76 serie branca

CONSIDERAÇÕES

SOBRE LEUCÓCITOS E LEUCOGRAMA

Leucograma Anormal: permite identificar os processos patológicos Não permite definição de um diagnóstico específico

Interpretação das anormalidades leucocitárias e dos achados clínicos pode levar a um diagnóstico

Leucócitos: morfologia e função Neutrófilos Função: quimiotaxia e fagocitose

Leucócitos: morfologia e função Linfócitos Função: imunidade humoral e celular

Linfócitos granulares (mais comuns em ruminantes)

Leucócitos: morfologia e função Linfócitos

Função:

Leucócitos: morfologia e função Monócitos Função: •Fagocitose •Função imunorreguladora •Destruição de hemácias

Monócitos

  



Normal Semelhante em cães e gatos Esfregaço de sangue fresco: arredondado, sem vacúolos citoplasmáticos Sangue com EDTA margem celular irregular, pseudópodos, vacuolizaçào citoplasmática

Leucócitos: morfologia e função Eosinófilos Função: • Mecanismo de defesa contra os estágios larvares de parasitas • Modulação de reações alérgicas inflamatórias e de imunocomplexos

Leucócitos: morfologia e função Basófilos

Função: • Desconhecida • Conteúdo: histamina e heparina • Membrana citoplasmática: IgE

Valores de Referência Interpretação : valores absolutos N. Bastonetes = 2% 60.000 10.000 1000 200

200

2%

2%

1200 2%

Número relativo vs. Número absoluto

Estágios de maturação dos neutrófilos

Produção e Cinética dos Neutrófilos

Produção de neutrófilos na MO Mieloblasto

Prómielócito Mielócito Metamielócito N. bastonete N. segmentado

Mieloblasto pode originar 16 a 32 células, antes de perder sua capacidade produtiva

Fatores que influem na granulopoiese

FEC- GM

FIC

FEC-G Linfocinas Eosinofilopoetina Basofilopoetina LĂ­tio Corticosteroides

(+)

Granulopoese (-)

Lactoferrina, transferrina Linfocinas PGE1 e PGE2 Produtos dos macrĂłfagos

Granulopoiese Sistema de células - tronco Compartimento De proliferação

Mieloblasto Promielocito

mielócito

Compartimento de Maturação e

estocagem

Compartimento circulante

Metamielócito N. Bastonete

N. segmentado

Compartimento marginal

TECIDOS

Distribuição de neutrófilos Exame M.O.



Mieloblasto Progranulocito Mielócito

Produção

Metamielo N. Bastonete N.Segmentado

Leucograma



Pool circ.

Pool marginal

Citologia



M. int.

Pulmão urina

Maturação/Reserva

Medula óssea

Sangue

Tecido

Cinética de neutrófilos Sangue

Medula óssea Mieloblasto Progranulocito Mielócito

Metamielo N. Bastonete N.Segmentado

Compartimento medular Tempo de trânsito – 7 a 10 dias ( inflamação- 2 a 3 dias)

Pool circ.

Pool marginal

Tecido M. int.

Pulmão urina Migração transendotelial

Compartimento sanguíneo Meia-vida na circulação (6-10 h)

Migração de neutrófilos Compartimento marginal

(microcirculação)

Compartimento circulante (Grandes vasos)

Cão: c. marginal = C. circulante

Gato: C. marginal = 2x C. circulante

Interpretação da resposta leucocitária nas doenças

Conceitos • Citopenias – neutropenia, linfopenia e eosinopenia • -filia ou –citose – neutrofilia ou leucocitose neutrofílica;

eosinofilia; basofilia; monocitose; linfocitose; eritroblastose ou metarrubricitose • Desvio à Esquerda – aumento do número de neutrófilos imaturos na circulação sanguínea • Leucemia – presença de células neoplásicas na circulação sanguínea

Conceitos • Distúrbios linfoproliferativos Neoplasias de linfócitos B ou T ou de outras células Linfoma – tecido sólido Leucemia linfocítica – sangue e/ou medula óssea Neoplasias de linfócito B –plasmócito Mieloma • Distúrbios mieloproliferativos

Alterações na morfologia celular 

Nucleares: hipersegmentação ou hiposegmentação



Tamanho ou forma: neutrófilos gigantes

Alterações tóxicas





   

Corpúsculos de Döhle Basofilia citoplasmática Granulações tóxicas Vacuolização Alterações nucleares Células gigantes

Degeneração de neutrófilos

•

Vacuolização citoplasmica

•

Tumefação nuclear-perda do padrão de cromatina

Esfregaço preparado após 12 horas – artefato de técnica

Mucopolissacaridose Doença de armazenamento lisosomal –(MPS)

Deficiência de enzimas lisossômicas para a degradação de GAGs Grânulos não são evidenciados na coloração pela técnica Diff-Quick

Resposta leucocitária

Resposta à excitação Migração de leucócitos do compartimento marginal  circulante: neutrofilia madura

Gatos: linfocitose até 20.000 células/L

Resposta ao estresse Linfopenia Aumento de neutrófilos – hiperssegmentação Eosinopenia Monocitose (cães)

Resposta neutrofílica na inflamação aguda

 Estágio inicial –neutrofilia (N. maduros)  Depleção do pool de maturação e reserva – D.E.  Dias após Mieloide hiperplasia expansão da produção de N  D.E.  Estabilização da inflamação – neutrófilos maduros

Resposta neutrofílica na inflamação aguda

Neutrofilia

Mieloblasto Progranulocito Mielócito

Produção

Metamielo N. Bastonete N.Segmentado

Pool circ.

Pool marginal

TECIDO

Maturação/Reserva

4 a 6 dias

Medula óssea

INFLAMAÇÃO

Resposta neutrofílica na inflamação aguda Neutrofilia Desvio a esquerda Mieloblasto Progranulocito Mielócito

Produção

Metamielo N. Bastonete N.Segmentado

Esgotamento da reserva

Medula óssea

Pool circ.

Pool marginal

TECIDO

INFLAMAÇÃO

Resposta neutrofílica na inflamação aguda Neutrofilia

Mieloblasto Progranulocito Mielócito

Produção

Metamielo N. Bastonete N.Segmentado

Maturação / reserva

Medula óssea

Pool circ.

Pool marginal

TECIDO

INFLAMAÇÃO

Resposta neutrofílica na inflamação aguda Neutrofilia discreta ou inexistente

Mieloblasto Progranulocito Mielócito

Produção

Metamielo N. Bastonete N.Segmentado

Maturação / reserva

Medula óssea

Pool circ.

Pool marginal

TECIDO

INFLAMAÇÃO

Resposta neutrofílica na inflamação Leucograma normal

 Mieloblasto Progranulocito Mielócito

Produção

Metamielo N. Bastonete N.Segmentado

Maturação/Reserva

Medula óssea

Pool circ.

Pool marginal

Tecido (Mucosa) Inflamação discreta,crônica

Neutrรณfilos x prognรณstico

Prognóstico do processo inflamatório

Bom Leucocitose < 40.000 D.E. discreta a moderada

Mau D.E. degenerativo Leucopenia / neutropenia Reação leucemoide Neutrófilos tóxicos Linfopenia

Neutrofilia

D.E. significante >1.000 N. bast. / uL

Sim

Inflamação

Não Leucocitose marcante

Sim

Não Linfopenia

Sim

Inflamação

Estresse Esteróide

Não

Linfocitose

Sim

Epinefrina

Outras causas de neutrofilia Hemorragia ou anemia hemolítica 





Neutrofilia com desvio a esquerda (discreto) ocorre em animais com anemia hemolítica imune – mediada Leucocitose marcante ( > 50.000) Neutrofilia madura ocorre 3 hs. após hemorragia aguda

Neutropenia Consumo de neutrófilos •Taxa de migração para os tecidos excede a capacidade do “pool”de reserva medular de neutrófilos / endotoxemia • Enterite por parvovirus • Salmonelose • Destruição imunemediada

Neutropenia •

Demanda aguda ou consumo nos tecidos •

Processo inflamatório severo

•

Desvio a esquerda severo

•

Alterações tóxicas evidentes nos neutrófilos na circulação sanguínea

•

Prognóstico pobre ou reservado

Neutropenia  Diminuição da produção medular por dano tóxico severo estrógeno, fenilbutazona, cloranfenicol, griseofulvina Agentes infecciosos: Ehrlichia canis, parvovirus, VLF Irradiação Imune - mediada

Neutropenia  Granulopoiese ineficaz (disgranulopoiese) Adequado número de progenitores / alteração na produção ou no desenvolvimento

Mielodisplasia, leucemia mieloide,VLF, VIF

Marginalização Evento precoce e transitório Anafilaxia, endotoxemia

Eosinófilos  Produção MO. Cinética = Neutrofilos

 Função Reações de hipersensibilidade Papel principal na morte de parasitas (nematoides e trematoides)

 Número no SP Reflexo da produção, demanda e consumo

Eosinofilia

  







Alergia (HS tipo I) Parasitas Inflamação granulomatosa Neoplasias Síndrome hipereosinofílica Leucemia eosinofílica

Eosinopenia  

Pode ser normal em alguns indivíduos Causas:   

Infecções agudas hipercortisolemia (endógena ou exógena) liberação de adrenalina por medo ou exercício extremo

Eosinopenia 



Limite normal inferior = zero Corticosteroide endógeno / exógeno

Fase aguda do processo inflamatório ou doenças graves, estressantes

Reaparecimento na circulação → prognóstico bom

Eosinofilia Algoritmo para o diagnóstico das causas mais comuns de eosinofilia em felinos Eosinofilia persistente ( >1000 / uL)

Exame da pele Exame do trato respiratório

Exame do trato digestivo

DAPP Placa eosinofílica Granuloma linear Dermatite alérgica Cuterebra sp.

Asma Paragonimus sp.

Aelurostrongylus sp Dirofilaria oculta Enterite parasitária ou não Lesão oral Síndrome hipereosinofílica

Eosinofilia Causas mais comuns de eosinofilia em cães: algoritmo Eosinofilia persistente ( >1000 / uL)

Exame do trato respiratório

Exame da pele

Exame do trato digestivo

Dirofilaria?

Pneumonite eosinofílica Paragonimus sp.

Filaroides DAPP Alergia (alimentar, Staphylococcus sp.

Strongyloides Outros Enterite Parasitaria ou não Granuloma eosinofílico oral

Basófilos Basofilia - > 3 a 6 % Parasitismo (Dirofilariose)

Reações de hipersensibilidade Associada a Lipemia Mastocitoma Leucemia granulocítica

Linfócitos





Origem- Timo e Medula óssea Circulação sangue - tecidos Tempo de trânsito: 8 a 12 horas Tempo de sobrevida: meses a anos

Linfopenia Doenças virais  Lesão direta do tecido linfóide  Redistribuição linfática devido ao estresse ou exposição ao antígeno  Cinomose, HIC, enterite por

parvovirus, enterite por coronavirus

Linfopenia  Corticoide exógeno ou endógeno Fase precoce de doença aguda e grave Normalização: prognóstico bom Perda de linfa Quilotorax (efusão quilosa) Enteropatia com perda proteica Linfangiectasia Alteração da circulação linfática Doença inflamatória, infecciosa ou neoplásica

Linfocitose  Transitória – leucocitose fisiológica (15-30’)  Linfocitose persistente – forte estimulação imune Infecção crônica Viremia Doença imunemediada Imunização recente

Can, M, Husky Siberiano, 3 a Ädquirido com 4 a 5 meses de idade. Óbito da irmã por cinomose.

Não imunizado. Presença de carrapatos.

Tremores, Ataxia, vocalização excessiva, convulsão,mioclonias

Hemácias x106/uL Hematócrito (%) Hemoglobina(g/dL)

4,7 33 10,3

Leucócitos ( x103/uL) N.bastonetes 0 N.segmentados Eosinófilos Linfócitos Monócitos Plaquetas – 137.000

5.700 4.902 57 570 171

Cão, Rex, M, 3 meses HC: gastrenterite, de 2 dias de evolução Hemácias x106/uL Hematócrito (%) Hemoglobina(g/dL) Leucócitos ( x103/uL) N. jovens N.bastonetes N.segmentados Eosinófilos Linfócitos Monócitos P.total (g/dL)

5,5 41 12,8 5,5 220 1650 3300 0 165 165 5,0

         

Obs. Neutrófilos tóxicos; degeneração do citoplasma de N

Linfocitose Leucemia linfática Anemia não regenerativa, trombocitopenia e neutropenia Linfoblastos

Linfocitose Linfoma / leucemia linfática  

 

Evento tardio Acompanhada de anemia não regenerativa Trombocitopenia e neutropenia, Linfoblastos, com nucléolos evidentes

Monócitos

Função  

 

Fagocitose PI liberação de mediadores: fatores quimiotáticos, prostaglandinas Apresentação de antígeno Participação na regulação da reserva corpórea de ferro

Monocitose







Presença de inflamação Demanda por fagocitose Necrose tecidual

Monócitos

   

Morfologia na doença Núcleo oval a arredondado Citoplasma abundante Vacúolos proeminentes, com ou sem material fagocitado:  Eritrócitos (AHIM)  Leveduras: histoplasmose  Protozoários: leishmaniose

Cão, M, Elvis, 3m

 Animal encontrado na rua  Diarréia, dispnéia, secreção nasal, “olho azul”  Em tratamento com corticoide (Ehrlichia?)

Hemácias x106/uL Hematócrito (%) Hemoglobina(g/dL) Leucócitos ( x103/uL) N. jovens N.bastonetes N.segmentados Eosinófilos Linfócitos Monócitos Basófilos

4,2 26 8,0 52.000 0 0 42.330 520 520 3.640 4.160

Plaquetas - 496.000 /uL (85.000)*





  

Cão, M, Elvis, 3m

PCR – Adenovirus 1 e 2, vírus da cinomose

Cão, Luana, F, 11 m  HC - diarréia, ataxia locomotora, paralisia progressiva, convulsão, imunização (três doses)

Data Leucócitos/uL N. bastonetes N. segmentados Eosinófilos

11/12/02

03/01/03

10/01/03

6.600

4.500

7.200

66

0

0

4.620

3.690

6.336

66

45

0

1650

495

216

198

45

648

Linfócitos Monócitos  Diagnóstico - Cinomose

Cão, Rex, M, 3 meses HC: gastrenterite, de 2 dias de evolução

Hemácias x106/uL Hematócrito (%) Hemoglobina(g/dL) Leucócitos ( x103/uL) N. jovens N.bastonetes N.segmentados Eosinófilos Linfócitos Monócitos P.total (g/dL)

5,5 41 12,8 5,5 220 1650 3300 0 165 165 5,0

         

Obs. Neutrófilos tóxicos; degeneração do citoplasma de N

Can, Maltês, F ,10 a

Hemácias x106/uL

1,9

Hematócrito (%)

12

Hemoglobina(g/dL)

3,9

Leucócitos ( x103/uL)

22,4

N.bastonetes

0

N.segmentados

11424

Eosinofilos

224

Linfócitos

10528

Monócitos

224

Reticulócitos %

10,5

Eritroblastos %

50

Plaquetas x 103 / uL

34,0

Coomb’s – Pos. Anemia hemolítica imunemediada

Xamã, Fel, siamês, M, 8anos Hemácias x106/uL Hematócrito (%) Hemoglobina(g/dL) Leucócitos ( x103/uL) N.bastonetes N.segmentados Eosinofilos Linfócitos tipicos L. atípicos Monócitos

4,2 24 7,6 67.000 0 57.630 678 102 2034 1356

Reticulócitos/ uL

150.000

5,5 31 9,7 28.200 0 21.714 282 5.640 ...

564

Diagnóstico –Anemia infecciosa felina

8,2 40 13,2 17.500 0 11.200 2100 3.150 525 525

Fel., Birmanês, F, 3 anos Anorexia e dispnéia de vários dias de duração

Hemácias x106/uL

5,6

Hematócrito (%)

25

Hemoglobina(g/dL)

8,1

Leucócitos ( x103/uL)

54,0

N.bastonetes

6000

N.segmentados

44.000

Eosinofilos

800

Linfócitos

1.200

Monócitos

2.000

Plaquetas x 103 / uL

Reduzido

Morfologia Marcante toxicidade de neutrófilos Linfócitos reativos esporadicos

1.

Leucograma inflamatório ativo com stress, necrose tecidual e toximia sistêmica.

Desvio a esquerda e monocitose são indicativos de inflamação A monocitose também indica necrose tissular.

Alto nível de corticoide circulante é indicado pla linfopenia marginal Toxemia sistêmica é indicada pela presença de neutrófilos tóxicos. Neste caso, a toxemia é grave, Em cães e gatos, toxiemia sistêmica grave é associada a infecções bacterianas 2. Anemia da doença inflamatória – anemia moderada,normocítica normocrômica 3. Trombocitopenia indicativa de possível CID, considerando-se a severidade da inflamação e toxemia sistêmica, a trombocitopenia pode ser indicador de CID. Diagnóstioc: Piotórax bacteriano. Painel para CID indicou ocorr~encia de CID sub-clínica

Can, cocker spaniel, F, 8 anos HC- linfadenopatia generalizada Hemácias x106/uL

2,6

Hematócrito (%)

15

Hemoglobina(g/dL)

5,0

Leucócitos ( x103/uL)

5,0

N.bastonetes

0

N.segmentados

3.000

Eosinofilos

300

Linfócitos

700

Monócitos

1.000

Plaquetas x 103 / uL Pt. Plasmática

34,0 6,0 g/dL

1. Possível doença medular. Os dados do leucograma, eritrograma e trombograma indicam pancitopenia.

2. Citopenia inexplicável de uma ou mais linhagens celulares sugere possível problema de produção medular.

3. Possibilidades: hipoplasia/aplasia, síndrome mieloftísica, mielofibrose 4. Nesse caso MO foi altamente celular, porém anormal. Infiltrado de linfoblastos.

5. Diagnóstico- síndrome mieloftísica devido a linfossarcoma linfoblástica