Capacidad de GPC8TM como potente desinfectante contra Vibrioparahaemolyticus en el cultivo del camarón blanco del Pacífico (Penaeusvannamei)

La vibriosis ha elevado las tasas de mortalidad en cultivos de camarón en todo el mundo. En este artículo se comparten resultados de la efectividad de GPC8TM, potente desinfectante de uso general a base de glutaraldehído, contra Vibrio parahaemolyticus en el cultivo de camarón blanco del Pacífico (Penaeusvannamei).

La vibriosis es una enfermedad bacteriana, causada por cepas patógenas extracelulares de varias especies pertenecientes al género Vibrio. En cultivos de camarón en todo el mundo, la vibriosis ha elevado las tasas de mortalidad, tanto en su fase larvaria como de engorda. En general, los brotes se producen por cambios ambientales que aceleran la reproducción bacteriana, sobrepasando la tolerancia de estos organismos y causando enfermedades.

Se puede presentar una amplia variedad de enfermedades causada por la vibriosis en los camarones: vibriosis oral, vibriosis entérica, diferentes tipos de necrosis, síndrome de la concha suelta (SLSS, por sus siglas en inglés), enfermedad del intestino blanco (WGD); entre otras. Por tanto, es importante la prevención y atención del Vibrio causante de estos padecimientos que afectan la producción de camarón.

El GPC8TM es un potente desinfectante de uso general a base de glutaraldehído, con un amplio espectro de actividad, altamente efectivo contra bacterias, virus y hongos; cuya composición incluye:

9 Glutaraldehído: 12%

9 Amonio cuaternario: 4%

9 Surfactante no iónico: 8%

9 Ácido fosfórico: 8%.

Entre las funciones del GPC8TM se encuentran:

9 Desinfección del agua antes del cultivo.

9 Tratamiento de patógenos durante el cultivo.

9 Eliminación de virus como: el Monodon baculovirus (MBV, por sus siglas en inglés), cabeza amarilla, síndrome de la mancha blanca (WSSV), virus de la necrosis hipodérmica y hematopoyética infecciosa (IHHNV), Síndrome de Taura (TSV), necrosis y bacterias que causan síndrome de mortalidad temprana (EMS). Además, tiene la ventaja de ser compatible con otros productos desinfectantes.

9 Eliminación de vibriosis luminiscente, coloración roja en cola y antenas, manchas negras, pleópodos rojos, enfermedad de branquias negras o enfermedad intestinal.

9 Eliminación de Fusarium, que causa branquias negras en camarones

9 Eliminación de Zoothanium sp, causante de la enfermedad de heces blancas provocadas por Gregarin

En cuanto a su forma de aplicación, depende de la etapa en la cual se encuentre el cultivo: 1) entre dos y tres horas antes del cultivo, para el tratamiento del agua con 0.5-0.8 litros/1,000 m3 (0.5-0.8 ppm); 2) durante el cultivo, se realiza la desinfección regular de patógenos, empleando una proporción de 1 litro/4,000-6,000 m3 (0.17-0.25 ppm) y 3) se continúa la aplicación cada 15 días, hasta la recolección o cose- cha. En criaderos, se recomienda su uso para la higiene y desinfección de equipos y tanques, en una proporción de 1 litro/100 m3 (10 ppm). La información, que se presenta a continuación, se basa en un reporte desarrollado por el Instituto de Investigación para la Acuicultura No.2 (RIA2, por sus siglas en inglés) y la empresa de productos de higiene y limpieza Evans Vanodine, sobre el efecto del producto GPC8TM en la desinfección contra Vibrio parahaemolyticus en el cultivo de camarón blanco del Pacífico.

Materiales y métodos

La muestra del estudio consistió en ejemplares de P. vannamei PL60, con un peso de 1.5 ± 0.03 g comprados en un criadero de calidad. Los camarones fueron examinados, para garantizar que estuvieran libres de patógenos específicos, antes de liberarlos para el ensayo; mientras que el V. parahaemolyticus se cultivó en el WebLab del RIA2, donde se desarrolló parte del estudio. La otra parte de la investigación, tuvo lugar en estanques de engorda de camarones blancos del Pacífico, en la provincia Bac Lieu.

Procedimiento y resultados

El estudio se desarrolló en tres fases. La primera, denominada Contenido 1, fue la investigación de la enfermedad que causa anti-Vibrio en camarones in vitro. En la segunda, Contenido 2, se determinó la concentración letal para el 50% de la población (LC50, por sus siglas en inglés) y la capacidad para eliminar V. parahaemolyticus in vivo. Finalmente, la tercera fase, Contenido 3, consistió en determinar la efectividad de los productos cuando se aplican en los estanques de engorda de los camarones blancos del Pacífico.

Contenido 1

En esta fase, se empleó el método de difusión (Chythanya et al., 2002). Se seleccionó una colonia de V. parahaemolyticus (inicialmente a -80°C) con un método de incubación de 30°C, 24 h, y se transfirió a 10 ml de caldo de soya tripticaseína (TCBS, por sus siglas en inglés), a una densidad óptica (OD, siglas en inglés) de 600 nm, diluido a 2x108 tb/ml (Figura 1). Las concentraciones de GPC8TM empleadas fueron: 0, 0.25, 5, 10, 20, 40, 60, 80, 100, 200, 500, 1,000 y 10,000 ppm; mientras que las con- centraciones de GPC8TM empleadas para el cocultivo fueron de: 0, 0.25, 0.5, 1, 5, 10 y 20 ppm.

La Figura 2 muestra los resultados obtenidos con el procedimiento del Contenido 1, donde se puede observar que utilizando el método de cocultivo in vitro ocurre una eliminación de V. parahaemolyticus de 100% para dosis de 10 ppm y 20 ppm del producto GPC8TM

Contenido 2

En esta segunda fase, se determinó la concentración letal para el 50% de la población y la capacidad para eliminar V. parahaemolyticus in vivo. El experimento LC50 se llevó a cabo con una salinidad de 15 ppt, en tanques plásticos de 10 L, con una densidad de camarones de 15 ind/tanque (PL60), en 3 réplicas. Las dosis usadas de GPC8TM fueron de: 0, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 100 ppm. Adicionalmente, para la determinación de la densidad de V. parahaemolyticus (VP) causante de LD50 de los camarones blancos del Pacífico, se empleó una salinidad de 15 ppt, en un tanque tipo acuario de 10 L, con una densidad de camarones de 10 ind/tanque (PL60), tres réplicas, a diferentes densidades de VP.

Para la prueba de desinfección in vivo, la salinidad fue de 15 ppt, pH 7, temperatura 28°C, el tanque fue tipo acuario de 150 L, la densidad de camarones de 15 ind/tanque (PL60), tres réplicas. La densidad de VP de 2xLD50 = 2x10 cfu/L, y las dosis de GPC8TM fueron: NT0 (control negativo, sin añadir GPC8TM y VP), NT1 (control positivo, añadiendo VP y sin GPC8TM); NT2 (0.5 ppm), NT3 (1 ppm), NT4 (5 ppm), NT5 (10 ppm) y NT6 (20 ppm). Se monitoreo el total de Vibrio y la tasa de supervivencia de camarón (Figura 3).

En la Figura 4, se observa una mayor tasa de supervivencia de los camarones en la prueba in vivo para concentraciones de 10 ppm y 20 ppm de GPC8TM.

Contenido 3

Esta fase del estudio, consistió en determinar la efectividad de los productos cuando se aplican en los estanques de engorda de los camarones blancos del Pacífico. El experimento se realizó de agosto a octubre de 2015, en la provincia de Bac Lieu. Para la preparación del estanque, se drenó el agua y se roció con CaCO3 (100 kg/ha). Después de suplir el agua, se añadió GPC8TM en una concentración de 5 ppm y durante el período de cultivo de 1 ppm. Se tomaron muestras de agua antes y después de 12 horas o 24 horas. Los parámetros analizados fueron: temperatura, pH, demanda química de oxígeno (COD, por sus siglas en inglés), clorofila, amoníaco, nitrito y Vibrio total.

Después de usar GPC8TM para tratar el agua, los resultados mostraron una ligera disminución del pH y una fuerte disminución en COD y clorofila. Esto significa que el GPC8TM puede oxidar materia orgánica y eliminar las microalgas.

La densidad de V. parahaemolyticus disminuyó en 99.1%, con 5 ppm de GPC8TM después de 24 horas, como se muestra en la Figura 5.

Conclusiones

Los hallazgos, de esta investigación, permiten puntualizar las siguientes conclusiones:

9 El método de difusión empleado resultó apropiado: dosis de 10,000 ppm con zona clara de 16.66 mm.

9 Del experimento en cocultivo se obtuvo que las dosis de 5 ppm, 10 ppm y 20 ppm pueden eliminar Vibrio parahaemolyticus desde 75% al 100%.

9 La concentración de GPC8TM que causa 50% de tasa de mortalidad (LC50) en camarones blancos del Pacífico es de 23 ppm.

9 La densidad de V. parahaemolyticus que causa 50% de la tasa de mortalidad (LD50) en P. vannamei se determinó con la dosis de 1x106 cfu/ml VP.

9 En el experimento in vivo, la desinfección de GPC8TM con las dosis de 10 y 20 ppm pueden eliminar VP durante 6 horas. Después de 6 horas, disminuye el componente activo.

9 Para la preparación de estanques: GPC8TM, en dosis de 5 ppm, se puede usar para eliminar Vibrio total en estanque de camarones blancos del Pacífico.

9 Durante el período de cultivo de P. vannamei: GPC8TM, en dosis de 1 ppm, puede usarse para eliminar Vibrio total.

Esta es una versión resumida desarrollada por el equipo editorial de Panorama Acuícola Magazine del artículo “GPC8 REPORT RIA2 AND EVANS VANODINE INTERNATIONAL PLC”escrito porResearchInstituteforAquacultureN°2. La versión original, incluyendo tablas y figuras, fue publicada en OCTUBRE de 2015 en RESEARCH INSTITUTE FOR AQUACULTURE N°2 and EVANS VANODINE INTERNATIONAL PLC.