UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA “Calidad, Pertinencia y Calidez” D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969 PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA Y TOXICOLOGÍA PRÁCTICA Nº BF.8.01-2 NOMBRE DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO DATOS INFORMATIVOS: CARRERA: Bioquímica y Farmacia CICLO/NIVEL: 8vo Semestre “B” GRUPO: N° 3 FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 07/Junio/2017 ESTUDIANTE: José Octavio Vega Herrera DOCENTE RESPONSABLE: Bioq. Carlos Alberto García Gonzales, Msc.
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Animal de Experimentación: Pollo Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. Volumen administrado: 10 mL de Cloroformo. TIEMPOS: Inicio de la práctica: 7:35 am Hora de disección: 7:55 am Hora Inicio de Destilado: 8:35 am Hora de finalización de Destilado: 8:60 am Hora finalización de la práctica: 11:20 am 1. OBJETIVOS: Identificar la reacción biológica que se produce en el pollo tras la intoxicación producida por cloroformo. Determinar mediante reacciones de reconocimiento la presencia de cloroformo en el destilado de las vísceras del pollo visualizando sus respectivas coloraciones.
2. FUNDAMENTO TEÓRICO: El cloroformo es un líquido incoloro de aroma agradable no irritante y de sabor ligeramente dulce. Se enciende espontáneamente cuando alcanza temperaturas muy altas.
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En el pasado, el cloroformo fue usado como anestésico en cirugía; en la actualidad tal uso se ha abandonado. Hoy en día, el cloroformo se usa para manufacturar otros productos químicos. Pequeñas cantidades de cloroformo se forman cuando se añade cloro al agua.
También se le llama triclorometano y tricloruro de metilo Cuadro clínico de una intoxicación por cloroformo: Es sumamente importante considerar a que nivel puede llegar la severidad de los síntomas por exposición aguda, vía respiratoria, digestivo, dérmica, está en relación directa con la dosis absorbida. El cloroformo, cuando se inhala, produce los siguientes síntomas:
3. RECURSOS: MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS SUSTANCIAS E INSUMOS MATERIALES 4.
VIDRIO: Vasos de precipitación Pipetas Erlenmeyer Tubos de ensayo Probeta Perlas de vidrio Agitador Embudo OTROS Guantes Mascarilla Gorro Mandil INSTRUCCIONES:
EQUIPOS
Aparato de destilación Balanza Baño maría Campana
SUSTANCIAS
Alcohol 95% Nitrato de plata Potasa alcohólica 1:10 Percloruro de hierro -β-naftol -Piridina clorhidrato de piperacina Yodo Reactivo de Benedict
MUESTRA
Destilado de vísceras del animal de experimen tación.
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Trabajar durante la practica con orden, limpieza y sin prisa. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. Llevar el uniforme e implementos adecuados para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. Siempre que sea necesario utilizar la campana extractora de gases.
5. PROCEDIMIENTO: Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse Preparar 10mL de Cloroformo. Agarrar al animal de experimentación (pollo) por sus alas y patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 10mL de Cloroformo. Colocar al animal de experimentación (pollo) en la panema y observar los efectos de la intoxicación. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el al animal de experimentación (pollo) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 mL ácido tartárico al4% y perlas de vidrio. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N. Con aproximadamente 15 mL del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos. Una vez terminada la práctica proceder a limpiar y desinfectar el área de trabajo, colocar los materiales y reactivos al lugar donde corresponden
6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: Reacción de dunas. Al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H2O Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente. A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido. Reacción de Lustgarten.
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Al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul. Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos oscuro; con resorsinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo. Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica. Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide. Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.
7. GRÁFICOS:
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8. RESULTADOS OBTENIDOS 8.1 Reacción de dunas: ANTES Destilado de vísceras positivo
8.2 Reacción de Lustgarten ANTES Destilado de vísceras positivo
DESPUÉS Reacción de dunas:
DESPUÉS Reacción de Lustgarten:
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8.3 Reacción de fujiwara: ANTES Destilado de vísceras positivo
DESPUÉS Reacción de fujiwara:
8.4 Reacción de roseboom ANTES Destilado de vísceras roseboom: positivo
DESPUÉS Reacción de
8.5 Reacción de Benedict ANTES
DESPUÉS
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Destilado de vísceras positivo
Reacción de Benedict:
9. CONCLUSIÓNES En vista de las diferentes técnicas que existen para identificar la intoxicación por cloroformo y el contenido de la información bibliográfica que existe según las técnicas de identificación pudimos concluir en la siguiente practica que el cloroformo es una sustancia sumamente toxica si no es tratada con la debida precaución esto de llevo a cabo mediante el experimento realizado en las vísceras de pollo demostrando visualmente las reacciones coloreadas para cada método de identificación .
10. RECOMENDACIONES La aplicación de las normas de Bioseguridad en el laboratorio so fundamentales Preparar las sustancias o reactivos a las concentraciones adecuadas. Los equipos de protección adecuada para minimizar algún tipo de accidente que ponga en riesgo nuestra salud. Realizar las pruebas de identificación dentro de la cámara de gases para así evitar cualquier intoxicación que podrían producir los reactivos usados o reacciones realizadas.
11. CUESTIONARIO “TODO ES VENENO NADA ES VENENO TODO DEPENDE DE LA DOSIS” PARACELSO
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¿Cuáles son las formas en las que se podría contaminar por cloroformo ?
Tomando agua o bebidas manufacturadas usando agua contaminada con cloroformo. Respirando aire interior o aire libre si el aire contiene cloroformo, especialmente en el trabajo. Comiendo alimentos que contienen cloroformo. Por contacto de la piel con cloroformo o agua que contiene cloroformo, por ejemplo en piscinas
¿Cómo determinar si una persona es intoxicada por cloroformo? La medición del cloroformo en fluidos y tejidos corporales puede ayudar a determinar si usted ha tenido contacto con grandes cantidades de cloroformo, pero estos exámenes sirven solo por corto tiempo después de la exposición ¿Cómo interacciona el cloroformo con el medio ambiente ?
Se evapora fácilmente al aire. La mayor parte del cloroformo en el aire eventualmente se degrada, aunque este es un proceso lento. El cloroformo se disuelve fácilmente en agua y parte puede degradarse a otros productos químicos. Permanece largo tiempo en el agua subterránea. El cloroformo no parece acumularse en grandes cantidades en plantas o en animales. 12. GLOSARIO: NARCOSIS Estado de sopor o pérdida de la sensibilidad o la conciencia de carácter pasajero, en especial el producido por la ingesta de narcóticos.. PREÑEZ: Estado de la hembra que lleva en el útero un embrión o un feto. FILTRO EPA: filtro de aire de alta eficiencia
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13. BIBLIOGRAFIA Referencias x 1. Garcia C. CÁTEDRA DE TOXICOLOGIA: Laboratorio de Toxicologìa. [Online].; 2016 [cited 2017 Junio 07. Available from: http://toxicologia5.blogspot.com/. x
FIRMA:
______________________________ José Octavio Vega Herrera 0705491538
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