CONSIDERAÇÕES
SOBRE LEUCÓCITOS E LEUCOGRAMA
Leucograma Anormal: permite identificar os processos patológicos Não permite definição de um diagnóstico específico
Interpretação das anormalidades leucocitárias e dos achados clínicos pode levar a um diagnóstico
Leucócitos: morfologia e função Neutrófilos Função: quimiotaxia e fagocitose
Leucócitos: morfologia e função Linfócitos Função: imunidade humoral e celular
Linfócitos granulares (mais comuns em ruminantes)
Leucócitos: morfologia e função Linfócitos
Função:
Leucócitos: morfologia e função Monócitos Função: •Fagocitose •Função imunorreguladora •Destruição de hemácias
Monócitos
Normal Semelhante em cães e gatos Esfregaço de sangue fresco: arredondado, sem vacúolos citoplasmáticos Sangue com EDTA margem celular irregular, pseudópodos, vacuolizaçào citoplasmática
Leucócitos: morfologia e função Eosinófilos Função: • Mecanismo de defesa contra os estágios larvares de parasitas • Modulação de reações alérgicas inflamatórias e de imunocomplexos
Leucócitos: morfologia e função Basófilos
Função: • Desconhecida • Conteúdo: histamina e heparina • Membrana citoplasmática: IgE
Valores de Referência Interpretação : valores absolutos N. Bastonetes = 2% 60.000 10.000 1000 200
200
2%
2%
1200 2%
Número relativo vs. Número absoluto
Estágios de maturação dos neutrófilos
Produção e Cinética dos Neutrófilos
Produção de neutrófilos na MO Mieloblasto
Prómielócito Mielócito Metamielócito N. bastonete N. segmentado
Mieloblasto pode originar 16 a 32 células, antes de perder sua capacidade produtiva
Fatores que influem na granulopoiese
FEC- GM
FIC
FEC-G Linfocinas Eosinofilopoetina Basofilopoetina LĂtio Corticosteroides
(+)
Granulopoese (-)
Lactoferrina, transferrina Linfocinas PGE1 e PGE2 Produtos dos macrĂłfagos
Granulopoiese Sistema de células - tronco Compartimento De proliferação
Mieloblasto Promielocito
mielócito
Compartimento de Maturação e
estocagem
Compartimento circulante
Metamielócito N. Bastonete
N. segmentado
Compartimento marginal
TECIDOS
Distribuição de neutrófilos Exame M.O.
Mieloblasto Progranulocito Mielócito
Produção
Metamielo N. Bastonete N.Segmentado
Leucograma
Pool circ. Pool marginal
Citologia
M. int. Pulmão urina
Maturação/Reserva
Medula óssea
Sangue
Tecido
Cinética de neutrófilos Sangue
Medula óssea Mieloblasto Progranulocito Mielócito
Metamielo N. Bastonete N.Segmentado
Compartimento medular Tempo de trânsito – 7 a 10 dias ( inflamação- 2 a 3 dias)
Pool circ. Pool marginal
Tecido M. int. Pulmão urina Migração transendotelial
Compartimento sanguíneo Meia-vida na circulação (6-10 h)
Migração de neutrófilos Compartimento marginal
(microcirculação)
Compartimento circulante (Grandes vasos)
Cão: c. marginal = C. circulante
Gato: C. marginal = 2x C. circulante
Interpretação da resposta leucocitária nas doenças
Conceitos • Citopenias – neutropenia, linfopenia e eosinopenia • -filia ou –citose – neutrofilia ou leucocitose neutrofílica;
eosinofilia; basofilia; monocitose; linfocitose; eritroblastose ou metarrubricitose • Desvio à Esquerda – aumento do número de neutrófilos imaturos na circulação sanguínea • Leucemia – presença de células neoplásicas na circulação sanguínea
Conceitos • Distúrbios linfoproliferativos Neoplasias de linfócitos B ou T ou de outras células Linfoma – tecido sólido Leucemia linfocítica – sangue e/ou medula óssea Neoplasias de linfócito B –plasmócito Mieloma • Distúrbios mieloproliferativos
Alterações na morfologia celular
Nucleares: hipersegmentação ou hiposegmentação
Tamanho ou forma: neutrófilos gigantes
Alterações tóxicas
Corpúsculos de Döhle Basofilia citoplasmática Granulações tóxicas Vacuolização Alterações nucleares Células gigantes
Degeneração de neutrófilos
•
Vacuolização citoplasmica
•
Tumefação nuclear-perda do padrão de cromatina
Esfregaço preparado após 12 horas – artefato de técnica
Mucopolissacaridose Doença de armazenamento lisosomal –(MPS)
Deficiência de enzimas lisossômicas para a degradação de GAGs Grânulos não são evidenciados na coloração pela técnica Diff-Quick
Resposta leucocitária
Resposta à excitação Migração de leucócitos do compartimento marginal circulante: neutrofilia madura
Gatos: linfocitose até 20.000 células/L
Resposta ao estresse Linfopenia Aumento de neutrófilos – hiperssegmentação Eosinopenia Monocitose (cães)
Resposta neutrofílica na inflamação aguda
Estágio inicial –neutrofilia (N. maduros) Depleção do pool de maturação e reserva – D.E. Dias após Mieloide hiperplasia expansão da produção de N D.E. Estabilização da inflamação – neutrófilos maduros
Resposta neutrofílica na inflamação aguda
Neutrofilia
Mieloblasto Progranulocito Mielócito
Produção
Metamielo N. Bastonete N.Segmentado
Pool circ. Pool marginal
TECIDO
Maturação/Reserva
4 a 6 dias
Medula óssea
INFLAMAÇÃO
Resposta neutrofílica na inflamação aguda Neutrofilia Desvio a esquerda Mieloblasto Progranulocito Mielócito
Produção
Metamielo N. Bastonete N.Segmentado
Esgotamento da reserva
Medula óssea
Pool circ. Pool marginal
TECIDO
INFLAMAÇÃO
Resposta neutrofílica na inflamação aguda Neutrofilia
Mieloblasto Progranulocito Mielócito
Produção
Metamielo N. Bastonete N.Segmentado
Maturação / reserva
Medula óssea
Pool circ. Pool marginal
TECIDO
INFLAMAÇÃO
Resposta neutrofílica na inflamação aguda Neutrofilia discreta ou inexistente
Mieloblasto Progranulocito Mielócito
Produção
Metamielo N. Bastonete N.Segmentado
Maturação / reserva
Medula óssea
Pool circ. Pool marginal
TECIDO
INFLAMAÇÃO
Resposta neutrofílica na inflamação Leucograma normal
Mieloblasto Progranulocito Mielócito
Produção
Metamielo N. Bastonete N.Segmentado
Maturação/Reserva
Medula óssea
Pool circ. Pool marginal
Tecido (Mucosa) Inflamação discreta,crônica
Neutrรณfilos x prognรณstico
Prognóstico do processo inflamatório
Bom Leucocitose < 40.000 D.E. discreta a moderada
Mau D.E. degenerativo Leucopenia / neutropenia Reação leucemoide Neutrófilos tóxicos Linfopenia
Neutrofilia
D.E. significante >1.000 N. bast. / uL
Sim
Inflamação
Não Leucocitose marcante
Sim
Não Linfopenia
Sim
Inflamação
Estresse Esteróide
Não
Linfocitose
Sim
Epinefrina
Outras causas de neutrofilia Hemorragia ou anemia hemolítica
Neutrofilia com desvio a esquerda (discreto) ocorre em animais com anemia hemolítica imune – mediada Leucocitose marcante ( > 50.000) Neutrofilia madura ocorre 3 hs. após hemorragia aguda
Neutropenia Consumo de neutrófilos •Taxa de migração para os tecidos excede a capacidade do “pool”de reserva medular de neutrófilos / endotoxemia • Enterite por parvovirus • Salmonelose • Destruição imunemediada
Neutropenia •
Demanda aguda ou consumo nos tecidos •
Processo inflamatório severo
•
Desvio a esquerda severo
•
Alterações tóxicas evidentes nos neutrófilos na circulação sanguínea
•
Prognóstico pobre ou reservado
Neutropenia Diminuição da produção medular por dano tóxico severo estrógeno, fenilbutazona, cloranfenicol, griseofulvina Agentes infecciosos: Ehrlichia canis, parvovirus, VLF Irradiação Imune - mediada
Neutropenia Granulopoiese ineficaz (disgranulopoiese) Adequado número de progenitores / alteração na produção ou no desenvolvimento
Mielodisplasia, leucemia mieloide,VLF, VIF
Marginalização Evento precoce e transitório Anafilaxia, endotoxemia
Eosinófilos Produção MO. Cinética = Neutrofilos
Função Reações de hipersensibilidade Papel principal na morte de parasitas (nematoides e trematoides)
Número no SP Reflexo da produção, demanda e consumo
Eosinofilia
Alergia (HS tipo I) Parasitas Inflamação granulomatosa Neoplasias Síndrome hipereosinofílica Leucemia eosinofílica
Eosinopenia
Pode ser normal em alguns indivíduos Causas:
Infecções agudas hipercortisolemia (endógena ou exógena) liberação de adrenalina por medo ou exercício extremo
Eosinopenia
Limite normal inferior = zero Corticosteroide endógeno / exógeno
Fase aguda do processo inflamatório ou doenças graves, estressantes
Reaparecimento na circulação → prognóstico bom
Eosinofilia Algoritmo para o diagnóstico das causas mais comuns de eosinofilia em felinos Eosinofilia persistente ( >1000 / uL)
Exame da pele Exame do trato respiratório
Exame do trato digestivo
DAPP Placa eosinofílica Granuloma linear Dermatite alérgica Cuterebra sp.
Asma Paragonimus sp. Aelurostrongylus sp Dirofilaria oculta Enterite parasitária ou não Lesão oral Síndrome hipereosinofílica
Eosinofilia Causas mais comuns de eosinofilia em cães: algoritmo Eosinofilia persistente ( >1000 / uL)
Exame do trato respiratório
Exame da pele
Exame do trato digestivo
Dirofilaria? Pneumonite eosinofílica Paragonimus sp. Filaroides DAPP Alergia (alimentar, Staphylococcus sp. Strongyloides Outros Enterite Parasitaria ou não Granuloma eosinofílico oral
Basófilos Basofilia - > 3 a 6 % Parasitismo (Dirofilariose)
Reações de hipersensibilidade Associada a Lipemia Mastocitoma Leucemia granulocítica
Linfócitos
Origem- Timo e Medula óssea Circulação sangue - tecidos Tempo de trânsito: 8 a 12 horas Tempo de sobrevida: meses a anos
Linfopenia Doenças virais Lesão direta do tecido linfóide Redistribuição linfática devido ao estresse ou exposição ao antígeno Cinomose, HIC, enterite por
parvovirus, enterite por coronavirus
Linfopenia Corticoide exógeno ou endógeno Fase precoce de doença aguda e grave Normalização: prognóstico bom Perda de linfa Quilotorax (efusão quilosa) Enteropatia com perda proteica Linfangiectasia Alteração da circulação linfática Doença inflamatória, infecciosa ou neoplásica
Linfocitose Transitória – leucocitose fisiológica (15-30’) Linfocitose persistente – forte estimulação imune Infecção crônica Viremia Doença imunemediada Imunização recente
Can, M, Husky Siberiano, 3 a Ädquirido com 4 a 5 meses de idade. Óbito da irmã por cinomose. Não imunizado. Presença de carrapatos. Tremores, Ataxia, vocalização excessiva, convulsão,mioclonias
Hemácias x106/uL Hematócrito (%) Hemoglobina(g/dL)
4,7 33 10,3
Leucócitos ( x103/uL) N.bastonetes 0 N.segmentados Eosinófilos Linfócitos Monócitos Plaquetas – 137.000
5.700 4.902 57 570 171
Cão, Rex, M, 3 meses HC: gastrenterite, de 2 dias de evolução Hemácias x106/uL Hematócrito (%) Hemoglobina(g/dL) Leucócitos ( x103/uL) N. jovens N.bastonetes N.segmentados Eosinófilos Linfócitos Monócitos P.total (g/dL)
5,5 41 12,8 5,5 220 1650 3300 0 165 165 5,0
Obs. Neutrófilos tóxicos; degeneração do citoplasma de N
Linfocitose Leucemia linfática Anemia não regenerativa, trombocitopenia e neutropenia Linfoblastos
Linfocitose Linfoma / leucemia linfática
Evento tardio Acompanhada de anemia não regenerativa Trombocitopenia e neutropenia, Linfoblastos, com nucléolos evidentes
Monócitos
Função
Fagocitose PI liberação de mediadores: fatores quimiotáticos, prostaglandinas Apresentação de antígeno Participação na regulação da reserva corpórea de ferro
Monocitose
Presença de inflamação Demanda por fagocitose Necrose tecidual
Monócitos
Morfologia na doença Núcleo oval a arredondado Citoplasma abundante Vacúolos proeminentes, com ou sem material fagocitado: Eritrócitos (AHIM) Leveduras: histoplasmose Protozoários: leishmaniose
Cão, M, Elvis, 3m
Animal encontrado na rua Diarréia, dispnéia, secreção nasal, “olho azul” Em tratamento com corticoide (Ehrlichia?)
Hemácias x106/uL Hematócrito (%) Hemoglobina(g/dL) Leucócitos ( x103/uL) N. jovens N.bastonetes N.segmentados Eosinófilos Linfócitos Monócitos Basófilos
4,2 26 8,0 52.000 0 0 42.330 520 520 3.640 4.160
Plaquetas - 496.000 /uL (85.000)*
Cão, M, Elvis, 3m
PCR – Adenovirus 1 e 2, vírus da cinomose
Cão, Luana, F, 11 m HC - diarréia, ataxia locomotora, paralisia progressiva, convulsão, imunização (três doses)
Data Leucócitos/uL N. bastonetes N. segmentados Eosinófilos
11/12/02
03/01/03
10/01/03
6.600
4.500
7.200
66
0
0
4.620
3.690
6.336
66
45
0
1650
495
216
198
45
648
Linfócitos Monócitos Diagnóstico - Cinomose
Cão, Rex, M, 3 meses HC: gastrenterite, de 2 dias de evolução
Hemácias x106/uL Hematócrito (%) Hemoglobina(g/dL) Leucócitos ( x103/uL) N. jovens N.bastonetes N.segmentados Eosinófilos Linfócitos Monócitos P.total (g/dL)
5,5 41 12,8 5,5 220 1650 3300 0 165 165 5,0
Obs. Neutrófilos tóxicos; degeneração do citoplasma de N
Can, Maltês, F ,10 a
Hemácias x106/uL
1,9
Hematócrito (%)
12
Hemoglobina(g/dL)
3,9
Leucócitos ( x103/uL)
22,4
N.bastonetes
0
N.segmentados
11424
Eosinofilos
224
Linfócitos
10528
Monócitos
224
Reticulócitos %
10,5
Eritroblastos %
50
Plaquetas x 103 / uL
34,0
Coomb’s – Pos. Anemia hemolítica imunemediada
Xamã, Fel, siamês, M, 8anos Hemácias x106/uL Hematócrito (%) Hemoglobina(g/dL) Leucócitos ( x103/uL) N.bastonetes N.segmentados Eosinofilos Linfócitos tipicos L. atípicos Monócitos
4,2 24 7,6 67.000 0 57.630 678 102 2034 1356
Reticulócitos/ uL
150.000
5,5 31 9,7 28.200 0 21.714 282 5.640 ... 564
Diagnóstico –Anemia infecciosa felina
8,2 40 13,2 17.500 0 11.200 2100 3.150 525 525
Fel., Birmanês, F, 3 anos Anorexia e dispnéia de vários dias de duração
Hemácias x106/uL
5,6
Hematócrito (%)
25
Hemoglobina(g/dL)
8,1
Leucócitos ( x103/uL)
54,0
N.bastonetes
6000
N.segmentados
44.000
Eosinofilos
800
Linfócitos
1.200
Monócitos
2.000
Plaquetas x 103 / uL
Reduzido
Morfologia Marcante toxicidade de neutrófilos Linfócitos reativos esporadicos
1.
Leucograma inflamatório ativo com stress, necrose tecidual e toximia sistêmica.
Desvio a esquerda e monocitose são indicativos de inflamação A monocitose também indica necrose tissular. Alto nível de corticoide circulante é indicado pla linfopenia marginal Toxemia sistêmica é indicada pela presença de neutrófilos tóxicos. Neste caso, a toxemia é grave, Em cães e gatos, toxiemia sistêmica grave é associada a infecções bacterianas 2. Anemia da doença inflamatória – anemia moderada,normocítica normocrômica 3. Trombocitopenia indicativa de possível CID, considerando-se a severidade da inflamação e toxemia sistêmica, a trombocitopenia pode ser indicador de CID. Diagnóstioc: Piotórax bacteriano. Painel para CID indicou ocorr~encia de CID sub-clínica
Can, cocker spaniel, F, 8 anos HC- linfadenopatia generalizada Hemácias x106/uL
2,6
Hematócrito (%)
15
Hemoglobina(g/dL)
5,0
Leucócitos ( x103/uL)
5,0
N.bastonetes
0
N.segmentados
3.000
Eosinofilos
300
Linfócitos
700
Monócitos
1.000
Plaquetas x 103 / uL Pt. Plasmática
34,0 6,0 g/dL
1. Possível doença medular. Os dados do leucograma, eritrograma e trombograma indicam pancitopenia. 2. Citopenia inexplicável de uma ou mais linhagens celulares sugere possível problema de produção medular. 3. Possibilidades: hipoplasia/aplasia, síndrome mieloftísica, mielofibrose 4. Nesse caso MO foi altamente celular, porém anormal. Infiltrado de linfoblastos. 5. Diagnóstico- síndrome mieloftísica devido a linfossarcoma linfoblástica