Practica 1

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969 PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR UNIDAD ACADÉMICA CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA TOXICOLOGÍA

PRÁCTICA N° 1 Estudiante: Andrea Rojas Angulo.

Curso: Octavo semestre “A”.

Docente: BQF. Carlos García Gonzáles MsC. Fecha: 05 de noviembre del 2016.

Título de la Practica: Animal de Experimentación: Rata wistar.

Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.

Volumen administrado: 10 ml de Alcohol Metílico.

Inicio de la Practica Hora de Disección Hora de Inicio de Destilado Hora de Finalización de Destilado Hora de Finalización dela Práctica

I.

10:35 am 10:55 am 11:30 am 12:00 am 13:30 pm

OBJETIVOS: a) Observar la sintomatología que presenta el animal de experimentación tras la intoxicación por metanol. b) Observar cuidadosamente las reacciones antes la presencia de metanol y controlar el tiempo en que actúa el toxico en la rata Wistar. c) Reconocer mediante la observación de los colores característicos, indicativos de la intoxicación.

II.

FUNDAMENTO TEÓRICO: El metanol, es un compuesto químico del grupo de los alcoholes, también conocido bajo el nombre de alcohol metílico, siendo además, el alcohol más sencillo del grupo. Su fórmula es CH3OH, teniendo una estructura química muy similar a la del agua, diferenciándose tan sólo en los ángulos de enlace. Cuando el metanol está a temperatura ambiente, en condiciones normales, se presenta en estado líquido e incoloro, siendo bastante tóxico, e inflamable. Tiene poca viscosidad y posee un olor característico a frutas bastante penetrable, y perceptible a partir de los 2 ppm. Es un compuesto que puede ser utilizado tanto como disolvente o como combustible, siendo bastante miscible tanto en agua como en otros solventes de tipo orgánico

III.

INSTRUCCIONES: 3.1. Trabajar con orden, limpieza y sin prisa.

3.2. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando.

3.3. Llevar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, cofia, zapatones, gafas.

3.4. Utilizar la campana de extracción de gases siempre que sea necesario.

IV.

MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS Y SUSTANCIAS:                  

MATERIALES Vasos de precipitación Pipetas Erlenmeyer Tubos de ensayo Probeta Perlas de vidrio Agitador Embudo Guantes Mascarilla Gorro Mandil Aguja hipodérmica 10 ml Fosforo Pinzas Cocineta Espátula Gradilla

       

EQUIPOS Aparto de destilación Balanza Baño mario Campana de extracción Cronómetro Estuche de diseccion Panema Agitador

         

SUSTANCIAS Cloruro de fenilhidracina Nitroprusiato sódico al 2.5 % NaOH y HCl Cloruro de fenilhidracina al 4% Ferricianuro de potasio 5-10% Ácido sulfúrico Leche Cloruro férrico Sulfato ferroso Ácido clorhídrico

MUESTRAS  Destilado de vísceras del animal de experimentaci ón

V.

ACTIVIDADES A REALIZAR: 5.1. Limpiar el mesón de trabajo.

5.2. Tener a mano todos los materiales a utilizarse en la práctica.

5.3. Colocarse el equipo de protección adecuada para evitar contaminación alguna como mascarilla, mandil, guantes y gorro.

5.4. Agarrar al animal de experimentación (rata wistar) por sus patas y intraperitoneal y anotamos el tiempo.

5.5. Luego se coloca en el panema y observamos los efectos que se producen en la rata wistar.

5.6. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el animal de experimentación (rata wistar), en u vaso de precipitación recolectar sus fluidos y cortar las vísceras lo más finas posibles en un vaso de precipitación.

5.7. Observamos el estado de las vísceras.

5.8. El contenido del vaso anterior lo pasamos al balón para proceder a la destilación.

5.9. Armamos el equipo de destilación (método de soxhleth), asegurando que no existan 5.10. Adicionamos a las vísceras acido tartárico (25 ml) y calentamos con la lámpara de alcohol esto con movimiento circular.fugas que conlleven a pérdidas del destilado.

5.11. Al producto de la destilación, le colocamos una lámina de cobre al rojo vivo hasta que se observe el desprendimiento de partículas de color gris, con esto convertimos el metanol a metanal.

5.12. Se agrega agua destilada hasta completar 250 ml, se lleva a baño maria por 30 minutos con agitación constante, dejamos enfriar y lo filtramos.

5.13. Terminado el proceso, con la solución problema se realiza las reacciones de reconocimiento.

5.14. Una vez terminada toda la práctica se limpia y desinfecta el área donde se trabajó, colocar los reactivos utilizados donde corresponden al igual que los materiales.

VI.

REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: 6.1. Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro.

Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.

6.2. Reacción de Rimini A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.

6.3. Con la Fenilhidracina En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella.

6.4. Reacción de Marquis Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta.

6.5. Con el Ácido Cromotrópico Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.

6.6. Reacción de Hehner Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.

6.7. Reacción con Cianuro de Sodio Se adiciona solución patrón de cianuro de sodio dando una coloración roja.

6.8. Coloración de la llama Se coloca una pequeña cantidad de muestra sobre una espátula y se pone en contacto con la llama, si hoy la presencia de metanol se tornara una coloración verde fluorescente.

VII.

GRÁFICOS

7.1.RESULTADOS OBTENIDOS REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS

Reacción de Shiff:

Reacciรณn de Rimidi:

Reacciรณn con Fenil hidracina:

Reacciรณn con Cianuro de Sodio:

Reacción de Hehner:

Reacción de Marquis

VIII.

OBSERVACIONES Se observó que al administrar el toxico (metanol) por vía intraperitoneal a la rata presento cierta inmovilidad, ceguera, vomito constante y cefalea, tomando 10 minutos para su deceso desde su administración.

IX.

CONCLUSIONES Se puede concluir que el veneno utilizado el metanol es muy toxico debido a las manifestaciones como la poca movilidad, convulsiones y como que presentaron los animales de experimentación, en primera instancia se logró la muerte ya que s le administro un total de 10 ml del toxico el deceso fue inmediato y mediante las reacciones para el reconocimiento de este podemos concluir que si hubo presencia de metanol en el destilado procedente de las vísceras del animal.

X.

RECOMENDACIONES  Realizar la asepsia de la mesa de trabajo.  Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla.  Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.  Utilizar la cámara de gases para realizar las pruebas y evitamos así intoxicaciones.  Para que la muerte del animal sea de forma rápida debemos de asegurarnos de la pureza del reactivo (metanol), así nos aseguramos que la muerte no sea lenta y dolorosa para el animal de experimentación.  Al someter calor en el tubo de ensayo para las reacciones, realizarlo de lado en direcciones contrarias a las personas.

XI.

CUESTIONARIO 1. ¿Qué es el metanol?

Líquido incoloro y muy tóxico, obtenido por destilación de la madera a baja temperatura o mediante la reacción del monóxido de carbono y el hidrógeno, que se emplea para desnaturalizar el alcohol etílico y como aditivo de combustibles líquidos.       

  

2. ¿Dónde se usa el metanol?

Síntesis química.

Solvente Industrial.

Deshumidificante.

Anticongelante.

Industria del plástico.

Pinturas.

Curtido de pieles.

3. Vías de intoxicación del metanol Vía digestiva, en el caso de bebidas alcohólicas adulteradas con alcohol desnaturalizado.

Vía respiratoria.

Vía dérmica (por la piel), difícilmente pueda dar lugar a intoxicaciones agudas.

4. ¿Qué síntomas se presentan ante una intoxicación por metanol?

Los síntomas pueden incluir:  Pulmones y vías respiratorias  Dificultad respiratoria

 Ojos            Otros:

Paro respiratorio Ceguera, completa o parcial, a veces descrita como "ceguera de la nieve" Visión borrosa Dilatación (ensanchamiento) de las pupilas Corazón y vasos sanguíneos Presión arterial baja Sistema nervioso: Comportamiento agitado Coma Confusión Dificultad para caminar Mareo

 Fatiga  Calambres en las piernas  Debilidad XII.

GLOSARIO Toxico cinética: Estudio cuantitavo de los procesos que experimenta, en función del tiempo, un xenobiótico en un organismo vivo.

Acidosis: La acidosis es un trastorno que se produce cuando los líquidos corporales contienen una cantidad excesiva de ácido. Se manifiesta cuando los riñones y los pulmones no logran mantener el equilibrio del pH corporal.

Mosto: El mosto es el zumo de la uva que contiene diversos elementos de la uva como pueden ser la piel, las semillas, etc. Se considera una de las primeras etapas de la elaboración del vino.

Aspartame: Es un polvo blanco, inodoro, no calórico y no nutritivo; elaborado a través de la mano del hombre, a partir de dos aminoácidos (moléculas pequeñas de las proteínas), que son el ácido aspártico y la fenilalanina, además de una pequeña cantidad de metanol (también conocido como alcohol metílico).

XIII.

ANEXO

XIV.

AUTORÍA BQF. Carlos García Gonzáles MsC.

XV.

WEBGRAFÍA

1. Carlos. (s.f.). Toxicología. Recuperado el 01 de noviembre de 2016, de http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/cfmc/Toxicologia/Toxicocinetica_Carlos.p df 2. Ecured. (s.f.). Recuperado https://www.ecured.cu/Metanol

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3. line, H. (2008). Recuperado el http://es.healthline.com/health/acidosis

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4. Medlineplus. (s.f.). Recuperado el 01 de noviembre https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/002680.htm

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5. Wordpress. (26 de septiembre de 2007). Nueva salud. Recuperado el 01 de noviembre de 2016, de https://diabetesstop.wordpress.com/2007/09/26/%C2%BFque-es-el-aspartame/

XVI.

FIRMA DE RESPONSABILIDAD:

_____________________________ Andrea Rojas Angulo C.I. 0706744752