
Effect of lysate of Sarcocystis gigantea in rats N. S. Al-Hyali, E. R. Kennany and A. F. Al-Taei
81
Fate of macrosarcocyst of Sarcocystis gigantea in sheep N. S. Al-Hyali, E. R. Kennany and L.Y. Khalil
87
Isolation and identification of bacteria causing arthritis in chickens B. Y. Rasheed
93
Misoprostol treatment of dystocia due to incomplete dilatation of the cervix in a cow: a case report O. I. Azawi, U. T. Naoman, Z. M. Al-Kass, E. H. Lazim and N. G. Fathi
97
Announcements Announcements from the Iraqi Journal of Veterinary Sciences
99
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (43-46)
Detection of Cryptosporidium and Giardia doudenalis in equines in Nineveh, Iraq E. T. Butty Department of Microbiology, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq (Received June 29, 2010; Accepted March 28, 2011) Abstract A total of 107 fecal samples of equines from different regions in Nineveh, were colleted from January 2007 till December 2007 and examined for Cryptosporidium sp., and Giardia doudenalis by using different methods (wet mount, flotation, lugol's iodine, modified Ziehl Nelsecn (hot) and Giemsa stain Just for Giardia doudenalis. The animal age examined ranged from 4 to 10 years. The total prevalence of cryptosporidium sp. was 27.10% (29 out of 107), while the prevalence of Giardia doudenalis was 19.63% (21 out of 107). This study represents the first trial to explore cryptosporidiosis, giardiasis in equines as in Nineveh there is no survey of these intestinal protozoa. Keywords: Cryptosporidium sp.; Giardia doudenalis; Intestinal protozoa. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
العراق،كشف لطفيلي البويغات الخبيئة والجيارديا في الخيول في نينوى انتصار توما بطي العراق، الموصل، جامعة الموصل، كلية الطب البيطري،فرع األحياء المجھرية الخالصة ال ى ك انون األول٢٠٠٧ ( عينة براز من الفصيلة الخيلية من مناطق مختلفة من محافظة نينوى للفترة من كانون الثاني١٠٧) تم جمع ، طريق ة التطوي ف، )الم سحة الرطب ة: وذلك للتحري عن وجود كال من طفيلي االبواغ الخبيئ ة والجياردي ا باس تخدام ط رق مختلف ة٢٠٠٧ تراوح ت أعم ار الحيوان ات. وص بغة كمي زا لتوض يح طفيل ي الجياردي ا،( وال صبغة ال صامدة للح امض المح ورة )الح ارة،صبغة االيودين ( بينم ا بلغ ت ن سبة١٠٧ من٢٩) %٢٧,١٠ بلغت نسبة اإلصابة الكلية لطفيلي االبواغ الخبيئة. سنوات١٠ سنوات الى٤ المفحوصة من تناول ت الدراس ة أھمي ة اإلص ابة بك ال الطفيلي ين ف ي الف صيلة الخيلي ة وتعتب ر.(١٠٧ من٢١) %١٩,٦٣ اإلصابة الكلية لطفيلي الجيارديا .أول محاولة للتحري عن ھذين الطفيليين المعويين في الخيول Albakry (4) in goats capra hircus in Nineveh governorate in lambs (ovis aries) by khalil (5), while in horses Equus caballus there is no study that deals with this parasite, in comparison to data for bovine and human cryptosporidial infection. There is a few information concerning equine cryptosporidiosis, although this disease has been reported in various regions of the world, which is connected with diarrhoea in foals (6,7). Furthermore, there is an important role of equine Cryptosporidium infection as a source of zoonotic disease
Introduction Cryptosporidium parvum and Giardia doudenalis are recognized as primary enteric pathogens in animals and human (1). The severity of enteric disease by either of these parasites ranged from self- limiting to a fulminating diarrhoea. These parasites can be transmitted by ingestion of contaminated food or water (2). Numerous studies have been carried out in our locality concerning Cryptosporidium sp., in farm animals, Baker recorded the infection with cryptosporidiosis in calves (3),
43
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (43-46)
infection of Cryptosporidium was (10.0%) in February. No significant difference in the rate of infection between the months of the year was found. Also the highest rate Giardia infection was found in March (45.45%), and the lower rate in January and July (0.0%). There was no significant difference in the infection rate between the months of the year for Cryptosporidium and Giardia. Table (2) shows the distribution regarding to age group, the highest rate of infection was found among 5-6 years (34.38%), followed by the group of 0 < 4 years (31.58%) and (27.59%) in group 7-8 years old, and the lowest rate of infection among the group of 9-10 years old was (14.81%).
(8). Some animals may carry Giardia organisms and animals appear healthy with no signs of disease, such hosts have a high potential rate for spreading the parasite. Infected animals can develop bloody diarrhoea or mucous stool often accompanied by gas production (9). The first occurrence of Giardia sp., was reported in horses in the Czech Republic by (10). Therefore these study deals with those intestinal protozoa (Cryptosporidium sp., and Giardia sp.) in horses it is considered the first trial in our locality in equine family. The aim of this study was to investigate the prevalence of cryptosporidiosis and giardiasis in horses suffering from diarrhoea and those healthy, and also to determine the possible correlation between cryptosporidium and other parasite producing diarrhoea mainly Giardia in horses in Nineveh governorate.
Table 1: Distribution of Cryptosporidium sp., and Giardia doudenalis according to the months of the year.
Materials and methods months of No. of the year samples
The study was carried out through a period of 12 months from January 2007 to December 2007. Atotal of 107 faecel samples of horse taken from both sex of equines family were collected from different regions in Nineveh governorate, samples were stored in clean plastic container covered with 2.5% potassium dichromate solution of preservation. Samples were tightly closed and stored at 4 â&#x2014;&#x152;Ů&#x2019; C till examination. The following methods were used for detection of Cryptosporidium oocysts and Giardia cysts in faeces samples were stained with the following: wet mount (lugol's Iodine 1% and 5%) (11), and sheather's flotation technique were used for primary diagnosis of oocyst and cyst. Modified Ziehl- Nelseen stain (hot method) for further investigation for cryptosporidium oocysts (12). Giemsa stain was used for distinguishing Giardia cyst (13). The oocysts of cryptosporidium and cyst of Giardia were measured and identified as described by (5,14). Chi-square X2, Fisher test F were used to compare the frequencies of positive and negative specimens (15).
January February March April May June July August September October November December Total P
7 10 11 9 13 12 4 5 8 7 8 13 107
Cryptosporidium Giardia +ve +ve % % samples samples 1 14.29 0 0.0 1 10 2 20.0 4 36.36 5 545.45 5 55.56 3 33.33 3 23.08 1 7.69 3 25.0 2 16.67 1 25.0 0 0.0 1 20.0 1 20 4 50.0 2 25.0 3 42.86 2 28.57 1 12.5 2 25.0 2 15.38 1 7.69 29 27.10 21 19.63 No significant No significant
Table 2: Distribution of Cryptosporidium sp., and Giardia doudenalis according to the age.
Results
Age / year
Twenty nine positive samples out of 107 (27.10%) for cryptosporidium infection, and 19.63% for Giardia infection. The percentage of infection with Cryptosporidium 27.10%, and 19.63% with Giardia among the total examined specimens. Although Cryptosporidium sp., and Giardia doudenalis were detected through out the year, table (1) shows, the highest rate of Cryptosporidium infection was found in April (55.56%), followed by September (50.0%), then October (42.86%), March (36.36%), (25%) in June, July, May (23.08%), December (15.38%), August (20.0%), January (14.29%) (12.5%) in November and lowest rate of
0<4 5-6 7-8 9-10 Total P
No. of samples 19 32 29 27 107
Cryptosporidium Giardia +ve +ve % % samples samples 6 31.58 3 15.79 11 34.38 5 15.63 8 27.59 7 24.13 4 14.81 6 22.22 29 27.10 21 19.63 No significant No significant
Statistical analysis shows no significant difference between age groups, for Cryptosporidium, while in Giardia doudenalis the rate of infection among age groups were high at 7-8 (24.13%) was followed by 9-10 years old group (22.22%) then the rate of infection among 0 < 4 age group
44
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (43-46)
Equine cryptosporidiosis was previously reported in other parts of the world and it is believed that is neither associated with the age of the horses nor with mode of life (16-19). In Iraq there are many studies which were conducted in different host such as calves, lambs, dogs, cats and rabbits with recorded different percentages of infection with Cryptosporidium spp. and Giardia spp. (3,5,20,21). While in equines we have no studies in our locality that deals with these parasites. In this study the percentage of infection with Cryptosporidium was 27.10%, this result was agreement with other studies which were occurred in different countries such as Germany, Poland, Texas, Colorado, USA and Louisiana and these studies were recorded different percentage of infection ranged from 0.33_100%(22-29) according to the months of the year, there was a variation in the infection rate of Cryptosporidium (10-55.56%) and no significant differences between months of the year, these result were agreement with (3,30-32). The differences in the percentage of infection in the months may be related to different factors such as number of samples, environmental condition, age, sex, immunity status, stress factor…etc. The age distribution among equines in this area covered by this study is relatively even, rang from one to 10 years old in our study over all rate of cryptosporidial infection. According to the age, infection was high in the 5-6 years age group which is higher than those reported by (33) who reported (3.2%) in horses ranging from one to12 years only, and (13.9%) of horses aged 5> years. In Morocco (34-36) few donkeys with old age over 12 years were infected, the reasons behind this are numerous such as type of life either feral or domestic, or immunity status, or in the sampling which is mostly taken from adult animals, or due to the unsuitable hygienic. Those infected horses with Cryptosporidium could be significant source of the parasite, both for other animals including human and for the environment, in addition horse faeces that used for soil fertilization also enhanced the like hood of contamination of food and water sheds. In this study the percentage of infection with Giardia doudenalis was19.63% this result was agreement with Kashash (20). Which recorded the infection rate in Baghdad was14.6 % also this result was agreement with other studies occurred in different parts of the world (10,37), while (18) was recorded percentage of infection with Giardia 4.6%, 5% in horses respectively. According to the age high percentage of infection in age 2-4 years 5% in the same region. While in racing horses two up to four years of age from two studies in the surrounding of Prague Giardia cysts were found in seven horses (35%) out of a total 20 animals (38, 39). Diaz (40) was reported high percentage of infection appears in several ages, while Kashash, Olsen, Wade
was (15.79%) and the lowest rate of infection among 5-6 age group was (15.63%) no significant difference between age group for Giardia. Ocular micrometer calibrated lens was used for measuring the oocyst of Cryptosporidium sp., the results revealed that the average of measurement of oocyst was 4.9-6.2 µm which were diagnosed by sugar flotation method and modified Ziehl-Nelseen method the oocysts appears as bright rose - pink (Fig. 1). Cysts of Giardia doudenalis were measured, the average of cysts were 10-11 µm × 8-9 µm, best detected in feces concentrated by sugar flotation method with specific gravity (1.18) (Fig. 2).
Fig. 1: Cryptosporidium sp., oocyst by using modified Ziehl-Nelseen method (counter stain methylene blue). x1200.
Fig. 2: Giardia doudenalis cyst by using Giemsa stain. x1000. Discussion This is the first report of cryptosporidial infection in equines in Nineveh governorate. The infection was identified in 29 out of 107 animals from different regions in Nineveh.
45
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (43-46)
20. Kshash KH, Mohammed TA. Clinical and Epidemiological study if Giardiasis in Cow in Baghdad. Bas J Vet Res.2006;5(1): 54-64. 21. Suleiman EG. Diagnostic study of some intestinal protozoa in domestic rabbits in Mosul area. Iraqi J Vet Med.2005;19(2):123-133. 22. Beelitz P, Göbel E, Gothe R. Artenspcktum und befallhä afigkeitvon endo- parasiten beifohlen und ihren Mutter stuten aus Zuchtbetrieben mit und ohne antihelmin–thika–prophylaxe in Oberbayern Tierär–ztt Prax.1996;(24):48-54. 23. Cole DJ, Cohen ND, Snowden K, Smith R. Prevalence of and risk factor for fecal shedding of Cryptosporidium parvum oocysts in horse. JAMA Vet Med Assoc.1998;231,1296-1302. 24. Forde KN, Swinke AM, Traub- Dargatz JL, Cheney JM. The prevalence of Cryptosporidium/ Giardia in trail horse population utilizing public lands in Colorado. J Equine Vet Sci.1998;18:38-40. 25. Majewsk AC, Kasprzak W, Werner A. Prevalence of Cryptosporidium in mammals housed in Poznan zoologicd garden, Poland. Acta Parasitol.1997;42:195-198. 26. Snyder SP, England JJ, Mcchesney AE. Cryptosporidiosis in immuno de ficient Arabian foals. Vet Pathol.1978;15:12-17. 27. Coleman Su, klei TR, French DD, Chapman MR, Corstret RE. Prevalence of Cryptosporidium sp. In equids in Louisiana. Am J Vet Res.1989;50:575-577. 28. Xiao L, Herd RP. Epidemiology of equine Cryptosporidium and Giardia in fections.Equine Vet J.1994;26:14-17. 29. Olson ME, Thorlakosn CL, Desellier SL, Morck DW, Mc Alliste TA. Giardia and Cryptosporidium in Canadian farm animals. Vet. Parasitol.1997;68:375-381. 30. Lefay D, Naciri, M, Doirier P, Chemette R. Prevalence of Cryptosporidium in calves on France. Vet Parasitol.2000;89:1-9. 31. Wade SE, Mohammed HO, Schaaf SL. Prevalence od Giardia sp., Cryptosporidium parvum and Cryptosporidium muris (C. adnersoni) in 109 dairy herds in five countries of South Eastern. New York. Vet Parasitol.2000;93(1):1-11. 32. Clavel A, Olivares JL, Fleta JC, Castillo J, Varea M, Ramos FJ, Arnal AC, Guilez J. Seasonality of cryptosporidiosis in children. Eur J Clin Microbial Infect Dis.1996;15:77-79. 33. Tavassoli M, Sodagar_ Skandarabadi M, Soltanalineejad F. A survey on Cryptosporidial infection in horse in Urmia area, northwestern Iran. Iranian J Vet Res. 2007; 8: 86-90. 34. Pearson RA, Russat M. Estimation of the liver weight and body condition of working donkey in Morocco. Vet Rec.1996;138:229-233. 35. WallaeeA. A assessing the efficacy of an antihelmintic programme on the health and welfare of working equines in Morocco. Research project for the society for the protection of animals a broad (SPANA) University of Liver pool.2003. 36. Svendsen ED. Work to improve the condition of donkeys and mules world wide. In :fielding, Dant P pearson, RA (eds), donkeys and mules and tropical agricultural development 9th eds. TVM Edinburgh.1991; 181-184. 37. Johnson E, Atwill ER, Fikins ME, Kalush J. The prevalence of shedding of Cryptosporidium and Giardia sp., based on a single fecal sample collection form each of 19 horses used for back country reaction. J Vet Diagn Invest.1997;9:56-60. 38. De Souza DNB, TCB Bomfim, F Huber LCS Abboud, RS Gomes.Natural in fection by Cryptosporidium sp. Giardia sp. Eimeria leukart in three groups of equines different handlings in Rio De janerio, Brazil. Vet Parasitol.2009;160:3-4. 39. Atwiller NK, Mc Dougald, Perea L. Cross sectional study of fecal shedding of Giardia sp. and Cryptosporidium parvum among packstocle in the Sierra Nevada Range, California USA.Equine Vet J. 2000;32:247-252. 40. DiazV, Compous M, Lozano, Manas I and Gonzales J. Aspects of animal Giardiasis in Granada province (South Spain). Vet Parasitol. 1996;64(3):171-176.
(20,29,31) showed that the infection of Giardia may occurred in all ages. This is study reports for the first time the occurrence of Giardia sp., in equines of the Nineveh. Acknowledgements I thank College of Veterinary Medicine, University of Mosul for the financial support of this study. References 1. Xiao L, Herd RP. Epidemiology of equine Cryptosporidium and Giardia infection. Equine Vet J.1994;26:1. 2. Lecherallier MW, Norton WD, Leek G. Giardia and cryptosporidium sp., in surface water. App Environ Microbiol.1991;57:2610-2616. 3. Baker MH. The study of epidemiology experimental immunity and transmission for cryptosporidiosis in Nineveh governorate. [dissertation]: College of Veterinary Medicine, University of Mosul; 2005. 4. Al-Bakray HS. Parasitic protozoa Eimeria and Cryptosporidium in goats Nineveh province. [master's thesis]: College of Veterinary Medicine, University of Mosul; 2002. 5. Khalil, LY. Comparsion of efficacy of diagnostic tests cryptosporidiosis in lambs and children in Nineveh governorate. [master's thesis]: College of Veterinary Medicine, University of Mosul; 2000. 6. Fayer R, Speer CA, Dubey Jp. The general biology of cryptosporidium: In: fay er (ed): Cryptosporidium and cryptosporidiosis, 1-14 CRC press, Boca Raton.1997;lTP. 7. Coleman Su, klei TR, French DD, Chapmann MR, Corstret RE. Prevalence of Cryptosporidium in equine in Louisiana. Am J vet Res. 1989;50,575-577. 8. Da Voodi, Yand Noor M. The horse source of cryptosporidial infection for human.4th National congress of zoonoses in Iran.Tehran, Iran.2000;40. 9. Olson ME, Thorlakson CL, Deselliers LM. TA. Giardia and Cryptosporidium in Canadian farm animals.Vet parasites.1997;68: 375-381. 10. Pavlasek I, Hessl, Stchlik I, Stikav. The first detection of Giardia sp. in horse in the Czech Republic. Vet Med (praha). Mar.1996;40(3):816. 11. WHO. Basic laboratory method in medical parasitology. Geneva, 1991;9-31. 12. Henriksen SV, Pohlenz JFL. Staining of Cryptosporidia by a modified Ziehl_Nelseen technique. Acta Vet Scand.1981;22:594_569 13. Ortega YR, Adam, RD. Giardia: over view and update. Clin Inf Dis. 1997;25:545. 14. Deluol AM. Color atlas of parasitology. Format Utile, Varia, 1999: 3463. 15. Bruning LJ, Kintz Bl. Computational hand book statistics. 2nd ed. Scott Foresman and Company England.1977;233-237. 16. Reimeyer CR, Kline RC, Stauffer GD. Absence of Cryptosporidium oocycts in feces of neonatal foals. Equine Vet J.1984;16:217-218. 17. Abou Eisha AM. Cryptosporidium infection in man and farm animals in Ismailia governorate. Vet Med J Giza.1994;42:107-108. 18. Johnson E, Atwill ER, Filkins ME, Kalush J. The prevalence of shedding of Cryptosporidium and Giardia sp., based on a single fecal sample collection from each of 91 horse used for back country reaction. J Vet Diagen Invest.1997;(9):56-60. 19. Bray RE, Wickler SJ, Cogger EA, Atwill ER, London C, Gallino JL, An derson TP. Endo parasite infection and Cryptosporidium/ Giardia in feral horses on public lands. J Equine Vet Sci.1998;18:41-43.
46
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (47-50)
Effect of nitrate poisoning on some biochemical parameters in rats O. H. Azeez1, M. B. Mahmood2 and J. S. Hassan1 1
Department of Veterinary Public Health, 2Department of Veterinary Internal Medicine and Surgery, College of Veterinary Medicine, University of Dohuk, Dohuk, Iraq (Received September 29, 2010; Accepted March 28, 2011)
Abstract The present study was conducted to investigate the toxicity of potassium nitrate on glucose, cholesterol, alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), and the possible ameliorative effect of ascorbic acid (Vitamin C). Male Wister rats are used as experimental model divided into three groups (each of 6-8 rats) and treated for six weeks as follows: Group 1: served as control; Group 2: received 2 % potassium nitrate added to the forage and Group 3: received 2 % potassium nitrate together with 1 % ascorbic acid added to rat's forage. Nitrate treatment in group 2 leads to high significant increase levels of glucose in 3rd, 4th, and 5th weeks, cholesterol level increased significantly in both 4th and 5th weeks, while ALT levels increased in the 4th, 5th and 6th weeks, and AST increased significantly in the 5th and 6th weeks. Addition of ascorbic acid with potassium nitrate, lead to reverse all the parameters nearly to normal. It was concluded that potassium nitrate causes significant toxic effect on some biochemical parameters which was ameliorated by ascorbic acid. Keywords: Nitrate toxicity; Ascorbic acid; Biochemical parameters. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
تأثير التسمم بالنترات في بعض القيم الكيموحيوية في الجرذان ١
و جيان سالم حسن٢ محمود بشير محمود،١عمر حسن عزيز ٢
العراق، دھوك، جامعة دھوك، كلية الطب البيطري، فرع الطب الباطني والجراحة البيطرية،فرع الصحة العامة البيطرية
١
الخالصة ،AST خمي رة،ALT خمي رة، الكول سترول،صممت تجارب ھ ذه الدراس ة الختب ار الت أثير ال سمي لنت رات البوتاس يوم عل ى الكلوك وز تجريبي ا ً حي ث ق سمتWister استخدمت ذكور ج رذان م ن ن وع.C ودراسة أمكانية تقليل ھذه التأثيرات السمية من خالل استخدام فيتامين أضيف: المجموعة الثانية، تركت دون معاملة وعدت مجموعة سيطرة: المجموعة األولى:( جرذان لكل مجموعة٨-٦) إلى ثالث مجاميع أظھ رت. إل ى العل فC م ن فيت امين% ١ نت رات البوتاس يوم م ع%٢ أض يف: المجموعة الثالث ة، من نترات البوتاسيوم إلى العلف%٢ وزي ادة معنوي ة ف ي تركي ز،النتائج أن نترات البوتاسيوم أحدثت زيادة معنوية في تركيز الكلوك وز ف ي األس ابيع الثال ث والراب ع والخ امس ف يAST وخمي رة، في األسابيع الراب ع والخ امس وال سادسALT بينما ازداد تركيز خميرة،الكولسترول في األسبوعين الرابع والخامس إلى العلف المضاف له نترات البوتاسيوم لم تظھر أي ت أثيرات معنوي ة وع ادت ك لC وعند إضافة فيتامين.األسبوعين الخامس والسادس أوضحت نت ائج الدراس ة الحالي ة إل ى أن نت رات البوتاس يوم أح دثت ت أثيرات س مية م ن خ الل تغي ر.القيم إلى مستويات قريبة من الطبيعية .C بعض القيم الكيموحيوية والتي تحسنت من خالل إضافة فيتامين fold more toxic than nitrate. In human nitrate is reduced to nitrite before ingestion in saliva and in the gastrointestinal tract (3,2). In ruminants such as cattle, sheep, and goat, the conversion of nitrate to nitrite is carried out by rumen bacteria (4).
Introduction Nitrate poisoning has been recorded in several studies (1) and it can occur in all animals (2). Nitrate themselves are not very toxic but nitrite which they converted to are ten
47
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (47-50)
Nitrate poisoning affect several biochemical parameters. A previous study indicates that nitrate poisoning cause decreased levels of glucose and alkaline phosphatase in sheep (5), while in study of (6) in sheep reported an increase in ALT, AST, AP. and glucose. Also (7) reported that an increase in levels of glucose, cholesterol, creatinine, lactate dehydrogenase, AST, and ALT in rats. Vitamin C (Ascorbic acid) are known to be potent antioxidant (8,9), and may augment the function of endogenous free radical scavengers. The objective of this study was to investigate the nitrate poisoning by potassium nitrate on some biochemical parameters in rats as experimental model, and the effect of ascorbic acid when used with nitrate.
(Vitamin C) 1% (11) were added to the same forage. All treatments were for 6 weeks. Blood samples were collected every week from the orbital plexus of vein into clear dry centrifuge tubes, allowed to clot; serum was separated after centrifugation at 1500 rpm for 15 minute (12). Serum Glucose, cholesterol, ALT, and AST levels were measured using colorimetric assay kits (Bicon Diagnostic GmbH Burbach, Germany). All data analyzed by one way analysis of variance, the specific group differences were determined using Duncan multiple range test; the accepted level of significance was P<0.05 (13).
Materials and methods
After 6 weeks of experiment potassium nitrate 2 % given to rat’s forage lead to significantly increases in levels of glucose in 3rd, 4th, 5th weeks (Table 1), cholesterol levels was increased in both 4th, and 5th weeks (Table 2). While levels of ALT increased in 4th, 5th, 6th weeks (Table 3), and AST levels increased significantly in 5th, 6th weeks (Table 4). When we add ascorbic acid at a dose 1 % to the diet containing nitrate 2 %, all parameters reverse nearly to the normal when compared with control, so there are no significant increase in all parameters (Tables 1-4).
Results
Male Wister rats age 3-4 months and 210-275 gm of body weight were housed in hanging cages and maintained under laboratory controlled of temperature (25 ± 2) and light (14 hour light and 10 hour dark), palleted food as concentrated forage and tap water were given. The animals divided into 3 groups each of 6-8 rats. Group 1: left as control group; Group 2: Potassium nitrate (KNO3) (Gerhard Bochman Tuttingreen, Germany) 2% (10) were added to the concentrated forage; Group 3: Coadminstration of Potassium nitrate 2% and ascorbic acid
Table 1: Effect of Nitrate poisoning alone and with ascorbic acid on glucose level (mg/dl). weeks 0 1 2 3 4 5 D D D D D D Control 91.07 ± 2.14 93.81 ± 3.58 90.16 ± 2.76 93.14 ± 3.19 92.88 ± 2.01 96.81 ± 3.76 D CD AB A ABC D KNO3 2 % 94.51 ± 3.73 94.03 ± 5.02 99.53 ± 2.4 111.94 ± 2.07 116.59 ± 7.52 109.28 ± 6.08 CD D CD D D D KNO3 2 % + Vit. C 1 % 95.47 ± 3.54 96.61 ± 4.20 93.81 ± 5.11 98.25 ± 2.92 96.22 ± 2.44 97.84 ± 2.49 Value is expressed as means ± SEM of 6-8 rats/ group. Different letters indicate significant differences between groups horizontally and vertically at P<0.05. Groups
6 D 92.11 ± 1.85 BCD 102.58 ± 5.11 D 94.50 ± 4.78
Table 2: Effect of Nitrate poisoning alone and with ascorbic acid on Cholesterol level (mg/dl). weeks 0 1 2 3 4 5 6 D CD CD CD CD CD D Control 138.48 ± 6.31 134.46 ± 8.15 140.61 ± 9.22 142.19 ± 4.39 139.86 ± 2.98 144.58 ± 5.20 141.21 ± 4.74 CD CD ABCD ABC A AB BCD KNO3 2 % 141.83 ± 6.58 145.73 ± 3.46 153.94 ± 7.62 158.7 ± 7.77 170.75 ± 5.13 168.68 ± 3.55 151.16 ± 6.15 D CD CD CD D D D KNO3 2%+ Vit. C 1 % 136.36 ± 8.62 134.84 ± 5.41 141.21 ± 4.74 143.72 ± 4.84 139.82 ± 3.80 137.34 ± 7.10 134.63 ± 3.27 Value is expressed as means ± SEM of 6-8 rats/ group. Different letters indicate significant differences between groups horizontally and vertically at P<0.05. Groups
48
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (47-50)
Table 3: Effect of Nitrate poisoning on ALT level (IU/L). weeks 0 1 2 3 4 5 D D D D D D Control 19.04 ± 0.90 19.02 ± 1.38 19.82 ± 1.43 20.63 ± 0.97 20.15 ± 1.28 20.16 ± 1.14 D D BC A A D KNO3 2 % 20.67 ± 0.87 20.25 ± 1.20 19.50 ± 1.33 23.20 ± 2.49 30.74 ± 3.13 31.23 ± 2.43 D BC BC BC BC BC KNO3 2%+ Vit. C 1 % 22.15 ± 4.01 19.48 ± 3.4 21.96 ± 3.08 23.53 ± 2.66 23.94 ± 5.79 24.36 ± 2.88 Value is expressed as means ± SEM of 6-8 rats/ group. Different letters indicate significant differences between groups horizontally and vertically at P<0.05. Groups
6 D 19.29 ± 1.35 AB 26.78 ± 1.92 BC 22.83 ± 2.67
Table 4: Effect of Nitrate poisoning on AST level (IU/L). weeks 0 1 2 3 4 5 B B B B B B Control 80.74 ± 2.53 85.09 ± 3.24 82.23 ± 2.44 82.74 ± 1.92 84.30 ± 1.90 83.36 ± 2.98 B B B B A B KNO3 2 % 79.86 ± 2.70 78.44 ± 2.18 79.59 ± 2.50 84.61 ± 3.83 89.24 ± 1.76 99.64 ± 2.97 B B B B B B KNO3 2%+ Vit. C 1 % 82.22 ± 4.01 85.36 ± 3.40 86.48 ± 3.05 84.32 ± 2.66 84.62 ± 5.74 87.11 ± 2.88 Value is expressed as means ± SEM of 6-8 rats/ group. Different letters indicate significant differences between groups horizontally and vertically at P<0.05. Groups
6 B 82.38 ± 4.03 A 101.10 ± 3.76 B 85.14 ± 2.67
parameters levels and returns nearly to normal levels. The results of this study agree with those of (19) in catfish, and (20) in humans. One of the established mechanisms of toxicity of nitrate is their ability to induce oxidative stress through the generation of free radicals (21,22). Vit. C is known to be potent antioxidant (8,9), thus its administration may augment the function of endogenous free radicals scavengers, decrease the deleterious effects of nitrates on body cells (23). In conclusion, the results obtained from our study that toxic effects of potassium nitrate on some biochemical parameters were significant ameliorative effect by Vit. C by returning this parameters back to nearly to normal.
Discussion Significant increase in glucose level was observed at 3rd, 4 and 5th weeks in rat feeding at diet containing 2% of KNO3, these results are consistent with those of the previous study of (7) in rats and human, and (14) in rats, but our result don't agree with the results of (5) in sheep. This may be due to stimulation of the rate of gluconeogenesis (14). ALT and AST levels increased significantly in 4th, 5th, th 6 and 5th, 6th, weeks respectively, similar result reported by (6) that reported increases in all parameters during 5th weeks of nitrate treatments. The table 2 showed that cholesterol levels increases significantly in 4th, and 5th weeks of nitrate poisoning. All the changes of glucose, ALT, AST and cholesterol levels can be due to that liver is the major organ that affected directly by nitrate, also the pathologic changes and furetimal state of liver play a major role in prognosis of nitrate poisoning in animals (1,15). Also liver plays an active important role in the metabolism of cholesterol, and an increase level of cholesterol and other parameters in state of poisoning (16,17). Nitrate cause hypoxia (6) lead to increase of activity of ALT, because hypoxia cause hepatocellular injury (18). In our study Vit. C administration to KNO3-treatrd rats produced no significant changes in all biochemical th
References 1. Muslih NJ. Clinico-electrophonocardiogeraphical and immunobiological changes in nitrate-nitrite toxicosis in sheep with and without treatment. (PhD thesis). Stavropol USSR 1991. 2. Jan A, Diane B, Andrew C, Jean-Pierre C, Eugenia D, Alessandro D D, Maria LF, Peter F, Johanna FG, Corrado L G, Philippe G, Jadwiga G, Gerhard H, Niklas J, Antonio M, Josef S, Rolaf V L, Carlos Van P, Philippe V. Nitrite as undesirable substances in animal feed. The EFSA Journal.2009;1017:1-47. 3. Kyriakidis NB, Tarantili-Georgiou K, Tsani-Batzaka E. Nitrate and nitrite content of Greek cheese. J Food Comp Analysis.1997;10:343– 349. 4. Chemlnitskii GA, Loktinov VN, Poloz DD. Veterinary Toxicology. Moscow Agric press.1987;318.
49
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (47-50)
5. Majid SR. Nitrate-Nitrite poisoning in laboratory animals and sheep. (PhD thesis). College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Iraq.1996. 6. Al-Kafajii NJ. Nitrate-Nitrite intoxication in sheep in Mosul Iraq. Iraqi J Vet Sci.1996. 7. Boukerche S, Aouacheri W, Saka S. Toxicological effects of nitrate: biological study in human and animal. Ann Biol Clin.2007;65(4):38591. 8. Ayo JO, Minka NS, Mamman MM. Excitability scores of goats administered ascorbic acid and transported during hot-dry conditions. J Vet Sci.2006;7(2):127-131. 9. Suteu R, Altuntas I, Buyukvanli B, Akturk O, Koylu H, Delibas N. The effects of diazozin on lipid peroxidation and antioxidant enzymes in rats erythrocytes: role of vitamins E and C. Toxicology and Industrial Health.2007;23(1):13-17. 10. Til HP. Short-term (4 weeks) oral toxicity in rats with nitrate added to a cereal basal diet. Interim report.1985;85:288. 11. Madhuban D, Anilava K. Ascorbic acid supplementation of diet for reduction of deltamethrin induced stress in freshwater catfish Clarias gariepinus. Chemosphere.2003;53(8):883-888. 12. Fox JG, Cohen BJ, Loew FM. Laboratory Animal Medicine. Academic press London UK.1984;19-120. 13. Bruning JL, Kintz BL. Computational Handbook of Statistics. 2ed ed.Scott Foresman and Co. Glenveiw. Illionois USA.1977;75-80,102138. 14. Wiechetek M, Garwacki S, Karlik W, Lewicki J, Souffrant W. Effect of nitrite on ureagenesis and carbohydrate metabolism in isolated rat hepatocytes.1993;24(3).
15. Hassan MG. Study the hematological, biochemical and histological changes in chronic nitrate poisoning in sheep. (M.Sc. Thesis). College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Iraq.1991. 16. Chatterjea MN, Shinde R. Textbook of Medical Biochemistry. 6th ed. Jaypee Brothers. India.2005;511-513. 17. Bishop ML, Fody EP, Schoeff L. Clinical Chemistry. 5th ed. Lippincott Williams and Wilkins. USA.2005. 18. Thrall MA, Baker DC, Campbell TW, Dennis D, Fettman MJ, Lassen ED, Rebar A, Weiser G. Veterinary Hematology and Clinical Chemistry. Lippincott Williams and Wilkins. USA.2004. 19. Saha S, Kaviraj A. Effects of cypermethrin on some biochemical parameters and its amelioration through dietary supplementation of ascorbic acid in freshwater catfish Heteropneustes fossilis. Chemosphere.2009;74(9):1254-9. 20. Bassenge E, Fink N, Skatchkov M, Fink B. Dietary supplement with vitamin C prevents nitrate tolerance. J Clin Invest.1998;102(1):67–71. 21. Singhal S, Gupta R, Gogle A,. Comparison of antioxidant efficacy of vitamin E, vitamin C, vitamin A and fruits in coronary heart diseases. A controlled trial. Journal of the Association of Physicians India 2001;49:327–331. 22. Manassaram DM, Backer LC. Moll DM. A review of nitrates in drinking water: Maternal exposure and adverse reproductive and developmental outcomes. Environmental Health Perspective.2006;114 (3):320–327. 23. Isyaku UY, Mohammad Abdel-Halim Mohammad Emam Okasha, Joseph Olusegun Ayo, Kolawole Victor Olorunshola. Antioxidant Vitamins C and E Alleviate the Toxicity Induced by Chronic Sodium Nitrate Administration on Sperm Count and Serum Testosterone Level in Wistar Rats. European Journal of Scientific Research.2009;25(1): 35-41.
50
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (51-54)
Vaginal cytology, vaginoscopy and progesterone profile: breeding tools in bitches K. C. S. Reddy1, K. G. S. Raju2*, K. S. Rao1 and K. B. R. Rao1 1
Animal Reproduction Dept., College of Veterinary Science, Rajendranagar, India 2 Faculty of Veterinary Medicine, Al Fateh University, Tripoli, Libya * Corresponding author: E-mail: solmonvet@gmail.com (Received December 31, 2009; Accepted August 8, 2010 )
Abstract The exfoliative vaginal cytology, vaginoscopic examination of vaginal mucosa and progesterone profiles were recorded in an attempt to identify the ideal time of breeding in bitches. A total of 18 anestrus bitches were selected and divided into 03 groups (Control, CABG and eCG groups). The bitches in control group did not receive any treatment and exhibited estrus. The estrus was induced with Cabergoline (CABG) and equine Chorionic Gonadotropin (eCG) in the other two groups of bitches. In control group, higher percentage of superficial cells (89.94 ± 0.64) and lower percentage of intermediate (7.30 ± 0.77) and parabasal cells (2.76 ± 0.30) were characteristic vaginal cytological changes during estrus. Vaginoscopic examination of CABG group of bitches revealed that the vaginal mucus was creamy and paper white with angular shrinkage during estrus. In eCG group of bitches, the plasma progesterone concentration was 1.55 ± 0.19 ng/ml on day 8.00 ± 0.71 of proestrus. The conception rates were 66.66, 83.33 and 83.33 per cent in Control, Cabergoline and eCG groups, respectively. The litter size varied from 3.50 + 1.12 to 4.83 + 0.83 in the three groups. Keywords: Bitches; Estrus; Exfolaitive; Vaginal Cytology; Vaginoscopy; Progesterone. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
معطيات التناسل:المنظار المھبلي والتغيرات الخلوية لسطح المھبل وتركيز ھورمون البروجسترون عند إناث الكالب ١
و كي بي آر راو١ كي إس راو،٢ كي جي إس راجو،١كي سي ريدي
ليبيا، طرابلس، جامعة الفاتح، كلية الطب البيطري٢ ، الھند، راجيندرانجار، كلية العلوم البيطرية، فرع تكاثر الحيوان١ الخالصة والتغي رات الخلوي ة ل سطح، ت م إج راء الفحوص ات بالمنظ ار المھبل ي،ف ي محاول ة لتعي ين الوق ت المناس ب للتناس ل ل دى ان اث الك الب يوم ا وق سمت ال ى ث الث١٨٠ كلب ة ف ي حال ة ع دم ش بق ألكث ر م ن١٨ ت م اختي ار.المھب ل وقي اس تركي ز ھورم ون البروج سترون بال دم المجموع ة. مجموع ة ال سيطرة الت ي ل م تخ ضع ألي ع الج حت ى ظھ ور ال شبق: المجموع ة األول ى.(مج اميع )س ت كلب ات لك ل مجموع ة وم ن خ الل.(eCG) أما المجموعة الثالثة فقد عولجت باس تخدام الھورم ون الم شيمي الخيل ي.(Cabergoline) عولجت باستخدام ال:الثانية الفحص بالمنظار المھبلي للمجموعة الثانية تبين ان مخاط المھب ل حليب ي ق شداني المظھ ر و ورق ي أب يض م ع انكم اش ذو زواي ا واض حة وأظھرت مجموعة السيطرة )األولى( تغيرات مميزة لخاليا سطح المھبل خالل فترة ال شبق حي ث لوحظ ت ن سبة عالي ة.خالل فترة الشبق ± ٢,٧٦) ( وك ذلك الخالي ا جن ب األساس ية٠,٧٧ ± ٠٧,٣٠) ( ون سبة أق ل م ن الخالي ا الوس طية٠,٦٤ ± ٨٩,٩٤) من الخالي ا ال سطحية م ن فت رة م ا٠,٧١ ± ٨,٠٠ م ل ف ي الي وم/ ن انوغرام٠,١٩ ± ١,٥٥ أما المجموعة الثالثة فقد كان تركيز البروج سترون بال دم.(٠,٣٠ واختل ف ع دد. للمج اميع األول ى والثاني ة والثالث ة عل ى الت والي%٨٣,٣٣ و%٨٣,٣٣ ، %٦٦,٦٦ كان ت ن سب اإلخ صاب.قب ل ال شبق . في المجاميع الثالثة٨٣,٠± ٤,٨٣ الى٠١,١٢ ± ٣,٥٠ المواليد بين
51
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (51-54)
In eCG treated bitches, the plasma was collected on day 1 of proestrus and thereafter every alternate day till early estrus. The progesterone profile was estimated by ELISA method (United Biotech Inc, 110 Pioneer ways, California). The estrus bitches in control group were mated as per the vaginal cytology (5) whenever the 80 percent cornified epithelial cells appeared and there after 3rd day. The bitches which responded to Cabergoline treatment were mated whenever the shrinkage of vaginal mucosa with angulation (7) was observed and thereafter 3rd day. The bitches responded for eCG were mated whenever the progesterone profile was more than 1 ng/ml thereafter 3rd day. The pregnancy was diagnosed by ultrasonography after 30 days of mating. The data was subjected to statistical analysis (analysis of variance – ANOVA) with Microsoft excel 2003 version.
Introduction There is a considerable variation in the time of ovulation in relation to the onset of serosanguinous discharge of early proestrus in bitches. This is often not understood by dog breeders and they frequently impose standard mating regimes upon their bitches. These regimes usually involve a plan for breeding at a predetermined or defined number of days after the onset of vulval "bleeding". As a result of this, many bitches are often mated at an inappropriate time, and this constitutes the commonest cause of apparent infertility in bitches (1). There are several investigative methods for identifying the optimal mating time including examination of exfoliated vaginal cells, vaginal endoscopy and measurement of plasma progesterone concentrations. Vaginal cytology is a simple technique that can be used by practitioners to characterize stages of the reproductive cycle of the bitch (2). Vaginoscopy is a useful diagnostic procedure for evaluating the nature and extent of changes in vaginal mucosa (3). Hence the present study is aimed to suggest breeding time based on vaginal cytology, vaginoscopy and progesterone profile.
Results and discussion The vaginal smears collected from the control bitches revealed that the superficial cells appeared in higher per cent during proestrus (65.30 ± 1.40) which was further increased to still higher per cent during estrus (89.94 ± 0.63). Thereafter the superficial cells decreased in numbers during diestrous (18.52 ± 0.94) and anestrous (12 ± 0.70) phases of estrous cycle. The per cent of intermediate cells was observed in almost equal number during proestrous (25.17± 1.17), diestrous (29.77 ± 1.98) and anestrous (28.38 ± 1.44) phases of estrous cycle. But these cells were very less in number (7.30 ± 0.77) in the bitches during the estrous phase of the study. The parabasal cells were predominantly noticed during diestrus (51.71 ± 1.05) and anoestrus (58.92 ± 1.37 percent). They appeared occasionally during proestrous (9.53 ± 0.29) and estrous (2.76 ± 0.30) phases of the estrous cycle (Figure 1). Similar exfoliative vaginal cytological changes in bitches during proestrus were observed by (2,4,8,9). This might be due to increased concentration of estradiol which caused thickening of the vaginal mucosa and proliferation of cell layers. As the mucosa thickened the surface cells changed in size, shape and staining characteristics and became larger, irregularly shaped and ultimately anuclear (10). The neutrophils could not enter into the vaginal lumen during proestrus due to thickening of vaginal mucosa, but abundant RBCs could enter into lumen by diapedesis due to estrogenic effect (5). During diestrus, the progesterone levels remained at high concentration resulting in sloughing of vaginal epithelium. The number of cell layers decreased, deeper cells were uncovered and as a result, the per cent of anuclear cells decreased (10), with higher numbers of neutrophils as noticed (5). The background on the vaginal smears appeared dirty during proestrus because of the presence of cellular debris and mucin as noticed by Feldman and Nelson (5). But during estrus, the background
Materials and methods Eighteen bitches of Labrador and German shepherd breeds in anestrus stage were utilized for the study. The bitches were assigned randomly to three groups so that each group consisted of six bitches. The bitches, which did not exhibit estrus for more than 180 days were considered as ‘anestrus’ condition. Control Group: Six bitches were utilized as untreated controls. CABG Group: Six bitches were subjected to induction of estrus by using Cabergoline (Cabgol, Sun Pharmaceutical Industries, Mumbai, India) at a dose of 05 µg / kg body weight orally (administered once daily) until the detection of proestrual bleeding. eCG Group: Six anestrus bitches were subjected to induction of estrus with the eCG (Folligon- Intervet International, Boxmeer, Netherland) at a dose of 20 IU/kg body weight I/M for 05 consecutive days and on day 05 injected with hCG (Chorulon - Intervet International, Boxmeer, Netherland) at a dose of 500 IU I/M. The vaginal smears were collected every alternate day from control whenever the bitches entered into proestrus till the day of diestrus for the purpose of determining the stage of estrous cycle. The vaginal smears were stained with geimsa stain (4, 5). The bitches which responded to Cabergoline treatment were subjected to vaginoscopic examinations at 02 days interval starting from day 0 of proestrus till first day of diestrus / pregnancy. The change in the mucosal colour, mucosal contours and profiles in the mucosal folds were recorded vaginoscopically (6).
52
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (51-54)
Â
Figure 1: Exfolaitive vaginal cytology during different phases of estrous cycle in bitches. A. Proestrus (RBC and Parabasal cell). B. Estrus (Superficial cells). C. Diestrus (Intermediate cells and Neutrophils). D. Anestrus (Parabasal cell).
Figure 2. Vaginoscopic images during different phases of estrous cycle in bitches. A. Proestrus (edematous and round vaginal folds). B. Estrus (crenulation). C. Diestrus (banded hyperemic angulations). D. Anestrus (no angulations). was clear (10). During anestrus, the background of smear was dirty which is as per the previous reports (5). Endoscopy examination of the vaginal mucosa of bitches of CABG group appeared pink in colour and congested but without any mucosal shrinkage during
proestrus. During this period, the edematous folds were found to be having rounded profiles. This might be due to thickening of mucosal epithelium and edema within sub mucosa due to the effect of increased estradiol levels which in turn led to retention of water in the vaginal mucosa
53 Â
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (51-54)
The authors are also thankful to the authorities of S. V. Veterinary University, Tirupati, India for providing facilities.
during proestrus. The onset of shrinkage of vaginal mucosa without angulations correlated with the onset of estrus which might be due to decreased levels of estradiol and consequent withdrawal of water from the vaginal mucosa. Dense creamy or paper white mucosa with angulated shrinkage during estrus was noticed which become increasingly sharp in profile. This indicated the fertile period in bitches. Cessation of mucosal shrinkage during diestrus and flat vaginal mucosa during anestrus might be due to low levels of estradiol (Figure 2). Similar studies were also carried by others (4,8-10). The plasma progesterone level was 0.37 ± 0.07 ng/ml first day of proestrus and it was recorded as 1.55 ± 0.19 ng/ml on day 8.00 ± 0.71 of proestrus in eCG treated bitches. Similar trend in progesterone profile during proestrus was noticed (2,8). The increased progesterone levels prior to estrus indicate the luteinization of preovulatory follicles which is a characteristic physiological feature in bitches (11-13) and also supported by histological evidence of luteinisation in the developing follicles prior to LH surge (15). High per cent of superficial cells were appeared on day 10.67 ± 1.84 from first day of proestrus. The per cent of bitches conceived were 66.66 which were bred based on vaginal cytology. The shrinkage of vaginal mucosa without angulation was appeared on day 09.00 ± 1.58 and maximum shrinkage with angulations (crenulations) noticed on day 10.80 ± 2.08 after the onset of proestural bleeding in Cabergoline treated bitches. The per cent of conception was 83.33 in Cabergoline treated bitches. The increase in progesterone profiles noticed on day 08.00 ± 0.71 after the onset of proestrual bleeding in eCG. The per cent of bitches conceived were 83.33. The litter size was 4.83 ± 0.83, 03.50 ± 1.12 and 04.33 ± 0.99 in Control, CABG and eCG group of bitches, respectively which is in line with other studies (14,16).
References 1. Concannon PW, England G, Verstegen J, Linde-Forsberg C. Recent Advances in Small Animal Reproduction. International Veterinary Information Service New York. 2002.1-11p. 2. Johnston SD, Root Kustritz MV, Olson PNS. Canine and Feline Theriogenology. W B Saunder Company New York. 2001.16-41p. 3. Hewitt D, England GCW. Assessment of optimal mating time in the bitch. Small Anim Pract.2000:24-31. 4. Arun M. Semi and Non invasive techniques for detection of the stages of estrus cycle and pregnancy in bitches. [master's thesis]. India, ANG Ranga Agricultural University. 2001.46-75p. 5. Feldman EC, Nelson RW. Canine and Feline Endocrinology and Reproduction. 3rd ed. W.B. Saunders Philadelphia. 2004.486–538p. 6. Lindsay FEF, Concannon PW. Normal canine vaginoscopy. In Small Animal Reproduction and Infertility Ed. T.Burke Lea and Fibiger, Philadelphia. 1986.112-120p. 7. Lindsay FEF, Jeffcoate IA. Clinical methods of estimating the optimum period for natural and artificial insemination in the bitch. J Reprod Ferti.1993;47:556. 8. Sridevi P. Determination of ovulation and fertile breeding time to optimize conception in bitches. [dissertation]. India, Tamil Nadu Veterinary and Animal Science University. 2001.62-89p. 9. Patil MD. Induction of estrus in bitches using dopamine agonist Cabergoline. [master's thesis]. Tamil Nadu Veterinary and Animal sciences University Chennai. 2006.26–56p. 10. England GCW. Manual of small animal endocrinology. 2nd ed. Bra Small Anim Vet Assoc. 1998.43-46p. 11. Kustritz MR. Clinical canine and feline reproduction evidence based answers 2121 state avenue, Ames, Iowa 50014-8300, USA. 2010.9798p. 12. Renton JP, Boyd JS, Harvey MJA, Ferguson JMF, Nickson DA, Eckersall PD. Comparison of endocrine changes and ultrasound as means of identifying ovulation in the bitch;. Res Vet Sci. 1992;53:7479. 13. Rota A, Veronesi MC, Volpe S, Riccardi A and Battocchio M. Estradiol-17B, Progesterone and Testosterone Plasma Concentrations during Estrus in the Bitch. Vet Resea Commun. 2007;31(Suppl. 1):197-199. 14. Rota A, Mollo A, Marinelli L, Gabai G, Vincenti L. Evaluation of Cabergoline and Buserelin efficacy for oestrous induction in the bitch. Reprod Domes Anim. 2003;38:440-443. 15. Phemister RD, Holst PA, Spano JS, Hopwood M.L. Time of ovulation in the Beagle bitch. Bio. Reprod.1973;8:74–82. 16. Gobello C, Castex G, Dela Sota L, Corrada Y. Shortening of interestrus intervals with Cabergoline in bitches a clinical trial. J Amer Anim Hospi Assoc.2004; 40:115-119.
Acknowledgements The authors are highly thankful to Prof. Dr. Salah Y. A. Aldahash, Dept. of Veterinary Surgery and Theriogenology, Alfateh University, Tripoli, Libya for his scientific acumen and transcendent suggestions in compilation of manuscript.
54
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (55-60)
Electron microscopic study of ileum of mice infected experimentally with Salmonella hadar A. A. Yousif1 and M. M. N. AL-Naqeeb2 1
College of Veterinary Medicine, University of Baghdad, 2College Of Veterinary Medicine, University of Kufa, Iraq (Received August 25, 2010; Accepted March 28, 2011)
Abstract Recently, Salmonella hadar has been isolated and identified from goat in Iraq. The purpose of the present study was to examine ultrastructural changes in the ileum epithelial cells of BALB/c mice experimentally infected with S. hadar. Mice were used as follows: Group A: 20 mice inoculated orally with phosphate buffer saline and considered as a control group. Group B: 20 mice inoculated orally with (100ID) by drenching the mice about 1 ml of the bacterial suspension which contain (1.5×109 cells) of Salmonella hadar and the ileum epithelial cells were examined by transmission electron microscopy at 24, 48, 72, 96 and 120 hours after infection. The ultra structural changes seen in the ileum of infected mouse at 24 hours were disorganization of the microvilli with severe cytoplasmic vacuolization, enlargement of the mitochondria and presence of intracellular Salmonella. Changes at 48 hours post infection, were detachments of many microvilli especially at the site of bacterial entry. Similar changes were observed after 72 hours but more severe; there was marked dilatation and proliferation of the endoplasmic reticulum with cytoplasmic vacuolization of the infected enterocytes. After 96 hours there were severe cytoplasmic vacuolization with accumulation of the bacteria within phagosomes and there was marked damage to the microvilli of the ileum. After 120 hours there was hypertrophy of goblet cell and thickening of the nuclear membrane and there was several Salmonella containing vacuoles. Keywords: Salmonellosis; Electron microscopy; Ileum; Mice. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
دراسة بالمجھر االلكتروني عن اللفائفي في الفئران المصابة تجريبيا بسالمونيلال ھدار ٢
و معن محسن نعمة صالح النقيب١عفاف عبدالرحمن يوسف
العراق، جامعة الكوفة، كلية الطب البيطري٢ ، جامعة بغداد، كلية الطب البيطري١ الخالصة كان ھدف الدراسة معرفة التغيرات في البنيان الفوقي لخاليا ظھارة. من الماعز في العراقSalmonella hadar تم عزل وتوصيف فارة٤٠ فأرة لحساب الجرعة المصيبة و٤٨: استخدمت الفئران كاالتي.S. hadar اللفائفي في الفئران البيض المصابة تجريبيا ببكتريا فارة( مجموعة السيطرة ومجموعة ب تم تجريعھا فمويا٢٠) استخدمت في االصابة بالبكتريا قسمت المجموعة االخيرة الى مجموعتين أ و٢٤ خلية وفحص اللفائفي بالمكرسكوب االلكتروني النافذ بعد1.5×107 × الجرعة المصيبة100 بجرعة عالية من البكتريا ساعة بعدم ترتيب24 ظھرت تغيرات البنيان الفوقي لظھارة اللفائفي في الفئران المصابة بعد. ساعة من التجريع١٢٠و٩٦و٧٢و٤٨ ٤٨ كانت التغيرات بعد.الزغيبات مع وجود فجوات سايتوبالزمية وتضخم في المايتوكوندريا ووجود عدد من السالمونيال داخل الخاليا ولوحظ تمدد واضح. ساعة لوحظت نفس التغيرات ولكنھا كانت اشد٧٢ ساعة بانسالخ الزغيبات وخاصة في مواقع دخول البكتريا وبعد ساعة بعد االصابة لوحظ تفجي شديد في فجوات٩٦ والشبكة الھيولية الباطنة بفجوات السايتوبالزم في الخاليا المعوية وبعد ساعة لوحظت ضخامة١٢٠ وبعد.السايتوبالزمية مع تجمع عدد من البكتريا في الجسيمات المبلعمة مع تحطيم كامل لزغيبات اللفائفي .لخاليا الكاسية مع تثخن في الغشاء النووي مع وجود العديد من السالمونيال حاوية على الفجوات
55
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (55-60)
which had these concentrations for drenching the mice: (1.5×105 cells), (1.5×106 cells), (1.5×107 cells), (1.5×108 cells), (1.5×109 cells), (1.5×1010 cells) and (1.5×1011 cells). Forty eight mice were divided into eight groups, (each group contain 6 mice) seven groups of mice drenched orally with one of the calculated diluents (C.F.U./ml) above diluted with 1 ml PBS while the last group (6 mice) served as control and drenched with 1 ml PBS (pH=7.2). All groups were observed for 30 days to calculate the live and dead mice, the infective dose (ID) was estimated by choosing the group of mice which showed clinical signs resemble to those in Salmonellosis with no mortality after ensure that by culture. This dose was calculated according to (15,16).
Introduction Globally, salmonellosis has remained one of the three most common meat associated diseases in human (1) and the disease caused by Salmonellae organisms is the most common and important zoonotic diseases (2). Salmonella hadar is now one of the five most frequently isolated serotypes in human and animals (3-5) it had been isolated firstly in the early 1950s, from a stool sample of a subject with gastro-enteritis and fever (6). Salmonella enterica serovars cause a variety of diseases ranging from self-limiting gastroenteritis to severe systemic infections. Virulence of these facultative intracellular pathogens is dependent on their ability to invade and replicate within non-phagocytic cells (7,8). Considerable attention has been given to the role of bacterial adherence in colonization of mucous membranes and in the pathogenesis of many infections. Both scanning and transmission electron microscopies (SEM and TEM) have been used widely in the study of intestinal colonization by Salmonellae (9,10). Mikula et al. (11) found that post oral infection of calves with S. typhimurium 4/5 strain at a dose (1×106 C.F.U./ml), appear in discontinuous and irregular of the brush border membrane of jejunal enterocyte. Yass (12) study the pathogenesis of S. typhimurium infection in calves by using transmission electron microscopy, he found that the early ultra structural changes observed in microvilli of small intestine were characterized by local derangement with slight swelling of the proximal end in addition to the presence of many bacteria either associated or adherent to the microvilli, and this Intracellular Salmonella was usually intact and enclosed by a membrane. Complete disappearance of the microvilli was observed after 5 days.
Laboratory animals Total numbers (40) mice (BALB/c) of both genders with age range (6 – 8) weeks old which adapted for two weeks before start of the experiment, all animals had negative fecal bacteriological culture for salmonella, then divided into two groups: Group (A): 20 mice inoculated orally with phosphate buffer saline and considered as a control group. Group (B): 20 mice inoculated orally with (100ID) by drenching the mice about 1 ml of the bacterial suspension which contain (1.5×109 cells) of Salmonella hadar (15). Solutions Phosphate buffer saline (PBS, pH=7.2): was prepared according to (17). 2.5 % Glutaraldehyde: was prepared by adding 2.5 ml of absolute formalin to 97.5 ml of PBS (pH=7.2) and used for electron microscope specimens. Transmission electron microscope (TEM) At the specified time of each experiment, the mouse was anesthetized by using the diethyl ether by inhalation. The abdomen was quickly opened, and then the ileum was removed as quickly as possible and drained then according to (18) the ileal tissue pieces (size approximately 1-2 mm3) of the experimental and control mice were fixed in 3% glutaraldehyde in phosphate buffer saline (pH= 7.2) at 5 ˚C for 6 hours and subsequently post-fixed/block stained in aqueous 1% osmium tetroxide (OsO4) for 6 hours at room temperature. The fixed tissues were embedded in epoxy resin and ultra-thin sections (approximately <0.1 μm in thickness) were cut using glass knife with an ultramicrotome. Ultra-thin sections obtained on 3 mm diameter copper grids, were stained with uranyl acetate and lead citrate stains for contrast and examined under Philips (CM-10) transmission electron microscope in (College of Medicine, Al-Nahern University).
Materials and methods Bacterial strain Salmonella hadar was isolated from Iraqi goats, diagnosed and confirmed according to (Standard Operating Procedure ''SOP'' (13) and serotyped in the national salmonella center in Iraq. Estimating the infectious dose (ID) Five colonies of S. hadar inoculated in 10 ml of brain heart infusion broth at 37 ˚C for 18 hours, then centrifuged in cold centrifuge at 8000 rpm (round per minute) for 15 minutes then the sediment washed three times with phosphate buffer solution (PBS) (pH=7.2) and re-suspended with 1 ml of PBS, then tenfold dilution (10-1, 10-2, 10-3, 104 , 10-5, 10-6, 10-7, 10-8, 10-9 and 10-10) were done. The viable count of the bacteria in each diluent was made according to method of Miles and Misra (14) and selected the diluents
56
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (55-60)
Results The ultrastructural examination of the brush border of the absorptive columnar epithelial cells that cover the villi of the control mice (group A) consisted of long, closely packed regular microvilli. The cytoplasmic region appeared normal with no ultrastructural changes (Fig. 1). The ultrastructural changes which obeserved in the ileum of infected mice in group (B) at 24 hours post infection were disorganized with sever disruption of the M cell and disproportional of the microvilli with severe cytoplasmic vacuolization, dilation of endoplasmic reticulum, enlargement of the mitochondria and presence of intracellular Salmonella (Figs. 2 and 3). Fig. 3: TEM. Ileum, mouse (group B) at 24 hours post infection with S. hadar, shows disorganization and severe disruption of the M-cell (black arrow), also there is cytoplasmic vacuolization (V) and presence of Salmonella containing vacuole that contain two Salmonella (white arrow). (Uranyl acetate & Lead citrate) X 41000. The ultrastructural changes at 48 hours post infection were detachments of many microvilli especially at the site of microorganism entry with vacuolar changes in the cytoplasm of the enterocytes (Fig. 4).
Fig. 1: Transmission electron micrograph. Ileum, mouse of control group (A), shows long, closely packed regular microvilli (white arrow), normal brush border (black arrow) with no changed cytoplasm of the enterocyte (C). (Uranyl acetate & Lead citrate) X 64000.
Fig. 4: TEM. Ileum, mouse (group B) at 48 hours post infection with S. hadar, shows bacterial attachment and invasion lead to loss of microvilli (white arrow) and vacuolation spaces (V), many intracellular invading bacteria (B) located in the lamina properia (black arrow), cell with apoptotic feature appear in field containing apoptotic bodies cell. (Uranyl acetate & Lead citrate) ((X 24500). The ultrastructural changes in the ileum of group (B) mice that killed after 72 hours post infection were the same with that observed previously but was more severe, there was marked dilatation and proliferation of the endoplasmic reticulum with cytoplasmic vacuolization of the infected enterocytes; in other sections the endoplasmic reticulum
Fig. 2: TEM. Ileum, mouse (group B) at 24 hours post infection with S. hadar, shows detachment and disruption of microvilli (white arrow), severe cytoplasmic vacuolization (V) and enlargement of the mitochondria (white head arrow). (Uranyl acetate & Lead citrate) X 16000.
57
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (55-60)
appeared to have dilated phagocytic vacuoles with lysosomes in addition to presence of many ribosomes detached and dispersed singly in the lamina properia and S. hadar is present in both an enterocytes and M cells (Figs. 5, 6 and 7). At 96 hours post infection, there were severe cytoplasmic vacuolization with accumulation of the bacteria within phagosomes and there was marked damage to the microvilli of the ileum of group (B) mouse at the same time (Fig. 8). Finally the ultrastructural changes in the ileum of group (B) mouse that killed after 120 hours post infection revealed hypertrophy of goblet cells, dilatation of endoplasmic reticulum, severe cytoplasmic vacuolization, thickening of the nuclear membrane and there were several Salmonella containing vacuoles (SCV) (Figs. 9, 10 and 11).
Fig. 7: TEM. Ileum, mouse (group B) at 72 hours post infection with S. hadar, shows dilation of the endoplasmic reticulum (black arrow), presence of phagocytic vacuole that contain many ribosomes (white arrow) in addition to presence of many lysosomes (L) which detached and dispersed singly in the lamina properia. (Uranyl acetate & Lead citrate) X 3400.
Fig. 5: TEM. Ileum, mouse (group B) at 72 hours post infection with S. hadar, shows an invading Salmonella hadar located in both an enterocytes and M-cells (black arrow) with detachment of the some microvilli (white arrow). (Uranyl acetate & Lead citrate) X 16000. Fig. 8: TEM. Ileum, mouse (group B) at 96 hours post infection with S. hadar, shows severe cytoplasmic vacuolization (V) with accumulation of the bacteria within phagosome (black arrow). (Uranyl acetate & Lead citrate) X 16000. Discussion The early ultrastructural changes observed in the microvilli by transmission electron microscope in the mice of group A which infected with S. hadar were characterized by local derangement with little swelling on the proximal end. One of the interesting findings is the ballooning of the microvilli and the appearance of this ultrastructural change may be due to the attachment of S. hadar to their membrane. While, when the infection was became more advanced, the microvilli became short, more effacement from epithelial cells in some location; these observations in the microvilli were similar to that mentions by (19) who
Fig. 6: TEM. Ileum, mouse (group B) at 72 hours post infection with S. hadar, shows breakdown of microvilli (white line), invading bacteria (white arrow), cytoplasmic vacuolization of enterocytes (V), and several phagosomes (black arrow) in addition to cellular debris. (Uranyl acetate & Lead citrate) X 3400.
58
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (55-60)
absorption), carrier protein and surface area as mentions by (20).
studied the ultrastructural changes of ileum microvilli of rabbit infected with S. typhimurium, and also was similar to that recorded by (12).
Fig. 9: TEM. Ileum, mouse (group B) at 120 hours post infection with S. hadar, shows severe hypertrophy of goblet cell (double head arrow), severe cytoplasmic vacuolization (V) and detachment of some microvilli (white head arrow). (Uranyl acetate & Lead citrate) X 4400.
Fig. 11: TEM. Ileum, mouse (group B) at 120 hours post infection with S. hadar, shows highly dilatation of endoplasmic reticulum (d), vacuolization of the cytoplasm (V), and there is some invading bacteria (B). (Uranyl acetate & Lead citrate) X 4400. The shortening and loss of microvilli is in accordance with decreased alkaline phosphatase activity, this enzyme is located in the plasma membrane of the microvilli and is considered as a measurement of the digestive-absorptive surface (21). The fragmentation and vesiculation of microvilli may be due to increases in cytoplasmic Ca2+ concentration which lead to actin filaments of the microvillus core cytoskeleton to be broken into short filament as mentioned by (22). The ultrastructural changes was observed in the epithelial cells were probably due to the presence of many intracellular Salmonella that produced cytotoxin inside the cells; these observations is similar to that observed in ileum of the infected calves with S. typhimurium (12) and also with that found in the ileum of swine which infected with S. typhimurium DT104 (23). The loss of microvilli reduced the intestinal absorption surface, this together with the functional deficiency and destruction of many epithelial cells, may be resulted in decrease absorption and caused gastroenteritis and diarrhea. The ultrastructural changes observed in the cytoplasm of the enterocytes which manifested by vacuolization of cytoplasm, displacement of organelles and swollen mitochondria, these changes in the host cells were occurred as a result of the effect of S. hadar endotoxin that is part of the outer membrane or metabolic substances released from the bacteria as mentioned by (24). Finally this study concluded that S.hadar has high ability to invade and established colonization in the intestine of mice, it is an invasive strain.
Fig. 10: TEM. Ileum, mouse (group B) at 120 hours post infection with S. hadar, shows brush border disruption at site of invasion; microvillus enlongation, invading bacteria (black arrow), bacterial attachment and invasion led to disruption of M-cells (white arrow) and vacuolation spaces (V). (Uranyl acetate & Lead citrate) X 12500. The effacement of the brush border of the enterocytes of the microvilli by S. hadar resulted in the loss of brush border enzymes (amino oligo peptidase, aspartate amino peptidase, dipeptidyl amino peptidase, carboxy peptidase and Îł glutamyl transferase which hydrolyze small peptides that are formed in the intestinal lumen by the action of proteases to free amino acids during the process of
59
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (55-60)
13. Anonymous. Standard Operating Procedure ''SOP'' Bacteriological Inter-laboratory Comparison Study on the detection of Salmonella in food organised by crl-salmonella. food study ii, crl-Salmonella, Bilthoven, Netherlands, 2007. 14. Miles AA, Misra SS. The estimation of the bactericidal power of blood. J Hyg.1938;38:732-749. 15. AL-Naqeeb MMN. Study the pathogenesis of Salmonella hadar which isolated from goats in mice. [master's thesis]. College Vet Med. Univ Baghdad. Iraq.2009. 16. Blaser MJ, Newman LS. A review of human salmonellosis: I. Infective dose. Reviews of Infectious Diseases.1982;4:1096–1106. 17. Luna HT, Lee G. Manual of histological staining method of the Armed Forces Institute of Pathology. 3rd ed. The Blakiston Division. McGraw–Hill Book Co. New York. USA.1968. 18. Sabatini DD, Bensch K, Barrnett R. Cytochemistry and electron microscopy. The preservation of cellular ultrastructure and enzymatic activity by aldehyde fixation. J Cell Biol.1963;17:19-59. 19. Worton KJ, Candy DC, Wallis TS, Clarke GJ, Osborne MP, Haddon SJ Stephen J. Studies on early association of Salmonella typhimurium with intestinal mucosa in vivo and in vitro: relationship to virulence. J Med Microbiol.1989;29:283-294. 20. Tobey N, William H, Roger Y, Tai-In H, Cindy H. Human intestinal brush border peptidases. Gastroenterology.1985;88:913-926 21. Cousemeni W, Ducatelle R, Debouck P, Hoorens J. Pathology of experimental CV777 corona virus enteritis in piglet, I– Histopathological and Histochemical study. Vet Path.1982;19:46-56. 22. Embage H, Batt R, Saunders J, Getty S, Hart C. Interaction of enteropathogeni E. coli O111 with rabbit intestinal mucosa in vitro. Gastroenterology.1989;96:1079-1086. 23. Meyerholz DK, Stebel TJ, Ackermann, MR, Carlson SA, Jones BD Pohlenz J. Early Epithelial Invasion by Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 in the Swine Ileum. Vet Pathol.2002;39:712720. 24. Yamamoto I. Ultrastructural changes in mesenteric lymph nodes of mice infected with Salmonella enteritidis. J Infect Dis.1966;116:8-20.
References 1. Cooper GL. Salmonellosis infection in man and the chicken: Pathogenesis and the development of live vaccines- a review. Vet Bull. 1994;64:123–143. 2. OIE. Manual of diagnostic tests and vaccines for Terrestrial Manual: Salmonellosis. OIE, France 2008.1267-1283. 3. Valdezate S, Echeita A, Diez R, Usera MA. Evaluation of phenotypic and genotypic markers for characterization of the merging gasteroenteritis pathogen Salmonella hadar. Eur. J Clinic Microbial Infect Dis.2000;9:275–281. 4. Cailhol J, Lailler R, Bouvet P, Lavieille S. Gauchard F, Sanders P, Brisabois A. Trend in antimicrobial resistance phenotypes in nontyphoid Salmonella from human and poultry origins in France. Epidemiol Infect.2006;134(1):171-178. 5. Yousif AA, Alshemmari IGM, Mahdi MS. Epidemiological study on Salmonella spp isolated from goat in some provinces in middle of IRAQ. (Unpublished manuscript submitted). 6. Hirsch W, Gerichter CB, Bregman E, Lubling P, Altman G. A new Salmonella type (S. hadar). Acta Med Orientalia.1954;13:41. 7. DeLeo F, Otto M. Bacterial Pathogenesis. Methods and Protocols, in Methods in Molecular Biology, Humana Press, a part of Springer Science+Business Media, LLC.2008. 8. Ohl ME, Miller SI.. Salmonella: A model for bacterial pathogenesis. Annu Rev Med.2001;52:259–274. 9. Santos RL, Tsolis RM, Baumler AJ, Adams LG. Pathogenesis of Salmonella-induced enteritis. Brazilian J Med Biological Res.2003; 36:3-12. 10. YashRoy RC. Mechanism of infection of a human isolate Salmonella (3,10:r:-) in chicken ileum: Ultrastructural study''. Indian J Med Res. 2007;126:558-566 11. Mikula E, Pilipeinec I, Timkovicova M. Electro-microscopic studies of the intestinal tract in calves after experimental Salmonella infection. Folia Vet.1988;32:70-97. 12. Yass AA. Experimental study on the pathogenesis of Salmonella typhimurium infection in calves. [dissertation]. College Vet Med. Univ Baghdad. Iraq.1990.
60
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (61-64)
Effect of laser treatment on thyroid gland hormones in female rabbits N. S. AL-Mustawfi1, T. S. Al- Azawi2 and I. F. R. Mohammed3 1
Health Ministry, 2 College of Veterinary Medicine, 3 College of AL-Kindy Medicine, Baghdad, Iraq (Received November 23, 2009; Accepted December 9, 2010)
Abstract This study was designed to investigate the effect of laser treatment on thyroid functions and hormones in female rabbits. A total of 18 female rabbits were used in this investigation. Six rabbits were used for examining the thyroid gland location and dissected to be sure that laser therapy will be directed to this gland. Twelve female rabbits were used in this experiment to study the physiological effect of laser therapy (4J/cm2) on normal thyroid function they were divided into two equal groups, six used as control and the others were exposed to laser therapy at the thyroid gland region for three successive days for 5 minutes on each side. Then blood was collected for hormonal assay from ear vein at 1, 6, 12, 18, 24 and 30 days after the last dose of laser treatment. The results revealed a gradual decrease in serum T3 and T4 levels with a concomitant increase in TSH level at the first eighteen days of laser treatment, then normalization of hormones level were take place to be normal after thirty days. More work is needed on this subject to examine the specific role of laser on glands. Keywords: Laser; Thyroid gland; Rabbits. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
تأثير المعاملة بالليزر في أفراز ھرمونات الغدة الدرقية في اناث االرانب ٣
و احسان فتح ﷲ محمد٢ تھاني سلمان العزاوي،١نھى صاحب المستوفي العراق، بغداد، كلية طب الكندي٣ ، كلية الطب البيطري٢ ، وزارة الصحة١ الخالصة
لتحقي ق ھ ذا الھ دف ت م.صمم ھذا البحث لدراسة تاثير اشعة الليزر على وظائف الغدة الدرقي ة والوظيف ة الف سلجية لھرموناتھ ا بالج سم ت م. تم استخدام ستة ارانب للتشريح ومعرفة موقع الغدة وحجمھا ولتحديد شكلھا ومكانھا ف ي الرقب ة.استخدام ثمانية عشر ارنبا ً من االناث ق سمت ھ ذه االران ب.استخدام اثنى عشر ارنبا ً من االناث السليمة لمعرفة تاثير اشعة الليزر على الغدة الدرقي ة وم ستوى الھرمون ات بال دم ( عل ى منطق ة الغ دة الدرقي ة لفت رة٢ س م/ ج ول٤) الى مجموعتين متساويتين مجموعة سيطرة ومجموع ة تعرض ت الش عة اللي زر بجرع ة يوم ا ً بع د٣٠ ,٢٤ ,١٨ ,١٢ ,٦ ,١ ت م س حب ال دم بع د.( دق ائق للجرع ة الواح دة عل ى ك ل جھ ة م ن الغ دة٥) ثالث اي ام متتابع ة وبواق ع م عT4 وT3 اظھرت النتائج انخفاضا ً ت دريجيا ً ف ي م ستوى. بالدمT4, T3 TSH الجرعة االخيرة من الليزر وذلك لقياس مستوى ھرمونات بع د ھ ذا ع ادت، ف ي دم المجموع ة المعرض ة الش عة اللي زر لح د الي وم الث امن ع شر بع د اخ ر جرع ةTSH ارتف اع ف ي م ستوى ھرم ون . المزيد من البحوث ضرورية لمعرفة دور الليزر على بقية الغدد.الھرمونات لمستواھا الطبيعي بعد اليوم الثالثين من التجربة Since the last century the laser occupied a large degree of attention in the scientific and technological fields. Invention of laser causes a chain of important changes in science development, industrial, commercial, agricultural, specification and measurement, cosmetic surgery and medical therapy. It had been used for eye treatment, autoimmune thyroiditis, menopausal bleeding, fallopian tube opening and ovarian stimulation to produce estrogen (2).
Introduction LASER is an acronym for Light Amplification by Stimulation Emission of Radiation, the key to operation of laser in 1917 when Albert Einstein made the proposal that particles of light with energy of a particular frequency could stimulate electrons to emit radiation of the light at same frequency (1).
61
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (61-64)
(4J/cm2) for 3 successive days are represented in tables 1-3 and figures 1-3.
Although, laser irradiation is now being considered a therapy of choice for many difficult pain management challenges and is becoming a common practice in medicine there is no clear understanding of its side effects from one side and its physiological actions on endocrine glands from the other side. Moreover, the available literature lacks the effect of laser on thyroid gland directly and their physiological changes in the body. Thus, this experiment was designed to study the effect of laser therapy on thyroid hormones in normal female rabbits.
Table 1: The physiological effect of laser therapy on serum T3 (nmol/l) level of normal female rabbits as compared to control group at different times after the third dose of laser therapy at (4J/cm2). Group Time Control Laser therapy 1 day 2.00 ±0.10 Aa 1.88 ± 0.10 Aa 6 days 2.10 ±0.10 Aa 1.65 ± 0.10 Bab 12days 2.13 ±0.10 Aa 1.40 ± 0.04 Bc 18 days 2.03 ±0.05 Aa 1.02 ±0.04 Bd 24 days 2.13 ±0.20 Aa 1.53 ±0.04 Bb 2.17 ±0.04 Aa 1.88 ±0.10 Ba 30 days Values = mean±SE (n=6 rabbits). Capital Letters denote: the difference between groups. Small Letters denote: the difference within group.
Materials and methods The study was conducted in the central health lab / Health ministry / Baghdad. A total number of eighteen female rabbits weighing (1-1.5) Kg and 6 months old were used in this study because many authors have reported that the females is more susceptible to thyroid diseases than males (3,4). They were housed in clean plastic cages and kept in conditioned room (28 -32 oC). All animals were left for two weeks for adaptation. Six female rabbits were killed by intramuscular injection of Ketamine hydrochloride at a dose 5ml/rabbit and the thyroid gland was exposed and the location was noticed. Twelve female rabbits were divided into two groups; Control groups, these rabbits were kept without any medication or treatment. Laser therapy group, the thyroid gland of these animals was exposed to diode laser light for 5 minutes at each side of the gland for 3 successive days. The dose was 4J/cm2 as mentioned by (5). Clinical signs and symptoms were recorded and noted carefully throughout the experiment which lasted for 30 days. Blood samples were collected and serum was isolated at 1st, 6th, 12th, 18th, 24th and 30th days after the last dose of irradiation for the following hormonal assay parameters: 1. Total triiodothyronine (TT3) assay (nmol/L): T3 was measured using standard assay (TT3-Kit) (6). 2. Total thyroxin (TT4) assay (nmol/L): The standard assay (TT4-Kit) was used (7). 3. Thyroid stimulating hormone (TSH) assay (mlu/L): The serum level of TSH was measured using standard assay (TSH-Kit) (8). All data were statistically analyzed on the bases of two way analysis of variance (ANOVA) (9).
Table 2: The physiological effect of laser therapy on serum T4 (nmol/l) level of normal female rabbits as compared to control group at different times after the third dose of laser therapy at (4J/cm2). Group Time Control Laser therapy 1 day 104.8 ± 2.20 Aa 102.2 ± 1.70 Aa 6 days 103.5 ± 2.40 Aa 82.5 ± 1.80 Bbc 12days 104.3 ± 2.50 Aa 76.8 ± 1.80 Bc 18 days 102 ± 2.30 Aa 50.8 ± 2.70 Bd 24 days 102.8 ± 1.40 Aa 77.3 ± 1.40 Bc 111.5 ± 0.70 Aa 96.5 ± 1.60 Bab 30 days Values = mean±SE (n=6 rabbits). Capital Letters denote: the difference between groups. Small Letter denote: the difference within group. Table 3: The physiological effect of laser therapy on serum TSH (mlu/l) level of normal female rabbits as compared to control group at different times after the third dose of laser therapy at (4J/cm2). Group Time Control Laser therapy 1 day 2.42 ± 0.10 Ba 3.78 ± 0.20 Acd 6 days 2.33 ± 0.10 Ba 4.48 ± 0.20 Ac 12days 2.33 ± 0.10 Ba 5.48 ± 0.20 Ab 18 days 2.21 ± 0.10 Ba 6.50 ± 0.20 Aa 24 days 2.31 ± 0.10 Ba 4.23 ± 0.10 Ac 2.35 ± 0.10 Ba 2.88 ± 0.10 Ae 30 days Values = mean±SE (n=6 rabbits). Capital Letters denote: the difference between groups. Small Letters denote: the difference within group.
Results Animals exposed to diode laser showed depression, fatigue, cold body, weakness, constipation and anxiety. Where as, no such symptoms were observed in control group. The mean values of serum T3, T4 and TSH levels±Se for female rabbits during 30 days after laser exposure at a dose
62
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (61-64)
T3 assay (nmol/L): Table (1) shows that exposure of thyroid gland to laser therapy produce a significant gradual decrease (P>0.05) in T3 as compared to control group. The minimal value was observed at the 18th day after exposure (Figure 1) and then it increases gradually. T4 assay (nmol/L): There is a significant gradual decrease in T4 level in rabbits exposed to laser therapy (table 2). This depression becomes highly significant after 18th days (figure 2) as compared to control group. Although T4 level increases after that in laser group it still significantly less than control group (P<0.05). TSH assay (mlu/L): Depending on the results in table (3), it is obvious that laser exposure on thyroid gland of normal female rabbits induced a significant gradual increase in TSH level (P<0.05). At the mean time, the results indicate that the maximal level of TSH is being at the 18th day after the last dose of laser therapy (figure 3) in comparison with the days before and after that.
Figure 1: The physiological effect of laser therapy on serum T3 (nmol/l) level of normal female rabbits as compared to control group at different times after the third dose of laser therapy at (4J/cm2).
Discussion The results of this experiment revealed that thyroid irradiation by laser induce a case of hypothyroidism which was characterized by decrease T3 and T4 levels and increase TSH secretion from anterior pituitary gland. Primary hypothyroidism is manifested by elevated TSH and depression of plasma T3 and T4 (10). Although, there is no clear explanation for the effect of laser on thyroid gland the mechanism by which laser exert its biological effect remains to be elucidated. The decrease in thyroid hormones secreting in our experiment could be attributed to some changes in thyroid gland organelles which in turn modify thyroid hormones synthesis and secretion processes. An increase in colloid droplets and lysosomes, dilation of rough endoplasmic reticulum and reduction of Golgi apparatus of thyroid gland have been noticed after infrared laser irradiation to rat (11). Many investigators had reported that measurement of serum TSH is the single best indicator of thyroid function because of its sensitivity to any change in serum T3 and T4 levels (12). This explains the increase of TSH secretion in our experiment. TSH the most reliable explanation for the normalization of hormones level after 18th day is due to the function performed by laser irradiation. It has been reported that laser mediated vasodilation by histamine, nitric oxide which enhances the transport of nutrients and oxygen to facilitate repair of damaged tissues (13). It has been clinically documented that laser significantly increases the number and regeneration of blood and lymphatic vessels (14,15). It has been reported for that laser therapy to hyperthyroid rabbits treated the case of hyperthyroidism by normalizing the levels of hormones and the related parameters (cholesterol, total protein, glucose and calcium
Figure 2: The physiological effect of laser therapy on serum T4 (nmol/l) level of normal female rabbits as compared to control group at different times after the third dose of laser therapy at (4J/cm2).
Figure 3: The physiological effect of laser therapy on serum TSH (mlu/l) level of normal female rabbits as compared to control group at different times of the third dose of laser therapy at (4J/cm2).
63
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (61-64)
8. Lucas M, Fernandez-Ulloa M. Thyroid, Analysis, correlation. 3rd Ed., Mosby Com. Philadelphia, USA.1996; 867-890. 9. Snedeccor G, Cochran W. Statistical method 6th ed. Iowa State University press.1973.238-248p. 10. Tunbridge W, Evered D, Hall R, Appleton D, Brewis M, Clark F. The spectrum of thyroid disease in a community. Clin Endocrinol (oxf) 1977;7(6):481-493. 11. Vidal I, Vargas P, Mata G. Ultra structural changes in thyroid follicular cell during postnatal development and effect of infrared laser radiation. Laser in Medical Science.2004;15(4):227-237. 12. Beck-peccoz P, Calebiro D, Persani, LTSH Resistance 2006. Available from: www.hotthyroidology.com. 13. Silveria L. In vivo study on most cells behaviors following Lowintensity visible and near infrared laser radiation. Laser Surg Med Abstract Tissue. 2002; Abstract. 304. 14. Kubota J. Laser and sport medicine in plastic and reconstructive surgery. Abstract from II congress of the Internat Asso. Laser Spports Med Rosario.2000:10-12. 15. Lievens O, Veen, V. Wound healthy process: influence of LLLT on the proliferation of fibroblasts and on the Lymphatic regeneration. Abstract from the 7th International congress of Eur Med laser J Amer Dent Asso.2000;124:57-61. 16. AL- Mustawfi NS. The physiological effect of laser therapy on normal and hyperthyroid female rabbits. [master's thesis]. College Vet Med. Univ Baghdad. Iraq.2009.
ions, inorganic phosphorus in serum) (16). Finally, our findings serve as proof-of-principle that laser therapy could be used in treatment of goiter, hyperthyroidism and other thyroid diseases. References 1. Miserendino L, Pick MLaser in Dentistry. Quintessence pub Com. 1995:5-54,114-120. 2. Ivanenko M, Hering P. Hard tissue ablation with a mechanically Qswitched CO2 laser.1998;SPIE Proc 3565:110-115. 3. Diekman M, Endert E. Endocrine factors related to changes in total peripheral vascular resistance after treatment of thyrotoxic and hypothyroid patients. Eur J Endocrinol.2001;144(4):339-346. 4. Basaria S, Copper D. Amiodarone and the thyroid. Amer J Med. 2005;118(7):706-714. 5. Azevedo L, Correaaranha A, Stolf S, Eduardo C, Vieira M. Evaluation of low intensity laser effect on the thyroid gland of male mice. Photomedicine and laser surgery.2005;23(6):567-570. 6. Katz P, Bellet N, less M.CEDIATM total an automated homogenous enzyme-immunoassay for serum total T3. Clin Chem.1991;37:9936. 7. Lazar A. Thyroid hormone receptor multiple forms, multiple possibilities. Endocr Rev.1993;14:184-193.
64
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (65-70)
Effect of omentum graft on esophageal anastomosis in dogs A. K. Mahdi Department of Surgery and Obstetrics, College of Veterinary Medicine. University of Baghdad, Baghdad, Iraq (Received September 29, 2009; Accepted June 30, 2010) Abstract This aim of this study was to evaluate the complications and final function outcome of wrapping nonvascularized omentum graft around the suture line of esophageal anastomosis. Twelve adult local breed dogs were used in this study. The animals were divided into two equal groups (control and treated), all animal induced into general anesthesia by injection of atropen sulphate in a dose 0.04 mg/kg B.W, intramuscularly then after 15 minute given mixture of ketamine hydrochloride and xylazine hydrochloride in doses 15 mg/kg and 5 mg/kg B.W intramuscularly respectively. An oblique resection of about 1cm of the esophageal length and anastomosis by double layer of simple interrupted pattern by 2.0 cat gut suture (control group), same procedure was done in treated group except the wrapping the anastomosis site with patch of omentum tissue after lapratomy operation in the left flank region procedure. The clinical signs of treated animal revealed signs of dysphagia and regurgitation in treated group while this signs disappear in the control group. Radiological and histopathological examination of the anastomosis site performed at 15 and 30 days post operation. Radiological study recorded high degree of stenosis in the anastomosis site in treated group at 15 and 30 days post operation in compared with animals in control group that record mean degree of stenosis in treated group at 15 day (57.61±0.2) and at 30 day (55.78±0.2) while it recorded in control group at 15 day (39.34±1.04) and at 30 day (36.0.6 ±0.9), histopathological results recorded enhanced healing of anastomosis site in treated animals more than control animals. In conclusion we found that non vascularized omental graft prevent leak when used around the anastomosis line in esophageal and enhanced healing of anastomosis line but it increase the stenosis, fibrosis and adhesion of anastomosis site with surrounding muscle and this interferes with the swallowing as well as dysphagia and regurgitation. Keywords: Anastomosis; Esophagus; Omentum; Stenosis. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
تأثير طعم الثرب في تفمم المرئ في الكالب أريج كامل مھدي العراق، بغداد، جامعة بغداد، كلية الطب البيطري،فرع الجراحة والتوليد الخالصة كلب ا بالغ ا م ن١٢ ت م اس تخدام.ان الھدف من ھذه الدراسة ھو تقييم المضاعفات التي يحدثھا استخدام طع م الث رب ح ول تفم م الم رئ خ درت الحيوان ات. حيث قسمت ھذه الحيوانات الى مجموعتين متساويتين وھما مجموعة السيطرة ومجموع ة المعامل ة،السالالت المحلية كغم من وزن الجسم/ ملغم٥ دقيقة استخدم مزيج من الزايلزين١٥ كغم من وزن الجسم وبعد/ ملغم٠,٠٤ باستخدام اتروبين سلفيت بجرعة سم من المرئ بشكل مائ ل وخ يط١ في مجموعة السيطرة تم استأصال.كغم من وزن الجسم كعالج تمھيدي بالعضلة/ ملغم١٥ والكيتامين ام ا ف ي مجموع ة المعامل ة فاتبع ت نف س الخط وات كم ا ف ي مجموع ة٢,٠ بصفين من الخياطة البسيطة المتقطعة بخيوط ك ات ك ات حج م تمثل ت العالم ات ال سريرية بع دم.السيطرة ماعدا استخدام قطعة من الثرب حول منطق ة ال تفمم أخ ذت م ن الحي وان بع د عملي ة ف تح ال بطن ١٥ اما الدراسة الشعاعية بع د،القدرة على البلع وفي بعض الحاالت ارجاعه في حيوانات مجموعة المعاملة مقارنة مع مجموعة السيطرة اما الدراسة الن سجية المرض ية فق د اظھ رت، يوم بعد العملية اظھرت مجموعة المعاملة تضيقا واضحا مقارنة مع مجموعة السيطرة٣٠و يوم ا م ن العملي ة تمثل ت بالن سيج الليف ي المن تظم مقارن ة م ع الن سيج الليف ي غي ر المن تظم١٥ التئام منطقة التفمم في مجموعة المعاملة بع د يوما فقد اظھرت مجموعة المعاملة التئام جيد لمنطقة ال تفمم مقارن ة م ع مجموع ة ال سيطرة الت ي ل م يكتم ل٣٠ لمجموعة السيطرة اما بعد 65
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (65-70)
نستنتج من الدراسة ان لف طعم الثرب حول منطقة تفمم المرئ يمنع النضح ويعمل على تسريع األلتئام لكن في نف س الوق ت،االلتئام فيھا .يسبب تضيق منطقة التفمم اضافة الى زيادة التصاقھا مع العضالت المجاورة مما يؤدي الى عدم القدرة على البلع و ارجاع الطعام Animals were divided randomly into two equal groups (control and treated). Prophylactic antibiotic penicillin – streptomycin in a dose 10,000 I.U and 20 mg/kg B.W intramuscularly, respectively was administered one hour before operation. Experimental animals were anesthetized by injection with atropine sulfate in a dose 0.04 mg/kg B.W as a premedication followed 15 minutes later by a mixture of ketamine hydrochloride in a dose 15 mg\kg B.W and xylazine hydrochloride in a dose 5 mg/kgB.W, intramuscularly. In animals of control group the surgical area of the ventral cervical region was prepared for aseptic surgery, the animal positioned on dorsal recumbency, ventral cervical midline incision through the skin and subcutaneous tissue. The sternohyoideus muscle were separated on their midline and retracted laterally for exposing the trachea, care must be take to avoid injury to the adjacent carotid sheath and left recurrent laryngeal nerve, curved artery forceps placed under the esophagus and stay sutures were placed proximally and distally to the site of cutting to facilitate the manipulation of the esophagus and prevent leakage of the intraluminal content, oblique incision is made in the middle third of esophagus by scalpel and about 1 cm of its length excised then anatomists with hand sewn suturing accomplished in two layer, the strongest layer in esophagus is the mucosa and sub mucosa are closed by placing simple interrupted suture by 2.0 chromic cat gut with the knot was tied inside the lumen, the second interrupted pattern placed in the muscular layer and adventitia the knot was tide on the outer aspect of the esophagus wall. In animals of treated group the same operation was made to expose the esophagus and excision part of it, then laporatomy was performed on the left flank region to obtain the patch of omentum tissue then fixed around the anatomises site by several stitches with 2.0 chromic cat gut, then suturing the laporatomy incision by routine technique. Antibiotic injection as mentioned previously for four days and intravenous fluid therapy of dextrose 5% in a dose 20 ml /kg B.W was given for three days after operation then soft food (milk with water) was given for 5 days later and the animals reintroduce gradually to solid food. Segment of esophagus was taken after euthanasia the animal in the period 15 and 30 days after operation an esophagogram was taken by clamping one end of esophagus by artery forceps and filled with water soluble material (barium solphate solution) to evaluate the leak and the degree of stenosis at anastomosis site by using this formula {stenosis index %=100(1-2A/B+C)} A: diameter in centimeter at anastomosis site, B and C : diameter in centimeter at two centimeter proximal and distal the anastomotic site (14), next the esophagus opened
Introduction Esophagectomy is an approach to remove an entire section of the esophagus, it was performed for a wide spectrum of conditions but mostly for carcinoma (1). The goal of esophageal resection is to restore both swallowing and barrier to the gastro esophageal reflex with minimal mortality and morbidity (2,3). In esophageal surgery, there is higher risk of complications than in any other portion of alimentary tract (1,4). This is believed to be the result of its lacks of a serosa cover which helps to limit leakage by exuding fibrin,lacks an omentum to help localize and seal a leak (5), segmental blood supply, constant motion and poor suture holding as compared to other part of the (1,6). Different approaches used for the excision of esophageal cancer varying from transthoracic to transhiatal and in some cases only abdominal approach have been recommended, each approach has its pros and cons (7). The conventional method of birding anatomic defects of the upper digestive tract in the neck is by tissue transfer –either gastric or colon pull through, free jejunal graft, or full –thickness skin flap (8), pedicle diaphragm and omentum flap (9). Anastomosis leak was defined as extravasations of water soluble contras medium and/or clinical symptom of leakage. Anastomotic stricture was defined as an anastomotic narrowing that did not allow a standard fiber endoscope with a diameter of 9mm to pass with out resistance, and this indication for dilatation (10). Any studies showed the omentum has a rich vascular, lymphatic tissue and it enhances anastomotic healing when added as an adjuvant for reconstruction procedures (11), that its pedicle transposition for reinforcing the anastamotic line significantly reduce the leakage after esophagectomy for carcinoma of esophagus (12). Anastomosis can be handmade, stapled or semi mechanical. As the hand –sewn anastomosis, many technical details, e.g. running versus interrupted sutures, absorbable or non absorbable, one-or two-layer sutures, knots within or outside the lumen, have been debated (1). However a greater number of stapled anastomosis resulted in strictures and there were less dangerous of anastomosis site leakage and continues necrosis (13). The goal of this study was to evaluate the effect of wrapping nonvascularized omental graft in the healing of anastomosis site in oblique esophageal partial resection in dogs. Materials and methods Twelve adult dogs (2-4 years), local breed, apparently healthy weighting 15-20 kg were used in this study.
66
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (65-70)
longitudinally and the biopsy taken from anastomosis site fixed in neutral buffer formalin solution 10% for histopatological study.
Radiographic examination of the two groups revealed the presence of difference in the degree of stenosis at anastomosis site 15 and 30 days after the operation (Fig. 2 A and B) and (Fig. 3).
Results Clinical signs of all experimental animals post operation period were recorded, and there was soft swelling in the neck at the site of operation, persisted for 2-3 days, then disappeared after retaining the animals to feeding on semi solid food. The animals of control group eat normally, but suffered from moderate sings of dysphagia and regurgitation that disappear after several days but this sign continued for long period in treated animals and the animal was able to eat the food but needed long time. After euthanizing the animals, to obtain the specimens, severe adhesions were seen between the anastomotic site and the muscle which surrounded it in treated animals less than seen in control group (Fig, 1 A and B).
A
B Fig. 2: Radiography of the anastomosis site after 15 days (A) and 30 days (B) in two animals of the control group.
A
Fig. 3: Radiography of the anastomosis site after 30 days in one animal of the treated group.
B
Statistical analysis revealed low degree of stenosis in the control group (36.06Âą0.9) after 30 days and high degree of stenosis after 15 days in the treated group (57.61Âą0.2) (Table 1).
Fig. 1: Adhesion of the anastomosis site with its surrounding tissue after filling with barium sulphate on two animals in treated group after 15 days (A) and 30 days (B) post operation.
67
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (65-70)
Table 1: mean degree of stenosis at the anastomosis site in the two groups. Group
control group treated group
Mean degree of stenosis at 15 day 39.34±1.04 57.61±0.2
Mean degree of stenosis at 30 day 36.06±0.9 55.78±0.2
Histopathological examination on postoperative day 15 in the control group showed fibrous connective tissue infiltrated by inflammatory cells (Fig. 4) with moderate thickness of epithelial layer covering the irregular direction fibrous connective tissue. On postoperative day 30 there was proliferation of stratified squamous epithelial layer which extended as papillary projection into sub epithelial layer with more thickness comparative to that seen on day 15 covering the fibrous connective tissue (Fig. 5). Hyperplasia of mucus gland surrounded by fibrous connective tissue were also seen, and in the area incomplete stratified epithelial layer. On postoperative day 15 in the treated group, the histopathological section showed formation of fibrous connective tissue in the adipose tissue of omentum and infiltrated by inflammatory cells (Fig. 6). The suture material was surrounded by fibrous connective tissue and proliferation of the epithelial layer with regular mature fibrous connective tissue, this layer was thicker that seen in the control group on this day. On day 30, there was severe fibrous connective tissue surrounded the suture material (Fig. 7). Mature regular fibrous connective tissue was infiltrated by inflammatory cells and complete thickness of epithelial layer.
Fig. 5: Histopathological section in the esophagus of control group on day 30 after operation showing proliferation of stratified squamous epithelium layer which extend as papillary projection (→) in sub epithelium layer. (H&E). 40×.
Fig. 6: Histopathological section in the esophagus of treated group on day 15 after the operation showing formation of fibrous connective tissue (→) in adipose tissue of omentum which was infiltrated by inflammatory cells. (H&E). 40×.
Fig. 4: Histopathologic section in the esophagus of control group on day 15 after the operation showing irregular direction of fibrous connective tissue (→) with inflammatory cells infiltration. (H&E). 40×.
Fig. 7: Histopathological section in the esophagus of treated group on day 30 after the operation showed fibrous connective tissue (→) surrounding the suture material (H&E). 40×.
68
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (65-70)
growth factor that enhance fibrosis and formation of fibrous connective tissue to the site it move to it (20). Also this study agree with the histopathological result showed formation of fibrous connective tissue in adipose tissue of omentum which infiltrated by inflammatory cells at 15 days post operation in treated group. The role of omentum is in believed enhances esophageal anastomosis healing from its ability to produce fibroblast growth factor. This compared with the histopathological result by the formation of mature regular fibrous tissue in treated group at 15 day while in control group the fibrous connective tissue is irregular, this factor may enhance fibrosis and adhesion at the site of anastomosis and later lead to increase of stenosis and this compared with the radiolographical results referred that’s mean degree of stenosis in treated group at 15 and 30 day post operation is higher than control group at the same period. The conclusion of this study revealed that non vascularized omental graft prevent leak when use around the anastomosis line in esophageal resection and at the same time enhanced healing of anastomosis line but it increase the stenosis at anstomosis site and increase the fibrosis and adhesion of anastomosis site with surrounding muscle and so interfere with the swallowing of patient by dysphagia and regurgitation.
Discussion Leakage one of serious complication seen in surgery of esophagus (7), for these reason some surgeon decided to use the pedicle omentum transposition for reinforcing the anastomotic suture line to reduce significantly the incidence of leak after esophagectomy and to decrease the morbidity and mortality of the procedure (12). Well vascularized flap of omentum provides of oxygen and nutrient for improve healing, moreover, the omentum delivers vascular endothelial growth factor and potent angiogenic growth factor(15), this substance gives ability to accelerate aneovascularization cross anastomosis line (16). from observation of experimental animals in post operation period for 30 days, all animal did not exhibit any signs of anastomosis leak and when euthanized the animals to take the specimen it showed that’s all anastomotic site was normally healed with out any dehiscence and this exactly appear radiographically in this study that’s no any leak of contrast media with present of stricture in the two groups was observed but it differ in its degree, this agree with previous study reported that in hand - sewn anastomosis there is a higher tendency for stricture formation after twolayer anastomosis than after single –layer anastomosis and disagree with (9) that refer not happen stricture in his study when used omentoplasty with diaphragmatic muscle in esophageal reconsrraction, in addition to that the adhesion which appeared in two groups of this study disagree with (17) who showed no any adhesion or stenosis at the site of anastomosis that used omental pedicle but it record increase in the thickness of esophagus at the anastomosis site and it related with the presence of omental pedicle, and the present study also disagree with other study (18) said stenosis of esophagus not appear at less than 30 day, and agree with (19) that demonstrated one layer suturing in esophageal anastomosis in the neck must be considered superior to the two layer procedure because of the lower incidence of non malignant stricture formation. The clinical sings of the treated animal recorded the present of dysphagia and regurgitation when in feeding solid food and need long time for eating and with the time the severity of the signs was decreased. When compared with control animals, that suffering from moderate signs of dysphagia and regurgitation that will disappear after several days and this appeared radiographically by higher degree of stenosis in treated group at 15 and 30 days post operation when compared with control group at the same period. This may be related with the role of omentum that’s enhance fibrosis and adhesion of anastomosis site with the surrounding muscle and this may be interfere with the freely movement of esophagus throw swallowing of food and lead to dysphagia and regurgitation, this agree with other study demonstrated that omentum contain in its histological structure fibroblast, fibrous cells and fibroblast
References 1. Lerut T, Coosemans W, Decker G, Deleyn P, Nafteux P, Vanraemdonck DV. Anastomotic complications after esophagectomy. Dig Surg.2002;19:92-98. 2. Young MM, Deschamps C, Allen MS, Miller DL, Transtek VF, Schleck CD, Airolero PC. Esophageal reconstruction for benign disease: self–assessment for functional outcome and quality of life. Anna Thora Surg.2000a;70:1799-1802. 3. Young MM, Deschamp SC, Transtek VF, Allen MS, Miller DL, Schleck CD, Pairolero PC. Esophageal reconstruction for benign disease: Early morbidity, mortality and functional results. Anna Thora Surg.2000b;70:1651-1655. 4. Finley RJ, Inculet RI. The results of esophagogastectomy without thoracotomy for adenocarcinoma of the esophagogastric junction. Ann Surg.1989;210:535-543. 5. Pavletic MM. Reconstructive esophageal surgery in the dog. Literature review and case report.J Am Anim Hosp Assoc.1981;17:435. 6. Ranen E, Shamir R, Johnston DF. Partial esophagectomy with single layer closure for treatment of esophageal sarcoma in 6 dogs. Vet Surg. 2004;33:428-434. 7. Binay Th, Shan ZC, Bo TZ. Omentoplasty versus no omentoplasty for esophagogastrostomy after surgery for cancer of cardia and esophagus. Indjcancer.2004;41(4):167-169. 8. Kim SH, Miller DJ, Young JE, Bennet WF, Urschel JD.Anesthesia leaks after esophagectomy for esophageal cancer comparison of thoracic and cervical anastomosis. Ann Thora Sardiovasc Surg. 2001;7:175-178. 9. Lee HB, Alam MR, Kim NS.Reconstruction of esophagus using pedicle diaphragm and omentum flaps in dogs: a case report. Vet Med. 2008;53(4):224-228. 10. Walther B, Johansson J, Holstein ChS, Zilling T. Cervical or thoracic anastomosis after esophageal resection and gastric tube reconstruction: Aprospective randomized trial comparing sutured neck anastomosis
69
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (65-70)
11.
12.
13.
14.
15.
with stapled intrathoracic anastomosis. Ann Surg.2003;238(6):803814.. Hayari L, Hershko DD, Shoshani H, Maor R, Mordecovich D, Shoshani G. Omentopexy improves vascularization and decreases stricture formation of esophageal anastomoses in a dogs model. J Pedia Surg.2004;39:540-544. Bhat MA, Dar MA, Lone GN, Dar AM. Use of pedicle omentum in esophagogastric anastomosis for prevention of anastomotic leak. Ann Thora Surg.2006;82(5):1857-1862. Jo WM, Shin JS, Lee IS. Mid-term outcomes of side â&#x20AC;&#x201C;to- side stapled anastomosis in cervical esophagogastrotomy. J Korean Med Sic.2006; 21:1033-1036. Athar MT, Chaudhry NL, Shako RK, Khan MA. Studies on end to end colonic anastomosis in the dog: A compassion of technique. Acta Vet Hung.1996;44:349- 354. Zhang QX, Magovern CJ, Mack CA, Budenbender KT, Ko W, Resengart TK. Vascular endothelial growth factor is the major
16.
17.
18. 19.
20.
70
angiogenic factor in omentum:Mechanism of omentum â&#x20AC;&#x201C;mediated angiogenesis. J Surg Res.1997;67:147-154. Morgan E, Lima O, Goldberg M, Ferdman A, Luk S, Cooper J. Successful revascularization of totally ischemic bronchial autografts with omental pedicle flap in dogs. J Thora Cardiovasc Surg. 1982;84:204-210. Younis BY. Esophageal anastomosis comparative study with or without use omtal pedicle in dog. [master's thesis]. College of vet Med, Univ of Baghdad.2002. Little AG, Naunheim KS, Ferguson MK, Skinner DB. Surgical management esophageal stricture. Ann Thora Surg.1988;45:144. Zieren HU, Muller JM, Pichlmaier H. Prospective randomized study of one or two - layer anastomosis following esophageal resection and cervical esophaogastrotomy. Br J Surg.1993;80:608-611. Hosgood G. The omentum the forgotten organ, physiology and potential surgical application in dog and cat. Comp Cont Ed Pract.1990;12:45-51.
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (71-80)
Treatment of hyper-granulated limb wounds in horses O. A. Bader1 and M. J. Eesa2 1
2
Department of Surgery and Theriogeniology, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Department of Surgery and Obstetrics, College of Veterinary Medicine, University of Baghdad, Baghdad, Iraq (Received February 26, 2008; Accepted May 19, 2010)
Abstract This study was performed to investigate the different methods of treating hyper granulation tissue on experimentally induced wounds in equine limbs. Wounds were induced by removal of a skin patch and subcutaneous tissue for about 5-7 cm width and 6-8 cm in length from the dorsal and lateral aspect of the fore and hind limbs below the carpal and tarsal joints. The wounds were left open without treatment and the animals were trained 2-2.5 hours every day for about 3-5 weeks until hyper granulation tissue was developed. The schedule for the treatment of hyper granulation was divided into five groups each contained eight wounds of hyper granulation tissue; each main group was divided into two subgroups. The subgroups of first, second, third, fourth and fifth groups were treated by the following schedules: bandage alone; copper sulphate ointment 10%; silver nitrate ointment 2%; red mercury ointment 11%; and laser therapy (at a total dose of 9.72 Joule / cm2) respectively. While the second subgroups were treated by surgical resection of the hyper granulation tissue, followed by the same treatments applied on the first subgroup. The bandage for all experimental groups was changed every 48 hours until healing was occurred. The clinical and histological observation of the first group revealed that the healing take long period comparing with other groups. The mean of wound healing were 65 days in non surgical removal of hyper granulation tissue subgroup, while 57 days in surgical removed of hyper granulation tissue subgroup. The results of the second, third, fourth groups revealed that the caustic material especially red mercury has a role in healing processes through depressing the hyper granulation tissue. The mean of wound healing of the second group was 42.25 days in non surgical removal of hyper granulation tissue subgroup while 37.25 days in surgically removed hyper granulation tissue subgroup. In the third group the mean of wound healing was 45.75 days in non surgical removal of hyper granulation tissue subgroup while 44.75 days in surgically removed hyper granulation tissue subgroup. While in the fourth group the mean of wound healing was 39 days in non surgical removal of hyper granulation tissue subgroup while 36 days in surgically removed hyper granulation tissue subgroup. In the fifth group the clinical and histological observation revealed that the using of laser lead to reduce the period for wound healing significantly comparing with other groups. The mean of wound healing was 25 days in non surgical removal of hyper granulation tissue subgroup while 20 days in surgically removed hyper granulation tissue subgroup, so that the laser was the best in this study and the using of surgical removal is better than of non surgical removal. Keywords: Hyper granulation; Limb wounds; Equine. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
عالج الفرط الحبيبي لجروج القوائم في الخيول ٢
و محمد جواد عيسى١عمر عادل بدر
، الموصل، جامعة الموصل، كلية الطب البيطري، فرع الجراحة وعلم تناسل الحيوان١ العراق، بغداد، جامعة بغداد، كلية الطب البيطري، فرع الجراحة والتوليد٢ الخالصة .أجريت ھذه الدراسة لبيان تأثير طرائق عالجية مختلفة لعالج حالة فرط النسيج الحبيبي في الجروح المحدثة تجريبيا في قوائم الخيل سم عرضا وتم إحداث الجروح٧-٥ سم طوال و٨-٦ تم إحداث الجروح بإزالة جزء من الجلد والنسيج تحت الجلد بمساحة تراوحت بين
71
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (71-80)
في الجھة الظھرية والوحشية لكال القائمتين األمامية والخلفية أسفل مفصل الرسغ بعد ذلك تركت الجروح مفتوحة ومن دون عالج وتم تم. أسابيع لحين ظھور فرط النسيج الحبيبي بشكل واضح٥-٣ ترويض حيوانات التجربة يوميا لمدة ساعتين – ساعتين ونصف ولمدة . جروح وكل مجموعة رئيسية قسمت إلى مجموعتين ثانويتين٨ تقسيم حيوانات التجربة إلى خمس مجاميع رئيسية ضمت كل مجموعة مرھم، عولجت المجاميع الثانوية األولى للمجاميع الرئيسية األولى والثانية والثالثة والرابعة والخامسة باستخدام العصابة لوحدھا ( على٢ سم/ جول٩.٧٢ والليزر )بجرعة كلية%١١ مرھم الزئبق األحمر، %٢ مرھم نترات الفضة، %١٠ كبريتات النحاس أما في المجاميع الثانوية الثانية فقد عولجت باستخدام اإلزالة الجراحية للنسيج الحبيبي الزائد ومن ثم تم وضع نفس المواد السابقة.التوالي أوضحت النتائج السريرية والنسجية أن المجموعة األولى استغرقت وقتا طويال مقارنة مع.التي تم وضعھا في المجاميع الثانوية األولى يوما أما في٦٥ باقي المجاميع األخرى حيث بلغ معدل التئام الجروح في المجموعة الثانوية التي لم يتم إجراء اإلزالة الجراحية فيھا بينت المجاميع الثانية والثالثة والرابعة التي استخدمت فيھا المواد. يوما٥٧ المجموعة الثانوية التي تم إجراء اإلزالة الجراحية فيھا الكاوية وخاصة الزئبق األحمر أن ھذه المواد لعبت دورا مھما في التئام الجروح من خالل تثبيط نمو النسيج الحبيبي المفرط حيث كان يوما أما في المجموعة الثانوية األخرى كان٤٢.٢٥ معدل التئام الجروح في المجموعة الثانوية التي لم يتم إجراء اإلزالة الجراحية فيھا أما في المجموعة الثالثة كان معدل التئام الجروح في المجموعة الثانوية التي لم يتم إجراء. يوما للمجموعة الرئيسية الثانية٣٧.٢٥ بينما في المجموعة الرابعة كان معدل التئام. يوما٤٤.٧٥ يوما أما في المجموعة الثانوية األخرى كان٤٥.٧٥ اإلزالة الجراحية فيھا أشارت. يوما٣٦ يوما أما في المجموعة الثانوية األخرى كان٣٩ الجروح في المجموعة الثانوية التي لم يتم إجراء اإلزالة الجراحية فيھا النتائج السريرية والنسجية للمجموعة الخامسة أن استخدام الليزر أدى إلى تقليل فترة التئام الجروح وبشكل ملحوظ مقارنة مع المجاميع يوما أما في المجموعة الثانوية٢٥ األخرى حيث بلغ معدل التئام الجروح في المجموعة الثانوية التي لم يتم إجراء اإلزالة الجراحية فيھا لذلك عد الليزر األفضل في ھذه التجربة أيضا فان إجراء اإلزالة الجراحية لفرط النسيج الحبيبي يعد أفضل من. يوما٢٠ األخرى كان .عدم إجرائھا The animals were healthy and did not suffer from any affection.
Introduction Equine limbs suffer traumatic wounds more than other animals and these wounds mostly heal by second intention healing which may be associated with some complications such as wound infections, tumor or hyper granulation tissue (1-3). The natural response of the body to form granulation tissue was resists infection and helps to full cavity of wounds, beside that creates a good surface for migration of epithelial cells to complete healing (4,5). Many factors may help the formation of hyper granulation tissue in equine limbs such as body size, age of animal, wound location, early wound care such as topical medical application, bandage and casting help to minimize hyper granulation tissue formation (1,6-10). Treatments of hyper granulation tissue depend on the amount of excessive tissue formation and duration of time, many methods were used in this field such as caustic material (11-13), cryogenic surgery (14,15), surgical resection which is regarded as a good method because it dose not affect on epithelization when compared with chemical material (3,7,11), topical steroids (16), skin grafting was used after resection of hyper granulation tissue from a large area (7,17) and low-power laser therapy in high doses (18). The aim of this study was to find a good method for treating hyper granulation tissue through comparing several methods of treatment.
Inducing hyper granulation tissue Animals were anaesthetized by using acepromazine (0.02 mg/kg B.W) intravenously as a premedication. Ten minutes later using thiopental sodium (1g/90 kg B.W) intravenously and repeated at a half doses if needed. Clipping and shaving the area of lateral and dorsal aspect of metacarpal and metatarsal bones. Wound was induced by removal of a skin patch with subcutaneous tissue for about 5-7 cm width and 6-8 cm length from the dorsal and lateral aspect of fore and hind limbs of metacarpal and metatarsal bones (Figure 1 a). The wounds were left open and the animals were trained daily for 2-2.5 hours/ day for about 35 weeks, until hyper granulation tissue was developed (Figure 1B). Treatment The experimental animals were divided into five groups, each contained four animals and each group was divided into two equal subgroups, each subgroups consisted of four wounds; First group (Control): The first four wounds were treated by application of pressure bandage over the hyper granulation tissue while the other four wounds were treated by surgical resection of hyper granulation tissue to the level of skin, then application of pressure bandage. Second group: The first four wounds were treated by using copper sulphate ointment10% locally with pressure bandage, while the other four wounds were treated by surgical removal of hyper granulation tissue and using copper sulphate ointment
Materials and methods Twenty horses of local breed 3-8 years in age, 250-400 Kg in weight and from both sexes were used in this study.
72
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (71-80)
10% with pressure bandage. Third group: The first four wounds were treated by application of silver nitrate ointment 2% locally with pressure bandage and the other four wounds were treated by surgical resection of hyper granulation tissue, then using silver nitrate ointment 2% with bandage. Fourth group: The first four wounds were treated by application of red mercury ointment 11% locally with pressure bandage, other four wounds were treated by surgical resection of hyper granulation tissue and using red mercury ointment 11% with bandage. Fifth group: The first four wounds were treated by laser radiation using Helieumneiun (He-Ne), Infrared (IR) with bandage, (He- Ne 6x10 -3 and IR 3x10 -3). Twelve sessions, one day rest between 3 sessions, the duration of radiation was 18 minute for each day. The amount of energy of He- Ne (0.54 J/cm2) and (0.27 J/cm2) for IR in each session. The total amount of energy of He- Ne, IR for twelve sessions was 6.48 J/cm2, and 3.24 J /cm2, respectively, so that the total amount was 9.72 J/cm2, other four wounds were treated by surgical resection of hyper granulation tissue, then using laser radiation as same in above with pressure bandage. In all first subgroups, bandage was changed every 48 hours until hyper granulation tissue became at the level of skin and epithelial cells migrate to the area, while in the second subgroups on which hyper granulation resection were performed (Figure 1C), the bandage was remained until wound became stable and epitheliazation started to invade the area. Clinical follow up of the animals during experimental period was practiced i.e. animal's appetite, wounds condition and degree of healing, lameness, and measurement of the thickness of hyper granulation tissue before and after treatment by using a caliper. Biopsies were taken from the hyper granulation tissue before and after treatments at the period of clinical healing from all groups to identify the nature of healing and to compare the degree of healing between these five groups. Hematoxylin and Eosin, MasonTtrichrom and Blue Alishin staining (19 - 21) were used to investigate the nature of tissue. Statistical analyse were done by using analysis of variance. The difference was determined by LSD at the level of (P<0.05), and using statistical program SPSS (SPSS Inc).
First group: in non surgical resection subgroup, pus formation was observed during dressing but there was no sensation, lameness or bleeding. While in surgical excision of hyper granulation tissue subgroup, the signs were the same as above but less pus formation was observed. Second group: the clinical signs were similar to that seen in the first group, but less in degree. Third group: in non surgical resection subgroup, excessive amount of pus and bleeding observed during bandage change but the discharge decreased gradually, tissue sloughing especially at the central lesion, pain and lameness, were observed. The signs of surgical resection subgroup were similar to the non surgical resection once. Fourth group: both the surgical and non surgical resection subgroups, show similar clinical signs in the form of little amount of pus exhibited during bandage change, no bleeding, pain or lameness during treatment were observed. Fifth group: in non surgical resection of hyper granulation tissue subgroup the signs revealed that the superficial layers of the hyper granulation tissue dissolved after 10 minutes of laser radiate, and at the end of each radiation session, the tissues appeared as it was cooked. There was no pain or lameness, with little pus but without bleeding at the time of bandage changing. Clinically the partial or complete wound healing after treatment as in 1st, 2nd, 3rd, 4th and 5th groups were appeared in (Figures 1D), (Figures 2A, 2B, 2C and 2D) and (Figures 3A, 3B, 3C and 3D). In all experimental animals wound healing of hind limbs was faster than of fore limbs, and of lateral aspect was faster than wounds located on dorsal aspect of both fore and hind limbs. Different degrees of tissue depression were recorded by using caliper in non surgical resection of hyper granulation tissue of experimental subgroups, after using pressure bandage in first group and different caustic material in 2nd, 3rd and fourth group or laser therapy as in fifth group. This variation of depression was summarized in Table 1. The mean degrees of wound healing for the experimental groups were recorded and summarized in Table 2. The histopatholgical findings of the hyper granulation tissue before treatment revealed severe proliferation of fibroblast with minimal amount of collagen fibers. There was severe infiltration of mononuclear and multinuclear inflammatory cells around newly blood vessels (Figure 4 A).While the microscopic findings for the biopsies taken at the period of clinical healing revealed that the formation of epithelial cells from the edge of skin and invade the area to cover it (Table 3).
Results The clinical findings revealed that the average thickness of hyper granulation tissue were 2 - 2.25 cm after 3-5 weeks from wounds inducing (Figure 1B).
73
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (71-80)
Figure 1: (A) Surgical resection of skin flap from lateral surface of fore limb. (B) Hyper granulation tissue formation after 35 days of inducing wound. (C) Complete resection of hyper granulation tissue after 5 weeks of inducing wound. (D) Partial wound healing after 40 days of treatment in non surgical resection of hyper granulation tissue in control group. Table 1: Mean and standard error of depression of non surgical resection of hyper granulation tissue. The different letters means significances difference at the level of P<0.05. Days 2 6 10 14 18 22 26 30 34 Mean
Control 19.4±0.2646 a 17.1±0.6884 a 15.1±0.5598 a 12.9±0.3851 a 10.6±0.3816 a 8.3±0.5023 a 5.3±0.4516 a 2.6±0.2415 a 0.8±0.2926 a 10.9±0.7402 a
Copper sulphate 17.2±0.4262 b 13.5±0.4491 b 8.1±0.4328 b 3.4±0.3425 b ---------------------
Silver nitrate 17.1±0.2780 b 14.55±0.2483 b 9.2±0.2750 c 5.7±0.1871 c 2.4±0.1291 c 0.4±0.1291 b -------------
Red mercury 17.19±0.4546 b 14.0±0.5105 b 6.1±0.3198 d 1.5±0.2217 d ---------------------
Laser 15.3±0.263 c 1.7±0.2944 c -----------------------------
5.4±0.8269 b
6.2±0.2850 b
5.0±0.8503 b
2.5±0.7025 c
74
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (71-80)
Figure 2: (A) Partial wound healing after 35 days of treatment in surgical resection of hyper granulation tissue in control group. (B) Partial wound healing after 35 days of treatment in non surgical resection of hyper granulation tissue in second group. (C) Complete wound healing after 35 days of treatment in surgical resection of hyper granulation tissue in second group. (D) Partial wound healing after 40 days of treatment in surgical resection of hyper granulation tissue in third group. Table 2: Show the mean of wound healing in experimental groups. The different letters means significances difference at the level of P<0.05. Groups Control Copper sulphate Silver nitrate Red mercury Laser
Surgical resection With out surgical resection With surgical resection With out surgical resection With surgical resection With out surgical resection With surgical resection With out surgical resection With surgical resection With out surgical resection With surgical resection
75
Degree of healing /days 65±0.9129 a 57.25±1.25 b 42.25±2.2867 ce 37.25±2.0156 cf 45.75±2.1747 b 44.75±1.75 e 39±1.9579 cg 36±2.2730 dfg 25±1.0801 h 20±0.8165 h
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (71-80)
Figure 3: (A) Partial wound healing after 20 days of treatment in non surgical resection of hyper granulation tissue in fourth group. (B) Partial wound healing after 18 days of treatment in surgical resection of hyper granulation in fourth group. (C) Partial wound healing after 15 days of laser treatment in non surgical of hyper granulation tissue in fifth group. (D) Partial wound healing after 11 days of laser therapy in surgical resection of hyper granulation tissue in fifth group. granulation tissue in equine limbs caused by epidermal growth factors and fibroblast growth factor. The results indicated that wound healing of distal fore limbs were slower than distal hind limbs at the same location, this may be due to skin tension or anatomical variation and this coincide with (6). In addition to that my opinion of this result may be due to over 60-70 % of body weight loaded by fore limbs so that it gets more tension and movement than hind limbs. The wound healing of lateral aspect of fore and hind limbs was faster than dorsal aspect of fore and hind limbs. This phenomenon may be due to the tension which is more in dorsal surface than in lateral aspect beside that the blood supply was less in dorsal aspect than in lateral aspect, this fact coincides with (6).
Discussion Healing of equine limb's wounds are usually associated with complications such as hyper granulation tissue, infection by bacteria, virus or fungus and may affect by tumor (22,23). The proliferation stage of wound healing in equine is important due to the formation of granulation tissue to repair the wound not stay at the level of skin edge, but continue to grow over the level of skin especially at the lower limbs (24). In this study open wound induced in lower limbs after 3-5 weeks of training produced hyper granulation tissue. Its formation might be due to high skin tension and excessive movement of the area, in addition the decrease of blood supply at this region. This opinion is in agreement with authors (1), while (23) said that the formation of hyper
76
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (71-80)
Figure 4: (A) Granulation tissue, which characterize by proliferation of fibroblast (a) and infiltration of inflammatory cells (b) and collagen fibers(c). H&E, 100 X. (B) Dense collagen fibers formation (a) with newly blood vessels (b). Non surgical resection of hyper granulation tissue of control group. Mason Trichrom, 100 X. (C) Congestion of blood vessels (a), proliferation of collagen fibers (b), epithelization appeared (c). Non surgical resection of hyper granulation tissue of second group. H&E, 75 X. (D) Congestion of blood vessels (a), proliferation of collagen fibers (b). Surgical resection of hyper granulation tissue of second group. Mason Trichrom, 100 X. Surgical removal of hyper granulation tissue promote healing, this may be due to the immediate resection of hyper granulation tissue made the area at the level of skin so it gives more chance for proliferation of epithelial cells to migrate into the excision site. This appears in results of surgical resection of hyper granulation tissue in first group as compare with non surgical resection of hyper granulation tissue of the same group (Table 2), this agreement with other workers (11). The role of copper sulphate ointment on depression of hyper granulation tissue appeared from results in (Table 2). The mean degree of wound healing were 42.25 ± 2.2867
and 37.25 ± 2.0156 days of non surgical and surgical resection of hyper granulation tissue respectively. This means that copper sulphate can be able to depress hyper granulation tissue and lead to enhance healing. The histopathological findings was documented these results and there was significant difference between this group and first group (Table 3), this fact coincides with (13). The mean degree of wound healing was 45.75 ± 2.1747 days with non surgical and 44.75 ± 1.75 days for surgical resection of hyper granulation tissue in third group (Table 2). This indicated that silver nitrate ointment has the ability to depress hyper granulation tissue and enhance healing
77
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (71-80)
Figure 5: (A) proliferation of newly blood vessels (a) collection of collagen fibers which appear vertical in position with epidermis (b). Non surgical resection of hyper granulation tissue of third group. Alishin blue, 100 X. (B) Sever proliferation of fibroblast with collection of collagen fiber (a) and newly blood vessels formation (b). Surgical resection of hyper granulation tissue of third group. H&E, 100 X. (D) Proliferation of fibroblast (a), infiltration of mono inflammatory cells (b). Surgical resection of hyper granulation tissue of fourth group. Alishin blue, 400 X. (C) Granulation tissue formation (a), newly blood vessels formation (b). Non surgical resection of hyper granulation tissue fourth group. Mason Trichrome, 100 X. when compare with first group, this agree with author (11). On the other hand lameness associated with this group may be due to pain. The pain may result from sever irritation by silver nitrate ointment which affect on tissue and produce sever inflammation or may result from absorption of silver nitrate and affect on nerve ending. This coincide with other worker (25). Bleeding, severe irritation, pus formation and lameness were considered as a disadvantages of silver nitrate ointment which recorded in this study. The histopathological findings revealed that hyperkeratosis and necrosis which may be due to severe irritation of silver nitrate ointment on tissue. The stimulation of keratinocytes
cells need more study to investigate the effect of silver nitrate ointment in different percentage on hyperkeratosis. The mean degree of wound healing of red mercury ointment in fourth group were 39 Âą 1.9579 and 36 Âą 2.2730 days of non surgical and surgical resection of hyper granulation tissue respectively. The results indicated that this ointment produced good depression on hyper granulation tissue as compared with copper sulphate and silver nitrate ointments and create good chance for epithelization to complete healing. This may be due to stimulation of phagocytes to produce growth factor, which derived from fibroblast (23).
78
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (71-80)
There was no pain in laser therapy, this may be due to the increasing endorphin, metenkephalin and betaendorphin which decrease pain, this agree with (26,27). Table 3: Show histopatholgical study of all groups and subgroups.
Groups
Non surgical resection of hyper granulation tissue
Control
Excessive collagen fibers formation mixed with sever mononuclear inflammatory cells. Minimal proliferation of newly blood vessels (Figure 4A).
Copper sulphate
Figure 6: (A) Collection of collagen fiber (a), newly blood vessels formation (b). Non surgical resection of hyper granulation tissue of laser therapy. Mason Trichrom, 200 X. (B) Infltration of mononuclear inflammatory cells (a) through collagen fibers. Surgical resection of hyper granulation tissue of laser therapy. Mason Trichrom, 400 X.
Silver nitrate
The results of laser therapy were exhibited that there was significant difference in between this group and other groups of this study. The mean degree of wound healing were 25Âą 1.6801 and 20Âą 0.8165 days in non surgical and surgical resection respectively. The ability of laser to depress hyper granulation tissue may be due to depression of growth factor which associated with granulation tissue formation, beside that the laser may affect on proliferation of macrophage which contribute to stimulate fibroblast to produce collagen fiber, this agreed with (26,27). Laser therapy caused increasing temperature which change the nature of protein or lead to vaporization of liquid in the tissue. Laser leads to increase temperature of water in the intracellular cells which causes burst of cells (28).
Red mercury
Laser
79
Fibroplasias with infiltration of inflammatory cells. Newly blood vessels formation and epithelization was appeared (Figure 4C). Sever fibroblastic, nidus of inflammation with infiltration of inflammatory cells. Sever collection of collagen fibers and blood vessels to form a rod like taken the vertical position with epidermal layer (Figure 5A). Proliferation of fibroblast and collection of collagen fiber. Sever infiltration of mononuclear and multinuclear inflammatory cells (Figure 5C). Mature granulation tissue which mixed with mononuclear inflammatory cells. Formation of newly blood vessels (Figure 6A).
Surgical resection of hyper granulation tissue Fibroplasias with dense collagen fibers. Mild infiltration of mononuclear inflammatory cells. Sever proliferation of newly blood vessels like cluster (Figure 4B). Sever fibroplasias and newly blood vessels formation with infiltration of mononuclear inflammatory cells (Figure 4D). Fibroplasias and there was nidus of newly blood vessels which surrounded by inflammatory cells. Precipitate of hemosidrin. Necrosis of epidermal layer (Figure 5B). Sever proliferation of fibroblast, decrease the amount of collagen fibers, infiltration of mononuclear cells around newly blood vessels (Figure 5D). Collagen fibers which infiltrated with mononuclear inflammatory cells. Proliferation of newly blood vessels (Figure 6B).
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (71-80)
8. Wilmink JM, Stolk PWT, van Weeren PR, Barneveld A. Differences in second intention wound healing between horses and ponies: Macroscopic aspects. Equine Vet J.1999;31:53-60. 9. Wilmink JM, Nederbraagt H, van Weeren PR, Stolk PWT, Barneveld A. Differences in wound contraction between horses and ponies :the in vitro contraction capacity of fibroblast. Equine Vet J.2001;33:499505. 10. Harris B, Eaglstein WH, Falanga V. Basal cell carcinoma arising in venous ulcers and mimicking granulation tissue. J Dermatol Surg Oncol. 1993;19(2):150-152. 11. Ovington LG. What to do with too much of a good thing. Cover wound care.1999;4(4):680-681. 12. Cultar RS.Copper sulphate treatment of proud flesh. Vet Rec.1973;92(26):711-712. 13. Frank ER. Wounds and infection. In Veterinary surgery 7th ed. Jain SK.CBS Publishers and distributors. India.1981;pp:47-48. 14. Fretz PB, Martin GS, Jacobs KA. Treatment of exuberant granulation tissue in the horse: Evaluation of four methods. Vet Surg.1983;12:137-140. 15. Seim HB. Mechanisms of cold induced cellular death. Vet clinc North Amer Small Anim Pract.1980;10:755. 16. Barber SM, Caron J. The effect of bandaging on second intention wound healing in the horse. Vet Surg.1987;16:82. 17. Stashak TS. Free skin grafting in the horses. Vet Clinc North Amer Large Anim Pract.1984;12:315. 18. Worth M. Low level laser therapy provides new treatment possibilities. Wound Equine Vet 1998;3(3):7-18. 19. Luna LG. Manual of histologic staining methods of the armed forces institute of pathology,3rd ed. MeGraw Hill Book Co., Inc,New York, USA.1968;pp:94-95. 20. Drury RAB, Wallington EA. Carleton's histological techniques 5th ed. Oxoford university press,London.1980;pp:57-68,140-142. 21. Pearse AGE. Histochemistry theoretical and applied 4th ed. Analytical technology, Churchill Livingston, Edinburgh. 1985;pp:1,849. 22. Miller RM.Sound and healthy :proud flesh. Western Horseman. 1993;58(4):33-34. 23. Cochrance CA, Freeman KL, Knottenbelt DC. Effect of growth factors on the characteristics of cells associated with equine wound healing and sarcoid formation. Wound Rep Reg.1996;4(1):65-85. 24. Bertone AL. Principles of wound healing. Vet Clin North Am :Equine Pract. 1989 b;5(3):449-463. 25. Sibbald RG, Williamson D, Orsted HL, Campbell K, Keast D, Krasner D, Sibbald D. Preparing the wound bed-debridement, bacterial balance and moisture balance. Ostomy wound management. 2000;46(11):1435. 26. Ebert DW, Bertone AL, Robert C. Effect of irradiation with a lowintensity diod laser on the metabolism of equine articular cartilage in vitro. Am J Vet Res.1998;59(12):1613-1618. 27. Ramey DW, Basford JR. Laser therapy in horse. Compendium 2000;22(3):263-271. 28. Klause SE, Roberts SM. Lasers and Veterinary surgery. Compendium small Anim.1990;12(11):1565-1576.
Conclusions This study indicated that wounds healing of surgical resection of hyper granulation tissue was faster than non surgical resection, and the wound healing of distal fore limbs were slower than distal hind limbs and the dorsal aspect of distal limbs were slower than lateral aspect of limbs. Different caustic materials were used in this study which lead to depress hyper granulation tissue at varying level and promote healing at different degrees. The disadvantage of silver nitrate ointment causes necrosis, slough, pain and lameness, while red mercury ointment gave best results when compared with other caustic materials. In addition to that the literature exhibit that red mercury ointment not used by other authors in treatment of hyper granulation tissue in equine. The laser therapy gets the best results when compare with other methods used in this study. The literature appeared that the laser therapy not widely studied in this field, in addition to that the histopathological study not used by other worker to document the results specially in laser therapy of hyper granulation tissue. References 1. Jacobs KA, Leach DH, Fretz PB, Townend HGG. Comparative aspects of the healing of excisional wounds on the leg and body of horses. Vet Surg.1984;13:83-90. 2. Monahan CM, Champman MR, Taylor HW, French DD, Klei TR, Knottenbelt DC. Equine wound management: Are there significant differences in healing at different sites on the body. Vet Dermatol.1997;8(4):273-290. 3. Lindsay WA. Wound treatment in horses: what to know about second intention healing. Equine pract.1988;10:396-403. 4. Lee AG, Swaim SF. Granulation tissue: how to take advantage of it in management of open wounds. Como contin Educ pract Vet.1988;10:163. 5. Stashak TS.Equine wound management.1st ed, Philadelphia, lea and Febiger.1991; pp:40-44. 6. Bertone AL, Sullins KE, Stashak TS, Norrdin RW. Effect of wound location and the use of topical collagen gel on exuberant granulation tissue formation and wound healing in the horse and pony.AMJ Vet Res. 1985;45(7):1438-1444. 7. Bertone A.L. Management of exuberent granulation tissue. Vet Clinc North Amer.. Equine Pract 1989; 5 (3) :551-562.
80
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (81-85)
Effect of lysate of Sarcocystis gigantea in rats N. S. Al-Hyali1, E. R. Kennany2 and A. F. Al-Taei1 1
Department of Microbiology, 2 Department of Pathology and Poultry Diseases, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq (Received June 22, 2009; Accepted June 30, 2010)
Abstract This study was conducted to examine the effect of lysate isolated from macrosarcocysts of Sarcocystis gigantea after inoculation into albino rats to follow up the pathological effect on heart, lung and skeletal muscle fibers. The results showed the presence of pathological changes, represented by hyperatrophy, congestion, associated with hyaline degeneration in myocardium of heart. In lung tissues severe congestion in each right and left lobes concomitant with emphysema, thickening was observed in wall of branchioles and blood vessels at 3-7 days have been seen. In skeletal muscles the result revealed the presence of multinecrotic areas which infiltrated with inflammatory cells accompanied by hyaline degeneration in muscle fibers at 3-7 days after treatment. Keywords: Sarcocyst; Lysate; Pathological lesions; Rat; Macrosarcocysts. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
في الجرذانSarcocystis gigantea تأثير الاليست لطفيلي ١
و احالم فتحي الطائي٢ انتصار رحيم الكناني،١نادية سلطان الحيالي
العراق، الموصل، جامعة الموصل، كلية الطب البيطري، فرع االمراض وامراض الدواجن٢ ، فرع االحياء المجھرية١ الخالصة Sarcocystis تضمنت الدراسة الحالية معرفة تاثير الاليست المعزول م ن االكي اس الع ضلية كبي رة الحج م لطفيل ي المكي سات الع ضلية اظھ رت النت ائج. بعد حقنه في الجرذان البيضاء لمالحظ ة الت اثيرات المرض ية عل ى ك ل م ن القل ب والرئ ة والع ضالت الھيكلي ةgigantea Hyaline ي صاحبھما ت نكس زج اجيCongestion واحتق انHyperatrophy وجود تغيرات مرض ية عياني ة ون سجية تمثل ت بوج ود ت ضخم Emphysema اما في الرئتين فقد لوحظ وجود االحتقان ال شديد ف ي ك ل م ن الف ص االيم ن واالي سر يرافقھ ا نف اخ، في القلبdegeneration
ام ا ف ي الع ضالت الھيكلي ة فق د ل وحظ وج ود.وتثخن جدار القصيبات وجدار االوعية الدموية عند الي وم الثال ث واس تمر ال ى الي وم ال سابع العديد من البؤر النخرية المترشحة بالخاليا االلتھابية مع التنكس الزجاجي في االلياف العضلية في اليوم الثال ث واس تمر ال ى الي وم ال سابع .من المعاملة of S. cruzi bradyzoites was shown to possess lectin activity separable from toxin activity (2). The lysate produced a reaction in rabbit similar to that produced by bacterial endotoxin, which have the ability to stimulate macrophages to produce the monokine called cachectin or tumor necrosis factor TNF, the TNF has been implicated as a cause of a profound wasting, loss of body weight, emaciation, this effect results from the action of TNF-α or other cytokines, either directly suppressing insulin-like growth factor 1 (1GF-1) in various tissue or acting indirectly via reduced
Introduction The sexual reproduction of the S. gigantea occurs in the intermediate hosts (sheep, goats, cattle or horses), eventually forming cysts in the skeletal muscle (Sarcocysts) that are filled with bradyzoites. Lysates is a bradyzoites extract of a sexual stages of Sarcocystis spp. are toxic when injected into various mammalian hosts such as rabbits and rats (1). The substances imparting toxicity have not been chemically defined and their mechanism of action, a lysate
81
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (81-85)
emphysema (Fig. 1 and 2). Also at seven days the lesions that mentioned above are seen, in addition to thickening in wall of bronchiol, hyperplasia in lymph node around bronchi as well as accumulation of inflammatory exudate in lumen of bronchi (Fig. 3) pulmonary arteries, revealed hypertrophy of endothelium and thickening in wall due to proliferation in vascular smooth muscle cells in the media (Fig. 4), congestion of blood vessels and atelechtasis also noticed (Fig. 5). Histopathological section of heart revealed congestion of blood vessels, vacuolar degeneration of myocyte associated with infiltration of inflammatory cells after 3 days (Fig. 6), while after 7 days edema and hyaline degeneration have been seen (Fig. 7).
feed intake or by action on the pituitary gland (3,4). Lysates which has been regarded as the cause of eosinophilic myositis (EM) syndrome, which has been described as a subacute to chronic inflammatory process of skeletal and cardiac muscle particulate and soluble antigen from schizont and merozoites may attract the large number of cells observed perivascularly and interstitially (5). The present study was to explored the effect of lysate which was isolated from S. gigantea on weight and pathology in albino rats. Materials and methods Twenty male 4-5 weeks old albino rat were used, they were divided into two equal groups. Group 1 (G1) is the control group (not inoculated with lysate), Group 2 (G2) was inoculated, intraperitonealy (IP) with lysate of S. gigantea which was prepared according to (2), each rat recieved about 1 ml the lysate contained 1 mg total protein per ml, these animal were revealed in laberatory house of Vet. Medicine. Rats weight obtained before and after inoculation during 3-7 days, rats were sacrified 3-7 days post inoculation to determine the gross pathological changes and speciemens were taken from lung, heart and skeletal muscle and fixed in 10% neutral formaline, processed routinely by ethyl alcohol and xylol and 4-6Âľm thick sections were prepared and stained with hematoxylin â&#x20AC;&#x201C; eosin stain (H&E) (6).
Table 1 : Effect of lysate on rat weight via three and seven days. Period of inoculation (days)
3
Results 7
Animal weight Table (1) showed reduction in weight of rats treated with lysate after 3 days in G2 as compared with control group. This reduction continuously at seven days the mean of weight gains reached 181.2 gm as compared with control rats which reached to 204.2 gm. Gross pathological finding Macroscopic findings After 3 days of inoculation of lysate into rats, gross pathological change which occur characterized by: In lung, lesions represented by severe congestion with some areas of gray hepatization in both right and left lobes. These lesions continuously at 7 days after inoculation. Heart, showed cardiomegaly at 3-7 days of inoculation. Skeletal muscles revealed multifocal discrete 2 mm-5 cm in diameter, greenish to yellowish nodules within the affected muscles.
Animal weight (gm) Group 1 (control) Group 2 (treated with lysate) 201 203 250 207 216 225 213 210 210 213 Mean = 218 Mean = 211.6 205 140 220 180 201 201 190 190 205 195 Mean = 204.2 Mean = 181.2
b a
Histopathological findings Histological sections of lungs rat treated with lysate at 3 days showed multifocal areas of necrosis infiltrated with neutrophils and macrophags and some eosinophils in addition to hemorrhage, thickening in wall of alveoli and
Fig. 1: Histomicrograph of rats lung inoculated with lysate isolated from S. gigantea after 3 days showed inflammatory foci (a) emphysema (b). H&E. 400X.
82
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (81-85)
b a Fig. 5: Histomicrograph of rats lung inoculated with lysate isolated from S. gigantea after 7 days, revealed atelechtasis in alveoli (â&#x2020;&#x2019;). H&E. 400X.
Fig. 2: Histomicrograph of rats lung inoculated with lysate isolated from S. gigantea after 3 days showed thickening in wall of alveoli (a) and bronchiol (b). H&E. 400X.
a
c
b
Fig. 6: Histomicrograph of rats heart muscle inoculated with lysate isolated from S. gigantea after 7 days, showed infiltration of inflammatory cells (a), hyaline degeneration (b) and edema (c). H&E. 400X.
Fig. 3: Histomicrograph of rats lung inoculated with lysate isolated from S. gigantea after 3 days revealed hyperplasia in lymphoid follical of bronchiol (â&#x2020;&#x2019;). H&E. 400X.
a
b a
b
Fig. 4: Histomicrograph of rats lung inoculated with lysate isolated from S. gigantea after 7 days, revealed thickening in the wall of pulmonary blood vessels (a) with congestion (b). H&E. 400X.
Fig. 7: Histomicrograph of rats heart inoculated with lysate isolated from S. gigantea after 7 days showed infiltration of inflammatory cells (a) and thickening in the wall of blood vessels (b). H&E. 400X.
83
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (81-85)
cachexia, it has been observed that effect of lysate of the sarcocysts bradyzoite resembles to the acute phase of sarcocystosis in calves (9), they reported that those result from interleukin-1(IL-1) suppression of food intake and reduction of gastric motility (10) as well as reduced gut motility possibly due to elevated somatostatin (SSN) levels (11), elevated levels of plasma glycerol and free fatty acids may also contribute to decreased appetite, 1L-1, through the stimulation of lymphocytes to produce 1L-2, stimulates adipose tissue lipolysis ; TNF-α by suppressing synthesis of lipoprotein lipase, also contributes to adipocyte lipolysis, also it may be correlated with abnormal nitrogen metabolism that appear to result from the malabsorption and internal recycling of nitrogen lysate (acute sarcocystosis) associated with skeletal muscle wasting resulting from muscle protein degradation to produce amino acids needed during the acute phase response. TNF-α also blocks myogenesis, preventing skeletal muscle from competing for amino acids and ultimately inhibiting muscle growth (4). Pathologically, the result demonstrated the occurance of stages of pneumonia in lung in addition to congestion of blood vessels and thickening in wall, this indicated the effect of lysate to stimulate the release of chemical mediator which lead to proliferation of vascular smooth muscle cell this result agreed with (12,13). The toxin may effect on host's immune response that lead to changes in the concentration of cytokine signal TNF-α, 1L-6 and 1L-1 that secreted from macrophages (14). In heart the results illustrated cardiomegaly, fatty change in addition to lymphocytic myocarditis, the result indicate that lysate of S. gigantea bradyzoites induced releasing of oxygen free radical which responsible of lipid peroxidation represented by fatty change apperance, and (15) refers to TNF-α during acute phase of sarcocystosis coincided with a reduction in the number of circulating leukocytes and massive infiltration of mononuclear cells, especially macrophages and lymphocytes, into various tissues, and this result agreed with (16,17). Results of skeletal muscles indicated the presence of eosinophilic myositis associated with necrosis, this results correlated with previous study (18-21) and also agreed with the results of (1,22) who refered to the increases in the level of alanine amino transferase ALT to ensure the muscle destruction due to ability of lysate to stimulate the chemical mediators to induse this lesion. The pathogenesis of EM varies; a correlation between serum IL-5 levels and disease severity (23) suggests a role for this interleukin species in eosinophil activation. The pathological consequences resulting from overproduction of cytokines TNF-α leading to a cascade of shock-like symptoms that could effect the survival of the hosts.
Histopathological sections of skeletal muscles showed lesion, characterized by presence of multifocal necrosis each one infiltrated by inflammatory cells represent by eosinophils and neutrophils in addition to edema and hyaline degeneration of myofibriles at 3-7 days post inoculation (Fig. 8 and 9).
Fig. 8: Histomicrograph of rats skeletal muscle inoculated with lysate isolated from S.gigantea after 3 days revealed presence of necrotic foci infiltrated with inflammatory cells (→). H&E. 400X.
a
b Fig. 9: Histomicrograph of rats skeletal muscles inoculated with lysate isolated from S. gigantea after 7 days revealed hyaline degeneration in myofibril (a) and edema (b). H&E. 400X. Discussion The significant reduction in weight of rat inoculated with lysate isolated from S. gigantea, was very close to (7,8) who reported that lysate have ability to release TNF-α which is responsible for the occurance of anorexia and
84
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (81-85)
12. Elsasser TH, Fayer R. Cytokines, Stress, and growth modulation. Marcel Dekker Inc.1995;261-289p. 13. McCormick-Rantze ML, Latimer K, Wilson GH. Sarcocystosis in Psittacine birds. Vet Clin Pathol. 2003; 27:1-7. 14. Markus MB. and Van der lugt JJ. In Sarcocystosis. Vol II, chapter 19S.1998;19:253-265. 15. Fayer R, Prasse KW. Hematology of experimental acute Sarcocystis bovincanis infection in calves. I. Cellular and serologic changes. Vet Pathol.18:351-357. 16. Bergmann V, Grafe A. The pathomorphology and pathogenesis of acute cardiovascular failure in Swine. 1. Histopathologic findings in the myocardium of swine of different age groups. Arch Exp Veterinar Med.1990;44(4):503-512. 17. Boyd KL, Latimer KS. Sarcocystosis in a major Mitchell's cockatoo (cacatua leadbeateri). Proceedings of international Virtual Conferences in Veterinary Medicine: Diseases of psittacine birds. 1998: 1-5. 18. Bundza A, Feltmate TE. Eosinophilic myositis/lymphadenitis in slaughter cattle. Can Vet J.1989;30:514-516. 19. Saito M, Mizusawa K, Itagaki H. Chronic Sarcocystis infections in slaughter cattle. J Vet Med Sci.1993;55(5):757-761. 20. McGavin DA, Valentine BA. Pathologic basis of Veterinary disease. 4th eds. Elsevier 2006;973-1040p. 21. Gozalo AS, Montall RJ, Claire MS, Barr B, Rejmanek D, Ward JM. Chronic polymyositis associated with disseminated Sarcocystosis in a Captive-born Rhesus Macaque. Vet Pathol.2007;44:695-699. 22. Daugschies A, Hintz J, Henning M, Rommel M. Growth performance, meat quality and activites of glycolytic enzymes in the blood and muscle tissue of calves infected with Sarcocystis cruzi Vet Parasitol.2000;88(1-2):7-16. 23. Trueb RM, Lubbe J, Torricelli R, Panizzon RG, Wuthrich B, Burg G. Eosinophilic myositis with eosinophilic cellulitis like skin lesion. Association with increased serum levels of eosinophil cationic protein and interleukin-5. Arch Dermatol.1997;133:203-206.
References 1.
Al-Hyali NSMS. Seroprevalence and toxicity of Sarcocystis gigantea in different hosts in Nineva province. [dissertation]. College Vet Med, Univ Mosul, 2006. 2. Fayer R, Andrews C, Dubey JP. Lysates of Sarcocystis cruzi bradyzoites stimulate RAW 264.7 macrophages to produce tumor necrosis factor (cachectin). J Parasitol.1988;74(4):660-664. 3. Nakamura Y, Saito M, Shibata Y, Itagaki H. Induction of tumor necrosis factor alpha and nitric oxide in rabbits inoculated with a cyst extract of Sarcocystis cruzi. Vet Parasitol.1999;85(4):235-243. 4. Fayer R. and Elsasser TH. Bovine Sarcocystosis: How parasites negatively affect growth. Parasitol Today.1991;7(9):250-255. 5. Do SH, Jeong DH, Chung JY, Park JK, Yang HJ, Yuan DW, Jeong KS, Eosinophilic myositis in a slaughtered Korean native cattle. J Vet Sci.2008;9(4):425-427. 6. Luna LG. Manual of histologic staining methods of the armed forces institute of pathology 3rd eds. Mc Graw-Hill Book Company, New York USA. 1968;1-46,236p. 7. Carrigan MJ. An outbreak of sarcocystosis in dairy cattle. Aust Vet J 1986;63:22-24. 8. Beutler B. Cachectin/tumor necrosis factor and lymphotoxin, in : peptide growth factor and their receptors IF (M.B. Sporn and A.B. Roberts, eds.), Springer-Verlag, New York. 1991;39-70p. 9. Elsasser TH. Fayer R. Rumsey TS. and Hammond AC. Plasma and tissue concentration and molecular forms of somatostatin in calves infected with Sarcocystis cruzi. Dom Anim Endocrinol.1990;7(4): 537-550. 10. Kluger MJ. In biomechanisms regulating growth and development (Steffens, G.A., and Rumsey, T.S., eds.) Kluwar Academic Publishers.1988;409-420p. 11. Barry TN, Faichney GJ, Redekopp C. Gastrointestinal tract function in sheep infused with somatostatin. Austral J Biol Sci.1985;38:393403.
85
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (87-91)
Fate of macrosarcocyst of Sarcocystis gigantea in sheep N. S. Al-Hyali1, E. R. Kennany2 and L.Y. Khalil1 1
Department of Microbiology, 2Department of Pathology and Poultry Diseases, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq (Received November 1, 2009; Accepted June 30, 2010)
Abstract This study was conducted to detect the fate of macrosarcocysts of Sarcocystis gigantea in the tongue and eosophagus of naturally infected sheep, via collection of 25 samples, 10 of which showed calcification. The results showed presence of white different size grains on the wall of the pale eosophagus, in addition to presence of nodules containing white chalky materials and on cutting by knife produced grunting sound which indicated calcification. Histopathological results showed presence of granulomatous nodules that contained necrotic centers infiltration by inflammatory cells. Some of which were free from zoites in addition to presence of calcium salt precipitation, which represented dystrophic calcification. Eosinophilic myositis appeared in the tongue was associated with ruptured cyst and released zoites in muscular tissue. Some histological sections revealed ruptured macrocystis with thin wall deposited between muscle bundles. In conclusion, this study showed that the fate of macrocysts included the formation of granulomatous nodules associated with dystrophic calcification and dead zoites in eosophagous more than that in the tongue. Keywords: Sarcocystis gigantean; Calcification; Macrosarcocyst; Sarcosporidiosis; Bradyzoites. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
مصير االكياس العينية لطفيلي المكيسات العضلية في االغنام ١
و ليان ياسين خليل٢ انتصار رحيم الكناني،١نادية سلطان الحيالي
العراق، الموصل، جامعة الموصل، كلية الطب البيطري، فرع األمراض وامراض الدواجن٢ ، فرع االحياء المجھرية١ الخالصة تضمنت ھذه الدراسة التحري عن م صير االكي اس العيني ة لطفيل ي المكي سات الع ضلية ف ي ل سان وم رئ ال ضان المخمج ة طبيعي ا م ن اظھرت النتائج وجود حبات بيضاء مختلفة االحجام على ج دار الم رئ ال شاحب ف ضال ع ن. منھا تعاني التكلس١٠ ، عينة٢٥ خالل جمع اظھرت النت ائج الن سجية.وجود عقيدات تحتوي مواد بيضاء طباشيرية عند قطعھا بالسكين تصدر اصوات قرقعة تشير الى وجود التكلس المرضية وجود عقيدات من ال ورم الحبيب ي ذات مرك ز متنخ ر مرت شح بالخالي ا االلتھابي ة وال بعض منھ ا خ الي م ن الحوين ات ف ضال ع ن كما ولوحظ وجود التھاب العضلة الحمضي في الل سان م ع تحط م االكي اس.وجود ترسبات من امالح الكالسيوم وھي تمثل التكلس السغلي بينت بعض المقاطع النسجية وجود االكياس العينية محطمة وذات جدار رقي ق يتموض ع.وتحرير العديد من الحوينات في النسيج العضلي تستنتج ھذه الدراسة بان مصير االكياس العينية ھو تكون االورام الحبيبية مع ال تكلس ال سغلي وم وت الحوين ات وف ي.بين الحزم العضلية .المرئ كان اكثر وضوحا منه في اللسان characteristically cause a chronic, subclinical infection in cardiac and skeletal muscle of livestock by forming macrosarcocysts (Sarcocysts) or macrocyst in the striated muscle of sheep, and infected carcases may be rejected from export or condemned for human consumption (1,2).
Introduction Sarcosporidiosis is caused by protozoa of the genus Sarcocystis, which is a member of the family Sarcocystidae. These parasites commonly and
87
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (87-91)
Abattoir surveys have recorded infections by macroscopic cyst of S. gigantea in 94.8% and 100% of ovine examined in Mosul (2,3). Infections by macroscopic cyst have been shown to be transmitted by cat (4). The mature sarcocysts are surrounded by primary cyst wall, which derives from the original membrane of the parasitophorous vacuole and it is covered by host cell material. This layer is called secondary cyst wall, or may be also formed by defense cells of the host and may later induce the calcification of the muscle fiber containing the parasite (5). The aim of this study was to exam the fate of the sarcocysts of S. gigantea in eosophagus and tongue in naturally infected ovine. Materials and methods
Fig. 2: Sheep eosophagus infected with S. gigantea showed pale eosophagus, presence of round chronic calcified nodules (arrow).
Twenty five samples of sheep eosophagus and tongue naturally infected with macrosarcocysts of S. gigantea were collected from Mosul abattoir. Ten of them were calcified, their grunting sound was heared after cutting by knife, then fixed in 10% neutral buffered formalin, then after 48-72 hr dehydrated by ethyl alcohol 70-100%, cleaning by xylol and embedded in paraffin wax, to prepare blocks, thus by microtomes cutting section at 4-6 Îźm thickness, stained with H&E (6) other's staining with Von gossa's and AlZarine stain (7).
Histopathological sections of the tongue showed presence of different size of elongated sarcocysts between muscle bundles each one surrounded by thin layer of muscle fibers which contain numerous bradyzoites. Some of these macrosarcocysts ruptured and released merozoites (bradyzoites), area of which infilterated by inflammatory cells represented by eosinophils (Fig. 3-5), some other sections revealed necrosis and dystrophic calcification in additions to degeneration of muscle fibers (Fig. 6).
Results Samples of infected eosophagus and tongue showed white rice-grain sized nodules, nodules including calcified cheesy content and after cutting by knife grunting sound was heard (Fig. 1) other samples showed pale easophagus with round calcified nodules (Fig. 2).
b
a
Fig. 3: Histological section of tongue infected with S. gigantea showed macrosarcocysts (a) hyaline degeneration of muscle fiber (b) (H and E stain 165X). In eosophageal sarcosporidiosis, histopathologically, revealed typical granuloma, calcified myofibers were locally surrounded by macrophage and numerous inflammatory cells and multinucleated giant cells (Fig. 7,8).
Fig. 1: Sheep eosophagus infected with S. gigantea showed white rice-grain nodules (arrow).
88
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (87-91)
a b Fig. 4: Histological section of tongue infected with S. gigantea showed elongated macrosarcocysts (a) surrounded by eosinophils infiltration (b) (H and E stain 165X).
Fig. 6: Histological section of tongue infected with S. gigantea showed necrotic and calcified macrosarcocysts (arrow) (Al-zarine stain 370X).
c
b
a
Fig. 5: Histological section of tongue infected with S. gigantea showed merozoites (bradyzoites) releasing between muscle bundles (arrow) (H and E stain 560X).
Fig. 7: Histological section of eosophagus infected with macrosarcocysts, showed granulomatous nodules (a) contain necrotic centers (b) surrounded by fibrous septa (c) (H and E stain 115X).
In some lesions massive fibrous septa with hyaline degeneration, sarcoplasma fragmentation and mastolysis were observed (Fig. 9), some other sections showed thin cyst wall and necrotic area with dystrophic calcification in muscle bundles. Some macrocysts showed thin cyst wall present between muscle fibers (Fig. 10, 11) which was more evidence in eosophagus than in tongue.
referred to a sarcocystosis (8). The S. gigantea is very common in Iraq (9), this high prevalence suggests that either sheep are reinfected continuously or that sarcocysts persist for several years in sheep, reinfection is more likely to be the case because the environment is highly contaminated with sporocyst (10) and the severity of natural field infections may therefore be limited by certain host/parasite interaction. The results of this study showed presence of macrosarcocysts of S. gigantea in different size in muscle fibers of tongue and eosophagus (Fig. 1) (1). These results indicated that infection was in chronic form, in addition to color and size confirmed the chronicity and activity of the cyst. Histopathological changes in ovine
Discussion The presence of a Sarcocystis spp. Infection as cysts in muscle termed sarcosporidiosis, is differentiated from the clinical syndrome expressed prior to cyst formation,
89
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (87-91)
Fig. 8: Histological section of eosophagus infected with macrosarcocysts, of S.gigantea showed granulomatous nodules surrounded by gaint cells (arrow) (H and E stain 115X).
Fig. 10: Histological section of eosophagus infected with macrosarcocysts, of S.gigantea showed thin cyst wall of macrosarcocysts in muscular layer (arrow) (H and E stain 90X).
Fig. 9: Histological section of eosophagus infected with macrosarcocysts, of S.gigantea showed mastolysis (arrow) in necrotic area of macrosarcocysts (H and E stain 370X).
Fig. 11: Histological section of eosophagus infected with macrosarcocysts, of S. gigantea showed dystrophic calcification (arrow) in granulomatous nodules (Von gossa 90X).
tongue infected with macrosarcocysts of S. gigantean showed presence of macrocysts between muscle bundles some of which were ruptured, released bradyzoite concomitant with eosinophilic response in addition to presence dead bradyzoites associated with dystrophic calcification. The results were observed indicated the presence of heavy and chronic infection with Sarcocystis spp. (11). The present investigation provides evidence that chronic infection with S. gigantea induce body response in the intermediate host, namely increase the macrosarcocysts in
sized (12). Evidence of ruptured cyst was similar to previous study (13) who reported that some sarcocysts probably rupture from time to time and thus the antigenic stimulus for antibodies production smaintained. Sarcocysts and enclosed organism are removed by leukocytes an area occupied by sarcocysts may be mineralized. The muscle cyst are prone to become ruptured due to enlargement, after rupturing of the cyst, some liberated large zoites, may become immobilized after binding with the apical complex associated antibody in the immunized host and change to round form (Fig. 2) (14). Binding of the surface membrane
90
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (87-91)
2. Al-Hyali NS. Seroprevalence and toxicity of Sarcocystis gigantea different hosts in Nineva Province. [dissertation]. College Vet Med, Univ Mousl, Mosul, Iraq. 2006. 3. Thanoon HB. Oral lesions and their prevalence of local sheep in mosul area. [master's thesis]. University of Mosul, 2009. 4. Rommel M, Heydorn AO. Bertrage zum lebenszyklus der sarkosporidien III. Isospora hominis (Railliet and lucet,1891) Wenyon 1923 eme Dauerform der sarkosporidien des Rindes und des Schweins. Berl Munch Tieraerztl Wochenschr.1972;85:143-145. 5. Encylopedic Reference of Parasitology. Tissue cyst. 2008 1-3. Available from: http://parasitology.informatik.un-wuerzburg.de 6. Luna LG. Manual of histologic staining methods of the armed forces, institute of pathology 3rd ed. Mc Graw-Hill Book company, New York, USA. 1968:1-64,236p. 7. Boncroft JD. Histological techniques. 2rd ed. Butterworths of London and Boston. 1975:213-215p. 8. Ford GE. The significance of the Sarcocystosis and Sarcosporidiosis in domestic animals. Aust Adv Vet Sci.1980:61-63. 9. Altahi MH. Epidemiological study on Sarcocystosis in humen and domestic animals. [dissertation]. College Vet Med, Univ Baghdad, Baghdad, Iraqi, 2002. 10. Dubey JP, Fayer R, Speer CA. Experimental Sarcocystis hominis infection in cattle: lesions and ultrastructure of sarcocysts. J Parasitol. 1988;74:875-879. 11. Al-Sultan II, Daoud MS. A case of massive mixed bovine infection with Cysticercus bovis and Sarcocystis spp. Iraqi J Vet Sci.1998; 11(2):273-274. 12. Munday BL, Obendorf DL. Development and growth of Sarcocystis gigantea in experimentally infected sheep. Vet Parasitol.1984;15:203211. 13. Fayer R, Dubey JP. Bovine Sarcocystosis. Compendium Food Animal.1986;8:130-142. 14. Herzenberg AM, Barta JR, Desser SS. Monoclonal antibodies raised against coccidia and malarial parasites recognize antigenic epitopes found in lankesterellid and adeleorin parasites. J Parasitol. 1995;18: 543-548. 15. Sukhum BMD. The Sarcocystis cyst containing beef and pork as the sources of natural intestinal sarcocystosis in Thai people. J Med Assoc Thai.2007;90(10):2128-2135. 16. Mc Gavin DA, Valentine BA. Pathologic basis of Veterinary diseases 4th ed. Elsevier Science publishing. New York. 2008:973-1040p. 17. Bergmann V, Grafe A. The pathomorphology and pathogensis of acute cardiovascular failure in swine. 1 Histopathlogic findings in the myocardium of swine of different age groups. Arch Exp Veternar Med.1990;44(5):503-512. 18. Jensen DVM, Alexander AF, Dahlgren RR, Jolley WR, Marquardt WC, Flack DE, Bennett BW, Cox MF, Harris CW, Hoffmann GA, Troutman RS, Hoff RL, Jones RL, Collins JK, Hamar DW, Cravans RL. Eosinophilic myositis and muscular Sarcocystosis in the carcasses of slaughtered cattle and lambs. Am J Vet Res.1986;47(3):587-593. 19. Do SH, Jeong DH, Chung JY, Park JK, Yang HJ, Yuan DW, Jeong KS. Eosinophilic myositis in a slaughtered Korean native cattle. J Vet Sci.2008;9(4):425-427.
and cytoplasmic granules to the corresponding antibody possibly leads to attracks by the eosinophils and lymphocytes on the exposing aspect with some zoites escaping the killing effect, further binding with this antibody intermixed with inflammatory cell debris (15). Muscle degeneration, myolysis, necrosis and dystrophic calcification other lesions described in our study are consistent with lesions found previously in tongue, oesophagus and skeletal muscle (16) who reported that muscle degeneration and necrosis are common sequelae to myofiber injury regardless of its causes (chemical, metabolic, traumatic and infections) myofiber degeneration can be reversible, if injury progresses beyond the point of no return degeneration become irreversible and necrosis will follow muscle appear pale (Fig. 2). If the calcification is extensive and severe muscle show glistening, white chalkey foci, that observed as granting sound, easinophilic infilteration, hyaline degeneration of muscle fiber, fiber necrosis, dystrophic calcification and sarcosporidiosis, these parameters were increasly detectable along with growing age of animals (17). Evidence of granulomatous reactions and dystrophic calcification in eosophagus were observed in 10 samples, these lesions were correspond with those found previously (18,19), they reported that sarcocysts in granulomas were open and degenerating, whereas those in normal myofiber were infect and non reactive. Other explanations for granulomas lesions include immunolobic responses, such as type I hypersensitivity, type II (cytotoxic reactions), and type IV (cell mediated immunity). Each of these mechanisms has some or all of the component necessary for development of these lesions. In the present study granulomas, dystrophic calcification and ruptured cyst were observed in (Fig. 11). Conclusion of these results indicates that the fate of sarcocysts are formation of granulomatous concomitant with dystrophic calcification and dead of trophozoite in eosophagus more than in the tongue. References 1. Odonoghue, P.J, Ford, GE. The prevalence and intensity in of Sarcocystis spp. Infection in sheep. Aust Vet J.1986;63:273-278.
91
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (93-95)
Isolation and identification of bacteria causing arthritis in chickens B. Y. Rasheed Department of Microbiology, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq (Received September 6, 2009; Accepted March 28, 2011) Abstract Sixty chickens 30-55 days old with arthritis symptoms, were collected from different broiler chickens farms, all samples were examined clinically, post mortem and bacterial isolation were done. The results revealed isolation of 26 (50.98%) of Staphylococcus aureus, which were found highly sensitive to amoxycillin. The experimental infection of 10 chickens was carried out on 35 days old by intravenous inoculated with 107 cfu/ml of isolated Staphylococcus aureus. Arthritis occurred in 8 (80%) chickens. Clinical signs and post mortem findings confined to depression, swollen joints, inability to stand. Keywords: Bacteria, Arthritis, Chicken. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
عزل وتشخيص المسببات الجرثومية اللتھاب المفاصل في الدجاج بلسم يحيى رشيد العراق، الموصل، جامعة الموصل، كلية الطب البيطري،فرع االحياءالمجھرية الخالصة وفح صت جمي ع العين ات, ي وم يظھ ر عليھ ا عالم ات التھ اب المفاص ل م ن حق ول ف روج اللح م٥٥-٣٠جمع ت س تون دجاج ة بعم ر ( م ن ج راثيم% ٥٠ ،٩٨) عزل ة٢٦ أظھرت النتائج عزل.وسجلت العالمات المرضية والصفة التشريحية واجري العزل الجرثومي لھا يوم حي ث٣٥ دجاجات وبعمر١٠ أجري الخمج التجريبي على.المكورات العنقودية وكانت ھذه العزالت عالية الحساسية لالموكسيسيلينز (%٨٠) ٨ ف ي الوري د أدى ذل ك إل ى ح صول التھ اب المفاص ل ف ي٣س م/ م ستعمرة٧١٠ حقن ت ب المكورات العنقودي ة المعزول ة وبجرع ة .دجاجات بينت العالمات السريرية والصفة التشريحية حصول خمول وتورم المفاصل وعدم القدرة على الوقوف (inflammation of tendon sheaths) and arthritis of the hock and stifle joints (1). In broiler breeders, stress caused by uneven feed distribution or predispose to Staphylococcal infection. The affected joints, usually the hocks, are hot, swollen and painful and affected birds are usually depressed, lameness and reluctant to walk-in tenosynovitis, the synovial membranes of tendon sheaths become thickened and oedematous, with fibrinous exudate within and around the tendon sheaths (5), secondary to the stress of moving, mating and onset of egg production, Male aggression and injuries associated with feed equipment, nest boxes also contribute, to the development of infections during this period, experimental work has shown that early infection with staphylococcus can cause inflammation of the hock joint and nearby tendons (6). The aim of this study
Introduction The term leg weakness is symptomatic word describing a condition resulting from several causes. It is assumed that purulent arthritis may constitute a significant proportion of the cases of leg weakness (1). The disease has been seen in birds ranging from 14 to 70 days of age, but most cases occurred around 35 days old (2). Bacterial arthritis in poultry after septicemia or localized is reported to be associated with Erysipelothrix, Listeria, Mycoplasma, Staphylococcus, and Escherichia (3). Disease is most commonly caused by Staphylococcus aureus (2), and sometimes involved Escherichia coli (4) which is of veterinary importance in broiler breeders. In such birds, the most common form of infection involves tenosynovitis
93
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (93-95)
is to diagnose the bacterial causes of arthritis in chickens farms.
Table 2: Range size (mm) of hock joint infected in chickens. Time post infection (hr) 24 48 72 96 120
Materials and methods Sixty broiler chickens were collected from different flocks suffering from arthritis used in the present study. Samples of affected hock joints were cultured on 5% blood agar base, Mannitol salt agar, MacConkey agar (7). Bacterial isolates were identified by biochemical tests (8). Antibacterial sensitivity tests carried on these isolates and included, streptomycin 30μg, novobiocin 30μg, amoxycillin 10μg, ampicillin 10μg, gentamicin 10μg produced by Oxoid (England) (9). Experimental infection was carried out on 20 chickens of 35 days old divided into 2 groups of 10 birds each. The chickens first group were inoculated intravenously with 0.2 ml 107 CFU/ml of live cells of isolated Staphylococcus aureus then all joints changes of these inoculated chickens were measured after 24, 48, 72, 96 and 120 h post inoculation (10). The second group was kept as a control. All birds were kept under observation for 14 days.
Size of hock joint in infected (mm) 2 2.1 2.4 2.5 2.5
Negative control size (mm) 1.8 1.8 1.8 1.8 1.8
Clinically experimental infected chickens showed, swollen of hock joints and lameness of (80%). Post mortem changes were white-to yellow colored purulent exudate of infected joints (Fig. 1). The liver and spleen showed hyperemia. Also Staphylococcus aureus reisolated from experimental infected joints after 24 h of inoculation at (80%).
Results Fifty one isolates of bacteria were isolated from 60 broiler chickens suffering from arthritis which included 26 (50.98%) isolates of Staphylococcus aureus and one of them was β-hemolytic, coagulase (+ve) which selected for experimental purpose carried out in the present study other isolates included Pseudomonas aeruginosa 14 (27.45%), Staphylococcus saprophyticus and Escherichia coli 4 (7.84%) for each one, Proteus spp 2 (3.9%) and Erysipelothrix rhusiopathiae 1 (1.9%). In vitro sensitivity of Staphylococcus aureus isolate to antibacterial agent was used. Isolate was sensitive to amoxycillin but showed resistance to gentamicin and novobiocin. Table (1) shows antibiotic susceptibility testing for Staphylococcus aureus. The joints of inoculated chickens shows swollen of both left and right due to sever arthritis, the average size of hock joints were measured in table 2.
Figure 1: Synovial fluid which was turbid and yellowish in color. Discussion The most frequent sites of Staphylococcus aureus infections in poultry were bones, tendons, sheaths and joints, especially tibiotarsal and stifle joints (11). In the present study Staphylococcus aureus was isolated at the percentage of 50.98%, same results (11,12). The bacterium is considered to be normal resident of the chicken, located on the skin, feathers and in the respiratory tracts. This organism must enter the circulatory system to cause disease, thus probability of infection is increased by any injury that provides the bacteria with rout of entry (2,6). Arthritis is most commonly caused by Staphylococcus aureus, but Escherichia coli and Erysipelothrix rhusiopathiae are some times involved as are, rarely other bacteria (12,13). This result was similar to (11). Antibiotic Susceptibility of Staphylococcus aureus was found to be
Table 1: Susceptibility of Staph. aureus to antibiotics under study. Antimicrobial agents Code Disk potency amoxycillin AMX 10μg streptomycin S 30μg ampicillin AMP 10μg gentamicin CN 10μg novobiobiocin NOV 30μg S: sensitive, R: resistant, I: intermediate.
S I I R R
94
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (93-95)
4. Chansiripornchai VR. The Efficacy of Escherichia coli Aro A-live vaccine in Broilers against avian E.coli serotype O78 Infection. Thai J Vet Med.2009;39(4):337-342. 5. Jordan F, Pattison M, Alexander D, Faragher T.Poultry diseases. 5th ed. London:W.B.Saunders;2002.163p. 6. Butterworth A. Infectious components of broiler lameness :a review. World's poultry Science Journal.1999;56(4):327-352. 7. Quiun PJ, Markey BK, Carter ME, Donnelly WJ,Leonard FC. Veterinary microbiology and microbial diseases. USA: Blackwell Publishing Company;2002.p.23-26. 8. Quiun PJ, Carter ME. Markey B, Caster GR.Clinical Veterinary Microbiology.UAS: Mosoby An Imprint of Elsevier limited; 1999. p.118-123,175-177,210-216. 9. Brown AE. Microbiological Applications. 9th ed. New York: McGrawHill companies;2005.p.221-224. 10. Alkarawani N. Experimental study on infectious arthritis caused by Staphylococcus bacteria in chickens. [master's thesis]: College of Veterinary Medicine, Al-Baath University, Syria.2008. 11. Adayel SA. Incidence of Staphylococcus aureus causing Arthritis of broiler dreeders.4th Int Sci Conf Mansoura.2005;65-70. 12. Mutalib AA, King JM, McDonough PL. Erysiplelas in caged laying chickens and suspected erysipeloid in animal caretakers. J Vet Diagn Invest.1993;5:198-201. 13. Morgan MJ, Britt JO, Cockrill JM, Eiten ML.Erysipelothrix rhusiopathiae infection in an emu (Dromaius navaehollandiae). J Vet Diagn Invest.1994;6:378-379. 14. Daum RS, Davis WH, Farris KB, Campeau RH, Mulvihill DM, Shane SM. A model of Staphylococcus aureus bacteremia, septic arthritis and osteomylitis in chickens. J Orthop Res. 2005; 8:804-813. 15. Mutalib A, Riddell C,Osborne AD. Studies on the pathogenesis of Staphylococcal osteomyelitis in chickens. Avian diseases J. 1982;27(1):141-144. 16. Hofstad MS, Barnes HJ, Clanek BW, Reid WM, Yoder HW. Diseases of poultry. 8th ed. USA: Iowa state university press, Ames, Iowa; 1984.p.264-265. 17. Jensen MM. An overview on the pathogenesis of Staphylococcosis and an update on Staphylococcal interference.In proceedings of the Avian skeletal disease symposium. AAAP/AVMA, San Antonio, TX. 1990;79-82. 18. Jordan FT, Pattisson M. Poultry diseases. 4th ed. London: W.B. Saunders company Ltd; 1996:66-67.
sensitive to amoxycillin and resistant to gentamycin, novobiocin the same results reported (11). Experimental inoculation of Staphylococcus aureus isolate to 35 days old chickens showed bacteremia after 24 hours and increased during 96 hours (14). Bacteremia is an essential prerequisite to occur diseases this agreed (15). Clinical signs and post mortem findings confined to depression, lameness, swollen joint, and unable to stand (5,16). Joint infections occurred with in 48-120 hours. The affected joints showed increase of synovial fluid which was turbid and yellowish this founded (17). Staphylococci have a high affinity for collagen-rich surfaces such as the articular surface of joints, and synovial sheaths located around joints and tendons. This organism also tends to localize in the growth plate of actively growing bones (18). Staphylococcal infection is the most real important causes of arthritis leading to economic losses in the broiler chickens as high morbidity swollen joint thus we must take care to control the Staphylococcal infection in poultry. Acknowledgment This work was supported by College of Veterinary Medicine, University of Mosul. References 1. Itakura C, Kurisu K, Goto M. Histopathology of purulent arthritis of chickens. Jap J vet Sci.1976;38:451-459. 2. McNamee PT, Smyth JA. Bacterial chondronecrosis with osteomylitis(femoral head necrosis) of broiler chickens: a review. Avian Pathology.2000;29(5):477-495. 3. Mohan K, Shroeder-Tucker LC, Karenga D, Dziva F, Harrison A and Muvavarirwa P.Unidentified Coryneform Bacterial strain from cases of polyarthritis in Chickens :phenotype and fatty acid profile. Avian Diseases.2002;46:1051-1054.
95
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (97-98)
Misoprostol treatment of dystocia due to incomplete dilatation of the cervix in a cow: a case report O. I. Azawi, U. T. Naoman, Z. M. Al-Kass, E. H. Lazim and N. G. Fathi Department of Surgery and Theriogenology, College of Veterinary Medicine, University of Mosul, Mosul, Iraq (Received September 27, 2010; Accepted March 28, 2011) Keywords: Cow; Dystocia; Incomplete dilatation; Cervix; Misoprostol. Available online at http://www.vetmedmosul.org/ijvs
عالج حالة عسر الوالدة بسبب توسع عنق الرحم الجزئي في بقرة باستعمال تقرير حالة:مسوبروستول أيمان حياوي الزم و ناصر غانم فتحي، زياد مكرم القس، عدي طلعت نعمان،أسامة إبراھيم عزاوي العراق، الموصل، جامعة الموصل، كلية الطب البيطري،فرع الجراحة وعلم تناسل الحيوان الخالصة .يصف ھذا التقرير حالة عسر والدة بسبب توسع عنق الرحم الجزئي في بقرة وعالجھا ألول مرة باستعمال مسوبروستول borogluconate, and he advised the owner to bring the cow to the clinic of the College of Veterinary Medicine, if the cow did not deliver or no fetal fluid was escaped to perform cesarean section. On clinical examination, the cow was at or near term, as denoted by mammary changes and ligamentous relaxation in the pelvis. The cow was in a standing position and restlessness due to abdominal discomfort, coupled with few feeble abdominal contractions but no progress was made. Vaginal examination indicated that the cervix was dilated about 2 fingers and the fetal membranes were intact.
Introduction Incomplete dilatation of the cervix is a common cause of dystocia in cattle (1). Cervical priming refers to dilating and softening of the cervix in the first stage of labor is a gradual process (2). Incomplete dilatation in multiparous cows may be associated with uterine inertia caused by hypocalcaemia; in these animals, the response to calcium therapy is rapid (1). Misoprostol an analogue of prostaglandin E1 is widely used to ripen the cervix and/or initiate labor at term in human and it is more widely used to control postpartum bleeding (3,4). PGE1 has never been used in bovine obstetrics to dilate the cervix in dystocia cases due to incomplete dilatation of the cervix. This report describes the first successful use of misoprostol (PGE1) for the treatment of incomplete dilatation of cervix in a local breed cow.
Treatment The perineum and adjacent areas were washed with soap and water and disinfected with lugol’s iodine. Obstetrical hands covered with long plastic gloves and lubricated with obstetrical lubricant was inserted in the birth canal, then 1 mg (5 tablets) of misoprostol (Cytotec, Searle Pharmaceuticals Ltd, UK) were inserted in the partially dilated cervical canal. Every 10 minutes the cervical canal was examined. After 45 minutes the cervix was completely dilated and the fetal parts were easily examined. The fetus was alive with anterior presentation, dorsal position and downward deviation of the head between the forelimbs and adjacent to the sternum with
History and clinical signs The cow involved was 7 years old brought by the owner to the clinic of the College of Veterinary Medicine, University of Mosul and he claimed that his animal had dystocia 24 hours ago. The owner said that he had brought a veterinarian to treat the cow. The veterinarian administrated estradiol benzoate and calcium
97
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (97-98)
the owner reported, that the cow and her calf were doing well.
bilateral shoulder flexion as posture. The posture was corrected by repelling the fetus and lifting the muzzle up into the pelvis. The forelimbs were located and manipulated and the obstetrical hand was advanced down the limb toward the carpal joint. The right limb was grasped and brought up into the carpal flexion position, and the foot was cupped in the hand and brought carefully up into the pelvis. A calving rope was placed around the fetlock and this procedure was performed to the left limb. Traction was applied manually with two assistants. After delivery the uterus and the birth canal were checked for signs of damage and hemorrhage. The cow and her calf were doing well. The cow was treated with 60 IU of oxytocin as single injection and 3 million IU procaine penicillin G with 3 g of dihydrostreptomycin IM daily for 5 days. After one week
References 1. Noakes DE, Parkinson TJ, England GCW, Arthur GH. Arthurâ&#x20AC;&#x2122;s veterinary reproduction and obstetrics. 8th ed, Elsevier Sci Ltd.2002; 335. 2. Jackson PGG. Handbook of veterinary obstetrics. 2nd ed, Elsevier Sci Ltd.2004;42-43. 3. Fiala C, Gemzell-Danielsson K, Tang OS, Von Hertzen H. Cervical priming with misoprostol prior to transcervical procedure. Intern J Gynecol Obstet.2007;99:168-171. 4. Weeks AD, Alfirevic Z, Faunders A, Hofmeyr J, Safar P, Wing D. Misoprostol for induction of labor with a live fetus. Intern J Gynecol Obstet.2007;99:194-197.
98
Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 25, No. 2, 2011 (99)
Announcements Announcements from the Iraqi Journal of Veterinary Sciences Erratum I. M. Kudair and N. A. J. Al-Hussary. Effect of vaccination on some biochemical parameters in broiler chickens. Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 24, No. 2, 2010 (59-64). The first row in table 3 should be as follows: VLDL-c HDL-c LDL-c (mg/ 100 ml) (mg/ 100 ml) (mg/ 100 ml) Age in weeks Non vaccinated Non vaccinated vaccinated Non vaccinated vaccinated vaccinated
Retraction The Iraqi Journal of Veterinary Sciences regrets to announce the retraction of the following paper: R. K. Muhsen Effect volatile fatty acids concentrations in the development of the caprine ruminal microflora. Iraqi Journal of Veterinary Sciences, Vol. 23, Supplement II, 2009 (207-211). Proceedings of the 5th Scientific Conference, College of Veterinary Medicine, University of Mosul. The results of tables 3 and 4 of this paper has been plagiarized from the results of tables 1 and 2 of the paper: van der Wielen, P.W.J.J. et al. 2000. Role of volatile fatty acids in development of the cecal microflora in broiler chickens during growth. Applied and Environmental Microbiology 66:2536-2540. We thank the author (Dr. Paul W. J. J. van der Wielen) for communicating with us and informing our journal about the plagiarized tables mentioned above.
99