4.2. Về thẩm định phương pháp

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL và không phải loại dùng cho detector MS. Để khắc phục điều này nhóm đã dựa vào các khuyến cáo về đường kính cột của hãng để lựa chọn cột. Cột có đường kính nhỏ thường phù hợp hơn với detector MS, ngoài ra đường kính càng nhỏ thì hiệu lực cột càng cao. Các dung môi lựa chọn phân tích có nhiệt độ sôi xấp xỉ nhau nên khi rửa giải các pic có thể rất sát nhau, vì vậy cần lựa chọn cột có hiệu lực cao để phân tách tốt hơn. Chính vì những lí do trên, nhóm nghiên cứu đã lựa chọn cột DB-WAX đường kính 0,25 mm thay vì cột DB624 đường kính 0,53 mm. Quá trình khảo sát đã tối ưu được nhiệt độ ủ mẫu và thời gian ủ mẫu đối với buồng headspace, tuy nhiên ngoài hai thông số trên thể tích vial tiêm mẫu hoặc thể tích mẫu cũng là những thông số có thể ảnh hưởng đến hệ số phân bố pha khí và pha hơi trong quá trình ủ mẫu, vì vậy khi nghiên cứu mở rộng có thể tiếp tục tiến hành khảo sát thêm những điều kiện này để phát triển phương pháp. Chương trình nhiệt độ lò cột chỉ tập trung vào khảo sát nhiệt độ ban đầu và khoảng tăng nhiệt để rửa giải hai chất còn còn lại. Ở nhiệt độ 300C là nhiệt độ tương đương với nhiệt độ phòng khi cài đặt hệ thống GC 7000, 5/7 pic đã được rửa giải, nguyên nhân có thể do các dung môi phân tích đều có nhiệt độ sôi thấp và xấp xỉ nhau nên được rửa giải liên tiếp nhau. Đối với các dung môi được lựa chọn trong nghiên cứu, nhiệt độ này vẫn đảm bảo quá trình phân tích tuy nhiên khi mở rộng phương pháp với nhiều dung môi hơn thì có thể xảy ra hiện tượng trùng pic. Để khắc phục điểm này có để sử dụng cột dài 60m để tăng độ phân giải hoặc sử dụng phần mềm tách phổ khối. 4.2. Về thẩm định phương pháp Phương pháp đã được thẩm định đáp ứng yêu cầu AOAC nhưng trong quá trình thực nghiệm vẫn còn một số vấn đề cần bàn luận. Các thiết bị sắc ký khí có gắn detector MS thường so sánh phổ của chất phân tích với phổ chuẩn có sẵn trong thư viện đi kèm hoặc phổ của chất tương ứng. Tuy nhiên trong độ đặc hiệu, nghiên cứu đã không sử dụng việc so sánh với phổ thư viện chuẩn do thiết bị phân tích chưa có bộ phận chống phân mảnh (lens 6mm thay vì lens 3 mm để giảm khả năng phân mảnh của các chất) nên phổ khối bị ảnh hưởng bởi sự phân tán các mảnh, đây là nguyên nhân dẫn đến sự sai khác giữa phổ của chuẩn dung môi và phổ của thư viện. Bên cạnh đó độ nhạy của detector MS của thiết bị trong nghiên cứu khó ghi nhận được các mảnh nhỏ hơn 30 m/z, nên đối với một số dung