UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN SEGUNDO SEMESTRE 2014
PRACTICA DE LABORATORIO DE BIOLOGIA #12 Estudiante:
INGRID HAYLIS FAREZ FILIAN Fecha:
MIERCOLES, 21 DE ENERO DEL 2015 Docente:
BIOQ. CARLOS GARCIA TEMA:
TEORIA CELULAR OBJETIVO:
Observar células microscópicas vegetales (células de la cebolla) a raves de la correcta manipulación del microscopio.
MATERIALES
SUSTANCIAS
microscopio
epidermis de la cebolla
portaobjetos
azul de metileno
cubreobjetos
Aguja de disección
bisturí
PROCEDIMIENTO: Con el bisturí cortaremos la cebolla, en una de sus capas extraeremos la epidermis con la ayuda de la aguja de disección y la colocaremos en el portaobjetos y agregaremos una pequeña gota de azul de metileno, este ayudara para una mejor visualización y lo cubriremos con el cubreobjetos. Para una correcta manipulación del microscopio primero verificaremos que ese conectado a la fuente de energía. Procedemos a prender el swinch, ajustaremos la platina, y con el tornillo macro métrico la subiremos para fijarla al lente y cuando observo algo muevo el micrómetro.
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Es importante siempre empezar la visualización con el objetivo de 4X. Y luego solo procedemos a mover los objetivos. OBSERVACIONES:
CONCLUSION:
Comprobamos que las células del corcho son más visible que la de las cebollas, también observamos en ella núcleos y almidones. RECOMENDACIÓN:
manipular el portaobjetos correctamente. Siempre se debe fijar la observación con el objetivo de 4x de ahí solo se moverá los demás. No se debe mantener el swinch prendido mientras no se fije correctamente la platina. Al colocar el azul de metileno, debemos tener cuidado que no se esparza por todo el portaobjetos.
CUESTIONARIO:
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¿Por qué es importante saber usar el microscopio? Porque así evitaremos romper el portaobjeto con los objetivos. ¿Por qué colocamos azul de metileno? Porque este colorante nos ayudara para una mejor visualización. ¿Por qué usamos colorantes de tinción? Usamos colorantes de tinción, porque es una técnica en microscopia para mejorar el contraste de la imagen, resaltando las estructuras en tejidos biológicos ¿Cuáles son los colorantes de tinción más importantes en el laboratorio? Los colorantes más importantes usados en el laboratorio son:
LA TINCIÓN DE GRAM, usada en el laboratorio de bacteriología. Se denomina así por el bacteriólogo Danés Christian Gram quien la desarrollo en 1844. Esta tinción permite que las bacterias puedan dividirse en dos grupos, Gram positivas y Gram negativas de su grupo morfológico, es usada con yodo-yódico y una solución cristalina de violeta.
AZUL BRILLANTE DE COOMASSIE, también conocido como azul brillante, tiñe en forma no específica a todas las proteínas con un fuerte color azul. Se utiliza frecuentemente para teñir las corridas de proteínas en las electroforesis en gel.
AZUL DE METILENO, se utiliza para teñir células animales, para hacer más visibles su núcleo. E también utilizado para teñir los extendidos de sangre para ser utilizados en citología y como colorante vital para el recuento de reticulocitos.
AZULO NILO, tiñe los núcleos de color azul y también se lo usa para teñir células vivas.
BISMARCK BROWN, imparte un color amarillo a las mucinas acidas. Se puede utilizar con células vivas.
BROMURO DE ETIDIO, se intercala en el ADN, y le otorga un color rojo naranja fluorescente, no es capaz de teñir células vivas ya que no atraviesa las membranas intactas, puede ser utilizado para identificar células que se encuentran en las etapas finales.
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CARMIN, colorante de intenso color rojo que puede ser utilizado como sal de litio para teñir glicógeno, requiere de un mordiente que usualmente es aluminio.
CRISTAL VIOLETA, tiñe las paredes celulares de color purpura.
DAPI, es un colorante nuclear se excita con luz ultravioleta y produce fuerte fluorescencia azul cuando se encuentra unido al ADN, es especialmente usada para el recuento celular.
NARANJA DE ACRIDINA, es un colorante fluorescente, cationico y selectivo para ácidos nucleícos útil para demostraciones sobre el ciclo celular. Atraviesa la membrana celular interactúa con el ADN y el ARN.
PLATA, una tinción argentica, para colorear preparados histológicos. Es especialmente importante para demostrar proteínas.
VERDE DE METILENO, tiñe la cromatina de las células y facilita así su visualización.
VERDE MALAQUITA, es una coloración para bacterias y endosporas.
ACIDO FOSFOTUNGSTICO, es un colorante negativo común utilizado para resaltar virus, nervios y otros tejidos biológicos.
TETROXIDO DE OSMIO, tiñe los lípidos se disuelven en grasas y se reduce por la presencia de materiales orgánicos, resalta la morfología.
HEMATOXILINA, tiñe núcleos, ácidos nucleícos y estructuras basofilicas.
EOSINA, tiñe proteínas y estructuras con afinidad por los ácidos.