MÓDULO 2: OBTENCIÓN, PREPARACIÓN Y CONSERVACIÓN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS HUMANAS
1. Procesamiento de muestras en distintas áreas del laboratorio clínico. 2. Análisis de muestras biológicas: Sustancias analizables Análisis cuantitativo, semicuantitativo y cualitativo Prueba analítica, perfil analítico y agrupación de pruebas Unidades de medida Preparación de disoluciones Tipos de agua 3. Muestras de sangre 4. Muestras de orina 5. Muestras de heces 6. Muestras de semen 7. Muestras de líquidos biológicos 8. Muestras del tracto respiratorio inferior (TRI) 9. Muestras de exudados y otras para análisis microbiológico 10. Otro tipo de muestras 11. Procedimientos preanalíticos de Citogenética 12. Procedimientos preanalíticos de Biología Molecular 13. Equipos y material de laboratorio. 14. Informática 15. Calidad en el laboratorio
ANÁLISIS DE MUESTRAS BIOLÓGICAS SUSTANCIAS ANALIZABLES
DEFINICIÓN MUESTRA BIOLÓGICA Una muestra biológica humana puede definirse como “Cualquier material de origen humano que incluye excretas, secreciones, sangre o sus componentes, tejidos y fluidos orgánicos, etc., recogidos con el propósito de obtener unos resultados que colaboren en el diagnóstico clínico, en el seguimiento de la evolución de algunas patologías y en la instauración y control del tratamiento adecuado”.
Excretas: heces, orina y esputo. Secreciones: genitales (semen, flujo vaginal), saliva, sudor, jugo gastrico y duodenal, nasales, uretrales, faríngeas, etc. Componentes de sangre: plasma , suero y sus células. Tejidos: biopsias. Fluidos orgánicos: líquido cefalorraquídeo, líquido sinovial (articular), líquido pleural, líquido ascítico (cavidad peritoneal), líquido amniótico (cavidad amniótica generado por estructuras fetales), líquido pericárdico.
FASES DE LA DETERMINACIÓN ANALÍTICA El proceso analítico es un proceso continuo y complejo, que tiene varias etapas: Fase pre-analítica: es el conjunto de operaciones que se realizan desde que se recibe una petición de examen por parte del médico hasta que se inicia el análisis, por tanto, incluye el proceso de interpretación de dicha petición, toma de muestras y transporte al laboratorio. Fase analítica: contempla todas aquellas acciones destinadas a la cuantificación del parámetro en estudio, manipulación de la muestra, procesos de identificación, calibración de equipos, uso de controles adecuados y todo el proceso de cuantificación. Fase post-analítica: son todas las acciones posteriores a la obtención del resultado de la determinación hasta la recepción del informe final por el facultativo.
SUSTANCIAS ANALIZABLES Las sustancias analizables están estrechamente vinculadas al tipo de muestra obtenida y al tipo de estudio solicitado. Se pueden dividir, según el tipo de estudio, en:
Sustancias analizables en estudios bioquímicos Sustancias analizables en estudios hematológicos Sustancias analizables en estudios inmunológicos Sustancias analizables en estudios microbiológicos Sustancias analizables en estudios genéticos
Según su naturaleza, las sustancias pueden ser: Inorgánicas: Na, K, Cl, Ca, P, etc. Orgánicas: hidratos de carbono, proteínas, lípidos, etc. Células y sus organelas: hematíes, leucocitos, etc. Son muy numerosas las sustancias que se pueden analizar, las cuales, se incrementan continuamente con los distintos avances científicos.
SUSTANCIAS ANALIZABLES EN MUESTRAS DE SANGRE Los estudios rutinarios se hacen frecuentemente en las muestras de sangre. La sangre es un medio de trasporte complejo:
Capta los nutrientes y el oxígeno de los sistemas digestivo y respiratorio. Transporta hormonas de las glándulas endocrinas. Recoge los desechos de las células y los lleva a los órganos excretores. Transporta enzimas, amortiguadores (para controlar el pH) y otras sustancias bioquímicas.
Por la multitud de funciones que realiza, y por ser el líquido más extenso y con mayor facilidad de acceso para la obtención de muestras, las muestras de sangre se utilizan frecuentemente en el estudio bioquímico, hematológico, inmunológico y microbiológico. ESTUDIO BIOQUÍMICO:
ORGÁNICAS:
Hidratos de carbono: glucosa, fructosamina, ác. láctico, ác. pirúvico, etc. Proteínas: prealbúmina, albúmina, globulinas, troponina, mioglobina, péptido natriurético atrial, proteína C reactiva, etc. Lípidos: triglicéridos, colesterol, etc. Enzimas: amilasa, lipasa, tripsina, transaminasas (GPT/ALT, GOT/AST), fosfatasa alcalina, gammaglutamiltranspeptidasa (GGT), 5’-nucleotidasa, lactatodeshidrogenasa (LDH), creatinfosfocinasa, aldolasa muscular, etc.
Otros: urea, creatinina, ác. úrico, bilirrubina, Hb glicosilada, etc.
INORGÁNICAS: Na, Cl, K, Mg, Ca, Fosfato, Hierro, Cobre, Zinc, amoniaco, nitrógeno ureico, bicarbonato, pH, etc.
ESTUDIO HEMATOLÓGICO:
CÉLULAS: hematíes, leucocitos (linfocitos, monocitos, neutrófilos, eosinófilos, basófilos) y plaquetas. OTROS: Hb, factores de coagulación (APTT, TP, fibrinógeno, dímero-D) APTT: tiempo de tromboplastina parcial activado. TP: tiempo protrombina
ESTUDIO MICROBIOLÓGICO:
OTROS: Virus, Bacterias, Hongos y Parásitos.
ESTUDIO INMUNOLÓGICO:
OTROS: Antígenos, anticuerpos, citocinas, interferones, adhesinas, inmunocomplejos, etc.
SUSTANCIAS ANALIZABLES EN MUESTRAS DE ORINA Las muestras de orina son también estudiadas de forma rutinaria. La orina es formada por los riñones, y tiene dos papeles fundamentales: La eliminación de residuos metabólicos y sustancias tóxicas. La regulación de la composición de los fluidos de nuestro organismo (regulación del equilibrio ácido-base, equilibrio hidroelectrolítico, presión sanguínea…). El estudio de muestras de orina permite obtener información sobre el estado general y evolución del paciente. Su estudio es útil para el diagnóstico y tratamiento de enfermedades renales o del tracto urinario, y para la detección de enfermedades metabólicas o sistémicas no relacionadas directamente con el sistema urinario (diabetes: por presencia de glucosa). Las muestras se obtienen por:
Micción espontánea Cateterismo vesical (sondaje) Punción suprapúbica (realizada por especialistas)
En las muestra de orina se realizan estudios bioquímicos y microbiológicos. ESTUDIO BIOQUÍMICO:
INORGÁNICAS: pH, Na, K, Cl, Ca, Cu, fósforo, cristales, sales, nitritos, etc. ORGÁNICAS: creatinina, ác. úrico, Hb, mioglobina, glucosa, galactosa, fructosa, pentosas, proteínas (cilindros, mucina), cuerpos cetónicos, aminoácidos, lípidos, porfirinas, bilirrubina, enzimas, hormonas, ác. ascórbico, etc. CÉLULAS: hematíes, leucocitos, células epiteliales.
ESTUDIO MICROBIOLÓGICO :
OTROS: Virus, Bacterias, Hongos y Parásitos..
SUSTANCIAS ANALIZABLES EN LCR El encéfalo y la médula espinal están protegidos por tres membranas meníngeas: Duramadre (capa mas externa). Aracnoides (capa media). Piamadre (capa interna): esta separada de la aracnoides por el espacio subaracnoideo, que es el que contiene el LCR. El volumen total del LCR en adultos es de aproximadamente 150 ml. La obtención de LCR se realiza mediante punción lumbar. El estudio del LCR es de utilidad para:
Determinar la presencia de infecciones (meningitis), hemorragias cerebrales, aumento de la presion intracraneal. Facilitar el diagnostico de la causa de las cefaleas, entumecimiento de las extremidades y otros síntomas neurológicos.
Se pueden realizar distintos tipos de estudios: ESTUDIO BIOQUÍMICO:
INORGÁNICAS: pH, Na, K, Cloruros. ORGÁNICAS: glucosa, proteínas (prealbúmina, albúmina, IgG, IgA, IgM), LDH, CK, ADA, etc. CÉLULAS: hematíes, leucocitos (recuento diferencial).
ESTUDIO MICROBIOLÓGICO :
OTROS: Virus, Bacterias, Hongos y Parásitos.
ESTUDIO INMUNOLÓGICO:
OTROS: antígenos y anticuerpos (antimicrobianos, anti-VIH).
OTRAS SUSTANCIAS ANALIZABLES SUSTANCIAS ANALIZABLES EN ESPUTO: Estudio microbiológico SUSTANCIAS ANALIZABLES EN LÍQUIDO PERITONEAL:
INORGÁNICAS/ORGÁNICAS: pH, glucosa, proteínas, amilasa, lipasa, LDH, lactato, etc.
CÉLULAS: hematíes, leucocitos (recuento diferencial).
SUSTANCIAS ANALIZABLES EN LÍQUIDO PERICÁRDICO Y PLEURAL:
INORGÁNICAS/ORGÁNICAS: pH, glucosa, proteínas, amilasa, LDH, lactato, triglicéridos, etc.
CÉLULAS: hematíes, leucocitos (recuento diferencial).
SUSTANCIAS ANALIZABLES EN JUGO DUODENAL: Estudio microbiológico (parásitos) SUSTANCIAS ANALIZABLES EN JUGO GÁSTRICO: Estudio bioquímico (secreción de factor intrínseco, HCl, pepsinógeno). Factor intrínseco: glicoproteína producida por las células parietales de la mucosa gástrica, necesaria para la absorción intestinal de la vitamina B12. SUSTANCIAS ANALIZABLES EN LÍQUIDO SINOVIAL:
ORGÁNICAS/INORGÁNICAS: pH, fibrinógeno, ácido hialurónico, proteínas, cristales, etc.
CÉLULAS: leucocitos, hematíes, bacterias, etc.
SUSTANCIAS ANALIZABLES EN HECES:
MICROBIOLÓGICO: parásitos, bacterias.
BIOQUÍMICO: leucocitos, sangre oculta, almidón, lípidos, fibras musculares, pH, etc.
SUSTANCIAS ANALIZABLES EN LÍQUIDO AMNIÓTICO:
MICROBIOLÓGICO: virus, bacterias, etc.
BIOQUÍMICO: bilirrubina, aminoácidos, creatinina, disacaridasas, esteroides, purinas, hidratos de carbono, alfa fetoproteína (defectos del tubo neural (ej: espina bífida por deficiencias de ácido fólico) y anomalías congénitas), etc.
GENÉTICO: cariotipo, grupo sanguíneo y Rh, etc.
SUSTANCIAS ANALIZABLES EN LÍQUIDO SEMINAL:
BIOQUÍMICO: ácido cítrico, zinc, fosfatasa ácida, fructosa, L-carnitina, células epiteliales, leucocitos, eritrocitos, Hb, etc.