UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969 PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR UNIDAD ACADÉMICA CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE ANÁLISIS DE MEDICAMENTOS
PRÁCTICA N° BF.9.01-07 TEMA DE LA PRÁCTICA: MÉTODOS ANALÍTICOS, MICRO ANALÍTICOS, BIOLÓGICOS, FÍSICOS Y QUÍMICOS EN EL CONTROL DE CALIDAD. INSPECCIÓN Y MUESTREO NOMBRE DE LA PRÁCTICA: EVALUACIÓN DE CALIDAD DE METIONINA I.
DATOS INFORMATIVOS
Carrera: Bioquímica y Farmacia Docente: Bioq. García González Carlos Alberto, Ms. Estudiante: Rojas Angulo Rosa Andrea. Grupo: N°2 Ciclo/Nivel: Noveno semestre “A”. Fecha de Elaboración de la Práctica: 13 de julio del 2017. Fecha de Presentación de la Práctica: 20 de julio del 2017 TIEMPOS
Inicio de la práctica: 1:45 pm.
Hora de preparación de materiales: 02:30 pm
Elaboración de cálculos: 3:00 am.
Proceso de control de calidad: 3:30 pm.
Fin de la práctica: 04:30 pm. “LA CALIDAD NUNCA ES UN ACCIDENTE, SIEMPRE ES EL RESULTADO DE UN ESFUERZO DE LA INTELIGENCIA”. JOHN RUSKIN
DATOS DEL MEDICAMENTO
Casa Comercial. SERES
Principio activo: Metionina
Peso Neto: 400 g
Forma farmacéutica: Polvo
Nombre del producto: Nutricalcim
II.
OBJETIVOS
2.2.1. Realizar la evaluación de calidad de la Metionina en una forma farmacéutica de polvo, basándose en ensayos de diferentes farmacopeas. 2.2.2. Comprobar si el fármaco cumple con los parámetros referenciales establecidos en las farmacopeas analizando y comparando los resultados. III.
FUNDAMENTACIÓN
La metionina es esencial para el buen estado de los tejidos corporales, en concreto de la piel y las uñas. Junto a esto hay que destacar la labor que tiene en el mecanismo de quema de grasas del cuerpo, y es que es la encargada de transportar la grasa hasta las células para convertirla en energía, y lograr así un rendimiento muscular óptimo en todos los sentidos. Este tránsito de las grasas del cuerpo lo que hace es que este aminoácido evite la acumulación de la misma en las arterias y el hígado, y así conseguir una buena salud corporal a varios niveles (VITÓNICA, 2011). Entre otras funciones que tiene este aminoácido debemos destacar su poder para disminuir las reacciones producidas en nuestro cuerpo por los alérgenos de los alimentos. Además, es algo que se utiliza en muchos tratamientos para la depresión y otros tipos de trastornos psicológicos. Es importante destacar su alto poder antioxidante, que lo convierte en un aliado celular a la hora de evitar los efectos causados por los radicales libres (VITÓNICA, 2011). La única fuente de metionina es la ingesta, a partir principalmente de proteínas animales. El metabolismo de la homocisteína está muy relacionado con las vitaminas B6, B12 y ácido fólico. La metionina que proviene de la ingesta se metaboliza, principalmente en el hígado, en homocisteína (García, Gómez, Ríos, Barbado, & Vázquez, 2001). “LA CALIDAD NUNCA ES UN ACCIDENTE, SIEMPRE ES EL RESULTADO DE UN ESFUERZO DE LA INTELIGENCIA”. JOHN RUSKIN
IV.
MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS Y SUSTANCIAS:
1. pH MATERIALES VIDRIO: Varilla de vidrio Pipeta Vaso de precipitación OTROS Guantes , Mascarilla Gorro, Mandil
EQUIPOS Peachimetro
SUSTANCIAS Agua destilada Buffer
MEDICAMENTO Metionina (Polvo Nutricalcin)
2. Pérdida por secado MATERIALES VIDRIO: Crisol
EQUIPOS Balanza analítica Estufa
MEDICAMENTO Metionina (Polvo Nutricalcin)
OTROS Espátula Guantes , Mascarilla Gorro, Mandil 3. Límite de Sulfatos MATERIALES VIDRIO: Varilla de vidrio Pipeta Vaso de precipitación Embudo OTROS Papel filtro Guantes , Mascarilla Gorro, Mandil
EQUIPOS Cocineta
SUSTANCIAS Agua destilada HCl diluido.
MEDICAMENTO Metionina (Polvo Nutricalcin)
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4. Límite de Cloruros MATERIALES VIDRIO: Vasos de precipitación Agitador Pipeta OTROS Espatula Guantes , Mascarilla Gorro, Mandil
EQUIPOS Balanza analítica
SUSTANCIAS Agua destilada Ácido nítrico al 12,5 % Nitrato de Plata. HCl conc.
MEDICAMENTO Metionina (Nutricalcin)
EQUIPOS Balanza analítica
SUSTANCIAS Agua destilada libre de CO2
MEDICAMENTO Metionina (Nutricalcin)
5. Disolución MATERIALES VIDRIO: Vasos de precipitación Agitador Pipeta OTROS Espatula Guantes , Mascarilla Gorro, Mandil
V.
INSTRUCCIONES: a. Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. b. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. c. Llevar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, cofia, zapatones, gafas. d. Utilizar la campana de extracción de gases siempre que sea necesario.
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VI.
PROCEDIMIENTO:
1. pH
a. Colocar 50ml de muestra en un recipiente adecuado. b. Medir el pH en el pHmetro. c. Observar el ph leído. 2. Pérdida por secado a. Se procede a pesar 1.0g de metionina. b. Se pesa el crisol vacío y el crisol con muestra y se anota los pesos. c. Se lleva a la estufa por 3 horas de 100 a 105°C. d. Se pesa el crisol luego de desecarse y se realiza los cálculos correspondientes. 3. Límite de Sulfatos Solución muestra: a. Disolver 1.0g de Metionina DL en 20 ml de agua destilada. b. Calentar a 60 OC, enfriar a 10 OC y filtrar. Procedimiento: a. Disolver 0.5 g de la sustancia a examinar en 3 ml de ácido clorhídrico diluido R y diluir hasta 15 ml con agua destilada R. b. La disolución satisface el ensayo límite para sulfatos. 4. Límite de Cloruros 1. Preparar la solución muestra y la solución de comparación: Solución muestra a. Disolver 250 mg de Metionina en 35 ml de agua. b. Agregar 5 ml de ácido nítrico al 12,5 % y 10 ml de nitrato de plata. c. Dejar en reposo, protegido de la luz, durante 5 minutos y filtrar. Solución de comparación a. Preparar al mismo tiempo y del mismo modo según se indica en Solución muestra b. Agregar 10 ml de solución de cloruro y 25 ml de agua. c. Examinar la Solución muestra y la Solución de comparación en sendos tubos frente a un fondo negro. “LA CALIDAD NUNCA ES UN ACCIDENTE, SIEMPRE ES EL RESULTADO DE UN ESFUERZO DE LA INTELIGENCIA”. JOHN RUSKIN
2. La opalescencia de la Solución muestra no debe ser más intensa que la obtenida con la Solución de comparación.
5. Disolución Para verificar el aspecto de disolución se debe disponer de 100ml de agua libre de 6. CO2 7. Luego pesar 10 gr de principio activo de Metionina. 8.
Poner 10gr de muestra en el en agua libre de CO2
9. Observar el estado de disolución de la mezcla. VII.
GRÁFICOS
1. Ph
1
2
Colocar 50ml de muestra en
Medir el pH y observar resultados
2. Pérdida por secado
1
2
Pesamos 1.0g de metionina
Pesamos crisol vacío
3 2
Pesamos crisol con muestra
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5 3
4 3
Llevamos a la estufa a 100°C por 3 horas
Pesamos el crisol con la mues<tra después de la desecación
3. Límite de Sulfatos
2 1
1
Preparación de sol. Muestra
Preparación de sol. a Examinar
6 1
3 1
Agregar 3 ml de HCl diluido
4 1
5 1
Sol. Muestra - Sol. a Examinar
Calentar y filtrar sol. Muestra.
Llevar a 20 ml de Agua dest.
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4. Límite de Cloruros
1
3 1
2 1
Medicamento para el
Pesar 250 mg de medicamento
análisis
6 1
Disolver en 35 ml de agua destilada
4 1
5 1
Mezclar a dejar reposar 5 minutos
Agregar 10 ml de nitrato de plata
Agregar 5 ml de ácido nítrico al 12,5 %
7
Comparar las soluciones en un fondo oscuro
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5. Disolución
1
3 1
2 1
Agregar la muestra en el agua libre de CO2.
Pesar 10g de muestra de Metionina.
El agua debe encontrase libre de CO2
5 1
4 1
Observar el estado de disolución. VIII.
Mezclar la muestra completamente.
CÁLCULOS
1. Pérdida por secado DATOS
Peso de crisol + muestra antes del secado= 23.67g. Peso de crisol + muestra después del secado= 23.62g.
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Dato referencial: De acuerdo a la farmacopea argentina no debe de perder mas del 0.5% de su peso real. Interpretación: El porcentaje obtenido de la humedad de la metionina se encuentra dentro de los límites establecidos por la farmacopea. IX.
RESULTADOS OBTENIDOS
1. pH El pH obtenido de la disolución es de 6,5 por lo tanto si cumple dentro del rango establecido de la USP. Dato referencial: Entre 5,6 y 6,1 en una solución. 2. Pérdida por secado (Farmacopea Argentina Vol. II) De acuerdo a la farmacopea argentina no debe de perder más del 0.5% de su peso real por lo que el ensayo es aprobado por que en el ensayo realizado no perdió más del 0.21% de su peso real. Dato referencial: Secar 1,0 g de Metionina DL entre 100 y105 °C: no debe perder más de 0,5 % de su peso 3. Límite de Sulfatos (Farmacopea Española 2Ed. – USP30) La solución muestra debe ser menos opalescente que la solución a examinar, por lo tanto el ensayo aprueba el control de calidad. Dato referencial: Solución muestra presenta opalescencia, esta no debe ser más intensa que la obtenida partir del control. 4. Límite de Cloruros (Farmacopea Argentina Vol. II)
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Aprobado ya que la opalescencia de la Solución muestra no fue más intensa que la obtenida con la Solución de comparación. Dato referencial: La opalescencia de la Solución muestra no debe ser más intensa que la obtenida con la Solución de comparación. 5. Disolución El estado de disolución es limpia por lo tanto si cumple con los parámetros establecidos en USP. X.
INTERPRETACIÓN
En cuanto a la práctica realizada del control de calidad de la Metionina podemos expresar que este polvo, suplemento alimenticio Nutricalcin si cumple con los ensayos establecidos en la farmacopea, pues se realizaron varios ensayos aplicando la técnica y los métodos descritas en las farmacopeas, llegando a la conclusión de que el suplemento alimenticio Nutricalcin si contiene Metionina. XI.
OBSERVACIONES
En el control de calidad del polvo de Metionina se realizaron diferentes ensayos donde se observó: El pH del suplemento alimenticio (Metionina) se encontró entre los parámetros establecidos por la farmacopea. La pérdida de secado no fue más del 0.5% que es parámetro establecidos en la farmacopea Argentina. La solución muestra fue menos opalescente que la solución a examinar. La opalescencia de la Solución muestra no fue más intensa que la obtenida con la Solución de comparación. La disolución cumplió con los parámetros ya que se encontró de manera límpida.
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XII.
CONCLUSIONES
Siguiendo el control de calidad que se requiere para comprobar la concentración de P.A del Metionina presente en el suplemento alimenticio Nutricalcin, mediante los métodos aplicados que según nos indican las farmacopeas: Todos los parámetros analizados en la Metionina se encontraron en su rango permitidito, siendo así que este este suplemento pasa el control de calidad dispuesto por las diferentes farmacopeas existentes. XIII.
RECOMENDACIONES
XIV.
Realizar la asepsia de la mesa de trabajo. Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Lavar siempre el material con agua destilada antes de utilizar ya que puede contener sustancias que pueden interferir en su control. Tratar de ser precisos en el momento de medir los volúmenes requeridos ya que de lo contrario tendremos inconvenientes tanto en la práctica como en los resultados. Usar la cámara de campana para evitar inhalaciones de los vapores de toxicos utilizados en la práctica. CUESTIONARIO
1. ¿Qué es la Metionina? La metionina es un aminoácido que generalmente es ingerido a través de los alimentos y esta va actuar en concordancia con el fosfato piridoxal allanado así a la eliminación de los residuos oxidantes, los cual alteran la función del endotelio (Casanueva, Cid, Cancino, Borzone, & Cid, 2003). 2. ¿Cómo se metaboliza la metionina? La metionina, luego de ser activada, sede su grupo metilo en una reacción catalizada por una metiltransferasa, y lugar a la S-adenosilhomocisteína, la cual se libre por hidrólisis de la adenosina, y se obtiene homocisteína libre (Menéndez, Fernández, & Rodriguez, 1999).
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3. ¿Cuáles son los efectos que causa el consumo excesivo de metionina? La metionina cambia el metabolismo cuando se presenta el envejecimiento, y directamente aumenta la homocisteína plasmática, sus elevadas concentraciones conlleva aun alto riesgo de producir aterosclerosis (Deutz, Sunday, Simbo, Cynober, Smriga, & Engelen, 2017). XV.
GLOSARIO
Efecto adverso: Una reacción adversa a un medicamento (RAM) se puede definir como cualquier respuesta a un fármaco que es nociva, no intencionada y que se produce a dosis habituales para la profilaxis, diagnóstico, o tratamiento (OMS, 2004). Homocisteina: La homocisteína es un aminoácido que se sintetiza en el organismo a partir de otro: la metionina. La única fuente de metionina es la ingesta, a partir principalmente de proteínas animales (Menéndez, Fernández, & Rodriguez, 1999). Nutricalcin: Fórmula para nutrición en polvo. Opalescencia: La opalescencia es un tipo de dicroísmo que aparece en sistemas muy dispersados, con poca opacidad. XVI.
WEBGRAFÍA
Casanueva, V., Cid, X., Cancino, M., Borzone, L., & Cid, L. (2003). Homocisteína en niños y adolecentes. Relación con historia familiar de enfermedad cardiovasculart. Scielo: Revista Médica de Chile, 131(9), 997-1002. Deutz, N., Sunday, Simbo, G. L.-M., Cynober, L., Smriga, M., & Engelen, M. (2017). Tolerance to increased supplemented dietary intakes of methionine in healthy older adults. The American Journal of Clinical Nutrition. García, S., Gómez, J., Ríos, J., Barbado, F., & Vázquez, J. (2001). La homocisteína. ¿El factor de riesgo cardiovascular del próximo milenio? Scielo: Anales de Medicina Interna, 18(4).
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Menéndez, A., Fernández, J., & Rodriguez, B. (1999). Metabolismo de la homocisteína y su relación con la aterosclerosis. Scielo: Revista Cubana de Investigaciones Biomédicas, 18(3). VITÓNICA.
(2011).
Recuperado
el
17
de
julio
de
2017,
de
https://www.vitonica.com/grasas/la-metionina-un-aminoacido-esencial-paramantener-la-grasa-a-raya XVII.
ANEXOS
HOJA DE TRABAJO DE PRÁCTICA FIRMADA POR EL PROFESOR FARMACOPEAS DE LA VALORACIÓN DE METIONINA ARTÍCULO CIENTÍFICO APUNTES DE LA PIZARRA
EJERCICIO DE APLICACIÓN
Un laboratorio farmacéutico desea realizar el control de calidad de una ampolla de Glucanato de calcio, de los cuales se tomó 1 ampolla y según dicha industria el contenido declarado de cada ampolla es de 10% de P.A. Para valorar dicho producto farmacéutico se utiliza se utiliza una solución de KMnO4 0.1 N obteniéndose un consumo practico de 11.5 mL. Determinar el consumo teórico (CT), consumo real KMnO4 0.1 N (CR) y el porcentaje real (PR) si se conoce que 1 ml KMnO4 0.1 N equivalen ---- 21.52 mg Gluconato de calcio.
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CALCULOS DATOS Solución titulante: HClO4 0.1 M Consumo Practico:
HClO4 0.1 M
Consumo Teórico CT:? Consumo Real CR: ? % Real: ? Equivalente: 1 ml de HClO4 0.1 M 14.92 mg de Metionina K: 1,002 % Permitido: 99.0 – 101.0 %
CANTIDAD PRINCIPIO ACTIVO PARA TRABAJAR
CT / CONSUMO TEÓRICO
CR / CONSUMO REAL
%R / PORCENTAJE REAL
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Conclusión: El suplemento nutricional Nutricalcin contiene 101.2% de Metionina por lo que cumple con lo establecido en la Real farmacopea español 2da. Edición.
FIRMA DE RESPONSABILIDAD
_____________________________ Rojas Angulo Rosa Andrea C.I. 0706744752
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